巨噬细胞源Exosomes分泌miR-99b在心肌梗死诱发心肌重构中的作用机制

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作者 郭萍 李乃艳 +4 位作者 王勇 史进 张亚男 贾瑞婷 冯辉 《山东医学高等专科学校学报》 2025年第1期52-54,共3页

心肌梗死(以下简称心梗)后心力衰竭的进展与心肌纤维化有紧密的关系。心梗后急性炎症期,MΦ1型巨噬细胞大量浸润,产生较多的氧化代谢产物及促炎因子[1]。Exosomes是一种能被大多数细胞分泌的微小膜性囊泡,在心脏中作为细胞间信号传递的... 心肌梗死(以下简称心梗)后心力衰竭的进展与心肌纤维化有紧密的关系。心梗后急性炎症期,MΦ1型巨噬细胞大量浸润,产生较多的氧化代谢产物及促炎因子[1]。Exosomes是一种能被大多数细胞分泌的微小膜性囊泡,在心脏中作为细胞间信号传递的中介体而发挥作用[2];巨噬细胞培养基中可分离大量Exosomes,并有稳定的特异的miRNA的表达[3];笔者前期研究证实,巨噬细胞源Exosomes可以在细胞之间传递特异性miR-99b,成纤维细胞生长因子21(Fgf-21)是心肌成纤维细胞的负向调控因子,引起心梗后心肌纤维化及心肌重构。 展开更多

关键词 巨噬细胞源 心肌梗死 EXOSOMES mir-99b

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艾司氯胺酮调控miR-99b-5p/TRIB1对小鼠术后认知功能障碍的影响 被引量：3

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作者 王晴 赵志伟 +1 位作者 宋晓森 李丽 《解剖科学进展》 2025年第1期118-121,共4页

目的 探究艾司氯胺酮与miR-99b-5p/TRIB1信号通路对小鼠术后认知功能障碍的影响及机制。方法 将C57BL/6J小鼠分为对照组(CTRL)、NC agomir组、miR-99b-5p agomir组以及艾司氯胺酮组。苏木素伊红染色分析小鼠海马组织神经元的变化;TUNEL... 目的 探究艾司氯胺酮与miR-99b-5p/TRIB1信号通路对小鼠术后认知功能障碍的影响及机制。方法 将C57BL/6J小鼠分为对照组(CTRL)、NC agomir组、miR-99b-5p agomir组以及艾司氯胺酮组。苏木素伊红染色分析小鼠海马组织神经元的变化;TUNEL实验检测小鼠海马组织神经细胞的凋亡率;水迷宫实验评估小鼠穿越平台次数及逃避潜伏期时间的变化;酶联免疫吸附实验分析小鼠海马组织的IL-1β、IL-6、TNF-α的水平;蛋白免疫印迹实验分析小鼠海马组织TRIB1的表达水平;实时荧光定量PCR检测小鼠海马组织miR-99b-5p的表达水平。结果 miR-99b-5p agomir组与艾司氯胺酮组小鼠的海马组织结构、神经细胞损伤得到改善、海马神经元凋亡率显著降低、穿越平台次数增加、逃避潜伏期时间减少、海马组织炎症因子分泌水平降低。miR-99b-5p agomir组与艾司氯胺酮组小鼠海马组织TRIB1表达降低,miR-99b-5p表达增加。结论 艾司氯胺酮能够通过调控miR-99b-5p/TRIB1信号轴抑制炎症反应,改善小鼠的术后认知功能障碍。 展开更多

关键词 mir-99b-5p TRIb1 炎症反应 小鼠 认知障碍 艾司氯胺酮

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Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号轴对术后认知障碍大鼠神经细胞活性的影响

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作者 王晴 赵志伟 +1 位作者 宋晓森 李丽 《生物技术》 2025年第3期384-389,402,共7页

[目的]探究Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号通路对术后认知障碍大鼠神经细胞活性的影响。[方法]将术后认知障碍大鼠神经细胞分为3组:对照组、si NC组和si TRIB1组。通过CCK-8实验检测神经细胞增殖能力;通过细胞集落形成实验检测神... [目的]探究Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号通路对术后认知障碍大鼠神经细胞活性的影响。[方法]将术后认知障碍大鼠神经细胞分为3组:对照组、si NC组和si TRIB1组。通过CCK-8实验检测神经细胞增殖能力;通过细胞集落形成实验检测神经细胞聚集活性;通过流式细胞数检测神经细胞凋亡率;通过生物信息学分析Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号轴的结合位点;通过荧光素报告基因实验检测Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号轴的靶向作用关系。通过蛋白免疫印迹实验分析TRIB1的表达。通过实时荧光PCR实验检测miR-99b-5p的表达。[结果]与对照组、si NC组相比,si TRIB1组的神经细胞增殖和聚集活性增加(1.25±0.08 vs 1.36±0.11 vs 2.27±0.03;62.69±12.28 vs 57.36±13.59 vs 173.51±22.68;P<0.05),凋亡率降低(13.19%±0.29%vs 14.66%±0.52%vs 3.69%±0.08%;P<0.05)。Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号轴分子间有相互结合位点,且具有靶向调控关系。[结论]激活Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号轴能够提高术后认知障碍大鼠神经细胞活性,Lnc-AC226118.1/miR-99b-5p/TRIB1信号轴有望成为术后认知障碍治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 Lnc-AC226118.1 mir-99b-5p TRIb1 术后认知障碍 神经细胞 大鼠 增殖 凋亡

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miRNA-mRNA联合分析研究抑制miR-99b-3p对山羊骨骼肌卫星细胞的影响机制

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作者 林月霞 吕玉华 +3 位作者 朱丽慧 戴建军 张德福 廖荣荣 《上海农业学报》 2024年第5期55-63,共9页

为深入探讨抑制miR-99b-3p对山羊骨骼肌细胞发育的影响机制,建立了地塞米松诱导的山羊骨骼肌卫星细胞(Skeletal muscle satellite cells,SMSCs)应激模型并转染miR-99b-3p,并通过转录组测序研究抑制miR-99b-3p对SMSCs的分子调控机制。结... 为深入探讨抑制miR-99b-3p对山羊骨骼肌细胞发育的影响机制,建立了地塞米松诱导的山羊骨骼肌卫星细胞(Skeletal muscle satellite cells,SMSCs)应激模型并转染miR-99b-3p,并通过转录组测序研究抑制miR-99b-3p对SMSCs的分子调控机制。结果表明:转染miR-99b-3p可促进SMSCs细胞增殖以及肌肉分化基因MyoG和MyoD的表达,抑制miR-99b-3p则会抑制细胞增殖和分化基因表达,并导致细胞中761个基因差异表达。KEGG分析显示,差异基因大多富集于与疾病相关的通路;GO富集分析表明,差异基因主要参与细胞增殖和DNA修复相关生物学过程。此外,鉴定到17个差异表达的miRNAs,包含9个上调和8个下调miRNAs。对差异miRNA靶基因进行预测分析,并与差异基因比对,筛选到18个重叠的差异基因,这些差异基因主要富集于与致病相关的通路。本研究可为阐明断奶应激对山羊生长发育的分子调控机制提供理论依据。 展开更多

关键词 mir-99b-3p 骨骼肌 联合分析 山羊 转录组

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环状RNA _005647通过结合miR-99b-5p抑制心肌细胞中肥厚相关基因的表达 被引量：6

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作者 严钰敏 袁淑菁 +4 位作者 张铭 朱杰宁 符永恒 方咸宏 单志新 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2021年第1期10-16,共7页

目的研究环状RNA circRNA_005647抑制心肌肥厚相关基因表达的作用机制。方法建立血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)灌注诱导的心肌肥厚小鼠模型。原代分离获得C57BL/6乳小鼠心肌细胞(NMVC),AngⅡ处理NMVC建立心肌细胞肥大模型。利用NMVC,分别感染circ... 目的研究环状RNA circRNA_005647抑制心肌肥厚相关基因表达的作用机制。方法建立血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)灌注诱导的心肌肥厚小鼠模型。原代分离获得C57BL/6乳小鼠心肌细胞(NMVC),AngⅡ处理NMVC建立心肌细胞肥大模型。利用NMVC,分别感染circRNA_005647重组腺病毒(rAd-circRNA_005647)和转染miR-99b-5p模拟物来研究对NMVC肥大的影响。通过双荧光素酶报告基因实验和RNA Pull-down实验验证circRNA_005647与miR-99b-5p的结合作用。实时荧光定量PCR和Western blot检测NMVC中心肌肥厚相关基因的mRNA和蛋白表达水平。结果在AngⅡ诱导的小鼠心肌肥厚模型和心肌细胞肥大模型中,circRNA_005647及其宿主基因肌球蛋白IXA(Myo9a)表达升高。过表达circRNA_005647可抑制AngⅡ诱导的NMVC中肥厚相关基因心房钠尿肽(Anp)和肌球蛋白重链7(Myh7)基因表达升高。circRNA_005647与miR-99b-5p间存在结合作用。过表达circRNA_005647可抑制miR-99b-5p促心肌细胞肥大的作用。结论circRNA_005647通过结合miR-99b-5p发挥抑制心肌细胞肥大的作用。 展开更多

关键词 心肌肥厚 环状RNA circRNA_005647 微小RNA mir-99b-5p

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miR-99b通过下调mTOR的表达抑制胃腺癌细胞系SGC-7901的增殖及迁移 被引量：1

6

作者 王战豪 潘逼然 +2 位作者 张彤彤 郭元彪 张莉萍 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期230-234,共5页

目的:探讨hsa-miR-99b在胃腺癌细胞系的表达及其影响胃腺癌细胞系增殖和迁移的潜在作用机制。方法:Real-time PCR检测miR-99b在人胃上皮细胞系GES-1和人胃腺癌细胞系SGC-7901、BGC-823、MGC-803中的表达。用人工合成的miR-99b模拟物转染... 目的:探讨hsa-miR-99b在胃腺癌细胞系的表达及其影响胃腺癌细胞系增殖和迁移的潜在作用机制。方法:Real-time PCR检测miR-99b在人胃上皮细胞系GES-1和人胃腺癌细胞系SGC-7901、BGC-823、MGC-803中的表达。用人工合成的miR-99b模拟物转染SGC-7901细胞构建过表达miR-996细胞系,转染对照模拟物作为对照组,CCK-8法检测过表达miR-99b的SGC-7901细胞的增殖情况,Transwell法检测SGC-7901细胞系的迁移情况,Western blotting检测SGC-7901细胞系中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)的表达情况。结果:miR-99b在胃腺癌细胞系中的表达水平显著低于胃上皮细胞系,其中以SCG-7901细胞最甚。转染miR-99b模拟物48 h后,实验组SCG-7901细胞增殖能力低于对照组(0.20±0.00 vs 0.27±0.02,P<0.05);与转染对照模拟物的细胞相比,转染24 h后,实验组SCG-7901穿膜细胞数低于对照组[(226.67±25.17)vs(523.33±25.17)个,P<0.05]。miR-99b可下调人胃腺癌细胞系SGC-7901中m TOR蛋白的表达。结论:miR-99b在胃腺癌细胞系中的表达明显下调,miR-99b抑制人胃腺癌细胞系SGC-7901增殖和迁移的作用可能与下调m TOR表达有关。 展开更多

关键词 mir-99b 胃腺癌 细胞增殖 细胞迁移 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

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miR-99b-5p通过靶向TRIB1基因调控乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的研究 被引量：2

7

作者 谢安心 王思源 +3 位作者 张洁 张惠娟 唐海欧 谭敦勇 《蚌埠医学院学报》 CAS 2022年第10期1331-1335,共5页

目的:探讨miR-99b-5p靶向Tribbles同源蛋白1(Tribbles pseudokinase 1,TRIB1)基因调控人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡。方法:采用RT-PCR检测人乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达水平,采用Western blotting检测人乳... 目的:探讨miR-99b-5p靶向Tribbles同源蛋白1(Tribbles pseudokinase 1,TRIB1)基因调控人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡。方法:采用RT-PCR检测人乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达水平,采用Western blotting检测人乳腺上皮细胞HBL-100和乳腺癌MCF-7细胞中TRIB1蛋白表达量。在MCF-7细胞中转染miR-99b-5p mimics或mimics对照,分别记为miR-99b-5p组和miR-NC组,RT-PCR检测细胞中miR-99b-5p表达变化,Western blotting检测TRIB1蛋白表达量,MTT法检测细胞增殖能力,AnnexinV-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡水平,双荧光素酶报告基因实验检测miR-99b-5p和TRIB1的靶向关系。结果:与人乳腺上皮细胞HBL-100比较,乳腺癌MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达量明显降低(P<0.01),而TRIB1蛋白的表达明显升高(P<0.01)。与miR-NC组比较,miR-99b-5p组MCF-7细胞中miR-99b-5p的表达量升高(P<0.05),TRIB1蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞增殖能力减弱(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测实验结果显示,miR-99b-5p能够明显降低TRIB1-Wt MCF-7细胞相对荧光素酶活性(P<0.01),而对TRIB1-Mut MCF-7细胞相对荧光素酶活性无明显影响(P>0.05)。结论:miR-99b-5p在乳腺癌MCF-7细胞中呈低表达,TRIB1蛋白呈高表达,过表达miR-99b-5p能够靶向抑制TRIB1阻碍MCF-7细胞增殖并促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 mir-99b-5p Tribbles同源蛋白1 增殖 凋亡

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miR-99b在牛肌卫星细胞分化中的表达及靶基因预测

8

作者 史丽维 张伟伟 +2 位作者 邵淑丽 张珍珠 李铁 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1993-1999,共7页

miRNA作为进化保守的非编码RNA,对于细胞的发生、发展和增殖过程发挥重要的功能。miR-99b参与多种细胞的分化及增殖,但其在牛(Bas taurus)肌卫星细胞增殖分化中的表达以及可能靶向的基因尚不明确。本研究首先对牛基因组中miR-99b的基本... miRNA作为进化保守的非编码RNA,对于细胞的发生、发展和增殖过程发挥重要的功能。miR-99b参与多种细胞的分化及增殖,但其在牛(Bas taurus)肌卫星细胞增殖分化中的表达以及可能靶向的基因尚不明确。本研究首先对牛基因组中miR-99b的基本信息进行详细介绍,采用茎环荧光定量PCR方法检测牛肌卫星细胞增殖及分化状态下miR-99b的表达。实验结果显示,miR-99b的表达在细胞处于增殖时显著高于其分化不同阶段。miRNA通过结合信使RNA转录本上的互补序列,转录完成后可以同时调节多个靶基因表达。为了深入研究miR-99b调节作用及机制,使用TargetScan软件预测了可能与miR-99b结合的靶基因,结果显示牛中大约有58个基因mRNA的3’UTR可能与miR-99b结合,并且这些靶基因大多数和细胞增殖、细胞分化及细胞凋亡相关。研究结果可为检测miR-99b在牛骨骼肌卫星细胞中的作用提供理论基础。 展开更多

关键词 mir-99b 牛 分化 靶基因预测

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miR-99b-5p靶向FGFR3对紫杉醇诱导慢性神经病理性疼痛形成的影响 被引量：4

9

作者 韩聪 徐力 +2 位作者 曾文玉 辜文艳 刘庆 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期737-743,共7页

目的:探讨miR-99b-5p对紫杉醇诱导的大鼠慢性神经病理性疼痛的影响。方法:成年SD雄性大鼠,按照简单随机化的方法分为空白组(blank)、紫杉醇模型组(modle)、agomiR-99b-5p治疗组和agomiR-NC对照组,每组8只。采用隔日腹腔注射紫杉醇(2 mg/... 目的:探讨miR-99b-5p对紫杉醇诱导的大鼠慢性神经病理性疼痛的影响。方法:成年SD雄性大鼠,按照简单随机化的方法分为空白组(blank)、紫杉醇模型组(modle)、agomiR-99b-5p治疗组和agomiR-NC对照组,每组8只。采用隔日腹腔注射紫杉醇(2 mg/kg,共4次)的方法制备紫杉醇诱导的慢性神经病理性疼痛大鼠模型。检测大鼠机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL);RT-qPCR检测miR-99b-5p的表达,判断agomiR-99b-5p的激活作用和背根神经节中炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β含量的变化;Western Blot检测背根神经节成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)的变化;双荧光素酶报告基因实验检测miR-99b-5p对FGFR3的靶向作用。结果:agomiR-99b-5p能显著增加大鼠背根神经节miR-99b-5p的含量,降低紫杉醇诱导的慢性神经病理性疼痛大鼠的MWT和TWL,同时也能显著下调背根神经节的炎症因子水平。荧光素酶结果表明相对于NC模拟物(mimic)组,miR-99b-5p mimic能够抑制FGFR3的表达。结论:miR-99b-5p能够影响FGFR3的表达,进而抑制背根神经节炎症因子的含量,达到降低紫杉醇诱导大鼠慢性神经病理性疼痛的目的。 展开更多

关键词 紫杉醇 慢性神经痛 mir-99b-5p 成纤维细胞生长因子受体3

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miR-99b-5p对紫杉醇致大鼠神经病理性疼痛的缓解作用及对神经细胞焦亡和凋亡的影响 被引量：2

10

作者 曾文玉 辜文艳 +2 位作者 徐力 张英 韩聪 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期438-442,共5页

目的:研究miR-99b-5p(非编码RNA)通过抑制NLRP3炎性小体活化缓解紫杉醇化疗后病理性神经疼痛的干预作用,以及对神经细胞焦亡和凋亡的影响。方法:SD大鼠随机分为空白组(Blank)、模型组(Model)、agomiR-99b-5p治疗组和agomiR-NC对照组,每... 目的:研究miR-99b-5p(非编码RNA)通过抑制NLRP3炎性小体活化缓解紫杉醇化疗后病理性神经疼痛的干预作用,以及对神经细胞焦亡和凋亡的影响。方法:SD大鼠随机分为空白组(Blank)、模型组(Model)、agomiR-99b-5p治疗组和agomiR-NC对照组,每组6只。空白组接受生理盐水治疗作为对照,模型组通过紫杉醇诱导建立疼痛模型,agomiR-99b-5p组和agomiR-NC组为在模型组的基础上注射agomiR-99b-5p和agomiR-NC进行干预。RT-qPCR检测空白组、模型组、agomiR-99b-5p治疗组和agomiR-NC组大鼠背根神经节中miR-99b-5p的表达差异;vonFrey纤维丝检测空白组、模型组与治疗组机械缩足阈值(MWT);TUNEL法测定背根神经节细胞凋亡情况;试剂盒检测大鼠背根神经节中ROS、MDA和SOD;免疫荧光染色检测炎症小体NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组miR-99b-5p含量较低;与模型组比较,agomiR-99b-5p治疗组可以显著增加大鼠背根神经节miR-99b-5p的水平(P<0.05),增加大鼠机械缩足阈值(MWT)(P<0.05),抑制背角细胞的凋亡,大鼠背根神经节ROS和MDA水平降低(P<0.05),而SOD水平增加(P<0.05)。免疫荧光显示,NLRP3、Caspase-1和IL-1β的表达水平可被miR-99b-5p抑制。结论:在体内miR-99b-5p可以通过抑制NLRP3活化和改善机体氧化应激以缓解大鼠经紫杉醇化疗后的神经病理性疼痛及神经细胞焦亡和凋亡。 展开更多

关键词 背根神经节 mir-99b-5p 氧化应激 NLRP3

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肾透明细胞癌患者血清细胞外囊泡中miR-99b-3p水平检测的临床价值 被引量：4

11

作者 田亚萍 张明威 +3 位作者 葛京平 张春妮 汪俊军 王成 《临床检验杂志》 CAS 2021年第3期178-181,共4页

目的探讨肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)患者血清细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)中miR-99b-3p的水平变化,评估其作为ccRCC非侵入性辅助诊断分子标志物的临床价值。方法收集2016年12月至2018年10月东部... 目的探讨肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)患者血清细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)中miR-99b-3p的水平变化,评估其作为ccRCC非侵入性辅助诊断分子标志物的临床价值。方法收集2016年12月至2018年10月东部战区总医院泌尿外科收治且未经治疗的65例ccRCC患者,另收集75例年龄、性别匹配的健康人对照血清标本,分离血清EVs并提取RNA。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ccRCC患者及健康人对照血清EVs miR-99b-3p的水平,并采用Mann-Whitney U检验、ROC曲线及Logistic回归分析EVs miR-99b-3p水平对ccRCC的诊断效能,Pearson相关分析EVs miR-99b-3p水平与ccRCC患者临床病理参数的相关性。结果Mann-Whitney U检验结果显示,ccRCC患者血清EVs miR-99b-3p的表达水平较健康人对照组明显上调(P<0.01);ROC曲线分析显示,EVs miR-99b-3p筛查ccRCC患者与健康人对照的曲线下面积(AUC^(ROC))为0.757(95%CI:0.674~0.840),敏感性为69.2%,特异性为77.3%;区分Ⅰ/Ⅱ级ccRCC患者的AUC^(ROC)为0.754(95%CI:0.663~0.846),敏感性和特异性分别为69.2%、77.3%;Logistic回归分析结果显示,血清EVs miR-99b-3p是ccRCC独立危险因素(OR=7.745,95%CI:3.596~16.682,P<0.01);Pearson相关分析显示,血清EVs miR-99b-3p与肿瘤分级、大小、有无远处转移的相关性均无统计学意义(P均>0.05)。结论ccRCC患者血清EVs miR-99b-3p水平较健康人对照显著升高,是ccRCC潜在的液体活检辅助诊断分子标志物。 展开更多

关键词 肾透明细胞癌 细胞外囊泡 mir-99b-3p 分子标志物

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外周血血清sTREM-1、Treg/Th17、miR-99b与耐多药结核病相关性及联合预测疗效的ROC分析 被引量：6

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作者 谢明 邓葵珍 +1 位作者 谭晴心 王连芳 《现代医学》 2021年第10期1176-1182,共7页

目的:探讨外周血血清可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)、调节性T细胞/辅助性T细胞17(Treg/Th17)、微小RNA-99b(miR-99b)与耐多药结核病(MDR-TB)相关性及联合预测疗效价值。方法:选取2017年4月至2020年1月常德市第一中医医院收治的79例... 目的:探讨外周血血清可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)、调节性T细胞/辅助性T细胞17(Treg/Th17)、微小RNA-99b(miR-99b)与耐多药结核病(MDR-TB)相关性及联合预测疗效价值。方法:选取2017年4月至2020年1月常德市第一中医医院收治的79例MDR-TB患者(MDR组)、85例非MDR-TB患者(非MDR组)及体检中心60例健康体检人群(对照组)。比较3组外周血血清sTREM-1、Treg/Th17、miR-99b水平,采用多因素Logistic回归方程分析各指标与MDR-TB的关系,比较MDR组不同疗效者基线资料及外周血血清sTREM-1、Treg/Th17、miR-99b水平,并比较不同外周血血清sTREM-1、Treg/Th17、miR-99b水平者转阴率,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)及曲线下面积(AUC)分析各指标预测转阴的价值。结果:MDR组外周血血清sTREM-1、miR-99b水平高于非MDR组和对照组,Treg/Th17水平低于非MDR组和对照组(P<0.05);非MDR组外周血血清sTREM-1、miR-99b水平高于对照组,Treg/Th17水平低于对照组(P<0.05);经多因素Logistic回归方程分析,外周血血清sTREM-1、miR-99b、Treg/Th17均为MDR-TB发生的影响因素(P<0.05);肺结核转阴者外周血血清sTREM-1、miR-99b水平低于未转阴者,Treg/Th17水平高于未转阴者(P<0.05);外周血血清sTREM-1、miR-99b高水平者转阴率低于低水平者,Treg/Th17高水平者转阴率高于低水平者(P<0.05);经ROC曲线分析,外周血血清sTREM-1、miR-99b、Treg/Th17联合应用预测转阴的AUC值高于单一检测(P<0.05)。结论:MDR-TB患者外周血血清sTREM-1、Treg/Th17、miR-99b水平呈明显异常变化,与MDR-TB发生、疗效具有密切关联性,对临床MDR-TB治疗具有一定指导作用。 展开更多

关键词 可溶性髓系细胞触发受体-1 调节性T细胞/辅助性T细胞17 mir-99b 耐多药结核病 相关性 联合预测

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和厚朴酚通过上调miR-99a/b抑制HeLa细胞增殖和侵袭 被引量：6

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作者 徐雅杰 张志强 于鹤 《医学研究杂志》 2018年第11期101-106,共6页

目的探究和厚朴酚对宫颈癌He La细胞增殖和侵袭的影响,并初步探讨相关分子机制。方法将培养的对数期的人宫颈癌He La细胞分为对照组、Scramble组、mi R-99a/b mimic组、和厚朴酚高、中、低剂量组。MTT实验用于检测不同干预对He La细胞... 目的探究和厚朴酚对宫颈癌He La细胞增殖和侵袭的影响,并初步探讨相关分子机制。方法将培养的对数期的人宫颈癌He La细胞分为对照组、Scramble组、mi R-99a/b mimic组、和厚朴酚高、中、低剂量组。MTT实验用于检测不同干预对He La细胞增殖的影响,Transwell小室用于测定He La的侵袭能力,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)用于检测细胞中mi R-99a、mi R-99b的表达情况,蛋白免疫印迹(WB)检测细胞中cyclin D1、MMP7蛋白表达。结果和厚朴酚高、中、低剂量组细胞增殖率和侵袭细胞数均明显低于对照组和DMSO溶剂组(P <0. 05),并呈剂量依赖性。minic组和厚朴酚高、中、低剂量组mi R-99a和mi R-99b表达水平明显高于对照组和Scramble组(P <0. 05);随着和厚朴酚剂量的增加,He La细胞中mi R-99a和mi R-99b表达水平逐渐升高。和厚朴酚高、中、低剂量组mi R-99a和mi R-99b表达水平明显高于对照组和Scramble组(P <0. 05),且呈剂量依赖性。和厚朴酚高、中、低剂量组He La细胞增殖率和侵袭能力明显低于对照组和Scramble组,呈现剂量依赖性。Western blot法检测结果显示,minic组和和厚朴酚高、中、低剂量组cyclin D1和MMP7表达水平明显低于对照组和Scramble组(P <0. 05);随着和厚朴酚剂量的增加,He La细胞中cyclin D1和MMP7表达水平明显降低。结论和厚朴酚可能通过上调mi R-99a/b表达,进而抑制宫颈癌He La细胞增殖和侵袭,为宫颈癌的靶向治疗提供一定的理论依据。 展开更多

关键词 和厚朴酚 宫颈癌 mir-99a mir-99b

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microRNA-99b表达调控对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的作用 被引量：4

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作者 吴维光 孙小丽 +1 位作者 陈勍 林仲秋 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2008年第10期752-755,共4页

目的:探讨上调microRNA-99b(miR-99b)表达对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的作用及可能的机制。方法:利用转染试剂将Pre-miR-hsa-miR-99b miRNA Precursor转染宫颈癌HeLa细胞,荧光实时定量PCR方法检测miR-99b表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检... 目的:探讨上调microRNA-99b(miR-99b)表达对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的作用及可能的机制。方法:利用转染试剂将Pre-miR-hsa-miR-99b miRNA Precursor转染宫颈癌HeLa细胞,荧光实时定量PCR方法检测miR-99b表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测其靶基因CDC-25A蛋白的表达。结果:转染Pre-miR-hsa-miR-99b miRNA Precursor的HeLa细胞,miR-99b表达增高86.45倍,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加,同时细胞CDC-25A蛋白表达降低。结论:上调miR-99b表达可通过降低靶基因CDC-25A表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,miR-99b可能成为治疗宫颈癌的靶基因。 展开更多

关键词 HELA细胞 mir-99b 增殖 凋亡

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MicroRNA-99b-5p通过抑制成纤维细胞生长因子21表达促进心肌细胞肥大 被引量：4

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作者 陈丽文 郭晶 +5 位作者 陈泽润 朱杰宁 徐金东 郭惠明 单志新 王晟 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期192-202,共11页

【目的】研究微小RNA microRNA-99b-5p(miR-99b-5p)对心肌细胞肥大表型的调节作用及机制。【方法】实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人心肌组织(包括健康对照者、心力衰竭患者心肌组织)以及横向主动脉缩窄(TAC)手术小鼠心肌中miR-99b-5p的... 【目的】研究微小RNA microRNA-99b-5p(miR-99b-5p)对心肌细胞肥大表型的调节作用及机制。【方法】实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人心肌组织(包括健康对照者、心力衰竭患者心肌组织)以及横向主动脉缩窄(TAC)手术小鼠心肌中miR-99b-5p的表达水平。血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理原代乳小鼠心肌细胞(NMVCs)后,利用鬼笔环肽染色呈现心肌细胞大小,RT-qPCR检测miR-99b-5p表达水平。利用RT-qPCR及蛋白质免疫印迹法检测转染miR-99b-5p mimic对NMVCs中肥大相关基因及成纤维细胞生长因子21(Fgf21)表达的影响。双萤光素酶报告实验验证miR-99b-5p与Fgf21基因3′端非翻译区(3’UTR)的结合作用。利用腺病毒介导在NMVCs中过表达Fgf21及超氧化物歧化酶2(Sod2),并利用小干扰RNA(siRNA)敲低NMVCs中Fgf21和Sod2表达,研究Fgf21/Sod2轴是否介导miR-99b-5p对心肌细胞肥大表型的调节作用。【结果】MiR-99b-5p在心衰患者心肌组织、TAC术后的小鼠心肌组织及在AngⅡ处理的心肌细胞中均表达上调(P<0.01)。MiR-99b-5p可促进NMVCs中与肥大相关基因的表达(P<0.01)。双萤光素酶报告基因实验证实miR-99b-5p与Fgf21基因的3’UTR存在结合作用,并且miR 99b-5p可抑制Fgf21及其下游基因Sod2表达(P<0.05)。在NMVCs中过表达Fgf21或Sod2均可有效逆转miR 99b-5p的促心肌细胞肥大作用(P<0.05)。【结论】MiR-99b-5p在肥厚心肌中表达增加,并通过Fgf21/Sod2轴发挥促进心肌细胞肥大的作用。 展开更多

关键词 心肌细胞肥大 微小RNA-99-5p 成纤维细胞生长因子21

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