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首发精神分裂症患者血浆microRNA-30e表达水平与症状的关系 被引量:3
1
作者 付广慧 许俊亭 +2 位作者 李奕 方芳 谢守付 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期489-492,共4页
目的探讨精神分裂症患者血浆micro RNA-30e表达水平变化及其与临床症状的相关性。方法纳入17例首发精神分裂症患者和16名健康对照者,年龄17~45岁。采用定量反转录聚合酶链式反应检测两组血浆micro RNA-30e的表达水平,使用阳性与阴性症... 目的探讨精神分裂症患者血浆micro RNA-30e表达水平变化及其与临床症状的相关性。方法纳入17例首发精神分裂症患者和16名健康对照者,年龄17~45岁。采用定量反转录聚合酶链式反应检测两组血浆micro RNA-30e的表达水平,使用阳性与阴性症状量表(positive and negative symptom scale,PANSS)、个人和社会功能量表(personal and social functioning scale,PSP)对患者组进行评定。结果 与对照组比较,精神分裂症患者血浆micro RNA-30e相对表达量下降,差异有统计学意义(Z=-2.180,P=0.029)。患者血浆micro RNA-30e相对表达水平与PANSS中攻击危险性得分存在正相关(r=0.517,P=0.040),与PANSS总分、阳性症状、阴性症状、一般精神病理学症状相关性无统计学意义(P>0.05);micro RNA-30e相对表达水平与PSP总分、对社会有益的活动、个人关系和社会关系、自我照料、扰乱及攻击行为相关性无统计学意义(P>0.05)。结论 血浆micro RNA-30e的表达水平可能与精神分裂症有关,与急性期冲动控制能力有关系;micro RNA-30e可能是精神分裂症的疾病性质指标,而非状态依赖性指标。 展开更多
关键词 精神分裂症 microrna-30e 生物标记物
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MicroRNA-30e-5p通过下调泛素特异性蛋白酶22抑制非小细胞肺癌的发生和发展 被引量:4
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作者 徐高俊 蔡捷 +2 位作者 黄健兵 梅举 丁芳宝 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1410-1417,共8页
目的探讨microRNA-30e-5p(miR-30e-5p)是否可通过下调泛素特异性蛋白酶22(USP22)抑制非小细胞肺癌(NSCLC)的发生和发展。方法采用qPCR、蛋白质印迹法和免疫组织化学染色法检测miR-30e-5p、USP22在NSCLC组织和癌旁组织中的表达。NSCLC细... 目的探讨microRNA-30e-5p(miR-30e-5p)是否可通过下调泛素特异性蛋白酶22(USP22)抑制非小细胞肺癌(NSCLC)的发生和发展。方法采用qPCR、蛋白质印迹法和免疫组织化学染色法检测miR-30e-5p、USP22在NSCLC组织和癌旁组织中的表达。NSCLC细胞株H460转染miR-30e-5p模拟物或miR-30e-5p抑制物后,利用qPCR和蛋白质印迹法检测细胞中miR-30e-5p、USP22的表达。构建USP22突变载体,采用荧光素酶报告基因检测miR-30e-5p在USP22基因中的结合位点。采用MTT法检测转染后H460细胞的增殖情况,并采用异种移植法检测裸鼠体内肿瘤生长情况。流式细胞术检测转染后H460细胞的周期阻滞和凋亡情况。结果 MiR-30e-5p、USP22在肿瘤组织中的表达均高于癌旁组织(P均<0.01)。在H460细胞中过表达miR-30e-5p后USP22 mRNA和蛋白的表达均下调(P均<0.01),而抑制miR-30e-5p表达后USP22mRNA和蛋白的表达均上调(P均<0.01)。NSCLC组织中miR-30e-5p与USP22的表达呈负相关(P<0.01)。miR-30e-5p可通过结合在3′UTR的特异序列负调控USP22的表达。过表达miR-30e-5p可抑制H460细胞的增殖、诱导细胞周期阻滞和凋亡,并抑制裸鼠体内肿瘤的生长(P<0.05,P<0.01);而抑制miR-30e-5p的表达可促进H460细胞的增殖、抑制细胞周期阻滞和凋亡(P<0.05,P<0.01)。结论 MiR-30e-5p可以下调USP22的表达,从而抑制NSCLC的发生和发展,提示其可作为NSCLC患者的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 肺肿瘤 非小细胞肺癌 miR-30e-5p 泛素特异性蛋白酶22 癌基因 肿瘤抑制基因
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MicroRNA-30b靶向调节Sema3A对视神经损伤修复的作用 被引量:1
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作者 乔俊丽 伟伟 杨佳 《临床和实验医学杂志》 2017年第9期880-883,共4页
目的对专MicroRNA-30b靶向调节Sema3A对视神经损伤的临床修复作用进行探究,进而进一步证实Sema3A是MicroRNA-30b的靶基因,明确MicroRNA-30b可以通过对Sema3A的调节来表达、抑制其信号通路,进而保护视网膜神经节细胞并加快轴突的生长,为... 目的对专MicroRNA-30b靶向调节Sema3A对视神经损伤的临床修复作用进行探究,进而进一步证实Sema3A是MicroRNA-30b的靶基因,明确MicroRNA-30b可以通过对Sema3A的调节来表达、抑制其信号通路,进而保护视网膜神经节细胞并加快轴突的生长,为视神经受损提供系的思路与目标靶点。方法择取实验室现有的实验鼠进行SD视神经钳夹损伤模型,并分别采取qRT-PCR、Western blotting以及双荧光素酶报告基因系统对实验鼠健康及受损后,视网膜中MicroRNA-30b、Sema3A等指标的表达变化情况进行检测分析。向实验鼠损伤眼玻璃体腔内分别注射实验室现有的PBS、rAAV-miR-30b mimic、rAAV-miRNA NC以及rAAV-miR-30b Inhibitor等制剂,进而判定损伤后不同时间节点内视网膜神经节细胞(RGCs)的存活率变化,以了解不同组别间视功能恢复情况的差异。最后,进行以Sema3A为靶目标的siRNA,分别在正常情况下体外培养RGCs和取目前抑制效果最佳的siRNA进行培养RGCs状态下检测Sema3A的表达量,以掌握MicroRNA-30b调控Sema3A的信号通路情况。进而判定MicroRNA-30b靶向调节Sema3A对视神经损伤修复中的具体作用。结果在SD神经钳夹损伤模型中可知,实验鼠视网膜中MicroRNA-30b、Sema3A的表达均为先上升而后下降,一般在7 d时达最高峰,免疫组化检测显示Sema3A的表达一般发生于健康视网膜中的节细胞层与内核层中,而在视神经受损后两细胞层内阳细胞数量显著增多。同时,在实验鼠玻璃体内注射注射PBS、rAAV-miR-30b mimic、rAAV-miRNA NC以及rAAV-miR-30b Inhibitor后受损四组RGCs存活率均有不同程度下降,且mimic组最高、inhibitor组最低。结论实验表明,Sema3A为MicroRNA-30b的靶基因,在对视神经修复中具有显著的作用,能够有效提升视神经损伤后RGCs的存活率,进而促进视神经的修复。 展开更多
关键词 视神经损伤 靶基因 microrna-30b 修复 SeMA3A 靶向调节
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定坤丹通过microRNA-30d-5p靶向调节Smad2促进多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞增殖的机制研究
4
作者 陈兰 颜晓静 +6 位作者 廉源沛 朱力 周世康 王地均 蔡佳丽 尹春燕 曹吉 《广州中医药大学学报》 2025年第7期1750-1756,共7页
【目的】通过观察microRNA-30d-5p对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞(GCs)的影响,探讨定坤丹治疗PCOS的作用机制。【方法】以脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,体外培养正常大鼠GCs与PCOS大鼠GCs。将GCs分为空白组,模型组及定坤丹低... 【目的】通过观察microRNA-30d-5p对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞(GCs)的影响,探讨定坤丹治疗PCOS的作用机制。【方法】以脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,体外培养正常大鼠GCs与PCOS大鼠GCs。将GCs分为空白组,模型组及定坤丹低、高剂量组,分组处理后,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测GCs的存活率,细胞流式术分析GCs凋亡率,实时聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测GCs中转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad3及microRNA-30d-5p的表达,Western Blot法检测GCs中TGF-β1、Smad2及Smad3的蛋白表达。【结果】与空白组比较,模型组GCs存活率显著下降,GCs凋亡率,TGF-β1、Smad2及Smad3的基因及蛋白表达水平显著升高,microRNA-30d-5p的表达水平显著下降,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,定坤丹低、高剂量组GCs存活率上升,GCs凋亡率显著下降,TGF-β1、Smad2及Smad3的基因与蛋白表达水平显著下降,microRNA-30d-5p的表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性。【结论】定坤丹通过microRNA-30d-5p靶向调节Smad2促进GCs增殖,可能起到治疗PCOS排卵障碍的作用。 展开更多
关键词 定坤丹 多囊卵巢综合征 转化生长因子β1 SMAD2 microrna-30d-5p 卵巢颗粒细胞 大鼠
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右美托咪定调控miR-30e表达对直肠癌增殖、凋亡及上皮间质转化的影响 被引量:1
5
作者 董彦东 王心 +1 位作者 张世彬 赵婷 《贵州医科大学学报》 2025年第1期39-47,56,共10页
目的探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)通过调控微小RNA-30e(miR-30e)对直肠癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法体外培养人直肠癌细胞SW480,将细胞分为ctrl组、miR-NC组、miR-30e m... 目的探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)通过调控微小RNA-30e(miR-30e)对直肠癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法体外培养人直肠癌细胞SW480,将细胞分为ctrl组、miR-NC组、miR-30e mimics组、anti-NC组、anti-miR-30e组、低浓度Dex组(2.00μmol/L)、高浓度Dex组(5.00μmol/L)、高浓度Dex(5.00μmol/L)+anti-NC组及高浓度Dex(5.00μmol/L)+anti-miR-30e组;48 h后,采用qRT-PCR法测定miR-30e表达,CCK-8法分析细胞增殖,流式细胞仪评估细胞凋亡,Transwell实验测量细胞迁移和侵袭,Western blot分析各组细胞增殖、凋亡、转移相关蛋白表达;通过双荧光素酶报告基因实验分析PTEN与miR-30e的关系。结果与miR-NC组比较,miR-30e mimics组迁移和侵袭数目、细胞存活率、PTEN、N-cadherin及PCNA表达降低,细胞凋亡率、miR-30e、BAX、E-cadherin水平上升(P<0.05);与anti-NC组比较,anti-miR-30e组SW480细胞存活率、PTEN、N-cadherin、PCNA表达、迁移和侵袭数目上升,miR-30e、BAX、E-cadherin表达、细胞凋亡率下降(P<0.05);与ctrl组比较,低浓度Dex组、高浓度Dex组SW480细胞的细胞存活率、PTEN、PCNA、N-cadherin表达、细胞迁移和侵袭数目下降,而miR-30e、细胞凋亡率、BAX、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05);与高浓度Dex组、高浓度Dex+anti-NC组比较,高浓度Dex+anti-miR-30e组SW480细胞存活率、细胞迁移和侵袭数、PCNA、N-cadherin、PTEN蛋白表达升高,而miR-30e表达水平、细胞凋亡率、BAX、E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。结论右美托咪定可能通过上调miR-30e的表达进而抑制直肠癌细胞的增殖和EMT,并促进直肠癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 右美托咪定 微小RNA-30e 直肠癌 增殖 凋亡 上皮间质转化
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miR-30e在乙肝肝纤维化疾病患者血清外泌体中表达及其临床意义
6
作者 廖丽菊 廖丽秋 +3 位作者 凌琳 黄晶晶 黎作茶 韦武均 《右江医学》 2025年第5期391-397,共7页
目的 探讨血清外泌体miRNA在乙型肝炎病毒(HBV)相关肝纤维化中的诊断价值。方法 选择2017年4月至2020年10月右江民族医学院附属医院的60例HBV相关肝纤维化患者及60例健康对照者。通过透射电子显微镜和纳米颗粒追踪分析鉴定外泌体形态和... 目的 探讨血清外泌体miRNA在乙型肝炎病毒(HBV)相关肝纤维化中的诊断价值。方法 选择2017年4月至2020年10月右江民族医学院附属医院的60例HBV相关肝纤维化患者及60例健康对照者。通过透射电子显微镜和纳米颗粒追踪分析鉴定外泌体形态和粒径,采用二代测序技术分析血清外泌体miRNA表达谱,并用实时荧光定量PCR验证关键miRNA的表达,结合受试者工作特征(ROC)曲线评估其诊断效能。结果 透射电镜观察到单层膜外泌体形态,粒径在30~100 nm。HBV相关肝纤维化组外泌体中28个miRNA表达显著差异,其中miR-30e-5p表达显著上调(t=19.17,P<0.001),并与肝功能指标ALT、GGT及AFP呈正相关(P<0.001)。ROC曲线分析显示miR-30e-5p的曲线下面积(AUC)为0.880(95%CI:0.752~1.000,P=0.002),具有较高的诊断效能。结论 血清外泌体miR-30e-5p可能作为HBV相关肝纤维化的潜在诊断标志物。 展开更多
关键词 乙肝肝纤维化 外泌体 微小RNA miR-30e 诊断标志物
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MPC_(30)-DEA_(70)载microRNA-21AS-ODN转染心肌成纤维细胞的可行性分析
7
作者 瞿晓雅 李艳茹 +1 位作者 张琼 张卓琦 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第25期1-4,共4页
目的探讨阳离子磷酸胆碱聚合物MPC30-DEA70能否成功载microRNA-21反义寡核苷酸(AS-ODN)转染大鼠心肌成纤维细胞,以及转染后MPC30-DEA70/microRNA-21ODN复合物对大鼠心肌成纤维细胞microRNA-21的基因沉默效应和microRNA-21下游产物的抑... 目的探讨阳离子磷酸胆碱聚合物MPC30-DEA70能否成功载microRNA-21反义寡核苷酸(AS-ODN)转染大鼠心肌成纤维细胞,以及转染后MPC30-DEA70/microRNA-21ODN复合物对大鼠心肌成纤维细胞microRNA-21的基因沉默效应和microRNA-21下游产物的抑制作用。方法制备不同氨基与磷酸根比值(N∶P)的MPC30-DEA70/microRNA-21ODN复合物;差速贴壁法分离大鼠心肌成纤维细胞并培养;利用荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜观察MPC30-DEA70/microRNA-21ODN复合物(FAM标记)在细胞内的分布;采用Western blotting法和RT-PCR法分别检测细胞外调节激酶(ERK)-丝裂原活化蛋白(MAP)激酶、Ⅰ型胶原蛋白及pre-microRNA-21的表达。结果原代培养的大鼠心肌成纤维细胞光镜下呈三角形或不规则多边形,核居中;MPC30-DEA70/microRNA-21ODN复合物在心肌成纤维细胞中具有较高的转染率,且呈剂量依赖性(P均<0.05),共聚焦激光扫描显微镜示复合物大部分分布于核周,少部分进入细胞核;MPC30-DEA70载microRNA-21ODN进入心肌成纤维细胞后下调pre-microRNA-21、ERK-MAP激酶及Ⅰ型胶原蛋白的表达(P均<0.05)。结论 MPC30-DEA70能成功并有效转载microRNA-21ODN进入心肌成纤维细胞,使microRNA-21及其下游信号通路ERKMAP激酶、Ⅰ型胶原蛋白表达下调,是一种有效的转基因载体。 展开更多
关键词 心肌成纤维细胞 MPC30-DeA70 microrna-21ODN 细胞转染 大鼠
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MicroRNA-30c inhibits pancreatic cancer cell proliferation by targeting twinfilin 1 and indicates a poor prognosis 被引量:2
8
作者 Lu-Lu Sun Ming Cheng Xiao-Dong Xu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2019年第42期6311-6321,共11页
BACKGROUND Studies have reported that microRNA-30c(miR-30c)has vital functions in the development and progression of multiple cancers.AIM To investigate the clinical significance and role of miR-30c in pancreatic canc... BACKGROUND Studies have reported that microRNA-30c(miR-30c)has vital functions in the development and progression of multiple cancers.AIM To investigate the clinical significance and role of miR-30c in pancreatic cancer.METHODS MiR-30c and twinfilin 1(TWF1)expression levels were analyzed in Gene Expression Omnibus datasets and validated in human pancreatic cancer by quantitative real-time polymerase chain reaction(RT-qPCR).The effects of miR-30c on pancreatic cancer cell growth,apoptosis,and cell cycle were evaluated by CCK-8 and flow cytometry assays.Furthermore,the in vivo effects were investigated using a subcutaneous xenograft experiment.Target gene prediction software and luciferase reporter assays were used to identify TWF1 as a direct target of miR-30c.RESULTS The expression of miR-30c was significantly decreased in pancreatic cancer tissues and associated with survival.Gain-and loss-of-function assays showed that miR-30c suppressed pancreatic cancer cell proliferation in vitro and in vivo.RT-qPCR,Western blot,and luciferase reporter assays showed that miR-30c directly targeted TWF1.The expression level of miR-30c was negatively correlated with TWF1 expression in pancreatic cancer tissues.Furthermore,the effects of ectopic miR-30c were rescued by TWF1 overexpression.CONCLUSION Our results identified the role of the miR-30c/TWF1 axis in pancreatic cancer progression and demonstrated that miR-30c might serve as a prognostic biomarker and therapeutic target for pancreatic cancer. 展开更多
关键词 PANCReATIC cancer microrna-30c PROLIFeRATION Twinfilin 1
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A14E,B16H,B25H,DesB30胰岛素含量测定方法开发及验证
9
作者 支艳艳 李晴晴 +1 位作者 李敬 文良柱 《生物化工》 2025年第4期126-129,133,共5页
目的:建立A14E,B16H,B25H,DesB30胰岛素含量的高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法:采用Kromasil 100-3.5-C_(4)色谱柱(4.6 mm×150 mm,3.5μm),流动相为10%乙腈+0.1%磷酸(A)-50%乙腈+0.1%磷酸(B),柱温为40℃,流速为1.0 mL/min,检测... 目的:建立A14E,B16H,B25H,DesB30胰岛素含量的高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法:采用Kromasil 100-3.5-C_(4)色谱柱(4.6 mm×150 mm,3.5μm),流动相为10%乙腈+0.1%磷酸(A)-50%乙腈+0.1%磷酸(B),柱温为40℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为214 nm,进样量为20μL,进行目标物含量测定及方法学验证。结果:该方法专属性好,在一定范围内线性关系良好(R^(2)=0.9994),平均回收率为100.43%,重复性的相对标准偏差为0.19%,中间精密度的相对标准偏差为0.14%,稳定性的相对标准偏差为0.57%。结论:建立的方法专属性强、准确度高、稳定性好,适用于A14E,B16H,B25H,DesB30胰岛素含量的测定。 展开更多
关键词 A14e B16H B25H DesB30胰岛素 含量 方法开发 验证
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哮喘发作患儿CD_(30)分子表达及与Th2源细胞因子和血浆免疫球蛋白E水平的相关性研究 被引量:5
10
作者 朱晓萍 杨锡强 +3 位作者 符州 俞海国 廉国利 李欣 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期110-112,共3页
目的 探讨CD3 0 在哮喘发病中的作用。方法 随机选择哮喘急性发作期患儿 2 7例 ,急性上呼吸道感染 (上感 )患儿 16例 ,对照组 19例。采用直接免疫荧光流式细胞术检测外周血单核细胞 (PBMC)中CD4+ 细胞表达CD3 0 百分率 ,采用ELISA法... 目的 探讨CD3 0 在哮喘发病中的作用。方法 随机选择哮喘急性发作期患儿 2 7例 ,急性上呼吸道感染 (上感 )患儿 16例 ,对照组 19例。采用直接免疫荧光流式细胞术检测外周血单核细胞 (PBMC)中CD4+ 细胞表达CD3 0 百分率 ,采用ELISA法检测培养上清IL 4、IL 13及血浆IgE水平。 结果  1.哮喘患儿PBMC中CD4+细胞表达CD3 0 百分率较对照组和上感组明显增高 ,差异有显著性 (P均 <0 .0 5) ;2 .哮喘患儿PBMC培养上清IL 4、IL 13和血浆总IgE水平均较对照组和上感组增高 ,上感组血浆IgE水平亦较对照组增高 ,差异均有显著性 ;3 .哮喘组CD4+ 细胞表达CD3 0 百分率与培养上清IL 4、IL 13和血浆IgE水平呈显著正相关。 结论 分泌IL 4和IL 13的Th2类细胞活化、增殖的克隆可能主要是由CD3 0 阳性细胞克隆组成 ,Th2细胞表面CD3 0 与CD3 0 L结合后导致Th2细胞分化成熟及释放Th2源细胞因子 ,IL 4和IL 13增加可诱导B细胞分泌较多的IgE。说明CD3 0 展开更多
关键词 哮喘 CD30 白细胞介素-4 白细胞介素-13 免疫球蛋白e
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用Reichardt's Dye研究碳酸酯溶剂极性的经验参数E_T(30) 被引量:4
11
作者 吴萌 吴锋 +1 位作者 栾和林 陈人杰 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第9期787-790,i001,共5页
使用2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料(Reichardt’sDye)研究锂离子电池中非水电解质溶剂碳酸酯的极性,并测量极性经验参数ET(30):碳酸乙烯酯为48.6,碳酸丙烯酯为46.1,2,3-碳酸丁烯酯为45.7,碳酸二甲酯为39.0,碳酸甲... 使用2,6-二苯基-4-(2,4,6-三苯基-1-吡啶鎓)苯氧内盐染料(Reichardt’sDye)研究锂离子电池中非水电解质溶剂碳酸酯的极性,并测量极性经验参数ET(30):碳酸乙烯酯为48.6,碳酸丙烯酯为46.1,2,3-碳酸丁烯酯为45.7,碳酸二甲酯为39.0,碳酸甲乙酯为37.3,碳酸二乙酯为37.0.LiClO4加入到碳酸酯溶剂中,显色剂受到离子的盐效应影响,表现为溶液体系的ET(30)值增加,极性增大.由于溶液中粒子间的相互作用不同,环碳酸酯与链状碳酸酯极性变化趋势不同.极性大的溶剂易形成Ar—O-…solvent…Li+结构,起到缓冲作用,抑制了显色剂的酚氧基与Li+直接作用. 展开更多
关键词 经验参数 溶剂极性 LI^+ 锂离子电池 碳酸乙烯酯 碳酸丙烯酯 碳酸二甲酯 碳酸甲乙酯 碳酸二乙酯 溶液体系 相互作用 变化趋势 环碳酸酯 缓冲作用 直接作用 显色剂 二苯基 三苯基 电解质 盐效应 酚氧基 丁烯 链状
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MiR-30e调控心肌肥厚的作用机制研究 被引量:5
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作者 李青 胡斌 +3 位作者 牛鑫 郭尚春 张长青 汪泱 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第20期3804-3806,3813,共4页
目的:预测并鉴定miR-30e的靶基因,阐明miR-30e调控心肌肥厚的分子机制。方法:分离新生大鼠心肌细胞,用苯肾上腺素(PE)处理心肌细胞构建心肌细胞肥大模型,48小时后通过定量PCR方法检测miR-30e的表达水平变化。利用生物信息学方法预测miR-... 目的:预测并鉴定miR-30e的靶基因,阐明miR-30e调控心肌肥厚的分子机制。方法:分离新生大鼠心肌细胞,用苯肾上腺素(PE)处理心肌细胞构建心肌细胞肥大模型,48小时后通过定量PCR方法检测miR-30e的表达水平变化。利用生物信息学方法预测miR-30e的靶基因,并通过荧光素酶报告基因实验和蛋白免疫印迹方法验证miR-30e的靶基因。结果:与对照组相比,PE处理48hr后,心肌肥厚标志基因nppa表达明显升高,肥大心肌细胞中miR-30e明显下调。生物信息学预测细胞骨架调控蛋白Twinfilin-1(Twf1)3'UTR有两个miR-30e的结合位点。过表达miR-30e能抑制含有Twf1 3'UTR的荧光素酶报告基因的表达,降低Twf1的蛋白表达水平。结论:Twf1为miR-30e的靶基因,miR-30e通过抑制Twf1的表达调控心肌肥厚。 展开更多
关键词 心肌肥厚 miR-30e Twf1
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妊娠糖尿病患者血清microRNA-873-5p、ZEB1与胰岛素抵抗、母婴结局的相关性研究 被引量:20
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作者 刘莹莹 赵一梅 +1 位作者 杨夫艳 李清桃 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期14-19,共6页
目的探究妊娠糖尿病(GDM)患者血清microRNA-873-5p(miR-873-5p)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)与胰岛素抵抗、母婴结局的相关性。方法选取连云港市第一人民医院2021年1月—2022年6月收治的137例GDM患者为研究组,另选取同期该院体检且一般资... 目的探究妊娠糖尿病(GDM)患者血清microRNA-873-5p(miR-873-5p)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)与胰岛素抵抗、母婴结局的相关性。方法选取连云港市第一人民医院2021年1月—2022年6月收治的137例GDM患者为研究组,另选取同期该院体检且一般资料与研究组患者相匹配的137例健康孕妇为对照组。实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测两组研究对象血清miR-873-5p、ZEB1的表达;Pearson法分析GDM患者血清miR-873-5p、ZEB1与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的相关性;多因素一般Logistic回归分析影响GDM患者母婴结局的相关因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-873-5p、ZEB1对GDM患者母婴不良结局的预测效能。结果研究组患者的空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)及HOMA-IR均高于对照组(P<0.05);研究组患者血清miR-873-5p、ZEB1水平均高于对照组(P<0.05);Pearson法分析结果显示,GDM患者血清miR-873-5p表达(r=0.754,P=0.000)、ZEB1表达(r=0.771,P=0.000)与HOMA-IR均呈正相关;母婴不良结局组的GDM患者血清miR-873-5p、ZEB1表达均高于良好结局组(P<0.05);FPG[OR=1.366(95%CI:1.065,1.752)]、FINS[OR=1.619(95%CI:1.214,2.160)]、HOMA-IR[OR=1.550(95%CI:1.146,2.096)]、miR-873-5p[OR=1.772(95%CI:1.250,2.512)]及ZEB1[OR=1.512(95%CI:1.050,2.177)]均为GDM患者发生母婴不良结局的危险因素(P<0.05);血清miR-873-5p、ZEB1及两者联合预测GDM患者发生母婴不良结局的敏感性分别为71.11%(95%CI:0.670,0.821)、66.67%(95%CI:0.620,0.715)和65.89%(95%CI:0.617,0.727),特异性分别为70.65%(95%CI:0.670,0.821)、85.87%(95%CI:0.775,0.897)和88.04%(95%CI:0.785,0.910),两者联合检测对GDM患者的母婴结局具有较高的特异性。结论GDM患者血清miR-873-5p、ZEB1表达与胰岛素抵抗密切相关,并且两者联合检测对GDM患者的母婴结局具有较好的预测效能。 展开更多
关键词 妊娠糖尿病 microrna-873-5p e盒结合锌指蛋白1 胰岛素抵抗 母婴结局
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MicroRNA-30a、microRNA-181a在原发免疫性血小板减少症中的表达及其临床意义 被引量:4
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作者 谭琳 谢瑜 +1 位作者 杨坚 黄颖 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第24期63-68,共6页
目的检测原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血单个核细胞(PBMC)microRNA-30a(miR-30a)、microRNA-181a(miR-181a)的表达,并分析其临床意义。方法选取2020年1月—2020年12月昆明医科大学第一附属医院收治的ITP患者48例作为ITP组,另取... 目的检测原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血单个核细胞(PBMC)microRNA-30a(miR-30a)、microRNA-181a(miR-181a)的表达,并分析其临床意义。方法选取2020年1月—2020年12月昆明医科大学第一附属医院收治的ITP患者48例作为ITP组,另取同期该院40例化疗后骨髓抑制血小板减少患者作为对照组,体检健康者45例作为健康组。检测3组血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV),采用实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMC中miR-30a、miR-181a的表达,分析miR-30a、miR-181a与血小板参数的相关性,以及对ITP的诊断价值。结果ITP组miR-30a、miR-181a相对表达量高于对照组和健康组(P<0.05);ITP组PLT、MPV低于对照组和健康组(P<0.05)。miR-30a与PLT、MPV呈负相关(r=-0.278和-0.247,P<0.05),与出血分级呈正相关(r=0.221,P<0.05);miR-181a与PLT、MPV呈负相关(r=-0.224和-0.301,P<0.05),与出血分级呈正相关(r=0.236,P<0.05)。miR-30a[O^R=1.876(95%CI:1.230,6.336)]和miR-181a[O^R=2.665(95%CI:1.365,8.558)]升高是发生ITP的独立危险因素(P<0.05)。以miR-30a、miR-181a及其回归系数建立临床模型的多元回归方程Logistic(P)=-4.115+1.305×MPV-1.258×miR-30a-1.664×miR-181a。该临床模型诊断ITP的标准误为0.055,AUC为0.889(95%CI:0.662,0.956),敏感性为75.25%(95%CI:1.123,2.084)、特异性为88.24%(95%CI:1.672,2.583)。结论miR-30a、miR-181a与ITP发生相关,通过miR-30a、miR-181a建立个体化临床模型可准确判断ITP的发生,且具有较高的临床实用价值。 展开更多
关键词 原发免疫性血小板减少症 microrna-30a microrna-181a 临床模型 预测
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截短的弓形虫P30基因在E.coli中的高效表达及纯化条件的探索 被引量:13
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作者 龚娅 陈晓光 杨培梁 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第2期14-18,共5页
目的 构建能在E .coli中高效表达的弓形虫主要表面抗原 (P30 )基因的重组表达质粒 ,并对纯化条件进行优化。方法 对已知的弓形虫P30基因序列进行部分取舍 ,用PCR技术从弓形虫ZS1株的基因组DNA中扩增出截短的P30基因片段 ,插入载体pET ... 目的 构建能在E .coli中高效表达的弓形虫主要表面抗原 (P30 )基因的重组表达质粒 ,并对纯化条件进行优化。方法 对已知的弓形虫P30基因序列进行部分取舍 ,用PCR技术从弓形虫ZS1株的基因组DNA中扩增出截短的P30基因片段 ,插入载体pET 30 (a)中 ,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达 ,包涵体经洗涤、变性、复性及不同程度的浓缩后 ,进行SDS PAGE及免疫印迹分析。结果 从弓形虫ZS1株基因组DNA中扩增出截短的P30基因片段 ,成功构建重组表达质粒 pET P30 ;SDS -PAGE显示蛋白表达带的分子量约为 31kD ,表达量占菌体总蛋白的 31.5 8% ,经 1M及 2M尿素洗涤后 ,其纯度分别达 6 3.42 %及 75 .74% ;免疫印迹显示 ,该纯化蛋白能被弓形虫病人阳性血清所识别 ,而且当浓缩至初始体积的 1/ 3~ 1/ 6时 ,纯化蛋白与DNA免疫鼠血清的反应最强。结论 成功构建重组质粒 pET P30 ,并以融合蛋白的形式进行了高效表达 ,经变性、复性后 ,该蛋白具有特异的免疫反应性 ,为弓形虫诊断试剂盒的研制打下基础。 展开更多
关键词 弓形虫 P30基因 蛋白表达 e.COLI 纯化
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MicroRNA-218下调肝细胞癌中的E2F2基因表达抑制细胞增殖的研究 被引量:7
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作者 王涛 马思聪 +6 位作者 戚星星 汤晓寅 崔丹 王智 池嘉昌 李萍 翟博 《肝脏》 2016年第3期179-182,共4页
目的探讨MicroRNA-218(miRNA-218)下调肝细胞癌中的E2F2基因表达,从而抑制细胞增殖的机制。方法从细胞库中取得人类肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97H、BEL-7402和正常肝细胞株L02。随后进行细胞培养和转移、反转录多聚酶链反应、免疫印... 目的探讨MicroRNA-218(miRNA-218)下调肝细胞癌中的E2F2基因表达,从而抑制细胞增殖的机制。方法从细胞库中取得人类肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97H、BEL-7402和正常肝细胞株L02。随后进行细胞培养和转移、反转录多聚酶链反应、免疫印迹分析、细胞增殖和集落形成试验、细胞周期分析和相应的统计学处理。结果 miR-218表达水平在癌细胞中下调。MTT生长曲线表明,当miR-218过度表达时(Huh7中的miR-218 P=0.001;在MHCC-97中的miR-218 P=0.013)细胞增殖能力明显降低。双荧光素酶实验证实,转染了miRNA-218模拟物的细胞的荧光素酶活性显著降低(P<0.01),荧光酶报告基因含有E2F2野生型的第3′非翻译区。这些结果表明E2F2是miR-218的直接作用对象。与阴性对照组相比,转染了miR-218模拟物的Huh7和MHCC-97细胞株中的E2F2的相对mRNA表达显著下调(P<0.05)。结论 miR-218通过直接作用于E2F2基因的第3′非翻译区调节E2F2的表达,从而抑制HCC细胞增殖。 展开更多
关键词 microrna-218 肝细胞癌 e2F2基因 细胞增殖
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miR-30e*在顺铂诱导的肾近端小管上皮细胞凋亡和线粒体损伤中的作用 被引量:3
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作者 杨玲云 郭燕 +5 位作者 倪佳佳 王荣 林加娟 丁桂霞 黄松明 张爱华 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1060-1065,共6页
目的:观察顺铂诱导肾近端小管细胞损伤过程中mi R-30e*的表达变化,并探讨其在顺铂诱导的小管细胞凋亡和线粒体损伤中的作用。方法:实时定量PCR(q RT-PCR)检测顺铂处理后的小管细胞mi R-30e*的表达水平;使用重组慢病毒载体感染细胞,稳定... 目的:观察顺铂诱导肾近端小管细胞损伤过程中mi R-30e*的表达变化,并探讨其在顺铂诱导的小管细胞凋亡和线粒体损伤中的作用。方法:实时定量PCR(q RT-PCR)检测顺铂处理后的小管细胞mi R-30e*的表达水平;使用重组慢病毒载体感染细胞,稳定高表达或低表达mi R-30e*;使用流式细胞仪检测细胞凋亡,观察mi R-30e*在顺铂诱导的小管细胞凋亡中的作用;q RT-PCR检测线粒体DNA(mt DNA)拷贝数,JC-1检测线粒体膜电位变化,探究mi R-30e*在顺铂引起的线粒体损伤中的作用。结果:1顺铂处理肾小管上皮细胞后,mi R-30e*的表达呈时间依赖性和剂量依赖性下调;2使用q RT-PCR检测重组慢病毒载体制备的稳定高表达或低表达mi R-30e*的小管细胞株中mi R-30e*的表达,过表达组增高了7倍,敲低表达组降低了近50%;3加入顺铂后,与对照组相比小管细胞凋亡增加,过表达mi R-30e*对凋亡起保护作用,敲低mi R-30e*则加重凋亡;4通过检测mt DNA的拷贝数发现顺铂诱导的线粒体损伤在48 h时有意义,迟于mi R-30e*表达的下调,线粒体膜电位检测JC-1提示过表达mi R-30e*对线粒体有保护作用。结论:顺铂处理小管细胞可降低其mi R-30e*的表达;体外过表达mi R-30e*对顺铂引起的小管细胞的凋亡和线粒体损伤具有保护作用,敲低mi R-30e*会加重顺铂诱导的肾近端小管细胞凋亡和线粒体损伤。 展开更多
关键词 miR-30e* 顺铂 肾近端小管上皮细胞 线粒体损伤
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免疫性血小板减少性紫癜患者单个核细胞中microRNA-30a表达增高及其意义 被引量:1
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作者 叶辛 张蕾 +6 位作者 石磊 谷明莉 张薇薇 张建荣 秦琴 钱宝华 邓安梅 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第24期3308-3309,3311,共3页
目的探讨microRNA-30a是否参与了免疫性血小板减少性紫癜(ITP)的发病机制。方法采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)技术检测38例ITP患者及35例健康者外周血单个核细胞(PBMC)中microRNA-30a和Lyn mRNA的相对表达量,并进行... 目的探讨microRNA-30a是否参与了免疫性血小板减少性紫癜(ITP)的发病机制。方法采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)技术检测38例ITP患者及35例健康者外周血单个核细胞(PBMC)中microRNA-30a和Lyn mRNA的相对表达量,并进行统计分析。结果 ITP患者外周血PBMC中microRNA-30a表达较健康对照组明显增高(P<0.01),且与血小板计数呈负相关(r2=0.42,P<0.05);ITP患者外周血PBMC中Lyn mRNA表达较健康对照组明显降低(P<0.01),且与microRNA-30a呈负相关(r2=0.33,P<0.01)。结论 microRNA-30a可能通过Lyn参与了ITP的发病机制。 展开更多
关键词 免疫性血小板减少性紫癜 microrna-30a 实时荧光定量逆转录PCR
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滋肾育胎丸联合盐酸利托君治疗先兆流产的效果及对凝血纤溶系统功能、microRNA-141、microRNA-518e表达的影响 被引量:8
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作者 徐珊 何荣 宋丽华 《临床医学研究与实践》 2023年第17期122-125,共4页
目的 探讨滋肾育胎丸联合盐酸利托君治疗先兆流产的效果。方法 选择2019年1月至2021年2月收治的100例先兆流产孕妇为研究对象,用随机数字表法将其分为对照组与观察组,各50例。对照组采用常规治疗+盐酸利托君,观察组在对照组基础上加滋... 目的 探讨滋肾育胎丸联合盐酸利托君治疗先兆流产的效果。方法 选择2019年1月至2021年2月收治的100例先兆流产孕妇为研究对象,用随机数字表法将其分为对照组与观察组,各50例。对照组采用常规治疗+盐酸利托君,观察组在对照组基础上加滋肾育胎丸治疗。比较两组的治疗效果。结果 观察组的治疗总有效率为94.00%,高于对照组的76.00%(P<0.05)。治疗后4周,观察组的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)长于对照组,组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)水平低于对照组(P<0.05)。治疗后4周,观察组的microRNA-141、microRNA-518e表达量低于对照组(P<0.05)。结论 滋肾育胎丸联合盐酸利托君治疗先兆流产的效果满意,也能改善凝血纤溶系统功能,调节microRNA-141、microRNA-518e表达,值得推广。 展开更多
关键词 滋肾育胎丸 盐酸利托君 先兆流产 凝血纤溶系统功能 microrna-141 microrna-518e
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MicroRNA-520e通过靶向抑制AEG-1发挥抗结直肠癌特性 被引量:1
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作者 吕飒美 张健 +2 位作者 吴友伟 刘倩 易默 《现代生物医学进展》 CAS 2022年第17期3229-3237,共9页
目的:探究MicroRNA-520e(miR-520e)在结直肠癌中的表达模式及其对细胞功能的影响。方法:采用qRT-PCR方法检测47例结直肠癌患者的癌组织和癌旁组织中miR-520e和星形胶质细胞上调基因-1(AEG-1)的mRNA表达水平。将SW480细胞分为对照组、miR... 目的:探究MicroRNA-520e(miR-520e)在结直肠癌中的表达模式及其对细胞功能的影响。方法:采用qRT-PCR方法检测47例结直肠癌患者的癌组织和癌旁组织中miR-520e和星形胶质细胞上调基因-1(AEG-1)的mRNA表达水平。将SW480细胞分为对照组、miR-520e-mimic组、NC-mimic组、miR-520e-inhibitor组、NC-inhibitor组、miR-520e-mimic+AEG-1-pcDNA3.1组和miR-520e-mimic+NC-pcDNA3.1组。通过MTT法检测SW480细胞的增殖,通过Annexin V-FITC/PI双染色试剂盒检测细胞凋亡,通过Transwell检测细胞迁移和侵袭,通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-520e和AEG-1的靶向关系,通过qRT-PCR或Western blotting检测AEG-1、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9、NF-κB p65(p65)和磷酸化的NF-κB p65(p-p65)的表达。结果:与癌旁组织相比,结直肠癌组织中miR-520e的表达水平降低(t=9.353,P<0.001)。与对照组相比,miR-520e-mimic组的OD值降低,细胞凋亡率升高,细胞迁移和侵袭数量降低,MMP2、MMP9和p-p65蛋白表达水平降低(P<0.001)。与对照组相比,miR-520e-inhibitor组的OD值升高,细胞凋亡率降低,细胞迁移和侵袭数量升高,MMP2、MMP9和p-p65蛋白表达水平升高。与NC-mimic组相比,miR-520e-inhibitor组的相对荧光素酶活性降低(P<0.001)。与对照组相比,miR-520e-mimic组的AEG-1的mRNA和蛋白表达水平均降低,而miR-520e-inhibitor组均升高(P<0.001)。与miR-520e-mimic+NC-pcDNA3.1组相比,miR-520e-mimic+AEG-1-pcDNA3.1组的AEG-1的mRNA和蛋白表达水平升高,OD值升高,细胞凋亡率降低,迁移和侵袭细胞数增加,MMP2和MMP9的蛋白表达水平及p65的磷酸化水平均增加(P<0.001)。结论:miR-520e在结直肠癌中表达降低,可通过靶向抑制AEG-1来发挥抗结直肠癌特性,其抗癌机制可能通过NF-κB信号通路介导。 展开更多
关键词 结直肠癌 microrna-520e 星形胶质细胞上调基因-1 侵袭 NF-ΚB信号通路
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