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MiRNA-199a-3p通过mTOR通路与阿霉素联合抑制子宫内膜癌细胞的增殖和促凋亡作用 被引量：7
1
作者 林勤 郑轩 +2 位作者 杨华静 鲍伟 万小平 《现代妇产科进展》 CSCD 2014年第9期673-676,共4页
目的:探讨阿霉素对转染miRNA-199a-3p的子宫内膜癌(EC)的作用及机制。方法:构建pSIREN-miRNA-199a-3p过表达质粒并稳定转染内膜癌细胞系Ishikawa、SPEC-2细胞。应用逆转录PCR(RT-PCR)检测miRNA-199a-3p的表达;MTT、克隆形成实验检测细... 目的:探讨阿霉素对转染miRNA-199a-3p的子宫内膜癌(EC)的作用及机制。方法:构建pSIREN-miRNA-199a-3p过表达质粒并稳定转染内膜癌细胞系Ishikawa、SPEC-2细胞。应用逆转录PCR(RT-PCR)检测miRNA-199a-3p的表达;MTT、克隆形成实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测mTOR信号通路相关蛋白表达。结果:上调miRNA-199a-3p可显著抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa、SPEC-2的克隆形成能力(P<0.01,P<0.05);miRNA-199a-3p可增强阿霉素对Ishikawa、SPEC-2细胞的生长抑制(P均<0.05)和凋亡诱导作用(P均<0.05);Western blot证实,miRNA-199a-3p可显著下调mTOR及其效应蛋白p70S6K的磷酸化水平。结论:miRNA-199a-3p可能通过mTOR通路与阿霉素联合抑制子宫内膜癌细胞的增殖并促进其凋亡,为联合应用miRNA和阿霉素治疗EC提供了实验依据。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 mirna-199a-3p MTOR 增殖 凋亡
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miRNA-199a-5p对骨肉瘤细胞增殖及自噬的影响 被引量：1
2
作者 刘念 张红 薛中柱 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期197-201,共5页
目的探讨mi RNA-199a-5p对人骨肉瘤细胞株U2OS增殖及自噬的影响及其可能的作用机制。方法实时定量PCR法检测32例骨肉瘤患者的病理组织标本及配对癌旁正常组织中mi RNA-199a-5p的表达水平。将mi RNA-199a-5p mimics转染入U2OS细胞,使其... 目的探讨mi RNA-199a-5p对人骨肉瘤细胞株U2OS增殖及自噬的影响及其可能的作用机制。方法实时定量PCR法检测32例骨肉瘤患者的病理组织标本及配对癌旁正常组织中mi RNA-199a-5p的表达水平。将mi RNA-199a-5p mimics转染入U2OS细胞,使其过表达mi RNA-199a-5p,采用CCK-8法和流式细胞仪检测细胞增殖及周期的变化;Western blot检测周期相关蛋白(cyclin D1、P27、p Rb)及自噬相关蛋白(Beclin 1、LC3Ⅱ/Ⅰ)表达水平。结果 mi RNA-199a-5p在骨肉瘤组织及癌细胞U2OS中低表达,且表达水平与肿块大小、远距转移、Enneking临床分期及病理分级密切相关。过表达mi RNA-199a-5p后,U2OS细胞的增殖能力显著降低(P<0.05),同时cyclin D1、p Rb表达水平显著下降,而P27、LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1的表达水平显著增加(P<0.05)。结论 mi RNA-199a-5p能够抑制人骨肉瘤细胞株U2OS的增殖并激活细胞自噬;其作用机制可能与下调cyclin D1、上调P27、抑制p Rb蛋白的磷酸化、造成细胞周期G1/S阻滞有关。提示mi RNA-199a-5p可以作为骨肉瘤临床治疗的潜在作用位点。 展开更多
关键词 mirna-199a-5p 骨肉瘤 增殖 周期 自噬
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窒息新生儿血清miRNA-199a的表达变化及意义 被引量：3
3
作者 程佳 沙莉 韩树萍 《临床医学工程》 2013年第2期159-160,共2页
目的探讨miRNA-199a在窒息新生儿血清的表达情况及意义。方法选择我院分娩的足月新生儿60例,其中30例窒息新生儿为窒息组,30例健康新生儿为对照组,生后24～48h采用实时荧光定量PCR技术检测新生儿血清中miRNA-199a的表达水平。运用Target... 目的探讨miRNA-199a在窒息新生儿血清的表达情况及意义。方法选择我院分娩的足月新生儿60例,其中30例窒息新生儿为窒息组,30例健康新生儿为对照组,生后24～48h采用实时荧光定量PCR技术检测新生儿血清中miRNA-199a的表达水平。运用TargetScan靶基因预测分析软件预测miRNA-199a的靶基因。结果与健康新生儿相比,窒息新生儿血清中miRNA-199a低表达(P<0.05);生物信息学分析显示miRNA-199a的靶基因为缺氧诱导因子1(HIF-1α)。结论血清miRNA-199a通过作用于靶基因HIF-1α而在窒息后缺氧性脑损伤中发挥作用,可作为早期判断窒息后缺氧性脑损伤的有效指标。 展开更多
关键词 窒息 新生儿 mirna-199a 实时荧光定量PCR
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下肢动脉粥样硬化斑块内miRNA-199a-3p对外周血单核细胞的影响
4
作者 张剑 肖乐 +3 位作者 郭晓东 侯德智 龚昆梅 欧阳一鸣 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2017年第16期3917-3919,共3页
目的探讨下肢动脉粥样硬化斑块内miRNA-199a-3p对外周血单核细胞的影响。方法选取37例下肢动脉粥样硬化闭塞症(AS)患者外周血为AS组。另外选取同期37名健康体检者外周血为对照组。新鲜血管组织取自1例下肢AS患者截肢远端血管为实验组,... 目的探讨下肢动脉粥样硬化斑块内miRNA-199a-3p对外周血单核细胞的影响。方法选取37例下肢动脉粥样硬化闭塞症(AS)患者外周血为AS组。另外选取同期37名健康体检者外周血为对照组。新鲜血管组织取自1例下肢AS患者截肢远端血管为实验组,以其截肢近端血管为对照。实时荧光定量PCR检测新鲜血管组织,分离得到的外周血中单核细胞和微泡中miRNA-199a-3p表达水平。以人单核细胞TTHP-1为载体,miRNA-199a-3p mimics组和miRNA-199a-3p inhibitor组分别转染miRNA-199a-3p mimics和miRNA-199a-3p inhibitor,同时设置空白对照组。实时荧光定量PCR检测各组miRNA-199a-3p、趋化因子单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、调解活化正常T细胞表达和分泌的趋化因子(RANTES)和Fractalkine表达水平。结果下肢动脉粥样硬化斑块内miRNA-199a-3p表达水平显著高于正常组织(P<0.05)。AS组外周血单核细胞和微泡中miRNA-199a-3p表达水平均显著高于对照组(P<0.05)。与空白对照组相比,miRNA-199a-3p mimics组miRNA-199a-3p表达水平显著上升(P<0.05),miRNA-199a-3p inhibitor组miRNA-199a-3p表达水平显著下降(P<0.05)。与空白对照组相比,miRNA-199a-3p mimics组MCP-1、RANTES和Fractalkine的mRNA表达水平显著降低(P<0.05),miRNA-199a-3p inhibitor组MCP-1、RANTES和Fractalkine的mRNA表达水平显著上升(P<0.05)。结论动脉粥样硬化斑块内巨噬细胞高表达miRNA-199a-3p,并以微泡形式分泌到外周血中,抑制单核细胞中MCP-1、RANTES和Fractalkine等趋化因子的表达,是一种动脉粥样硬化保护因素。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 mirna-199a-3p 单核细胞 趋化因子
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下肢动脉粥样硬化斑块内miRNA-199a-3p对外周血单核细胞的影响
5
作者 颜雯 钟文清 +3 位作者 许晓双 胡桂芳 杨美兰 程佳 《中国实用医药》 2018年第21期16-18,共3页
目的分析miRNA-199a-3p对外周血单核细胞的影响。方法选取下肢动脉粥样硬化闭塞症患者(实验组)及健康体检者(对照组),各60例。取1例截肢患者截肢远端血管,以近端血管为对照,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测,获得血管组织及人... 目的分析miRNA-199a-3p对外周血单核细胞的影响。方法选取下肢动脉粥样硬化闭塞症患者(实验组)及健康体检者(对照组),各60例。取1例截肢患者截肢远端血管,以近端血管为对照,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测,获得血管组织及人外周血中单核细胞和微泡(MV)中miRNA-199a-3p的表达水平,此外,于细胞对数生长期,分设miRNA-199a-3p inhibitor组、miRNA-199a-3p mimics组、空白对照组,各组设复孔6个,转染miRNA-199a-3p inhibitor、miRNA-199a-3p mimics、FuGENE,分析miRNA-199a-3p对外周血单核细胞的影响。结果动脉粥样硬化斑块内miRNA-199a-3p表达水平(8.49±3.05)高于正常组织的(3.64±1.20),差异有统计学意义(P<0.05)。实验组外周血单核细胞、MV中的miRNA-199a-3p表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。miRNA-199a-3p inhibitor组的外周血单核细胞中的miRNA-199a-3p表达水平低于空白对照组,miRNA-199a-3p mimics组的外周血单核细胞中miRNA-199a-3p表达水平高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。检测Fractalkine、T细胞表达和分泌因子(RANTES)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的mRNA表达水平,miRNA-199a-3p inhibitor组高于空白对照组,miRNA-199a-3p mimics组低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论下肢动脉粥样硬化斑块内miRNA-199a-3p通过MV作用于单核细胞,抑制其Fractalkine、RANTES、MCP-1等趋化因子表达,而起到抗炎抗动脉粥样硬化的作用。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 单核细胞 mirna-199a-3p 微泡 趋化因子
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miRNA-199a-5p在热损伤人皮肤成纤维细胞中的表达及其功能研究 被引量：1
6
作者 熊亮 胡寅 +3 位作者 王立夫 曹咬脐 钱莉丽 刘泾科 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1160-1165,共6页
目的:观察热损伤人皮肤成纤维细胞中miRNA-199a-5p表达量的变化,以及对皮肤成纤维细胞增殖、迁移、侵袭功能的影响。方法:分别用人皮肤成纤维细胞株(HSF)隔水52℃水浴30 s、60 s制造细胞热损伤模型,对比观察细胞热损伤状态;用四甲基偶... 目的:观察热损伤人皮肤成纤维细胞中miRNA-199a-5p表达量的变化,以及对皮肤成纤维细胞增殖、迁移、侵袭功能的影响。方法:分别用人皮肤成纤维细胞株(HSF)隔水52℃水浴30 s、60 s制造细胞热损伤模型,对比观察细胞热损伤状态;用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测热损伤24 h、48 h后细胞的增殖率;用qRT-PCR检测热损伤24 h、48 h后细胞miRNA-199a-5p表达量的变化情况;用划痕和Transwell测试细胞的迁移、侵袭功能;用模拟物提高热损伤细胞中miRNA-199a-5p的表达量,检测热损伤细胞的增殖和侵袭情况。结果:52℃30 s可以很好地制造人皮肤成纤维热损伤模型;与对照组比较,热损伤后miRNA-199a-5p表达量下调[24 h,(2.67±0.35)%,P<0.001;48 h,(18.42±0.44)%,P<0.001],细胞增殖显著受到抑制[24 h,(17.10±3.21)%,P<0.002;48 h,(25.93±1.74)%,P<0.001],细胞的迁移功能显著下降[(35.35±7.07)%,P<0.001],侵袭功能亦被显著抑制[(57.14±9.52)%,P<0.007]。通过模拟物提高热损伤细胞中miRNA-199a-5p的表达量后,细胞的增殖显著上调[(136.55±6.14)%,P<0.003],细胞的侵袭能力增强[(196.88±15.63)%,P<0.003]。结论:热损伤人皮肤成纤维细胞中miRNA-199a-5p的表达量与细胞增殖、迁移和侵袭正相关,提高热损伤细胞中miRNA-199a-5p的表达量可以帮助热损伤细胞快速转归。 展开更多
关键词 皮肤成纤维细胞 热损伤 mirna-199a-5p QRT-PCR 细胞增殖 细胞迁移与侵袭
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大鼠烧伤和热压伤自身修复过程中miRNA-199a-5p的表达变化 被引量：1
7
作者 熊亮 王立夫 +3 位作者 胡寅 钱莉丽 曹咬脐 刘泾科 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1575-1577,共3页
目的:探讨大鼠烧伤和热压伤中变性真皮miRNA-199a-5p表达量随时间的变化情况。方法:用控温烫伤仪制作皮肤烧伤模型和热压伤模型,设置阴性对照组,用qRT-PCR检测不同的时间烫伤和热压伤部位变性真皮中的miRNA-199a-5p相对表达量。结果:各... 目的:探讨大鼠烧伤和热压伤中变性真皮miRNA-199a-5p表达量随时间的变化情况。方法:用控温烫伤仪制作皮肤烧伤模型和热压伤模型,设置阴性对照组,用qRT-PCR检测不同的时间烫伤和热压伤部位变性真皮中的miRNA-199a-5p相对表达量。结果:各模型组变性真皮中miRNA-199a-5p相对表达量较正常组织中的相对表达量呈先下调后上调趋势,14 d时miRNA-199a-5p相对表达量上调具有显著差异(P<0.05)。结论:miRNA-199a-5p表达和变性真皮的增殖和迁移调控相关,损伤早期表达量的下调,促进变性真皮恢复正常功能,表达量的上调则促进细胞增殖和迁移,为热压伤创面修复机制的探讨提供新思路。 展开更多
关键词 热压伤 大鼠 mirna-199a-5p
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宫颈癌组织中Has-miRNA-199a-5p的表达变化 被引量：2
8
作者 张一娇 丁晓萍 《山东医药》 CAS 2012年第6期40-42,共3页
目的观察宫颈癌组织中has-miRNA-199a-5p的表达变化。方法采用茎环RT-PCR法检测50例宫颈癌组织(观察组)和50例非癌疾病切除的正常宫颈组织(对照组)中has-miRNA-199a-5p。结果观察组has-miR-NA-199a-5p表达量为38.62±16.57,对照组为... 目的观察宫颈癌组织中has-miRNA-199a-5p的表达变化。方法采用茎环RT-PCR法检测50例宫颈癌组织(观察组)和50例非癌疾病切除的正常宫颈组织(对照组)中has-miRNA-199a-5p。结果观察组has-miR-NA-199a-5p表达量为38.62±16.57,对照组为5.46±4.89,P<0.01。高分化宫颈癌组织has-miRNA-199a-5p表达量为5.67±4.35,中低分化宫颈癌组织为40.28±17.13,P<0.01。结论宫颈癌组织has-miRNA-199a-5p异常高表达,且表达量与宫颈癌分化程度有关。 展开更多
关键词 has-mirna-199a-5p基因 宫颈癌
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miRNA-199a对子宫内膜异位症患者VEGF及COX-2表达调控的研究 被引量：3
9
作者 余怀英 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2020年第9期1007-1010,共4页
目的探讨子宫内膜异位症患者内膜组织miRNA-199a、血管内皮生长因子(VEGF)、环氧合酶-2(COX-2)水平及意义。方法选取2017年6月~2018年6月杭州市富阳区第一医院保存的子宫内膜异位症组织92例,选取正常子宫内膜组织81例,采用免疫组化染色... 目的探讨子宫内膜异位症患者内膜组织miRNA-199a、血管内皮生长因子(VEGF)、环氧合酶-2(COX-2)水平及意义。方法选取2017年6月~2018年6月杭州市富阳区第一医院保存的子宫内膜异位症组织92例,选取正常子宫内膜组织81例,采用免疫组化染色检测VEGF、COX-2表达,采用RT-PCR检测miRNA-199a表达。结果子宫内膜异位症在位内膜和异位内膜miRNA-199a相对表达量低于正常子宫内膜组织,差异有统计学意义(t=5.494、6.821,P<0.05),其中异位内膜miRNA-199a相对表达量为(0.532±0.101),低于在位内膜,差异有统计学意义(t=4.112,P<0.05);子宫内膜异位症在位内膜和异位内膜VEGF、COX-2蛋白表达高于正常子宫内膜组织,差异有统计学意义(t=5.221、6.021、4.382、5.192,P<0.05),其中异位内膜VEGF、COX-2蛋白表达分别为(0.740±0.100)和(0.915±0.107),高于在位内膜(t=4.621、4.703,P<0.05);miRNA-199a与COX-2、VEGF表达呈负相关(r=-0.354、-0.331,P<0.05)。结论子宫内膜异位症患者内膜组织miRNA-199a表达降低,COX-2和VEGF升高,其中miRNA-199a表达与COX-2、VEGF呈负相关。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 内膜组织 mirna-199a 血管内皮生长因子 环氧合酶-2
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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞miRNA-199a-3p表达及调控机制 被引量：3
10
作者 施善芬 黎良达 +2 位作者 潘翠萍 单爱琴 何永平 《中华临床免疫和变态反应杂志》 2018年第6期623-629,共7页
目的探究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞miRNA-199a-3p的表达及对PI3K/Akt/mTOR信号通路调控机制。方法选取本院就诊的SLE患者50例,包括缓解期患者20例(缓解期组)、活动期患者30例(活动期组),... 目的探究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞miRNA-199a-3p的表达及对PI3K/Akt/mTOR信号通路调控机制。方法选取本院就诊的SLE患者50例,包括缓解期患者20例(缓解期组)、活动期患者30例(活动期组),同时选择25例健康志愿者作为对照组。采用RT-PCR检测入选者外周血单个核细胞miRNA-199a-3p表达情况;应用Pearson相关性分析方法了解miRNA-199a-3p表达水平与SLE疾病活动程度,并进一步分析miRNA-199a-3p表达水平与脏器受累的相关性;利用流式细胞仪检测miRNA-199a-3p对细胞凋亡的影响。通过生物信息软件和荧光素酶报告实验验证miRNA-199a-3p的靶基因。上调miRNA-199a-3p后采用Western Blot检测PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达情况。结果缓解期SLE患者外周血单个核细胞miRNA-199a-3p相对表达水平(1. 25±0. 19)显著低于健康志愿者(2. 38±0. 24),但显著高于活动期患者(0. 34±0. 07)(P <0. 05)。Pearson相关性分析表明miRNA-199a-3p相对表达水平与系统性红斑狼疮疾病活动度指数(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)评分呈负相关性(R=-0. 704,P <0. 05),浆膜炎、血尿、血管炎、脱发和光过敏患者miRNA-199a-3p水平与无以上临床表现患者相近(P> 0. 05);皮疹、白细胞降低和肾炎患者miRNA-199a-3p水平显著高于无以上临床表现患者(P <0. 05)。凋亡检测发现上调miRNA-199a-3p能够显著提高单个核细胞凋亡率(P <0. 05)。生物信息学及荧光素酶报告实验表明miRNA-199a-3p的靶基因为mTOR mRNA 3'UTR。WB检测表明外周血单个核细胞转染miRNA-199a-3p mimics后,能够显著下调mTOR、PI3K、p AKt和Bcl-2表达水平(P <0. 05),同时能够显著上调Bax与caspase-3表达水平(P <0. 05)。结论 SLE患者外周血单个核细胞miRNA-199a-3p低表达,且其能够影响PI3K/Akt/mTOR信号通路分子的表达。 展开更多
关键词 mirna-199a-3p 系统性红斑狼疮 外周血单个核细胞 调控机制 MTOR
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miRNA-199a-3p调控MAP3K4在胃癌中的表达 被引量：9
11
作者 闵小春 伍婷婷 +4 位作者 曾吉 张晓雪 刘晓明 景小鹏 金策 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第17期2817-2820,共4页
目的探讨胃癌中MIRNA-199A-3P调控候选基因MAP3K4的表达。方法收集35例胃癌及癌旁组织标本,采用茎环逆转录-聚合酶链式反应法检测胃癌组织及癌旁组织中MIR-199A-3P的表达水平,WESTERN BLOT法检测MAP3K4表达;细胞转染法检测MIR-199A-3P调... 目的探讨胃癌中MIRNA-199A-3P调控候选基因MAP3K4的表达。方法收集35例胃癌及癌旁组织标本,采用茎环逆转录-聚合酶链式反应法检测胃癌组织及癌旁组织中MIR-199A-3P的表达水平,WESTERN BLOT法检测MAP3K4表达;细胞转染法检测MIR-199A-3P调控MAP3K4表达,双荧光素酶报告基因检测系统验证MIR-199A-3P结合MAP3K4的3’UTR的靶位点。结果与癌旁组织相比,胃癌组织MIR-199A-3P高表达,且其候选基因MAP3K4低表达;MIR-199A-3P MIMICS转染抑制MAP3K4表达;MAP3K4是MIR-199A-3P作用的靶基因。结论 MIR-199A-3P是胃癌的一个癌基因,MAP3K4是受其调控的靶基因。 展开更多
关键词 胃肿瘤 MIR-199a-3P MAP3K4
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miRNA-199a-5p通过SP1调节ERK5抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭的机制 被引量：10
12
作者 翟丽敏 杨硕 李文通 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期981-985,共5页
目的探讨miR-199a-5p对乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭影响及其作用机制。方法转染miR-199a-5p mimic至MDA-MB-231细胞,Transwell侵袭实验检测miR-199a-5p对MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响。采用细胞免疫荧光、Western blot法检测上皮细胞-... 目的探讨miR-199a-5p对乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭影响及其作用机制。方法转染miR-199a-5p mimic至MDA-MB-231细胞,Transwell侵袭实验检测miR-199a-5p对MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响。采用细胞免疫荧光、Western blot法检测上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)分子标志物E-cadherin、vimentin的表达。应用Western blot法检测miR-199a-5p mimic及其LNA-siRNA对ERK5、p ERK5、EGF、SP1表达的影响。染色体免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,CHIP)技术检测SP1是否与ERK5启动子区结合。结果 miR-199a-5p能抑制MDA-MB-231细胞的侵袭,降低vimentin的表达,增强E-cadherin的表达。同时,miR-199a-5p降低ERK5表达并抑制其磷酸化;EGF、SP1的表达也相应减少。相反,应用LNA-siRNA抑制miR-199a-5p后,ERK5、p ERK5、EGF、SP1的表达上调。CHIP结果显示SP1能与ERK5启动子区结合。结论 miR-199a-5p通过调节EGF、SP1下调ERK5的表达并抑制其磷酸化,进而发挥对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭的抑制作用。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 miR-199a-5p ERK5 SP1 侵袭
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下调miRNA-199a-5p靶向HIF1α激活JAK/STAT3通路促进乳腺癌细胞增殖与恶性转移 被引量：4
13
作者 徐斌 梁仁杰 +1 位作者 刘永萱 卫利民 《中国现代普通外科进展》 CAS 2022年第9期684-689,693,共7页
目的:探讨miRNA-199a-5p在乳腺癌MCF-7细胞中的表达及其对细胞增殖与恶性转移的影响。方法:利用RT-qPCR检测miR-199a-5p在乳腺癌细胞(MCF-7细胞)和人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A细胞)中的差异表达。过表达或下调miR-199a-5p表达,通过MTT... 目的:探讨miRNA-199a-5p在乳腺癌MCF-7细胞中的表达及其对细胞增殖与恶性转移的影响。方法:利用RT-qPCR检测miR-199a-5p在乳腺癌细胞(MCF-7细胞)和人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A细胞)中的差异表达。过表达或下调miR-199a-5p表达,通过MTT试剂盒检测MCF-7细胞增殖能力,Transwell检测MCF-7细胞的侵袭能力,Western blot检测过表达及下调miR-199a-5p对MCF-7细胞EMT的影响。TargetScan分析miR-199a-5p的作用靶点,双荧光素酶报告基因实验检测miR-199a-5p和HIF1α之间的关系。RT-qPCR检测HIF1α在MCF-7细胞和MCF-10A细胞中的差异表达。HIF1α siRNA质粒转染细胞后,检测下调HIF1α对MCF-7细胞增殖、侵袭和EMT的影响。过表达HIF1α后,Western blot检测细胞内JAK、p-JAK、STAT3和p-STAT3蛋白的表达量。将AG490作用MCF-7细胞后再转染pcDNA-HIF1α质粒,检测MCF-7细胞增殖、侵袭和EMT能力。结果:与MCF-10A细胞相比,MCF-7细胞中miR-199a-5p表达明显降低(P<0.01),HIF1α表达明显上升(P<0.01)。过表达miR-199a-5p抑制了MCF-7细胞增殖、侵袭与EMT,下调miR-199a-5p促进了MCF-7细胞的增殖、侵袭与EMT;miR-199a-5p靶向HIF1α,且负调控HIF1α表达;siRNA下调HIF1α表达后明显抑制了MCF-7细胞增殖、侵袭和EMT;上调HIF1α表达后,激活MCF-7细胞内JAK/STAT3通路,AG490作用MCF-7细胞能明显抑制HIF1α对MCF-7细胞增殖、侵袭和EMT的促进作用。结论:下调miRNA-199a-5p靶向HIF1α激活JAK/STAT3通路促进乳腺癌细胞增殖与恶性转移。 展开更多
关键词 miR-199a-5p HIF1Α JAK/STAT3 乳腺癌 转移
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血清miRNA-199a-5p、α-1-B-糖蛋白反义RNA1水平与脑胶质瘤患者术后复发的关系
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作者 单永双 万学锋 王晓英 《癌症进展》 2024年第4期457-460,464,共5页
目的检测脑胶质瘤患者的血清微小RNA(miRNA)-199a-5p、α-1-B-糖蛋白反义RNA1(A1BG-AS1)水平,并分析其与患者术后复发的关系。方法选取94例接受手术治疗的脑胶质瘤患者和84例健康体检者,分别作为研究组和对照组。术后所有脑胶质瘤患者... 目的检测脑胶质瘤患者的血清微小RNA(miRNA)-199a-5p、α-1-B-糖蛋白反义RNA1(A1BG-AS1)水平,并分析其与患者术后复发的关系。方法选取94例接受手术治疗的脑胶质瘤患者和84例健康体检者,分别作为研究组和对照组。术后所有脑胶质瘤患者均随访2年,依据是否复发分为复发组(n=71)和非复发组(n=23)。采用聚合酶链反应(PCR)检测血清miRNA-199a-5p、A1BG-AS1水平,比较研究组和对照组、复发组和非复发组的血清miRNA-199a-5p、A1BG-AS1水平。采用Spearman相关分析法分析血清miRNA-199a-5p、A1BG-AS1水平与脑胶质瘤患者术后复发的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),分析血清miRNA-199a-5p、A1BG-AS1单独及联合检测对脑胶质瘤患者术后复发的评估价值。结果研究组患者血清miRNA-199a-5p水平明显低于对照组,血清A1BG-AS1水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。复发组患者血清miRNA-199a-5p水平低于非复发组,血清A1BG-AS1水平高于非复发组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。血清miRNA-199a-5p水平与脑胶质瘤患者术后复发呈负相关(r=-0.382,P﹤0.05),血清A1BG-AS1水平与脑胶质瘤患者术后复发呈正相关(r=0.423,P﹤0.05)。ROC曲线显示,血清miRNA-199a-5p、A1BG-AS1联合检测评估脑胶质瘤患者术后复发的AUC和灵敏度均高于二者单独检测。结论脑胶质瘤患者血清miRNA-199a-5p水平降低,血清A1BG-AS1水平升高,且其表达水平与脑胶质瘤患者术后复发有关,联合检测对术后复发具有较好的评估价值。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 mirna-199a-5p α-1-B-糖蛋白反义RNA1 复发
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长链非编码RNA TMPO-AS1靶向调控miRNA-199a-5p基因对胃癌SGC-7901细胞生物学特性的影响 被引量：6
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作者 钟琰 王鹏 《现代消化及介入诊疗》 2019年第10期1115-1122,共8页
目的 探讨lncRNATMPO和miR-199a-5p调控胃癌SGC-7901细胞增殖和迁移的作用及其机制。方法采用qRT-PCR检测胃癌组织和细胞中lncRNATMPO-AS1的表达。采用CCK-8、Transwell检测胃癌细胞的增殖和迁移;采用生物信息分析、荧光素酶实验、qRT-... 目的 探讨lncRNATMPO和miR-199a-5p调控胃癌SGC-7901细胞增殖和迁移的作用及其机制。方法采用qRT-PCR检测胃癌组织和细胞中lncRNATMPO-AS1的表达。采用CCK-8、Transwell检测胃癌细胞的增殖和迁移;采用生物信息分析、荧光素酶实验、qRT-PCR验证lncRNATMPO-AS1和miR-199a-5p的靶向关系。结果 与癌旁正常组织和正常胃黏膜上皮细胞相比,lncRNATMPO-AS1在胃癌组织和细胞中表达上调(P<0.05)。下调lncRNATMPO-AS1增加胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。lncRNATMPO-AS1靶向作用miR-199a-5p并下调其表达水平。结论lncRNATMPO-AS1在胃癌中发挥促癌效应,其可以通过抑制miR-199a-5p的功能而促进胃癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 lncRNATMPO-AS1 miR-199a-5p 胃癌细胞 增殖 迁移
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鹿茸干细胞外泌体miRNA-145调控炎症软骨细胞的作用
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作者 蒋一頔 赵建伟 +6 位作者 周珏 吕金朋 王大涛 李勋胜 岳志刚 崔博 孙红梅 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第13期3288-3297,共10页
背景:近年来,干细胞外泌体对关节炎的治疗作用备受关注,课题组前期已发现鹿茸干细胞外泌体对软骨缺损有明显修复作用,但其作用机制尚不清楚。目的:探究鹿茸干细胞外泌体中miRNA-145在关节炎软骨细胞中的调控作用和机制。方法:通过慢病... 背景:近年来,干细胞外泌体对关节炎的治疗作用备受关注,课题组前期已发现鹿茸干细胞外泌体对软骨缺损有明显修复作用,但其作用机制尚不清楚。目的:探究鹿茸干细胞外泌体中miRNA-145在关节炎软骨细胞中的调控作用和机制。方法:通过慢病毒载体系统构建过表达miRNA-145的鹿茸干细胞,并通过超速离心法提取外泌体。将大鼠软骨细胞分为5组:空白对照组、白细胞介素1β组、外泌体+白细胞介素1β组、空载体转染外泌体+白细胞介素1β组、miRNA-145转染外泌体+白细胞介素1β组,除空白对照组外,其余4组用白细胞介素1β诱导软骨细胞24 h建立炎症细胞模型,然后分别用相应外泌体处理,采用CCK-8检测细胞增殖水平,划痕实验检测细胞迁移能力,qPCR、Western blot实验检测软骨细胞相关基因和蛋白表达水平。结果与结论:①外泌体呈现典型椭圆形双层囊泡样结构,直径在50-150 nm之间,均表达外泌体的经典标志物CD9、ALIX和TSG101,且不表达Calnexin;②鹿茸干细胞外泌体可提高炎症环境下软骨细胞活力、细胞迁移率、Ⅱ型胶原A1、转化生长因子β1、SMAD3、SOX9 mRNA和蛋白表达水平,降低基质金属蛋白酶13 mRNA表达水平;③miRNA-145过表达使炎症环境下软骨细胞活力、细胞迁移率、Ⅱ型胶原A1、转化生长因子β1、SMAD3、SOX9 mRNA和蛋白表达下降,基质金属蛋白酶13 mRNA表达上升;④结果表明,鹿茸干细胞外泌体可以通过转化生长因子β1/SMAD3信号通路促进软骨细胞修复,miRNA-145过表达后抑制软骨细胞修复。 展开更多
关键词 骨关节炎 外泌体 鹿茸干细胞 microRNA mirna-145 软骨细胞 SOX9 转化生长因子β1(TGF-β1) SMAD3
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LncRNA NONRATT021203.2通过调控miRNA-138-5p表达促进骨癌痛进展
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作者 俞晨阳 朱涵希 +5 位作者 朱正华 宋梦雪 顾卓 李星润 陈家宏 魏金荣 《江苏大学学报(医学版)》 2026年第1期51-57,64,共8页
目的:探索长链非编码RNA(lncRNA)NONRATT021203.2在骨癌痛进展中的作用及其可能的分子机制。方法:采用胫骨内注射乳腺癌Walker 256细胞构建SD大鼠骨癌痛模型;取16只180~200 g成年SD雌鼠,随机分为对照组和骨癌痛组,每组8只,分别胫骨注射1... 目的:探索长链非编码RNA(lncRNA)NONRATT021203.2在骨癌痛进展中的作用及其可能的分子机制。方法:采用胫骨内注射乳腺癌Walker 256细胞构建SD大鼠骨癌痛模型;取16只180~200 g成年SD雌鼠,随机分为对照组和骨癌痛组,每组8只,分别胫骨注射10μL生理盐水和10μL乳腺癌Walker 256细胞悬液(1×10~8个细胞/mL),通过行为学检测大鼠造模侧下肢爪退缩阈值(paw withdrawal threshold,PWT)和爪退缩潜伏期(paw withdrawal latency,PWL),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中lncRNA NONRATT021203.2和miRNA-138-5p相对表达,荧光原位杂交分析miRNA-138-5p在DRG组织中定位。取造模后7 d骨癌痛大鼠10只,分为骨癌痛+siRNA组(n=5)和骨癌痛+siNC组(n=5),分别鞘内注射lncRNA NONRATT021203.2-siRNA及siNC,qRT-PCR检测两组lncRNA NONRATT021203.2和miRNA-138-5p相对表达量。取造模后7 d骨癌痛大鼠16只,分为骨癌痛+mimics组(n=8)和骨癌痛+NC组(n=8),分别鞘内注射miRNA-138-5p mimics和阴性对照寡核苷酸(NC),行为学检测两组PWT和PWL。利用miRand、miRwalk3.0软件分析lncRNA NONRATT021203.2和miRNA-138-5p结合位点。结果:与对照组相比,骨癌痛组造模侧下肢PWT和PWL明显降低(P<0.05),lncRNA NONRATT021203.2相对表达量明显升高(P<0.01),miRNA-138-5p相对表达量明显降低(P<0.001);荧光原位杂交结果显示,miRNA-138-5p定位于神经元胞质中。与骨癌痛+siNC组相比,骨癌痛+lncRNA NONRATT021203.2-siRNA组lncRNA NONRATT021203.2相对表达量明显降低(P<0.05),而miRNA-138-5p相对表达量明显升高(P<0.05)。与骨癌痛+NC组相比,骨癌痛+miRNA-138-5p mimics组PWT明显升高(P<0.01)。生物信息学分析结果显示,lncRNA NONRATT021203.2与miRNA-138-5p存在结合位点。结论:LncRNA NONRATT021203.2可通过竞争性结合miRNA-138-5p,降低胞内游离miRNA-138-5p水平,从而促进骨癌痛的发生与发展。 展开更多
关键词 骨癌痛 背根神经节 lncRNA NONRATT021203.2 mirna-138-5p
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血清miRNA-183与CA199联合检测在胃癌诊断和预后评估中的价值 被引量：5
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作者 何广思 魏洁 张健 《癌变·畸变·突变》 CAS 2023年第6期457-461,466,共6页
目的:探讨血清miRNA-183与糖类抗原199(CA199)联合检测在胃癌诊断和预后评估中的价值。方法:选取2017年1月-2021年12月在安徽医科大学附属滁州医院确诊的52例胃癌患者,将其病例资料纳入胃癌组,另选同期诊断为胃部良性病变的40例患者纳... 目的:探讨血清miRNA-183与糖类抗原199(CA199)联合检测在胃癌诊断和预后评估中的价值。方法:选取2017年1月-2021年12月在安徽医科大学附属滁州医院确诊的52例胃癌患者,将其病例资料纳入胃癌组,另选同期诊断为胃部良性病变的40例患者纳入对照组。采集其外周静脉血,分别采用逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和化学发光免疫法检测血清miRNA-183、CA199水平,比较胃癌患者与对照组间的差异,绘制受试者工作特征曲线(ROC),分析以上指标单独及联合检测在胃癌诊断中的价值。分析血清miRNA-183和CA199水平与胃癌患者临床病理指标的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线分析血清miRNA-183和CA199水平对胃癌患者预后的影响。结果:与对照组相比,胃癌组患者血清中miRNA-183表达水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。组织病理分型为低-未分化、T3~T4以及TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期胃癌患者血清miRNA-183的表达水平较组织病理分型为中-高分化、T1~T2和TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期的胃癌患者明显升高(P<0.05);组织病理分型为低-未分化、TNM分期为Ⅲ-Ⅳ期胃癌患者血清CA199的表达水平较组织病理分型为中-高分化、TNM分期为Ⅰ-Ⅱ期的胃癌患者亦明显升高(P<0.05)。采用ROC曲线分析得出miRNA-183相对表达量4.11为诊断胃癌的最佳临界值,灵敏度与特异度分别为67.31%和80%,ROC曲线下面积(AUC)为0.771;CA199以46.17 U/mL为诊断胃癌的最佳临界值,敏感度与特异度分别为53.8%和87.5%,AUC为0.724;联合检测血清miRNA-183与CA199诊断胃癌对应的敏感度及特异度分别为76.92%和87.5%,AUC为0.882。miRNA-183联合CA199诊断胃癌的AUC大于miRNA-183或CA199独立诊断,差异均具有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示,miRNA-183高表达水平组患者的预后较miRNA-183低水平组患者差,miRNA-183和CA199均高表达患者预后更差(P<0.05)。结论:胃癌患者血清miRNA-183表达明显升高,且与肿瘤的T分期、TNM分期、组织学分级相关;血清miRNA-183与CA199联合检测可以提高胃癌诊断效能,预测胃癌患者的预后。 展开更多
关键词 mirna-183 CA199 胃癌 肿瘤标记物
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从LncRNA-UCA1探讨针刺调节miRNA-331-3p/BRD4轴改善脾虚大鼠肠道炎症作用机制 被引量：2
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作者 刘继东 张家豪 +2 位作者 王建波 曲怡 薛亚楠 《中华中医药学刊》 北大核心 2025年第6期183-188,I0027-I0030,共10页
目的从长链非编码RNA尿路上皮癌相关基因1(LncRNA-UCA1)探讨针刺调节miRNA-331-3p/溴结构域蛋白4(BRD4)轴改善脾虚大鼠肠道炎症作用机制,探讨“健益脾气”针刺疗法改善脾虚便溏症状现代作用机制。方法将60只SD雄性大鼠以随机数字表法分... 目的从长链非编码RNA尿路上皮癌相关基因1(LncRNA-UCA1)探讨针刺调节miRNA-331-3p/溴结构域蛋白4(BRD4)轴改善脾虚大鼠肠道炎症作用机制,探讨“健益脾气”针刺疗法改善脾虚便溏症状现代作用机制。方法将60只SD雄性大鼠以随机数字表法分为正常组、模型组、非经非穴组、针刺组,每组15只。除正常组外,其余3组采用劳倦过度和不规律饮食复合方法建立脾虚证大鼠模型。造模成功后,针刺组电针“足三里”穴及“脾俞”穴干预治疗,非经非穴组给予电针尾尖作为对照干预,每日1次/20 min,共治疗14 d。治疗结束后,取大鼠血清及结肠组织。qPCR法检测大鼠结肠组织LncRNA-UCA1、miRNA-331-3p/BRD4轴相关基因的表达;ELISA法检测大鼠血清中白介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的含量;HE染色法观察大鼠结肠组织病理形态变化;免疫组化法观察结肠中BRD4、白细胞介素-8(IL-8)的表达情况;免疫荧光法观察IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及核因子-κBp65(NFκBp65)的表达水平;TUNEL染色法观察各组结肠组织凋亡情况。结果与正常组比较,模型组、非经非穴组大鼠结肠组织miRNA-331-3p的表达水平明显下降(P<0.05),LncRNA-UCA1、BRD4、NF-κB p65、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的mRNA表达水平有所升高(P<0.05);与模型组比较,针刺组大鼠结肠组织miRNA-331-3p的表达水平明显升高(P<0.05),LncRNA-UCA1、BRD4、NF-κB p65、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的mRNA表达水平有所降低(P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠血清中促炎因子IL-1β、IL-6表达水平明显升高(P<0.05),与模型组比较,针刺组大鼠结肠组织中促炎因子IL-1β、IL-6的表达水平有所降低(P<0.05)。免疫组化法结果显示与正常组比较,模型组大鼠结肠组织BRD4、IL-8表达有所升高(P<0.05);与模型组比较,针刺组的BRD4表达有所降低(P<0.05)。免疫荧光结果显示与正常组比较,模型组、非经非穴组结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值升高(P<0.05);与模型组比较,针刺组大鼠结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值降低(P<0.05)。另外HE染色结果显示,针刺治疗可有效减轻结肠黏膜组织中炎症细胞浸润和杯状细胞的损失;TUNEL染色结果显示,针刺治疗可以改善脾虚大鼠结肠炎症,抑制结肠黏膜细胞凋亡。结论电针“足三里”“脾俞”穴可以干预LncRNA-UCA1调节miRNA-331-3p/BRD4轴,抑制肠道炎症和促炎症介质的表达,进而抑制结肠黏膜细胞凋亡,提高机体免疫力,从而改善脾虚便溏症状。 展开更多
关键词 足三里 脾俞 脾虚 肠道炎症 LncRNA-UCA1 mirna-331/BRD4
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