miRNA-29b对大鼠心肌梗死后心肌纤维化的作用机制研究

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作者 刘萌萌 杜文涛 《中南药学》 2025年第2期436-441,共6页

目的探究miRNA-29b在大鼠心肌梗死后心肌纤维化过程中的作用机制。方法采用左冠脉前降支结扎法制备心肌梗死动物模型,共24只SD雄性大鼠造模成功,将其随机分为MI组、MI+NC miRNA组、MI+miRNA-29b组,每组8只;另取8只大鼠只穿线不结扎冠状... 目的探究miRNA-29b在大鼠心肌梗死后心肌纤维化过程中的作用机制。方法采用左冠脉前降支结扎法制备心肌梗死动物模型,共24只SD雄性大鼠造模成功,将其随机分为MI组、MI+NC miRNA组、MI+miRNA-29b组,每组8只;另取8只大鼠只穿线不结扎冠状动脉作为假手术(Sham)组。构建携带大鼠miRNA-29b基因的慢病毒载体。MI+NC miRNA组及MI+miRNA-29b组大鼠尾静脉分别单次注射NC慢病毒、miRNA-29b慢病毒各100μL进行干预,Sham组和MI组分别尾静脉注射等体积的生理盐水。28 d后超声心动图检测心功能相关指标;Masson染色观察心肌胶原容积分数(CVF);免疫组化法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原表达;实时荧光PCR及蛋白印迹法检测心肌转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3、Ⅰ型胶原α1链基因(COL1A1)及平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA和蛋白表达变化。结果影像学结果显示,MI+miRNA-29b组大鼠心功能改善。病理学及分子生物学结果显示,与MI组、MI+NC miRNA组比较,MI+miRNA-29b组大鼠心肌组织Ⅰ、Ⅲ胶原和CVF、COL1A1及α-SMA的miRNA及蛋白表达水平降低;心肌组织TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白表达水平降低。结论miRNA-29b通过靶向抑制TGF-β1/Smad3信号通路抑制心肌梗死后纤维化的发生发展,从而改善心功能。 展开更多

关键词 mirna-29b 心肌梗死 纤维化 TGF-β1/Smad3信号通路

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利用CRISPR/Cas9技术构建miRNA-29b1基因敲除小鼠 被引量：10

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作者 赵勇 师长宏 +7 位作者 赵亚 辛智倩 刘佩娟 张彩勤 白冰 白杰英 王华 张海 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第12期1-4,共4页

目的应用CRISPR/Cas9技术构建miRNA-29b1基因敲除小鼠。方法针对miRNA-29b1基因设计一段sgRNA,sgRNA和Cas9体外转录后显微注射至C57BL/6小鼠受精卵细胞。小鼠出生后取其基因组DNA进行测序以鉴定基因型,同时取小鼠心、肝、脾、肺、肾等... 目的应用CRISPR/Cas9技术构建miRNA-29b1基因敲除小鼠。方法针对miRNA-29b1基因设计一段sgRNA,sgRNA和Cas9体外转录后显微注射至C57BL/6小鼠受精卵细胞。小鼠出生后取其基因组DNA进行测序以鉴定基因型,同时取小鼠心、肝、脾、肺、肾等脏器研磨后提取总RNA,通过real-time PCR分析miRNA-29b1在这些脏器中的表达。结果设计了20 bp的miRNA-29b1sgRNA并与Cas9一起进行了体外转录,显微注射小鼠受精卵细胞后获得miRNA-29b1基因突变小鼠。测序结果表明突变小鼠有两种基因型,一种为10 bp的缺失突变;另一种为22 bp的缺失突变,同时伴有3 bp的插入突变。与野生型小鼠相比,基因突变小鼠心、肝、脾、肺、肾等组织中miRNA-29b1表达量下降明显。结论应用CRISPR/Cas9技术成功构建miRNA-29b1基因敲除小鼠。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9 mirna-29b1 基因敲除小鼠

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小檗碱对大鼠高血压左室肥厚心肌表达miRNA-29b的影响及抑制心肌纤维化的作用机制 被引量：15

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作者 郑颖 李小华 +2 位作者 李强 张忆雪 陈漠水 《中国医药导报》 CAS 2020年第14期19-22,F0004,共5页

目的探讨小檗碱(BBR)对大鼠高血压左室肥厚心肌表达miRNA-29b的影响及抑制心肌纤维化的作用机制。方法将25只雄性SD大鼠随机分成假手术组(Sham组,n=7),模型组(Model组,n=9)和模型给药组(Model+BBR组,n=9)。腹主动脉缩窄法制备大鼠高血... 目的探讨小檗碱(BBR)对大鼠高血压左室肥厚心肌表达miRNA-29b的影响及抑制心肌纤维化的作用机制。方法将25只雄性SD大鼠随机分成假手术组(Sham组,n=7),模型组(Model组,n=9)和模型给药组(Model+BBR组,n=9)。腹主动脉缩窄法制备大鼠高血压心肌肥厚模型,术后8周测定各组超声心动图、心脏肥大指数,Masson染色检测心肌组织纤维化,RT-PCR检测心肌组织miRNA-29b及其靶基因col1α1和col3α1 mRNA表达。结果Model组的舒张末期室间隔厚度(IVSd)、舒张末期左室后壁厚度(LVPWd)均厚于Sham组,左室长轴缩短分数(FS)、射血分数(EF)均低于Sham组,差异有统计学意义(P<0.05);Model+BBR组的IVSd、LVPWd均薄于Model组,FS、EF均高于Model组,差异有统计学意义(P<0.05)。Model组的心脏重量显著重于Sham组,心脏/体重比显著高于Sham组(P<0.01);Model+BBR组的心脏重量轻于Model组,心脏/体重比低于Model组(P<0.05)。Model组的心肌胶原蛋白体积分数显著高于Sham组(P<0.01);Model+BBR组的心肌胶原蛋白体积分数低于Model组(P<0.05)。Model组的Col1α1 mRNA和Col3α1 mRNA水平均高于Sham组,miRNA-29b水平低于Sham组(P<0.05或P<0.01);Model+BBR组的Col1α1 mRNA和Col3α1 mRNA水平均低于Model组,miRNA-29b水平高于Model组(P<0.05)。结论BBR可能通过下调miRNA-29b水平及上调其靶基因表达水平,抑制高血压心肌肥厚模型心肌肥厚和心肌纤维化。 展开更多

关键词 小檗碱 心肌肥厚 心肌纤维化 mirna-29b

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miRNA-29b在特发性肺间质纤维化中的抗纤维化作用 被引量：4

4

作者 路尧 李萍 +1 位作者 赵国强 张国俊 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2015年第5期637-641,共5页

目的:探讨miRNA-29b(简称miR-29b)在特发性肺间质纤维化(IPF)上皮间充质转分化(EMT)过程中的抗纤维化作用。方法:将体外培养的IMR-90细胞随机分为空白对照组、TGF-β1诱导组(诱导48 h)、miR-29b转染组(TGF-β1+miR-29b)和miR-29b阴性对... 目的:探讨miRNA-29b(简称miR-29b)在特发性肺间质纤维化(IPF)上皮间充质转分化(EMT)过程中的抗纤维化作用。方法:将体外培养的IMR-90细胞随机分为空白对照组、TGF-β1诱导组(诱导48 h)、miR-29b转染组(TGF-β1+miR-29b)和miR-29b阴性对照组(TGF-β1+无意义序列);应用倒置相差显微镜观察细胞形态改变;运用实时荧光定量PCR技术和Western bolt技术分别检测TGF-β/Smad信号通路Smad3和p-Smad3、上皮标志物E-钙黏蛋白(E-cad)、间质标志物平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和下游靶基因Ⅰ型胶原蛋白(COL1A1)的表达。结果:与空白对照组比较,TGF-β1诱导组IMR-90细胞中E-cad表达显著下降,p-Smad3、α-SMA和COL1A1的表达显著升高(P均<0.05);与TGF-β1诱导组比较,miR-29b转染组E-cad表达升高,p-Smad3、α-SMA和COL1A1的表达降低(P均<0.01)。结论:上调miR-29b表达可抑制TGF-β/Smad信号通路介导的肺泡上皮细胞EMT。 展开更多

关键词 mirna-29b 特发性肺间质纤维化 转化生长因子Β1 SMAD3

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miRNA-29b、MMP-2在大鼠颅内动脉瘤中的相关性及药物干预 被引量：2

5

作者 彭浩 陈健龙 +2 位作者 赵建农 王鹏程 张茂 《海南医学》 CAS 2017年第10期1549-1551,共3页

目的观察miRNA-29b与MMP-2在颅内动脉瘤壁组织中的变化,探讨其在动脉瘤中的相关性及不同药物干预的影响。方法将40只雄性SD大鼠(6周龄)采用随机数字表法分为模型组、多西环素组、丙戊酸钠组和对照组,每组各10只。模型组、多西环素组、... 目的观察miRNA-29b与MMP-2在颅内动脉瘤壁组织中的变化,探讨其在动脉瘤中的相关性及不同药物干预的影响。方法将40只雄性SD大鼠(6周龄)采用随机数字表法分为模型组、多西环素组、丙戊酸钠组和对照组,每组各10只。模型组、多西环素组、丙戊酸钠组大鼠均采用颈外动脉结扎制造颅内动脉瘤模型,对照组大鼠不做造模处理。前三组于造模成功后分别注射生理盐水0.1 mL/(kg·d)、多西环素15 mg/(kg·d)、丙戊酸钠15 mg/(kg·d),对照组大鼠注射生理盐水0.1 mL/(kg·d)。2个月后取各组动脉组织,采用实时荧光定量PCR检测miRNA-29b的表达,采用免疫组化检测MMP-2的表达。结果模型组、多西环素组、丙戊酸钠组和对照组中miRNA-29b的相对表达量分别为(0.27±0.04),(0.68±0.03),(0.47±0.15),(0.95±0.12),差异均有显著统计学意义(F=10.235,P<0.01);miRNA-29b表达量经两两比较,模型组明显低于对照组,丙戊酸钠组明显高于模型组,而多西环素组明显高于丙戊酸钠组,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组、多西环素组、丙戊酸钠组和对照组中MMP-2阳性细胞数分别为(21.10±3.36),(10.27±1.20),(15.24±2.13),(4.50±0.44),差异均有显著统计学意义(F=6.013,P<0.01);MMP-2阳性细胞数经两两比较,模型组明显高于对照组,丙戊酸钠组明显低于模型组,而多西环素组则明显低于丙戊酸钠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miRNA-29b、MMP-2的表达水平与颅内动脉瘤的发生相关,多西环素对MMP-2的抑制作用明显强于丙戊酸钠。 展开更多

关键词 颅内动脉瘤 mirna-29b MMP-2 多西环素 丙戊酸钠

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转化生长因子-β_2(TGF-β_2)诱导人视网膜色素上皮层细胞上皮-间质转分化中miRNA-29b的表达及意义 被引量：4

6

作者 刘亚军 闫峰 +2 位作者 叶巍 朱欣悦 黄振平 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第11期1001-1005,共5页

目的探究转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)诱导人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)层细胞上皮-间质转分化中miRNA-29b的表达变化及意义。方法使用不同浓度TGF-β2刺激RPE细胞上皮-间质转分化后... 目的探究转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)诱导人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)层细胞上皮-间质转分化中miRNA-29b的表达变化及意义。方法使用不同浓度TGF-β2刺激RPE细胞上皮-间质转分化后,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,Western blot、RT-PCR检测成纤维化相关分子纤维连接蛋白(fibronection,FN)、神经钙粘连蛋白(nerve calcium adhesion protein,N-Cadherin)的表达。采用RT-PCR检测不同浓度TGF-β2及不同时间TGF-β2(5μg·L^(-1))刺激RPE细胞后miRNA-29b的表达。结果 TGF-β2刺激后的RPE细胞形态呈纤维化改变。在一定浓度范围内(1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1)、10μg·L^(-1)),随着TGF-β2浓度的增加FN、N-Cadherin及相应mRNA随之增加,1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1)、10μg·L^(-1)组与对照组(0μg·L^(-1))相比,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。TGF-β2在一定浓度范围内(0μg·L^(-1)、1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1))以剂量依赖的方式诱导RPE细胞miRNA-29b表达的降低,1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1)、10μg·L^(-1)组与对照组(0μg·L^(-1))相比,差异均有统计学意义(均为P<0.01),在TGF-β2浓度为5μg·L^(-1)时miRNA-29b表达量最低。TGF-β2在一定时间范围内(0 h、3 h、6 h、12 h)以时间依赖的方式诱导RPE细胞miRNA-29b表达的降低,3 h、6 h、12 h、24 h、48 h组与0 h相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论一定范围内TGF-β2以剂量和时间依赖的方式诱导RPE细胞miRNA-29b的表达,为进一步研究miRNA-29b与TGF-β2在RPE细胞上皮-间质转分化过程中的相互作用提供理论基础。 展开更多

关键词 人视网膜色素上皮层细胞 上皮-间质转分化 转化生长因子-Β2 mirna-29b 增生性玻璃体视网膜病变

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肺痨康对耐异烟肼肺结核小鼠miRNA-29b和caspase-3的影响 被引量：5

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作者 王燕平 叶品良 +3 位作者 张传涛 卢润生 成茂源 刘天宝 《中医药导报》 2016年第6期28-31,46,共5页

目的:观察肺痨康对耐异烟肼肺结核小鼠肺组织中mi RNA-29b和caspase-3表达的影响,揭示肺痨康治疗耐异烟肼肺结核的作用机制。方法:将小鼠随机分为空白对照组、模型组、肺痨康组、异烟肼组,小鼠尾静脉注射耐异烟肼肺结核分枝杆菌菌悬液造... 目的:观察肺痨康对耐异烟肼肺结核小鼠肺组织中mi RNA-29b和caspase-3表达的影响,揭示肺痨康治疗耐异烟肼肺结核的作用机制。方法:将小鼠随机分为空白对照组、模型组、肺痨康组、异烟肼组,小鼠尾静脉注射耐异烟肼肺结核分枝杆菌菌悬液造模,空白对照组小鼠、模型组小鼠每天灌胃生理盐水;肺痨康组小鼠每天灌胃6 g(生药)/kg;异烟肼组小鼠每天灌胃异烟肼液6 g/kg,连续灌胃56 d。采用免疫组化方法检测小鼠肺组织中caspase-3的表达水平,采用RT-q PCR(实时荧光定量聚合酶链反应)技术检测各组小鼠肺组织中mi RNA-29b的表达水平。结果:与空白组比较,模型组肺组织caspase-3和mi RNA-29b明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01),肺痨康干预后,肺痨康组肺组织caspase-3和mi RNA-29b明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:肺痨康治疗耐异烟肼肺结核,可能与caspase-3引起的细胞凋亡有关,可能通过mi RNA-29b的降低而发挥作用。 展开更多

关键词 肺痨康 耐异烟肼肺结核小鼠 mirna-29b CASPASE-3

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miRNA-34a和miRNA-29b在非小细胞肺癌中的表达及意义 被引量：8

8

作者 赵淑灿 郑定容 《河北医药》 CAS 2017年第16期2436-2439,共4页

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺癌组织标本中miRNA-34a和miRNA-29b基因的表达与临床特征及化疗疗效的相关性。方法将已确诊的80例NSCLC患者肿瘤肺组织作为试验组(并按病理类型及TNM分期分组),同期随机选择肺部为良性疾病肺组织100... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者肺癌组织标本中miRNA-34a和miRNA-29b基因的表达与临床特征及化疗疗效的相关性。方法将已确诊的80例NSCLC患者肿瘤肺组织作为试验组(并按病理类型及TNM分期分组),同期随机选择肺部为良性疾病肺组织100例作为对照组,通过实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)法检测miRNA-34a和miRNA-29b基因表达水平,并回顾性分析miRNA-34a和miRNA-29b基因表达与化疗疗效情况。结果miRNA-34a在试验组的组织表达水平高于对照组(P<0.05);miRNA-29b在试验组的组织表达水平低于对照组(P<0.05);miRNA-34a在腺癌组与鳞癌组均明显高于其他型肺癌组(P<0.05),在腺癌组组中的表达高于鳞癌组(P<0.05),miRNA-29b在腺癌组与鳞癌组均明显低于其他型肺癌组,在腺癌组中的表达低于鳞癌组(P<0.05),miRNA-34a和miRNA-29b在肺癌组织分级、TNM分期及淋巴结转移呈密切相关性(P<0.05)。miRNA-34a高表达组患者化疗有效率显著低于低表达组患者(P<0.05);miRNA-29b低表达组患者化疗有效率显著低于高表达组患者(P<0.05)。NSCLC组织中miRNA-34a的表达和miRNA-29b的表达之间呈负相关(r=-0.79,P<0.01)。结论 miRNA-34a的基因表达在NSCLC中高表达,miRNA-29b的基因表达在NSCLC中低表达,它们表达水平有助于临床分期组、织学分级和淋巴结转移的判断,并且miRNA-34a低表达或者miRNA-29b高表达的患者化疗有效率高,是化疗受益的指标之一。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 MRNAS 疗效 mirna-34a mirna-29b 临床意义

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肺鳞癌组织miRNA-29b表达及预后相关性研究 被引量：3

9

作者 姜学东 李文雅 +1 位作者 叶圣权 张林 《解剖科学进展》 2016年第5期493-496,共4页

目的探讨miRNA-29b在可手术的肺鳞癌组织中的表达及其与转移及预后的关系。方法回顾性分析2006年6月至2013年12月间武警总医院与中国医科大学附属第一医院62例肺鳞癌手术患者的临床资料,采用RT-PCR方法检测上述病例肺鳞癌组织标本中miRN... 目的探讨miRNA-29b在可手术的肺鳞癌组织中的表达及其与转移及预后的关系。方法回顾性分析2006年6月至2013年12月间武警总医院与中国医科大学附属第一医院62例肺鳞癌手术患者的临床资料,采用RT-PCR方法检测上述病例肺鳞癌组织标本中miRNA-29b的表达水平,根据miRNA-29b相对表达量进行实验分组。应用x^2检验分析miRNA-29b表达与肺鳞癌患者转移的关系,应用Kaplan-Meier方法分析miRNA-29b表达与生存的关系,应用Cox风险比例模型分析miRNA-29b表达与预后的关系,应用Western blot分析肺鳞癌组织标本中胰岛素样生长因子-1(IGF1),分析miRNA-29b与IGF1表达的相关性。结果肺鳞癌组织中miRNA-29b的表达量显著低于正常肺组织,与转移相关(P<0.05),低表达组生存期较高表达组明显缩短(P<0.01),miRNA-29b表达可作为肺鳞癌患者预后的独立影响因素。IGF1在肺鳞癌组织标本中的表达显著高于正常肺组织(P<0.01)。结论 miRNA-29b低表达与非小细胞肺癌转移及生存期相关,miRNA-29b表达与IGF1的表达呈显著负相关。 展开更多

关键词 mirna-29b 胰岛素样生长因子-1 肺鳞癌 转移 预后

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miRNA-29b在肺腺癌的表达及临床意义 被引量：2

10

作者 姚阳 范朝晖 《江苏医药》 CAS 2015年第23期2854-2856,共3页

目的研究微小RNA-29b(miRNA-29b)在肺腺癌中的表达及其临床意义。方法采用荧光定量RT-PCR法检测82例肺腺癌组织及其癌旁正常肺组织中miRNA-29b的表达,分析其与临床病理学特征的关系。结果肺腺癌组织中miRNA-29b表达高于癌旁正常肺组织(P... 目的研究微小RNA-29b(miRNA-29b)在肺腺癌中的表达及其临床意义。方法采用荧光定量RT-PCR法检测82例肺腺癌组织及其癌旁正常肺组织中miRNA-29b的表达,分析其与临床病理学特征的关系。结果肺腺癌组织中miRNA-29b表达高于癌旁正常肺组织(P<0.01)。肺腺癌组织中miRNA-29b表达与患者肿瘤组织分化程度、临床分期、淋巴结转移状态以及总生存期密切相关(P<0.01),而与性别、年龄和吸烟史无明显相关(P>0.05)。肿瘤的临床分期、淋巴结转移状态以及miRNA-29b表达水平均为判断肺腺癌患者预后的独立因素(P<0.01)。结论 miRNA-29b表达下调参与肺腺癌的发生、发展过程,有望成为临床肺腺癌患者早期诊断和预后评估的分子学标志物。 展开更多

关键词 肺腺癌 mirna-29b

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miRNA-29b参与上皮间质转化相关信号通路调控的研究进展

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作者 王俊鑫(综述) 孙岩(审校) 《山东大学耳鼻喉眼学报》 CAS 2021年第6期132-137,共6页

上皮间质转化(EMT)是上皮细胞转化为间质细胞的生物学过程,它赋予细胞转移和入侵的能力,与器官纤维化和肿瘤发生发展密切相关。miRNA-29b是一类与EMT过程密切相关的非编码小RNA,直接或间接调控TGF-β/Smad、PI3K/AKT、Wnt/β-catenin等... 上皮间质转化(EMT)是上皮细胞转化为间质细胞的生物学过程,它赋予细胞转移和入侵的能力,与器官纤维化和肿瘤发生发展密切相关。miRNA-29b是一类与EMT过程密切相关的非编码小RNA,直接或间接调控TGF-β/Smad、PI3K/AKT、Wnt/β-catenin等多条信号通路,参与Ⅱ型和Ⅲ型EMT的发展过程,进而延缓器官纤维化进程,调控肿瘤的侵袭转移。针对miRNA-29b的靶向治疗,有望为临床诊断、治疗器官纤维化和肿瘤侵袭转移提供新视角。本文就miRNA-29b通过多条EMT相关信号通路调控器官纤维化和肿瘤侵袭转移过程的研究现状进行综述。 展开更多

关键词 mirna-29b 上皮间质转化 器官纤维化 肿瘤侵袭转移 信号通路

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miRNA-29a调控H3K4甲基化在前列腺癌病理机理中的作用 被引量：3

12

作者 李军亮 吴登龙 +3 位作者 黄盛松 卞崔冬 袁涛 桂亚平 《同济大学学报（医学版）》 CAS 2016年第6期6-11,共6页

目的探讨在前列腺癌中miR-29a与H3K4特异性去甲基化酶—KDM5B之间的关系,验证miR-29a通过调控KDM5B的表达来抑制前列腺癌细胞的增殖并诱导其凋亡。方法将miR-29a模拟物(miR-29a mimic)片段和含野生型KDM5B基因3'-非翻译区的荧光素... 目的探讨在前列腺癌中miR-29a与H3K4特异性去甲基化酶—KDM5B之间的关系,验证miR-29a通过调控KDM5B的表达来抑制前列腺癌细胞的增殖并诱导其凋亡。方法将miR-29a模拟物(miR-29a mimic)片段和含野生型KDM5B基因3'-非翻译区的荧光素酶报告载体(KDM5B-wt)共转染至前列腺癌PC3和Lncap细胞后,进行荧光素酶活性检测。采用脂质体转染法将miR-29a mimics转染入人前列腺癌PC3和Lncap细胞中,MTT实验检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;Real-Time PCR和Western印迹法检测KDM5B表达水平。结果转染miR-29a mimics后,KDM5B的表达被明显抑制(P<0.01),蛋白表达水平也明显低于NC组。与NC组相比,转染miR-29a mimics组细胞增殖能力显著降低(P<0.01),细胞生长被阻滞在S/G2期,细胞凋亡率较NC组增加(P<0.01)。结论 miR-29a可以通过调控H3K4特异性去甲基化酶-KDM5B的表达而抑制前列腺癌PC3和Lncap细胞的增殖。miR-29a有希望成为诊断和治疗前列腺癌新的分子标记和靶点。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 mirna-29a KDM5b基因 去甲基化酶

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牛miR-29b影响牛病毒性腹泻病毒感染BALB/c小鼠的作用 被引量：17

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作者 田瑞鑫 李胜男 +11 位作者 胡新艳 陈俊贞 郭妍婷 赵新艳 李祯 董文丽 如先古丽 李淑娴 冉多良 姚刚 史慧君 付强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期264-271,共8页

前期研究发现高表达miR-29b能显著抑制牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)在体外的复制,而miR-29b过表达是否影响BVDV在体内的复制尚未见有报道。研究设计扩增牛pre-miR-29b基因片段的引物,以MDBK基因组为模板,PCR扩增... 前期研究发现高表达miR-29b能显著抑制牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)在体外的复制,而miR-29b过表达是否影响BVDV在体内的复制尚未见有报道。研究设计扩增牛pre-miR-29b基因片段的引物,以MDBK基因组为模板,PCR扩增pre-miR-29b并克隆至慢病毒载体pLL3.7。将阳性质粒pLL3.7-pre-miR-29b与包装质粒共转染HEK-293T细胞,包装慢病毒并测定慢病毒滴度,同时包装pLL3.7空质粒的慢病毒作为阴性对照。将4~5周龄BALB/c小鼠随机分成5组,每组6只,连续2次尾静脉注射2.5×107 IU慢病毒悬液pLL3.7-pre-miR-29b或pLL3.7,并于慢病毒注射后96 h通过滴鼻途径攻毒BVDV毒株NADL(1.68×105 TICD50/只),于攻毒后不同时间(0,2,4,10,15 d)处死BALB/c小鼠,采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、小肠和血液,提取总RNA,使用荧光定量RT-PCR检测不同组织中BVDV拷贝数;同时制备病理组织切片观察各组织病变情况。结果显示,成功构建pLL3.7-pre-miR-29b质粒;成功包装pLL3.7-pre-miR-29b和pLL3.7慢病毒;使用荧光定量RT-PCR检测发现,pLL3.7-pre-miR-29b感染能显著性降低BVDV拷贝数;与pLL3.7-pre-miR-29b感染的处理组相比较,pLL3.7感染的对照组中各组织病变情况较为严重。结果表明,BALB/c小鼠体内过表达miR-29b能明显抑制BVDV的复制,减轻BVDV感染造成的病变,为以后研发抗BVDV的有效策略和方法提供了理论依据。 展开更多

关键词 miR-29b前体 慢病毒 bALb/C小鼠 病毒载量 病理组织切片

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MicroRNA-29b表达改变对卵巢癌细胞增殖及侵袭的影响 被引量：1

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作者 季晓微 王琳 +2 位作者 徐军 刘素英 董曦 《中国临床医学》 2018年第3期387-390,共4页

目的:探讨microRNA-29b(miRNA-29b)在卵巢癌细胞中的表达差异及其对卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:采用real-time PCR技术检测人卵巢癌上皮细胞系SKOV-3及正常人卵巢上皮细胞系IOSE80中miRNA-29b的表达水平;采用转染技术上调SKO... 目的:探讨microRNA-29b(miRNA-29b)在卵巢癌细胞中的表达差异及其对卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:采用real-time PCR技术检测人卵巢癌上皮细胞系SKOV-3及正常人卵巢上皮细胞系IOSE80中miRNA-29b的表达水平;采用转染技术上调SKOV-3细胞中miRNA-29b的表达水平;采用CCK-8法检测SKOV-3细胞增殖能力;采用Transwell法检测SKOV-3细胞的侵袭能力;采用Western印迹法检测SKOV-3细胞中蛋白表达水平。结果:与IOSE80细胞相比,人卵巢癌上皮细胞系SKOV-3细胞miRNA-29b的表达下降(P<0.05)。转染miRNA-29bmimic后SKOV-3细胞中miRNA-29b的表达水平增加;从第4天开始,转染miRNA-29b的SKOV3细胞增殖能力下降(P<0.05)。转染miRNA-29b减少了通过聚碳酸酯膜的SKOV3细胞数量,抑制了SKOV3细胞的侵袭能力(P<0.05);转染miRNA-29bmimic后,卵巢癌细胞SKOV3中抑制凋亡蛋白Bcl-2和侵袭相关蛋白MMP-9的表达均降低,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miRNA-29b可通过抑制凋亡相关蛋白Bcl-2和侵袭相关蛋白MMP-9的表达来抑制卵巢癌细胞的增殖和侵袭。 展开更多

关键词 mirna-29b 卵巢癌 细胞增殖 细胞侵袭 调控机制

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原发性高血压患者外周血miR-126、miR-29b、miR-18b变化及与血管内皮损伤的关系 被引量：4

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作者 彭德川 熊德琼 +3 位作者 徐海锋 廖洪柳 袁毅 刘阳 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2023年第4期5526-5532,共7页

目的 探究原发性高血压患者外周血miRNA-126(miR-126)、miRNA-29b(miR-29b)、miRNA-18b(miR-18b)变化及与血管内皮损伤的关系。方法 采取病例对照研究,选择2021年9月至2022年9月收治的原发性高血压病例87例(高血压组)和同期体检的健康... 目的 探究原发性高血压患者外周血miRNA-126(miR-126)、miRNA-29b(miR-29b)、miRNA-18b(miR-18b)变化及与血管内皮损伤的关系。方法 采取病例对照研究,选择2021年9月至2022年9月收治的原发性高血压病例87例(高血压组)和同期体检的健康对照人群80名(对照组)。入选者均采集外周血标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)技术测定外周血miR-126、miR-29b、miR-18b表达水平,采用硝酸还原酶法测定血清一氧化氮(notric oxide, NO)水平,采用酶联免疫吸附法测定血清内皮素1(endothelin 1, ET-1)、血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)水平。分析高血压组与对照组的检测结果差异及不同高血压分级患者间的检测结果差异,采用Spearman相关分析法分析原发性高血压外周血miR-126、miR-29b、miR-18b水平与NO、ET-1、vWF的关系。结果 高血压组患者高血压家族史比例、收缩压和舒张压水平均高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);高血压组外周血miR-126相对表达量、血清NO水平低于对照组,而外周血miR-29b、miR-18b相对表达量和血清ET-1、vWF水平高于对照组,组间比较差异有统计学意义(P <0.05)。随着高血压分级增加,收缩压、舒张压、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平逐渐升高,两两比较差异有统计学意义(P <0.05);随着高血压分级增加,外周血miR-126相对表达量和血清NO水平逐渐降低,外周血miR-29b、miR-18b相对表达量和血清ET-1、vWF水平均逐渐升高,两两比较差异有统计学意义(P <0.05)。外周血miR-126相对表达量与血清NO水平呈正相关,与血清ET-1、vWF水平成负相关;miR-29b、miR-18b相对表达量均与NO水平呈负相关,与血清ET-1、vWF水平正相关(P <0.05)。结论 原发性高血压患者外周血miR-126相对表达量异常降低,而外周血miR-29b、miR-18b相对表达量均异常增加,且三者均与高血压分级、血管内皮损伤具有显著相关性。 展开更多

关键词 原发性高血压 mirna-126 mirna-29b mirna-18b 血管内皮损伤

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MicroRNA-29b的研究现状 被引量：1

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作者 李新娜 史艳芬 李荣贵 《吉林医学》 CAS 2013年第1期130-132,共3页

1 miRNA简介miRNA广泛存在于自然界中,是一种大小约为22 nt的内源性非编码的单链微小RNA[1],它的成熟过程需要经历以下几个步骤[2]：首先以内源性转录本为模板进行基因转录,形成发夹状的原始pri-miRNA,接着于细胞核内经过Drosha切割,被... 1 miRNA简介miRNA广泛存在于自然界中,是一种大小约为22 nt的内源性非编码的单链微小RNA[1],它的成熟过程需要经历以下几个步骤[2]：首先以内源性转录本为模板进行基因转录,形成发夹状的原始pri-miRNA,接着于细胞核内经过Drosha切割,被加工成具有茎环结构的70 nt左右的前体pre-miRNA, 展开更多

关键词 mirna-29b 纤维化 表观遗传学 甲基化

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MicroRNA-29b对肝纤维化及肝星状细胞增殖、凋亡的影响 被引量：7

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作者 王艳景 谷征 李圆圆 《中国现代医学杂志》 CAS 2018年第32期17-24,共8页

目的探究microRNA-29b(miR-29b)在肝纤维化过程中的作用,以及对肝星状细胞增殖和凋亡的影响。方法将大鼠随机分为对照组和模型组,每组10只。模型组大鼠经腹部注射60%3 ml/kg CCl4复制肝纤维化模型;对照组注射等量生理盐水。分别观察两... 目的探究microRNA-29b(miR-29b)在肝纤维化过程中的作用,以及对肝星状细胞增殖和凋亡的影响。方法将大鼠随机分为对照组和模型组,每组10只。模型组大鼠经腹部注射60%3 ml/kg CCl4复制肝纤维化模型;对照组注射等量生理盐水。分别观察两组大鼠肝纤维化情况,检测肝组织中miR-29b、TGF-β1、SAMD3基因及TGF-β1、SAMD3蛋白的表达。体外培养肝星状细胞HSC-T6、LX-2,转染miR-29b siRNA,检测miR-29b对HSC-T6、LX-2细胞增殖、凋亡的影响,以及对TGF-β1、SAMD3表达的影响。结果与对照组相比,模型组心肌纤维比例增加,随着时间延长,第6和12周心肌纤维比例逐渐升高(P <0.05)。与对照组相比,模型组miR-29b基因相对表达量降低,随着时间延长,模型组miR-29b基因相对表达量逐渐降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组TGF-β1、SAMD3基因和蛋白相对表达量升高;随着时间延长,TGF-β1、SAMD3基因和蛋白相对表达量逐渐升高(P <0.05)。在HSC-T6、LX-2细胞中,miR-29b转染组G1期细胞比例高于空白对照组、阴性转染组,S期细胞比例低于空白对照组、阴性转染组(P<0.05)。miR-29b转染组HSC-T6、LX-2细胞凋亡率高于空白对照组、阴性转染组(P<0.05)。与空白对照组、阴性转染组相比,HSC-T6、LX-2细胞中TGF-β1、SAMD3基因和蛋白相对表达量升高,miR-29b基因相对表达量降低(P<0.05)。结论 miR-29b在肝纤维化过程中表达降低,miR-29b可抑制肝星状细胞增殖,诱导其凋亡。 展开更多

关键词 mirna-29b 肝纤维化 肝星状细胞 细胞增殖凋亡

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