靶向沉默miR-345表达对胃癌细胞周期的影响及其机制 被引量：4

1

作者 李博 马俊 +8 位作者 郭婉薇 陈晓武 王伟福 柳勤译 蔡少薇 叶丽芳 杨夏彤 王丽萍 许鸣 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2015年第4期398-401,共4页

目的探讨miR-345影响胃癌细胞生长周期的作用机制。方法采用脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803、MKN45以沉默miR-345表达,采用实时英光定量PCR(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹(Western blotting)检测胃癌细胞中p21Cip1... 目的探讨miR-345影响胃癌细胞生长周期的作用机制。方法采用脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803、MKN45以沉默miR-345表达,采用实时英光定量PCR(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹(Western blotting)检测胃癌细胞中p21Cip1水平,随后检测CDK4、CDK6、Cyclin D1、p-Rb、Rb蛋白水平,进一步克隆形成实验比较其增殖能力,流式细胞术检测miR-345对胃癌细胞周期的影响。结果脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803、MKN45可以抑制miR-345的表达;p21Cip1的mRNA和蛋白水平在低miR-345表达的胃癌细胞系中升高;下调miR-345的表达后MGC803、MKN45细胞中CDK4、CDK6、Cyclin D1和总Rb蛋白的表达水平无明显变化,但Rb蛋白的磷酸化水平显著降低。结论沉默miR-345的表达能够明显阻滞胃癌细胞从G1期向S期的进程,减慢细胞生长速度;其机制与上调p21Cip1进而抑制Rb蛋白的磷酸化有关。 展开更多

关键词 微小RNA 胃癌 细胞周期 mir-345

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槐定碱上调miR-345-5p对乳腺癌细胞BT549增殖、迁移和侵袭的影响 被引量：2

2

作者 李敬霞 刘艳 《新中医》 CAS 2022年第1期128-133,共6页

目的:探讨槐定碱对乳腺癌细胞BT549增殖、迁移、侵袭的影响和分子机制。方法:运用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell实验分别检测不同浓度(1.0、2.0、4.0、8.0 mg/mL)的槐定碱对乳腺癌细胞BT549增殖、迁移、侵袭的影响,筛选槐定碱最佳... 目的:探讨槐定碱对乳腺癌细胞BT549增殖、迁移、侵袭的影响和分子机制。方法:运用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell实验分别检测不同浓度(1.0、2.0、4.0、8.0 mg/mL)的槐定碱对乳腺癌细胞BT549增殖、迁移、侵袭的影响,筛选槐定碱最佳使用浓度。将细胞BT549分为对照(NC)组、槐定碱组、anti-miR-NC组、anti-miR-345-5p组、槐定碱+anti-miR-NC组、槐定碱+anti-miR-345-5p组。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-345-5p表达,检测细胞活力、迁移和侵袭能力变化。免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化的核转录因子(NF-κB) p65 (p-p65)和磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)表达。结果:不同浓度槐定碱干预后细胞BT549活力、迁移和侵袭细胞数均显著降低,选择4.0 mg/mL槐定碱浓度进行后续实验。与NC组比较,槐定碱组细胞中miR-345-5p表达显著升高,p-p65和p-IκBα表达降低(P<0.05)。与anti-miR-NC组比较,anti-miR-345-5p组细胞活力、迁移和侵袭细胞数升高,p-p65和p-IκBα表达升高(P<0.05)。与槐定碱+anti-miR-NC组比较,槐定碱+anti-miR-345-5p组细胞活力、迁移和侵袭细胞数升高,p-p65和p-IκBα表达升高(P<0.05)。结论:槐定碱通过上调miR-345-5p可抑制乳腺癌细胞BT549增殖、迁移和侵袭,其机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。 展开更多

关键词 槐定碱 乳腺癌 mir-345-5p 增殖 迁移 侵袭

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miR-345在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

3

作者 胡海峰 冯谢敏 +3 位作者 乔健 段伟 刘宁宁 孙晓东 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2017年第2期117-122,共6页

目的探讨microRNA-345(miR-345)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况,并进一步分析其与肿瘤的临床病理特征和预后关系。方法利用Real-time PCR检测98例NSCLC患者组织及三种细胞系中miR-345的表达,分析miR-345的表达与临床预后的关系。结... 目的探讨microRNA-345(miR-345)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况,并进一步分析其与肿瘤的临床病理特征和预后关系。方法利用Real-time PCR检测98例NSCLC患者组织及三种细胞系中miR-345的表达,分析miR-345的表达与临床预后的关系。结果和对照组相比,miR-345的表达在NSCLC组织及细胞系中显著下调(P<0.05);组织中miR-345的表达水平和临床病理指标包括淋巴结转移(P<0.001)、远端转移(P=0.028)、TNM分级(P=0.004)以及病理分期(P=0.011)有关;低表达miR-345的NSCLC患者组和高表达miR-345的患者组相比,其总生存率较低(P=0.021)。多因素分析表明miR-345的表达是NSCLC预后的独立危险因素(HR=3.897,95%CI:2.263~10.440;P=0.012)。结论 miR-345在NSCLC组织及细胞系中的表达降低,低表达的miR-345和NSCLC的进展及预后有关,表明miR-345可能作为NSCLC的一个潜在临床诊断标记。 展开更多

关键词 生物标记 mir-345 非小细胞肺癌 预后

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CircACTR2调节miR-345-3p/TXNRD1轴对高糖诱导的滋养层细胞增殖、凋亡的影响

4

作者 罗亚丽 黄志刚 +1 位作者 罗思通 徐洲 《中国优生与遗传杂志》 2023年第5期957-962,共6页

目的 探究CircACTR2对高糖诱导的滋养层细胞增殖、凋亡的影响,探讨其作用机制。方法 将人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/Svneo)分为:control组(5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖)、si-NC组(转染si-NC)、si-CircACTR2组(转染si-CircACT... 目的 探究CircACTR2对高糖诱导的滋养层细胞增殖、凋亡的影响,探讨其作用机制。方法 将人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/Svneo)分为:control组(5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖)、si-NC组(转染si-NC)、si-CircACTR2组(转染si-CircACTR2)、si-CircACTR2+inhibitor-NC组(si-CircACTR2和inhibitor-NC共转染)、si-CircACTR2+miR-345-3p inhibitor组(si-CircACTR2和miR-345-3p inhibitor共转染)。RT-qPCR检测细胞中CircACTR2、miR-345-3p的表达;MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Westernblot检测细胞中硫氧还蛋白还原酶1(TXNRD1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved cleaved caspase-3)的表达;双荧光素酶报告基因实验分别验证CircACTR2和miR-345-3p、miR-345-3p和TXNRD1的关系。结果 与control组相比,高糖组HTR-8/Svneo细胞的凋亡率、CircACTR2、TXNRD1、Bax、cleavedcaspase-3蛋白表达升高(P<0.05),miR-345-3p、OD490值、PCNA蛋白表达降低(P<0.05);与高糖组、si-NC组相比,si-CircACTR2组HTR-8/Svneo细胞的凋亡率、CircACTR2、TXNRD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达降低(P<0.05),miR-345-3p、OD490值、PCNA蛋白表达升高(P<0.05);与si-CircACTR2组、si-CircACTR2+inhibitor-NC组相比,si-CircACTR2+miR-345-3p inhibitor组HTR-8/Svneo细胞的miR-345-3p、OD490值、PCNA蛋白表达降低(P<0.05),凋亡率、TXNRD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05);CircACTR2靶向调控miR-345-3p表达,miR-345-3p靶向负调控TXNRD1表达。结论 敲低CircACTR2可能通过靶向miR-345-3p来下调TXNRD1表达,进而抑制高糖诱导的滋养层细胞凋亡,促进滋养层细胞增殖。 展开更多

关键词 CircACTR2 mir-345-3p/TXNRD1轴 滋养层细胞 增殖 凋亡

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艾灸通过调节腹泻型肠易激综合征大鼠结肠组织miR-345-3p/miR-216a-5p表达抑制炎性反应 被引量：13

5

作者 邹玲 阮静茹 +6 位作者 陈进雨 王娇娇 祝姗姗 廖路敏 李奎武 王婧吉 储浩然 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期226-232,共7页

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p、核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的影响,探讨艾灸治疗IBS-D的抗炎机制。方法:SD幼鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、吡咯烷二硫代甲酸铵盐(PDTC)组,每... 目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p、核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的影响,探讨艾灸治疗IBS-D的抗炎机制。方法:SD幼鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、吡咯烷二硫代甲酸铵盐(PDTC)组,每组12只。采用新生仔鼠母子分离联合醋酸灌肠刺激联合慢性束缚法复制IBS-D大鼠模型。艾灸组艾灸“天枢”“上巨虚”,每次20 min,每天1次,治疗7 d。PDTC组腹腔注射PDTC(50 mg·kg^(-1)·d^(-1)),共治疗7 d。观察各组幼鼠体质量、稀便率和腹部回缩反射(AWR)最小容量阈值;HE染色法观察各组幼鼠结肠黏膜层病理形态;ELISA法检测各组幼鼠血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;荧光定量PCR法检测各组幼鼠结肠组织中miR-345-3p、miR-216a-5p、NF-κB p65 mRNA表达水平;免疫荧光法检测各组幼鼠结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65表达水平。结果:与正常组比较,模型组稀便率升高(P<0.01),体质量、AWR最小容量阈值降低(P<0.01),结肠组织黏膜存在轻度炎性反应,血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量升高(P<0.01),IL-4含量降低(P<0.01),结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p相对表达量降低(P<0.01),NF-κB p65 mRNA相对表达量升高(P<0.01),结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值升高(P<0.01)。与模型组比较,艾灸组和PDTC组稀便率降低(P<0.01),体质量、AWR最小容量阈值升高(P<0.01),结肠组织黏膜炎性反应减轻,血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量降低(P<0.01),IL-4含量升高(P<0.01),结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p相对表达量升高(P<0.05),NF-κB p65 mRNA相对表达量降低(P<0.01),结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值降低(P<0.01)。与艾灸组比较,PDTC组血清IL-6含量降低(P<0.01)。结论:艾灸可以减轻IBS-D大鼠肠道炎性反应水平,降低内脏高敏感性,其机制可能与提高结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p表达水平,抑制NF-κB p65表达水平,从而降低炎性因子水平有关。 展开更多

关键词 腹泻型肠易激综合征 艾灸 炎性反应 mir-345-3p mir-216a-5p 核因子-κB p65

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miR-345抑制人胰腺癌细胞的增殖能力研究

6

作者 杨琴 王杰 +1 位作者 吕沐瀚 唐世孝 《现代医药卫生》 2018年第6期828-832,共5页

目的探讨miR-345对人胰腺癌细胞增殖能力的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-RCR)检测miR-345在胰腺癌组织标本、5株人胰腺癌细胞系及1株人正常胰腺上皮细胞系中的表达量,选取miR-345表达差异较明显的胰腺癌细胞PANC-1和SW1... 目的探讨miR-345对人胰腺癌细胞增殖能力的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-RCR)检测miR-345在胰腺癌组织标本、5株人胰腺癌细胞系及1株人正常胰腺上皮细胞系中的表达量,选取miR-345表达差异较明显的胰腺癌细胞PANC-1和SW1990细胞系进行后续实验;构建miR-345过表达慢病毒载体(lv-miR-345-U)及空载慢病毒载体(lv-NC),采用qRT-PCR检测感染效率;在体外采用细胞计数Kit-8(CCK-8)实验,采用平板克隆实验检测miR-345对胰腺癌细胞增殖能力的影响;体内建立裸鼠皮下成瘤模型,并将瘤体包埋,采用免疫组织化学实验法检测miR-345对胰腺癌细胞成瘤能力的影响;采用蛋白质免疫印迹(western blotting)检测miR-345对预测靶点Bcl-2表达的影响。结果 qRT-PCR显示,5株胰腺癌细胞系中miR-345表达量低于正常胰腺上皮细胞系(P<0.05);过表达miR-345后PANC-1和SW1990细胞增殖能力均明显受到抑制(P<0.05),细胞集落形成数量明显减少(P<0.05)。裸鼠皮下成瘤模型显示,过表达miR-345后肿瘤体积及免疫组织化学指标Ki-67均明显低于正常胰腺上皮细胞系组,差异均有统计学意义(P<0.05);上调miR-345的表达能使凋亡关键Bcl-2的表达下调。结论 miR-345能在体内外有效抑制胰腺癌细胞的增殖,有可能成为胰腺癌治疗的新靶点。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 微小RNA mir.345 细胞增殖

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miR-345-3p在长骨感染性骨不连中的表达及诊断效能研究 被引量：1

7

作者 戴艳 胡军 +2 位作者 张宇 胡擎晖 刘源 《药物评价研究》 CAS 2020年第5期842-846,共5页

目的探讨循环血miR-345-3p在长骨感染性骨不连中的表达变化,评估其作为潜在的新型生物标志物在长骨感染性骨不连的诊断价值。方法建立股骨感染性骨不连及开放性截骨大鼠模型,术后42 d后,拍摄X线评估内固定位置及骨折愈合情况;离断股骨后... 目的探讨循环血miR-345-3p在长骨感染性骨不连中的表达变化,评估其作为潜在的新型生物标志物在长骨感染性骨不连的诊断价值。方法建立股骨感染性骨不连及开放性截骨大鼠模型,术后42 d后,拍摄X线评估内固定位置及骨折愈合情况;离断股骨后行micro-CT,检测骨痂矿物质密度(BMD)、骨痂体积/总体积(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁间隙(Tb.Sp)。使用Sysmex XN-350全血细胞分析仪进行白细胞计数(WBC);采用免疫散射比浊法测定血中C反应蛋白(CRP)表达水平;采用毛细管动态光度计成像测定法检测红细胞沉降速率(ESR)水平。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测和比较感染性骨不连组及骨折组全血中miR-345-3p的表达水平,并通过受试者工作特征(ROC)曲线评估WBC、CRP、ESR及miR-345-3p在感染性骨不连中的诊断效能。结果行X线及micro-CT评估骨折愈合情况,骨折组骨折线模糊,断端连续,有连续骨痂通过骨折线;长骨感染性骨不连组骨折端硬化,断端有间隙,骨痂间无小梁通过,骨膜增厚。感染性骨不连组术后42 d,BMD、Tb.Th、Tb.N显著高于骨折组,Tb.Sp显著低于骨折组(P<0.05、0.01)。感染性骨不连组WBC、CRP、ESR较骨折组显著升高(P<0.05),miR-345-3p表达较骨折组显著降低(P<0.01)。miR-345-3p诊断的AUC为0.906,优于WBC、CRP、ESR。结论全血miR-345-3p在长骨感染性骨不连中表达水平显著降低,有望成为感染性骨不连诊断的潜在新型生物标志物。 展开更多

关键词 感染性骨不连 mir-345-3p 诊断 生物标志物 ROC曲线

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miR-345-5p、chemerin、HDL-C在HLAP患者中的表达及与HLAP发病的相关性研究 被引量：1

8

作者 杨忠海 冯文涛 +1 位作者 张大鹏 童颖 《国际检验医学杂志》 CAS 2023年第6期641-644,650,共5页

目的探讨高脂血症性急性胰腺炎(HLAP)患者血清趋化素(chemerin)、miR-345-5p、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的表达及与HLAP发病的相关性。方法回顾性分析2020年6月至2021年12月于该院确诊的HLAP患者100例作为HLAP组,另选取同时期来该院行... 目的探讨高脂血症性急性胰腺炎(HLAP)患者血清趋化素(chemerin)、miR-345-5p、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的表达及与HLAP发病的相关性。方法回顾性分析2020年6月至2021年12月于该院确诊的HLAP患者100例作为HLAP组,另选取同时期来该院行一般体检的健康人50例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清chemerin水平,实时荧光定量PCR法检测血清miR-345-5p水平,全自动生化分析仪检测血清HDL-C。对比两组患者血清miR-345-5p、chemerin、HDL-C水平差异;探讨两组患者血清其他指标如肿瘤坏死因子(TNF-α)、降钙素原(PCT)及C反应蛋白(CRP)的表达水平差异;采用Spearman相关系数分析miR-345-5p、chemerin、HDL-C与HLAP发病的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-345-5p、chemerin、HDL-C联合检测对HLAP的诊断效能。结果HLAP组患者血清miR-345-5p、chemerin水平显著高于对照组,而HDL-C显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);HLAP组患者血清TNF-α、PCT、CRP水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关系数分析显示,血清miR-345-5p、chemerin水平与HLAP的发病均呈正相关(r=0.518、0.604,P<0.001),而HDL-C与HLAP发病呈负相关(r=-0.672,P<0.001)。ROC曲线显示,联合检测的曲线下面积为0.886,特异度为87.50%,灵敏度为86.50%,高于任意单一检测结果,具有良好的诊断效能(P<0.05)。结论血清miR-345-5p、chemerin、HDL-C联合检测对诊断HLAP具有重要意义,值得临床推广应用。 展开更多

关键词 高脂血症性急性胰腺炎 高密度脂蛋白胆固醇 趋化素 mir-345-5p

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高脂血症性急性胰腺炎患者血清miR-345-5p的表达及意义 被引量：14

9

作者 刘春雨 林宁 +5 位作者 熊杰 刘若鸿 杨屹 田伏洲 孙红玉 汤礼军 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期318-321,共4页

目的探讨高脂血症性急性胰腺炎(HTGAP)患者外周血miR-345-5p的表达水平及其临床意义。方法选取2017年12月-2018年9月西部战区总医院普通外科中心收治的HTGAP患者40例(A组)、非HTGAP患者75例(B组),同时选取高脂血症非急性胰腺炎患者25例(... 目的探讨高脂血症性急性胰腺炎(HTGAP)患者外周血miR-345-5p的表达水平及其临床意义。方法选取2017年12月-2018年9月西部战区总医院普通外科中心收治的HTGAP患者40例(A组)、非HTGAP患者75例(B组),同时选取高脂血症非急性胰腺炎患者25例(C组)和健康志愿者30例(D组)为对照组。其中A组根据急性胰腺炎亚特兰大分级标准再分为轻度(HTG-MAP)与重度(HTG-SAP)两个亚组,每组20例。检查所有患者血清三酰甘油和淀粉酶水平并进行APACHEⅡ评分,应用实时荧光定量PCR检测血清中miR-345-5p的表达水平,分析miR-345-5p表达水平与HTGAP临床指标的相关性,并评估其在预测急性胰腺炎严重程度中的作用。结果 A组患者血清中miR-345-5p的表达水平(2.28±0.23)明显高于B组(0.35±0.21)、C组(0.29±0.23)和D组(0.25±0.33),差异均有统计学意义(P<0.001),而B、C、D组之间miR-345-5p的表达差异无统计学意义。ROC曲线分析显示miR-345-5p检测HTG-SAP的曲线下面积为0.785(0.634～0.935)。重度HTGAP组miR-345-5p的表达水平(2.95±0.46)明显高于轻度HTGAP组(0.69±0.23),差异有统计学意义(P<0.05);miR-345-5p表达水平与三酰甘油水平具有相关性(r=0.853,P<0.001),而与淀粉酶无相关性(r=–0.239,P>0.05)。结论 miR-345-5p在HTGAP中表达明显上调,且其随着病情严重程度而升高,有望为HTGAP的临床诊断及严重程度评估提供新的途径。 展开更多

关键词 胰腺炎 高脂血症 微RNAS mir-345-5p

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miR-345-5p靶向下调KIF15抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移及侵袭 被引量：1

10

作者 王志刚 鲁静 +1 位作者 王明华 崔秀卿 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2022年第2期168-176,共9页

目的探讨miR-345-5p靶向调控运动蛋白超家族蛋白15(KIF15)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法qRT-PCR检测NSCLC患者癌组织、癌旁组织以及人NSCLC细胞系A549、NCI-H358、SPC-A-1、人正... 目的探讨miR-345-5p靶向调控运动蛋白超家族蛋白15(KIF15)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法qRT-PCR检测NSCLC患者癌组织、癌旁组织以及人NSCLC细胞系A549、NCI-H358、SPC-A-1、人正常肺上皮细胞系BEAS-2B中miR-345-5p表达量;免疫组织化学检测NSCLC癌组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达;细胞转染技术将miR-345-5p模拟物(miR-345-5p mimics)、miR-345-5p抑制物(anti-miR-345-5p)、KIF15过表达物(KIF15 OE)转染于A549细胞,CCK-8法、EdU染色检测A549细胞增殖;Transwell实验A549细胞迁移、侵袭;Western blot检测A549细胞中KIF15蛋白表达情况;双荧光素酶报告基因实验验证miR-345-5p和KIF15靶向关系。结果miR-345-5p在NSCLC癌组织和细胞系中均呈低表达,其中A549细胞miR-345-5p表达量最低。NSCLC组织中PCNA、Bcl-2、MMP-2蛋白阳性表达高于癌旁组织;上调miR-345-5p显著抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭能力,miR-345-5p和KIF15存在靶向关系,KIF15过表达能逆转上调miR-345-5p对A549细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论miR-345-5p可通过靶向下调KIF15表达,抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 mir-345-5p 运动蛋白超家族蛋白15 细胞增殖 迁移 侵袭

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miR-345靶向调控TGM1抑制膀胱癌的初步研究

11

作者 雷永华 王磊 +2 位作者 赵致广 张伟 付晓亮 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第18期3412-3419,共8页

目的:探讨mi R-345调控TGM1表达影响膀胱癌的分子生物学机制。方法:首先,采用RT-qPCR检测T24和RT4细胞中mi R-345、TGM1的表达;再采用mi RNA-NC、mi R-345 mimic、NC inhibitor、mi R-345 inhibitor、control si RNA、si TGM1和pc-DNA3.... 目的:探讨mi R-345调控TGM1表达影响膀胱癌的分子生物学机制。方法:首先,采用RT-qPCR检测T24和RT4细胞中mi R-345、TGM1的表达;再采用mi RNA-NC、mi R-345 mimic、NC inhibitor、mi R-345 inhibitor、control si RNA、si TGM1和pc-DNA3.1/TGM1等转染膀胱癌细胞;然后,采用MTT实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞侵袭,流式细胞仪检测细胞凋亡,双荧光报告酶检测mi R-345的靶基因;最后,采用Western blot检测TGM1在细胞中的表达。结果:mi R-345在T24和RT4细胞中表达低于正常细胞(P<0.05)。mi R-345过表达时,T24和RT4细胞的增殖侵袭能力减弱,细胞凋亡率上升;mi R-345表达沉默时,细胞增殖和侵袭能力增强,细胞凋亡率下降。双荧光报告基因检测结果显示TGM1为mi R-345的靶基因,mi R-345过表达抑制TGM1的表达(P<0.05);mi R-345表达沉默时则表达上调(P<0.05)。当TGM1表达沉默时,T24和RT4细胞的增殖和侵袭能力减弱,细胞凋亡率上升;TGM1过表达时该细胞的增殖和侵袭能力增强,细胞凋亡率下降。结论:mi R-345通过下调靶基因TGM1的表达,抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭并促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 mir-345 TGM1 膀胱癌 细胞侵袭

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miR-345在胃癌中的表达特点及其临床意义 被引量：6

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作者 李博 郭婉薇 +4 位作者 王伟福 陈晓武 蔡少薇 柳勤译 许鸣 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2011年第24期7220-7225,共6页

目的探讨miR-345在胃癌中的表达特点及其临床意义。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测人胃黏膜上皮细胞GES-1、3株胃癌细胞系(SGC7901、MGC803、MKN45)及48例配对的胃癌与癌旁组织中miR-345的表达水平,并对miR-345表达水平... 目的探讨miR-345在胃癌中的表达特点及其临床意义。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测人胃黏膜上皮细胞GES-1、3株胃癌细胞系(SGC7901、MGC803、MKN45)及48例配对的胃癌与癌旁组织中miR-345的表达水平,并对miR-345表达水平与患者临床病理特征、生存预后的关系进行相关性分析,最后通过PicTar和TargetScan软件预测miR-345潜在的重要靶基因。结果与正常组织比较,胃癌细胞系及胃癌组织中miR-345表达明显升高(P<0.05);miR-345的表达与胃癌的分化程度(P=0.005),TNM分期(P=0.003),原发肿瘤的浸润深度(P<0.001)和淋巴结转移(P<0.001)密切相关;过度表达的miR-345预示胃癌患者的术后生存期更短;miR-345潜在的重要靶基因为CDKN1A、BBC3和RUNX3。结论 miR-345与胃癌的发生、发展密切相关,可能成为胃癌诊治和评估预后的潜在生物学指标。 展开更多

关键词 胃肿瘤 mir-345 病理学 临床

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沉寂miR-345表达对胃癌细胞增殖的影响及其机制探讨 被引量：2

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作者 李博 马俊 +9 位作者 刘丽玉 郭婉薇 陈晓武 王伟福 柳勤译 蔡少薇 叶丽芳 杨夏彤 王丽萍 许鸣 《中华全科医学》 2015年第7期1048-1050,F0003,共4页

目的探讨在胃癌细胞中沉寂miR-345表达对癌细胞增殖及p21Cip1的影响。方法采用脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803、MKN45,MTT法检测胃癌细胞系生长速度,流式细胞术检测其对胃癌细胞周期的影响。随后采用Real-time PCR... 目的探讨在胃癌细胞中沉寂miR-345表达对癌细胞增殖及p21Cip1的影响。方法采用脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803、MKN45,MTT法检测胃癌细胞系生长速度,流式细胞术检测其对胃癌细胞周期的影响。随后采用Real-time PCR、Western blot检测胃癌细胞中p21Cip1水平。结果 MGC803、MKN 45细胞转染miR-345反义寡核苷酸后其miR-345的表达量较对照组均明显下降分别为(8.06±0.69)比(23.06±0.81),P=0.009,(7.26±0.55)比(17.73±0.65),P=0.016;MTT试验结果显示MGC 803、MKN 45转染miR-345反义寡核苷酸后其细胞存活率较对照组下降分别为(190.03±0.55)比(405.20±0.22),P=0.008,(242.09±0.83)比(440.58±0.07),P=0.025;MGC803、MKN 45细胞转染miR-345反义寡核苷酸并能够明显阻滞胃癌细胞从G1期向S期的进程;MGC803、MKN 45细胞转染miR-345反义寡核苷酸后其p21Cip1的mRNA的表达量较对照组升高分别为(48.09±0.67)比(15.20±0.32),P=0.011,(56.07±0.77)比(13.82±0.59),P=0.007,Western blot结果显示在MGC803、MKN45细胞中沉寂miR-345后p21Cip1蛋白表达量亦明显升高。结论沉寂miR-345的表达可以抑制胃癌细胞株MGC803、MKN45的增殖;其机制与上调p21Cip1的表达有关。 展开更多

关键词 微小RNA 胃肿瘤 mir-345

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葡萄糖转运促流感病毒复制的机制研究

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作者 师娟 范砚茹 刘晓丽 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第4期455-460,共6页

目的探讨流感病毒H9N2复制与葡萄糖转运之间的潜在联系。方法 H9N2感染A549细胞后,检测葡萄糖转运对其复制的影响。感染H9N2后高通量测序检测调控此生理过程的潜在miRNA。通过过表达miRNA筛选影响葡萄糖转运的miRNA。miRDB在线分析和荧... 目的探讨流感病毒H9N2复制与葡萄糖转运之间的潜在联系。方法 H9N2感染A549细胞后,检测葡萄糖转运对其复制的影响。感染H9N2后高通量测序检测调控此生理过程的潜在miRNA。通过过表达miRNA筛选影响葡萄糖转运的miRNA。miRDB在线分析和荧光素酶报告试验鉴定miRNA底物。结果 H9N2感染A549后,A549细胞葡萄糖转运水平上升(31.2±7.1 vs 123.5±24.9,t=6.138,P<0.05)。葡萄糖转运抑制剂Phloretin处理A549后,H9N2复制水平显著下降(5.2±1.0 vs 1.6±0.2,t=6.035,P<0.05)。葡萄糖转运激动剂Insulin处理A549后,H9N2复制水平显著上升(5.6±0.9 vs 14.3±2.5,t=5.493,P<0.05)。高通量测序显示,H9N2感染后37种miRNA的表达发生显著变化。当敲低miR-345-3p时,A549细胞葡萄糖转运水平显著上升(25.4±5.3 vs 175.2±31.2 t=8.239,P<0.05),H9N2的复制水平显著上升(5.2±0.9 vs 10.6±1.6 t=4.780,P<0.05)。过表达miR-345-3p后,A549细胞葡萄糖转运水平显著下降(26.4±6.1 vs 4.7±0.2,t=6.159,P<0.05),H9N2的复制水平显著下降(5.2±0.9 vs 1.1±0.1,t=7.583,P<0.05)。miRDB在线分析显示,miR-345-3p潜在靶向74个基因。过表达miR-345-3p后,其中14个基因的表达发生6倍以上的变化。当敲低EH结构域蛋白2(EH Domain Containing 2,EHD2)时,H9N2的复制水平显著下降(4.6±0.9 vs 0.5±0.1,t=8.026,P<0.05)。过表达miR-345-3p时,EHD2的表达水平下降;敲低miR-345-3p时,EHD2的表达水平上升。此外,miR-345-3p靶向EHD2的3′端非编码区。过表达miR-345-3p后,H9N2的复制水平显著上升(5.6±0.6 vs 16.3±3.2,t=5.653,P<0.05),葡萄糖转运水平上升(35.1±7.0 vs 154.2±22.2,t=8.928,P<0.05);敲低miR-345-3p后,H9N2的复制水平显著下降(6.0±0.3 vs 0.9±0.0,t=25.78,P<0.05),葡萄糖转运水平下降(42.0±5.1 vs 11.1±3.1,t=9.208,P<0.05)。H9N2感染并敲低miR-345-3p后,EHD2和GLUT4的相互作用减弱。敲低GLUT4后,H9N2的复制水平显著下降(4.8±0.2 vs 0.9±0.1,t=26.90,P<0.05)。H9N2感染并过表达miR-345-3p后,EHD2和GLUT4的相互作用增强。敲低GLUT4的同时过表达EHD2后,H9N2的复制水平无显著变化(1.1±0.1 vs 1.1±0.0,t=0.6573,P>0.05)。结论 H9N2通过降低miR-345-3p的表达使EHD2高表达,并增强EHD2与GLUT4的相互作用以促进葡萄糖的转运,最终促进自身基因组的复制。 展开更多

关键词 流感病毒 H9N2 mir-345-3p EHD2 葡萄糖转运

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连翘-金银花药对调控血清外泌体miRNA对急性肺损伤的改善作用及机制研究

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作者 陈朝华 谢淑敏 +5 位作者 常万顺 韩雨晴 陈艳雯 朱艳慧 曹明卓 黄海英 《中国药房》 2026年第3期305-310,共6页

目的基于血清外泌体微RNA(miRNA),研究连翘-金银花药对对急性肺损伤(ALI)的改善作用及机制。方法将大鼠分为空白组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、连翘-金银花药对组(2.55 g/kg),每组10只。除空白组外,其余各组大鼠均通过气管滴注5 mg/m... 目的基于血清外泌体微RNA(miRNA),研究连翘-金银花药对对急性肺损伤(ALI)的改善作用及机制。方法将大鼠分为空白组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、连翘-金银花药对组(2.55 g/kg),每组10只。除空白组外,其余各组大鼠均通过气管滴注5 mg/mL脂多糖复制ALI模型。造模后,各组大鼠灌胃相应药液/生理盐水,每天1次,连续3 d。末次给药后,观察大鼠肺组织病理学形态;测定肺组织湿干重比和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞数量;检测BALF中炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-10]水平;提取大鼠血清外泌体,利用高通量测序技术筛选外泌体中差异表达miRNA,并进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。基于筛选的差异表达miRNA和富集的KEGG通路,通过体外细胞实验进行机制验证。结果动物实验结果显示,经连翘-金银花药对干预后,ALI大鼠湿干重比以及BALF中白细胞数量和TNF-α、IL-1β水平均显著降低/减少(P<0.01),IL-10水平显著升高(P<0.01)。高通量测序实验结果显示,连翘-金银花药对可显著上调外泌体中miR-345-3p、miR-194-5p、miR-653-5p等的表达,其中差异表达miRNA的靶基因涉及的KEGG通路包括缺氧诱导因子1(HIF-1)信号通路等。细胞验证实验结果显示,过表达的miR-345-3p可显著升高细胞上清液中IL-10水平(P<0.01),显著降低细胞上清液中TNF-α、IL-1β水平以及细胞中蛋白激酶B1、磷脂酰肌醇3-激酶、HIF-1α的mRNA及其蛋白表达水平(P<0.01)。结论连翘-金银花药对可通过上调血清外泌体中miR-345-3p表达,抑制HIF-1信号通路活性,从而减轻炎症反应,进而发挥改善ALI的作用。 展开更多

关键词 连翘-金银花药对 急性肺损伤 外泌体 mir-345-3p HIF-1信号通路 高通量测序技术

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PSP下调miR-345-5p对雨蛙素诱导的AP腺泡细胞氧化应激和炎症因子表达

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作者 倪昊 王发武 +1 位作者 李翔天 马战胜 《中华细胞与干细胞杂志（电子版）》 2022年第1期8-13,共6页

目的探讨黄精多糖(PSP)对雨蛙素诱导的急性胰腺炎(AP)腺泡细胞氧化应激和炎症因子表达的影响及分子机制。方法取对数期大鼠胰腺腺泡细胞AR42J,采用100 nmol/L雨蛙素处理细胞6 h,建立AP腺泡细胞损伤模型,并采用不同浓度(1、2、4 mg/mL)PS... 目的探讨黄精多糖(PSP)对雨蛙素诱导的急性胰腺炎(AP)腺泡细胞氧化应激和炎症因子表达的影响及分子机制。方法取对数期大鼠胰腺腺泡细胞AR42J,采用100 nmol/L雨蛙素处理细胞6 h,建立AP腺泡细胞损伤模型,并采用不同浓度(1、2、4 mg/mL)PSP处理AP细胞(AP+PSP-L、AP+PSP-M、AP+PSP-H)。试剂盒检测细胞中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性以及培养液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-1β水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-345-5p表达水平。将miR-345-5p抑制物转染AR42J细胞,检测下调miR-345-5p表达对AP细胞氧化应激和炎症因子表达的影响。将miR-345-5p模拟物转染AR42J细胞,检测上调miR-345-5p表达和PSP处理对AP细胞氧化应激和炎症因子表达的影响。两组比较采用t检验,多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与对照比较,AP细胞MDA含量、IL-6、TNF-α、IL-1β水平和miR-345-5p表达水平均升高,SOD和GPx活性降低(P<0.05)。与AP细胞比较,不同浓度(1、2、4 mg/mL)PSP作用的AP细胞中MDA含量[(1.08±0.07)比(0.88±0.06),(0.73±0.06),(0.60±0.05)nmol/mg]降低,SOD[(43.01±4.37)比(59.60±5.62),(72.37±6.32),(94.21±8.70)U/mg]和GPx活性[(29.03±2.51)比(44.11±4.71),(58.07±4.20),(72.67±6.56)U/mg]均升高,培养液中IL-6[(310.72±22.27)比(257.01±20.85),(192.28±17.70),(146.93±11.90)pg/mL]、TNF-α[(223.82±21.87)比(175.57±15.85),(137.00±11.31),(89.26±7.05)pg/mL]、IL-1β表达水平[(41.66±3.85)比(33.82±3.20),(26.15±2.56),(20.14±1.71)pg/mL]和miR-345-5p表达水平(2.78±0.24比2.38±0.21,1.91±0.12,1.25±0.13)均降低,且呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P均<0.05)。下调miR-345-5p表达后,AP细胞中MDA含量[(1.13±0.08)比(0.72±0.06)nmol/mg]降低,SOD活性[(41.31±3.98)比(81.73±7.62)U/mg]和GPx[(28.82±2.97)比(61.41±5.81)U/mg]升高,培养液中IL-6[(314.65±25.02)比159.76±11.93)pg/mL]、TNF-α[(235.18±23.13)比(100.41±8.09)pg/mL]和IL-1β水平[(48.67±4.50)比(27.73±2.54)pg/mL]降低(P均<0.05)。上调miR-345-5p表达可逆转PSP对AP细胞的影响。其中MDA含量[(0.58±0.03)比(0.95±0.08)nmol/mg]升高、SOD活性[(96.52±9.54)比(54.24±4.15)U/mg]、GPx活性[(79.62±6.23)比(39.81±3.84)U/mg]降低、IL-6[(145.38±12.49)比(275.38±21.55)pg/mL]、TNF-α[(84.83±7.81)比(183.73±16.39)pg/mL]和IL-1β[(19.38±1.85)比(36.97±3.62)pg/mL]的表达水平升高(P均<0.05)。结论PSP以剂量依赖方式减轻雨蛙素诱导AP细胞炎症反应和氧化应激损伤,其机制与下调miR-345-5p表达有关。 展开更多

关键词 黄精多糖 雨蛙素 急性胰腺炎 mir-345-5p 氧化应激 炎症反应

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