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支气管哮喘患儿血清miR-130a-3p、miR-326与气道炎症的关系及对预后的交互影响 被引量:1
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作者 吕国锋 吕文丽 +1 位作者 田涛 王磊 《临床肺科杂志》 2025年第4期575-581,共7页
目的分析支气管哮喘(BA)患儿血清微小核糖核酸(miR)-130a-3p、miR-326与气道炎症的关系及对预后的交互影响。方法选择2019年6月至2021年7月在本院接受治疗的120例BA患儿作为研究组,另选取同期在本院体检的120例健康者纳入对照组。采用... 目的分析支气管哮喘(BA)患儿血清微小核糖核酸(miR)-130a-3p、miR-326与气道炎症的关系及对预后的交互影响。方法选择2019年6月至2021年7月在本院接受治疗的120例BA患儿作为研究组,另选取同期在本院体检的120例健康者纳入对照组。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测两组血清miR-130a-3p、miR-326水平,采用血细胞分析仪测定气道炎症因子[诱导痰嗜酸性粒细胞(EOS)]水平,经Pearson相关性分析血清miR-130a-3p、miR-326相对表达量与诱导痰EOS水平的相关性。随访,按照预后情况将研究组分为预后良好组、预后不良组,对比两组一般资料与血清miR-130a-3p、miR-326、诱导痰EOS水平。经Logistic单因素、多因素分析影响BA患儿预后的危险因素。建立Logistic回归交互作用模型,分析miR-130a-3p、miR-326与EOS交互作用与BA患儿预后的关系。绘制ROC曲线,分析二元Logistics模型预测支气管哮喘患儿预后不良的价值。结果研究组血清miR-130a-3p、miR-326相对表达量比对照组低,诱导痰EOS水平比对照组高(P<0.05);经Pearson相关性显示,血清miR-130a-3p、miR-326相对表达量与诱导痰EOS水平呈负相关(r=-0.532、-0.358,P均<0.001);研究组120例BA患儿中有20例预后不良,占比16.67%;预后不良组血清miR-130a-3p、miR-326相对表达量比预后良好组低,诱导痰EOS水平比预后良好组高(P<0.05);经Logistic回归分析发现,血清miR-130a-3p、miR-326是BA患儿预后的保护因素(OR=0.109、0.162,P=0.004、0.002,95%CI:0.352~0.465、0.270~0.882),诱导痰EOS是危险因素(OR=8.656,P<0.001,95%CI:1.122~131.615);miR-130a-3p、miR-326与EOS产生交互作用,增加BA患儿预后不良发生的风险性(P<0.05);建立二元Logistics模型,绘制ROC曲线发现,miR-130a-3p+EOS预测BA患儿预后不良发生的AUC为0.965(95%CI:0.959~0.992),miR-326+EOS预测BA患儿预后不良发生的AUC为0.924(95%CI:0.885~0.962)。结论血清miR-130a-3p、miR-326水平在BA患儿中呈低表达,诱导痰EOS水平呈高表达,miR-130a-3p、miR-326与EOS均呈负相关且存在交互作用,并与BA患儿预后不良发生密切相关。 展开更多
关键词 支气管哮喘 微小核糖核酸-130a-3p 微小核糖核酸-326 气道炎症 相关性 交互作用
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miR-130a-3p靶向PPAR-γ对肺上皮间质转化的影响在矽肺纤维化中的作用
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作者 郝小惠 李倩 +3 位作者 靳宜璇 张秦欣 王渝迪 杨方 《环境与职业医学》 北大核心 2025年第2期188-195,共8页
[背景]目前矽肺病的治疗措施仍然有限,缺乏彻底治愈方法。微小RNA(miRNAs)通过直接降解靶基因mRNA或抑制其翻译,在转录水平参与纤维化疾病进程。然而miR-130a-3p如何调控矽肺纤维化仍未完全阐明。[目的]探讨miR-130a-3p是否通过抑制过... [背景]目前矽肺病的治疗措施仍然有限,缺乏彻底治愈方法。微小RNA(miRNAs)通过直接降解靶基因mRNA或抑制其翻译,在转录水平参与纤维化疾病进程。然而miR-130a-3p如何调控矽肺纤维化仍未完全阐明。[目的]探讨miR-130a-3p是否通过抑制过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)基因促进上皮间质转化,进而促进矽肺纤维化进程,以寻找矽肺治疗有效新靶点。[方法](1)动物实验:10 mg二氧化硅(SiO_(2))溶于100μL生理盐水制成混悬液,一次性注入C57BL/6J小鼠的气管内制作模型,SiO_(2)暴露后28 d为矽肺组;对照组气管内注入等量的生理盐水。苏木素-伊红和天狼猩红染色观察肺组织病理学变化和胶原沉积。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测肺组织的miR-130a-3p和PPAR-γ的mRNA表达水平。Western blotting检测肺组织的PPAR-γ、转化生长因子(TGF)-β1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)蛋白的表达水平。(2)细胞实验:5μg·L^(-1)的TGF-β1刺激小鼠肺泡上皮细胞(MLE-12)不同时间(0、12、24、48 h)。RT-qPCR检测细胞miR-130a-3p和PPAR-γ的mRNA表达。双荧光素酶报告基因实验检测MLE-12细胞内miR-130a-3p和PPAR-γ的mRNA的结合。转染miR-130a-3p抑制剂后5μg·L^(-1)的TGF-β1刺激MLE-12细胞,Western blotting检测细胞内PPAR-γ、E-cadherin和α-SMA蛋白表达。[结果](1)矽肺模型组小鼠肺泡间隔增宽、肺内矽结节形成,红染的胶原沉积于矽结节内表明矽肺纤维化模型建立成功。肺组织TGF-β1、α-SMA及CollagenⅠ蛋白表达增高,E-cadherin和PPAR-γ蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。肺组织miR-130a-3p表达增高,PPAR-γ的mRNA表达降低(P<0.01)。(2)TGF-β1刺激MLE-12细胞后miR-130a-3p表达增高,PPAR-γ的mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。双荧光素酶报告基因检测显示在MLE-12细胞中miR-130a-3p和PPAR-γ的mRNA存在直接作用关系。转染miR-130a-3p抑制剂可抑制TGF-β1刺激的MLE-12细胞内PPAR-γ、E-Cadherin蛋白表达的降低和α-SMA蛋白表达的增高(P<0.05或P<0.01)。[结论]miR-130a-3p通过靶向降低PPAR-γ的表达,增加肺上皮间质转化进而促进矽肺纤维化发生发展。 展开更多
关键词 矽肺 miR-130a-3p 过氧化物酶增殖物激活受体Γ 上皮间质转化 纤维化
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血清外泌体LncRNA XIST、miR-130a-3p在妊娠期糖尿病患者中的表达及与妊娠结局的关系
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作者 赵瑜 方美凤 +2 位作者 袁虎 贾颖娜 宋珍源 《国际检验医学杂志》 2025年第18期2177-2182,共6页
目的探讨血清外泌体长链非编码RNA X染色体失活特异转录物(LncRNA XIST)、微小RNA(miR)-130a-3p在妊娠期糖尿病(GDM)患者中的表达及与妊娠结局的关系。方法选取2021年1月至2024年1月该院收治的149例GDM患者(GDM组)和149例产检健康的孕妇... 目的探讨血清外泌体长链非编码RNA X染色体失活特异转录物(LncRNA XIST)、微小RNA(miR)-130a-3p在妊娠期糖尿病(GDM)患者中的表达及与妊娠结局的关系。方法选取2021年1月至2024年1月该院收治的149例GDM患者(GDM组)和149例产检健康的孕妇(对照组),检测并比较两组血清外泌体LncRNA XIST、miR-130a-3p及糖脂代谢指标,采用Pearson法分析LncRNA XIST、miR-130a-3p水平与糖脂代谢指标的相关性。采用单因素和多因素Logistic回归模型分析GDM患者妊娠结局的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清外泌体LncRNA XIST、miR-130a-3p水平单独及联合检测对GDM患者妊娠结局的预测效能。结果GDM组血清外泌体LncRNA XIST、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、餐后2 h血葡萄糖(2 hPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平高于对照组(P<0.05),miR-130a-3p、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于对照组(P<0.05)。LncRNA XIST与FINS、FBG、HOMA-IR、2 hPG、TC、TG、LDL-C呈正相关(P<0.05),与HDL-C呈负相关(P<0.05);miR-130a-3p与FINS、FBG、HOMA-IR、2 hPG、TC、TG、LDL-C呈负相关(P<0.05),与HDL-C呈正相关(P<0.05)。149例GDM患者出现不良妊娠结局43例,占比28.86%,FBG水平升高、LncRNA XIST水平升高、HOMA-IR升高是GDM患者不良妊娠结局的危险因素(P<0.05),miR-130a-3p水平升高则是保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,联合检测的预测效能优于单项指标检测的预测效能。结论GDM患者血清外泌体LncRNA XIST呈高表达,miR-130a-3p呈低表达,且联合检测上述指标对妊娠结局具有较高的预测价值。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 妊娠结局 糖脂代谢 长链非编码核糖核酸X染色体失活特异转录物 微小RNa-130a-3p
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环状RNA circMRPS35通过miR-130a-3p/ZNRF3轴调节胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭 被引量:1
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作者 刘文飞 秦洪真 +3 位作者 董翼 郭玉洋 胡文军 方勇 《现代生物医学进展》 CAS 2022年第21期4020-4026,共7页
目的:探讨环状RNA MRPS35(circMRPS35)对胃癌(GC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的调控机制。方法:体外培养人GC细胞系(HGC-27、MGC-803、MKN45和AGS)和正常胃上皮GES-1细胞,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测circMRPS35、mi R-130a-3p和锌环... 目的:探讨环状RNA MRPS35(circMRPS35)对胃癌(GC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的调控机制。方法:体外培养人GC细胞系(HGC-27、MGC-803、MKN45和AGS)和正常胃上皮GES-1细胞,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测circMRPS35、mi R-130a-3p和锌环指蛋白3 (ZNRF3)m RNA表达。另取MGC-803细胞,分为对照组、pc-NC组、pc-circMRPS35组、pc-circMRPS35+miR-NC组、pc-circMRPS35+miR-130a-3p组,采用Lipofectamine 3000进行质粒转染。RT-qPCR检测circMRPS35、mi R-130a-3p和ZNRF3 m RNA表达,Western blot检测ZNRF3蛋白表达,CCK-8法、流式细胞术检测细胞增殖与凋亡,划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭能力,裸鼠移植瘤实验探究circMRPS35对GC细胞体内生长的影响。双荧光素酶报告基因检测mi R-130a-3p与circMRPS35或ZNRF3的靶标关系。结果:GC细胞系中circMRPS35和ZNRF3 m RNA呈低表达,mi R-130a-3p呈高表达(均P<0.05)。过表达circMRPS35可降低mi R-130a-3p,上调ZNRF3 m RNA和蛋白水平,抑制细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡(均P<0.05);circMRPS35过表达对GC细胞恶性行为和裸鼠移植瘤生长的抑制作用可被mi R-130a-3p mimic逆转(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,过表达mi R-130a-3p可降低circMRPS35-WT和ZNRF3-WT的荧光素酶活性(P<0.05)。结论:circMRPS35可能通过mi R-130a-3p/ZNRF3轴抑制GC细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 circMRpS35 microrna-130a-3p 锌环指蛋白3 增殖 凋亡 迁移 侵袭
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mir-130a-3p及smad 4在肝细胞癌组织中的表达及临床意义 被引量:12
5
作者 周争光 汪蕊 +5 位作者 李玉梅 杨燕 苏方 赵福友 吴穷 孙国平 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第3期383-387,共5页
目的考察mir-130a-3p及靶基因smad 4在肝细胞癌(HCC)组织中表达及相关性,并分析两者表达与肝癌临床病理特征和预后的关系。方法从石蜡组织包埋的51例肝癌组织及相应癌旁组织中提取总RNA,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测mir-130a-3... 目的考察mir-130a-3p及靶基因smad 4在肝细胞癌(HCC)组织中表达及相关性,并分析两者表达与肝癌临床病理特征和预后的关系。方法从石蜡组织包埋的51例肝癌组织及相应癌旁组织中提取总RNA,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测mir-130a-3p的表达,并采用免疫组织化学Eli Vision(IHC)法测定肝癌组织及癌旁组织中smad 4表达,分析两者相关性、与临床病理参数及总生存时间(OS)之间的关系。结果 mir-130a-3p在肝癌组织中的表达水平(1.38±0.15)显著低于癌旁组织(2.48±0.16)(P<0.001)。在肝癌组织中,smad 4阳性表达率为72.5%(37/51),明显高于癌旁组织51.0%(26/51)(P<0.05)。mir-130a-3p和smad 4在肝癌组织中的表达呈负相关性(rs=-0.431,P<0.05)。mir-130a-3p和smad 4的表达水平与肝癌患者TNM分期有关(P<0.05),与年龄、性别、有无淋巴结转移、有无脉管癌栓及病理分级无关。肝癌组织中mir-130a-3p高表达患者中位OS(25.6个月)较低表达组(23.1个月)延长,但差异无统计意义;smad 4阴性表达组中位OS(26.7个月)较阳性表达组(20.0个月)显著延长(P<0.05)。结论 mir-130a-3p在肝癌组织中表达下调,可能通过调控smad 4的表达参与了肝癌的发生发展,mir-130a-3p有望成为肝癌潜在的治疗靶点及预后判断因子。 展开更多
关键词 mir-130a-3p SMAD 4 肝细胞肝癌
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MicroRNA-122-5p、microRNA-33a-3p在胃癌患者中的表达及与临床病理特征和预后的关系 被引量:5
6
作者 张伟 蔡振花 +5 位作者 周瑞轻 刘小慧 江麒麟 刘红波 董永杰 冯运章 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第13期17-22,共6页
目的探究胃癌患者血清microRNA-122-5p(miR-122-5p)、microRNA-133a-3p(miR-133a-3p)mRNA相对表达量与临床病理特征及预后的关系。方法采集胃癌患者血清标本94例,以相同例数的健康体检者的血清样本作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反... 目的探究胃癌患者血清microRNA-122-5p(miR-122-5p)、microRNA-133a-3p(miR-133a-3p)mRNA相对表达量与临床病理特征及预后的关系。方法采集胃癌患者血清标本94例,以相同例数的健康体检者的血清样本作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-qPCR)技术检测血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量,同时分析两者与胃癌患者临床病理特征的关系;绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析miR-122-5p、miR-133a-3p的表达与胃癌患者预后的关系。结果胃癌患者血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量低于健康体检者(P<0.05);有淋巴结转移、分化程度低、浸润至浆膜层的患者血清miR-122-5p mRNA相对表达量低于无淋巴结转移,中、高分化程度、浸润至黏膜下各层的患者(P<0.05);有淋巴结转移、低分化程度、浸润至浆膜层、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的患者血清miR-133a-3p mRNA相对表达量低于无淋巴结转移,中、高分化程度,浸润至黏膜下各层,TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期的患者(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线结果显示,miR-122-5p低表达胃癌患者5年生存率低于miR-122-5p高表达胃癌患者(P<0.05);miR-133a-3p低表达胃癌患者的5年生存率低于miR-133a-3p高表达胃癌患者(P<0.05)。结论胃癌患者血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量呈低表达,并且两者与胃癌的恶性程度和患者不良预后密切相关,血清miR-122-5p、miR-133a-3p可能成为胃癌患者预后预测的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 胃肿瘤 microrna-122-5p microrna-133a-3p 临床病理特征 预后
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miR-130a-3p对膀胱癌细胞侵袭、迁移和凋亡的影响及对SPOCK1的调控作用 被引量:9
7
作者 宋歌 董彪 朱照伟 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2020年第4期541-546,共6页
目的:探讨微小RNA-130a-3p(miR-130a-3p)对膀胱癌细胞侵袭、迁移和凋亡的影响及其分子机制。方法:采用qRT-PCR和Western blot法检测膀胱癌组织、癌旁正常组织以及人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1、膀胱癌细胞5637中miR-130a-3p和细胞外基质... 目的:探讨微小RNA-130a-3p(miR-130a-3p)对膀胱癌细胞侵袭、迁移和凋亡的影响及其分子机制。方法:采用qRT-PCR和Western blot法检测膀胱癌组织、癌旁正常组织以及人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1、膀胱癌细胞5637中miR-130a-3p和细胞外基质蛋白多糖(SPOCK1)mRNA及蛋白的表达。取5637细胞,分别转染miR-130a-3p mimics或si-SPOCK1,同时设阴性对照和空白对照,用MTT法检测细胞存活,Transwell小室法测定细胞侵袭和迁移,AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot法检测MMP-2和Caspase-3蛋白的表达;用生物学信息预测和双荧光素酶报告实验分析miR-130a-3p和SPOCK1的靶向关系。结果:与癌旁组织和SV-HUC-1细胞相比,膀胱癌组织和细胞中miR-130a-3p的表达下调,SPOCK1 mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05)。转染miR-130a-3p或沉默SPOCK1均可抑制膀胱癌细胞存活、侵袭和迁移,诱导其凋亡,并抑制MMP-2蛋白表达,促进Caspase-3蛋白表达(P<0.05)。经验证SPOCK1是miR-130a-3p的靶基因。结论:miR-130a-3p可能通过靶向调控SPOCK1的表达来抑制膀胱癌细胞侵袭、迁移,诱导其凋亡。 展开更多
关键词 膀胱癌 凋亡 miR-130a-3p SpOCK1
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MicroRNA-199a-3p对人骨肉瘤细胞凋亡的影响 被引量:3
8
作者 朱楠 张积森 +2 位作者 荆珏华 钱军 仇汪宝 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期159-163,共5页
目的:探讨microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:用合成的成熟miR-199a-3p序列模拟物(miR-199a-3p mimics)转染人骨肉瘤细胞(U2-OS),以阴性对照物序列(NC mimics)转染细胞作为阴性对照。转染后应用实时定量逆... 目的:探讨microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:用合成的成熟miR-199a-3p序列模拟物(miR-199a-3p mimics)转染人骨肉瘤细胞(U2-OS),以阴性对照物序列(NC mimics)转染细胞作为阴性对照。转染后应用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞miR-199a-3p的表达量,Western blot法检测各组细胞中髓样细胞白血病-1(MCL-1)蛋白的表达水平及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的剪切情况,利用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,并对实验结果进行统计学分析。结果:与对照组相比,转染miR-199a-3p mimics的实验组细胞中,miR-199a-3p的表达量明显升高,MCL-1蛋白的表达降低,PARP蛋白的剪切水平增加,细胞的凋亡率增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-199a-3p可以有效促进骨肉瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 骨肉瘤 凋亡 microrna-199a-3p 转染
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血清microRNA-21、microRNA-193a-3p表达与结直肠癌患者手术预后的关系 被引量:5
9
作者 张丽 凌晨 沈轶骊 《中国现代医学杂志》 CAS 2024年第5期1-6,共6页
目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访1... 目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访16个月,记录患者的预后生存结局,多因素逐步Logistic回归分析结直肠癌患者手术预后的影响因素,评估血清miR-21、miR-193a-3p对结直肠癌患者预后的预测效能。结果112例结直肠癌患者死亡22例,病死率为19.64%;生存90例,生存率为80.36%。死亡组术前血清miR-21 mRNA相对表达量、临床分期Ⅲ期占比、淋巴结转移率均高于生存组(P<0.05),血清miR-193a-3p m RNA相对表达量低于生存组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,临床分期Ⅲ期[OR=3.777(95%CI:1.399,10.194)]、淋巴结转移[OR=5.099(95%CI:1.715,15.156)]、miR-21表达升高[OR=4.889(95%CI:1.645,14.533)]、miR-193a-3p表达降低[OR=4.402(95%CI:1.481,13.084)]均是直肠癌患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特性曲线分析结果显示,血清miR-21、miR-193a-3p单一及联合预测结直肠癌预后的敏感性分别为69.04%(95%CI:0.487,0.813)、72.73%(95%CI:0.495,0.884)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为62.22%(95%CI:0.513,0.720)、68.89%(95%CI:0.581,0.780)、90.00%(95%CI:0.814,0.950),曲线下面积分别为0.782、0.731和0.901。结论结直肠癌患者术前miR-21、miR-193a-3p表达与术后预后密切相关,且在结直肠癌患者的预后结局中表现出良好的预测效能。 展开更多
关键词 结直肠癌 手术 预后 microrna-21 microrna-193a-3p
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miR-130a-3p通过HGF/MET信号通路抑制乳腺癌细胞MCF-7侵袭 被引量:2
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作者 刘海旺 张宏旭 +2 位作者 李春辉 郝美玲 王军 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1243-1248,共6页
目的:探究miR-130a-3p通过HGF/MET信号通路调控上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)影响乳腺癌细胞侵袭转移的分子机制。方法:收集承德医学院附属医院2018年1月至10月收治的22例乳腺癌患者癌组织和配对癌旁组织标本,... 目的:探究miR-130a-3p通过HGF/MET信号通路调控上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)影响乳腺癌细胞侵袭转移的分子机制。方法:收集承德医学院附属医院2018年1月至10月收治的22例乳腺癌患者癌组织和配对癌旁组织标本,乳腺癌细胞系(MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-453)和正常乳腺上皮细胞MCF10A来自承德医学院基础研究所,然后采用q PCR检测组织和细胞系中miR-130a-3p的表达情况;将实验分为对照组、miR-130a-3p mimics组、miR-130a-3p inhibitor组、PHA665752(MET小分子抑制剂)转染组及共转PHA665752+miR-130a-3p inhibitor组,然后采用CCK-8法和Transwell实验分别检测MCF-7细胞增殖活力、侵袭和迁移能力;WB实验检测MCF-7细胞EMT和HGF/MET信号通路相关蛋白的表达情况;此外,采用双荧光素酶报告基因检测miR-130a-3p与MET之间的靶向关系。结果:miR-130a-3p在乳腺癌组织和细胞系中呈低表达;过表达miR-130a-3p可抑制MCF-7细胞增殖、侵袭、迁移和EMT;而抑制miR-130a-3p出现相反的结果。双荧光素酶报告基因结果证实miR-130a-3p靶向下调MET的表达水平,且miR-130a-3p负调控HGF/MET信号通路的表达;进一步实验证明,miR-130a-3p通过阻断HGF/MET信号通路抑制MCF-7细胞增殖、侵袭、迁移和EMT。结论:miR-130a-3p通过阻断HGF/MET信号通路抑制MCF-7细胞EMT过程,进而抑制MCF-7细胞侵袭转移。 展开更多
关键词 乳腺癌 上皮间质转化 侵袭 转移 miR-130a-3p HGF/MET信号通路
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miR-130a-3p通过抑制CXCL12抑制鼻咽癌细胞增殖与侵袭 被引量:4
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作者 刘春丽 张洁 +3 位作者 齐志伟 梁媛 黄跃雁 张淑君 《中国实验诊断学》 2017年第12期2168-2170,共3页
目的探讨miR-130a-3p对人鼻咽癌细胞CNE-1功能的影响及其可能的靶向基因。方法采用脂质体介导方法将miR-130a-3p模拟物(实验组)或对照模拟物(对照组)转染CNE-1细胞,分别用CCK-8法和Transwell试验检测细胞增殖侵袭和迁移能力变化,Western... 目的探讨miR-130a-3p对人鼻咽癌细胞CNE-1功能的影响及其可能的靶向基因。方法采用脂质体介导方法将miR-130a-3p模拟物(实验组)或对照模拟物(对照组)转染CNE-1细胞,分别用CCK-8法和Transwell试验检测细胞增殖侵袭和迁移能力变化,Western Blot检测趋化因子CXCL12蛋白表达。结果相较对照组,实验组CNE-1细胞的增殖,侵袭和迁移能力增强(P<0.05),细胞中CXCL12蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论 miR-130a-3p可能通过调节CXCL12蛋白表达抑制人鼻咽癌细胞CNE-1细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 鼻咽癌 趋化因子 CXCL12 miR-130a-3p CNE-1细胞
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MiR-130a-3p通过抑制BACH2抑制鼻咽癌细胞增殖和转移 被引量:3
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作者 刘春丽 张洁 +3 位作者 齐志伟 梁媛 黄跃雁 张淑君 《中国地方病防治》 北大核心 2017年第12期1355-1357,共3页
目的探究对鼻咽癌细胞的作用及其靶向基因在鼻咽癌细胞中的相互作用机制.方法应用脂质法将MiR-130a-3p模拟物或pCMV-BACH2重组质粒转染进NPC细胞中,用MTT法检测细胞增殖情况,用划痕试验检测细胞转移功能,用Western bloting检测相关蛋白... 目的探究对鼻咽癌细胞的作用及其靶向基因在鼻咽癌细胞中的相互作用机制.方法应用脂质法将MiR-130a-3p模拟物或pCMV-BACH2重组质粒转染进NPC细胞中,用MTT法检测细胞增殖情况,用划痕试验检测细胞转移功能,用Western bloting检测相关蛋白表达水平.结果 (1)NP9细胞株中miR130a-3p表达量显著低于NPC细胞株,BACH2的mRNA和蛋白质表达量在NPC细胞株明显高于NP9细胞组.(2)miR130a-3p过度表达抑制细胞增殖和转移.(3)miR130a-3p在NPC细胞中靶向作用于BACH2.(4)下调BACH2抑制NPC细胞增殖和迁移.(5)过表达BACH2降低miR130a-3p在NPC细胞的抑制作用.结论 miR130a-3p是一种NPC肿瘤抑制基因,抑制BACH2抑制鼻炎癌细胞增殖和转移. 展开更多
关键词 MiR-130a-3p BACH2 鼻咽癌 EMT
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LncRNA HOTAIR通过miR-130a-3p/ABCC5调控乳腺癌细胞紫杉醇耐药的分子机制研究 被引量:4
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作者 何宇 袁志鹏 +2 位作者 卢志斌 廖景升 贾筠 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第4期316-323,共8页
目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)HOTAIR调控乳腺癌细胞紫杉醇耐药的潜在分子机制。方法筛选出乳腺癌紫杉醇抗性细胞系(MCF7/TR细胞),并且检测MCF7/TR细胞以及亲代细胞的HOTAIR的表达水平以及紫杉醇耐药指标(增殖水平... 目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)HOTAIR调控乳腺癌细胞紫杉醇耐药的潜在分子机制。方法筛选出乳腺癌紫杉醇抗性细胞系(MCF7/TR细胞),并且检测MCF7/TR细胞以及亲代细胞的HOTAIR的表达水平以及紫杉醇耐药指标(增殖水平、凋亡水平、细胞周期、细胞内紫杉醇浓度)。结果敲低HOTAIR后,紫杉醇处理可以显著抑制MCF7/TR细胞的增殖和诱导细胞凋亡,并且诱导MCF7/TR细胞停滞于G_(1)期。敲低HOTAIR后MCF7/TR细胞内紫杉醇浓度升高。miR-130a-3p与HOTAIR存在相互作用。过表达miR-130a-3p时MCF7/TR细胞内紫杉醇浓度明显升高,敲低HOTAIR后,MCF/TR细胞中miR-130a-3p的表达水平升高。miR-130a-3p靶向ABCC5 mRNA的3′端非翻译区。过表达ABCC5时MCF7/TR细胞内紫杉醇浓度明显升高。结论LncRNA HOTAIR通过miR-130a-3p/ABCC5轴减少了紫杉醇耐药细胞中紫杉醇细胞内水平,促进了乳腺癌细胞对紫杉醇的耐药。 展开更多
关键词 HOTAIR miR-130a-3p ABCC5 乳腺癌 紫杉醇
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长非编码RNA ILF3-AS1通过调控miR-130a-3p/PTEN轴抑制宫颈癌细胞的增殖 被引量:1
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作者 胡盈盈 毛蕾蕾 +1 位作者 潘镏镏 屈王蕾 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期524-532,共9页
ILF3反义RNA 1(ILF3 antisense RNA 1,ILF3-AS1)是一条定位于染色体19p13.2的lncRNA,它是白介素增强子结合因子3(interleukin enhancer binding factor 3,ILF3)的反义RNA。ILF3-AS1在多种肿瘤发生发展中发挥关键作用,但其在宫颈癌中的... ILF3反义RNA 1(ILF3 antisense RNA 1,ILF3-AS1)是一条定位于染色体19p13.2的lncRNA,它是白介素增强子结合因子3(interleukin enhancer binding factor 3,ILF3)的反义RNA。ILF3-AS1在多种肿瘤发生发展中发挥关键作用,但其在宫颈癌中的作用尚无研究探讨。本文利用TCGA及GTEx数据库进行生物信息学分析提示,ILF3-AS1在宫颈癌组织中低表达(P<0.001)并与良好预后相关(P=0.045)。qRT-PCR结果显示,ILF3-AS1在宫颈癌组织及SiHa、HeLa、CaSki宫颈癌细胞系中表达较对照组均呈下降趋势。过表达ILF3-AS1可明显抑制宫颈癌细胞增殖活力及促进宫颈癌细胞凋亡。Star Base v3.0数据库分析提示,ILF3-AS1可靶向吸附miR-130a-3p;而miR-130a-3p可靶向结合PTEN。qRT-PCR检测显示,miR-130a-3p在宫颈癌中的表达量明显高于正常宫颈组织(P<0.01)。荧光素酶报告基因结果显示,ILF3-AS1可以与miR-130a-3p特异性结合(P<0.01)。HeLa细胞过表达ILF3-AS1后,miR-130a-3p表达量明显下调(P<0.01);在过表达ILF3-AS1细胞中,同时转染miR-130a-3p mimics,能部分逆转LF3-AS1对于细胞增殖的抑制作用(P<0.001)。HeLa细胞在过表达ILF3-AS1后,磷酸酶及张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)mRNA(P<0.001)及蛋白质(P<0.001)表达量显著升高;当同时转染miR-130a-3p mimics,PTEN的mRNA(P<0.001)及蛋白质(P<0.001)的表达升高被明显抑制。综上,ILF3-AS1可以作为miR-130a-3p的吸附海绵靶向调控PTEN表达,从而抑制宫颈癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 长非编码RNA ILF3反义RNA miR-130a-3p 内源竞争RNA 宫颈癌
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miR-130a-3p下调STAT3对恶性黑素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响 被引量:1
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作者 孙耀辉 宋继权 柯锦 《河北医药》 CAS 2020年第9期1301-1305,1310,共6页
目的探讨miR-130a-3p对黑素瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响以及潜在的作用机制。方法运用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测黑色素瘤细胞A2058、WM239和正常人黑色素细胞HEMn中miR-130a-3p和STAT3 mRNA的表达水平;将miR-NC组... 目的探讨miR-130a-3p对黑素瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响以及潜在的作用机制。方法运用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测黑色素瘤细胞A2058、WM239和正常人黑色素细胞HEMn中miR-130a-3p和STAT3 mRNA的表达水平;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-130a-3p组(转染miR-130a-3p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-130a-3p组(转染anti-miR-130a-3p)、miR-130a-3p+pcDNA3.1组(共转染miR-130a-3p和pcDNA3.1)、miR-130a-3p+pcDNA3.1-STAT3组(共转染miR-130a-3p和pcDNA3.1-STAT3)、miR-NC+WT-STAT3组(共转染miR-NC和WT-STAT3)、miR-NC+MUT-STAT3组(共转染miR-NC和MUT-STAT3)、miR-130a-3p+WT-STAT3组(共转染miR-130a-3p和WT-STAT3)、miR-130a-3p+MUT-STAT3组(共转染miR-130a-3p和MUT-STAT3)均用脂质体法转染至黑素瘤A2058细胞中;采用CCK-8法检测细胞增殖;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测各组细胞的凋亡;Western Blot检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果相较于正常人黑色素细胞HEMn,黑色素瘤细胞A2058、WM239中miR-130a-3p的表达水平显著降低(P<0.05);过表达miR-130a-3p可抑制A2058细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡;抑制Bcl-2、MMP-2蛋白的表达,促进Bax蛋、E-cadherin蛋白的表达。miR-130a-3p靶向调控STAT3的表达。过表达STAT3能逆转miR-130a-3p对A2058细胞增殖、迁移、侵袭的抑制和凋亡的促进作用。结论miR-130a-3p可抑制恶性黑素瘤细胞增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,其机制可能与靶向下调STAT3的表达有关,将可为恶性黑素瘤的预防和治疗提供新靶点。 展开更多
关键词 miR-130a-3p STAT3 恶性黑素瘤 增殖 凋亡 迁移 侵袭
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lncRNA MAGI2-AS3靶向调控miR-130a-5p对柯萨奇病毒B3诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的影响 被引量:1
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作者 朱康宁 郑培明 高岚 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2023年第6期801-806,共6页
目的:探讨lncRNA MAGI2-AS3靶向miR-130a-5p调控柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的分子机制。方法:对照组,用不含药物、病毒的DMEM处理H9C2细胞48 h。CVB3组,用含有100倍半数组织培养感染剂量CVB3的DMEM处理H9C2细胞48 h... 目的:探讨lncRNA MAGI2-AS3靶向miR-130a-5p调控柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的分子机制。方法:对照组,用不含药物、病毒的DMEM处理H9C2细胞48 h。CVB3组,用含有100倍半数组织培养感染剂量CVB3的DMEM处理H9C2细胞48 h(感染)。CVB3+sh-NC组,H9C2细胞转染sh-NC慢病毒后感染CVB3。CVB3+sh-MAGI2-AS3组,H9C2细胞转染sh-MAGI2-AS3慢病毒后感染CVB3。CVB3+miR-NC组,H9C2细胞转染miR-NC后感染CVB3。CVB3+miR-130a-5p组,H9C2细胞转染miR-130a-5p mimic后感染CVB3。sh-MAGI2-AS3+抗miR-NC组,sh-MAGI2-AS3、抗miR-NC共转染H9C2细胞后感染CVB3。sh-MAGI2-AS3+抗miR-130a-5p组,sh-MAGI2-AS3、抗miR-130a-5p共转染H9C2细胞后感染CVB3。qRT-PCR检测MAGI2-AS3、miR-130a-5p相对表达量;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;ELISA法检测TNF-α、IL-6分泌水平;双荧光素酶报告实验验证MAGI2-AS3与miR-130a-5p靶向关系;Western blot检测Bcl-2、Cleaved-Caspase-3蛋白相对表达量。结果:与对照组比较,CVB3组MAGI2-AS3相对表达量、细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平升高,而miR-130a-5p相对表达量、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。分别与CVB3+sh-NC组、CVB3+miR-NC组相比,CVB3+sh-MAGI2-AS3组、CVB3+miR-130a-5p组细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。MAGI2-AS3可靶向调控miR-130a-5p表达。与sh-MAGI2-AS3+抗miR-NC组比较,sh-MAGI2-AS3+抗miR-130a-5p组细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:沉默MAGI2-AS3可通过上调miR-130a-5p而抑制细胞凋亡、炎症反应,进而减轻CVB3诱导的H9C2细胞损伤。 展开更多
关键词 MAGI2-AS3 miR-130a-5p 柯萨奇病毒B3 大鼠 心肌细胞
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MicroRNA-200a-3p通过靶点蛋白ZEB2和e钙粘蛋白对膀胱癌细胞的生物学影响 被引量:1
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作者 卢毅 俞凌 +3 位作者 俞鹏奎 林建喜 张晓 孟宏舟 《浙江创伤外科》 2021年第6期1013-1016,共4页
目的分析miR-200a-3p在膀胱癌中的生物学作用。方法选取于2018年3月至2020年3月在本院行膀胱部分切除术或根治性膀胱切除术的9例膀胱癌患者,采用qPCR检测膀胱癌组织中miR-200a-3p水平、组织学分析肿瘤形态、WB法测定蛋白表达情况。结果m... 目的分析miR-200a-3p在膀胱癌中的生物学作用。方法选取于2018年3月至2020年3月在本院行膀胱部分切除术或根治性膀胱切除术的9例膀胱癌患者,采用qPCR检测膀胱癌组织中miR-200a-3p水平、组织学分析肿瘤形态、WB法测定蛋白表达情况。结果miR-200a-3p在膀胱癌组织中显著下调。组织学分析结果显示膀胱癌黏膜坏死与肉芽组织增生、多核巨噬细胞聚集和浸润性尿路上皮癌有关。蛋白表达结果显示E-钙粘蛋白显著上调、ZEB2蛋白显著下调。推测miR-200a-3p可与E-cadherin和ZEB2相关调控膀胱癌的侵袭和迁移。结论miR-200a-3p可以作为靶向ZEB2的生物标志物,负调控ZEB2的表达,这些发现将有助于寻找新的膀胱癌治疗靶点。 展开更多
关键词 microrna-200a-3p E-钙粘蛋白 ZEB2 膀胱癌
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MicroRNA-34a-5p在肝纤维化中的表达及作用 被引量:2
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作者 朱海东 胡东坡 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2019年第5期859-865,共7页
目的:探讨大鼠肝纤维化组织及活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平及其在肝纤维化中的作用。方法:建立肝纤维化大鼠模型,转化生长因子-β1(TGF-β1)活化肝星状细胞,采用HE染色观察肝脏组织形态学变化,采用RT-PCR测定大鼠肝组织和活化... 目的:探讨大鼠肝纤维化组织及活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平及其在肝纤维化中的作用。方法:建立肝纤维化大鼠模型,转化生长因子-β1(TGF-β1)活化肝星状细胞,采用HE染色观察肝脏组织形态学变化,采用RT-PCR测定大鼠肝组织和活化肝星状细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和MicroRNA-34a-5p水平。将肝纤维化模型大鼠根据随机数字表法分为空白对照组、阴性转染对照组和MicroRNA-34a-5p组;将TGF-β1活化的HSC-T6细胞分为空白对照组、阴性转染对照组和MicroRNA-34a-5p组。采用RT-PCR和蛋白质印迹法测定3组大鼠肝组织和肝星状细胞中α-SMA、I型胶原蛋白(collagenI)、沉默调节蛋白1(SIRT1)、分泌型糖蛋白-3α(Wnt-3α)、分泌型糖蛋白-5α(Wnt-5α)和β-波链蛋白(β-catenin)的水平。结果:与对照组比较,肝纤维化组大鼠肝组织和活化肝星状细胞中α-SMA水平升高(P<0.05),MicroRNA-34a-5p水平降低(P<0.05)。与空白对照组和阴性转染对照组比较,MicroRNA-34a-5p转染组大鼠肝组织和活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平升高(P<0.05),而α-SMA、collagenI、SIRT1、Wnt-3α、Wnt-5α和β-catenin的mRNA和蛋白水平均下降(P<0.05),空白对照组和阴性转染对照组间大鼠肝组织和活化肝星状细胞中各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肝纤维化组织及活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平降低,可能通过靶向SIRT1而抑制Wnt/β-catenin信号通路,从而发挥抗肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 肝纤维化 肝星状细胞 microrna-34a-5p Ⅰ型胶原蛋白 沉默调节蛋白1 分泌型糖蛋白-3α 分泌型糖蛋白-5α β-波链蛋白 大鼠
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MicroRNA-450a-3p通过抑制Bub1基因的表达调控小鼠细胞增殖和胚胎发育
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作者 刘晨 杨丹丹 +5 位作者 蒋凤兵 白慧丽 李宝林 罗敏 湛晓琴 施琼 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1651-1657,共7页
目的:探讨microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)对小鼠细胞增殖和胚胎发育的调控是否通过抑制Bub1基因的表达实现。方法:用萤光素酶报告基因实验检测miR-450a-3p能否特异性结合于Bub1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);用Western b... 目的:探讨microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)对小鼠细胞增殖和胚胎发育的调控是否通过抑制Bub1基因的表达实现。方法:用萤光素酶报告基因实验检测miR-450a-3p能否特异性结合于Bub1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);用Western blotting和实时荧光定量RT-PCR检测miR-450a-3p对Bub1蛋白和mRNA表达;分别通过MTT、Hoechst染色、流式细胞术等分析miR-450a-3p对小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)增殖、凋亡和细胞周期等生物学功能的调控;利用染色体核型分析技术检测miR-450a-3p对MEFs染色体数目的影响。结果:miR-450a-3p能与靶基因Bub1的3’-UTR结合,在翻译水平抑制MEFs中Bub1的表达,然而其转录水平的表达却不受影响。miR-450a-3p通过下调靶基因Bub1的表达,抑制MEFs的增殖,促进细胞的凋亡;而且miR-450a-3p还能使大多数细胞停滞在G1/G0期,使细胞分裂受阻,导致细胞染色体数目异常。结论:miR-450a-3p能够调控靶基因Bub1的表达,抑制MEFs增殖,并最终影响小鼠胚胎的发育。 展开更多
关键词 microrna-450a-3p 小鼠胚胎成纤维细胞 基因 Bub1 胚胎
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慢病毒载体对MDA-MB-231细胞中microRNA-18a-3P表达的影响
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作者 王立斌 王丹妮 +5 位作者 马荣 张旭 田进海 李晓菡 冯惠敏 马芳 《中国现代医学杂志》 CAS 2020年第2期14-21,共8页
目的构建人microRNA-18a-3P(miR-18a-3P)过表达及干扰慢病毒载体,研究病毒感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的步骤和方法。方法 PCR技术扩增相应目的基因片段并进行酶切,回收后与目的基因连接,产物转化细菌感受态细胞,对阳性克隆测序行对... 目的构建人microRNA-18a-3P(miR-18a-3P)过表达及干扰慢病毒载体,研究病毒感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的步骤和方法。方法 PCR技术扩增相应目的基因片段并进行酶切,回收后与目的基因连接,产物转化细菌感受态细胞,对阳性克隆测序行对比分析,构建miR-18a-3P过表达及干扰慢病毒载体,荧光法测定病毒滴定;倒置荧光显微镜观察人乳腺癌细胞MDA-MB-231转染及筛选过程的转染效率,筛选最佳MOI值;qRT-PCR检测慢病毒转染后MDA-MB-231细胞内miR-18a-3P的表达。结果测序分析证实重组慢病毒构建正确;过表达及干扰慢病毒滴度分别为2×10~9和1×10~9 TU/ml;加Polybrene较未加Polybrene转染效率升高,当感染复数为10 TU/ml,Polybrene浓度为1μg/ml时,转染效率最佳;miR-18a-3P转染组过表达miR-18a-3P的相对表达量较空白对照组、阴性对照组高(P<0.05),miR-18a-3P转染组干扰表达miR-18a-3P的相对表达量较空白对照组、阴性对照组低(P<0.05)。结论成功构建了miR-18a-3P过表达及干扰慢病毒表达载体,对人乳腺癌细胞MDA-MB-231进行转染和筛选后,可快速高效率获得所需目的细胞。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 microrna-18a-3p/微RNAs 慢病毒感染
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