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携载microRNA-140外泌体/海藻酸钠/胶原水凝胶修复关节软骨损伤
1
作者 陈明伟 余雯莉 +5 位作者 夏苏杭 陈宾 陈文忠 李锋侦 周宇 司文腾 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第16期3326-3334,共9页
背景:研究已证实,上调microRNA-140表达可部分抑制膝关节软骨组织与细胞的骨关节炎样改变,延缓骨关节炎进程,提示microRNA-140参与了骨关节炎的发病机制。目的:采用海藻酸钠/胶原水凝胶负载过表达microRNA-140的外泌体,进一步分析microR... 背景:研究已证实,上调microRNA-140表达可部分抑制膝关节软骨组织与细胞的骨关节炎样改变,延缓骨关节炎进程,提示microRNA-140参与了骨关节炎的发病机制。目的:采用海藻酸钠/胶原水凝胶负载过表达microRNA-140的外泌体,进一步分析microRNA-140参与骨关节炎的相关机制。方法:利用慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞使其过表达microRNA-140,随后分离提取外泌体,得到过表达microRNA-140的外泌体。制备负载外泌体的海藻酸钠/胶原水凝胶。采用随机数字表法将32只SD大鼠随机分为4组,每组8只:正常对照组不进行任何处理,骨关节炎组、未转染外泌体组、转染外泌体组均通过膝关节腔内注射碘乙酸钠的方式建立骨关节炎模型,造模2周后,骨关节炎组膝关节腔内注射PBS,未转染外泌体组、转染外泌体组膝关节腔内分别注射负载未过表达microRNA-140与过表达microRNA-140外泌体的海藻酸钠/胶原水凝胶。造模后第6周,检测大鼠机械刺激缩足反应阈值、滑膜液炎症因子浓度、软骨相关基因表达、膝关节软骨组织的组织学变化与焦亡相关蛋白表达。结果与结论:①与正常对照组比较,骨关节炎组机械刺激缩足反应阈值、Ⅱ型胶原及SOX9 mRNA表达、Ⅱ型胶原免疫荧光强度均减少(P<0.05),滑膜液中促炎症因子水平增加(P<0.05),基质金属蛋白酶13、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS5)mRNA表达增加(P<0.05),NLRP3、ASC、GSDMD p30、caspase-1 p20、白细胞介素1β、白细胞介素18蛋白表达均增加(P<0.05),GSDMD、cleaved caspase-1免疫荧光强度增强(P<0.05),软骨组织损伤严重。②与骨关节炎组比较,两外泌体组机械刺激缩足反应阈值、Ⅱ型胶原及SOX9 mRNA表达、Ⅱ型胶原免疫荧光强度均增加(P<0.05),滑膜液中促炎症因子水平减少(P<0.05),基质金属蛋白酶13 mRNA表达减少(P<0.05),NLRP3、ASC、GSDMD p30、caspase-1 p20、白细胞介素1β、白细胞介素18的蛋白表达均减少(P<0.05),GSDMD、cleaved caspase-1的免疫荧光强度减弱(P<0.05),软骨组织损伤减轻(P<0.05),并且转染外泌体组的作用更强。③结果表明,microRNA-140可通过抑制炎症、维持软骨稳态、抑制软骨焦亡来减轻骨关节炎大鼠的疼痛反应,降低软骨损伤,发挥骨关节炎治疗作用。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨损伤 外泌体 microrna-140 海藻酸钠/胶原水凝胶 焦亡
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microRNA-140通过下调HDAC4抑制胃癌细胞迁移和侵袭能力 被引量：1
2
作者 王显艳 高峰 +4 位作者 赵春明 孙玉荣 温秋婷 于秀文 张晓杰 《癌症进展》 2016年第3期223-227,共5页
目的探讨micro RNA-140(mi R-140)对胃癌细胞SGC-7901迁移及侵袭能力的影响及其调控机制。方法将mi R-140 mimics(mi R-140)、mi R-140特异性抑制剂(Anti-mi R-140)和针对HDAC4的si RNA(HDAC4si RNA)分别通过脂质体转染至细胞,应用实时... 目的探讨micro RNA-140(mi R-140)对胃癌细胞SGC-7901迁移及侵袭能力的影响及其调控机制。方法将mi R-140 mimics(mi R-140)、mi R-140特异性抑制剂(Anti-mi R-140)和针对HDAC4的si RNA(HDAC4si RNA)分别通过脂质体转染至细胞,应用实时荧光定量(q RT-PCR)检测细胞中mi R-140和HDAC4 m RNA表达情况,并采用蛋白质印迹法(WB)分析HDAC4蛋白水平。采用Transwell小室模型分析mi R-140上调和下调以及HDAC4调低对SGC-7901细胞迁移和侵袭能力的影响。结果 mi R-140转染可使HDAC4蛋白表达降低,HDAC4 m RNA水平则无明显变化。mi R-140上调与HDAC4调低均可显著抑制SGC-7901细胞的迁移和侵袭能力,而在转染了Anti-mi R-140的SGC-7901细胞中HDAC4蛋白表达增高,细胞迁移和侵袭能力增强。结论mi R-140在转录后水平调控HDAC4表达。mi R-140抑制胃癌细胞迁移和侵袭能力,部分是通过下调HDAC4而实现。mi R-140可能作为肿瘤转移诊断及治疗的新靶点。 展开更多
关键词 胃癌 microrna-140 HDAC4 肿瘤迁移 肿瘤侵袭
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抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎患者血浆microRNA-140表达的初步研究
3
作者 王笑寒 彭涛 +5 位作者 高慧丽 李燕飞 段冉冉 王景涛 滕军放 贾延劼 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1064-1066,共3页
目的探讨抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎患者血浆中microRNA-140表达变化及其意义。方法应用微阵列基因芯片技术检测抗NMDAR脑炎患者和健康人血浆microRNAs的表达水平;通过实时定量PCR方法检测5例抗NMDAR脑炎患者(实验组)、20例结... 目的探讨抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎患者血浆中microRNA-140表达变化及其意义。方法应用微阵列基因芯片技术检测抗NMDAR脑炎患者和健康人血浆microRNAs的表达水平;通过实时定量PCR方法检测5例抗NMDAR脑炎患者(实验组)、20例结核性脑(膜)炎患者(结脑组)、20例病毒性脑(膜)炎患者(病脑组)、30例健康人(对照组)血浆microRNA-140的表达水平。结果 (1)基因芯片表明血浆microRNA-140的表达水平在抗NMDAR脑炎患者中显著低于健康人,差异具有统计学意义(log2=5.11,P=0.004);通过实时定量PCR方法验证,与芯片检测结果一致,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)血浆microRNA-140的表达水平在实验组中显著低于结脑组、病脑组、对照组(P<0.05);结脑组、病脑组与对照组相比,血浆中microRNA-140水平下调差异无统计学意义(P>0.05)。结论抗NMDAR脑炎患者血浆中microRNA-140水平明显下调,提示microRNA-140可能参与了抗NMDAR脑炎的发生、发展过程。 展开更多
关键词 microrna-140 抗NMDAR脑炎 血浆
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microRNA-140真核表达载体的构建及鉴定
4
作者 张洋洋 彭效祥 +1 位作者 张绪美 赵荣兰 《医学研究杂志》 2017年第8期35-38,30,共5页
目的构建miR-140真核表达载体并检测其在兔软骨细胞中的表达情况。方法以人全血标本基因组为模板,PCR扩增出带有酶切位点的miR-140序列,将该序列定向克隆入pBudCE4.1载体中,构建pBudCE4.1-miR-140真核表达载体。将核定位信号肽偶联核激... 目的构建miR-140真核表达载体并检测其在兔软骨细胞中的表达情况。方法以人全血标本基因组为模板,PCR扩增出带有酶切位点的miR-140序列,将该序列定向克隆入pBudCE4.1载体中,构建pBudCE4.1-miR-140真核表达载体。将核定位信号肽偶联核激酶底物短肽(nucleus localization signal linked nucleic kinase substrate short peptide,NNS)修饰的壳聚糖(^(NNS)CS)分别与pBud CE4.1-miR-140重组质粒及pBudCE4.1空质粒形成纳米复合物,分别瞬时转染体外分离培养的正常兔原代关节软骨细胞,实时荧光定量PCR方法检测miR-140的表达情况。结果构建的pBudCE4.1-miR-140真核表达质粒酶切鉴定和测序结果均正确,表明miR-140成功克隆入pBudCE4.1载体中。实时荧光定量PCR结果表明,与^(NNS)CS/pBudCE4.1对照组相比,^(NNS)CS/pBudCE4.1-miR-140转染组软骨细胞中miR-140表达升高约14.5倍(P<0.05)。结论成功构建了pBudCE4.1-miR-140真核表达载体,瞬时转染后软骨细胞可以有效地高表达miR-140,为将来探究miR-140在软骨损伤修复中的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 microrna-140 软骨细胞 真核表达载体 定量PCR
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MicroRNA-140-5p通过蛋白激酶C亚型ε促进肾癌细胞增殖（英文） 被引量：2
5
作者 刘伟红 余肖 +3 位作者 任雨 刘开泰 林晨 王萍 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期185-191,共7页
目的探讨microRNA-140-5p(miR-140-5p)在肾癌发生中的作用。方法 Real-time PCR方法检测肾癌细胞(Caki-1、ACHN、OS-RC-2和786-O)中miR-140-5p的表达。MTS,流式细胞术和Western blotting检测细胞增殖,细胞周期和相关蛋白的改变。结果降... 目的探讨microRNA-140-5p(miR-140-5p)在肾癌发生中的作用。方法 Real-time PCR方法检测肾癌细胞(Caki-1、ACHN、OS-RC-2和786-O)中miR-140-5p的表达。MTS,流式细胞术和Western blotting检测细胞增殖,细胞周期和相关蛋白的改变。结果降低Caki-1细胞中miR-140-5p的水平后,细胞增殖被抑制,G0/G1期细胞数量显着增加,cyclin D、cyclin E和CDK2、CDK4也随之减少;此外,增加786-O细胞中miR-140-5p的水平后,促进体外细胞增殖和体内肿瘤发生。基因芯片结果发现,蛋白激酶C亚型ε(PKCε)基因在改变Caki-1和786-O的细胞中显著性升高。si PKCε在降低肾癌细胞(RCC)中PKCε蛋白表达的同时,还能显著性反转抑制物/模拟物诱导的细胞增殖和细胞周期的改变。结论 miR-140-5p通过PKCε促进肾癌细胞增殖。 展开更多
关键词 microrna-140-5p 肾癌细胞 细胞增殖 细胞周期 实时定量聚合酶链反应 人
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急性脑出血患者血清microRNA-140-5p的水平变化及临床意义 被引量：8
6
作者 王凯 李洪涛 胡洁滨 《临床神经病学杂志》 CAS 2022年第3期171-174,共4页
目的检测急性脑出血患者血清microRNA-140-5p(miR-140-5p)表达水平并探讨其临床意义。方法选取本院收治的96例急性脑出血患者(观察组)作为研究对象,选取同期100名健康体检者(对照组)作为对照。检测两组受试者血清miR-140-5p、IL-1β、T... 目的检测急性脑出血患者血清microRNA-140-5p(miR-140-5p)表达水平并探讨其临床意义。方法选取本院收治的96例急性脑出血患者(观察组)作为研究对象,选取同期100名健康体检者(对照组)作为对照。检测两组受试者血清miR-140-5p、IL-1β、TNF-α水平,并对观察组进行血肿体积估算、神经功能缺损程度划分及预后分组。采用Pearson法分析观察组血清miR-140-5p水平与血清IL-1β、TNF-α水平、血肿体积的相关性。用ROC曲线评估血清miR-140-5p水平对急性脑出血患者预后的预测价值。结果与对照组相比,观察组血清miR-140-5p水平显著降低(P<0.05),血清IL-1β、TNF-α水平显著升高(均P<0.05)。观察组血清miR-140-5p水平与血清IL-1β、TNF-α水平及血肿体积均呈显著负相关(r=-0.511,r=-0.513,r=-0.469;均P<0.05)。随着神经功能缺损程度的加重,急性脑出血患者血清miR-140-5p水平逐渐降低(均P<0.05)。预后不良组急性脑出血患者血清miR-140-5p水平较预后良好组显著降低(P<0.05);血清miR-140-5p水平预测急性脑出血患者预后的ROC曲线下面积为0.881,截断值为0.52,敏感度为93.3%,特异度为75.8%。结论急性脑出血患者血清miR-140-5p表达水平显著降低,其水平与血肿体积、神经功能缺损程度及预后均相关,可作为临床急性脑出血患者预后评估参考指标。 展开更多
关键词 急性脑出血 血清 microrna-140-5p 临床意义
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MicroRNA-140抑制胃癌细胞的增殖和侵袭
7
作者 傅卫红 倪庆锋 《交通医学》 2021年第4期323-328,共6页
目的:探讨microRNA-140(miR-140)在胃癌中的表达及其在胃癌细胞增殖和侵袭中的作用。方法:采用荧光定量PCR检测胃癌及癌旁组织、胃癌细胞系及正常人胃黏膜上皮细胞中miR-140表达水平,通过胃癌细胞株过表达及干扰miR-140,分析miR-140对... 目的:探讨microRNA-140(miR-140)在胃癌中的表达及其在胃癌细胞增殖和侵袭中的作用。方法:采用荧光定量PCR检测胃癌及癌旁组织、胃癌细胞系及正常人胃黏膜上皮细胞中miR-140表达水平,通过胃癌细胞株过表达及干扰miR-140,分析miR-140对胃癌细胞增殖和侵袭的作用。结果:胃癌组织miR-140表达水平明显低于癌旁组织,胃癌细胞系miR-140表达水平明显低于正常胃黏膜上皮细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-140能抑制SGC7901细胞的增殖和侵袭,而干扰miR-140表达能促进AGS细胞的增殖和侵袭,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-140在胃癌组织中低表达,过表达miR-140能抑制肿瘤的增殖和侵袭,miR-140可能成为临床治疗胃癌新靶点。 展开更多
关键词 微小RNA-140 胃癌细胞 增殖 侵袭
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MicroRNA-140在骨关节炎中的分子机制研究进展 被引量：4
8
作者 殷春明 潘晓华 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1277-1281,1286,共6页
骨关节炎(OA)是一种以细胞外基质(ECM)渐进性破坏,滑膜、软骨、软骨下骨及关节内其他组织的改变为特点的高发疾病。微小RNA(microRNA或miRNA)属于非编码区小RNA,其通过调控基因的表达对组织生长和稳态进行控制。在已知的miRNA中,MicroRN... 骨关节炎(OA)是一种以细胞外基质(ECM)渐进性破坏,滑膜、软骨、软骨下骨及关节内其他组织的改变为特点的高发疾病。微小RNA(microRNA或miRNA)属于非编码区小RNA,其通过调控基因的表达对组织生长和稳态进行控制。在已知的miRNA中,MicroRNA-140(miR-140)特异性高表达于关节软骨中,并在OA的发病机制中发挥至关重要的作用,然而miR-140调控关节软骨的分子机制却非常复杂。本文主要就miR-140在OA中对软骨生长及软骨稳态调控的分子机制进行综述。 展开更多
关键词 微小RNA-140 关节软骨 骨关节炎
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血清miR-140-3p、SDC-4水平与ST段抬高型心肌梗死病人介入治疗后发生恶性心律失常的关系
9
作者 代智高 王炎鑫 +1 位作者 徐英利 杨鹏会 《中西医结合心脑血管病杂志》 2026年第1期91-95,共5页
目的:探讨血清微小RNA-140-3p(miR-140-3p)、多配体蛋白聚糖4(SDC-4)水平与ST段抬高型心肌梗死(STEMI)病人经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后发生恶性心律失常(MA)的关系。方法:选取2021年10月—2023年10月于秦皇岛中西医结合医院就诊的142例... 目的:探讨血清微小RNA-140-3p(miR-140-3p)、多配体蛋白聚糖4(SDC-4)水平与ST段抬高型心肌梗死(STEMI)病人经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后发生恶性心律失常(MA)的关系。方法:选取2021年10月—2023年10月于秦皇岛中西医结合医院就诊的142例STEMI病人作为STEMI组,另选取同期进行健康体检者74名作为对照组;根据病人是否发生MA分为MA组(26例)和非MA组(116例)。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组血清SDC-4水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)法检测各组血清miR-140-3p表达水平;Target Scan Human网站预测miR-140-3p与SDC-4的靶向关系;Pearson法分析STEMI病人血清miR-140-3p与SDC-4表达水平的相关性及二者血清水平与实验室血清指标的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-140-3p和SDC-4对STEMI病人PCI术后发生MA的预测价值。结果:与对照组相比,STEMI组血清miR-140-3p表达水平明显降低,SDC-4水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。MA组与非MA组Killip分级、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(c TnI)、肌红蛋白(Mb)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、脑钠肽(BNP)水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与非MA组相比,MA组血清miR-140-3p表达水平明显降低,SDC-4水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示,miR-140-3p与CK-MB、c TnI、Mb、IL-6、TNF-α、IL-1β均呈负相关(P<0.05),SDC-4与CK-MB、c TnI、Mb、IL-6、TNF-α、IL-1β水平均呈正相关(P<0.05)。Target Scan Human网站预测结果显示,miR-140-3p与SDC-4之间存在靶向结合位点,且STEMI病人血清miR-140-3p与SDC-4水平呈负相关(r=-0.369,P<0.001)。miR-140-3p和SDC-4单独及联合预测PCI术后发生MA的曲线下面积(AUC)分别为0.893,0.846,0.961,联合预测优于单独预测(Z_(二者联合-miR-140-3p)=2.321,P=0.020;Z_(二者联合-SDC-4)=2.340,P=0.019)。结论:STEMI病人血清miR-140-3p和SDC-4表达水平与PCI术后MA的发生密切相关,且二者联合监测对MA的发生有较高的预测价值。 展开更多
关键词 ST段抬高型心肌梗死 经皮冠状动脉介入治疗 恶性心律失常 微小RNA-140-3p 多配体蛋白聚糖4
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MicroRNA-140靶向组蛋白去乙酰化酶7基因及在大鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化过程中的表达分析 被引量：2
10
作者 高原 王伟 +3 位作者 林金德 张春丽 温传俊 沈干 《国际免疫学杂志》 CAS 2013年第6期462-466,共5页
目的检测组蛋白去乙酰化酶7（HDAC7）是否为MicroRNA（miRNA）-140的靶基因，并研究在大鼠骨髓间充质干细胞（ratMSCs）成软骨诱导分化中miRNA-140和HDAC7表达的相关性。方法利用生物信息学、双荧光素酶报告基因检测以及Western blot法... 目的检测组蛋白去乙酰化酶7（HDAC7）是否为MicroRNA（miRNA）-140的靶基因，并研究在大鼠骨髓间充质干细胞（ratMSCs）成软骨诱导分化中miRNA-140和HDAC7表达的相关性。方法利用生物信息学、双荧光素酶报告基因检测以及Western blot法鉴定miRNA-140与HDAC7之间的靶作用关系。选取4周龄Sprague—Dawley（SD）雄性大鼠采用全骨髓贴壁法进行体外分离培养纯化得到大鼠骨髓间充质干细胞并向成软骨方向诱导分化，同时采用实时定量PCR和Western blot法检测miRNA-140和HDAC7的表达水平。结果双荧光素酶活性分析结果提示，miRNA-140靶结合人HDAC7基因的3’UTR。将miRNA-140mimics转染大鼠骨髓间充质干细胞后抑制HDAC7的蛋白表达。在大鼠骨髓间充质干细胞成软骨诱导分化过程中，miRNA-140表达上调，而HDAC7表达下降。结论miRNA-140通过靶结合HDAC7基因的3’UTR抑制HDAC7表达，二者在大鼠骨髓间充质干细胞成软骨诱导分化过程中表达负相关，提示miRNA-140通过抑制HDAC7蛋白表达保护软骨组织。 展开更多
关键词 microrna-140 组蛋白去乙酰化酶 大鼠骨髓间充质干细胞 成软骨诱导
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MicroRNA-140与前列腺癌患者免疫功能的关系
11
作者 郭青良 周树明 《中国实用医刊》 2021年第8期23-26,共4页
目的探讨microRNA-140与前列腺癌患者免疫功能的相关性。方法收集2017年1月至2020年1月河南医学高等专科学校附属医院收治的前列腺癌患者100例作为观察组,收集同期健康成人100例作为对照组,比较两组人群microRNA-140和免疫功能状态,分析... 目的探讨microRNA-140与前列腺癌患者免疫功能的相关性。方法收集2017年1月至2020年1月河南医学高等专科学校附属医院收治的前列腺癌患者100例作为观察组,收集同期健康成人100例作为对照组,比较两组人群microRNA-140和免疫功能状态,分析microRNA-140与前列腺癌患者免疫功能、病理特征的相关性。结果与对照组比较,观察组microRNA-140降低(0.87±0.23比1.65±0.32,P=0.000);CD4^(+)T细胞降低(27.62±1.82比31.65±2.08,P=0.001);CD8^(+)T细胞增高(29.08±2.26比25.53±2.08,P=0.000);CD4^(+)/CD8^(+)降低(0.93±0.20比1.17±0.19,P=0.001)。前列腺癌患者microRNA-140与淋巴管密度负相关(r=-0.526,P=0.001),与微血管密度负相关(r=-0.649,P=0.001),与Gleason评分负相关(r=-0.238,P=0.017)。与CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)正相关(r=0.473,0.492,P=0.001),与CD8^(+)T细胞负相关(r=-0.564,P=0.001)。结论microRNA-140在前列腺癌患者中低表达,与肿瘤的免疫抑制和预后不良有关。 展开更多
关键词 microrna-140 前列腺癌 免疫功能
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血清circ-ATAD1和miR-140-3p表达与宫颈癌患者预后相关性的研究
12
作者 冯晔 郜蕾 +3 位作者 李增慧 齐丽敏 靳亚慈 王丽君 《国际检验医学杂志》 2025年第8期926-930,936,共6页
目的分析血清环状RNA-ATAD1(circ-ATAD1)和微小RNA-140-3p(miR-140-3p)表达与宫颈癌患者预后的相关性。方法选择2018年3月至2020年3月河北省沧州中西医结合医院146例宫颈癌患者(研究组)、146例子宫良性病变患者(子宫良性病变组)及146例... 目的分析血清环状RNA-ATAD1(circ-ATAD1)和微小RNA-140-3p(miR-140-3p)表达与宫颈癌患者预后的相关性。方法选择2018年3月至2020年3月河北省沧州中西医结合医院146例宫颈癌患者(研究组)、146例子宫良性病变患者(子宫良性病变组)及146例体检健康者(对照组)为研究对象。采用实时荧光定量PCR检测血清miR-140-3p、circ-ATAD1水平。采用Kaplan-Meier法分析血清circ-ATAD1、miR-140-3p表达与宫颈癌患者预后的相关性。多因素Cox回归模型分析宫颈癌患者预后的影响因素。结果研究组血清circ-ATAD1水平高于对照组、子宫良性病变组(P<0.05),miR-140-3p水平低于对照组、子宫良性病变组(P<0.05)。有阴道浸润、有淋巴结转移、FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期的宫颈癌患者miR-140-3p低表达、circ-ATAD1高表达者占比分别高于无阴道浸润、无淋巴结转移、FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期的患者(P<0.05)。血清circ-ATAD1高表达的宫颈癌患者3年生存率低于circ-ATAD1低表达患者(30.14%vs.64.38%,P<0.001)。血清miR-140-3p高表达的宫颈癌患者3年生存率高于miR-140-3p低表达患者(61.64%vs.32.88%,P<0.001)。FIGO分期、circ-ATAD1、淋巴结转移、miR-140-3p为宫颈癌患者预后的影响因素(P<0.05)。结论宫颈癌患者血清circ-ATAD1水平升高而miR-140-3p水平降低,二者与宫颈癌患者淋巴结转移、FIGO分期密切相关,为宫颈癌患者预后的影响因素。 展开更多
关键词 环状RNA-ATAD1 微小RNA-140-3p 宫颈癌 预后
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慢病毒介导miR-140-5p过表达对内毒素诱导大鼠肝损伤的保护作用
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作者 李丽 崔海山 李梅 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期69-74,共6页
目的:探究慢病毒介导miR-140-5p过表达对内毒素诱导大鼠肝损伤的保护作用。方法:40只大鼠随机分为对照组、模型组、miR-NC组和miR-140-5p-mimic组,每组10只。miR-NC组、miR-140-5p-mimic组分别尾静脉注射慢病毒空载体miR-NC、重组miR-14... 目的:探究慢病毒介导miR-140-5p过表达对内毒素诱导大鼠肝损伤的保护作用。方法:40只大鼠随机分为对照组、模型组、miR-NC组和miR-140-5p-mimic组,每组10只。miR-NC组、miR-140-5p-mimic组分别尾静脉注射慢病毒空载体miR-NC、重组miR-140-5p,对照组、模型组尾静脉注射生理盐水。3 d后模型组、miR-NC组、miR-140-5p-mimic组大鼠腹腔注射10 mg/kg脂多糖,对照组大鼠腹腔注射生理盐水。注射后12 h处死所有大鼠,检测血清ALT、AST、内毒素、TNF-α、IL-6、IL-1β、SOD、MDA、CAT水平,HE、TUNEL染色观察肝组织病理形态与细胞凋亡情况。TargetScanHuman预测miR-140-5p和TLR4的结合位点,双荧光素酶报告基因检测分析miR-140-5p和TLR4的靶向调节关系。qRT-PCR检测肝组织miR-140-5p水平,qRTPCR、Western blot检测肝组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA和蛋白表达,Western blot检测p-NF-κB表达。结果:对照组肝小叶清晰可见,无肝细胞变性、坏死,无炎症细胞浸润;模型组、miR-NC组可见明显肝细胞坏死、空泡变性、充血,炎症细胞渗入肝窦;miR-140-5p-mimic组肝细胞充血、坏死、空泡变性和炎症细胞浸润情况较模型组、miR-NC组明显减少。miR-140-5p能够直接靶向作用于TLR4。与对照组相比,模型组、miR-NC组、miR-140-5p-mimic组ALT、AST、内毒素、凋亡细胞数、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、TLR4、MyD88 mRNA与蛋白、NF-κB mRNA、p-NF-κB水平升高(P<0.05),SOD、CAT水平降低(P<0.05);与模型组、miR-NC组相比,miR-140-5p-mimic组ALT、AST、内毒素、凋亡细胞数、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、TLR4、MyD88 mRNA与蛋白,以及NF-κB mRNA、p-NF-κB水平降低(P<0.05),SOD、CAT水平升高(P<0.05)。结论:过表达miR-140-5p能够降低内毒素诱导肝损伤大鼠的炎症反应、氧化应激水平,保护肝细胞,减轻肝脏的病理性损伤,其作用机制可能与TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关。 展开更多
关键词 miR-140-5p 内毒素 肝损伤 炎症反应 氧化应激
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MicroRNA-140在乳腺癌细胞中对Mrf2及其下游抗氧化基因的表达调控 被引量：3
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作者 于影 李豪杰 温传俊 《国际免疫学杂志》 CAS 2013年第4期303-309,共7页
目的本研究旨在揭示microRNA在乳腺癌细胞中对哪表达的影响。方法利用生物信意学方法预测miR-140与Ⅳ啦的结合位点，然后采用双荧光报告系统检测miR-140对Nrf23’UTR及启动子上的8×ARE区域活性的影响；同时以实时荧光定量PCR法和We... 目的本研究旨在揭示microRNA在乳腺癌细胞中对哪表达的影响。方法利用生物信意学方法预测miR-140与Ⅳ啦的结合位点，然后采用双荧光报告系统检测miR-140对Nrf23’UTR及启动子上的8×ARE区域活性的影响；同时以实时荧光定量PCR法和Westernbloting法检测过表达miR．140和加药刺激前后细胞中Nrf2及其下游基因的mRNA和蛋白的表达变化；最后，四甲基偶氮唑蓝（MTY）法检测转染miR-140后，对于不同浓度H2O2处理的细胞，观察其生长能力及对氧化应激敏感性的变化。结果过表达miR．140能够显著抑制Nrf啦5’UTR区域的表达（P=0．007）和启动子上ARE区域的活性（P=0．01）；在过表达miR-140的对照组和加药组细胞中，Ⅳ以及其下游基因mRNA和蛋白水平均被明显抑制（均P〈0．05）；MTT实验结果显示转染miR-140细胞活力受到抑制，同时再使用不同浓度的H2O2刺激细胞后，细胞对氧化应激的敏感性增加（P〈0．01）。结论Ⅳ啦可能作为miR-140的一个新型靶基因，miR-140能够通过抑制Ⅳ犯，进而影响其下游一系列抗氧化基因的表达。 展开更多
关键词 miR-140 NRF2 ARE 细胞生长 氧化应激
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MicroRNA-34a通过调控Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病进展的机制探讨
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作者 刘虹 张玥玥 +4 位作者 王一琳 王彩丽 王晓敏 毛敏 李燕 《天津医药》 2025年第8期785-790,共6页
目的探讨微小RNA(miRNA)-34a通过Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病(CLL)疾病进展的作用机制。方法选用人慢性B细胞白血病细胞MEC-1。实验一分组:p53激动剂组和Control组;实验二分组:Control组、miR-34a-5p mimic组及对照组、miR-34a-5p in... 目的探讨微小RNA(miRNA)-34a通过Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病(CLL)疾病进展的作用机制。方法选用人慢性B细胞白血病细胞MEC-1。实验一分组:p53激动剂组和Control组;实验二分组:Control组、miR-34a-5p mimic组及对照组、miR-34a-5p inhibitor组及对照组、miR-34a-5p inhibitor+Wnt抑制剂XAV-939组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组细胞中miR-34a-5p表达水平;CCK8检测细胞增殖能力;Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;双萤光素酶报告实验检测p53与miR-34a-5p及miR-34a-5p与Wnt1的靶向关系;Western blot检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达。结果在MEC-1细胞中:①p53激动剂组中miR-34a表达升高,增殖受抑制(P<0.05);双萤光素酶报告实验证实miR-34a-5p与p53之间呈现负调控相关性。②miR-34a-5p mimic组miR-34a-5p表达升高,增殖受抑制,迁移能力降低,β-catenin、Cyclin D1蛋白表达下调(P<0.05);miR-34a-5p inhibitor组miR-34a-5p表达降低,增殖升高,迁移能力增强,β-catenin、Cyclin D1蛋白表达上调(P<0.05)。③miR-34a-5p和Wnt1呈现负调控相关性。④与miR-34a-5p inhibitor组相比,XAV-939组的miR-34a-5p表达升高,迁移细胞数减少,β-catenin和Cyclin D1蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论miR-34a在CLL中扮演着抑癌基因的角色,过表达miR-34a可抑制Wnt/β-catenin信号通路,降低细胞的增殖活性和迁移能力,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 白血病 B细胞 WNT信号通路 肿瘤抑制蛋白质P53 细胞增殖 microrna-34a
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运用CRISPR-dCas9-VP64基因编辑技术验证microRNA-140的独立转录启动位点
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作者 郝耀 陈丽 +1 位作者 韩永斌 原野 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2023年第1期57-64,共8页
目的探讨microRNA-140(miR-140)是否有独立于其宿主基因WWP2的转录启动子,从而为骨性关节炎的治疗提供新的思路。方法通过共转染CRISPR-dCas9-VP64和ACAN gRNA慢病毒的SW1353细胞验证软骨细胞特征性基因ACAN的转录水平。通过构建能稳定... 目的探讨microRNA-140(miR-140)是否有独立于其宿主基因WWP2的转录启动子,从而为骨性关节炎的治疗提供新的思路。方法通过共转染CRISPR-dCas9-VP64和ACAN gRNA慢病毒的SW1353细胞验证软骨细胞特征性基因ACAN的转录水平。通过构建能稳定表达CRISPR-dCas9-VP64的SW1353细胞并结合多条sgRNA(single guide RNA,sgRNA/gRNA)、人类髋关节软骨RNA测序结果验证miR-140是否与WWP2基因共表达,是否有独立的转录启动位点。结果共转染CRISPR-dCas9-VP64和ACAN gRNA慢病毒的SW1353细胞能显著提高软骨细胞特征性基因ACAN的转录水平。从基因水平、蛋白水平证实成功构建能稳定表达CRISPR-dCas9-VP64的SW1353细胞。通过人类髋关节软骨RNA测序结果设计多条WWP2 gRNA以及miR-140启动子gRNA。实时定量PCR结果显示miR-140的表达既受其宿主基因WWP2调控,同时也有其独立的转录位点。结论运用CRISPR-Cas9基因编辑技术成功构建稳定表达CRISPR-dCas9-VP64蛋白的SW1353细胞能极大减少实验中样本间的差异化,保证实验结果的一致性。结合多条gRNA证明了miR-140既与WWP2共表达,同时也受其独立的转录启动子调控转录。运用CRISPR-dCas9-VP64d-gRNA能单独调控miR-140的表达,同时其宿主基因的表达不受影响,有潜力作为新兴的基因治疗方法治疗骨性关节炎。 展开更多
关键词 CRISPR-dCas9-VP64 骨性关节炎 非编码小RNA-140 含WW域E3泛素蛋白连接酶2
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定坤丹通过microRNA-30d-5p靶向调节Smad2促进多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞增殖的机制研究
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作者 陈兰 颜晓静 +6 位作者 廉源沛 朱力 周世康 王地均 蔡佳丽 尹春燕 曹吉 《广州中医药大学学报》 2025年第7期1750-1756,共7页
【目的】通过观察microRNA-30d-5p对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞(GCs)的影响,探讨定坤丹治疗PCOS的作用机制。【方法】以脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,体外培养正常大鼠GCs与PCOS大鼠GCs。将GCs分为空白组,模型组及定坤丹低... 【目的】通过观察microRNA-30d-5p对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞(GCs)的影响,探讨定坤丹治疗PCOS的作用机制。【方法】以脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,体外培养正常大鼠GCs与PCOS大鼠GCs。将GCs分为空白组,模型组及定坤丹低、高剂量组,分组处理后,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测GCs的存活率,细胞流式术分析GCs凋亡率,实时聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测GCs中转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad3及microRNA-30d-5p的表达,Western Blot法检测GCs中TGF-β1、Smad2及Smad3的蛋白表达。【结果】与空白组比较,模型组GCs存活率显著下降,GCs凋亡率,TGF-β1、Smad2及Smad3的基因及蛋白表达水平显著升高,microRNA-30d-5p的表达水平显著下降,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,定坤丹低、高剂量组GCs存活率上升,GCs凋亡率显著下降,TGF-β1、Smad2及Smad3的基因与蛋白表达水平显著下降,microRNA-30d-5p的表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性。【结论】定坤丹通过microRNA-30d-5p靶向调节Smad2促进GCs增殖,可能起到治疗PCOS排卵障碍的作用。 展开更多
关键词 定坤丹 多囊卵巢综合征 转化生长因子β1 SMAD2 microrna-30d-5p 卵巢颗粒细胞 大鼠
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系统性免疫炎症指数与microRNA-145对肺癌根治术患者发生肺部感染的预测价值
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作者 王君 代玺 《中国现代医学杂志》 2025年第22期1-7,共7页
目的探讨系统性免疫炎症指数(SII)联合microRNA-145(miR-145)对肺癌根治术患者发生肺部感染的预测价值。方法选取2020年1月—2023年1月在陕西省人民医院接受肺癌根治术患者(244例),根据患者是否发生肺部感染分为感染组(43例)和非感染组(... 目的探讨系统性免疫炎症指数(SII)联合microRNA-145(miR-145)对肺癌根治术患者发生肺部感染的预测价值。方法选取2020年1月—2023年1月在陕西省人民医院接受肺癌根治术患者(244例),根据患者是否发生肺部感染分为感染组(43例)和非感染组(201例)。收集患者的临床资料,比较两组患者术前的炎症因子水平[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)]、营养指标(白蛋白、血红蛋白)、SII,并通过实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-145表达。采用多因素逐步Logistic回归模型分析肺癌根治术患者发生肺部感染的风险因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估SII、miR-145对肺部感染的预测效能。结果感染组患者糖尿病患病率、吸烟率、年龄、手术时间、白细胞计数、炎症因子和SII水平均高于非感染组(P<0.05),白蛋白和miR-145相对表达量均低于非感染组(P<0.05);多因素逐步Logistic回归分析结果显示,年龄大[OR=1.520(95%CI:1.137,2.031)]、手术时间长[OR=9.803(95%CI:1.865,51.528)]、吸烟史[OR=118.515(95%CI:1.781,7884.700)]、糖尿病史[OR=133.243(95%CI:2.960,5997.049)]、白蛋白低[OR=0.525(95%CI:0.329,0.836)]、SII水平高[OR=1.007(95%CI:1.002,1.011)]和miR-145相对表达量低[OR=0.011(95%CI:0.000,0.675)]均是肺癌根治术患者发生肺部感染的危险因素(P<0.05);ROC曲线结果显示,SII联合miR-145预测肺癌根治术患者发生肺部感染的曲线下面积为0.956(95%CI:0.927,0.985),敏感性为81.4%(95%CI:0.666,0.916),特异性为96.0%(95%CI:0.923,0.983)。结论SII越高、miR-145相对表达量越低的患者发生肺部感染的风险增加,可为患者病情评估提供指导。 展开更多
关键词 肺癌根治术 肺部感染 系统性免疫炎症指数 microrna-145
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大黄灵仙胶囊含药血清对胆管细胞炎症模型miRNA⁃140⁃5p表达及NF-κB/NLRP3信号通路的影响 被引量：1
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作者 居燕飞 陈雅璐 +2 位作者 林龙 劳永彩 王清坚 《时珍国医国药》 北大核心 2025年第4期628-635,共8页
目的探讨大黄灵仙胶囊(DHLX)含药血清对脂多糖(LPS)诱导的大鼠胆管细胞炎症模型miRNA-140-5p表达及NF-κB/NLRP3信号通路的可能作用机制。方法12只SD大鼠随机分为空白血清组和含药血清组,每组6只。含药血清组给予320 mg·kg^(-1)... 目的探讨大黄灵仙胶囊(DHLX)含药血清对脂多糖(LPS)诱导的大鼠胆管细胞炎症模型miRNA-140-5p表达及NF-κB/NLRP3信号通路的可能作用机制。方法12只SD大鼠随机分为空白血清组和含药血清组,每组6只。含药血清组给予320 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,空白血清组给予等量蒸馏水灌胃,连续3 d,每天1次,末次给药6 h后腹主动脉取血制备含药血清。将胆管细胞分为空白组、模型组、DHLX组、DHLX+抑制剂组、DHLX+抑制剂对照组。收集上述各组细胞,电镜观察胆管细胞形态改变;检测各组细胞半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)活性;ELISA测定白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)浓度;qRT-PCR检测各组细胞miRNA-140-5p以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、Toll样受体4(TLR4)、核因子κB p65(NF-κB p65)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、Caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)mRNA表达量;Western blot检测TNF-α、IL-6、TLR4、NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组胆管细胞核固缩、胞膜出泡、胞质空泡化,线粒体嵴模糊不清、减少或消失,内质网膨胀,Caspase-1活性表达显著增加(P<0.01),IL-1β、IL-18,TNF-α、IL-6、TLR4、NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、ASC mRNA及蛋白表达增加(P<0.05),miRNA-140-5p表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,DHLX组胆管细胞损伤减轻,Caspase-1活性表达显著降低(P<0.01),IL-1β、IL-18,TNF-α、IL-6、TLR4、NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、ASC mRNA及蛋白表达降低(P<0.05),miRNA-140-5p表达显著增加(P<0.01);与DHLX组比较,DHLX+抑制剂组胆管细胞损伤加重,Caspase-1活性表达显著增加(P<0.01),IL-1β、IL-18,TNF-α、IL-6、TLR4、NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、ASC mRNA及蛋白表达增加(P<0.05),miRNA-140-5p表达显著降低(P<0.01),DHLX+抑制剂对照组上述指标差异均无统计学意义(P>0.05);与DHLX+抑制剂组比较,DHLX+抑制剂对照组胆管细胞焦亡情况较前改善,Caspase-1活性表达显著降低(P<0.01),IL-1β、IL-18,TNF-α、IL-6、TLR4、NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、ASC mRNA及蛋白表达降低(P<0.05),miRNA-140-5p表达显著增加(P<0.01)。结论DHLX可能通过上调胆管细胞miRNA-140-5p表达,抑制NF-κB/NLRP3信号通路相关因子释放,抑制细胞焦亡,延缓细胞炎症反应进程从而起到防治胆石症的作用。 展开更多
关键词 胆石症 胆管细胞 大黄灵仙胶囊 miRNA-140-5p NF-κB/NLRP3信号通路
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miR-140-5p在乳腺癌细胞MDA-MB-231缺氧状态中的表达及对其增殖侵袭迁移功能的影响 被引量：2
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作者 罗义 别俊 +3 位作者 张雪琳 鲜童丞 杨闽叶 王杰 《西部医学》 2025年第1期15-20,共6页
目的探讨miR-140-5p在低氧环境下对乳腺癌细胞功能的影响。方法对乳腺癌细胞株MDA-MB-231进行常规培养和缺氧处理,qt-PCR检测miRNA-140-5p在细胞MDA-MB-231低氧和常氧状态下的表达水平,WB实验检测miRNA-140-5p在细胞MDA-MB-231低氧和常... 目的探讨miR-140-5p在低氧环境下对乳腺癌细胞功能的影响。方法对乳腺癌细胞株MDA-MB-231进行常规培养和缺氧处理,qt-PCR检测miRNA-140-5p在细胞MDA-MB-231低氧和常氧状态下的表达水平,WB实验检测miRNA-140-5p在细胞MDA-MB-231低氧和常氧状态下的蛋白表达水平,转染miRNA-140-5p mimics,将细胞分组(常氧组、低氧组、低氧+Mock组、低氧+miRNA-140-5p mimics组),对各组细胞进行增殖、迁移、侵袭能力检测;最后,检测各组细胞中NOX4的表达情况,评估miR-140-5p与NOX4的调控关系。结果miRNA-140-5p在细胞MDA-MB-231缺氧状态中的表达降低(P<0.05),转染miRNA-140-5p mimics表达升高。miRNA-140-5p mimics能增强细胞在低氧环境中的增殖、迁移、侵袭能力;miRNA-140-5p mimics也能增强NOX4在MDA-MB-231中的表达影响。结论miRNA-140-5p在乳腺癌细胞MDA-MB-231缺氧状态中的表达减低,在转染Mimic之后表达升高,并且对细胞MDA-MB-231在低氧状态下的迁移、侵袭、增殖功能产生了影响,表明细胞低氧状态下miRNA-140-5p对乳腺癌细胞MDA-MB-231功能的影响可能导致了乳腺癌发生发展,并且这一机制可能是对MDA-MB-231中的NOX4诱导变化而形成的。 展开更多
关键词 miRNA-140-5p 乳腺癌 增殖 迁移 侵袭
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