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microRNA-378b对心脏成纤维细胞纤维化水平的影响及机制研究
1
作者 姜敏 李姗姗 +5 位作者 王春 郑闻 张伟 邓慧 戴阳 顾寰宇 《药物评价研究》 CAS 2023年第2期370-376,共7页
目的研究microRNA-378b(miR-378b)对心脏成纤维细胞的纤维化水平的影响及分子机制。方法小鼠行慢性心肌梗死手术构建体内心肌纤维化模型,利用转化生长因子-β(TGF-β)诱导原代心脏成纤维细胞发生纤维化以构建体外心肌纤维化模型;实时荧... 目的研究microRNA-378b(miR-378b)对心脏成纤维细胞的纤维化水平的影响及分子机制。方法小鼠行慢性心肌梗死手术构建体内心肌纤维化模型,利用转化生长因子-β(TGF-β)诱导原代心脏成纤维细胞发生纤维化以构建体外心肌纤维化模型;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测2种纤维化模型中miR-378b的表达水平;Western blotting法检测miR-378b模拟物和抑制物对心脏成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA,心肌纤维化特异性指标)表达量的影响;TargetScan、miRDB和miRWalk软件预测miR-378b的下游靶基因,双荧光素酶实验验证miR-378b与生长相关蛋白43(GAP43)的靶向关系;Western blotting法检测miR-378b模拟物和抑制物对心脏成纤维细胞GAP43表达的影响;Western blotting法检测体内和体外2种纤维化模型中GAP43的蛋白水平。结果小鼠心肌纤维化模型组miR-378b表达量较假手术组显著降低(P<0.01),心脏成纤维细胞TGF-β处理组miR-378b表达量较对照组显著降低(P<0.001)。在基础水平和TGF-β处理后,与对照模拟物组比较,miR-378b模拟物显著降低细胞的α-SMA蛋白水平(P<0.05);在基础水平,与对照抑制物组比较,miR-378b抑制物可显著升高细胞的α-SMA蛋白水平(P<0.05);但在TGF-β处理的细胞中,miR-378b抑制物不能进一步增加α-SMA蛋白表达量。GAP43是miR-378b直接作用的下游靶基因,与对照组比较,miR-378b可负调控心脏成纤维细胞GAP43的蛋白表达水平(P<0.01)。心肌纤维化模型组小鼠心肌GAP43蛋白表达量较假手术组显著升高(P<0.01),心脏成纤维细胞TGF-β处理组GAP43蛋白表达量较对照组显著升高(P<0.001)。结论miR-378b可抑制心脏成纤维细胞纤维化,该功能可能通过抑制其下游靶基因GAP43发挥作用。 展开更多
关键词 心脏成纤维细胞 心肌纤维化 microrna-378b GAP43 Α-平滑肌肌动蛋白
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甲基阿魏酸通过microRNA-378b介导CaMKK2-AMPK通路改善乙醇诱导的L02细胞脂肪变性
2
作者 黄萍 陈杏 +4 位作者 蒙荣华 卢君 张言 李丽 李勇文 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期193-201,共9页
酒精性肝病(alcoholic liver disease, ALD),随着其发病率和病死率的不断上升,已严重且广泛地影响着全世界人民的健康。甲基阿魏酸(methyl ferulic acid, MFA)在前期已被证实可通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AM... 酒精性肝病(alcoholic liver disease, ALD),随着其发病率和病死率的不断上升,已严重且广泛地影响着全世界人民的健康。甲基阿魏酸(methyl ferulic acid, MFA)在前期已被证实可通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)信号显著抑制乙醇诱导的L02细胞内脂质生成,但深层作用机制尚不清楚。该研究旨在现有基础上,进一步阐明MFA可通过microRNA-378b(miR-378b)介导钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶2(calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2,CaMKK2)-AMPK信号通路改善乙醇诱导的L02细胞脂质积累的机制。通过100 mmol·L^(-1)乙醇诱导L02细胞48 h建立体外ALD模型,并给予不同浓度(100、50、25μmol·L^(-1))的MFA处理。采用电穿孔法将miR-378b质粒(含过表达质粒-miR-378b mimics、沉默质粒-miR-378b inhibitor及各自的阴性对照-miR-378b NCs)转染进L02肝细胞以上调或下调细胞中miR-378b水平。采用市售诊断试剂盒和全自动生化分析仪检测细胞中胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglyceride, TG)水平。采用定量实时聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测L02细胞中miR-378b的表达水平,采用PCR检测CaMKK2 mRNA水平,采用Western blot检测脂质代谢过程中参与脂质合成、分解和转运的相关因子的蛋白表达。结果显示乙醇能显著诱导细胞内TG、TC水平的上升,而MFA则能显著降低TG、TC水平。乙醇使miR-378b的水平急剧上调,而MFA有效地抑制了miR-378b水平。miR-378b过表达刺激了乙醇诱导的L02细胞中的脂质积累,miR-378b沉默改善了乙醇诱导的脂质沉积,而MFA通过降低miR-378b来激活CaMKK2-AMPK信号通路,调节脂质合成、分解与转运,从而改善L02细胞内脂代谢紊乱。实验结果表明,MFA通过miR-378b调控CaMKK2-AMPK通路改善L02细胞内脂质沉积。 展开更多
关键词 甲基阿魏酸 miR-378b CaMKK2 肝脂积累 酒精性肝病
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多囊卵巢综合征患者血清SerpinB1、microRNA-137检测的临床意义
3
作者 贡童 王敏 闫洪超 《中国现代医学杂志》 2025年第23期84-89,共6页
目的探究多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清丝氨酸蛋白酶抑制剂B1(SerpinB1)、microRNA-137(miR-137)检测的临床意义。方法选取2023年9月—2024年12月徐州医科大学附属宿迁医院150例PCOS患者作为PCOS组,另选取同期该院100例健康体检的女性... 目的探究多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清丝氨酸蛋白酶抑制剂B1(SerpinB1)、microRNA-137(miR-137)检测的临床意义。方法选取2023年9月—2024年12月徐州医科大学附属宿迁医院150例PCOS患者作为PCOS组,另选取同期该院100例健康体检的女性为对照组。比较两组一般资料及血清SerpinB1水平、miR-137表达,采用多因素一般Logistic回归模型分析PCOS的影响因素并构建列线图,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清SerpinB1、miR-137对PCOS的预测价值。结果PCOS组与对照组年龄、体质量指数、促卵泡生成素(FSH)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。PCOS组催乳素(PRL)、促黄体生成素(LH)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)均高于对照组(P<0.05)。PCOS组SerpinB1水平高于对照组,miR-137基因相对表达量低于对照组(P<0.05)。多因素一般Logistic回归分析结果表明,PRL水平高[OR=11.900(95%CI:1.441,98.252)]、LH水平高[OR=23.509(95%CI:1.908,289.627)]、TC水平高[OR=5.889(95%CI:1.069,32.448)]、TG水平高[OR=8.785(95%CI:1.267,60.921)]、SerpinB1水平高[OR=11.480(95%CI:1.627,80.987)]和miR-137水平低[OR=0.164(95%CI:0.041,0.650)]是PCOS的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果表明,SerpinB1、miR-137联合预测的曲线下面积为0.987(95%CI:0.970,1.000),敏感性为98.0%(95%CI:0.943,0.996),特异性为98.0%(95%CI:0.930,0.998)。结论血清SerpinB1、miR-137对PCOS有良好的预测价值。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 丝氨酸蛋白酶抑制剂b1 microrna-137 受试者工作特征曲线 预测
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microRNA-21在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及意义 被引量：9
4
作者 张继新 吕晓涛 +4 位作者 高颖 崔力方 张程燕 昌红 李保玉 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期163-167,共5页
目的研究miR-21在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的表达,探讨miR-21表达与DL-BCL临床病理特征的关系及其在DLBCL发生发展中的意义。方法采用Real-time RT-PCR方法检测36例DLBCL和10例正常淋巴结中miR-21的表... 目的研究miR-21在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的表达,探讨miR-21表达与DL-BCL临床病理特征的关系及其在DLBCL发生发展中的意义。方法采用Real-time RT-PCR方法检测36例DLBCL和10例正常淋巴结中miR-21的表达,并采用免疫组织化学SP法检测Ki-67、PTEN在DLBCL中的表达。结果miR-21在DLBCL中高表达,36例DLBCL中有14例表达PTEN(38.9%),21例Ki-67≥50%(58.3%)。DLBCL中miR-21表达水平与PTEN蛋白表达呈负相关,其高表达与DLBCL高Ann Arbor分期、高增殖指数(Ki-67≥50%)、国际预后指数(IPI)呈正相关。结论miR-21过表达可能是DLBCL恶性度高的标志,是促进DLBCL肿瘤细胞增殖的重要因素。PTEN可能是miR-21在DLBCL发挥作用的靶标。 展开更多
关键词 淋巴瘤 大b细胞 microrna-21 实时定量RT-PCR
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microRNA-26b对宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭的影响 被引量：5
5
作者 凌燕 彭诗维 +1 位作者 熊员焕 高军 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1651-1653,共3页
目的探讨microRNA-26b(miR-26b)在宫颈癌组织的表达水平及其对宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭的影响。方法收集36例宫颈癌及癌旁组织的手术标本,应用实时荧光定量PCR技术,检测miR-26b mRNA的表达水平。以人宫颈癌细胞系HeLa细胞为研究对象,转... 目的探讨microRNA-26b(miR-26b)在宫颈癌组织的表达水平及其对宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭的影响。方法收集36例宫颈癌及癌旁组织的手术标本,应用实时荧光定量PCR技术,检测miR-26b mRNA的表达水平。以人宫颈癌细胞系HeLa细胞为研究对象,转染miR-26b成熟体及反义核苷酸,通过MTS方法和Transwell实验检测miR-26b对HeLa细胞增殖和侵袭的影响。结果 (1)miR-26b mRNA在宫颈癌组织中呈低水平表达。(2)MTS实验研究显示,与空白对照组(仅加转染试剂)相比,转染miR-26b成熟体,HeLa细胞的增殖能力明显下降(P<0.01);转染miR-26b反义核苷酸,HeLa细胞的增殖能力明显增强(P<0.01),而无义对照,没有明显变化(P>0.05)。(3)Transwell小室实验研究显示,与空白对照组相比,转染miR-26b成熟体,HeLa细胞的侵袭能力明显下降(P<0.01);转染miR-26b反义核苷酸,HeLa细胞的侵袭能力明显增强(P<0.05),而无义对照,没有明显变化(P>0.05)。结论 miR-26b具有抑制HeLa细胞的增殖和侵袭作用,miR-26b可能成为治疗宫颈癌的靶基因。 展开更多
关键词 microrna-26b 宫颈癌 HELA细胞 增殖 侵袭
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MicroRNA-378＊通过抑制CTGF促进人骨髓间充质干细胞凋亡 被引量：3
6
作者 董珺 曾波航 +4 位作者 刘宁宁 莫沛 熊龙根 刘世明 黎佼 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2238-2242,共5页
目的:研究年龄相关microRNA-378*(miR-378*)对人骨髓间充质干细胞(h MSCs)存活和凋亡的调控作用。方法:通过microRNA芯片和qRT-PCR检测供体年龄对h MSCs中miR-378*表达的影响;通过H2O2诱导h MSCs凋亡;通过转染miR-378*模拟物或抑制物,... 目的:研究年龄相关microRNA-378*(miR-378*)对人骨髓间充质干细胞(h MSCs)存活和凋亡的调控作用。方法:通过microRNA芯片和qRT-PCR检测供体年龄对h MSCs中miR-378*表达的影响;通过H2O2诱导h MSCs凋亡;通过转染miR-378*模拟物或抑制物,过表达或抑制miR-378*的表达;用MTT、LDH、caspase-3/7、TUNEL检测等方法研究其对h MSCs存活和凋亡的影响;通过siRNA研究结缔组织生长因子(CTGF)对h MSCs存活和凋亡的影响。结果:随供体年龄增加,h MSCs中miR-378*的表达增加。H2O2刺激可促进miR-378*表达,抑制CTGF表达。过表达miR-378*可减少h MSCs的存活,促进细胞凋亡。相反,抑制miR-378*的表达促进h MSCs的存活,减少细胞凋亡。同时抑制miR-378*和CTGF的表达,使miR-378*失去对h MSCs存活和凋亡的调控作用。直接抑制CTGF的表达可减少h MSCs的存活,促进细胞凋亡。结论:miR-378*通过抑制CTGF的表达减少h MSCs存活,促进h MSCs凋亡。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 microrna-378＊ 细胞凋亡
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MicroRNA-125b对人牙周膜干细胞成骨分化的影响 被引量：12
7
作者 杜莉 曹伟靖 +1 位作者 田莹 王原明 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期11-17,共7页
目的:探讨micro RNA-125b(mi R-125b)对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSCs)成骨分化的影响。方法:利用组织块法分离培养PDLSCs,流式细胞术检测细胞表面标志分子。PDLSCs经mi R-125b模拟物或mi R-125b抑制剂转染后,... 目的:探讨micro RNA-125b(mi R-125b)对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSCs)成骨分化的影响。方法:利用组织块法分离培养PDLSCs,流式细胞术检测细胞表面标志分子。PDLSCs经mi R-125b模拟物或mi R-125b抑制剂转染后,采用MTT法和LDH试剂盒分别检测细胞活性和细胞毒性,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和细胞内钙离子水平均以相应试剂盒检测,Western印迹法和RT-q PCR检测成骨相关基因水平。双荧光素酶基因报告实验检测mi R-125b对细胞间隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)的靶向调控作用。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果 :体外分离培养的PDLSCs呈现间充质干细胞特性。转染mi R-125b mimic后,PDLSCs的活性下降,毒性上升,ALP活性、钙离子水平以及成骨相关分子水平均显著下降;相反,antimi R125b提高了PDLSCs的细胞活性、ALP活性、钙离子水平以及成骨相关分子的表达。双荧光素酶基因报告实验结果表明,mi R-125b能够靶向降低Cx43基因水平。而在Cx43过表达的PDLSCs中,mi R-125b模拟物对PDLSCs成骨分化的作用被反转。结论:mi R-125b通过靶向下调Cx43而抑制PDLSCs的成骨分化。 展开更多
关键词 牙周膜干细胞 microrna-125b 细胞间隙连接蛋白43
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大黄对ICH模型大鼠microRNA-29b/DNMT3b/MMP-9信号通路的调节作用研究 被引量：6
8
作者 汪坤 赵旭 +1 位作者 杨艳华 崔应麟 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1604-1608,共5页
目的探讨大黄对ICH模型大鼠的血脑屏障保护作用机制。方法将50只Wistar雄性大鼠随机分成5组:空白组、假手术组、ICH组、安宫牛黄丸组(0.27 g/kg)、大黄组(3.60 g/kg)。除空白组外,其他组采用胶原酶注射尾状核的方法构建大鼠脑出血(ICH)... 目的探讨大黄对ICH模型大鼠的血脑屏障保护作用机制。方法将50只Wistar雄性大鼠随机分成5组:空白组、假手术组、ICH组、安宫牛黄丸组(0.27 g/kg)、大黄组(3.60 g/kg)。除空白组外,其他组采用胶原酶注射尾状核的方法构建大鼠脑出血(ICH)模型。术后连续灌肠3 d后,采集样本,免疫组化法检测ICH模型大鼠出血侧海马组织和皮层组织中ZO-1、VE-cadherin-2表达水平;蛋白免疫印迹试验(Western blot)检测ICH模型大鼠出血侧脑组织MMP-9、DNMT3b的表达;实时荧光定量PCR检测ICH模型大鼠出血侧脑组织中microRNA-29b的表达。结果与ICH组相比,大黄干预后可明显上调大鼠出血侧海马组织中ZO-1(P<0.01)、VE-cadherin-2(P<0.05)和皮层组织中ZO-1(P<0.01)、VE-cadherin-2(P<0.01)的表达,显著降低microRNA-29b(P<0.05)、DNMT3b(P<0.05)、MMP-9(P<0.01)的表达。结论大黄可以通过上调与血脑屏障相关的黏附蛋白和连接蛋白的表达发挥血脑屏障保护作用,这种作用可能与大黄调节microRNA-29b/DNMT3b/MMP-9信号通路有关。 展开更多
关键词 大黄 脑出血 血脑屏障 microrna-29b DNMT3b MMP-9
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miRNA378~*表达对柯萨奇B3病毒感染乳鼠心肌细胞凋亡、网腔钙结合蛋白、内质网应激伴侣蛋白表达的影响 被引量：5
9
作者 赵明 刘晓翠 +3 位作者 崔晓雪 邱祥春 王羽 魏成喜 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第4期304-307,共4页
目的:研究沉默miRNA378~*表达对柯萨奇B3病毒(CVB3)感染心肌细胞凋亡、内质网应激、网腔钙结合蛋白(calumenin)影响。方法:原代培养乳鼠心肌细胞分为:对照组(正常细胞)、柯萨奇病毒感染组(正常细胞+柯萨奇B3病毒)、miRNA378~*沉默对照组... 目的:研究沉默miRNA378~*表达对柯萨奇B3病毒(CVB3)感染心肌细胞凋亡、内质网应激、网腔钙结合蛋白(calumenin)影响。方法:原代培养乳鼠心肌细胞分为:对照组(正常细胞)、柯萨奇病毒感染组(正常细胞+柯萨奇B3病毒)、miRNA378~*沉默对照组(正常细胞+柯萨奇B3病毒+转染miRNA378~*空质粒)、miRNA378~*沉默组(正常细胞+柯萨奇B3病毒+转染miRNA378~*沉默质粒),各组细胞分别转染和感染处理后置37℃、CO_2培养箱中培养3 d。检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞凋亡率、网腔钙结合蛋白、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及内质网应激信号通路因子激活转录因子6(ATF6)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达。结果:通过检测ɑ-SMA蛋白,证实分离乳鼠细胞为心室肌细胞。TUNEL法检测不同组心室细胞凋亡情况发现,柯萨奇病毒感染组心室肌细胞凋亡明显,与柯萨奇病毒感染组心肌细胞相比较,miRNA378~*沉默组心肌细胞凋亡细胞量明显减少。与柯萨奇病毒感染组比较,Calumenin表达减少(P<0.01),而GRP78、ATF6、CHOP表达增加(P<0.01)。结论:CVB3病毒感染心肌细胞作用与miRNA378~*,引发内质网应激并激活信号通路因子,心肌细胞凋亡增加。 展开更多
关键词 心肌细胞 乳鼠 miRNA378＊ 柯萨奇b3病毒 内质网应激 网腔钙结合蛋白 凋亡
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MicroRNA-10b对人低转移肺癌细胞株95-C增殖和侵袭的作用及其机制的研究 被引量：3
10
作者 刘翼 李明慧 +2 位作者 张国庆 庞作良 郭文佳 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第9期928-931,共4页
目的微小RNA(microRNA,miRNA)-10b被证实可促进多种肿瘤细胞的生长及增强其侵袭能力。文中旨在研究miRNA-10b对人低转移肺癌细胞95-C的增殖及侵袭力的影响及其作用机制。方法用脂质体法将miRNA-10b真核表达质粒瞬时转染入95-C,实验设置... 目的微小RNA(microRNA,miRNA)-10b被证实可促进多种肿瘤细胞的生长及增强其侵袭能力。文中旨在研究miRNA-10b对人低转移肺癌细胞95-C的增殖及侵袭力的影响及其作用机制。方法用脂质体法将miRNA-10b真核表达质粒瞬时转染入95-C,实验设置空白对照组、阴性对照组和miRNA-10b质粒转染组,实时定量荧光PCR(Real-Time PCR,RT-PCR,)检测各组细胞miRNA-10b的表达及KLF4mRNA的表达,细胞增殖实验检测各组细胞的增殖情况,Transwell实验检测各组细胞侵袭能力,Western blot检测各组细胞KLF4蛋白的表达。结果转染后48h,RT-PCR检测,miRNA-10b质粒转染组miRNA-10b表达(1.61±0.12)较空白对照组(1.01±0.08)、阴性对照组(0.86±0.07)明显上调(P<0.05),阴性对照组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。生长曲线反映miRNA-10b质粒转染组细胞生长速度明显高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);Transwell结果显示,miRNA-10b质粒转染组[(188.0±15.1)/高倍显微镜]较空白对照组[(151.0±11.3)/高倍显微镜]、阴性对照组[(136.0±10.8)/高倍显微镜]有更多的细胞迁移到Transwell膜的另一侧(P<0.05),空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义(P>0.05);转染后48 h,miRNA-10b质粒组KLF4蛋白表达(0.86±0.06)较空白对照组(1.48±0.05)和阴性对照组(1.54±0.08)降低(P<0.05);各组细胞KLF4 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miRNA-10b可能过下调KLF4蛋白的表达促进95-C细胞的增殖及侵袭能力。 展开更多
关键词 microrna-10b 95-C KLF4 细胞增殖 侵袭能力
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MicroRNA-196b基因在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义 被引量：7
11
作者 王薇 于宝丹 +2 位作者 李玉莲 曹冉华 闫海成 《实用医院临床杂志》 2016年第5期61-64,共4页
目的探讨非小细胞肺癌组织中MicroRNA-196b的表达及其临床意义。方法收集2013年5月至2015年5月在我院接受治疗的65例非小细胞肺癌患者肺癌组织及其对应的癌旁组织,采用实时荧光定量PCR技术对组织样本中MicroRNA-196b的表达情况进行检测... 目的探讨非小细胞肺癌组织中MicroRNA-196b的表达及其临床意义。方法收集2013年5月至2015年5月在我院接受治疗的65例非小细胞肺癌患者肺癌组织及其对应的癌旁组织,采用实时荧光定量PCR技术对组织样本中MicroRNA-196b的表达情况进行检测,分析其与患者临床病理因素的关系;评价MicroRNA-196b在非小细胞肺癌诊断中的效能。结果非小细胞肺癌患者癌组织中MicroRNA-196b的表达量明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。癌组织中MicroRNA-196b的表达水平与淋巴结转移、TNM分期、病理分型密切相关(P<0.05),而与患者性别、年龄、吸烟史、肿瘤大小以及分化程度无关联性(P>0.05)。癌组织中MicroRNA-196b最佳检测临界值为0.879,检测灵敏度和特异度分别为78.5%、90.8%。结论 MicroRNA-196b在非小细胞肺癌患者肺癌组织中呈高表达,其表达水平与淋巴结转移、TNM分期、病理分型有关;癌组织MicroRNA-196b可作为临床非小细胞肺癌诊断的辅助检测指标。 展开更多
关键词 microrna-196b 非小细胞肺癌 PCR
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重症肌无力患者外周血单个核细胞中microRNA-23b表达的初步探究 被引量：4
12
作者 李娜 王丽华 +2 位作者 张帅 王健健 孙雪松 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期776-779,共4页
目的探讨microRNA-23b与MG发病的相关性。方法 31例MG患者,31例健康人,取其外周血分离外周血单个核细胞(PBMCs),提取RNA并逆转录,实时定量PCR检测microRNA-23b的表达,以小分子RNAU6为内参,计算标准化后的2-ΔCt值表示microRNA-23b相对... 目的探讨microRNA-23b与MG发病的相关性。方法 31例MG患者,31例健康人,取其外周血分离外周血单个核细胞(PBMCs),提取RNA并逆转录,实时定量PCR检测microRNA-23b的表达,以小分子RNAU6为内参,计算标准化后的2-ΔCt值表示microRNA-23b相对表达量。结果 MG患者PBMCs中microRNA-23b的表达水平高于健康对照组(P=0.0266),但其在MG不同临床特征亚组中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。MicroRNA-23b表达水平与肌无力严重程度之间的相关性无统计学意义(r=-0.0308,P=0.8695)。结论 MG患者PBMCs中microRNA-23b异常高表达,但与性别、发病年龄、类型、胸腺状态、甲状腺功能及肌无力严重程度无关。 展开更多
关键词 重症肌无力 microrna-23b 外周血单个核细胞
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MicroRNA-15b在子宫内膜癌组织中的表达及其对子宫内膜癌细胞增殖的影响 被引量：11
13
作者 张英 马瑞霞 +1 位作者 杜艳云 史亚男 《新乡医学院学报》 CAS 2018年第3期177-181,共5页
目的探讨microRNA-15b(miR-15b)在子宫内膜癌组织中的表达及其对子宫内膜癌细胞增殖的影响。方法选取2013年2月至2017年2月新乡市中心医院收治的87例子宫内膜癌患者手术切除的子宫内膜癌组织,另选取45例因子宫肌瘤行子宫全切术患者的正... 目的探讨microRNA-15b(miR-15b)在子宫内膜癌组织中的表达及其对子宫内膜癌细胞增殖的影响。方法选取2013年2月至2017年2月新乡市中心医院收治的87例子宫内膜癌患者手术切除的子宫内膜癌组织,另选取45例因子宫肌瘤行子宫全切术患者的正常子宫内膜组织作为对照,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中miR-15b的表达,并分析miR-15b表达与患者临床病理特征的关系。培养人子宫内膜癌HEC-1A细胞,随机分为miR-15b模拟物组、对照序列组和空白对照组,采用实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-15b表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡率和细胞周期变化。结果子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中miR-15b相对表达量分别为1.32±0.13、2.49±0.16,子宫内膜癌组织中miR-15b相对表达量低于正常子宫内膜组织(t=46.184,P<0.05);子宫内膜癌组织中miR-15b相对表达量与国际妇产科联合会分期、肌层浸润深度和淋巴结转移有关(P<0.05),与年龄、组织学类型、分化程度、是否累及淋巴管和血管无关(P>0.05)。与空白对照组和对照序列组比较,miR-15b模拟物组人子宫内膜癌细胞中miR-15b相对表达量显著增加(P<0.05),培养24、48、72、96 h时细胞增殖能力均降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),G_0+G_1期细胞比例显著增加(P<0.05),而G_2+M期细胞比例减少(P<0.05)。空白对照组与对照序列组人子宫内膜癌细胞中miR-156相对表达量、培养12、24、48、72、96 h时细胞增殖能力、细胞凋亡率及G_0+G期、S期和G_2+M期细胞比例比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-15b在子宫内膜癌组织中呈低表达,上调子宫内膜癌细胞中miR-15b基因表达可抑制细胞增殖,其机制可能与阻滞细胞周期及促进细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 microrna-15b 细胞增殖 细胞凋亡
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MicroRNA-29a对大鼠心肌细胞Bcl-2和Mcl-1表达的调控作用及其机制 被引量：6
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作者 张振辉 尤祥宇 +2 位作者 刘少军 刘连 刘世明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1928-1932,共5页
目的:探讨microRNA-29a(miR-29a)对大鼠心肌细胞(CM细胞)B细胞白血病/淋巴瘤-2(Bcl-2)和髓样细胞白血病-1(Mcl-1)表达的调控机制。方法:体外培养新生Sprague-Dawley大鼠CM细胞和人胚肾细胞株293T。合成大鼠miR-29a的拟似物(mimic)和抑制... 目的:探讨microRNA-29a(miR-29a)对大鼠心肌细胞(CM细胞)B细胞白血病/淋巴瘤-2(Bcl-2)和髓样细胞白血病-1(Mcl-1)表达的调控机制。方法:体外培养新生Sprague-Dawley大鼠CM细胞和人胚肾细胞株293T。合成大鼠miR-29a的拟似物(mimic)和抑制剂(inhibitor)。用脂质体Lipofectamine RNAiMAX转染miR-29a mimic进入CM细胞,转染48 h后分别用实时荧光定量PCR和Western blotting检测Bcl-2和Mcl-1mRNA和蛋白的表达变化。构建Bcl-2和Mcl-1的萤光素酶报告基因载体(DNA质粒),转染293T细胞(DNA质粒和miRNA共转染)和CM细胞(miRNA和DNA质粒先后转染),双萤光素酶报告基因系统检测萤光素酶的表达变化。结果:CM细胞转染miR-29a mimic 48 h后,Bcl-2和Mcl-1 mRNA和蛋白的水平均下调(P<0.05)。双萤光素酶报告基因系统显示,在293T细胞中,miR-29a可特异抑制带有bcl-2和mcl-1 3’UTR上野生型识别元件的报告基因表达(P<0.05),在CM细胞中,抑制内源性的miR-29a水平能促进bcl-2和mcl-1 3’UTR上野生型识别元件的报告基因表达。结论:抗凋亡基因bcl-2和mcl-1是miR-29a的靶基因。miR-29a可能通过作用于Bcl-2和Mcl-1实现对心肌细胞凋亡的调控作用,具体效应仍待进一步阐明。 展开更多
关键词 microrna-29a 细胞凋亡 b细胞白血病 淋巴瘤-2 髓样细胞白血病-1
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microRNA-125b在葛根素诱导人卵巢癌细胞SKOV3凋亡中的作用研究 被引量：4
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作者 张悦 段海霞 +1 位作者 暴蕾 符乔珊 《现代检验医学杂志》 CAS 2017年第5期13-15,117,共4页
目的探讨micRNA-125b在葛根素诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡中的重要作用。方法运用qRT-PCR技术检测葛根素处理卵巢癌细胞SKOV3中microRN A-125b的改变。运用干涉RNA技术抑制SKOV3细胞中microRNA-125 b表达。运用Western blot技术检测SKOV3细... 目的探讨micRNA-125b在葛根素诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡中的重要作用。方法运用qRT-PCR技术检测葛根素处理卵巢癌细胞SKOV3中microRN A-125b的改变。运用干涉RNA技术抑制SKOV3细胞中microRNA-125 b表达。运用Western blot技术检测SKOV3细胞microRNA-125b低表达后,葛根素处理组与对照组中凋亡相关蛋白的改变。结果葛根素能够显著抑制卵巢癌细胞SKOV3的增殖活力以及促进其凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3,Bax和Bcl-2的表达,并且初步揭示了葛根素处理卵巢癌细胞SKOV3后能够促进microRNA-125b的表达;抑制卵巢癌细胞SKOV3中microRNA-125b的表达能够降低葛根素对SKOV3细胞凋亡蛋白Cleaved Caspase-3,Bax和Bcl-2的表达。结论 microRNA-125b参与了葛根素对卵巢癌细胞SKOV3的促凋亡作用,提示microRNA-125b是卵巢癌细胞SKOV3耐药机制中的关键分子。 展开更多
关键词 卵巢癌 葛根素 microrna-125b 凋亡
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调控microRNA-99b表达对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的作用 被引量：2
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作者 吴维光 孙小丽 +1 位作者 陈勍 林仲秋 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期670-675,共6页
【目的】探讨上调microRNA-99b(miR-99b)表达对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的作用及可能的机制。【方法】宫颈癌SiHa细胞分正常对照组、阴性对照组和miR-99b调控组。利用siPORT NeoFX TransfectionAgent,阴性对照组细胞转染Cy3dye labeled... 【目的】探讨上调microRNA-99b(miR-99b)表达对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的作用及可能的机制。【方法】宫颈癌SiHa细胞分正常对照组、阴性对照组和miR-99b调控组。利用siPORT NeoFX TransfectionAgent,阴性对照组细胞转染Cy3dye labeled PremiR Negative Control,miR-99b调控组细胞转染Pre-miR-hsa-miR-99b miRNA Precursor。实时定量PCR方法检测miR-99b表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测靶基因细胞分裂周期25A(CDC25A)蛋白表达。【结果】实时定量PCR结果显示,miR-99b调控组细胞,miR-99b表达增加107.23倍。正常对照组、阴性对照组和miR-99b调控组细胞增殖率分别为(3.26±0.44)%、(3.65±0.47)%和(2.24±0.45)%,细胞凋亡率分别为(8.12±1.54)%、(8.75±1.67)%和(14.26±1.70)%,细胞CDC25A蛋白表达分别为0.50±0.06、0.59±0.05和0.31±0.05。与正常对照组和阴性对照组比较,miR-99b调控组细胞增殖率、凋亡率和CDC25A蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】上调miR-99b表达可通过降低靶基因CDC25A表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,miR-99b可能成为宫颈癌治疗的靶基因。 展开更多
关键词 SIHA细胞 microrna-99b 增殖 调亡
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上皮性卵巢癌患者microRNA-15a/b表达及其临床意义 被引量：5
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作者 陈琳 左亚敏 +1 位作者 沈亚杰 赵松兰 《临床和实验医学杂志》 2019年第1期55-58,共4页
目的检测上皮性卵巢癌(EOC)患者肿瘤组织以及血清microRNA-15a/b(miR-15a/b)表达水平,并探讨其临床意义。方法回顾性选取30例卵巢良性疾病或健康体检者(对照组)以及64例EOC患者,应用实时定量PCR检测肿瘤组织以及血清中miR-15a/b表达水平... 目的检测上皮性卵巢癌(EOC)患者肿瘤组织以及血清microRNA-15a/b(miR-15a/b)表达水平,并探讨其临床意义。方法回顾性选取30例卵巢良性疾病或健康体检者(对照组)以及64例EOC患者,应用实时定量PCR检测肿瘤组织以及血清中miR-15a/b表达水平,同时评价两类样本中miR-15a/b表达相关性。受试者工作特征曲线(ROC)和Kaplan-Meier生存分析分别用于评价血清miR-15a/b表达的诊断价值及对预后的影响。结果 EOC患者血清以及组织miR-15a/b表达水平均低于对照组(P <0. 001和P <0. 01),且血清与组织中miR-15a/b表达呈显著正相关(r=0. 912,P <0. 001和r=0. 881,P <0. 001)。ROC分析显示血清miR-15a/b表达能够较好地区分EOC患者与对照组,曲线下面积分别为0. 805(95%CI:0. 718～0. 893)和0. 806(95%CI:0. 718～0. 894)。此外,miR-15a/b高、低表达组间患者的FIGO分期、肿瘤分化程度以及淋巴结转移等有显著差异(P <0. 05)。Kaplan-Meier生存分析发现miR-15a低表达患者的总体生存以及无病生存均短于miR-15a高表达患者(P=0. 005和0. 072)。结论 miR-15a/b表达下调是EOC患者常见的分子事件,且血清miR-15a可以作为非侵入性分子标志用于EOC的诊断及预后判断。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 microrna-15a/b 表达 诊断 预后
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microRNA-125b在Flk1^+脂肪源间充质干细胞向神经分化过程中的表达变化 被引量：3
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作者 王世华 边春景 +1 位作者 黄珊 赵春华 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1711-1715,共5页
背景:间充质干细胞的分化受遗传和表观遗传因素的严格调控,越来越多的研究表明microRNA也在这一过程中发挥重要的调控作用。目的:观察microRNA-125b在Flk1+间充质干细胞向神经细胞分化过程中的表达变化。方法:成人脂肪样品取自15～35岁... 背景:间充质干细胞的分化受遗传和表观遗传因素的严格调控,越来越多的研究表明microRNA也在这一过程中发挥重要的调控作用。目的:观察microRNA-125b在Flk1+间充质干细胞向神经细胞分化过程中的表达变化。方法:成人脂肪样品取自15～35岁健康志愿者,贴壁培养法获得间充质干细胞,采用神经诱导培养基对第3代间充质干细胞进行诱导培养。在诱导第0,4,8,12天检测microRNA-125b的表达情况。应用microRNA芯片技术检测间充质干细胞在神经诱导前后microRNA-125b的表达差异并采用反转录-聚合酶链反应和Taqmanreal-timePCR的方法进行验证。检测inhibitor抑制microRNA-125b表达的有效性。结果与结论:①实验成功诱导间充质干细胞向神经分化,诱导培养后12d观察到细胞形态发生变化:大部分细胞胞体回缩,呈球形,并有轴突形成,免疫荧光检测结果显示,分化后的细胞表达神经元、星形胶质细胞特征性表面标志。②RT-PCR和Taqmanreal-timePCR显示神经诱导后microRNA-125b表达明显升高,与microRNA芯片结果一致。③inhibitor可以有效抑制microRNA-125b的表达。提示microRNA-125b可能在间充质干细胞成神经分化过程中起调控作用。 展开更多
关键词 microrna-125b 脂肪源间充质干细胞 神经分化 MIRNA MIRNA芯片
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MicroRNA-218、microRNA-193b在宫颈癌组织中的表达及与化疗耐药性的关系 被引量：1
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作者 吴玲姣 邓洁 +2 位作者 徐瑶 彭聪 徐蕾 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第20期20-25,共6页
目的 探讨microRNA-218(miR-218)、microRNA-193b(miR-193b)在宫颈癌组织中的表达及其与化疗耐药性的关系。方法 选取2018年1月-2023年1月成都医学院第一附属医院收治的101例行手术治疗的宫颈癌患者。患者均行紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-... 目的 探讨microRNA-218(miR-218)、microRNA-193b(miR-193b)在宫颈癌组织中的表达及其与化疗耐药性的关系。方法 选取2018年1月-2023年1月成都医学院第一附属医院收治的101例行手术治疗的宫颈癌患者。患者均行紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂药物敏感性试验,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-218、miR-193b表达情况。比较癌组织、癌旁组织中miR-218、miR-193b表达情况,统计化疗药物耐药情况,分析宫颈癌组织中miR-218、miR-193b的表达与化疗耐药性的关系。结果 癌组织中miR-218相对表达量低于癌旁组织(P <0.05),miR-193b相对表达量高于癌旁组织(P <0.05)。宫颈癌患者行体外化疗药物紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂的耐药率分别为38.61%、46.53%、48.51%、26.73%和40.59%。宫颈鳞癌与宫颈腺癌患者对体外化疗药物紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂耐药率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。耐药患者癌组织中miR-218相对表达量均低于敏感患者,miR-193b相对表达量均高于敏感患者(P <0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,miR-218、miR-193b及两者联合预测宫颈癌患者化疗耐药性的敏感性分别为74.51%(95%CI:0.601,0.852)、70.59%(95%CI:0.560,0.821)、82.35%(95%CI:0.686,0.911),特异性分别为74.00%(95%CI:0.594,0.849)、78.00%(95%CI:0.637,0.880)、90.00%(95%CI:0.774,0.963),曲线下面积分别为0.754(95%CI:0.661,0.847)、0.743(95%CI:0.643,0.843)、0.890(95%CI:0.824,0.956)。结论 宫颈癌组织中miR-218表达低于癌旁组织、miR-193b表达高于癌旁组织,miR-218、miR-193b的表达水平与宫颈癌患者化疗耐药性有关,两者联合预测宫颈癌患者化疗耐药性效能良好。 展开更多
关键词 宫颈癌 microrna-218 microrna-193b 耐药
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舌鳞状细胞癌组织microRNA-29b表达生物学意义研究 被引量：2
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作者 乐飞 钟晓鸣 +1 位作者 罗文政 陈雯 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2014年第17期1347-1350,1354,共5页
目的:探讨微小RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)在舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)组织中的表达及其生物学意义。方法:收集2012-01-02-2013-03-15江西省肿瘤医院头颈外科行手术切除的45例TSCC及对应癌旁组织(距离切缘&... 目的:探讨微小RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)在舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)组织中的表达及其生物学意义。方法:收集2012-01-02-2013-03-15江西省肿瘤医院头颈外科行手术切除的45例TSCC及对应癌旁组织(距离切缘>2cm),qRT-PCR技术检测miR-29b在TSCC及对应癌旁组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系;应用miR-29bmimic转染人舌鳞癌Tca-8113细胞,MTT和流式细胞技术检测转染后细胞增殖和凋亡变化,qRT-PCR和蛋白质印迹法检测miR-29b潜在靶点Bcl-2mRNA及蛋白的表达变化。结果:qRT-PCR结果显示,miR-29b在TSCC组织中的表达量为0.213±0.071,显著低于对应癌旁组织的1.873±0.114,t=2.531,P=0.031;miR-29b低表达与肿瘤体积增大(≥3cm,χ2=4.022,P=0.033)及高TNM分期(Ⅲ+Ⅳ,χ2=3.398,P=0.036)具有显著相关性;MTT结果显示,在Tca-8113细胞中转染miR-29b48h后可显著降低细胞增殖能力,P<0.05;同时,转染miR-29b72h后细胞凋亡率由(2.31±0.98)%增加到(11.83±1.36)%,t=2.237,P=0.034。Real-time PCR及蛋白质印迹结果显示,转染miR-29b后可显著下调Tca-8113细胞内Bcl-2mRNA及蛋白表达,P<0.05。结论:TSCC组织中miR-29b表达下调并与其临床病理特征相关,miR-29b可能通过下调Bcl-2的表达来抑制舌鳞癌Tca-8113细胞增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 microrna-29b 舌鳞状细胞癌 增殖 凋亡 bCL-2
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