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microRNA-1271靶向调控白血病细胞CYLD蛋白的表达
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作者 张茜 王媛媛 +1 位作者 刘丽萍 倪芳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第7期908-911,共4页
目的探讨人白血病细胞中微小RNA(microRNA)-1271对CYLD蛋白表达的调控作用。方法 qRT-PCR检测microRNA-1271在不同的人白血病细胞系、临床初诊未治的几种类型原代白血病细胞、正常人外周血单个核细胞中的表达差异,利用Targetscan信息学... 目的探讨人白血病细胞中微小RNA(microRNA)-1271对CYLD蛋白表达的调控作用。方法 qRT-PCR检测microRNA-1271在不同的人白血病细胞系、临床初诊未治的几种类型原代白血病细胞、正常人外周血单个核细胞中的表达差异,利用Targetscan信息学预测软件预测microRNA-1271靶向CYLD基因,构建携带靶基因野生型及突变型3’非翻译区(3’UTR)(缺失了整段预测的microRNA-1271结合序列)的双荧光素酶报告基因质粒,采用脂质体Lipofectamine 3000包裹双荧光素酶重组质粒及microRNA-1271模拟物(mimic)或阴性对照,共转染HEK293A细胞,应用双荧光素酶报告基因检测试剂盒测定荧光素酶活性。FAM标记的microRNA-1271抑制物和阴性对照分别核转染至人白血病细胞系K562细胞,Western blot法检测CYLD蛋白水平的表达变化。结果 microRNA-1271在不同人白血病细胞系以及临床初诊未治的原代白血病细胞中的表达均明显高于正常人外周血单个核细胞,双荧光素酶报告基因实验验证CYLD是microRNA-1271的潜在靶基因;K562细胞中转染microRNA-1271抑制物下调microRNA-1271后,Western blot法检测结果显示CYLD蛋白水平明显上调。结论人白血病细胞中microRNA-1271的表达上调,下调microRNA-1271后可以促进靶基因CYLD蛋白的表达,microRNA-1271有可能成为白血病治疗的新靶点。 展开更多
关键词 白血病 MICRORNA microrna-1271 CYLD
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食管鳞状细胞癌患者microRNA-127-3p的表达水平及临床意义 被引量:6
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作者 符佳 汪砥 +2 位作者 江金琼 刘劲 段华新 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第20期28-33,共6页
目的探讨miR-127-3p在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及其临床意义。方法选取2013年2月-2015年2月于湖南省人民医院和长沙市中心医院行外科手术的80例ESCC患者癌组织及癌旁组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-127-3p mRNA相... 目的探讨miR-127-3p在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及其临床意义。方法选取2013年2月-2015年2月于湖南省人民医院和长沙市中心医院行外科手术的80例ESCC患者癌组织及癌旁组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-127-3p mRNA相对表达量,利用免疫组织化学法检测SKI蛋白在患者癌组织及癌旁组织标本中的表达,并对所有患者进行≥3年的随访。同时检测ESCC细胞株Eca109和Kyse150及正常人食管上皮细胞株Het-1a中miR-127-3p的表达水平。结果免疫组织化学染色结果表明,癌组织中SKI蛋白表达阳性率较癌旁组织升高(P<0.05);ESCC细胞株Eca109、Kyse150中miR-127-3p相对表达量低于正常人食管上皮细胞株Het-1a(P<0.05);临床分期Ⅲ期患者miR-127-3p低表达率高于Ⅰ期和Ⅱ期(P<0.05),有淋巴结转移和饮酒史患者miR-127-3p低表达率高于无淋巴结转移和无饮酒史患者(P<0.05),miR-127-3p低表达患者的中位无进展期较高表达患者短(P<0.05)。结论miR-127-3p通过靶向调控SKI蛋白的表达参与ESCC的发生,其低表达可能参与ESCC的侵袭及转移过程,并显著影响患者的预后。 展开更多
关键词 食管肿瘤 鳞状细胞 miR-127-3p/微RNAs SKI蛋白/蛋白
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Dynamic Expression of MicroRNA-127 During Porcine Prenatal and Postnatal Skeletal Muscle Development 被引量:6
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作者 YANG Ya-lan LI Yan +6 位作者 LIANG Ru-yi ZHOU Rong AO Hong MU Yu-lian YANG Shu-lin LI Kui TANG Zhong-lin 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2014年第6期1331-1339,共9页
MicroRNAs (miRNAs), evolutionarily conserved non-coding RNAs in length 21-24 bp, play a critical role in skeletal muscle development. In this study, to explore the function of mircoRNA-127 in porcine skeletal muscle... MicroRNAs (miRNAs), evolutionarily conserved non-coding RNAs in length 21-24 bp, play a critical role in skeletal muscle development. In this study, to explore the function of mircoRNA-127 in porcine skeletal muscle development, eight tissue samples from adult pigs and longissimus muscle samples at 26 developmental stages were collected from Tongcheng and Landrace pigs. The spatial-temporal expression proifles of miRNA-127 were carried out using step-loop quantitative real-time PCR (stem-loop RT-PCR). To explore the molecular functions of miRNA-127, we predicted its target genes and performed functional annotation using bioinformatics methods. Results suggested that miRNA-127 was abundantly expressed in heart, ovary, uterus and spleen tissues and was weakly expressed in liver, lung, kidney and small intestine in both Tongcheng and Landrace pigs. And miRNA-127 showed signiifcant expression differences in heart, ovary, spleen and uterus tissues between these two breeds. miRNA-127 basically kept at a relatively stable high level in middle and later embryonic stages and a low expression level in early embryonic stages and postnatal stages, but the expression levels of miRNA-127 were higher in Tongcheng pigs than in Landrace at most developmental stages. miRNA-127 potentially regulated 240 candidate genes. Results of Gene Ontology and KEGG pathway analysis indicated that these genes could be involved in many molecular functions and mechanisms, such as regulation of the force of heart contraction, regulation of transcription, regulation of T cell differentiation, MAPK signaling pathway and GnRH signaling pathway. Many signiifcantly enriched GO terms and KEGG pathways were related to skeletal muscle development. This study will be helpful to understand the biological function for miRNA-127 and identify candidate gene associated with meat production traits in pigs. 展开更多
关键词 PORCINE microrna-127 expression profiles skeletal muscle development target prediction
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EBNA1通过调控miR-127-5p影响伯基特淋巴瘤细胞增殖、凋亡和代谢
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作者 王顺永 王彦 +6 位作者 李晗婧 曹火亮 郑锖锖 黄冰榆 邱晨希 陈宁宁 付海英 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2026年第1期35-44,共10页
目的:初步阐明EBNA1通过表观遗传方式调控miR-127-5p并影响伯基特淋巴瘤(BL)细胞增殖、凋亡和代谢的作用。方法:通过慢病毒shRNA转导,在EBV^(+)的RajiBL细胞中敲低EBNA1的表达。分别采用定量实时PCR、焦磷酸测序和流式细胞术评估基因表... 目的:初步阐明EBNA1通过表观遗传方式调控miR-127-5p并影响伯基特淋巴瘤(BL)细胞增殖、凋亡和代谢的作用。方法:通过慢病毒shRNA转导,在EBV^(+)的RajiBL细胞中敲低EBNA1的表达。分别采用定量实时PCR、焦磷酸测序和流式细胞术评估基因表达、启动子甲基化和细胞凋亡。通过CCK-8实验评估细胞增殖情况,使用SeahorseXF糖酵解速率分析仪分析细胞糖酵解活性。UHPLC-QE-MS对EBV^(+)Raji细胞和EBV-CA46BL细胞进行代谢组学的比较研究。结果:与CA46细胞比较,Raji细胞中miR-127-5p的转录水平显著升高(P<0.05)。沉默EBNA1均可显著抑制Raji细胞增殖、糖酵解水平、miR-127-5p转录水平,促进Raji细胞凋亡,增加Caspase-3和LCLAT1蛋白表达(P<0.05)。焦磷酸测序证实miR-127-5p转录水平的下调与EBNA1-shRNAi-Raji细胞的启动子甲基化增加相关。代谢组学分析发现,与CA46细胞相比,Raji细胞产生了更多肿瘤代谢相关的代谢物。结论:EBNA1通过去甲基化作用上调miR-127-5p的表达,促进EBV^(+)BL细胞的增殖和糖酵解代谢,并抑制其凋亡。 展开更多
关键词 伯基特淋巴瘤 EB病毒 miR-127-5p 甲基化
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MicroRNA-613在肿瘤代谢重编程与治疗抵抗中的研究进展
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作者 张文典 陈仪萍 《临床合理用药》 2026年第5期163-166,共4页
近年来,基于RNA的肿瘤治疗方法不断获得监管批准,RNA药物的发展给肿瘤治疗领域带来了新的希望。肿瘤治疗经常由于获得性或固有的耐药性而失败,肿瘤代谢重编程已被公认为治疗耐药性的主要机制之一。MicroRNA-613是一种在多种癌症中具有... 近年来,基于RNA的肿瘤治疗方法不断获得监管批准,RNA药物的发展给肿瘤治疗领域带来了新的希望。肿瘤治疗经常由于获得性或固有的耐药性而失败,肿瘤代谢重编程已被公认为治疗耐药性的主要机制之一。MicroRNA-613是一种在多种癌症中具有调控作用的非编码RNA,因其在恶性肿瘤、炎症性疾病及代谢紊乱中的多效性调控功能而备受关注,其在肿瘤代谢重编程与治疗抵抗中具有多重调控作用。研究表明,MicroRNA-613通过靶向多个关键基因,在肿瘤抑制、细胞增殖、凋亡和迁移等生物学过程中发挥重要作用。文章系统综述了MicroRNA-613在代谢中的调控机制,并揭示其在化疗、放疗及靶向治疗抵抗中的角色,并探讨了MicroRNA-613的转化潜力及当前面临的挑战,为未来精准治疗策略提供理论依据。 展开更多
关键词 恶性肿瘤 RNA药物 microrna-613 肿瘤代谢重编程 治疗抵抗
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microRNA-127抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的表观遗传调控研究 被引量:8
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作者 曹琼洁 董菁 +3 位作者 李丽 陈晓燕 王教 闫东升 《中华眼视光学与视觉科学杂志》 CAS CSCD 2018年第9期546-551,565,共7页
目的:研究microRNA-127(miR-127)在人葡萄膜黑色素瘤细胞中的表达水平及其对细胞增殖的影响。方法:实验研究。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-127在葡萄膜黑色素瘤细胞M23和SP6.5与正常葡萄膜黑色素细胞UM95中的表达水平。细胞... 目的:研究microRNA-127(miR-127)在人葡萄膜黑色素瘤细胞中的表达水平及其对细胞增殖的影响。方法:实验研究。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-127在葡萄膜黑色素瘤细胞M23和SP6.5与正常葡萄膜黑色素细胞UM95中的表达水平。细胞实验通过阳离子脂质体介导的方法将miR-127和阴性对照(NC)转染入M23和SP6.5中,并应用细胞增殖实验法(MTS法)和流式细胞技术分别检测细胞增殖能力和细胞周期,采用WesternBlot法检测转染miR-127后细胞周期相关蛋白的表达。另外,通过RT-qPCR检测用表观药物5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-dC)和(或)曲古抑菌素A(TSA)处理后的M23和SP6.5细胞内miR-127的表达水平。MiR-127的表达量及细胞实验各参数在2组间比较采用独立样本t检验。结果:miR-127在M23和SP6.5中的表达水平低于UM95(t=72.2、591.5,P<0.001)。MTS结果显示,在M23和SP6.5细胞中,转染miR-127组相对细胞数目较NC组的100%分别减少至(62.3±4.2)%和(65.4±2.3)%,差异具有统计学意义(t=12.7、21.6,P<0.001)。流式细胞技术分析显示,转染miR-127组处于G0/G1期的M23和SP6.5细胞数量比例明显高于NC组(t=-6.7,P=0.003;t=-9.9,P<0.001),同时处于S期的M23和SP6.5细胞数量比例明显低于NC组(t=8.6,P=0.001;t=12.7,P<0.001)。WesternBlot结果表明miR-127可明显降低M23和SP6.5细胞内磷酸化Rb蛋白的表达水平(t=22.2、15.6,P<0.001)。此外,miR-127在M23和SP6.5细胞中的表达可被5-Aza-dC和TSA诱导上调(P<0.05)。结论:miR-127通过抑制细胞周期而抑制人葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖,并可被DNA甲基化和组蛋白乙酰化表观遗传机制调控。 展开更多
关键词 葡萄膜黑色素瘤 microrna-127 细胞周期 细胞增殖 表观遗传调控
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老年多重耐药菌感染肺炎患者miR-127-5p、miR-127、miR-155表达水平及其与免疫相关细胞因子的相关性 被引量:5
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作者 毛燕青 付婷 +2 位作者 王娟 王亚楠 李洁 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第3期385-390,共6页
目的探究老年多重耐药菌感染肺炎患者微小核糖核酸(miR)-127-5p、miR-127、miR-155表达水平,并分析其与免疫相关细胞因子的相关性。方法选取2020年6月到2022年6月本院收治的65例老年多重耐药菌感染肺炎患者作为观察组,并选取同期健康体... 目的探究老年多重耐药菌感染肺炎患者微小核糖核酸(miR)-127-5p、miR-127、miR-155表达水平,并分析其与免疫相关细胞因子的相关性。方法选取2020年6月到2022年6月本院收治的65例老年多重耐药菌感染肺炎患者作为观察组,并选取同期健康体检人员80例作为对照A组和同期收治的老年普通肺炎患者80例作为对照B组。比较三组血清miR-127-5p、miR-127、miR-155表达水平和γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4、IL-17、转化生长因子-β(TGF-β)水平,采用Pearson相关分析血清miR-127-5p、miR-127和miR-155表达水平与免疫相关细胞因子的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析三者单独及联合对老年多重耐药菌感染肺炎的诊断价值。结果对照B组和观察组血清miR-127-5p、IFN-γ水平低于对照A组,且观察组低于对照B组(P<0.05);而对照B组和观察组血清miR-127、miR-155、IL-4、IL-17、TGF-β水平高于对照A组,且观察组高于对照B组(P<0.05)。血清miR-127-5p表达水平与血清IFN-γ水平呈正相关(r=0.463,P<0.05),与血清IL-4、IL-17、TGF-β水平呈负相关(r=-0.378、-0.396、-0.408,P<0.05);而血清miR-127和miR-155表达水平与血清IFN-γ水平呈负相关(r=-0.267、-0.513,P<0.05),与血清IL-4、IL-17、TGF-β水平呈正相关(r=0.306、0.273、0.330和r=0.410、0.453、0.385,P<0.05)。血清miR-127-5p、miR-127和miR-155表达水平单独及联合诊断对老年多重耐药菌感染肺炎具有一定的诊断价值,其AUC值分别为0.811、0.733、0.817、0.906,敏感度为90.77%、60.00%、67.69%、84.62%,特异度为66.87%、80.62%、83.75%、83.18%。结论miR-127-5p、miR-127和miR-155在老年多重耐药菌感染肺炎患者中差异性表达,与免疫相关细胞因子具有一定的相关性,三者联合检测对老年多重耐药菌感染肺炎具有较好的诊断价值。 展开更多
关键词 老年 多重耐药菌 肺炎 微小RNA-127-5p 微小RNA-127 微小RNA-155 免疫因子 相关性
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鸡痘病毒ORF127蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立与应用
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作者 华炯钢 朱寅初 +6 位作者 叶加林 张存 陈柳 倪征 付媛 霍苏馨 云涛 《浙江农业学报》 北大核心 2025年第10期2057-2065,共9页
为建立快速、准确的鸡痘病毒(fowlpox virus,FPV)抗体检测方法,将FPV ORF127基因的抗原表位区域克隆于pET-28a(+)原核表达载体,诱导表达并纯化获得FPV ORF127截短蛋白,以纯化的蛋白作为包被抗原,通过优化各反应条件,建立检测FPV抗体的间... 为建立快速、准确的鸡痘病毒(fowlpox virus,FPV)抗体检测方法,将FPV ORF127基因的抗原表位区域克隆于pET-28a(+)原核表达载体,诱导表达并纯化获得FPV ORF127截短蛋白,以纯化的蛋白作为包被抗原,通过优化各反应条件,建立检测FPV抗体的间接ELISA方法,经特异性、敏感性、重复性等试验和临床血清样本检测进行系统验证。结果显示,间接ELISA检测FPV抗体的最佳反应条件为:包被抗原质量浓度为10μg·mL^(-1),待检血清稀释度为1∶100,酶标二抗稀释度为1∶25000;特异性试验结果显示,除FPV阳性血清呈阳性反应外,与其他6种病毒(新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒、鸡传染性法氏囊病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、禽腺病毒4型、火鸡疱疹病毒)的阳性血清均无交叉反应;敏感性结果显示,FPV阳性血清稀释800倍后检测结果仍为阳性;批内、批间重复试验结果显示,批内变异系数为1.81%~7.07%,批间变异系数为2.12%~7.16%,均小于10%。临床血清样品检测结果显示,180份血清样本总阳性率为79.4%(143/180)。上述结果表明,本研究建立的间接ELISA方法特异性强、敏感性高、重复性和稳定性好,可为免疫鸡群FPV抗体水平监测和FPV流行病学调查提供技术支撑。 展开更多
关键词 鸡痘病毒 ORF127蛋白 间接ELISA 抗体
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血清miR-146a、miR-127-5p在重症肺炎合并脓毒血症患者的表达及联合检测的临床意义
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作者 陈苗苗 易会兴 许文林 《国际检验医学杂志》 2025年第23期2902-2907,共6页
目的探讨血清微小核糖核酸(miR)-146a、miR-127-5p在重症肺炎合并脓毒血症患者的表达及联合检测的临床意义。方法选取2020年1月至2023年12月该院重症监护室收治的重症肺炎合并脓毒血症患者118例(研究组)作为研究对象。另选同期该院收治... 目的探讨血清微小核糖核酸(miR)-146a、miR-127-5p在重症肺炎合并脓毒血症患者的表达及联合检测的临床意义。方法选取2020年1月至2023年12月该院重症监护室收治的重症肺炎合并脓毒血症患者118例(研究组)作为研究对象。另选同期该院收治的125例单纯重症肺炎患者作为重症肺炎组,以及143例体检的健康志愿者作为对照组。根据研究组脓毒血症严重程度分为轻度组(n=51)、中度组(n=35)和重度组(n=32),再根据其预后情况分为预后良好组(n=92)和预后不良组(n=26)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组miR-146a、miR-127-5p表达,酶联免疫吸附试验检测各组炎症因子[白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、降钙素原(PCT)]水平。Pearson相关性分析miR-146a、miR-127-5p与各因素之间的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-146a、miR-127-5p表达对研究组患者预后不良的诊断价值。结果研究组miR-146a表达高于重症肺炎组和对照组,重症肺炎组miR-146a表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组miR-127-5p表达低于重症肺炎组和对照组,重症肺炎组miR-127-5p表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。各组炎症因子(IL-6、TNF-α、PCT)及miR-146a表达随着患者疾病严重程度增加而增加,而miR-127-5p表达逐渐降低(P<0.05)。预后不良组机械通气时间、炎症因子(IL-6、TNF-α、PCT)及miR-146a表达高于预后良好组,miR-127-5p表达低于预后良好组(P<0.05)。血清miR-146a表达与炎症因子(IL-6、TNF-α、PCT)水平呈正相关(P<0.05);血清miR-127-5p表达与炎症因子(IL-6、TNF-α、PCT)水平呈负相关(P<0.05)。血清miR-146a、miR-127-5p单独诊断研究组患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.780(95%CI:0.695~0.851)、0.793(95%CI:0.709~0.862)。二者联合诊断的AUC为0.905(95%CI:0.837~0.951),优于各自单独诊断(Z_(二者联合-miR-146a)=2.802、Z_(二者联合-miR-127-5p)=2.533,P=0.005、P=0.011)。结论血清miR-146a和miR-127-5p表达随重症肺炎合并脓毒血症患者疾病严重程度的增加而发生变化,并与其炎症因子水平密切相关。 展开更多
关键词 微小核糖核酸-146a 微小核糖核酸-127-5p 重症肺炎 脓毒血症 预后
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MicroRNA-34a通过调控Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病进展的机制探讨
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作者 刘虹 张玥玥 +4 位作者 王一琳 王彩丽 王晓敏 毛敏 李燕 《天津医药》 2025年第8期785-790,共6页
目的探讨微小RNA(miRNA)-34a通过Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病(CLL)疾病进展的作用机制。方法选用人慢性B细胞白血病细胞MEC-1。实验一分组:p53激动剂组和Control组;实验二分组:Control组、miR-34a-5p mimic组及对照组、miR-34a-5p in... 目的探讨微小RNA(miRNA)-34a通过Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病(CLL)疾病进展的作用机制。方法选用人慢性B细胞白血病细胞MEC-1。实验一分组:p53激动剂组和Control组;实验二分组:Control组、miR-34a-5p mimic组及对照组、miR-34a-5p inhibitor组及对照组、miR-34a-5p inhibitor+Wnt抑制剂XAV-939组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组细胞中miR-34a-5p表达水平;CCK8检测细胞增殖能力;Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;双萤光素酶报告实验检测p53与miR-34a-5p及miR-34a-5p与Wnt1的靶向关系;Western blot检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达。结果在MEC-1细胞中:①p53激动剂组中miR-34a表达升高,增殖受抑制(P<0.05);双萤光素酶报告实验证实miR-34a-5p与p53之间呈现负调控相关性。②miR-34a-5p mimic组miR-34a-5p表达升高,增殖受抑制,迁移能力降低,β-catenin、Cyclin D1蛋白表达下调(P<0.05);miR-34a-5p inhibitor组miR-34a-5p表达降低,增殖升高,迁移能力增强,β-catenin、Cyclin D1蛋白表达上调(P<0.05)。③miR-34a-5p和Wnt1呈现负调控相关性。④与miR-34a-5p inhibitor组相比,XAV-939组的miR-34a-5p表达升高,迁移细胞数减少,β-catenin和Cyclin D1蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论miR-34a在CLL中扮演着抑癌基因的角色,过表达miR-34a可抑制Wnt/β-catenin信号通路,降低细胞的增殖活性和迁移能力,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 白血病 B细胞 WNT信号通路 肿瘤抑制蛋白质P53 细胞增殖 microrna-34a
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MicroRNA-155联合MicroRNA-127对急性呼吸窘迫综合征预后的意义 被引量:4
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作者 凡华 张国新 李庚 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 2021年第6期760-763,共4页
目的分析血清微小核糖核酸-155(MicroRNA-155)联合血清微小核糖核酸-127(MicroRNA-127)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)预后的意义。方法选取2018年6月至2021年5月本院收治的56例ARDS患者为对象。逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测MicroRNA... 目的分析血清微小核糖核酸-155(MicroRNA-155)联合血清微小核糖核酸-127(MicroRNA-127)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)预后的意义。方法选取2018年6月至2021年5月本院收治的56例ARDS患者为对象。逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测MicroRNA-155、MicroRNA-127水平。随访28 d,统计ARDS患者生存情况,并依据其预后情况分为死亡组和存活组。对比死亡组和存活组患者的临床资料。Logistic回归分析影响ARDS患者预后的相关因素。绘制受试者工作特征曲线(ROC),以曲线下面积(AUC)分析血清MicroRNA-155、MicroRNA-127及两者联合对ARDS患者预后的预测效能。结果56例ARDS患者病死率为19.64%%。死亡组病情为重症患者占比、急性生理学及慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)评分、序贯器官衰竭评估(SOFA)评分、机械通气时间、ICU住院时间、血清MicroRNA-155及MicroRNA-127水平均高于存活组(P<0.05)。Logistic回归分析,多因素分析结果显示,ARDS病情为重度、SOFA评分、血清MicroRNA-155、MicroRNA-127均为影响ARDS患者预后的独立因素(OR=3.442、2.878、2.804、3.184,P<0.05)。ROC分析显示,血清MicroRNA-155、MicroRNA-127对ARDS患者预后连进行预测的最佳截断点分别为1.24、1.48,两者联合的特异度为95.56%,高于血清MicroRNA-155、MicroRNA-127单独进行评估的特异度,且血清MicroRNA-155、MicroRNA-127两者联合预测ARDS患者预后的AUC为0.892,高于其单独预测的AUC(P<0.05)。结论血清MicroRNA-155、MicroRNA-127两者联合对ARDS患者预后的预测效能较高,可作为评估ARDS患者预后有意义。 展开更多
关键词 微小核糖核酸-155 微小核糖核酸-127 急性呼吸窘迫综合征 预后
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定坤丹通过microRNA-30d-5p靶向调节Smad2促进多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞增殖的机制研究
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作者 陈兰 颜晓静 +6 位作者 廉源沛 朱力 周世康 王地均 蔡佳丽 尹春燕 曹吉 《广州中医药大学学报》 2025年第7期1750-1756,共7页
【目的】通过观察microRNA-30d-5p对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞(GCs)的影响,探讨定坤丹治疗PCOS的作用机制。【方法】以脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,体外培养正常大鼠GCs与PCOS大鼠GCs。将GCs分为空白组,模型组及定坤丹低... 【目的】通过观察microRNA-30d-5p对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞(GCs)的影响,探讨定坤丹治疗PCOS的作用机制。【方法】以脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,体外培养正常大鼠GCs与PCOS大鼠GCs。将GCs分为空白组,模型组及定坤丹低、高剂量组,分组处理后,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测GCs的存活率,细胞流式术分析GCs凋亡率,实时聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测GCs中转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad3及microRNA-30d-5p的表达,Western Blot法检测GCs中TGF-β1、Smad2及Smad3的蛋白表达。【结果】与空白组比较,模型组GCs存活率显著下降,GCs凋亡率,TGF-β1、Smad2及Smad3的基因及蛋白表达水平显著升高,microRNA-30d-5p的表达水平显著下降,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,定坤丹低、高剂量组GCs存活率上升,GCs凋亡率显著下降,TGF-β1、Smad2及Smad3的基因与蛋白表达水平显著下降,microRNA-30d-5p的表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性。【结论】定坤丹通过microRNA-30d-5p靶向调节Smad2促进GCs增殖,可能起到治疗PCOS排卵障碍的作用。 展开更多
关键词 定坤丹 多囊卵巢综合征 转化生长因子β1 SMAD2 microrna-30d-5p 卵巢颗粒细胞 大鼠
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系统性免疫炎症指数与microRNA-145对肺癌根治术患者发生肺部感染的预测价值
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作者 王君 代玺 《中国现代医学杂志》 2025年第22期1-7,共7页
目的探讨系统性免疫炎症指数(SII)联合microRNA-145(miR-145)对肺癌根治术患者发生肺部感染的预测价值。方法选取2020年1月—2023年1月在陕西省人民医院接受肺癌根治术患者(244例),根据患者是否发生肺部感染分为感染组(43例)和非感染组(... 目的探讨系统性免疫炎症指数(SII)联合microRNA-145(miR-145)对肺癌根治术患者发生肺部感染的预测价值。方法选取2020年1月—2023年1月在陕西省人民医院接受肺癌根治术患者(244例),根据患者是否发生肺部感染分为感染组(43例)和非感染组(201例)。收集患者的临床资料,比较两组患者术前的炎症因子水平[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)]、营养指标(白蛋白、血红蛋白)、SII,并通过实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-145表达。采用多因素逐步Logistic回归模型分析肺癌根治术患者发生肺部感染的风险因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估SII、miR-145对肺部感染的预测效能。结果感染组患者糖尿病患病率、吸烟率、年龄、手术时间、白细胞计数、炎症因子和SII水平均高于非感染组(P<0.05),白蛋白和miR-145相对表达量均低于非感染组(P<0.05);多因素逐步Logistic回归分析结果显示,年龄大[OR=1.520(95%CI:1.137,2.031)]、手术时间长[OR=9.803(95%CI:1.865,51.528)]、吸烟史[OR=118.515(95%CI:1.781,7884.700)]、糖尿病史[OR=133.243(95%CI:2.960,5997.049)]、白蛋白低[OR=0.525(95%CI:0.329,0.836)]、SII水平高[OR=1.007(95%CI:1.002,1.011)]和miR-145相对表达量低[OR=0.011(95%CI:0.000,0.675)]均是肺癌根治术患者发生肺部感染的危险因素(P<0.05);ROC曲线结果显示,SII联合miR-145预测肺癌根治术患者发生肺部感染的曲线下面积为0.956(95%CI:0.927,0.985),敏感性为81.4%(95%CI:0.666,0.916),特异性为96.0%(95%CI:0.923,0.983)。结论SII越高、miR-145相对表达量越低的患者发生肺部感染的风险增加,可为患者病情评估提供指导。 展开更多
关键词 肺癌根治术 肺部感染 系统性免疫炎症指数 microrna-145
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骨髓间充质干细胞来源外泌体通过microRNA-210发挥对小鼠心肌梗死的保护作用 被引量:2
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作者 申怡博 李聪叶 +2 位作者 郑南波 吴冠吉 郝媛媛 《空军军医大学学报》 2025年第2期181-186,191,共7页
目的探究骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的外泌体(exos)生物活性物质microRNA-210在小鼠心肌梗死(MI)后发挥的作用,评估其在MI中的潜在临床价值。方法提取BMSCs-exos并通过电镜及Western blotting进行鉴定及分析。所有小鼠随机分为4组:Sha... 目的探究骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的外泌体(exos)生物活性物质microRNA-210在小鼠心肌梗死(MI)后发挥的作用,评估其在MI中的潜在临床价值。方法提取BMSCs-exos并通过电镜及Western blotting进行鉴定及分析。所有小鼠随机分为4组:Sham组(只开胸不结扎)、MI组(开胸并结扎左前降支)、MI+BMSCs-exos组(结扎左前降支后注射BMSCs-exos)、MI+BMSCs-exos+microRNA-210 inhibitor组(结扎左前降支后注射转染microRNA-210抑制剂的BMSCs-exos)。左前降支冠状动脉结扎法构建小鼠MI模型后立即在梗死心肌周围行心肌内点注射exos或转染microRNA-210 inhibitor的exos。提取各组心肌组织microRNA-210并通过PCR检测其表达。超声心动图检测心脏功能。伊文思蓝染色心脏后测量MI面积。TUNEL检测心肌细胞凋亡情况。Western blotting检测心肌细胞凋亡相关蛋白的表达。结果与Sham组比较,MI组左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)明显降低,MI面积明显增多,心肌细胞凋亡水平明显增高,凋亡相关蛋白Bcl-2表达明显降低,Bax表达明显增高(P<0.05)。与MI组比较,MI+BMSCs-exos组LVEF、LVFS明显升高,MI面积明显减少,心肌细胞凋亡水平明显降低,凋亡相关蛋白Bcl-2表达明显增高,Bax表达明显降低(P<0.05)。与MI+BMSCs-exos组比较,MI+BMSCs-exos+microRNA-210 inhibitor组LVEF、LVFS明显降低,MI面积明显增多,心肌细胞凋亡水平明显增高,凋亡相关蛋白Bcl-2表达明显降低,Bax表达明显增高(P<0.05)。结论BMSCs来源的exos通过microRNA-210减轻细胞的凋亡,从而提高MI后小鼠的心功能,减少小鼠的MI面积,对小鼠MI起到了一定的保护作用。 展开更多
关键词 外泌体 microrna-210 心肌梗死 细胞凋亡
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麦积山第127窟“设乐礼佛”图像考释
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作者 高琨 赵青山 《敦煌研究》 北大核心 2025年第6期35-43,共9页
麦积山第127窟西壁佛龛上方仅有的一处经变乐舞图像,不仅是中国石窟壁画中现存最早的经变乐舞图像,而且还是经变画“设乐礼佛”样式确立的标志。所谓经变画“设乐礼佛”样式有其成立的标准,关键在于具有乐队声部性质的伎乐队伍于佛前独... 麦积山第127窟西壁佛龛上方仅有的一处经变乐舞图像,不仅是中国石窟壁画中现存最早的经变乐舞图像,而且还是经变画“设乐礼佛”样式确立的标志。所谓经变画“设乐礼佛”样式有其成立的标准,关键在于具有乐队声部性质的伎乐队伍于佛前独立空间进行表演。“设乐礼佛”新形象的出现,与北魏以来盛行佛寺陈设大型乐舞的供养仪式有关。这种“设乐礼佛”的行为也被广泛运用于石窟造像中,从北魏云冈石窟基于西域伎乐天传统形式开始的乐器配置探索,到北魏后期巩义石窟“设乐礼佛”题材的浮雕版本形成,再到麦积山第127窟壁画中“设乐礼佛”图像的成熟,反映了北魏至西魏时期佛教伎乐供养及其相关造像艺术形式蓬勃发展的时代背景。 展开更多
关键词 麦积山石窟 127 经变画 设乐礼佛 伎乐形象
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结直肠癌患者血清microRNA-497的表达及其诊断与预后价值
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作者 华梅 翟晓璐 +2 位作者 唐翀 陈颖 印滇 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第22期3579-3584,共6页
目的研究血清microRNA-497(miR-497)在结直肠癌(CRC)患者的表达特征,分析其与临床病理参数、诊断价值及患者预后的相关性。方法对医院2020年3月至2022年3月期间收治的122例CRC患者(CRC组)进行资料整理,筛选出100例健康体检人群作为对照... 目的研究血清microRNA-497(miR-497)在结直肠癌(CRC)患者的表达特征,分析其与临床病理参数、诊断价值及患者预后的相关性。方法对医院2020年3月至2022年3月期间收治的122例CRC患者(CRC组)进行资料整理,筛选出100例健康体检人群作为对照组。所有受试者在术前采集血清样本,利用实时定量PCR技术检测血清中miR-497的表达水平,并同步测定CEA与CA199水平。进一步分析miR-497表达与临床病理变量之间的关系,通过受试者工作特征(ROC)曲线评估其诊断能力,并采用Kaplan-Meier生存分析与Cox回归模型探讨其对患者预后的影响。结果CRC组血清miR-497表达水平显著低于健康对照组(P<0.001)。miR-497表达与TNM分期及淋巴结转移密切相关(P<0.001),而与肿瘤位置、性别、年龄等无显著相关性。ROC曲线分析显示miR-497在CRC诊断中的AUC为0.845,优于CEA(0.748)和CA199(0.702),DeLong检验表明miR-497与CEA、CA199的AUC差异均有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,miR-497高表达组患者的3年DFS率显著优于低表达组(84.06%vs.64.58%)。高表达组中位DFS未达到,而低表达组中位DFS为36个月,组间差异有统计学意义(P=0.015)。Cox回归分析显示,miR-497低表达(HR=1.923,95%CI:1.184~3.125)、TNM分期(HR=2.511,95%CI:1.421~4.437)及淋巴结转移(HR=1.753,95%CI:1.151~2.664)是影响CRC患者DFS的独立危险因素。结论血清miR-497在CRC患者中呈低表达状态,且与肿瘤进展及不良预后密切相关,具有较高的诊断价值和预后评估潜力,可望作为CRC的辅助诊断和预后判断的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 microrna-497 结直肠癌 肿瘤标志物 诊断效能 预后
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老年社区获得性肺炎患者血清miR-127、FOXO3水平对呼吸衰竭发生风险的预警价值
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作者 杨贝贝 单远莹 +1 位作者 陈高瑛 徐娜 《海南医学》 2025年第22期3229-3235,共7页
目的 探讨老年社区获得性肺炎(CAP)患者血清微小RNA(miR)-127、叉头盒转录因子O3(FOXO3)水平对呼吸衰竭(RF)发生风险的预警价值。方法 前瞻性选取2022年5月至2024年12月河南大学第一附属医院收治的老年CAP患者224例,根据入院后3 d内是... 目的 探讨老年社区获得性肺炎(CAP)患者血清微小RNA(miR)-127、叉头盒转录因子O3(FOXO3)水平对呼吸衰竭(RF)发生风险的预警价值。方法 前瞻性选取2022年5月至2024年12月河南大学第一附属医院收治的老年CAP患者224例,根据入院后3 d内是否发生RF分为RF组108例和非RF组116例,比较两组患者的血清miR-127、FOXO3水平,根据血清miR-127、FOXO3水平中位数分为低miR-127低FOXO3组(Q1)、低miR-127高FOXO3组(Q2)、高miR-127低FOXO3组(Q3)、高miR-127高FOXO3组(Q4),比较四组患者的临床资料、RF发生率,采用Logistic回归分析血清miR-127、FOXO3对老年CAP患者RF发生风险的影响及交互效应,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-127、FOXO3对RF的预测效能。结果 RF组患者的血清miR-127、FOXO3水平分别为2.57±0.33、1.28±0.20,明显高于非RF组的2.24±0.21、1.10±0.14,差异均有统计学意义(P<0.05);四组患者的年龄、糖尿病、低蛋白血症、英国胸科协会改良肺炎评分(CURB-65)评分、急性生理与慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分、C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)比较差异均有统计学意义(P<0.05);Q1组、Q2组、Q3组、Q4组患者的RF发生率分别为21.82%、38.71%、51.67%、87.23%,依次升高;校正年龄、低蛋白血症、CURB-65评分等因素前后,Logistic回归分析结果显示,血清miR-127、FOXO3均是老年CAP患者RF发生风险的影响因素(P<0.05);校正其他因素前,与Q1组比较,Q2组、Q3组、Q4组患者RF发生风险的OR值分别为4.050、4.791、8.247(P<0.05);校正其他因素后,与Q1组比较,Q2组、Q3组、Q4组患者RF发生风险的OR值分别为3.740、4.520、7.189(P<0.05),且高miR-127、高FOXO3在老年CAP患者RF发生风险中呈正向交互作用(P<0.05);血清miR-127、FOXO3联合对老年CAP患者RF发生风险的AUC为0.878,优于单一预测价值。结论 血清miR-127、FOXO3水平升高与老年CAP患者发生RF密切相关,两者同时高表达具有明显正向交互作用,且两者联合有助于提高患者发生RF的预测价值。 展开更多
关键词 老年 社区获得性肺炎 微小RNA-127 叉头盒转录因子O3 呼吸衰竭 预警价值
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携载microRNA-140外泌体/海藻酸钠/胶原水凝胶修复关节软骨损伤
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作者 陈明伟 余雯莉 +5 位作者 夏苏杭 陈宾 陈文忠 李锋侦 周宇 司文腾 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第16期3326-3334,共9页
背景:研究已证实,上调microRNA-140表达可部分抑制膝关节软骨组织与细胞的骨关节炎样改变,延缓骨关节炎进程,提示microRNA-140参与了骨关节炎的发病机制。目的:采用海藻酸钠/胶原水凝胶负载过表达microRNA-140的外泌体,进一步分析microR... 背景:研究已证实,上调microRNA-140表达可部分抑制膝关节软骨组织与细胞的骨关节炎样改变,延缓骨关节炎进程,提示microRNA-140参与了骨关节炎的发病机制。目的:采用海藻酸钠/胶原水凝胶负载过表达microRNA-140的外泌体,进一步分析microRNA-140参与骨关节炎的相关机制。方法:利用慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞使其过表达microRNA-140,随后分离提取外泌体,得到过表达microRNA-140的外泌体。制备负载外泌体的海藻酸钠/胶原水凝胶。采用随机数字表法将32只SD大鼠随机分为4组,每组8只:正常对照组不进行任何处理,骨关节炎组、未转染外泌体组、转染外泌体组均通过膝关节腔内注射碘乙酸钠的方式建立骨关节炎模型,造模2周后,骨关节炎组膝关节腔内注射PBS,未转染外泌体组、转染外泌体组膝关节腔内分别注射负载未过表达microRNA-140与过表达microRNA-140外泌体的海藻酸钠/胶原水凝胶。造模后第6周,检测大鼠机械刺激缩足反应阈值、滑膜液炎症因子浓度、软骨相关基因表达、膝关节软骨组织的组织学变化与焦亡相关蛋白表达。结果与结论:①与正常对照组比较,骨关节炎组机械刺激缩足反应阈值、Ⅱ型胶原及SOX9 mRNA表达、Ⅱ型胶原免疫荧光强度均减少(P<0.05),滑膜液中促炎症因子水平增加(P<0.05),基质金属蛋白酶13、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS5)mRNA表达增加(P<0.05),NLRP3、ASC、GSDMD p30、caspase-1 p20、白细胞介素1β、白细胞介素18蛋白表达均增加(P<0.05),GSDMD、cleaved caspase-1免疫荧光强度增强(P<0.05),软骨组织损伤严重。②与骨关节炎组比较,两外泌体组机械刺激缩足反应阈值、Ⅱ型胶原及SOX9 mRNA表达、Ⅱ型胶原免疫荧光强度均增加(P<0.05),滑膜液中促炎症因子水平减少(P<0.05),基质金属蛋白酶13 mRNA表达减少(P<0.05),NLRP3、ASC、GSDMD p30、caspase-1 p20、白细胞介素1β、白细胞介素18的蛋白表达均减少(P<0.05),GSDMD、cleaved caspase-1的免疫荧光强度减弱(P<0.05),软骨组织损伤减轻(P<0.05),并且转染外泌体组的作用更强。③结果表明,microRNA-140可通过抑制炎症、维持软骨稳态、抑制软骨焦亡来减轻骨关节炎大鼠的疼痛反应,降低软骨损伤,发挥骨关节炎治疗作用。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨损伤 外泌体 microrna-140 海藻酸钠/胶原水凝胶 焦亡
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MicroRNA-132-3p靶向Nrf2加重脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的机制研究 被引量:1
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作者 马寒玉 赵宇浩 +3 位作者 张铭 李真 王飞 陈书艳 《中国现代医学杂志》 2025年第6期24-31,共8页
目的探讨microRNA-132-3p(miR-132-3p)靶向Nrf2加重脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的机制。方法用LPS刺激HUVECs建立体外脓毒症细胞模型,引起内皮细胞损伤。采用CCK-8法测定细胞活力,EdU法检测细胞增殖能力。转染miR-13... 目的探讨microRNA-132-3p(miR-132-3p)靶向Nrf2加重脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的机制。方法用LPS刺激HUVECs建立体外脓毒症细胞模型,引起内皮细胞损伤。采用CCK-8法测定细胞活力,EdU法检测细胞增殖能力。转染miR-132-3p模拟物/抑制剂后,检测细胞迁移能力、乳酸脱氢酶(LDH)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平。通过荧光素酶报告基因验证miR-132-3p与其靶基因的结合。结果对照组细胞活力、细胞阳性比高于LPS组(P<0.05)。LPS组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA水平均较对照组升高(P<0.05),SOD水平较对照组降低(P<0.05)。LPS组miR-132-3p mRNA相对表达量较对照组升高(P<0.05),Nrf2 mRNA相对表达量较对照组降低(P<0.05)。LPS组Nrf2蛋白相对表达量较对照组降低(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组细胞活力比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组细胞活力较LPS组降低(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组细胞活力较LPS组升高(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组迁移细胞数比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组迁移细胞数较LPS组减少(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组迁移细胞数较LPS组增多(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组细胞划痕愈合率比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组细胞划痕愈合率较LPS组降低(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组细胞划痕愈合率较LPS组升高(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA和SOD水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);LPS+miR-132-3p模拟物组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA水平均较LPS组升高(P<0.05),SOD水平较LPS组降低(P<0.05);LPS+miR-132-3p抑制剂组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA水平均较LPS组降低(P<0.05),SOD水平较LPS组升高(P<0.05)。对照组与阴性对照组Nrf2-WT的荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P>0.05),miR-132-3p模拟物抑制Nrf2-WT的荧光素酶活性(P<0.05),miR-132-3p抑制剂增强Nrf2-WT的荧光素酶活性(P<0.05)。各组Nrf2-MUT的荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组Nrf2 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组Nrf2 mRNA相对表达量较LPS组降低(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组Nrf2 mRNA相对表达量较LPS组升高(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组Nrf2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组Nrf2蛋白相对表达量较LPS组降低(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组Nrf2蛋白相对表达量较LPS组升高(P<0.05)。结论miR-132-3p通过下调Nrf2的表达加重了LPS诱导的内皮细胞损伤,miR-132-3p可能是治疗脓毒症的潜在的新靶点。 展开更多
关键词 脓毒症 microrna-132-3p 内皮细胞 脂多糖 核因子红细胞2相关因子2
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MicroRNA-214调控骨关节炎软骨和软骨下骨代谢的机制 被引量:3
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作者 天生 王玺 +2 位作者 王永成 刘亚宁 阳鸿全 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第12期2466-2474,共9页
背景:microRNA-214(miR-214)在骨质疏松中的作用国内外已有相关报道,而miR-214与骨关节炎关节软骨及软骨下骨退变之间的相互关系尚不清楚。目的:探讨miR-214与小鼠膝骨关节炎软骨及软骨下骨退变之间存在的关系。方法:取30只C57BL/6J小... 背景:microRNA-214(miR-214)在骨质疏松中的作用国内外已有相关报道,而miR-214与骨关节炎关节软骨及软骨下骨退变之间的相互关系尚不清楚。目的:探讨miR-214与小鼠膝骨关节炎软骨及软骨下骨退变之间存在的关系。方法:取30只C57BL/6J小鼠随机分组:①实验一:分为假手术组和内侧半月板失稳组(n=3),分别进行苏木精-伊红染色和荧光定量PCR检测miR-214基因的表达变化;②实验二:分为假手术组、内侧半月板失稳组、内侧半月板失稳+空载腺病毒组(空载组)、内侧半月板失稳+miR-214拮抗剂过表达腺病毒组(拮抗剂组)(n=6),术后4周各组分别取软骨组织,进行苏木精-伊红、番红O固绿、甲苯胺蓝染色分析;荧光定量PCR、Western blot检测关节软骨中相关因子的表达情况。结果与结论:①实验一中,苏木精-伊红染色结果显示,与假手术组相比,内侧半月板失稳组可见软骨退变;荧光定量PCR检测结果显示,所有样本均有miR-214表达,而内侧半月板失稳组软骨样本中miR-214的表达水平明显高于假手术组(P<0.05);②实验二中,苏木精-伊红染色、番红O固绿染色、甲苯胺蓝染色结果显示,拮抗剂组软骨退变程度低于内侧半月板失稳组;腺病毒验证PCR检测结果显示,空载组软骨中miR-214表达水平高于拮抗剂组(P<0.05);③实验二中,X射线片显示,内侧半月板失稳组和空载组呈典型骨关节炎影像学变化,拮抗剂组关节退行性病变程度相对较轻;Mirco-CT检测结果显示,拮抗剂组在注入miR-214拮抗剂后,骨小梁结构模型指数变小,各项数据整体好于内侧半月板失稳组及空载组;④实验二Western blot检测结果显示,内侧半月板失稳组、空载组软骨标本中软骨相关因子Ⅱ型胶原α1、性别决定区Y框转录因子9、Runt相关转录因子2、骨桥蛋白的相对表达水平低于假手术组及拮抗剂组(P<0.05);而金属基质蛋白酶13的相对表达水平在内侧半月板失稳组、空载组高于假手术组及拮抗剂组(P<0.05);⑤实验二荧光定量PCR检测结果显示,与假手术组比较,肿瘤坏死因子α和白细胞介素6 mRNA的相对表达量在内侧半月板失稳组、空载组中表达相对较高,拮抗剂组中表达相对较低(P<0.05);内侧半月板失稳组、空载组高于拮抗剂组(P<0.05);⑥结果表明,骨关节炎小鼠模型的关节软骨中miR-214表达水平明显升高,提示miR-214表达水平的升高与骨关节炎有密切联系;而在骨关节炎小鼠模型膝关节腔内注入miR-214拮抗剂,可以延缓关节软骨退化、促进软骨下骨重塑,改善骨关节炎进展。 展开更多
关键词 microrna-214 骨关节炎 关节软骨 肿瘤坏死因子Α 白细胞介素6 软骨下骨
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