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急性缺血性脑卒中患者血清miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a水平表达检测的诊断价值研究 被引量:12
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作者 郭洁 池水侠 《现代检验医学杂志》 CAS 2021年第5期43-45,89,共4页
目的探究急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者血清miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a水平表达检测的诊断价值。方法选取西安医学院第一附属医院急诊科2019年5月~2020年3月收治的65例AIS患者为病例组,另选同期50例体... 目的探究急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者血清miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a水平表达检测的诊断价值。方法选取西安医学院第一附属医院急诊科2019年5月~2020年3月收治的65例AIS患者为病例组,另选同期50例体检健康者为对照组。比较两组的糖尿病史、高血压史和高血脂史,采用实时灾光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a的水平。采用美国国立卫生院卒中量表(NIH stroke scale,NIHSS)评估AIS患者的神经功能缺损程度。采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)计算miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a的AIS诊断价值。结果两组的糖尿病史、高血压史和高血脂史比较差异无统计学意义(P>0.05)。相比于对照组,病例组血清中miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a水平均升高,其差异具有统计学意义(t=20.700,25.997,23.629,均P=0.000)。Pearson相关性分析结果显示,血清中miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a水平与NIHSS评分均呈显著正相关,其差异具有统计学意义(r=0.272,P<0.001;r=0.142,P=0.005;r=0.171,P=0.013)。miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a联合检测诊断AIS的灵敏度和特异度分别为71.2%和76.4%,高于三项单独和两两联合检测。结论miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a三者联合检测可进一步提高AIS患者的诊断率,为临床应用提供了可靠的理论基础。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 miRNA-181c-5p miRNA-340-5p mirna146a
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miRNA146a对软骨细胞VEGF表达的影响 被引量:1
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作者 张清 杨静 +6 位作者 陈经勇 李钟 张鹏 毕梦娜 张上上 朱江伟 鲁丽莎 《实用骨科杂志》 2016年第3期237-241,共5页
目的研究在正常软骨细胞及中期和晚期骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞中激活或抑制miRNA146a后血管内皮生长因子(vascular endothelial groxth factor,VEGF)表达的变化规律,探索miRNA146a在OA发生、发展中的作用。方法收集正常人... 目的研究在正常软骨细胞及中期和晚期骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞中激活或抑制miRNA146a后血管内皮生长因子(vascular endothelial groxth factor,VEGF)表达的变化规律,探索miRNA146a在OA发生、发展中的作用。方法收集正常人膝关节软骨4例,OA患者膝关节软骨12例。OA组又依据Kellgren-Lawrence的放射学诊断标准分为中期和晚期OA。通过化学转染的方法转染miRNA146a mimic或miRNA146a inhibitor于各组软骨细胞,测定激活或抑制miRNA146a后,VEGF蛋白水平表达的变化。结果正常人软骨细胞中激活miRNA146a后,VEGF的蛋白水平较对照组及抑制组均出现明显的上升,结果具有统计学意义(P<0.05);抑制miRNA146a后,VEGF蛋白水平下降,结果没有统计学意义(P≥0.05)。中期OA软骨细胞表达VEGF水平高于晚期OA软骨细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。中期OA软骨细胞激活miRNA146a后,VEGF的蛋白水平上升,结果具有统计学意义(P<0.05);抑制miRNA146a后,VEGF的蛋白水平下降,结果具有统计学意义(P<0.05)。晚期OA软骨细胞激活miRNA146a后,VEGF的蛋白水平上升,结果具有统计学意义(P<0.05);晚期OA软骨细胞抑制miRNA146a后,VEGF的蛋白水平下降,结果不具有统计学意义(P≥0.05)。结论 miRNA146a可调控软骨细胞VEGF表达,从而参与OA的发生、发展。 展开更多
关键词 骨关节炎 mirna146a 血管内皮生长因子 RNA干扰
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miRNA146a通过TRAF6下调IFNβ的表达 被引量:1
3
作者 卜欣欣 朱亮华 《智慧健康》 2023年第19期27-30,共4页
目的探讨miRNA146a通过TRAF6下调IFNβ的表达情况。方法设计TRAF6基因3’UTR区miRNA146a结合位点的野生型引物,随后预测IRF-3及TRAF6基因3’UTR区域可能的miRNA结合位点,以人cDNA为模板,进行PCR目的片段扩增,将HeLa细胞在含10%胎牛血清... 目的探讨miRNA146a通过TRAF6下调IFNβ的表达情况。方法设计TRAF6基因3’UTR区miRNA146a结合位点的野生型引物,随后预测IRF-3及TRAF6基因3’UTR区域可能的miRNA结合位点,以人cDNA为模板,进行PCR目的片段扩增,将HeLa细胞在含10%胎牛血清的DMEM高糖培养液进行传代培养,并进行细胞RNA提取,逆转录,进行实时定量RT-PCR、免疫印迹实验。结果miRNA146a、miRNA23a、miRNA24k可上调IRF-3启动子活性,通过表达miRNA146a转染细胞检测IFNβ通路上游分子TRAF6、IRAK1、NF-κB,提示miRNA146a、TRAF6、IRAK1、NF-κB均明显下降,表达miRNA146a降低pGL3c-TRAF6-3UTR萤光素酶活性,干扰miRNA146a可上调萤光素酶活性,miRNA146a下调TRAF6表达,TRAF6 siRNA下调PolyI:C激活的IFNβ启动子活性,TRAF6 siRNA较对照能够显著增加miRNA146a对IFNβ启动子下调作用。结论IRF-3及IFNβ可能是EB病毒诱导宿主miRNA的调控靶点,为防治EB病毒相关疾病提供新的思路。 展开更多
关键词 mirna146a TRAF6 IFNβ表达
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中波紫外线诱导角质形成细胞急性光损伤模型的建立及其miRNA146a表达的研究
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作者 华丽娟 《常州实用医学》 2015年第5期292-294,共3页
目的建立中波紫外线(UVB)诱导角质形成细胞(HaCaT细胞)的急性光损伤模型,并对其miRNA146a的表达进行初步研究。方法以含10%小牛血清及1%双抗的RPMI1640培养基体外培养HaCaT细胞、miRNA146a~mimics转染细胞,分别以0、30、60、9... 目的建立中波紫外线(UVB)诱导角质形成细胞(HaCaT细胞)的急性光损伤模型,并对其miRNA146a的表达进行初步研究。方法以含10%小牛血清及1%双抗的RPMI1640培养基体外培养HaCaT细胞、miRNA146a~mimics转染细胞,分别以0、30、60、90mJ/cm2UVB照射诱导急性光损伤,实时荧光定量PCR法检测miRNA146a的表达,MTT法检测细胞活性,流式细胞技术检测细胞凋亡。结果以real—timePCR方法检测不同剂量UVB照射后各实验组中miRNA146a的表达,显示各剂量组中miRNA146a的表达较对照组均出现下调,差异具有统计学意义(P〈0.01)。结论HaCaT细胞急性光损伤模型中miRNA146a出现下调,故上调miRNA146a后有可能抑制UVB诱导的细胞凋亡,从而对细胞起到光保护作用。 展开更多
关键词 中波紫外线 角质形成细胞 光损伤 mirna146a
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miRNA146a基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定 被引量:2
5
作者 吴慧 范恒 +1 位作者 唐庆 刘星星 《湖北中医药大学学报》 2019年第4期8-11,共4页
目的探讨构建大鼠微小RNA(miRNA)146a基因过表达慢病毒载体的技术方法并检测其体外表达目的基因的水平。方法设计miRNA146a基因引物,采用聚合酶链反应(PCR)扩增miRNA146a基因片段;用Age I酶切GV342载体;通过连接酶将miRNA146a基因片段... 目的探讨构建大鼠微小RNA(miRNA)146a基因过表达慢病毒载体的技术方法并检测其体外表达目的基因的水平。方法设计miRNA146a基因引物,采用聚合酶链反应(PCR)扩增miRNA146a基因片段;用Age I酶切GV342载体;通过连接酶将miRNA146a基因片段连接至线性化的GV342载体上;将构建的重组载体阳性克隆送美国英杰公司进行DNA测序分析;重组慢病毒转染骨髓间充质干细胞(BMSC),利用RT-PCR检测BMSC的miRNA146a表达量。结果通过PCR成功地扩增了miRNA146a基因片段并连接到了GV342病毒载体上,通过DNA测序鉴定,证明miRNA146a-GV342质粒构建正确,通过RT-PCR检测,表明相对于空白组,mi RNA146a过表达组的miRNA146a基因表达量明显上升。结论成功构建miRNA146a-GV342慢病毒载体,为mi RNA146a基因的后期研究提供了实验基础。 展开更多
关键词 微小RNA146a基因 过表达 慢病毒 载体构建
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STAT4基因rs7574865位点多态性与武陵山地区类风湿性关节炎具有相关性 被引量:6
6
作者 夏燕 宋敬丽 +5 位作者 冯佳 田瑞 曾殷豪 向阳 代玉芳 袁林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期829-833,共5页
目的探讨信号转导子与转录激活子4(STAT4) rs7574865和miRNA146a rs2910164基因单核苷酸多态性(SNP)与武陵山地区类风湿性关节炎(RA)的相关性。方法选择287例RA患者和同期305例体检的健康人群为对照组,采用多重PCR结合高通量测序技术(Hi... 目的探讨信号转导子与转录激活子4(STAT4) rs7574865和miRNA146a rs2910164基因单核苷酸多态性(SNP)与武陵山地区类风湿性关节炎(RA)的相关性。方法选择287例RA患者和同期305例体检的健康人群为对照组,采用多重PCR结合高通量测序技术(Hi-SNP)测定RA患者和同期对照人群rs7574865和rs2910164位点基因型,用χ2检验比较分析两组人群中基因型和等位基因型频率分布,并分析这两个位点多态性与RA发病风险的相关性以及与患者类风湿因子(RF)和抗环瓜氨酸肽(ACCP)抗体水平的相关性。结果 rs7574865位点的基因型频率在两组间存在统计学差异,TT基因型和T等位基因均是RA的易感因素(OR=2. 42,95%CI:1. 37~4. 28; OR=1. 43,95%CI:1. 12~1. 82),同时显性模型和隐性模型也显示与RA的发病易感相关。rs2910164位点单核苷酸多态性与RA易感性无关,并且rs7574865和rs2910164位点多态性与RF和ACCP抗体水平均无显著相关性。结论 STAT4 rs7574865位点单核苷酸多态与武陵山地区RA的发病相关,与患者RF和ACCP抗体水平无关;而miRNA146a rs2910164多态性与RA无显著相关性。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎(RA) 信号转导子与转录激活4(STAT4) mirna146a 单核苷酸多态性(SNP)
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miRNA-146a在溃疡性结肠炎大鼠结肠组织与血浆中浓度表达意义 被引量:6
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作者 刘佳丽 杨坤 +3 位作者 徐爱玲 刘一东 谷雪松 孙平良 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第1期115-118,I0026,共5页
目的探讨miRNA-146a在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)大鼠结肠组织及血浆中浓度表达意义。方法建立溃疡性结肠炎模型,采取病变结肠组织与血浆提取miRNA,并采用核酸测定仪测定浓度,琼脂糖凝胶电泳检测完整性,采用荧光定量PCR技术... 目的探讨miRNA-146a在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)大鼠结肠组织及血浆中浓度表达意义。方法建立溃疡性结肠炎模型,采取病变结肠组织与血浆提取miRNA,并采用核酸测定仪测定浓度,琼脂糖凝胶电泳检测完整性,采用荧光定量PCR技术检测溃疡性结肠炎miRNA-146a在组织及血浆中表达差异。结果模型组中溃疡性结肠炎大鼠结肠组织与血浆miRNA-146a表达量低于空白组(P<0.05)。模型组中组织核酸测定及琼脂糖凝胶电泳示浓度、纯度及完整性较血浆好。结论 miRNA-146a在溃疡性结肠炎大鼠组织与血浆中呈低表达,并且溃疡性结肠炎大鼠结肠组织较血浆更具稳定性可作为UC诊断的指标之一。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 mirna146a 组织 血浆
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miRNA-146a-5p对癫痫大鼠海马神经元NF-κB信号转导通路的影响 被引量:9
8
作者 杜双霞 张晓红 +3 位作者 赵合意 王亚男 李娜 马京京 《临床和实验医学杂志》 2019年第4期341-346,共6页
目的观察miRNA-146a-5p(miR-146a-5p)对癫痫大鼠海马神经元核因子κB(NF-κB)信号转导通路的影响。方法体外培养新生SD大鼠海马神经元,随后制备癫痫海马神经元模型,随机分为三组,空白对照组(control组):转染时添加等体积opti-MEM培养基... 目的观察miRNA-146a-5p(miR-146a-5p)对癫痫大鼠海马神经元核因子κB(NF-κB)信号转导通路的影响。方法体外培养新生SD大鼠海马神经元,随后制备癫痫海马神经元模型,随机分为三组,空白对照组(control组):转染时添加等体积opti-MEM培养基;阴性对照组(NC组):转染80 n M浓度NC至癫痫大鼠海马神经元; miR-146a-5p组:转染80 n M浓度miR-146a-5p mimics至癫痫大鼠海马神经元。转染后培养24 h,再用200 ng/ml脂多糖(LPS)诱导6 h,采用免疫荧光双染法鉴定体外培养海马神经元,采用膜片钳技术检测正常大鼠海马神经元和癫痫大鼠海马神经元自发性放电频率,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测未经LPS诱导各组海马神经元miR-146a-5p表达水平及经LPS诱导后各组海马神经元核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα(p IκBα)、NF-κB P65、IKB激酶-β(IKKβ) mRNA表达水平,采用Western blot法检测经LPS诱导后各组海马神经元IκBα、p IκBα、NF-κB P65、IKKβ蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测经LPS诱导后各组细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达水平。结果体外培养7 d的癫痫大鼠海马神经元与正常大鼠海马神经元相比较形态未见明显异常;癫痫大鼠海马神经元自发性放电频率明显较正常大鼠海马神经元明显增加(P <0. 05); miR-146a-5p组海马神经元miR-146a-5p表达水平明显高于control组和NC组(P <0. 05);经LPS诱导后miR-146a-5p组海马神经元p IκBα、NF-κB P65、IKKβmRNA及蛋白表达水平明显低于control组和NC组(P <0. 05),而IκBαmRNA及蛋白表达水平明显高于control组和NC组(P <0. 05);经LPS诱导后miR-146a-5p组细胞培养液中TNF-α、IL-1、IL-6、ICAM-1表达水平明显低于control组和NC组(P <0. 05)。结论miR-146a-5p可抑制LPS诱导的癫痫大鼠海马神经元NF-κB信号转导通路中p IκBα、NF-κB P65、IKKβmRNA及蛋白表达,促进IκBαmRNA及蛋白表达,减少TNF-α、IL-1、IL-6、ICAM-1等炎症因子的释放。 展开更多
关键词 大鼠 癫痫 miRNA-146a-5p 海马神经元 核因子ΚB
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miRNA 146b在多种疾病中的作用及其机制研究进展 被引量:8
9
作者 邢子禾 张荣雪 +2 位作者 李杨 陈京燕 钱晖 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2018年第5期454-458,共5页
miRNA146b(简称miR-146b,其人类同源性miRNA也被称为hs-miR-146b-5p)同miRNA146a均是miRNA146家族中的一员。鼠miR-146b由位于19号染色体19qC3位置的MIRNA146B基因编码,而鼠miR-146a由位于11号染色体的11qA5位置的MIRNA146A基因编码.
关键词 miRNA146b 肿瘤 炎症 FOXP3-miR-146-NF-κB轴 JAK/STAT通路 PI3K-Akt通路 MAPK通路
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外泌体miRNA146b-5p促进甲状腺乳头状癌细胞迁移和侵袭 被引量:2
10
作者 叶卫东 邓先兆 樊友本 《外科理论与实践》 2019年第4期344-348,共5页
目的 :分离和鉴定甲状腺乳头状癌KTC-1细胞分泌的外泌体,并探讨外泌体携带miRNA146b-5p对KTC-1细胞体外迁移和侵袭的影响。方法:收集KTC-1细胞的外泌体,电转miRNA146b-5p和其抑制剂进入外泌体,并与KTC-1细胞共培养。检测KTC-1细胞的体... 目的 :分离和鉴定甲状腺乳头状癌KTC-1细胞分泌的外泌体,并探讨外泌体携带miRNA146b-5p对KTC-1细胞体外迁移和侵袭的影响。方法:收集KTC-1细胞的外泌体,电转miRNA146b-5p和其抑制剂进入外泌体,并与KTC-1细胞共培养。检测KTC-1细胞的体外迁移和侵袭的能力。结果:成功分离和鉴定KTC-1细胞分泌的外泌体。外泌体miRNA146b-5p可进入KTC-1细胞,促进KTC-1细胞的体外迁移和侵袭。结论:外泌体miRNA146b-5p可促进甲状腺乳头状癌的体外侵袭和转移。外泌体miRNA423-5p沉默可能作为甲状腺乳头状癌的治疗方法。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 外泌体 miRNA146b-5p 迁移和侵袭
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低强度周期性应力对骨骼肌细胞增殖分化调控的机制 被引量:2
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作者 匡威 谭家莉 +3 位作者 王桥 李洪涛 伍丽静 刘琴瑶 《临床口腔医学杂志》 2014年第5期259-262,共4页
目的:探明低强度周期性应力调控骨骼肌细胞增殖分化的分子机制。方法:采用Flexercell Strain Unit系统对C2C12成肌细胞加载5%牵张应力,观察细胞增殖和分化情况,检测成肌细胞分化标志基因myogenin等的表达情况,荧光报告系统检测NFkappa ... 目的:探明低强度周期性应力调控骨骼肌细胞增殖分化的分子机制。方法:采用Flexercell Strain Unit系统对C2C12成肌细胞加载5%牵张应力,观察细胞增殖和分化情况,检测成肌细胞分化标志基因myogenin等的表达情况,荧光报告系统检测NFkappa B的活性,microRNA特异性荧光定量PCR检测miR146a在增殖和分化条件下表达差异。结果:在5%周期性牵张应力作用下,成肌细胞分化受到抑制;无论增殖条件还是分化条件下,低强度拉伸均可以导致miR146a升高,但在分化条件下更为明显(P<0.05);分化条件下组成性的NFkappa B的活性低于其在增殖条件下的活性(P<0.05)。结论:低强度应力抑制骨骼肌细胞分化,可能是通过miR146a的升高从而抑制NFkappaB的活性引起的。 展开更多
关键词 周期性应力 骨骼肌细胞 增殖 分化 miR146a
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