microRNA 20a通过核因子-κB信号通路影响肺炎模型幼鼠炎症水平的机制研究 被引量：3

1

作者 胡正权 孙欣娜 杨青 《临床和实验医学杂志》 2020年第8期815-819,共5页

目的 探讨microRNA 20a通过核因子-κB信号通路影响肺炎模型幼鼠炎症反应和T细胞亚群分型的机制。方法 30只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为两组:肺炎组和健康组,每组各15只。肺炎模型组采用刺破鼻黏膜后,从鼻腔滴入50μl链球菌液法制备小... 目的 探讨microRNA 20a通过核因子-κB信号通路影响肺炎模型幼鼠炎症反应和T细胞亚群分型的机制。方法 30只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为两组:肺炎组和健康组,每组各15只。肺炎模型组采用刺破鼻黏膜后,从鼻腔滴入50μl链球菌液法制备小鼠链球菌性肺炎模型;健康组刺破鼻黏膜后,从鼻腔滴入50μl生理盐水。将肺炎细胞分成4组:对照组、脂多糖(LSP)组、LPS+miR-20a组、LSP+miR-20a+PDTC组,分别用模拟对照物、脂多糖、mir-20a模拟物转染细胞,过表达miR-20A的细胞在37℃时用NF-κB抑制剂PDTC(100μg/L)处理30 min。用逆转录定量聚合酶链反应检测miR-20a的血清表达水平。用酶联免疫吸附(ELISA)法检测临床血清和组织细胞中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)α和C-反应蛋白(CRP)的浓度。用Western blotting法检测核因子(NF)-κBα(iκbα)和磷酸化p-NF-κB的蛋白表达水平。分析NF-κB抑制剂PDTC对miR-20a诱导的细胞炎症反应的影响。结果 肺炎组miR-20a的表达水平510. 75±50. 21,高于健康组202. 36±39. 58(P <0. 05)。肺炎组血清IL-6、TNF-α、CRP水平均高于健康组,差异有统计学意义(F <0. 05)。与对照组相比,LPS组的炎症因子IL-6、TNF-α和CRP浓度增加(F <0. 05),IκBα和p-NF-κB蛋白表达水平升高(P <0. 05)。与LPS组相比,LPS+miR-20a组细胞IL-6、TNF-α和CRP的表达水平,IκBα和p-NF-κB蛋白的表达水进一步升高(P <0. 05)。与LPS+miR-20a组比较,NF-κB抑制剂PDTC对炎症因子表达有抑制作用(P <0. 05)。结论 miR-20a在肺炎小鼠模型中表达上调,miR-20a的过表达可能通过激活NF-κB信号通路促进炎症反应。 展开更多

关键词 小鼠 肺炎 microrna-20a 炎症因子 核因子-ΚB 信号通路 脂多糖

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血清中microRNA 20a与小儿肺炎炎症反应进展的相关性研究 被引量：4

2

作者 刘春艳 柯文玲 +1 位作者 柴林 张慧 《中国儿童保健杂志》 CAS 2019年第8期881-884,共4页

目的分析血清中microRNA 20a与小儿肺炎炎症反应进展的相关性,为临床治疗提供依据。方法筛选2015年3月-2017年2月治疗的90例诊断为'肺炎'的患儿设为小儿肺炎组(n=90),另选同期健康体检儿童90例设为对照组(n=90)。儿童入院后均... 目的分析血清中microRNA 20a与小儿肺炎炎症反应进展的相关性,为临床治疗提供依据。方法筛选2015年3月-2017年2月治疗的90例诊断为'肺炎'的患儿设为小儿肺炎组(n=90),另选同期健康体检儿童90例设为对照组(n=90)。儿童入院后均分别进行血常规和血沉等的检查;用酶联免疫吸附测定法(ELISA)识别肺炎的特异性抗体;采用全自动特定蛋白分析仪和免疫比浊法对血清中C反应蛋白(CRP)和类风湿因子(RF)浓度进行定量检测;使用TRIzol试剂分离总RNA,按照Prime-Script RT试剂盒说明将血清中microRNA 20a合成逆转录cDNA;通过10%SDS-PAGE凝胶电泳分离蛋白质提取物,并电泳转移到聚偏二氟乙烯膜上进行血清中microRNA 20a蛋白的表达,采用Kolmogorov-Smirnov检验分析血清中microRNA 20a表达与小儿肺炎的炎症反应的相关性。结果与对照组相比,小儿肺炎组血清中血清免疫球蛋白IgG、IgA水平升高,IgM无显著变化。特定蛋白分析显示小儿肺炎组血清CRP、RF和IL-17含量,microRNA 20a的表达均高于对照组(P<0.05)。microRNA 20a参数与IL-17水平呈显著正相关(r=0.571,P=0.002)。结论血清中microRNA 20a表达可能与肺炎炎症的发病过程有关,microRNA 20a将有望成为诊断小儿肺炎的标志物,可作为判断小儿肺炎患者预后不良的指标。 展开更多

关键词 microrna 20a 小儿肺炎 炎症反应

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螺旋CT灌注成像联合血清microRNA-20a、microRNA-210水平对非小细胞肺癌同步放化疗预后的预测价值 被引量：19

3

作者 潘元威 董军强 +2 位作者 胡丽丽 王猛 周志刚 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2020年第2期281-286,共6页

目的:探讨64层螺旋CT灌注(CTP)成像联合血清microRNA(miR)-20a、miR-210水平对非小细胞肺癌(NSCLC)同步放化疗预后的预测价值。方法:回顾性分析105例行同步放化疗的NSCLC患者的临床资料,同步放化疗结束2周后评估疗效,行CT检查并记录血流... 目的:探讨64层螺旋CT灌注(CTP)成像联合血清microRNA(miR)-20a、miR-210水平对非小细胞肺癌(NSCLC)同步放化疗预后的预测价值。方法:回顾性分析105例行同步放化疗的NSCLC患者的临床资料,同步放化疗结束2周后评估疗效,行CT检查并记录血流量(BF)、表面通透性(PMB)、对比剂平均通过时间(MTT),实时荧光定量PCR法检测血清miR-20a、miR-210水平。结果:同步放化疗结束2周后,缓解84例,未缓解21例。随访1 a,生存68例,死亡37例。缓解组BF、PMB及血清miR-20a、miR-210水平低于未缓解组,生存组低于死亡组(P<0.05);缓解组MTT长于未缓解组,生存组长于死亡组(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示BF、PMB、MTT、血清miR-20a、miR-210水平是预后不良的预测因子,OR(95%CI)分别为2.599(1.856~3.341)、2.100(1.748~2.452)、1.831(1.236~2.427)、3.117(2.197~4.038)、2.892(2.004~3.380)。5个指标在诊断界点串联预测的灵敏度、准确度、约登指数分别为72.97%、94.12%、0.671。结论:CTP成像参数BF、PMB、MTT及血清miR-20a、miR-210水平与NSCLC同步放化疗预后关系密切,指标联合可提高预后预测的特异度。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 螺旋CT灌注成像 microrna-20a microrna-210

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血清癌胚抗原、神经元特异性烯醇化酶、microRNA-20a和microRNA-210联合检测对早期小细胞肺癌的诊断价值 被引量：13

4

作者 赵宝祥 李华 +1 位作者 张亚君 王雪辉 《新乡医学院学报》 CAS 2019年第5期452-454,共3页

目的探讨血清癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、microRNA-20a (miRNA-20a)和microRNA-210(miRNA-210)联合检测对早期小细胞肺癌(SCLC)的诊断价值。方法选择2016年6月至2017年5月秦皇岛市第二医院收治的60例早期SCLC患者作为... 目的探讨血清癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、microRNA-20a (miRNA-20a)和microRNA-210(miRNA-210)联合检测对早期小细胞肺癌(SCLC)的诊断价值。方法选择2016年6月至2017年5月秦皇岛市第二医院收治的60例早期SCLC患者作为观察组,另选择同期体检健康者30例作为对照组,采用双抗体夹心法检测血清CEA水平,采用化学发光分析法检测血清NSE水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miRNA-20a、miRNA-210的表达量,采用受试者工作特征曲线分析单项及血清CEA、NSE、miRNA-20a和miRNA-210联合检测对早期SCLC的诊断价值。结果观察组患者血清CEA、NSE、miRNA-20a及miRNA-210水平显著高于对照组(P<0.05)。血清miRNA-20a诊断早期SCLC的敏感度显著高于血清CEA、NSE和miRNA-210(P<0.05),血清NSE诊断早期SCLC的特异度高于血清CEA、miRNA-20a和miRNA-210(P<0.05),4项指标联合检测诊断早期SCLC的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值显著高于单个指标检测、2项指标联合检测及3项指标联合检测(P<0.05)。结论CEA、NSE、miRNA-20a和miRNA-210联合检测对SCLC的早期诊断具有较高的临床价值。 展开更多

关键词 小细胞肺癌 癌胚抗原 神经元特异性烯醇化酶 microrna-20a microrna-210 诊断

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糖尿病性视网膜病变患者血清microRNA-20a-5p、VEGF水平变化及其临床意义 被引量：8

5

作者 王涛 崔月玲 +1 位作者 王晓聪 谭薇 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第21期20-25,共6页

目的探讨糖尿病性视网膜病变(DR)患者血清microRNA-20a-5p(miR-20a-5p)、血管内皮生长因子(VEGF)水平变化及其临床意义。方法选取合肥市第一人民医院眼科2018年1月—2020年12月收治的82例DR患者为DR组,根据DR严重程度分为增殖型糖尿病... 目的探讨糖尿病性视网膜病变(DR)患者血清microRNA-20a-5p(miR-20a-5p)、血管内皮生长因子(VEGF)水平变化及其临床意义。方法选取合肥市第一人民医院眼科2018年1月—2020年12月收治的82例DR患者为DR组,根据DR严重程度分为增殖型糖尿病性视网膜病变(PDR)组(n=27)和非增殖型糖尿病性视网膜病变(NPDR)组(n=55)。选取同期单纯T2DM患者为T2DM组,42例体检健康者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组血清miR-20a-5p mRNA相对表达量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清VEGF水平;采用葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖(FBG)、胶乳凝集反应法测定糖化血红蛋白(HbA1c)水平。Pearson相关性分析DR患者血清miR-20a-5p mRNA相对表达量与VEGF、FBG、HbA1c的相关性,多因素Logistic回归分析血清miR-20a-5p、VEGF与DR发生的关系,ROC曲线分析血清miR-20a-5p、VEGF对DR发生的预测价值。结果与T2DM组比较,DR组FBG、HbA1c、VEGF水平升高,血清miR-20a-5p mRNA相对表达量降低,与对照组比较,T2DM组FBG、HbA1c、VEGF水平升高,血清miR-20a-5p mRNA相对表达量降低(P<0.05)。与NPDR组比较,PDR组FBG、HbA1c、VEGF水平升高,血清miR-20a-5p mRNA相对表达量降低(P<0.05)。DR患者血清miR-20a-5p mRNA相对表达量与FBG、HbA1c、VEGF水平呈负相关(r=-0611、-0.799和-0.545,均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血清miR-20a-5p高水平[O^R=0.254(95%CI:0.154,0.596)]为DR发生的独立保护因素,糖尿病病程长[O^R=2.042(95%CI:1.422,2.933)]、血清HbA1c高水平[O^R=2.307(95%CI:1.101,4.833)]、血清VEGF高水平[O^R=2.570(95%CI:1.584,4.144)]为DR发生的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清miR-20a-5p预测DR发生敏感性为97.56%(95%CI:0.915,0.997)、特异性为61.54%(95%CI:0.471,0.748);血清VEGF敏感性为57.32%(95%CI:0.447,0.683)、特异性为96.15%(95%CI:0.868,0.995);联合预测敏感性为91.46%(95%CI:0.832,0.965)、特异性为76.92%(95%CI:0.632,0.875)。结论DR患者血清miR-20a-5p mRNA相对表达量降低,与FBG、HbA1c、VEGF水平密切相关,miR-20a-5p可能通过调控糖代谢和VEGF介导DR发生和发展。 展开更多

关键词 糖尿病性视网膜病变 2型糖尿病 microrna-20a-5p 血管内皮生长因子

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MicroRNA-20a对胃癌细胞生长与迁移的影响及其机制 被引量：4

6

作者 裴洪利 白尚星 《临床与病理杂志》 2018年第11期2314-2320,共7页

目的:探讨microRNA-20a(miR-20a)对胃癌细胞的生长和迁移的影响及其相关分子机制。方法:通过qRT-PCR方法检测正常胃黏膜上皮细胞(gastric epithelial cell 1,GES-1)和胃癌细胞系MKN45,SGC7901和NUGC-3中miR-20a的相对表达水平;选取SGC7... 目的:探讨microRNA-20a(miR-20a)对胃癌细胞的生长和迁移的影响及其相关分子机制。方法:通过qRT-PCR方法检测正常胃黏膜上皮细胞(gastric epithelial cell 1,GES-1)和胃癌细胞系MKN45,SGC7901和NUGC-3中miR-20a的相对表达水平;选取SGC7901细胞为代表,MTT法和克隆形成能力实验评估miR-20a mimic和inhibitor对细胞生长能力的影响;Transwell实验观察miR-20a的mimic和inhibitor对细胞迁移能力的影响;qRT-PCR检测miR-20a靶基因早期生长反应蛋白2(early growth reactive protein 2,EGR2)在mRNA水平的表达。结果:MiR-20a在胃癌细胞中的表达量较GES-1细胞显著增加;MTT实验、克隆形成实验和Transwell实验显示miR-20a mimic促进SGC7901细胞的生长和迁移,而miR-20a inhibitor抑制生长和迁移。MiR-20a mimic抑制EGR2 mRNA表达,而miR-20a inhibitor促进EGR2 mRNA表达。结论:MiR-20a可促进胃癌细胞生长和迁移能力,其分子机制可能与下调EGR2 mRNA的表达相关。 展开更多

关键词 microrna-20a 胃癌 增殖 迁移 早期生长反应蛋白2

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血清miR-10a、miR-20a、miR-615-3p、CEA、CA19-9联合检测对结直肠癌的诊断价值 被引量：1

7

作者 李颖 张晓茹 +2 位作者 赵洪焕 徐进霞 韩素桂 《检验医学与临床》 2025年第6期753-759,共7页

目的分析血清微小RNA(miR)-10a、miR-20a、miR-615-3p、癌胚抗原(CEA)、糖基抗原19-9(CA19-9)联合检测对结直肠癌(CRC)的诊断价值。方法回顾性选取2017年10月至2019年2月该院收治的50例CRC患者为CRC组,另选取同期该院收治的肠道良性病... 目的分析血清微小RNA(miR)-10a、miR-20a、miR-615-3p、癌胚抗原(CEA)、糖基抗原19-9(CA19-9)联合检测对结直肠癌(CRC)的诊断价值。方法回顾性选取2017年10月至2019年2月该院收治的50例CRC患者为CRC组,另选取同期该院收治的肠道良性病变患者50例为疾病对照组,选取同期在该院体检的30例健康体检者为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组血清miR-10a、miR-20a、miR-615-3p水平,采用电化学发光法检测各组血清CEA、CA19-9水平。采用多因素Logistic回归分析CRC发生的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-10a、miR-20a、miR-615-3p、CEA、CA19-9对CRC的诊断价值。结果疾病对照组患者血清miR-10a水平低于健康对照组,而血清miR-615-3p、CEA、CA19-9水平高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);CRC组患者血清miR-10a水平低于疾病对照组和健康对照组,而血清miR-20a、miR-615-3p、CEA、CA19-9水平高于疾病对照组和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤最大径、Dukes分期、细胞分化程度及是否合并淋巴结转移CRC患者的血清miR-10a、miR-20a、miR-615-3p、CEA、CA19-9水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),但不同肿瘤部位及是否规律饮食CRC患者的血清miR-10a、miR-20a、miR-615-3p、CEA、CA19-9水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示血清miR-10a水平升高是CRC发生的保护因素(P<0.05),血清miR-20a、miR-615-3p、CEA、CA19-9水平升高是CRC发生的危险因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清miR-10a、miR-20a、miR-615-3p、CEA、CA19-9联合检测诊断CRC发生的曲线下面积(AUC)为0.952,显著高于各指标单独检测的AUC(Z_(联合-miR-10a)=3.735,P<0.001;Z_(联合-miR-20a)=3.650,P<0.001;Z_(联合-miR-615-3p)=4.133,P<0.001;Z_(联合-CEA)=4.536,P<0.001;Z_(联合-CA19-9)=3.708,P<0.001;Z_(联合-CEA+CA19-9)=3.515,P<0.001),5项血清指标联合检测的灵敏度为92.00%,特异度为94.00%。结论CRC患者血清miR-10a水平下调,miR-20a、miR-615-3p、CEA、CA19-9水平上调,5项血清指标联合检测对于CRC具有较好的诊断价值。 展开更多

关键词 微小RNA-10a 微小RNA-20a 微小RNA-615-3p 癌胚抗原 糖基抗原19-9 结直肠癌

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多发性骨髓瘤患者外周血清中microRNA-181a和microRNA-20a表达水平的检测及其临床意义 被引量：5

8

作者 彭晶 袁瑞丽 +2 位作者 王晓琴 吴锋 郭炫 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期625-630,共6页

目的:检测多发性骨髓瘤(MM)患者外周血血清中microRNA-181a和microRNA-20a表达水平,探讨microRNA-181a和microRNA-20a在MM发病过程中的临床意义。方法:选取2013年1月—2014年5月西安交通大学第一附属医院血液科住院患者作为病例组研究对... 目的:检测多发性骨髓瘤(MM)患者外周血血清中microRNA-181a和microRNA-20a表达水平,探讨microRNA-181a和microRNA-20a在MM发病过程中的临床意义。方法:选取2013年1月—2014年5月西安交通大学第一附属医院血液科住院患者作为病例组研究对象,其中MM组32例,其他血液病组12例,所有研究对象均符合《血液病诊断和疗效标准》中诊断标准且均经临床医师确诊,并排除心、肺、肝脏等其他器官衰竭且病情稳定者。同时选取同期20名健康体检者作为正常对照组。收集各组研究对象的外周血标本,采用实时荧光定量PCR方法检测血清中microRNA-181a和microRNA-20a表达情况,同步检测血清β2微球蛋白(β2-MG)水平、乳酸脱氢酶(LDH)活性、白蛋白(ALB)水平、游离轻链(FLC)水平及M蛋白百分比,并比较其差异。结果:MM组、其他血液病组和正常对照组研究对象血清中microRNA-181a和microRNA-20a表达水平分别为0.0452和5.879、0.000和0.072、0.004和1.159,3组间比较差异有统计学意义(H=15.218,9.891;P=0.000,0.007)。MM组患者血清中microRNA-181a和microRNA-20a表达水平与正常对照组比较差异有统计学意义(Z=-2.702,-1.979;P=0.005,0.048),MM组与其他血液病组比较差异也有统计学意义(Z=-3.163,-2.722;P=0.001,0.005);microRNA-181a和microRNA-20a表达水平均与M蛋白百分比呈正相关关系(r=0.574,0.739;P=0.032,0.003);miR-181a表达水平与肿瘤负荷指标β2-MG和FLC呈正相关关系(r=0.552,0.780;P=0.041,0.001)。结论:MM患者血清中microRNA-181a和microRNA-20a高表达,其可能参与MM的发病过程,有望成为MM诊断标志物;其中microRNA-181a可能作为判断MM患者预后不良的指标。 展开更多

关键词 microrna-181a microrna-20a 多发性骨髓瘤 实时聚合酶链反应

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LncRNA NORAD靶向调控miR-20a-5p对结核分枝杆菌感染的巨噬细胞凋亡的影响

9

作者 孙红梅 程欢欢 +1 位作者 孔祥龙 薛建昌 《中国感染与化疗杂志》 北大核心 2025年第5期549-556,共8页

目的 探讨长链非编码RNA DNA损伤激活的非编码RNA(LncRNA NORAD)靶向调控微小RNA-20a-5p(miR-20a-5p)对结核分枝杆菌感染的巨噬细胞凋亡的影响。方法 选取河北省胸科医院2022年3月至2023年4月的活动性肺结核患者、结核分枝杆菌感染无症... 目的 探讨长链非编码RNA DNA损伤激活的非编码RNA(LncRNA NORAD)靶向调控微小RNA-20a-5p(miR-20a-5p)对结核分枝杆菌感染的巨噬细胞凋亡的影响。方法 选取河北省胸科医院2022年3月至2023年4月的活动性肺结核患者、结核分枝杆菌感染无症状患者、健康体检者各50例。分别采集各组研究对象空腹状态下的静脉血,离心后检测血清中LncRNA NORAD和miR-20a-5p表达水平以及炎性因子水平。将人单核细胞系THP-1诱导分化为巨噬细胞并将其分为对照组(Control组)、模型组(Model组)、转染NORAD空载体组(sh-NC组)、转染sh-NORAD载体组(sh-NORAD组)、共转染sh-NORAD和miR-20a-5p抑制剂空载体组(sh-NORAD+miR-20a-5p inhibitor NC组)、共转染sh-NORAD和miR-20a-5p抑制剂载体组(sh-NORAD+miR-20a-5p inhibitor组)、转染miR-20a-5p空载体组(miR-NC组)、转染miR-20a-5p载体组(miR-20a-5p mimics组)。检测各组细胞LncRNA NORAD和miR-20a-5p表达水平(qRT-PCR法)、细胞增殖能力(CCK-8试剂盒法)、细胞凋亡情况(流式细胞术法)、细胞炎性因子水平(ELISA法)和细胞中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl 2)和活化的半胱天冬蛋白酶-3(cleaved caspase 3)蛋白表达量,验证LncRNA NORAD与miR-20a-5p之间的靶向关系。结果 与健康体检者比较,活动性肺结核患者和结核分枝杆菌感染无症状患者血清中炎性因子水平和LncRNA NORAD表达水平显著升高、miR-20a-5p水平显著降低。与Control组比较,Model组细胞LncRNA NORAD、细胞增殖能力、Bcl 2蛋白表达水平以及炎性因子水平显著升高,miR-20a-5p水平、细胞凋亡率以及Bax和cleaved caspase 3蛋白表达量显著下降(P<0.05);与sh-NC组比较,sh-NORAD组细胞LncRNA NORAD表达水平、Bcl 2蛋白表达水平、炎性因子水平以及细胞增殖能力明显降低,miR-20a-5p水平、细胞凋亡率以及Bax和cleaved caspase 3蛋白表达量显著升高(P<0.05);与sh-NORAD+miR-20a-5p inhibitor NC组比较,sh-NORAD+miR-20a-5p inhibitor组细胞炎性因子水平、Bcl 2蛋白表达水平以及细胞增殖能力显著升高,miR-20a-5p水平、细胞凋亡率以及Bax和cleaved caspase 3蛋白表达量显著下降(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-20a-5p mimics组细胞炎性因子水平、增殖能力明显升高,细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。进一步通过实验证实LncRNA NORAD与miR-20a-5p之间的靶向关系。结论 在结核分枝杆菌诱导的巨噬细胞中LncRNA NORAD过表达,沉默LncRNA NORAD的表达可靶向下调miR-20a-5p的表达,从而抑制结核分枝杆菌诱导的巨噬细胞的炎性反应,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 长链非编码RNA DNA损伤激活的非编码RNA 微小RNA-20a-5p 结核分枝杆菌 巨噬细胞 炎症 凋亡

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血清microRNA-184和microRNA-20a联合检测对胃癌的诊断价值 被引量：1

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作者 鲁斌 黄晓宇 +1 位作者 夏秀梅 尹小五 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第7期35-40,共6页

目的探讨血清microRNA-184(miR-184)和microRNA-20a(miR-20a)联合检测对胃癌诊断的临床价值。方法分别选取孝感中心医院332例及368例经病理确诊为慢性胃炎和胃癌的患者。采用荧光定量PCR检测所有患者血清miR-20a与miR-184的表达水平。... 目的探讨血清microRNA-184(miR-184)和microRNA-20a(miR-20a)联合检测对胃癌诊断的临床价值。方法分别选取孝感中心医院332例及368例经病理确诊为慢性胃炎和胃癌的患者。采用荧光定量PCR检测所有患者血清miR-20a与miR-184的表达水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评价2种miRNA诊断胃癌的效能。根据ROC曲线确定这2种miRNA诊断胃癌的阈值,计算敏感性和特异性,并对比癌胚抗原(CEA)的测定结果。结果慢性胃炎组患者血清miR-20a水平较胃癌组患者低(P<0.05);慢性胃炎组患者血清miR-184水平较胃癌组患者高(P<0.05)。临床病理特征中,胃癌患者血清miR-20a表达水平与临床分期、淋巴结转移、饮酒史、年龄及性别差异无统计学意义(P>0.05);胃癌患者血清miR-184表达水平与患者淋巴结转移、饮酒史、年龄及性别差异无统计学意义(P>0.05),与肿瘤临床分期有差异(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,血清miR-20a[OR=1.012(95%CI:1.697,6.875)]、miR-184[OR=2.056(95%CI:0.417,0.722)]表达水平与胃癌的发生相关(P<0.05)。经ROC曲线分析表明,诊断胃癌采用血清miR-20a的临界值为4.24,曲线下面积(AUC)为0.762,特异性为71.7%,敏感性为79.4%;miR-184临界值为10.35,AUC为0.861,特异性为82.8%,敏感性为88.4%;CEA临界值为6 mg/ml,AUC为0.740,特异性为71.4%,敏感性为69.3%;血清miR-20a、miR-184联合诊断胃癌的AUC为0.908,特异性为87.6%,敏感性为84.7%。血清miR-184和miR-20a联合诊断胃癌的AUC、特异性及敏感性较3种单一检测方法大或高。结论采用血清miR-20a和miR-184联合检测方法诊断胃癌,临床具有一定的应用价值。 展开更多

关键词 胃癌 microrna-20a microrna-184 癌胚抗原

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^(18)F-FDG-PET/CT显像参数联合血清miR-345、miR-20a对晚期非小细胞肺癌患者的免疫治疗疗效和预后的预测价值

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作者 高毅 李卫星 +5 位作者 王忠耕 李丽君 乔志华 张立甲 任绍青 孙兴智 《临床放射学杂志》 北大核心 2025年第10期1975-1982,共8页

目的 探讨^(18)F-FDG-PET/CT显像参数联合血清miR-345、miR-20a对晚期非小细胞肺癌患者的免疫治疗疗效和预后的预测价值。方法 纳入2021年1月至2024年6月接受免疫治疗的158例晚期非小细胞肺癌患者,患者在接受免疫治疗前均进行了^(18)F-F... 目的 探讨^(18)F-FDG-PET/CT显像参数联合血清miR-345、miR-20a对晚期非小细胞肺癌患者的免疫治疗疗效和预后的预测价值。方法 纳入2021年1月至2024年6月接受免疫治疗的158例晚期非小细胞肺癌患者,患者在接受免疫治疗前均进行了^(18)F-FDG-PET/CT检查和血清miR-345和miR-20a水平的检测。^(18)F-FDG-PET/CT的显像参数包括最大标准摄取值(SUV_(max)),肿瘤代谢体积(MTV)和病灶糖酵解总量(TLG),搜集患者的一般资料及临床病理特征参数,根据RECIST 1.1标准评估疗效,采用电话、门诊及住院复查等多种随访方式对所有患者随访10~24个月,搜集肿瘤评估结果、疾病进展情况以及总生存时间,根据RECIST 1.1标准评估进行疗效评估,采用KaplanMeier法绘制无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)曲线,运用Spearman相关性分析临床疗效与^(18)F-FDG-PET/CT显像参数和血清miR-345、miR-20a水平的相关性,运用受试者工作特征曲线(ROC)分析^(18)F-FDG-PET/CT显像参数和血清miR-345、miR-20a水平预测临床疗效的效能。采用Cox单因素和多因素分析影响患者预后的危险因素。结果 所有患者的SUV_(max)、MTV和TLG的平均值分别为12.52±5.26、(97.36±13.63)cm^(3)和1669.74±705.46,miR-345和miR-20a的相对表达水平分别为24.54±2.11和25.38±2.33。158例非小细胞肺癌患者的免疫治疗的客观缓解率(ORR)为44.30%(70/158),疾病控制率(DCR)为89.87%(142/158),与未缓解组患者相比,缓解组患者的SUV_(max)、MTV、TLG和miR-345降低,而血清miR-20a升高,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。Spearman相关性分析显示免疫治疗的疗效和SUV_(max)、MTV、TLG和miR-345水平呈负相关,而与miR-20a水平呈正相关,ROC结果显示,SUV_(max)、MTV 、TLG、miR-345 2^(–△△Ct)和miR-20a 2^(–△△Ct)在预测非小细胞肺癌患者的免疫治疗疗效均具有良好的效能,联合预测具有更高的灵敏度和特异度。随访期内80例患者出现死亡,死亡率为50.63%(80/158)。Kaplan-Meier曲线分析显示,所有患者的中位无进展生存期(mPFS)和中位生存期(mOS)分别为6.75个月(95%CI 6.20~8.15)和20.81个月(95%CI 19.34~20.06),Cox多因素结果显示ECOG评分、分化程度、肿瘤大小、远处转移、临床分期、SUV_(max)、MTV、TLG、miR-345和miR-20a是影响非小细胞肺癌患者的免疫治疗预后的独立风险因素。结论^(18)F-FDG-PET/CT显像参数(SUV_(max)、MTV、TLG)联合血清miR-345和miR-20a水平可以有效预测晚期非小细胞肺癌患者的免疫治疗的疗效和预后。 展开更多

关键词 最大标准摄取值 肿瘤代谢体积 病灶糖酵解总量 微小RNA-345 微小RNA-20a

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基于miR-20a-5p/CCND2轴探讨达格列净干预慢性心力衰竭大鼠的作用机制

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作者 韩青 刘晓娟 +3 位作者 任小乾 邱毅 刘雪 邢金梅 《中西医结合心脑血管病杂志》 2025年第15期2298-2306,共9页

目的:探讨达格列净调控微小RNA-20a-5p(miR-20a-5p)/细胞周期蛋白D2(CCND2)轴干预慢性心力衰竭大鼠的作用机制。方法:建立慢性心力衰竭大鼠模型,分为假手术组(Sham组)、模型组、达格列净低剂量组(DAPA-L组)、达格列净高剂量组(DAPA-H组... 目的:探讨达格列净调控微小RNA-20a-5p(miR-20a-5p)/细胞周期蛋白D2(CCND2)轴干预慢性心力衰竭大鼠的作用机制。方法:建立慢性心力衰竭大鼠模型,分为假手术组(Sham组)、模型组、达格列净低剂量组(DAPA-L组)、达格列净高剂量组(DAPA-H组)、达格列净高剂量+miR-20a-5p激动剂阴性对照组(DAPA-H+agomir-NC组)、达格列净高剂量+miR-20a-5p激动剂组(DAPA-H+miR-20a-5p-agomir组)。超声心动图评估心脏功能,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织形态;Masson染色评估心肌组织纤维化水平;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-20a-5p和CCND2的表达变化;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测抗体切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和CCND2蛋白水平。结果:与Sham组相比,模型组心肌组织部分细胞损伤坏死、结构紊乱,心肌细胞肿胀,有大量的炎性细胞浸润;左室舒张压(LVDP)、IL-6、TNF-α和IL-1β水平,细胞凋亡率,胶原成分和纤维化,Cleaved Caspase-3、Bax、miR-20a-5p表达水平明显增加(P<0.05);左室收缩压(LVSP)、左室射血分数(LVEF)水平,Bcl-2、CCND2表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组相比,DAPA-L组和DAPA-H组心肌纤维排列逐渐规则,心肌细胞肿胀、坏死及炎性细胞浸润减少;LVDP、IL-6、TNF-α和IL-1β水平,细胞凋亡率、胶原成分和纤维化,Cleaved Caspase-3、Bax、miR-20a-5p表达水平明显降低(P<0.05);LVSP和LVEF水平,Bcl-2、CCND2表达水平明显增加(P<0.05)。与DAPA-H+agomir-NC组相比,DAPA-H+miR-20a-5p-agomir组大鼠心肌细胞肿胀、坏死及炎性细胞浸润增大,心肌纤维排列较紊乱,LVDP、IL-6、TNF-α和IL-1β水平,细胞凋亡率、胶原成分和纤维化,Cleaved Caspase-3、Bax、miR-20a-5p表达水平明显增加(P<0.05),LVSP和LVEF水平,Bcl-2、CCND2表达水平明显降低(P<0.05)。结论:达格列净通过下调miR-20a-5p表达,促进CCND2表达改善大鼠慢性心力衰竭。 展开更多

关键词 慢性心力衰竭 达格列净 微小RNA-20a-5p 细胞周期蛋白D2 实验研究

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急性脑梗死患者血清mi R-20a-5p、mi R-139-5p表达与认知功能和预后的关系分析

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作者 李慧 周俊梅 《实验与检验医学》 2025年第1期18-22,共5页

目的 探究急性脑梗死患者血清miR-20a-5p、miR-139-5p表达与认知功能和预后的关系。方法 选择本院2021年3月-2024年3月收治的80例ACI患者作为观察对象(ACI组),另招募同期体检健康受试者96例作为对照组。qRTPCR测定血清miR-20a-5p、miR-1... 目的 探究急性脑梗死患者血清miR-20a-5p、miR-139-5p表达与认知功能和预后的关系。方法 选择本院2021年3月-2024年3月收治的80例ACI患者作为观察对象(ACI组),另招募同期体检健康受试者96例作为对照组。qRTPCR测定血清miR-20a-5p、miR-139-5p水平;将ACI患者分为轻度组(30例)、中度组(28例)和重度组(22例)。根据ACI患者出院随访情况分为预后良好组(50例)和预后不良组(30例)。以ROC曲线分析miR-20a-5p、miR-139-5p对ACI患者预后不良的预测价值;以多因素Logistic回归分析影响ACI患者发生预后不良的因素。结果 ACI组较对照组血清miR-20a-5p水平升高,miR-139-5p水平降低(P<0.05);轻、中、重度组血清miR-20a-5p水平逐渐升高,miR-139-5p水平逐渐降低(P<0.05)。与预后良好组比较,预后不良组NIHSS评分>15分患者比例、血清miR-20a-5p水平升高,血清miR-139-5p水平下降(P<0.05)。miR-20a-5p是ACI患者发生预后不良的危险因素,miR-139-5p是保护因素(P<0.05)。miR-20a-5p、miR-139-5p单独及联合预测患者发生预后不良的AUC分别为0.850、0.883、0.933,联合预测效果好于单独预测(Z=2.323、2.535,P=0.020、0.010)。结论 ACI患者血清miR-20a-5p表达水平升高,miR-139-5p表达水平降低,二者与患者的认知功能有关,且对患者预后不良具有一定的预测价值。 展开更多

关键词 急性脑梗死 微小RNA-20a-5p 微小RNA-139-5p 认知功能 预后

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外泌体miR-20a、miR-21表达与慢性乙型肝炎病情进展的关联研究

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作者 田金茹 王孟丽 《现代医药卫生》 2025年第10期2366-2370,共5页

目的分析外泌体微小RNA-20a(miR-20a)、微小RNA-21(miR-21)表达与慢性乙型肝炎(CHB)病情进展的关联。方法采用回顾性研究,研究对象为开封市第三人民医院2021年10月至2024年4月收治的135例CHB患者,依据病情进展阶段不同,将80例免疫耐受期... 目的分析外泌体微小RNA-20a(miR-20a)、微小RNA-21(miR-21)表达与慢性乙型肝炎(CHB)病情进展的关联。方法采用回顾性研究,研究对象为开封市第三人民医院2021年10月至2024年4月收治的135例CHB患者,依据病情进展阶段不同,将80例免疫耐受期CHB患者列为早期组,将55例免疫激活期CHB患者列为进展组。比较2组患者外泌体miR-20a、miR-21,髓源性抑制性细胞(MDSCs)功能因子[精氨酸酶1(ARG1)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)],肝功能指标[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBil)]的差异。经Pearson相关性系数检验miR-20a、miR-21与MDSCs功能因子、肝功能指标间的相关性。通过绘制受试者操作特征(ROC)曲线验证miR-20a、miR-21对CHB患者病情进展的预测价值。结果早期组患者miR-20a、miR-21、AGR1、NO、iNOS高于进展组,ALT、AST、ALP、TBil均低于进展组,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关性系数检验,miR-20a与AGR1、NO、iNOS呈正相关(P<0.05),与ALT、AST、ALP、TBil呈负相关(P<0.05);miR-21与AGR1、NO、iNOS呈正相关(P<0.05),与ALT、AST、ALP、TBil呈负相关(P<0.05)。经ROC曲线验证,miR-20a对CHB患者病情进展的预测灵敏度、特异度分别为81.25%、78.83%,miR-21对CHB患者病情进展的预测灵敏度、特异度分别为80.33%、75.45%[曲线下面积(AUC)=0.863、0.862]。结论高表达miR-20a、miR-21可通过激活MDSCs功能因子而抑制CHB患者免疫功能,并加重其病情,故监测miR-20a、miR-21水平变化能实现对其病情进展情况的动态评估,并指导临床决策。 展开更多

关键词 慢性乙型肝炎 髓源性抑制性细胞 肝功能损伤 微小RNA-20a 微小RNA-21

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人肝癌细胞系中miR-20a-5p的表达及对肝癌细胞Bel-7402增殖及凋亡的影响 被引量：5

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作者 郭瑛 李君 +5 位作者 李宗芳 孙晋 张健 田静 王亚利 孔光耀 《西部医学》 2019年第1期7-12,共6页

目的探讨miR-20a-5p在人肝癌细胞系中表达及其对肝癌细胞Bel-7402增殖及凋亡的影响。方法通过反转录实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)考察miR-20a在肝细胞L-02和7种肝癌细胞中的表达;构建过表达或沉默miR-20a-5p的人肝癌Bel-7402细胞株;... 目的探讨miR-20a-5p在人肝癌细胞系中表达及其对肝癌细胞Bel-7402增殖及凋亡的影响。方法通过反转录实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)考察miR-20a在肝细胞L-02和7种肝癌细胞中的表达;构建过表达或沉默miR-20a-5p的人肝癌Bel-7402细胞株;通过噻唑蓝(MTT)实验考察过表达或沉默miR-20a-5p后对细胞增殖的影响;通过AnnexinV-FITC/PI流式实验考察对细胞凋亡的影响,并进一步通过蛋白质免疫印迹试验考察对凋亡相关基因蛋白表达水平的影响。结果与人肝细胞L-02相比,6种细胞系的miR-20a-5p表达水平较低。过表达miR-20a-5p后细胞增殖能力显著下降(P=0.011),沉默后显著上升(P=0.007)。高表达miR-20a-5p后细胞凋亡和早期凋亡比例均显著增加(P=0.009、0.017),沉默miR-20a-5p均明显降低(P=0.012、0.007)。高表达miR-20a-5p后细胞中凋亡抑制蛋白XIAP、Survivin、Bcl-2表达下调,凋亡促进蛋白Bax表达上调;沉默miR-20a-5p后XIAP、Survivin、Bcl-2表达上调,Bax表达下调。结论 miR-20a-5p在6种肝癌细胞中低表达,可促进肝癌细胞Bel-7402凋亡,抑制细胞增殖能力。 展开更多

关键词 微小RNA-20a-5p 肝癌 增殖 凋亡

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肺癌与癌旁组织中miR-20a的定量检测及其意义 被引量：9

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作者 王亚南 史进方 +3 位作者 吴元健 徐卫东 蒋敏 顾国浩 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期135-137,共3页

目的探讨人肺癌与癌旁组织miR-20a定量检测的临床意义。方法 real-timePCR检测31例肺癌及其对应癌旁组织中miR-20a的表达量,分析其与肺癌组织学类型、临床分期、分化程度等临床病理特征的关系。结果肺癌组织miR-20a表达量(2-△△Ct)为3.... 目的探讨人肺癌与癌旁组织miR-20a定量检测的临床意义。方法 real-timePCR检测31例肺癌及其对应癌旁组织中miR-20a的表达量,分析其与肺癌组织学类型、临床分期、分化程度等临床病理特征的关系。结果肺癌组织miR-20a表达量(2-△△Ct)为3.630(1.042～7.727),与对应癌旁组织相比,有显著性差异(P<0.05)。miR-20a与肺癌临床分期、分化程度、病理类型、肿块大小和淋巴结转移均无相关性(P>0.05)。结论 miR-20a在肺癌组织高表达,可能与肺癌的发生有关。 展开更多

关键词 肺癌 miR-20a 微小RNA 实时荧光定量PCR

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miRNA-20a作为CHO-K1细胞抗凋亡调控靶标的研究 被引量：2

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作者 张兵兵 侯汝涛 +2 位作者 李磊 张莹 潘长江 《中国科技论文》 CAS 北大核心 2015年第6期740-744,共5页

通过分析miRNA表达谱发现,miRNA-20a在凋亡CHO-K1细胞中的表达降低。通过构建稳定表达miRNA-20a的重组细胞株,分析该重组细胞的抗凋亡能力。分别构建携带miRNA-20a前体序列或反义序列的重组慢病毒,转染CHO-K1细胞,得到miRNA-20a功能获... 通过分析miRNA表达谱发现,miRNA-20a在凋亡CHO-K1细胞中的表达降低。通过构建稳定表达miRNA-20a的重组细胞株,分析该重组细胞的抗凋亡能力。分别构建携带miRNA-20a前体序列或反义序列的重组慢病毒,转染CHO-K1细胞,得到miRNA-20a功能获得或功能抑制的重组细胞。无血清过度消耗培养液应激环境下培养重组细胞,分析靶基因E2F1的表达水平,通过细胞活力和Caspase3/7活性分析评价细胞的抗凋亡能力。结果显示,miRNA-20a过表达的细胞株,E2F1的表达受到显著抑制,在无血清过度消耗的应激环境下,细胞活力显著提高,Caspase3/7活性降低。相反,miRNA-20a抑制表达的细胞株中,E2F1表达增加,而细胞活性显著降低,抗凋亡能力显著下降。上述结果提示,miRNA-20a有望作为哺乳动物宿主细胞的遗传重构靶标,构建耐受应激环境的抗凋亡细胞。 展开更多

关键词 生物工程 微小RNA-20a 中国仓鼠卵巢细胞 抗凋亡 遗传重构

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miR-20a-5p调节VEGF通路在氧诱导视网膜病变小鼠模型中的作用机制 被引量：1

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作者 黄润英 范智利 +2 位作者 肖吉群 郑巍 蔡强 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第5期83-88,共6页

目的探讨微小RNA(miR)-20a-5p调节血管内皮生长因子(VEGF)通路在氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠中的作用机制。方法实验分为正常组、模型组、高氧对照组、miR-20a-5p高表达组,每组24只。除正常组外,其余组小鼠在出生后第7天置于氧浓度(75.00... 目的探讨微小RNA(miR)-20a-5p调节血管内皮生长因子(VEGF)通路在氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠中的作用机制。方法实验分为正常组、模型组、高氧对照组、miR-20a-5p高表达组,每组24只。除正常组外,其余组小鼠在出生后第7天置于氧浓度(75.00±2.00)%氧箱中建立OIR小鼠模型,连续高氧环境5 d后置于常氧中饲养。高氧环境结束前1 d,高氧对照组玻璃体腔内注射1μL磷酸缓冲盐溶液(PBS),miR-20a-5p高表达组玻璃体腔内注射1μL miR-20a-5p激动剂(miR-20a-5p agomir)(1μmol/L),模型组不进行任何处理。正常组一直置于空气中正常饲养。高氧结束后各组小鼠正常空气再饲养5 d进行实验。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测视网膜组织miR-20a-5p、VEGF、血管内皮生长因子受体(VEGFR)-1、VEGFR-2表达情况;视网膜铺片观察视网膜血管形态;苏木精-伊红(HE)染色计数视网膜新生血管内皮细胞核情况;免疫组化检测视网膜组织中VEGF阳性细胞情况。结果模型组和高氧对照组在出生第17天自视盘向周围发出的放射状大血管迂回、不规则扩张,出现大量新生血管,且新生血管结构及分布紊乱,周边毛细血管网闭塞;miR-20a-5p高表达组相较模型组和高氧对照组在出生第17天自视盘向周围发出的放射状大血管迂回不明显,血管不规则扩张现象减轻,新生血管明显减少。与正常组相比,模型组、高氧对照组视网膜组织中miR-20a-5p水平降低(P<0.05),视网膜血管内皮细胞核数量、VEGF蛋白阳性面积百分比、视网膜组织中VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2 mRNA表达水平升高(P<0.05);分别与模型组、高氧对照组相比,miR-20a-5p高表达组视网膜组织中miR-20a-5p水平升高(P<0.05),视网膜血管内皮细胞核数量、VEGF蛋白阳性面积百分比、视网膜组织中VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2mRNA表达水平降低(P <0.05)。结论升高miR-20a-5p可抑制VEGF通路从而减少OIR小鼠视网膜血管新生,实现对OIR小鼠视网膜的保护。 展开更多

关键词 微小RNA-20a-5p 血管内皮生长因子 氧诱导视网膜病变

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miR-20a-5p靶向调控BRMS1L对人结直肠癌细胞株SW480增殖、凋亡能力的影响及其机制探讨 被引量：4

19

作者 陈杰 《山东医药》 CAS 2020年第12期5-9,共5页

目的观察微小RNA-20a-5p(miR-20a-5p)靶向调控乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1L)对人结直肠癌细胞株SW480增殖、凋亡能力的影响,并探讨其可能机制。方法取SW480细胞,分别将miR-20a-5p抑制物(anti-miR-20a-5p)、miR-20a-5p抑制物阴性对照(anti... 目的观察微小RNA-20a-5p(miR-20a-5p)靶向调控乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1L)对人结直肠癌细胞株SW480增殖、凋亡能力的影响,并探讨其可能机制。方法取SW480细胞,分别将miR-20a-5p抑制物(anti-miR-20a-5p)、miR-20a-5p抑制物阴性对照(anti-miR-NC)、BRMS1L过表达载体(pcDNA-BRMS1L)、BRMS1L过表达载体阴性对照(pcDNA-NC)、miR-20a-5p模拟物(miR-20a-5p mimics)、miR-20a-5p模拟物阴性对照(miR-NC)转染至细胞中,CCK-8法测算细胞存活率,流式细胞术测算细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞周期素D1(CyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-Caspase-3)、β-catenin蛋白。取SW480细胞,分别将miR-20a-5p mimics、miR-NC与WT-BRMS1L或MUT-BRMS1L共转染至细胞中,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测细胞荧光素酶活性;另取SW480细胞,分别将miR-20a-5p mimics、miR-NC、anti-miR-20a-5p、anti-miR-NC分别转染至细胞中,采用Western blotting法检测细胞BRMS1L蛋白。结果抑制miR-20a-5p表达或过表达pcDNA-BRMS1L,SW480细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,CyclinD1蛋白表达降低,Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高(P均<0.05);抑制BRMS1L表达部分逆转anti-miR-20a-5p对SW480细胞增殖和凋亡的影响(P均<0.05)。抑制miR-20a-5p表达后SW480细胞中β-catenin蛋白的表达较低,抑制BRMS1L表达部分逆转anti-miR-20a-5p对β-catenin蛋白表达的影响(P均<0.05)。miR-20a-5p靶向BRMS1L,并负性调控其表达(P均<0.05)。结论miR-20a-5p靶向调控BRMS1L抑制SW480细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与抑制β-catenin蛋白表达有关。 展开更多

关键词 微小RNA-20a-5p 乳腺癌转移抑制基因1 结直肠癌 细胞增殖 细胞凋亡 WNT/Β-CATENIN信号通路

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微小RNA-20a对宫颈癌细胞迁移、侵袭、增殖及ATG7表达的影响 被引量：5

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作者 段学英 杜二球 邰云燕 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期310-315,共6页

目的探讨微小RNA-20a(miR-20a)对宫颈癌Si Ha细胞迁移、侵袭和增殖的影响及可能机制。方法采用Lipofectamine 2000脂质体法将miR-20a抑制剂和阴性对照载体分别转染Si Ha细胞株。采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测两组细胞中miR-20a的表达... 目的探讨微小RNA-20a(miR-20a)对宫颈癌Si Ha细胞迁移、侵袭和增殖的影响及可能机制。方法采用Lipofectamine 2000脂质体法将miR-20a抑制剂和阴性对照载体分别转染Si Ha细胞株。采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测两组细胞中miR-20a的表达以验证转染效果,细胞迁移实验、Transwell细胞侵袭实验及MTT法分别检测miR-20a的表达抑制对Si Ha细胞迁移、侵袭和增殖的影响;荧光素酶报告实验及Western blotting验证miR-20a对下游预测靶基因自噬相关蛋白7(ATG7)的调控作用。结果 QPCR检测结果显示,与阴性对照组比较,miR-20a抑制剂组Si Ha细胞中miR-20a的表达量显著降低(P<0.01),证明转染模型构建成功。细胞迁移实验显示,转染48 h后,阴性对照组细胞的划痕愈合率为(75.68±5.94)%,高于抑制剂组的(38.24±7.68)%(P<0.01)。Transwell细胞侵袭实验显示,转染48 h后,阴性对照组穿膜细胞数为(96.35±10.23)个,多于抑制剂组的(23.54±7.26)个(P<0.01)。MTT法检测显示,阴性对照组和抑制剂组细胞增殖能力的差异无统计学意义(P>0.05)。与阴性对照组相比,转染miR-20a模拟物+ATG7野生型3’UTR报告基因载体的细胞荧光素酶活性显著下降(P<0.01),而转染miR-20a模拟物+ATG7突变型3’UTR报告基因载体的细胞荧光素酶活性无显著变化(P>0.05);Western blotting检测显示,与阴性对照组比较,抑制剂组细胞ATG7蛋白表达量显著增加(P<0.01)。结论降低miR-20a的表达能显著抑制宫颈癌细胞的迁移和侵袭能力,但细胞增殖能力不受影响,这可能与miR-20a直接作用于其下游靶基因ATG7并调控其表达紧密相关。 展开更多

关键词 宫颈癌 微小RNA-20a(miR-20a) 迁移 侵袭 增殖 自噬相关蛋白7(ATG7)

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