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MicroRNA-15b-3p对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移能力的影响 被引量:3
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作者 龚楚岚 黄建军 《中国临床医生杂志》 2017年第12期50-53,共4页
目的 研究MicroRNA-15b-3p对HCC1937三阴性乳腺癌细胞株增殖、迁移、凋亡能力的影响。方法 选用乳腺癌细胞株MCF-7、T47D、HCC1937及MDA-MB-468作为研究模型,实时荧光定量PCR方法分别检测4种细胞株中hsa-miR-15b-3p的表达情况。体外培... 目的 研究MicroRNA-15b-3p对HCC1937三阴性乳腺癌细胞株增殖、迁移、凋亡能力的影响。方法 选用乳腺癌细胞株MCF-7、T47D、HCC1937及MDA-MB-468作为研究模型,实时荧光定量PCR方法分别检测4种细胞株中hsa-miR-15b-3p的表达情况。体外培养HCC1937细胞,将上调后的MicroRNA-15b-3p转染至HCC1937细胞株中设为实验组,并设置阴性对照组,Brdu实验检测细胞乳腺癌细胞的增殖能力、Transwell小室检测细胞迁移能力、FACS细胞凋亡检测细胞凋亡情况。结果 hsa-miR-15b-3p在不同的乳腺癌细胞株中表达量均较正常乳腺细胞少,实验组细胞增殖能力强于阴性对照组(P<0.05),实验组乳腺癌细胞的迁移能力强于阴性对照组(P<0.05),但实验组与对照组细胞凋亡水平差异无显著性。结论 MicroRNA-15b-3p可增强三阴性乳腺癌细胞的增殖、迁移能力,有可能会促进乳腺癌的发生与发展。 展开更多
关键词 microrna-15b-3p 三阴性乳腺癌 增殖 迁移
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MicroRNA-122-5p、microRNA-33a-3p在胃癌患者中的表达及与临床病理特征和预后的关系 被引量:5
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作者 张伟 蔡振花 +5 位作者 周瑞轻 刘小慧 江麒麟 刘红波 董永杰 冯运章 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第13期17-22,共6页
目的探究胃癌患者血清microRNA-122-5p(miR-122-5p)、microRNA-133a-3p(miR-133a-3p)mRNA相对表达量与临床病理特征及预后的关系。方法采集胃癌患者血清标本94例,以相同例数的健康体检者的血清样本作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反... 目的探究胃癌患者血清microRNA-122-5p(miR-122-5p)、microRNA-133a-3p(miR-133a-3p)mRNA相对表达量与临床病理特征及预后的关系。方法采集胃癌患者血清标本94例,以相同例数的健康体检者的血清样本作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-qPCR)技术检测血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量,同时分析两者与胃癌患者临床病理特征的关系;绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析miR-122-5p、miR-133a-3p的表达与胃癌患者预后的关系。结果胃癌患者血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量低于健康体检者(P<0.05);有淋巴结转移、分化程度低、浸润至浆膜层的患者血清miR-122-5p mRNA相对表达量低于无淋巴结转移,中、高分化程度、浸润至黏膜下各层的患者(P<0.05);有淋巴结转移、低分化程度、浸润至浆膜层、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的患者血清miR-133a-3p mRNA相对表达量低于无淋巴结转移,中、高分化程度,浸润至黏膜下各层,TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期的患者(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线结果显示,miR-122-5p低表达胃癌患者5年生存率低于miR-122-5p高表达胃癌患者(P<0.05);miR-133a-3p低表达胃癌患者的5年生存率低于miR-133a-3p高表达胃癌患者(P<0.05)。结论胃癌患者血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量呈低表达,并且两者与胃癌的恶性程度和患者不良预后密切相关,血清miR-122-5p、miR-133a-3p可能成为胃癌患者预后预测的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 胃肿瘤 microrna-122-5p microrna-133a-3p 临床病理特征 预后
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MicroRNA-199a-3p对人骨肉瘤细胞凋亡的影响 被引量:3
3
作者 朱楠 张积森 +2 位作者 荆珏华 钱军 仇汪宝 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期159-163,共5页
目的:探讨microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:用合成的成熟miR-199a-3p序列模拟物(miR-199a-3p mimics)转染人骨肉瘤细胞(U2-OS),以阴性对照物序列(NC mimics)转染细胞作为阴性对照。转染后应用实时定量逆... 目的:探讨microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:用合成的成熟miR-199a-3p序列模拟物(miR-199a-3p mimics)转染人骨肉瘤细胞(U2-OS),以阴性对照物序列(NC mimics)转染细胞作为阴性对照。转染后应用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞miR-199a-3p的表达量,Western blot法检测各组细胞中髓样细胞白血病-1(MCL-1)蛋白的表达水平及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的剪切情况,利用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,并对实验结果进行统计学分析。结果:与对照组相比,转染miR-199a-3p mimics的实验组细胞中,miR-199a-3p的表达量明显升高,MCL-1蛋白的表达降低,PARP蛋白的剪切水平增加,细胞的凋亡率增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-199a-3p可以有效促进骨肉瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 骨肉瘤 凋亡 microrna-199a-3p 转染
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血清microRNA-21、microRNA-193a-3p表达与结直肠癌患者手术预后的关系 被引量:5
4
作者 张丽 凌晨 沈轶骊 《中国现代医学杂志》 CAS 2024年第5期1-6,共6页
目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访1... 目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访16个月,记录患者的预后生存结局,多因素逐步Logistic回归分析结直肠癌患者手术预后的影响因素,评估血清miR-21、miR-193a-3p对结直肠癌患者预后的预测效能。结果112例结直肠癌患者死亡22例,病死率为19.64%;生存90例,生存率为80.36%。死亡组术前血清miR-21 mRNA相对表达量、临床分期Ⅲ期占比、淋巴结转移率均高于生存组(P<0.05),血清miR-193a-3p m RNA相对表达量低于生存组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,临床分期Ⅲ期[OR=3.777(95%CI:1.399,10.194)]、淋巴结转移[OR=5.099(95%CI:1.715,15.156)]、miR-21表达升高[OR=4.889(95%CI:1.645,14.533)]、miR-193a-3p表达降低[OR=4.402(95%CI:1.481,13.084)]均是直肠癌患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特性曲线分析结果显示,血清miR-21、miR-193a-3p单一及联合预测结直肠癌预后的敏感性分别为69.04%(95%CI:0.487,0.813)、72.73%(95%CI:0.495,0.884)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为62.22%(95%CI:0.513,0.720)、68.89%(95%CI:0.581,0.780)、90.00%(95%CI:0.814,0.950),曲线下面积分别为0.782、0.731和0.901。结论结直肠癌患者术前miR-21、miR-193a-3p表达与术后预后密切相关,且在结直肠癌患者的预后结局中表现出良好的预测效能。 展开更多
关键词 结直肠癌 手术 预后 microrna-21 microrna-193a-3p
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miR-203a-3p通过ALOX15途径抑制胃癌细胞铁死亡 被引量:7
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作者 唐凤英 董汾 +3 位作者 曾玉婷 高二鹏 张锋利 闫娣 《中南医学科学杂志》 CAS 2022年第6期796-800,共5页
目的探讨miR-203a-3p通过ALOX15途径调控胃癌细胞铁死亡的机制。方法检测胃癌组织和癌旁正常组织的铁死亡指标——活性氧诱导脂质过氧化(lipid-ROS)水平。对胃癌组织miR-203a-3p与lipid-ROS进行Pearson相关性分析。在胃正常细胞和胃癌... 目的探讨miR-203a-3p通过ALOX15途径调控胃癌细胞铁死亡的机制。方法检测胃癌组织和癌旁正常组织的铁死亡指标——活性氧诱导脂质过氧化(lipid-ROS)水平。对胃癌组织miR-203a-3p与lipid-ROS进行Pearson相关性分析。在胃正常细胞和胃癌细胞株中过表达或敲低相关分子后,检测其lipid-ROS和线粒体膜电位(MMP)。结果miR-203a-3p水平胃癌组织高于癌旁正常组织,胃癌细胞株高于胃正常细胞;lipid-ROS水平胃癌组织低于癌旁正常组织,胃癌细胞株低于胃正常细胞(P<0.05)。在胃癌组织中,miR-203a-3p与lipid-ROS呈负相关(P<0.05)。胃癌组织ALOX15 mRNA低于癌旁正常组织(P<0.05)。过表达miR-203a-3p后,胃正常细胞lipid-ROS、胃癌细胞MMP、所有细胞ALOX15 mRNA和蛋白水平降低;敲低miR-203a-3p后,胃癌细胞lipid-ROS、所有细胞ALOX15 mRNA和蛋白升高;敲低ALOX15时胃正常细胞lipid-ROS和胃癌细胞MMP降低,过表达ALOX15后胃癌细胞lipid-ROS升高(P<0.05)。结论胃癌细胞高表达的miR-203a-3p可靶向ALOX15,减少ALOX15表达,抑制其铁死亡发生。 展开更多
关键词 miR-203a-3p ALOX15 胃癌细胞 铁死亡
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MicroRNA-200a-3p通过靶点蛋白ZEB2和e钙粘蛋白对膀胱癌细胞的生物学影响 被引量:1
6
作者 卢毅 俞凌 +3 位作者 俞鹏奎 林建喜 张晓 孟宏舟 《浙江创伤外科》 2021年第6期1013-1016,共4页
目的分析miR-200a-3p在膀胱癌中的生物学作用。方法选取于2018年3月至2020年3月在本院行膀胱部分切除术或根治性膀胱切除术的9例膀胱癌患者,采用qPCR检测膀胱癌组织中miR-200a-3p水平、组织学分析肿瘤形态、WB法测定蛋白表达情况。结果m... 目的分析miR-200a-3p在膀胱癌中的生物学作用。方法选取于2018年3月至2020年3月在本院行膀胱部分切除术或根治性膀胱切除术的9例膀胱癌患者,采用qPCR检测膀胱癌组织中miR-200a-3p水平、组织学分析肿瘤形态、WB法测定蛋白表达情况。结果miR-200a-3p在膀胱癌组织中显著下调。组织学分析结果显示膀胱癌黏膜坏死与肉芽组织增生、多核巨噬细胞聚集和浸润性尿路上皮癌有关。蛋白表达结果显示E-钙粘蛋白显著上调、ZEB2蛋白显著下调。推测miR-200a-3p可与E-cadherin和ZEB2相关调控膀胱癌的侵袭和迁移。结论miR-200a-3p可以作为靶向ZEB2的生物标志物,负调控ZEB2的表达,这些发现将有助于寻找新的膀胱癌治疗靶点。 展开更多
关键词 microrna-200a-3p E-钙粘蛋白 ZEB2 膀胱癌
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MicroRNA-34a-5p在肝纤维化中的表达及作用 被引量:2
7
作者 朱海东 胡东坡 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2019年第5期859-865,共7页
目的:探讨大鼠肝纤维化组织及活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平及其在肝纤维化中的作用。方法:建立肝纤维化大鼠模型,转化生长因子-β1(TGF-β1)活化肝星状细胞,采用HE染色观察肝脏组织形态学变化,采用RT-PCR测定大鼠肝组织和活化... 目的:探讨大鼠肝纤维化组织及活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平及其在肝纤维化中的作用。方法:建立肝纤维化大鼠模型,转化生长因子-β1(TGF-β1)活化肝星状细胞,采用HE染色观察肝脏组织形态学变化,采用RT-PCR测定大鼠肝组织和活化肝星状细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和MicroRNA-34a-5p水平。将肝纤维化模型大鼠根据随机数字表法分为空白对照组、阴性转染对照组和MicroRNA-34a-5p组;将TGF-β1活化的HSC-T6细胞分为空白对照组、阴性转染对照组和MicroRNA-34a-5p组。采用RT-PCR和蛋白质印迹法测定3组大鼠肝组织和肝星状细胞中α-SMA、I型胶原蛋白(collagenI)、沉默调节蛋白1(SIRT1)、分泌型糖蛋白-3α(Wnt-3α)、分泌型糖蛋白-5α(Wnt-5α)和β-波链蛋白(β-catenin)的水平。结果:与对照组比较,肝纤维化组大鼠肝组织和活化肝星状细胞中α-SMA水平升高(P<0.05),MicroRNA-34a-5p水平降低(P<0.05)。与空白对照组和阴性转染对照组比较,MicroRNA-34a-5p转染组大鼠肝组织和活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平升高(P<0.05),而α-SMA、collagenI、SIRT1、Wnt-3α、Wnt-5α和β-catenin的mRNA和蛋白水平均下降(P<0.05),空白对照组和阴性转染对照组间大鼠肝组织和活化肝星状细胞中各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肝纤维化组织及活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平降低,可能通过靶向SIRT1而抑制Wnt/β-catenin信号通路,从而发挥抗肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 肝纤维化 肝星状细胞 microrna-34a-5p Ⅰ型胶原蛋白 沉默调节蛋白1 分泌型糖蛋白-3α 分泌型糖蛋白-5α β-波链蛋白 大鼠
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微小RNA-15a-3p靶向调控烯醇化酶2对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响
8
作者 廖旭慧 张小燕 卢洪胜 《中国妇幼保健》 CAS 2023年第15期2855-2860,共6页
目的 探讨微小RNA-15a-3p(miR-15a-3p)靶向调控烯醇化酶2(ENO2)对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响。方法 采用qRT-PCR检测人卵巢癌组织和细胞系中miR-15a-3p表达,对卵巢癌细胞SKOV3进行干预,过表达miR-15a-3p或同时过表达miR-15a-3p和ENO2,... 目的 探讨微小RNA-15a-3p(miR-15a-3p)靶向调控烯醇化酶2(ENO2)对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响。方法 采用qRT-PCR检测人卵巢癌组织和细胞系中miR-15a-3p表达,对卵巢癌细胞SKOV3进行干预,过表达miR-15a-3p或同时过表达miR-15a-3p和ENO2,分别检测SKOV3细胞增殖、凋亡,Western Blot检测ENO2、CyclinD1、Bax及Bcl-2蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验验证miR-15a-3p和ENO2的靶向关系。结果 miR-15a-3p在卵巢癌组织表达水平(0.47±0.06)显著低于癌旁组织(1.05±0.12),差异有统计学意义(t=25.208,P<0.05)。miR-15a-3p在卵巢癌细胞系HO-8910、SKOV3、A2780及OVCAR3中表达水平分别为(0.75±0.07)、(0.25±0.04)、(0.58±0.07)及(0.47±0.05),显著低于HOSEpiC细胞(1.01±0.13),差异有统计学意义(F=27.326,P<0.05)。选择SKOV3细胞进行后续实验,与miR-NC组比较,miR-15a-3p mimics组细胞凋亡率[(18.56±3.25)%]高于miR-NC组[(2.98±0.84)%],差异有统计学意义(t=28.385,P<0.05);细胞OD值[(0.35±0.04)]和EdU阳性细胞率[(13.35±2.73)%]低于miR-NC组[(0.70±0.08),(35.34±5.56)%],差异均有统计学意义(t=26.335、29.374,均P<0.05);ENO2、CyclinD1及Bcl-2蛋白表达水平[(0.35±0.04)、(0.31±0.04)及(0.44±0.06)]低于miR-NC组[(0.87±0.07)、(1.05±0.13)及(1.23±0.16)],Bax蛋白表达水平[(1.15±0.12)]高于miR-NC组[(0.27±0.03)],差异均有统计学意义(t=25.364、25.735、26.256及25.273,均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果证实,miR-15a-3p可靶向调控ENO2表达,过表达ENO2可逆转过表达miR-15a-3p对SKOV3细胞增殖的抑制作用并降低细胞凋亡(P<0.05)。结论 miR-15a-3p在卵巢癌组织和细胞中低表达,过表达miR-15a-3p可靶向抑制ENO2表达,抑制卵巢癌细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 微小RNa-15a-3p 烯醇化酶2 卵巢癌 增殖 凋亡
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MicroRNA-450a-3p通过抑制Bub1基因的表达调控小鼠细胞增殖和胚胎发育
9
作者 刘晨 杨丹丹 +5 位作者 蒋凤兵 白慧丽 李宝林 罗敏 湛晓琴 施琼 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1651-1657,共7页
目的:探讨microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)对小鼠细胞增殖和胚胎发育的调控是否通过抑制Bub1基因的表达实现。方法:用萤光素酶报告基因实验检测miR-450a-3p能否特异性结合于Bub1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);用Western b... 目的:探讨microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)对小鼠细胞增殖和胚胎发育的调控是否通过抑制Bub1基因的表达实现。方法:用萤光素酶报告基因实验检测miR-450a-3p能否特异性结合于Bub1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);用Western blotting和实时荧光定量RT-PCR检测miR-450a-3p对Bub1蛋白和mRNA表达;分别通过MTT、Hoechst染色、流式细胞术等分析miR-450a-3p对小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)增殖、凋亡和细胞周期等生物学功能的调控;利用染色体核型分析技术检测miR-450a-3p对MEFs染色体数目的影响。结果:miR-450a-3p能与靶基因Bub1的3’-UTR结合,在翻译水平抑制MEFs中Bub1的表达,然而其转录水平的表达却不受影响。miR-450a-3p通过下调靶基因Bub1的表达,抑制MEFs的增殖,促进细胞的凋亡;而且miR-450a-3p还能使大多数细胞停滞在G1/G0期,使细胞分裂受阻,导致细胞染色体数目异常。结论:miR-450a-3p能够调控靶基因Bub1的表达,抑制MEFs增殖,并最终影响小鼠胚胎的发育。 展开更多
关键词 microrna-450a-3p 小鼠胚胎成纤维细胞 基因 Bub1 胚胎
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慢病毒载体对MDA-MB-231细胞中microRNA-18a-3P表达的影响
10
作者 王立斌 王丹妮 +5 位作者 马荣 张旭 田进海 李晓菡 冯惠敏 马芳 《中国现代医学杂志》 CAS 2020年第2期14-21,共8页
目的构建人microRNA-18a-3P(miR-18a-3P)过表达及干扰慢病毒载体,研究病毒感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的步骤和方法。方法 PCR技术扩增相应目的基因片段并进行酶切,回收后与目的基因连接,产物转化细菌感受态细胞,对阳性克隆测序行对... 目的构建人microRNA-18a-3P(miR-18a-3P)过表达及干扰慢病毒载体,研究病毒感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的步骤和方法。方法 PCR技术扩增相应目的基因片段并进行酶切,回收后与目的基因连接,产物转化细菌感受态细胞,对阳性克隆测序行对比分析,构建miR-18a-3P过表达及干扰慢病毒载体,荧光法测定病毒滴定;倒置荧光显微镜观察人乳腺癌细胞MDA-MB-231转染及筛选过程的转染效率,筛选最佳MOI值;qRT-PCR检测慢病毒转染后MDA-MB-231细胞内miR-18a-3P的表达。结果测序分析证实重组慢病毒构建正确;过表达及干扰慢病毒滴度分别为2×10~9和1×10~9 TU/ml;加Polybrene较未加Polybrene转染效率升高,当感染复数为10 TU/ml,Polybrene浓度为1μg/ml时,转染效率最佳;miR-18a-3P转染组过表达miR-18a-3P的相对表达量较空白对照组、阴性对照组高(P<0.05),miR-18a-3P转染组干扰表达miR-18a-3P的相对表达量较空白对照组、阴性对照组低(P<0.05)。结论成功构建了miR-18a-3P过表达及干扰慢病毒表达载体,对人乳腺癌细胞MDA-MB-231进行转染和筛选后,可快速高效率获得所需目的细胞。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 microrna-18a-3p/微RNAs 慢病毒感染
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LncRNA TTTY15通过调控miR-520a-3p表达对高糖诱导大鼠心肌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
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作者 郝翠翠 张青 《现代医学》 2021年第1期46-52,共7页
目的:探讨长链非编码RNA TTTY15(LncRNA TTTY15)对高糖诱导大鼠心肌细胞H9c2增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:高糖诱导H9c2细胞后,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测H9c2细胞中TTTY15和miR-520a-3p水平,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增... 目的:探讨长链非编码RNA TTTY15(LncRNA TTTY15)对高糖诱导大鼠心肌细胞H9c2增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:高糖诱导H9c2细胞后,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测H9c2细胞中TTTY15和miR-520a-3p水平,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白印迹(Western blotting)法检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和活化的半胱天冬酶-3(C-caspase-3)蛋白水平。转染TTTY15小干扰RNA或miR-520a-3p模拟物至H9c2细胞,用上述相同方法观察下调TTTY15或上调miR-520a-3p对高糖诱导的H9c2细胞存活率、凋亡率以及cyclin D1和C-caspase-3蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证TTTY15与miR-520a-3p调控关系。结果:高糖促进了H9c2细胞中TTTY15表达、细胞凋亡率及C-caspase-3蛋白表达(P <0.05),降低了H9c2细胞存活率、miR-520a-3p表达及cyclin D1蛋白表达(P <0.05)。下调TTTY15或上调miR-520a-3p可提高高糖诱导的H9c2细胞存活率及cyclin D1蛋白水平(P <0.05),降低细胞凋亡率和C-caspase-3蛋白水平(P <0.05)。TTTY15在H9c2细胞中靶向负调控miR-520a-3p表达。下调miR-520a-3p可逆转下调TTTY15对H9c2细胞存活率、凋亡率及cyclin D1和C-caspase-3蛋白表达的影响。结论:TTTY15可能通过下调细胞中miR-520a-3p表达抑制高糖诱导的H9c2细胞增殖并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 TTTY15 miR-520a-3p 糖尿病 心肌细胞 增殖 凋亡 大鼠
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MicroRNA-199a-3p在肾癌中的表达及作用 被引量:8
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作者 陶良俊 秦超 +7 位作者 曹强 钱健 蔡宏宙 朱建 李普 邵鹏飞 孟小鑫 殷长军 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2012年第4期229-232,241,共5页
目的检测microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)在肾癌细胞株和组织中的表达情况并探究miR-199a-3p在肾癌细胞中的作用。方法利用实时定量RT-PCR检测miR-199a-3p在肾癌细胞和组织中的表达水平;利用miR-199a-3p模拟物转染肾癌细胞786-0上调miR-1... 目的检测microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)在肾癌细胞株和组织中的表达情况并探究miR-199a-3p在肾癌细胞中的作用。方法利用实时定量RT-PCR检测miR-199a-3p在肾癌细胞和组织中的表达水平;利用miR-199a-3p模拟物转染肾癌细胞786-0上调miR-199a-3p后,通过CCK-8、克隆形成、Transwell以及细胞周期检测来探究其在肾癌细胞中的作用。结果 miR-199a-3p在肾癌细胞中明显低表达,在78%(14/18)的肾癌组织中亦明显低表达;上调miR-199a-3p可显著抑制肾癌细胞的增殖、存活和侵袭并能诱导细胞周期G1期阻滞。结论我们的研究显示在肾癌中miR-199a-3p明显低表达并参与肾癌的发生、发展,这表明miR-199a-3p具有作为肾癌诊断和治疗靶点的潜能。 展开更多
关键词 microrna-199a-3p 抑癌基因 肾细胞癌
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胃癌组织中microRNA-148a-3p的表达及临床意义 被引量:3
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作者 张波 徐皓 池堂春 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期86-89,93,共5页
目的探究胃癌组织中microRNA-148a-3p的表达水平及其临床意义。方法随机选取行手术治疗的胃癌患者60例,采用qRT-PCR检测胃癌与癌旁组织中miR-148a-3p的表达水平,采用免疫组化检测胃癌组织中LC3与Beclin 1的表达,统计分析胃癌组织中miR-1... 目的探究胃癌组织中microRNA-148a-3p的表达水平及其临床意义。方法随机选取行手术治疗的胃癌患者60例,采用qRT-PCR检测胃癌与癌旁组织中miR-148a-3p的表达水平,采用免疫组化检测胃癌组织中LC3与Beclin 1的表达,统计分析胃癌组织中miR-148a-3p表达水平与临床病理特征及LC3、Beclin 1表达的相关性。采用脂质体法在SGC-7901细胞中转染miR-148a-3p并使用免疫荧光实验检测LC3的定位,Western blot检测LC3及Beclin1的表达量。结果胃癌组织中miR-148a-3p表达水平显著低于癌旁组织,并且与胃癌肿瘤大小、肿瘤淋巴结转移情况、临床分期具有相关性,且与LC3及Beclin 1的表达呈负相关。过表达miR-148a-3p后SGC-7901细胞中LC3荧光斑点的数量显著减少,并且LC3Ⅱ与LC3Ⅰ表达量的比值及Beclin1表达量均显著降低。结论 miR-148a-3p的低表达可能参与了胃癌的恶性演进,并且miR-148a-3p可能通过抑制细胞自噬发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 胃细胞癌 microrna-148a-3p 自噬 BECLIN1
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MicroRNA-29a-3p调控转化生长因子β1诱导的人角膜基质细胞的肌成纤维细胞转化 被引量:5
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作者 李凌菡 郝朋 李轩 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期44-48,共5页
目的探讨MicroRNA-29a-3p对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人角膜基质细胞肌成纤维细胞转化的影响。方法本实验选用培养至2~4代的人角膜基质细胞,分别设置对照组、TGF-β1组、miR-29a过表达对照+TGF-β1组、miR-29a过表达+TGF-β1组、miR... 目的探讨MicroRNA-29a-3p对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人角膜基质细胞肌成纤维细胞转化的影响。方法本实验选用培养至2~4代的人角膜基质细胞,分别设置对照组、TGF-β1组、miR-29a过表达对照+TGF-β1组、miR-29a过表达+TGF-β1组、miR-29a抑制表达对照+TGF-β1组及miR-29a抑制表达+TGF-β1组。采用TGF-β1体外诱导的人角膜基质细胞向肌成纤维细胞转化,细胞饥饿过夜之后,在无血清的条件下转染miR-29a 24 h;然后以浓度5 ng/mL加入TGF-β1,无血清培养48 h。采用CCK-8法检测细胞活力,采用细胞总RNA提取法提取细胞总RNA,逆转录成cDNA后采用实时荧光定量PCR法检测目的相应指标的表达情况,Western Blot法检测相应蛋白的表达。结果人角膜基质细胞呈多角形,树突状,排列规则。按实验设计处理完细胞之后,各组细胞活性差异无统计学意义(P>0.05),转染效果良好。与对照组比较,TGF-β1组平滑肌肌动蛋白α(αSMA)的mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);与miR-29a过表达对照+TGF-β1组比较,miR-29a过表达+TGF-β1组αSMA mRNA表达有明显下降,差异有统计学意义(P=0.001);与miR-29a抑制表达对照+TGF-β1组比较,miR-29a抑制表达+TGF-β1组αSMAmRNA表达有明显上升,差异有统计学意义(P=0.019)。同时,αSMA在蛋白水平的表达结果可得,对照组与TGF-β1组相比,αSMA的相对表达量显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);miR-29a过表达+TGF-β1组与miR-29a过表达对照+TGF-β1组相比αSMA的相对表达量明显降低,差异有统计学意义(P=0.007);而该指标在miR-29a抑制表达+TGF-β1组与miR-29a抑制表达对照+TGF-β1组的比较中增高且差异有统计学意义(P=0.034)。结论MicroRNA-29a对TGF-β1诱导的人角膜基质细胞的肌成纤维细胞转化作用是负性的。 展开更多
关键词 角膜基质细胞 microrna-29a-3p 转化生长因子Β1 肌成纤维细胞转化 平滑肌肌动蛋白α
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微小RNA-15a-3p通过肿瘤蛋白D52增强Hela细胞放射敏感性的实验研究
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作者 张欣萍 《中国校医》 2023年第3期215-219,共5页
目的研究微小RNA-15a-3p(microRNA-15a-3p,miR-15a-3p)的表达与Hela细胞放射敏感性的关系,探讨肿瘤蛋白D52(Tumor protein D52,TPD52)参与调节的机制。方法设立空白对照组、放射组、miR-15a-3p mimics组和IR+miR-15a-3p mimics组。各组... 目的研究微小RNA-15a-3p(microRNA-15a-3p,miR-15a-3p)的表达与Hela细胞放射敏感性的关系,探讨肿瘤蛋白D52(Tumor protein D52,TPD52)参与调节的机制。方法设立空白对照组、放射组、miR-15a-3p mimics组和IR+miR-15a-3p mimics组。各组细胞培养结束后,采用CCK-8试剂盒测定细胞活力,结晶紫染色测定单克隆形成数目,FACScan流式细胞仪检测凋亡,Transwell室测定细胞侵袭水平,RT-PCR法及蛋白印迹法测定miR-15a-3p、TPD52 mRNA和蛋白水平。结果与宫颈癌Hela细胞组比较,IR组、miR-15a-3p mimics组、IR+miR-15a-3p mimics组OD值、存活率、单克隆形成数目、穿膜数、TPD52 mRNA和蛋白降低(t=10.965、8.321、9.654、10.215、14.654、12.698、17.632、10.214、9.874、13.658、17.987、20.321、23.214、14.474、16.214、18.695、17.459、19.510,P均<0.05)。与IR组、miR-15a-3p mimics组比较,IR+miR-15a-3p mimics组OD值、存活率、单克隆形成数目、穿膜数、TPD52 mRNA和蛋白降低(t=10.321、6.657、9.547、10.214、14.658、9.654、8.954、9.547、14.514、10.369、18.654、16.632,P均<0.05)。与宫颈癌Hela细胞组比较,IR组、miR-15a-3p mimics组、IR+miR-15a-3p mimics组凋亡率、miR-15a-3p表达均升高(t=23.321、18.624、9.995、11.214、16.654、9.965,P均<0.05),与IR组、miR-15a-3p mimics组比较,IR+miR-15a-3p mimics组凋亡率、miR-15a-3p表达均升高(t=20.369、17.548、11.548、12.258,P均<0.05)。结论miR-15a-3p过表达能提高人宫颈癌细胞放射敏感性,抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭,促进其凋亡;其机制与miR-15a-3p靶向抑制TPD52表达有关。 展开更多
关键词 miR-15a-3p 肿瘤蛋白D52 宫颈癌 放射敏感性 HELA细胞
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参斛汤对前列腺癌患者术后病灶及血清microRNA-301a-3p水平的影响 被引量:3
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作者 杨静 李晓天 陈品金 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第22期39-43,共5页
目的探讨参斛汤对前列腺癌术后病灶进展及血清microRNA-301a-3p(miRNA-301a-3p)水平的影响。方法选取2020年2月—2021年3月就诊于郑州大学第一附属医院的95例前列腺癌患者作为研究对象,按随机数表法分为对照组(47例)和研究组(48例)。患... 目的探讨参斛汤对前列腺癌术后病灶进展及血清microRNA-301a-3p(miRNA-301a-3p)水平的影响。方法选取2020年2月—2021年3月就诊于郑州大学第一附属医院的95例前列腺癌患者作为研究对象,按随机数表法分为对照组(47例)和研究组(48例)。患者均接受经尿道前列腺癌根治术,对照组术后接受常规化学治疗,研究组在对照组基础上增加参斛汤辅助治疗。比较两组患者术后病灶进展情况、血清学指标[前列腺特异性抗原(PSA)、游离前列腺特异性抗原(f-PSA)、游离前列腺特异抗原百分率(FPSAR)、血清肿瘤相关物质(TAM)]、免疫功能、不良反应等。结果研究组局部病灶进展时间、远处转移时间较对照组长(P<0.05)。两组患者治疗前血清PSA、FPSAR、TAM、miR-301a-3p表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),研究组FPSAR高于对照组(P<0.05),PSA、TAM、miR-301a-3p低于对照组(P<0.05)。两组患者治疗前CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),研究组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)较对照组高(P<0.05),CD8^(+)较对照组低(P<0.05)。两组患者不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论参斛汤用于前列腺癌术后辅助治疗可有效抑制病灶进展,提高患者免疫功能,抑制miR-301a-3p表达,但在减少术后化学治疗不良反应方面未见明显优势。 展开更多
关键词 前列腺癌 化学治疗 病灶进展 microrna-301a-3p
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microRNA-203a-3p在原发性肝癌患者外周血中的临床研究 被引量:3
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作者 黄伟 陈兆瑛 +2 位作者 孟樱 张晓晶 刘雁 《中国卫生检验杂志》 CAS 2021年第14期1751-1753,共3页
目的对不同分期原发性肝癌患者外周血中microRNA-203a-3p表达进行荧光定量PCR检测,研究microRNA-203a-3p在原发性肝癌患者中的临床意义。方法收集56例原发性肝癌患者外周血,另取56例同期健康者作为对照组并留取血样。荧光定量PCR实验测... 目的对不同分期原发性肝癌患者外周血中microRNA-203a-3p表达进行荧光定量PCR检测,研究microRNA-203a-3p在原发性肝癌患者中的临床意义。方法收集56例原发性肝癌患者外周血,另取56例同期健康者作为对照组并留取血样。荧光定量PCR实验测定血样microRNA-203a-3p表达水平。与健康者相比,统计microRNA-203a-3p在不同分期原发性肝癌患者的表达水平,并分析与AFP数值的相关性以及15例肝癌患者治疗前后microRNA-203a-3p的差异。结果与健康者相比,56例原发性肝癌患者外周血中microRNA-203a-3p显著降低,和原发性肝癌分期相关,与AFP水平显著负相关,且15例原发性肝癌手术患者治疗1个月后microRNA-203a-3p表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MicroRNA-203a-3p在原发性肝癌患者外周血中显著降低并和临床进程显著相关。 展开更多
关键词 microrna-203a-3p 原发性肝癌 分期
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LncRNA MEG3及miR-15a-5p在慢性阻塞性肺疾病中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 魏小婉 鲁美霞 +2 位作者 高佳男 李晓博 楚荷莹 《临床肺科杂志》 2022年第4期505-511,共7页
目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血中长链非编码RNA MEG3及微小RNA-15a-5p的表达水平及临床意义。方法用qRT-PCR的方法检测43例慢阻肺患者,其中急性加重组28例,稳定期组15例,以及26例对照组患者外周静脉血中LncRNA MEG3和miR-15... 目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血中长链非编码RNA MEG3及微小RNA-15a-5p的表达水平及临床意义。方法用qRT-PCR的方法检测43例慢阻肺患者,其中急性加重组28例,稳定期组15例,以及26例对照组患者外周静脉血中LncRNA MEG3和miR-15a-5p的表达水平。结果①慢阻肺患者LncRNA MEG3表达水平高于对照组,并且急性加重组高于稳定期组,miR-15a-5p表达水平显著低于对照组。②慢阻肺患者LncRNA MEG3的表达与miR-15a-5p成负相关(r=-0.396,P=0.02),与CAT评分及C反应蛋白成正相关(r分别为0.478,0.508,P分别为0.002,0.003)。③分别应用LncRNA MEG3及miR-15a-5p识别慢阻肺的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.661、0.66,敏感度分别为76.92%、50%,特异度分别为60%、77.27%。应用LncRNA MEG3联合miR-15a-5p识别慢阻肺的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.721,敏感度为81.82%,特异度为55%。进一步通过多因素Logistic回归分析显示miR-15a-5p为慢阻肺发生的保护性因素(OR=0.029,95%CI 1.140~9.718,P=0.002)。结论LncRNA MEG3在慢阻肺患者中高表达,miR-15a-5p低表达,并且与疾病的严重程度相关,LncRNA MEG3联合miR-15a-5p对慢阻肺有较好的诊断价值,我们猜测LncRNA MEG3可能通过负向调节miR-15a-5p介导慢性阻塞性肺疾病的发展。 展开更多
关键词 LncRNA MEG3 miR-15a-5p 慢性阻塞性肺疾病(COpD)
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普鲁卡因通过miR-15a-5p/PI3K-AKT3途径调控乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制 被引量:9
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作者 马宝丰 李铁成 徐芳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期610-614,共5页
目的探讨普鲁卡因对乳腺癌细胞MCF-7增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法以不同浓度(0.5、1.0、2.5、5.0、10.0 mmol/L)普鲁卡因处理MCF-7细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;5.0 mmol/L普鲁卡因处理MCF-7细胞48 h后,Transwell法检... 目的探讨普鲁卡因对乳腺癌细胞MCF-7增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法以不同浓度(0.5、1.0、2.5、5.0、10.0 mmol/L)普鲁卡因处理MCF-7细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;5.0 mmol/L普鲁卡因处理MCF-7细胞48 h后,Transwell法检测迁移和侵袭,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-15a-5p的表达。转染miR-15a-5p mimic至MCF-7细胞,检测细胞增殖、迁移和侵袭。靶基因预测软件预测miR-15a-5p和AKT3靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验检测二者靶向关系。转染miR-15a-5p inhibitor至MCF-7细胞,并用5.0 mmol/L普鲁卡因处理48 h,检测细胞增殖、迁移和侵袭,Western印迹检测蛋白激酶B(AKT)3的表达。结果与Con组相比,普鲁卡因能明显抑制MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.001),促进细胞中miR-15a-5p的表达(P<0.01)。过表达miR-15a-5p可抑制MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.001,P<0.01,P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-15a-5p和AKT3的靶向结合有关。抑制miR-15a-5p表达减弱了普鲁卡因对MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭及AKT3表达的抑制作用(P<0.05)。结论普鲁卡因能够抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与调控miR-15a-5p/磷脂酰肌激-3-激酶(PI3K)-AKT3途径有关。 展开更多
关键词 普鲁卡因 乳腺癌 miR-15a-5p/pI3K-AKT3 增殖 迁移 侵袭
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MicroRNA-101a-3p mimic ameliorates spinal cord ischemia/reperfusion injury 被引量:4
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作者 Zai-Li Zhang Dan Wang Feng-Shou Chen 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2022年第9期2022-2028,共7页
miR-101a-3p is expressed in a variety of organs and tissues and plays a regulatory role in many diseases,but its role in spinal cord ischemia/reperfusion injury remains unclear.In this study,we established a rat model... miR-101a-3p is expressed in a variety of organs and tissues and plays a regulatory role in many diseases,but its role in spinal cord ischemia/reperfusion injury remains unclear.In this study,we established a rat model of spinal cord ischemia/reperfusion injury by clamping the aortic arch for 14 minutes followed by reperfusion for 24 hours.Results showed that miR-101a-3p expression in L4-L6 spinal cord was greatly decreased,whereas MYCN expression was greatly increased.Dual-luciferase reporter assay results showed that miR-101a-3p targeted MYCN.MYCN immunoreactivity,which was primarily colocalized with neurons in L4-L6 spinal tissue,greatly increased after spinal cord ischemia/reperfusion injury.However,intrathecal injection of an miR-101a-3p mimic within 24 hours before injury decreased MYCN,p53,caspase-9 and interleukin-1βexpression,reduced p53 immunoreactivity,reduced the number of MYCN/NeuN-positive cells and the number of necrotic cells in L4-L6 spinal tissue,and increased Tarlov scores.These findings suggest that the miR-101a-3p mimic improved spinal ischemia/reperfusion injury-induced nerve cell apoptosis and inflammation by inhibiting MYCN and the p53 signaling pathway.Therefore,miR-101a-3p mimic therapy may be a potential treatment option for spinal ischemia/reperfusion injury. 展开更多
关键词 apoptosis CASpASE-9 INFLAMMATION INTERLEUKIN-1Β microrna-101a-3p MYCN nerve cells p53 spinal cord ischemia/reperfusion injury
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