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葡萄籽提取物原花青素通过LncRNA NBR2/miR-650调节EMT抑制肝癌细胞Hep3B增殖、迁移和侵袭的分子机制 被引量:6
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作者 雷洁琼 田迎霞 +1 位作者 李正果 王兴东 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第17期4307-4312,共6页
目的探讨葡萄籽提取物原花青素是否通过长链非编码RNA(LncRNA)NBR2/微小RNA(miR)-650并调节上皮间充质转化(EMT)来影响肝癌细胞Hep3B的增殖、迁移和侵袭。方法将肝癌细胞Hep3B分为NC组(未处理),低、中、高剂量组(给予25、50、100μg/ml... 目的探讨葡萄籽提取物原花青素是否通过长链非编码RNA(LncRNA)NBR2/微小RNA(miR)-650并调节上皮间充质转化(EMT)来影响肝癌细胞Hep3B的增殖、迁移和侵袭。方法将肝癌细胞Hep3B分为NC组(未处理),低、中、高剂量组(给予25、50、100μg/ml葡萄籽提取物原花青素),si-NC组,si-LncRNA NBR2组,si-NC+高剂量组、si-LncRNA NBR2+高剂量组,anti-miR-NC+si-LncRNA NBR2+高剂量组,anti-miR-650+si-LncRNA NBR2+高剂量组。采用Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、EMT过程E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白表达,细胞计数试剂盒(CCK)-8、Transwell法和定量RT-PCR(qRT-PCR)分析细胞增殖、迁移、侵袭与LncRNA NBR2、miR-650的表达。双荧光素酶活性检测LncRNA NBR2和miR-650的靶向结合。结果低、中、高剂量组葡萄籽提取物原花青素作用的肝癌细胞Hep3B CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达量、增殖能力、迁移数量、侵袭数量、miR-650表达量均低于NC组,LncRNA NBR2表达量高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组葡萄籽提取物原花青素作用的肝癌细胞Hep3B细胞中E-Cadherin蛋白表达量高于NC组,N-Cadherin、Vimentin蛋白表达量低于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。si-LncRNA NBR2组的肝癌细胞Hep3B细胞中CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达量、增殖能力、迁移和侵袭数量均比si-NC组高,差异有统计学意义(P<0.05)。si-LncRNA NBR2+高剂量组肝癌细胞Hep3B细胞中CyclinD1、MMP2、MMP9、N-Cadherin、Vimentin蛋白表达量、增殖能力、迁移和侵袭数量均高于si-NC+高剂量组,E-Cadherin蛋白表达量低于si-NC+高剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。LncRNA NBR2靶向调控miR-650的表达。anti-miR-650+si-LncRNA NBR2+高剂量组肝癌细胞Hep3B CyclinD1、MMP2、MMP9、N-Cadherin、Vimentin蛋白、LncRNA NBR2表达量及增殖能力、迁移和侵袭数量均低于anti-miR-NC+si-LncRNA NBR2+高剂量组,E-Cadherin蛋白表达量高于anti-miR-NC+si-LncRNA NBR2+高剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论葡萄籽提取物原花青素通过上调LncRNANBR2靶向下调miR-650并调节EMT,来抑制肝癌细胞Hep3B的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 葡萄籽提取物原花青素 肝癌细胞Hep3B 恶性行为 长链非编码RNA(LncRNA)NBR2 mir-650 上皮间充质转化(EMT)
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CircSEPT9调节miR-650/HSPB1轴对胶质瘤细胞恶性生物学行为影响的探讨 被引量:3
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作者 任成波 赵丽霞 +5 位作者 杜晓猛 李锦秋 邹念东 王聪 宋晓 张志林 《中国临床新医学》 2023年第8期842-849,共8页
目的探讨环状RNA(CircRNA)SEPT9调节miR-650/热休克蛋白B1(HSPB1)轴对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)、Western blot法检测胶质瘤组织、癌旁组织、人类正常神经胶质细胞HEB及胶质瘤细胞系LN1... 目的探讨环状RNA(CircRNA)SEPT9调节miR-650/热休克蛋白B1(HSPB1)轴对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响。方法通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)、Western blot法检测胶质瘤组织、癌旁组织、人类正常神经胶质细胞HEB及胶质瘤细胞系LN18、SW1088、U251中CircSEPT9、miR-650、HSPB1蛋白表达水平。将U251细胞分为对照组(NC组)、si-NC组、si-CircSEPT9组、mimic NC组、miR-650 mimic组、si-CircSEPT9+inhibitor NC组、si-CircSEPT9+miR-650 inhibitor组、si-CircSEPT9+pcDNA组、si-CircSEPT9+pcDNA-HSPB1组。采用qRT-PCR法检测CircSEPT9、miR-650表达水平。采用Western blot法检测HSPB1、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Caspase-3、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达水平。通过双荧光素酶基因实验验证CircSEPT9与miR-650、miR-650与HSPB1的关系。结果在胶质瘤组织和细胞中,CircSEPT9和HSPB1蛋白呈高表达,miR-650呈低表达,且在U251细胞中CircSEPT9以及HSPB1蛋白表达水平最高,miR-650表达水平最低,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默CircSEPT9或过表达miR-650均可抑制U251细胞增殖、侵袭、迁移及Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平,促进细胞凋亡及Caspase-3蛋白表达。下调miR-650或过表达HSPB1均可减弱沉默CircSEPT9对U251细胞的作用影响。CircSEPT9与miR-650、miR-650与HSPB1存在靶向关系。结论沉默CircSEPT9可能通过海绵化上调miR-650来抑制HSPB1表达,进而抑制U251细胞增殖、迁移与侵袭,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA SEPT9 mir-650 热休克蛋白B1 胶质瘤 生物学行为
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miR-650在溃疡性结肠炎患者血浆中的表达水平及其与预后的关系 被引量:3
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作者 何英 张慧华 吴小明 《国际消化病杂志》 CAS 2021年第2期135-139,共5页
目的检测miR-650在溃疡性结肠炎(UC)患者中的表达水平,探究其与患者预后的关系。方法前瞻性选取2017年3月至2019年10月在浙江衢化医院就诊的117例UC患者作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time qPCR)法检测UC患者血浆miR... 目的检测miR-650在溃疡性结肠炎(UC)患者中的表达水平,探究其与患者预后的关系。方法前瞻性选取2017年3月至2019年10月在浙江衢化医院就诊的117例UC患者作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time qPCR)法检测UC患者血浆miR-650的表达水平,并分析其与患者预后的关系。结果117例UC患者中有44例(37.61%)预后不良,73例(62.39%)预后良好。预后良好组和预后不良组治疗后血浆miR-650表达水平均较治疗前降低,且预后良好组治疗后血浆miR-650表达水平低于预后不良组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。治疗后miR-650评估UC预后的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度分别为0.865、88.64%和82.19%。治疗后miR-650评估UC预后的效能高于治疗前miR-650,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,UC内镜下严重度指数(UCEIS)、初始治疗方案和血浆miR-650均是UC预后的独立危险因素(P<0.05)。限制性立方样条拟合Logistic回归分析结果显示,血浆miR-650与UC预后有关,且呈非线性关系。结论UC患者血浆miR-650水平与预后有关,经治疗后其表达水平越高,提示患者预后不良的风险越高。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 mir-650 预后
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Hsa-miR-650通过靶向RAC1抑制NF2阴性脑膜瘤的生长
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作者 张超 李朋 +2 位作者 王博 汪颖 刘丕楠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1687-1696,共10页
目的本文旨在确定NF2表达阴性脑膜瘤中潜在的miRNA-mRNA轴,研究它们的靶向关系,并确定它们的生物学功能。方法从基因表达数据库(GEO)下载包含与NF2阴性脑膜瘤相关数据的GSE17792数据集。使用R软件中的limma包确定差异表达的mi RNA(De Mi... 目的本文旨在确定NF2表达阴性脑膜瘤中潜在的miRNA-mRNA轴,研究它们的靶向关系,并确定它们的生物学功能。方法从基因表达数据库(GEO)下载包含与NF2阴性脑膜瘤相关数据的GSE17792数据集。使用R软件中的limma包确定差异表达的mi RNA(De MiRNAs)。应用miRWalk 2.0数据库获取De MiRNAs的靶基因。利用相互作用基因检索工具(STRING)数据库构建蛋白质相互作用(PPI)网络,并通过Cytoscape软件确定核心基因。对筛选出的miRNA进一步验证其表达和生物学作用。结果在NF2阴性脑膜瘤肿瘤样本与蛛网膜组织对照组比较中发现了86个差异mi RNA,其中包括52个上调的mi RNAs和34个下调的miRNAs。在这些差异miRNA中鉴定出与274个靶基因相关的14个mi RNAs,并基于这些数据构建miRNA-靶基因网络。通过cyto Hubba分析显示,在PPI网络中有两个mi RNAs(hsa-miR-650和hsa-miR-623)位于前20个关键核心基因之中。进一步的定量逆转录PCR(q RT-PCR)实验证实,相对于正常脑组织,hsa-miR-650在NF2阴性脑膜瘤中的表达显著增高。下调hsa-miR-650抑制了NF2阴性脑膜瘤细胞的增殖并诱导细胞凋亡。最后,确定RAC1是hsa-miR-650的靶基因。结论Hsa-miR-650作为肿瘤促进剂,可能作为治疗NF2阴性脑膜瘤患者的治疗靶点。 展开更多
关键词 2型神经纤维瘤病(NF2) 脑膜瘤 hsa-mir-650 RAC1 生物信息学
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MiR-650通过靶向ING4促进骨肉瘤细胞增殖的研究 被引量:3
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作者 陈贤明 张森 +1 位作者 王爱民 王子明 《重庆医学》 CAS 2018年第9期1173-1175,共3页
目的探讨骨肉瘤组织和细胞系中miR-650的表达及其在肿瘤形成中的作用机制。方法用实时荧光定量PCR的方法,检测并比较肿瘤组织及癌旁正常组织、骨肉瘤细胞系(MG63)及健康人成骨细胞(hFOB1.19)之间的miR-650表达情况;用MTT实验检测不同组... 目的探讨骨肉瘤组织和细胞系中miR-650的表达及其在肿瘤形成中的作用机制。方法用实时荧光定量PCR的方法,检测并比较肿瘤组织及癌旁正常组织、骨肉瘤细胞系(MG63)及健康人成骨细胞(hFOB1.19)之间的miR-650表达情况;用MTT实验检测不同组细胞的增殖情况;用Western blot的方法检测调节生长抑制因子4(ING4)蛋白的表达情况。结果miR-650在骨肉瘤组织及细胞系中的表达显著高于癌旁正常组织及健康人成骨细胞;抑制miR-650的表达后,MG63细胞的增殖能力显著减弱。此外,miR-650表达减低后,ING4的表达显著升高,其中阴性对照组、乱序组、miR-650抑制剂组的ING4mRNA分别为1.00±0.16、1.08±0.14、5.35±0.32;蛋白表达分别为:0.62±0.06、0.59±0.12、2.45±0.20;miR-650抑制组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);而抑制ING4升高后,MG63细胞的增殖能力有一定的恢复。结论 miR-650可以通过降低ING4的表达促进MG63细胞的增殖,提示miR-650可能成为骨肉瘤治疗的新靶点。 展开更多
关键词 骨肉瘤 MG63 mir-650 调节生长抑制因子4
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骨肉瘤组织中微小RNA-650的表达变化及其意义 被引量:1
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作者 杜壮文 欧阳帆 曾繁宽 《河北医学》 CAS 2022年第7期1107-1112,共6页
目的:探讨骨肉瘤(OS)组织中微小RNA(miR)-650的表达特点,分析miR-650与临床病理参数和预后的关系。方法:取80例经手术切除的骨肉瘤组织标本以及瘤旁正常组织标本(距离瘤组织>5cm),采用实时PCR法检测组织中miR-650表达,根据骨肉瘤组织... 目的:探讨骨肉瘤(OS)组织中微小RNA(miR)-650的表达特点,分析miR-650与临床病理参数和预后的关系。方法:取80例经手术切除的骨肉瘤组织标本以及瘤旁正常组织标本(距离瘤组织>5cm),采用实时PCR法检测组织中miR-650表达,根据骨肉瘤组织miR-650表达均数将患者分为miR-650高表达组(miR-650≥5.03,42例)、miR-650低表达组(miR-650<5.03,38例)。收集患者临床病理参数相关信息,比较不同临床病理参数患者miR-650表达差异。术后定期随访3年,采用Kaplan-Meier、COX风险比例回归分析miR-650与骨肉瘤患者预后的关系。结果:骨肉瘤组织miR-650相对表达量高于瘤旁组织(P<0.001),miR-650与OS患者Enneking分期、淋巴结转移、远处转移有关(P<0.001)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示miR-650高表达组OS患者3年生存率低于miR-650低表达组(P<0.01)。淋巴结转移[OR=1.545(95%:1.474~1.635)]、远处转移[OR=1.702(95%:1.664~1.815)]、miR-650≥5.03[OR=1.645(95%:1.564~1.748)]是OS患者死亡的危险因素(P<0.01)。结论:骨肉瘤组织织miR-650表达升高,miR-650表达与患者Enneking分期、淋巴结转移、远处转移及预后密切相关,可能作为OS预后评估的标记物及治疗靶点。 展开更多
关键词 骨肉瘤 mir-650 临床病理参数
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