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circ_0061140靶向miR-548b-3p调控胃癌细胞增殖、周期分布和凋亡的机制研究 被引量：2
1
作者 牛涛 庄唯 伍苏娟 《蚌埠医科大学学报》 2025年第3期298-303,308,共7页
目的:研究胃癌细胞中circ_0061140和miR-548b-3p表达水平,探讨circ_0061140靶向miR-548b-3p对胃癌细胞增殖、周期分布和凋亡的影响。方法:RT-qPCR检测人胃黏膜细胞GES1和胃癌细胞系(SNU-1、AGS、HS-746T)中circ_0061140和miR-548b-3p相... 目的:研究胃癌细胞中circ_0061140和miR-548b-3p表达水平,探讨circ_0061140靶向miR-548b-3p对胃癌细胞增殖、周期分布和凋亡的影响。方法:RT-qPCR检测人胃黏膜细胞GES1和胃癌细胞系(SNU-1、AGS、HS-746T)中circ_0061140和miR-548b-3p相对水平。将circ_0061140的小干扰RNA、miR-548b-3p模拟物、circ_0061140的小干扰RNA+miR-548b-3p抑制物分别转染到SNU-1细胞,通过CCK-8实验检测SNU-1细胞活力,通过流式细胞仪检测细胞凋亡和周期分布。采用双荧光素酶报告实验、RIP实验和RT-qPCR分析circ_0061140和miR-548b-3p靶向调控关系。结果:与GES1细胞比较,SNU-1、AGS、HS-746T细胞中circ_0061140相对水平升高(P<0.05~P<0.01),miR-548b-3p相对水平降低(P<0.05~P<0.01)。干扰circ_0061140表达后SNU-1细胞活力、S期比例降低(P<0.05),凋亡率、G0/G1期比例、miR-548b-3p相对水平升高(P<0.05)。过表达miR-548b-3p后SNU-1细胞活力、S期比例降低(P<0.01),凋亡率、G0/G1期比例升高(P<0.01)。过表达circ_0061140后SNU-1细胞miR-548b-3p相对水平降低(P<0.05)。circ_0061140与miR-548b-3p直接特异性结合。抑制miR-548b-3p表达明显减弱干扰circ_0061140对SNU-1细胞活力、周期分布以及凋亡的影响(P<0.01)。结论:胃癌细胞中circ_0061140表达上调,miR-548b-3p表达下调。干扰circ_0061140通过上调miR-548b-3p能够抑制胃癌细胞增殖,使细胞阻滞在G0/G1期,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃肿瘤 细胞增殖 细胞周期 凋亡 circ_0061140 mir-548b-3p
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miR-374a和miR-548b调控非小细胞肺癌对吉非替尼耐药的研究 被引量：3
2
作者 朱彩华 曹新广 +5 位作者 吕慧芳 陈贝贝 唐菲 樊鑫鑫 秦建军 陈小兵 《医药论坛杂志》 2016年第4期1-3,7,共4页
目的探讨miR-374a和miR-548调控非小细胞肺癌对吉非替尼耐药的机制。方法 1qRT-PCR检测转染载体miR-Zip-347a或p-miR-548b的HCC827-Gef和Calul细胞中miR-374a或miR-548b的相对表达水平;并检测转染pcDNA-Wnt5a和pcDNA-CCNB1及其对照载体... 目的探讨miR-374a和miR-548调控非小细胞肺癌对吉非替尼耐药的机制。方法 1qRT-PCR检测转染载体miR-Zip-347a或p-miR-548b的HCC827-Gef和Calul细胞中miR-374a或miR-548b的相对表达水平;并检测转染pcDNA-Wnt5a和pcDNA-CCNB1及其对照载体的HCC827-Gef细胞中Wnt5a和CCNB1的相对表达水平。2MTS法检测敲除miR-374a或过表达miR-548b的HCC827-Gef和Calul细胞对吉非替尼的敏感性,并分析过表达蛋白Wnt5a或CCNB1的HCC827-Gef细胞对吉非替尼的敏感性;3荧光素酶报告基因检测共转染相应载体后的HEK293细胞中荧光素酶活性。4蛋白印迹分析转染p-miR-374a、p-miR-548b和p-miR-control的细胞中Wnt5a或CCNB1的表达水平。结果 1非小细胞肺癌细胞Calul和HCC827-Gef中miR-374a表达明显受到抑制或miR-548b过表达时,其对吉非替尼的敏感性显著升高;2HCC827-Gef细胞miR-374a和miR-548b过表达分别显著降低Wnt5a和CCNB1蛋白的表达;HCC827-Gef细胞中Wnt5a过表达可部分逆转非小细胞肺癌细胞对吉非替尼的耐药;转染p-miR-548b的HCC827-Gef细胞中CCNB1的再表达也说明了细胞对吉非替尼的敏感性。结论 miR-374a和miR-548b分别通过靶向Wnt5a和CCNB1基因调控非小细胞肺癌细胞对吉非替尼的敏感性。 展开更多
关键词 mir-374a mir-548b 非小细胞肺癌 吉非替尼
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miR-548b-3p通过调控诱骗受体3的表达影响肝癌细胞恶性生物学性状的研究 被引量：1
3
作者 许英晨 梁超杰 +1 位作者 张立军 伍冀湘 《国际外科学杂志》 2023年第12期829-834,F0004,共7页
目的探讨miR-548b-3p是否可以通过下调诱骗受体3(DcR3)的表达进而调节肝癌细胞的恶性生物学性状。方法通过实时荧光定量PCR检测Hep3b、HepG2、Huh7.5.1、PLC、97H等5种常见肝癌细胞系中miR-548b-3p的水平,实验用肝癌细胞系购自上海市肿... 目的探讨miR-548b-3p是否可以通过下调诱骗受体3(DcR3)的表达进而调节肝癌细胞的恶性生物学性状。方法通过实时荧光定量PCR检测Hep3b、HepG2、Huh7.5.1、PLC、97H等5种常见肝癌细胞系中miR-548b-3p的水平,实验用肝癌细胞系购自上海市肿瘤研究所。裸鼠皮下成瘤性实验包括miR-548b-3p过表达和低表达两部分:miR-548b-3p过表达实验包括Huh7.5.1-miR-548b-3p细胞组和Huh7.5.1-NC细胞组;miR-548b-3p低表达实验组包括PLC-miR-548b-3p-sponge组和PLC-NC细胞组,每组分别5只裸鼠。实验用裸鼠为雄性Balb/c品系,体重20~25 g,4~6周龄。利用Starbase软件预测miR-548b-3p与DcR3是否存在结合位点;双荧光素酶报告实验验证DcR3是否为miR-548b-3p的靶基因。通过拯救实验验证miR-548b-3p对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响是否通过DcR3来实现。采用Graphpad Prism 9进行统计分析,符合正态分布的计量资料以均数±标准差(x^(-)±s)表示,组间比较采用t检验。结果实时荧光定量PCR以2-ΔΔCt相对表达量为参数进行比较,假设Hep3b相对表达量为1,HepG2相对表达量为0.902,Huh7.5.1相对表达量为0.712,PLC相对表达量为1.293,97H相对表达量为0.818,最后结果表明,miR-548b-3p表达最高的是PLC细胞,表达最低的是Huh7.5.1细胞;裸鼠皮下成瘤性实验表明,实验4周后,Huh7.5.1-miR-548b-3p组成瘤体积为(444.77±142.34)mm^(3),Huh7.5.1-NC组成瘤体积为(918.80±139.21)mm^(3);PLC-miR-548b-3p-sponge组成瘤体积为(407.49±58.50)mm^(3),PLC-NC组成瘤体积为(218.62±47.55)mm^(3);利用Starbase软件预测到miR-548b-3p与DcR3存在结合位点;双荧光素酶报告实验证明DcR3是miR-548b-3p的靶基因;拯救实验验证miR-548b-3p对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响是通过DcR3来实现的。结论miR-548b-3p可调节肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移等恶性生物学性状,并且是通过下调DcR3的表达水平来实现的。 展开更多
关键词 癌 肝细胞 细胞增殖 细胞迁移分析 mir-548b-3p 诱骗受体3
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