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赤桉miR482f基因启动子克隆及其响应非生物胁迫和激素表达活性分析
1
作者 周茜 谢怡玲 +1 位作者 黄舒怡 林元震 《广西林业科学》 2025年第2期131-140,共10页
为了解miR482f基因在赤桉(Eucalyptus camaldulensis)响应非生物胁迫和激素的调控机制,采用PCR扩增克隆赤桉miR482f(Eca-miR482f)基因启动子,对其顺式作用元件进行预测,采用农杆菌(Agrobacterium)介导的烟草(Nicotiana taba-cum)瞬时表... 为了解miR482f基因在赤桉(Eucalyptus camaldulensis)响应非生物胁迫和激素的调控机制,采用PCR扩增克隆赤桉miR482f(Eca-miR482f)基因启动子,对其顺式作用元件进行预测,采用农杆菌(Agrobacterium)介导的烟草(Nicotiana taba-cum)瞬时表达试验,结合荧光素酶报告基因检测和GUS组织化学染色分析Eca-miR482f基因启动子活性。设置低温、盐和干旱胁迫及脱落酸、生长素、水杨酸和茉莉酸甲酯处理,分析Eca-miR482f基因启动子对非生物胁迫和激素的响应特性。结果表明,Eca-miR482f基因启动子长度为1 938 bp,除含有TATA-box和CAAT-box核心元件外,还包含胁迫(低温、盐、干旱和光照)响应元件和激素(脱落酸、生长素、水杨酸和茉莉酸甲酯)响应元件。Eca-miR482f基因启动子的荧光素酶报告基因活性显著高于阴性对照。Eca-miR482f基因启动子驱动GUS基因正常表达。在非生物胁迫和激素处理下,Eca-miR482f基因启动子活性均显著上升。Eca-miR482f基因启动子可促进miR482f基因的转录表达,其表达调控可能受单一因素作用或多因素协同作用。 展开更多
关键词 荧光素酶报告基因检测 GUS染色 mir482f 启动子 赤桉
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