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SP94修饰的肝靶向阳离子基因载体的制备及其体外评价
1
作者 柳莹 武鑫 +3 位作者 高原 张丹丹 刘皋林 李晓宇 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2017年第10期900-905,共6页
目的:研究适配体SP94修饰的阳离子基因载体H_3R_5,合成新型肝靶向纳米复合物SP94-H_3R_5/miR195,增加对肝癌细胞的靶向性,提高基因的转染效率。方法:经半胱氨酸修饰的SP94与H_3R_5末端的半胱氨酸发生氧化反应,组装得到SP94-H_3R_5,利用~... 目的:研究适配体SP94修饰的阳离子基因载体H_3R_5,合成新型肝靶向纳米复合物SP94-H_3R_5/miR195,增加对肝癌细胞的靶向性,提高基因的转染效率。方法:经半胱氨酸修饰的SP94与H_3R_5末端的半胱氨酸发生氧化反应,组装得到SP94-H_3R_5,利用~1 H-NMR鉴定SP94-H_3R_5载体的结构,通过电位粒度仪测定纳米复合物的电位和粒径,利用琼脂糖凝胶电泳考察载体对miR195的压缩能力。以体外培养的人肝癌SK-Hep-1为研究对象,CCK8法检测SP94-H_3R_5和H_3R_5对细胞增殖的抑制作用,采用激光共聚焦显微镜考察肝癌细胞对纳米复合物的摄取,以pEGFP为报告基因考察基因转染效率,Western blot实验检测SK-Hep-1细胞VEGF的蛋白表达。结果:SP94-H_3R_5具有生物相容性,可以压缩miR195形成稳定的纳米复合物,SP94-H_3R_5/miR195与H_3R_5/miR195相比可以更多地被SK-Hep-1摄取(P<0.01),SP94-H_3R_5转染效率高于非靶向载体H_3R_5,对VEGF的阻滞作用也更高(P<0.01)。结论:SP94-H_3R_5兼具纳米材料的被动靶向作用和适配体的主动靶向作用,有潜力成为肝癌治疗中的新型载体。 展开更多
关键词 适配体 聚阳离子载体 肝癌 mir195
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伊立替康调控SNHG1/miR-195的表达抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制研究 被引量：1
2
作者 孙绪举 干飞 +1 位作者 胡娟 张继东 《河北医药》 CAS 2020年第24期3691-3696,共6页
目的研究伊立替康对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法以16 ml/L、32 ml/L、64 ml/L浓度的伊立替康处理肝癌细胞HepG2,MTT法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)... 目的研究伊立替康对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法以16 ml/L、32 ml/L、64 ml/L浓度的伊立替康处理肝癌细胞HepG2,MTT法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达,qPCR检测SNHG1和miR-195表达。构建抑制SNHG1表达的HepG2细胞,或构建过表达SNHG1的细胞并进行32 ml/L伊立替康处理,观察其对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。StarBase软件预测出miR-195是SNHG1的靶基因,双荧光素酶报告实验进一步验证。细胞HepG2中转染anti-miR-195并使用32 ml/L伊立替康处理,检测细胞增殖、迁移和侵袭。结果不同浓度伊立替康明显降低HepG2细胞活性,并呈剂量和时间依赖性。32 ml/L伊立替康显著减少迁移细胞数、侵袭细胞数、Cyclin D1蛋白、MMP-2蛋白、SNHG1表达量,明显提高P21、E-cadherin蛋白水平(P<0.05)。抑制SNHG1表达显著降低24 h、48 h和72 h的细胞活性,减少迁移细胞数侵袭细胞数、Cyclin D1、MMP-2蛋白表达量,提升P21、E-cadherin蛋白水平(P<0.05)。过表达SNHG1逆转了伊立替康对HepG2细胞增殖、迁移、侵袭、Cyclin D1、MMP-2蛋白表达的抑制作用,以及逆转对P21、E-cadherin蛋白表达的促进作用。SNHG1靶向调控miR-195表达。抑制miR-195表达逆转伊立替康抑制HepG2细胞增殖、迁移、侵袭的作用。结论伊立替康通过调控SNHG1/miR-195表达抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭。 展开更多
关键词 伊立替康 SNHG1 miR-195 肝癌 增殖
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血清miR⁃195⁃5p、miR⁃409⁃3p对胃癌诊断和预后的价值 被引量：3
3
作者 杨芳 杨伏猛 +3 位作者 王琨 戚雨欣 王震文 王西珍 《热带医学杂志》 2024年第12期1699-1704,共6页
目的结合基因表达数据库(GEO)寻找胃癌血清潜在的miRNA肿瘤标志物,并研究对胃癌的诊断和预后价值。方法收集2023年1-6月间在连云港市第二人民医院就诊的30例胃癌患者和20名体检健康人的血清,利用GEO2R在线分析工具对GSE86226数据集筛选... 目的结合基因表达数据库(GEO)寻找胃癌血清潜在的miRNA肿瘤标志物,并研究对胃癌的诊断和预后价值。方法收集2023年1-6月间在连云港市第二人民医院就诊的30例胃癌患者和20名体检健康人的血清,利用GEO2R在线分析工具对GSE86226数据集筛选出差异表达的miRNA,采用实时荧光定量PCR方法对筛选结果经行验证,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR⁃195⁃5p、miR⁃409⁃3p水平对胃癌的诊断价值。仙桃学术在线工具对癌症基因组图谱(TCGA)数据库中胃癌组织和癌旁正常组织中miRNA水平、总生存率进行统计。结果GEO2R在线分析工具显示,胃癌患者和健康人存在10个差异表达的miRNA,分别为hsa⁃miR⁃296⁃5p、hsa⁃miR⁃28⁃3p、hsa⁃miR⁃10b⁃5p、hsa⁃miR⁃141⁃3p、hsa⁃miR⁃95、hsa⁃miR⁃146b⁃5p、hsa⁃miR⁃195⁃5p、hsa⁃miR⁃409⁃3p、hsa⁃miR⁃421、hsa⁃miR⁃200a⁃3p,选择miR⁃195⁃5p和miR⁃409⁃3p这两种在胃癌血清中鲜有报道的miRNA做下一步分析。定量结果显示,miR⁃195⁃5p在胃癌患者血清中表达(1.10±0.32)低于健康人(1.40±0.35),差异有统计学意义(t=2.981,P=0.005);miR⁃409⁃3p表达(0.09±0.13)高于健康人(0.02±0.01),差异有统计学意义(t=-2.310,P=0.025);仙桃学术在线工具分析显示,miR⁃195⁃5p在胃癌组织中低表达,miR⁃409⁃3p在胃癌组织中高表达,与血清定量结果一致。miR⁃195⁃5p和miR⁃409⁃3p联合诊断胃癌的曲线下面积(AUC)为0.900,高于miR⁃195⁃5p的0.729,差异有统计学意义(Z=2.765,P=0.006);而与miR⁃409⁃3p(0.816)差异无统计学意义(Z=1.707,P=0.088)。miR⁃409⁃3p高表达患者总生存率低于miR⁃409⁃3p低表达患者,差异有统计学意义[HR=1.40(1.03~1.89),P=0.032]。结论血清miR⁃195⁃5p、miR⁃409⁃3p水平可以作为胃癌患者诊断标志物,miR⁃195⁃5p、miR⁃409⁃3p联合能够提高胃癌诊断能力;其中miR⁃409⁃3p是较好的胃癌预后指标。 展开更多
关键词 胃癌 生物信息学 miR⁃195⁃5p miR⁃409⁃3p
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联合检测miR⁃195、SOCS3 mRNA、miR⁃210对急性淋巴细胞性白血病的诊断价值分析 被引量：5
4
作者 徐祖超 刘艳冰 《广州医科大学学报》 2021年第2期54-60,共7页
目的:研究联合检测微小核苷酸195(miR⁃195)、细胞因子信号转导抑制因子⁃3(SOCS3 mRNA)、微小核苷酸210(miR⁃210)在急性淋巴细胞性白血病(ALL)诊断及危险度评估中的价值。方法:选取2014年2月至2017年2月收治的120例ALL患者为研究对象,初... 目的:研究联合检测微小核苷酸195(miR⁃195)、细胞因子信号转导抑制因子⁃3(SOCS3 mRNA)、微小核苷酸210(miR⁃210)在急性淋巴细胞性白血病(ALL)诊断及危险度评估中的价值。方法:选取2014年2月至2017年2月收治的120例ALL患者为研究对象,初诊患者74例、缓解组患者22例、复发患者24例,另选取健康体检的儿童120例作为对照组,分别对不同组别研究对象的miR⁃195、SOCS3 mRNA、miR⁃210表达水平,初诊组患者不同危险度与miR⁃195、SOCS3 mRNA、miR⁃210表达水平的相关性,初诊组患者危险度的危险因素以及单独检测和联合检测对ALL疾病的诊断效能进行分析。结果:对照组、缓解组、复发组、初诊组以及不同危险度患者的miR⁃195、SOCS3 mRNA、miR⁃210表达水平差异明显(P<0.05)。经两两比较,各组miR⁃195、miR⁃210表达水平从高到低依次为对照组、缓解组、初诊组、复发组以及标危组、中危组、高危组,SOCS3 mRNA表达水平从高到低依次为复发组、初诊组、缓解组、对照组以及高危组、中危组和标危组(P<0.05)。患者的危险度与miR⁃195、miR⁃210表达水平呈现负相关,与SOCS3 mRNA呈现正相关,联合检测灵敏度显著高于单独检测患者的miR⁃195、miR⁃210、SOCS3 mRNA的标危、中危以及高危临界值分别为2.43、2.01、1.34;6.32、5.44、4.09;0.66、0.98、1.22。结论:联合检测miR⁃195、SOCS3 mRNA、miR⁃210在ALL患者诊断中灵敏度较高,且miR⁃195、SOCS3 mRNA、miR⁃210表达水平与ALL患者危险度呈显著相关,建议在临床中推广。 展开更多
关键词 急性白血病 淋巴细胞 联合检测 SOCS3 miR⁃210 miR⁃195
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