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呼出气冷凝液、血清和组织中miRNA34a检测对非小细胞肺癌患者的价值探讨
1
作者 陶国华 孙苹苹 +1 位作者 陈金亮 陈建荣 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第12期1661-1664,1669,共5页
目的探讨呼出气冷凝液、血清和组织中miRNA34a表达水平检测对非小细胞肺癌患者的应用价值。方法应用实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)技术检测50例病理证实为NSCLC患者的EBC、血清及其中30例手术患者癌组织、癌旁组织和50例健康人群的血清... 目的探讨呼出气冷凝液、血清和组织中miRNA34a表达水平检测对非小细胞肺癌患者的应用价值。方法应用实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)技术检测50例病理证实为NSCLC患者的EBC、血清及其中30例手术患者癌组织、癌旁组织和50例健康人群的血清及EBC标本中miRNA34a的相对表达水平,用化学发光法检测血清癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白19的可溶性片段(CYFRA21-1)。结果 NSCLC患者癌组织、血清及EBC中miRA34a的相对表达量均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。晚期(Ⅲ~Ⅳ期)NSCLC患者癌组织、血清和EBC中miRNA34a的表达量低于早期(Ⅰ~Ⅱ期)患者,差异有统计学意义(P<0.05)。EBC中miRNA34a在诊断NSCLC的在灵敏度和特异度分别为:72%、78%,与血清CEA和CYFRA21-1联合应用,诊断NSCLC的在灵敏度和特异度分别为:78.3%、82.1%。结论 EBC中miRNA34a的表达量与非小细胞肺癌患者的TNM分期有关。EBC中miRNA34a与血清CEA和CYFRA21-1联合应用可提高NSCLC诊断的灵敏度和特异度。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 呼出气冷凝液 mirna34a
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miRNA34a外泌体构建及其抑制口腔鳞癌细胞增殖的体外实验研究 被引量：1
2
作者 邓威 王晨星 +4 位作者 金齐尧 毛广艳 孟颖 李怀奇 叶金海 《口腔生物医学》 2020年第2期92-96,共5页
目的:运用加载miRNA34a的外泌体治疗口腔鳞状细胞癌。方法:采用超速离心的方法从HEK293细胞的培养上清液中提取外泌体,结合透射电子显微镜、纳米粒子追踪分析仪、Western blot实验鉴定外泌体,进而利用共孵育的方法将疏水性修饰的miRNA34... 目的:运用加载miRNA34a的外泌体治疗口腔鳞状细胞癌。方法:采用超速离心的方法从HEK293细胞的培养上清液中提取外泌体,结合透射电子显微镜、纳米粒子追踪分析仪、Western blot实验鉴定外泌体,进而利用共孵育的方法将疏水性修饰的miRNA34a模拟物加载到外泌体中,以构建含miRNA34a的外泌体(exo-miRNA34a),倒置荧光显微镜下观察加载效率。将exo-miRNA34a接种于口腔鳞癌细胞HN6中,利用激光共聚焦显微镜观察HN6细胞对外泌体的摄取,结合CCK-8实验检测HN6细胞增殖的变化。结果:在HEK293细胞培养上清液提取物中观察到40~150 nm大小的小囊泡,囊泡粒径分布峰值为97.9 nm;肿瘤易感基因101蛋白(TSG101)和CD63表达阳性,钙联蛋白(Calnexin)表达阴性。疏水改性的miRNA34a可有效加载到外泌体中,载药率约为47%,载药后外泌体粒径增加,其完整性不受影响。exo-miRNA34a可以进入HN6细胞中,对HN6细胞的增殖具有明显抑制作用(P<0.05)。结论:外泌体介导的miRNA34a可明显抑制口腔鳞癌HN6细胞的增殖。 展开更多
关键词 mirna34a 外泌体 口腔鳞癌 增殖 HEK293细胞 HN6细胞
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肺腺癌中miRNA34a和c-myc的表达及意义 被引量：6
3
作者 许晶晶 刘峰 +1 位作者 杨廷桐 陆建福 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1374-1378,共5页
目的检测肺腺癌组织中miRNA34a,癌基因c-myc的表达,探讨两者之间的关系及意义。方法采用qRT-PCR法检测mRNA miRNA34a,Western blot、免疫组化法检测c-myc蛋白在正常肺组织、癌旁肺组织、肺腺癌以及转移癌组织中的表达。结果(1)miRNA34a... 目的检测肺腺癌组织中miRNA34a,癌基因c-myc的表达,探讨两者之间的关系及意义。方法采用qRT-PCR法检测mRNA miRNA34a,Western blot、免疫组化法检测c-myc蛋白在正常肺组织、癌旁肺组织、肺腺癌以及转移癌组织中的表达。结果(1)miRNA34a在肺腺癌组织中呈低表达,低于癌旁和正常肺组织(P<0.01),高于转移癌组织(P<0.01)。c-myc在肺腺癌组织中呈高表达,高于癌旁和正常肺组织(P<0.01),低于转移癌组织(P<0.01)。miRNA34a及c-myc在癌旁组织和正常肺组织之间的表达差异有统计学意义(P<0.05)。(2)病理类型:miRNA34a及c-myc在低分化和高分化肺腺癌之间的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。两者在转移癌与非转移肺腺癌组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。(3)预后分析:cmyc阳性组的肺腺癌患者生存率低于阴性组(P<0.05),miRNA34a低表达组患者的生存时间明显低于高表达组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论肺腺癌组织中miRNA34a的表达与c-myc蛋白表达呈负相关。c-myc高表达miRNA34a低表达提示患者预后不良。 展开更多
关键词 肺腺癌 微小RNA34a C-MYC QRT-PCR
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血清miRNA34a基因表达水平在结直肠腺癌诊断和评估预后中的价值 被引量：4
4
作者 雒亚蒙 晋国权 谭成军 《河北医药》 CAS 2019年第20期3082-3085,共4页
目的探讨血清miRNA34a基因表达水平在结直肠腺癌的诊断及评估预后中的价值。方法研究对象分为A组(结直肠腺癌患者)、B组(结肠腺瘤性息肉患者)和C组(健康个体),每组40例。所有研究对象均接受完整的病史采集和一般临床检查。检测并记录患... 目的探讨血清miRNA34a基因表达水平在结直肠腺癌的诊断及评估预后中的价值。方法研究对象分为A组(结直肠腺癌患者)、B组(结肠腺瘤性息肉患者)和C组(健康个体),每组40例。所有研究对象均接受完整的病史采集和一般临床检查。检测并记录患者血细胞计数、肝肾功能及血清肿瘤标志物CEA及CA19-9。采用实时荧光定量PCR检测miRNA34a基因的表达水平。结果3组患者人口学资料如年龄、性别比和体重指数间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与B组和C组比较,A组患者血红蛋白及血清miRNA34a基因表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),而血清肿瘤标志物CA19-9和CEA水平则显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与血清癌性指标物CEA、CA19-9比较,miRNA34a基因表达水平诊断结直肠癌的特异性和敏感性均较好,分别为90.00%和93.75%,ROC曲线下面积为0.968,差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌患者中基线血清肿瘤标志物CEA和CA19-9与miRNA34a基因表达水平间存在显著负相关关系,差异有统计学意义(P<0.05)。随着结直肠癌TNM分期和病理分级增加,患者血清miRNA34a基因表达水平均随之显著下调(P<0.05),且发生转移的结直肠癌患者的miRNA34a基因表达水平较未发生转移的结直肠癌患者显著降低(P<0.05);已死亡的患者miRNA34基因表达水平较存活的患者显著下调(P<0.05)。结论血清miRNA34a基因表达可作为筛选结直肠腺癌的一种可靠诊断指标,且结直肠腺癌患者血清miRNA34a基因表达水平越低越容易发生转移,预后越差。 展开更多
关键词 结直肠腺癌 mirna34a 诊断 预后
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IRE1α调节miRNA34a在高糖诱导的心肌细胞肥大中的作用
5
作者 刘静 李晓莉 +4 位作者 陈蕊蕊 魏婷 艾永飞 李炜 刘慧 《心脏杂志》 CAS 2019年第4期373-378,共6页
目的研究肌醇需求因子(inositol-requiringenzyme,IRE)1α在高糖诱导的心肌细胞肥大中的作用及与miRNA34a的关系。方法分离培养心肌细胞并分为对照组,高糖组,对照+过表达IRE1α组,高糖+过表达IRE1α组。利用IRE1α的腺病毒干预细胞,观... 目的研究肌醇需求因子(inositol-requiringenzyme,IRE)1α在高糖诱导的心肌细胞肥大中的作用及与miRNA34a的关系。方法分离培养心肌细胞并分为对照组,高糖组,对照+过表达IRE1α组,高糖+过表达IRE1α组。利用IRE1α的腺病毒干预细胞,观察高糖条件下其对心肌细胞活力、肥大及心钠肽(ANP)表达的影响。Westernblot检测ANP和IRE1α的表达,qRT-PCR检测ANP、IRE1α和miRNA34a表达,免疫荧光染色检测细胞纯度及横截面积。结果与对照组比较,随着葡萄糖浓度上升,细胞活力持续下降(P<0.05),心肌细胞肥大标志ANP表达增加(P<0.05),IRE1α基因及蛋白表达降低(P<0.05),且于葡萄糖浓度达到30mmol/L最低。与对照组比较,高糖能够降低细胞活力,刺激心肌细胞上调ANP表达(P<0.05),刺激心肌细胞横截面积增大(P<0.05);而过表达IRE1α基因能显著上调心肌细胞的活力水平,降低ANP蛋白及基因的表达,抑制高糖培养下心肌细胞的肥大(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,随着血糖浓度上升,miRNA34a表达明显升高,且当过表达IRE1α后,miRNA34a表达明显降低。结论过表达IRE1α基因可有效抑制高糖诱导的心肌细胞肥大,其机制可能与下调miRNA34a表达有关。 展开更多
关键词 内质网应激 IRE1α mirna34a 心肌细胞肥大 高糖
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miR34a在戊四氮致癫痫大鼠中通过下调Bcl-2导致神经元凋亡 被引量：14
6
作者 金绍静 马巍 +4 位作者 张淑红 金岳雷 刘东海 王淑秋 朱金玲 《中风与神经疾病杂志》 CAS 2018年第7期617-621,共5页
目的探讨miR34a对戊四氮致癫痫大鼠的影响及其可能的机制。方法将24只雄性健康的Wister大鼠随机分为正常对照组和癫痫组(PTZ 35 mg/kg),采用腹腔注射方式,连续注射28 d最后一次施用药物24 h后处死实验大鼠、取材。通过Racine评分标准对... 目的探讨miR34a对戊四氮致癫痫大鼠的影响及其可能的机制。方法将24只雄性健康的Wister大鼠随机分为正常对照组和癫痫组(PTZ 35 mg/kg),采用腹腔注射方式,连续注射28 d最后一次施用药物24 h后处死实验大鼠、取材。通过Racine评分标准对癫痫大鼠模型的建立进行评价;应用生物信息学方法分析癫痫大鼠海马中差异表达的、靶向Bcl-2的miRNA;应用qRT-PCR方法验证检测大鼠海马中miRNA34a的表达情况;应用Western blot检测大鼠海马中bcl-2的表达情况;应用Hoechst检测大鼠海马神经元的凋亡情况。结果癫痫组大鼠的Racine评分明显高于正常对照组(P<0.01);通过生物信息学方法发现miRNA34a是差异高表达前十的miRNA中唯一可以靶向Bcl-2的miRNA;癫痫组大鼠海马组织中miR34a的表达量明显高于正常对照组(P<0.01)、Bcl-2的表达量明显低于正常对照组(P<0.01)、海马神经元凋亡情况明显高于正常对照组(P<0.01)。结论miRNA34a对戊四氮致癫痫大鼠海马可能具有损伤神经元的作用,并且其作用机制可能是通过下调Bcl-2导致海马神经元凋亡进而对癫痫大鼠产生影响。 展开更多
关键词 癫痫 mirna34a BCL-2 细胞凋亡
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MiR-34c在奶山羊雄性生殖干细胞增殖分化中的作用 被引量：3
7
作者 刘超 武思宇 华进联 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期569-577,共9页
microRNA(miRNA)在奶山羊雄性生殖细胞和精子发生过程有重要的调控功能。为研究miR-34c对雄性生殖干细胞增殖与分化中的作用,本文利用视黄酸效应基因8(Stra8)在雄性生殖细胞中随年龄增长,以其表达量上调的表达特征为指针,使用实时定量PC... microRNA(miRNA)在奶山羊雄性生殖细胞和精子发生过程有重要的调控功能。为研究miR-34c对雄性生殖干细胞增殖与分化中的作用,本文利用视黄酸效应基因8(Stra8)在雄性生殖细胞中随年龄增长,以其表达量上调的表达特征为指针,使用实时定量PCR技术筛选分析miRNAs。结果发现,miR-34c与Stra8的表达规律基本一致。在无精症奶山羊的睾丸组织中,发现miR-34c在无精症奶山羊睾丸组织中表达缺失。利用miR-34c模拟物及抑制剂转染奶山羊雄性生殖干细胞,体外转染miR-34c模拟物及其抑制剂,发现miR-34c能够下调Rarg、Stra8与c-Myc基因的表达,减缓奶山羊雄性生殖干细胞的增殖。结果提示,miR-34c可能具有调控奶山羊雄性生殖干细胞的减数分裂的作用,同时抑制其增殖。 展开更多
关键词 视黄酸效应基因8(Stra8) MIRNA miRNA前体与成熟体miR-34c 雄性生殖干细胞 奶山羊
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麦冬皂苷B体外调控非小细胞肺癌A549细胞miRNA-34b表达的研究 被引量：5
8
作者 邱雯莉 姜泽群 +1 位作者 陈海彬 周红光 《世界科学技术-中医药现代化》 2016年第4期620-625,共6页
目的:本研究主要观察不同方式处理后的非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞中mi RNA?34b表达水平,探讨mi RNA?34b对MET信号通路的调控机制,以及麦冬皂苷B(OPB)抑癌效应的分子机理,探寻治疗NSCLC的新靶点。方法:采用非小细胞肺癌A549细胞、胚肺... 目的:本研究主要观察不同方式处理后的非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞中mi RNA?34b表达水平,探讨mi RNA?34b对MET信号通路的调控机制,以及麦冬皂苷B(OPB)抑癌效应的分子机理,探寻治疗NSCLC的新靶点。方法:采用非小细胞肺癌A549细胞、胚肺成纤维细胞MRC?5、A549+OPB细胞、感染过表达慢病毒LV?hsa?mir?34b的A549细胞、以及感染阴性对照CON181B病毒的A549细胞作为研究对象,分别设为CON组、MRC?5组、CON+OPB组、Micro?up组、NC组。采用q RT?PCR方法检测mi R?34b在CON组、MRC?5组、A549+OPB组A549细胞中的表达情况。使用生物信息学软件预测mi RNA?34b可能的下游功能靶基因。使用q RT?PCR的方法定量分析OPB对MET基因表达的影响,用Western blot检测mi RNA?34b和OPB对靶MET蛋白表达的影响。结果:与MRC?5组相比,A549细胞中mi RNA?34b的表达明显减少,加入OPB后mi R?34b的表达增加。生物信息学预测显示MET基因是mi R?34b可能的关键下游靶基因。加入OPB后,MET基因水平和蛋白水平的表达均降低。结论:OPB可能通过上调A549细胞mi RNA?34b表达,抑制下游靶基因MET进而发挥抗癌作用。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 miRNA?34b MET基因 麦冬皂苷B
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