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LncRNA HAND2-AS1介导miR-449a/RNF125改善膝骨关节炎软骨退变
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作者 陈星宇 任奋强 +2 位作者 周斌 艾力亚尔·阿依都 王新安 《解剖科学进展》 2025年第5期651-654,659,共5页
目的探究lncRNA HAND2-AS1对膝骨关节炎软骨退变的影响及其机制。方法SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、膝骨关节炎组(KOA组)、膝骨关节炎+过表达对照组(KOA+ov-NC组)和膝骨关节炎+过表达HAND2-AS1组(KOA+ov-HAND2-AS1组),每组10只,观... 目的探究lncRNA HAND2-AS1对膝骨关节炎软骨退变的影响及其机制。方法SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、膝骨关节炎组(KOA组)、膝骨关节炎+过表达对照组(KOA+ov-NC组)和膝骨关节炎+过表达HAND2-AS1组(KOA+ov-HAND2-AS1组),每组10只,观察大鼠形态变化。RT-qPCR检测各组大鼠关节软骨中HAND2-AS1、miR-449a和RNF125 mRNA表达水平;HE染色观察各组大鼠关节软骨病理损伤;TUNEL实验检测各组大鼠关节软骨细胞凋亡情况;Western blot检测各组大鼠关节软骨中RNF125、β-catenin、p-GSK3β和p-β-catenin蛋白表达水平。生物信息学预测miR-449a与HAND2-AS1和RNF125的潜在结合位点,并采用双荧光素酶报告基因实验验证。结果过表达lncRNA HAND2-AS1改善膝骨关节炎大鼠关节炎症状和关节软骨病理损伤,抑制大鼠关节软骨细胞凋亡,下调大鼠关节软骨中miR-449a、β-catenin和p-GSK3β表达,并上调RNF125和p-β-catenin表达。miR-449a与HAND2-AS1和RNF125 mRNA结合。结论过表达lncRNA HAND2-AS1改善膝骨关节炎诱导的软骨退变,其机制与海绵化miR-449a上调RNF125表达并抑制Wnt/β-catenin信号通路激活有关。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 LncRNA HAND2-AS1 mir-449a RNF125 WNT/Β-CATENIN信号通路 大鼠
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miR-449a/b负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖 被引量:7
2
作者 林爱琴 卜文婕 +4 位作者 汪萍 高继光 杨建课 丁飞雨 李铁臣 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期13-19,共7页
目的探讨miR-449a/b在胃癌发生中的可能作用机制。方法采用qRT-PCR方法检测了miR-449a/b和E2F1基因在胃癌细胞BGC-823和胃粘膜细胞GES-1表达情况;采用瞬时转染技术将miR-449a/b模拟物(mimic)以及mimic阴性对照分别转入胃癌细胞BGC-823中... 目的探讨miR-449a/b在胃癌发生中的可能作用机制。方法采用qRT-PCR方法检测了miR-449a/b和E2F1基因在胃癌细胞BGC-823和胃粘膜细胞GES-1表达情况;采用瞬时转染技术将miR-449a/b模拟物(mimic)以及mimic阴性对照分别转入胃癌细胞BGC-823中,qRT-PCR验证转染成功后,通过CCK-8法检测胃癌细胞的增殖能力,流式细胞术检测胃癌细胞凋亡的变化,细胞划痕实验检测胃癌细胞的迁移能力,Western blot方法检测miR-449a/b上调后其靶基因蛋白的表达水平;并通过转染E2F1过表达质粒和空质粒对照入胃癌细胞BGC-823,Western blot确定转染效率后,分别用qRT-PCR和数字PCR检测miR-449a/b的表达水平。结果相比于正常胃粘膜细胞株GES-1,miR-449a/b在胃癌细胞株BGC-823中表达均下调(P<0.01);过表达miR-449a/b可抑制胃癌细胞BGC-823增殖和迁移,并促进其凋亡(P<0.05);过表达的E2F1可上调miR-449a/b的表达(P<0.001),而上调miR-449a/b的表达,其直接靶基因CDK4、CDK6表达下调,并可通过CDKs-pRb-E2F1信号通路,间接下调E2F1蛋白的表达(P<0.01)。结论 miR-449a/b的低表达和E2F1的高表达均参与了胃癌的发生、发展,并且miR-449a/b能负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖。 展开更多
关键词 胃癌 mir-449a/b E2F1 细胞增殖
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广东地区胃癌患者中医临床证候分型与miR-449表达相关性研究 被引量:4
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作者 李立平 吴炜景 +2 位作者 邱娴 李晓 赵亚刚 《中华中医药学刊》 CAS 2013年第12期2695-2698,I0026,共5页
目的:研究不同中医症候临床分型胃癌患者癌变组织miR-449表达差异,探讨胃癌患者中医证候临床分型与miR-449表达情况的相关性。方法:收集2011年1月—2012年10月就诊于广州军区广州总医院消化内科及广州中医药大学第一附属医院脾胃病科的... 目的:研究不同中医症候临床分型胃癌患者癌变组织miR-449表达差异,探讨胃癌患者中医证候临床分型与miR-449表达情况的相关性。方法:收集2011年1月—2012年10月就诊于广州军区广州总医院消化内科及广州中医药大学第一附属医院脾胃病科的患者,其中以"胃脘痛"为中医诊断并确断为"胃癌"患者60名为研究对象,中医四诊对其进行中医辨证分型;胃镜下钳取胃癌组织及癌旁周围正常组织为标本,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测标本miR-449表达情况。结果:①60名患者中医证型以"脾胃湿热型"为主,占46.67%,明显高于其他证型比率。②相对于癌旁正常组织,所有患者胃癌组织miR-449表达下调,相对表达量为32.367±7.318(P=0.001)。③"脾胃湿热型"患者胃癌组织miR-449相对表达量为26.250±2.287,明显低于其他证型(P<0.05)。结论:广东地区胃癌患者中医症候临床分型以"脾胃湿热证"为主,"脾胃湿热证"患者胃癌组织内miR-449表达下调,表明湿热之邪可能通过诱导组织miR-449表达下调参与胃癌的发生与发展。 展开更多
关键词 MICRORNA mir-449 中医证型 胃癌 胃脘痛
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miR-449a对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及迁移能力的影响 被引量:7
4
作者 王红磊 肖奕 +1 位作者 武力 马大昌 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期508-513,共6页
目的:通过敲低微小RNA(microRNA,miRNA)-449a的方法研究miR-449a对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖和迁移能力的影响。方法:采用miRNA芯片在乳腺癌细胞MCF-7和人正常乳腺细胞MCF-10A筛选具有表达差异的miRNA;化学合成法制备miR-449a的抑制剂(in... 目的:通过敲低微小RNA(microRNA,miRNA)-449a的方法研究miR-449a对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖和迁移能力的影响。方法:采用miRNA芯片在乳腺癌细胞MCF-7和人正常乳腺细胞MCF-10A筛选具有表达差异的miRNA;化学合成法制备miR-449a的抑制剂(inhibitor),转染后经real-time PCR验证表达的变化;细胞增殖CCK-8实验对转染后细胞增殖能力进行检测;划痕实验检测细胞转移能力,transwell小室实验检测细胞侵袭的改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)实验对MCF-7细胞增殖和迁移相关的β-catenin和E-cadherin蛋白进行检测;通过生物信息学软件预测miR-449a潜在靶基因为Notch 1,荧光素酶实验检测Notch 1是miR-449a的靶基因。结果:分别收集MCF-7和MCF-10A细胞,芯片结果显示miR-449a在MCF-7细胞的表达水平显著高于MCF-10A;本研究将细胞分为未处理组(Mock组),阴性对照组(negative control组,NC组)和处理组,通过收集不同组MCF-7细胞进行试验,CCK-8结果显示miR-449a下调后MCF-7细胞增殖能力显著降低;划痕实验结果显示miR-449a表达降低导致MCF-7细胞转移能力降低;transwell实验结果显示MCF-7细胞侵袭受到抑制;Western blot结果发现miR-449a敲低后β-catenin表达降低,E-cadherin表达增加;荧光素酶试验结果显示,miR-449a能够显著降低Notch 1-3'-UTR质粒的荧光素活性(P<0.01)。结论:在乳腺癌细胞MCF-7中敲低miR-449a能够显著抑制癌细胞增殖和迁移,而这一变化可能通过降低Notch 1蛋白表达实现的。 展开更多
关键词 mir-449a 人乳腺癌MCF-7细胞 NOTCH1 增殖 迁移
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miR-449a/b在Ⅱ型子宫内膜癌中表达下调 被引量:4
5
作者 薛纪森 张乾 +4 位作者 李晓琳 胡燕 杨孝军 颜笑健 郑飞云 《医学研究杂志》 2012年第11期103-107,共5页
目的分析Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌及良性子宫内膜组织间MicroRNA(miRNA)表达谱差异。方法收集子宫内膜癌手术患者内膜及良性患者内膜组织,利用免疫组化法分组,分别提取总RNA,基因芯片检测差异表达的miRNA,并经反转录PCR和荧光定量PCR验证... 目的分析Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌及良性子宫内膜组织间MicroRNA(miRNA)表达谱差异。方法收集子宫内膜癌手术患者内膜及良性患者内膜组织,利用免疫组化法分组,分别提取总RNA,基因芯片检测差异表达的miRNA,并经反转录PCR和荧光定量PCR验证差异表达的miRNA。结果芯片检测发现Ⅱ型子宫内膜癌与Ⅰ型子宫内膜癌及良性内膜组织间存在显著下调的miRNA分别有12个和9个,均下调的有miR-449a/b和miR-20b,显著上调的miRNA分别有18个和4个,均上调的有miR-29a。经反转录PCR和荧光定量PCR验证后发现miR-449a在Ⅱ型子宫内膜癌比Ⅰ型子宫内膜癌及良性内膜组织分别下调347倍和288倍,miR-449b分别下调461倍和424倍。结论Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌间miRNA的表达差异可能与不同类型子宫内膜癌的发生发展相关,而miR-449a/b可能与Ⅱ型子宫内膜癌的发病机制有关,可为进一步研究子宫内膜癌发生的分子机制提供依据。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 MICRORNA mir-449a b 基因芯片 荧光定量PCR
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miR-449a靶向调控外周血Toll样受体5影响风湿性心脏病发生发展的分子机制研究 被引量:2
6
作者 李宝亮 苏华 +2 位作者 李梦嘉 耿丽娜 马俊帅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第17期2057-2063,共7页
目的:研究微小RNA-449a(miR-449a)是否通过靶向外周血中的Toll样受体5(TLR5)影响风湿性心脏病的发生发展。方法:实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测风湿性心脏病患者外周血中TLR5和miR-449a的表达水平。在风湿性心脏病心肌细胞中转... 目的:研究微小RNA-449a(miR-449a)是否通过靶向外周血中的Toll样受体5(TLR5)影响风湿性心脏病的发生发展。方法:实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测风湿性心脏病患者外周血中TLR5和miR-449a的表达水平。在风湿性心脏病心肌细胞中转染miR-449a模拟物或TLR5小干扰RNA si-TLR5。采用qRT-PCR检测miR-449a表达,Western blot分析细胞核相关抗原Ki67(Ki67)、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)、TLR5、磷酸化p65(p-p65)和磷酸化IκBα(p-IκBα)蛋白表达,MTT测定细胞增殖,流式细胞仪评估细胞凋亡,ELISA测定炎症因子IL-1β、TNF-α水平。Starbase靶位点预测软件与双荧光素酶报告基因分析miR-449a与TLR5之间的靶向关系。在风湿性心脏病心肌细胞中共转染miR-449a模拟物和TLR5过表达质粒pcDNA-TLR5,观察细胞增殖、凋亡和NF-κB信号通路活性变化。结果:风湿性心脏病患者外周血中miR-449a的表达水平明显降低,TLR5 mRNA和TLR5蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。过表达miR-449a明显提高风湿性心脏病心肌细胞的Ki67蛋白表达水平、细胞存活率,显著降低Cleaved-caspase-3、p-p65、p-IκBα蛋白表达水平、细胞凋亡率和IL-1β、TNF-α水平(P<0.05)。低表达TLR5明显提高风湿性心脏病心肌细胞的Ki67蛋白表达水平、细胞存活率,显著降低Cleaved-caspase-3蛋白表达水平、凋亡率(P<0.05)。miR-449a通过靶向TLR5调控TLR5蛋白的表达。高表达TLR5后,miR-449a对风湿性心脏病心肌细胞增殖、Ki67蛋白表达的促进作用,以及miR-449a对细胞凋亡、Cleaved-caspase-3、p-p65、pIκBα蛋白表达和IL-1β、TNF-α水平的抑制作用被逆转。结论:miR-449a通过靶向TLR5抑制NF-κB信号通路活性,促进风湿性心脏病心肌细胞的增殖与抑制其凋亡。 展开更多
关键词 风湿性心脏病 mir-449a TLR5 增殖 凋亡 NF-ΚB信号通路
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miR-449与胃癌相关性研究进展 被引量:4
7
作者 李立平 吴炜景 赵亚刚 《华南国防医学杂志》 CAS 2012年第3期288-289,共2页
自1993年首次在秀丽线虫体内发现了miRNA-lin-4后,对miRNA的深入研究成为临床与基础研究的新热点。由于不同的miRNA在胃癌的发生与胃癌发展的不同阶段都呈现不同的表达水平,因此对于未来早期胃癌的筛查、诊断、治疗等方面,miRNA的应用... 自1993年首次在秀丽线虫体内发现了miRNA-lin-4后,对miRNA的深入研究成为临床与基础研究的新热点。由于不同的miRNA在胃癌的发生与胃癌发展的不同阶段都呈现不同的表达水平,因此对于未来早期胃癌的筛查、诊断、治疗等方面,miRNA的应用有着巨大的潜力。 展开更多
关键词 MICRORNA 胃癌 mir-449 E2F1 P53 P21 细胞程序性凋亡
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miR-449a、miR-26a和CXCL5在溃疡性结肠炎中的表达水平及其预后研究 被引量:9
8
作者 徐彦玲 时霞 张立辉 《热带医学杂志》 CAS 2019年第7期880-885,942,共7页
目的探讨miR-449a、miR-26a、CXC趋化因子配体5(CXCL5)在溃疡性结肠炎组织中的表达水平及其预后研究。方法选取2017年5月至2018年4月本院进行治疗的94例溃疡性结肠炎患者,以及同期行单发息肉切除的72例肠粘膜组织正常者进行研究,所有受... 目的探讨miR-449a、miR-26a、CXC趋化因子配体5(CXCL5)在溃疡性结肠炎组织中的表达水平及其预后研究。方法选取2017年5月至2018年4月本院进行治疗的94例溃疡性结肠炎患者,以及同期行单发息肉切除的72例肠粘膜组织正常者进行研究,所有受试者均行结肠镜检查采集结肠粘膜组织,实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测组织中miR-449a、miR-26a表达水平,免疫组化法检测组织中CXCL5阳性表达情况,分析miR-449a、miR-26a和CXCL5与溃疡性结肠炎患者病理参数的关系;采用COX回归分析、KM曲线分析miR-449a、miR-26a和CXCL5与溃疡性结肠炎患者预后的关系。结果与正常组比较,溃疡性结肠炎组中miR-449a、miR-26a表达水平下降,CXCL5阳性表达率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-449a、miR-26a和CXCL5表达与患者疾病活动程度、内镜分级、组织学分级相关,差异有统计学意义(P<0.05)。COX单因素分析显示,疾病活动程度、内镜分级、组织学分级、miR-449a、miR-26a、CXCL-5与患者预后有关,差异有统计学意义(P<0.05);多因素显示,疾病活动程度、内镜分级、miR-449a、miR-26a和CXCL5为影响患者预后的独立危险因素,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-449a、miR-26a低表达组和CXCL5高表达组黏膜愈合良好率分别为49.09%、49.06%和48.28%,均低于miR-449a、miR-26a高表达组与CXCL5低表达组的71.79%、76.73%和75.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-449a、miR-26a在溃疡性结肠炎患者中低表达,CXCL5呈高表达,三者与患者黏膜组织预后情况有关,且为黏膜愈合不良的独立危险因素。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 mir-449a mir-26a CXC趋化因子配体5 预后
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LncRNA GNAS-AS1通过调节miR-449a/Notch1轴参与胃癌细胞的增殖和迁移 被引量:3
9
作者 徐俐 胡珊珊 赵海明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期483-489,共7页
目的探究长链非编码RNA(LncRNA)GNAS反义RNA1(GNAS-AS1)通过调节miR-449a/缺刻基因1(Notch1)轴对胃癌(GC)细胞增殖和迁移的影响。方法收集四川省人民医院2013年9月至2017年9月30例确诊为GC的患者肿瘤组织与癌旁组织标本;将GC细胞AGS随... 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)GNAS反义RNA1(GNAS-AS1)通过调节miR-449a/缺刻基因1(Notch1)轴对胃癌(GC)细胞增殖和迁移的影响。方法收集四川省人民医院2013年9月至2017年9月30例确诊为GC的患者肿瘤组织与癌旁组织标本;将GC细胞AGS随机分为对照组(Control组)、si-NC组、si-GNAS-AS1组、si-GNAS-AS1+inhibitor NC组、si-GNAS-AS1+miR-449a inhibitor组。实时荧光定量PCR检测GNAS-AS1、miR-449a和Notch1 mRNA的表达;MTT实验、平板克隆形成实验检测增殖;wound healing实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭。Western Blot检测Notch1、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-449a和GNAS-AS1、Notch1的关系。结果与癌旁组织相比,肿瘤组织中GNAS-AS1、Notch1 mRNA表达升高,miR-449a表达降低(P<0.05)。与Control组、si-NC组相比,si-GNAS-AS1组AGS细胞GNAS-AS1表达、OD_(490)值、克隆形成数、划痕愈合率、细胞侵袭数目、Notch1、Vimentin、N-cadherin蛋白表达表达降低,miR-449a表达、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。与si-GNASAS1组、si-GNAS-AS1+inhibitor NC组相比,si-GNAS-AS1+miR-449a inhibitor组OD_(490)值、划痕愈合率、细胞侵袭数目、Notch1、Vimentin、N-cadherin表达升高(P<0.05),miR-449a表达、E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。GNAS-AS1靶向负调控miR-449a表达,miR-449a靶向负调控Notch1表达。结论沉默GNAS-AS1可能通过上调miR-449a来抑制Notch1蛋白的表达,从而抑制GC细胞增殖、迁移、侵袭过程。 展开更多
关键词 长链非编码RNA GNAS反义RNA1 mir-449a 缺刻基因1 胃癌 迁移 增殖
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miR-449a通过NOTCH1介导铁死亡调控非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡 被引量:3
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作者 贾晓琼 孙秋颖 +1 位作者 刘晓宇 温珍平 《中国癌症防治杂志》 CAS 2022年第6期617-623,共7页
目的 探讨miR-449a对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的调控作用及其分子机制。方法 用miR-499a过表达类似物Agomir-499a(Agomir-499a组)及其阴性对照(NC组)分别转染非小细胞肺癌NCI-H1975细胞,采用qRT-PCR检测转染细胞中miR-499a的表达水平... 目的 探讨miR-449a对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的调控作用及其分子机制。方法 用miR-499a过表达类似物Agomir-499a(Agomir-499a组)及其阴性对照(NC组)分别转染非小细胞肺癌NCI-H1975细胞,采用qRT-PCR检测转染细胞中miR-499a的表达水平,CCK-8和Ki67染色法检测细胞增殖,Annexin V染色法检测细胞凋亡。采用铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)和谷胱甘肽(GSH)分别处理转染Agomir-499a的NCI-H1975细胞(依次记为Agomir-499a+Fer-1组和Agomir-499a+GSH组),采用荧光探针法检测细胞内的Fe2+水平,光学比色法检测细胞内的GSH含量,qRT-PCR检测细胞内铁死亡和铁稳态相关基因的mRNA表达,Western blot检测NOTCH1信号通路相关蛋白的表达。结果 与NC组比较,Agomir-499a组NCI-H1975细胞的miR-449a表达水平明显增加(P=0.001),细胞增殖活力明显降低(P<0.05),细胞凋亡比例明显增加(P=0.004);铁死亡相关因子PTGS2、ACSL4、SLC7A11和COX2的表达水平,Fe2+细胞比例以及铁稳态相关基因TF、STEAP3、TFRC和DMT1的表达水平均明显增加(均P<0.05),但GSH含量以及NOTCH1信号通路相关分子NOTCH1、NICD、JAG1、JAG2、DLL1和HES1的表达水平均明显降低(均P<0.05)。与Agomir-449a组比较,Agomir-449a+Fer-1组铁死亡相关因子PTGS2、ACSL4、COX2和SLC7A11的表达水平,Fe2+细胞比例以及铁稳态相关基因TF和STEAP3的表达水平均明显降低(均P<0.05),但GSH含量和NOTCH1信号通路相关分子NICD、JAG1和DLL1的表达水平均明显增加(均P<0.05);Agomir-449a+GSH组SLC7A11、COX2和ACSL4的表达水平也较Agomir-449a组明显降低(均P<0.05)。结论 miR-449a可诱导非小细胞肺癌NCI-H1975细胞凋亡和增殖抑制,其作用机制可能与抑制NOTCH1信号介导的铁死亡有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 mir-449a NOTCH1信号通路 铁死亡 增殖 凋亡
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骨肉瘤患者血清中miR-34a、miR-449a表达及与新辅助化疗耐药的关系 被引量:4
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作者 楚利涛 李兴华 +3 位作者 朱梁豫 辛晓林 魏瑄 骆晓飞 《实用癌症杂志》 2022年第3期388-391,共4页
目的分析骨肉瘤患者血清中miR-34a、miR-449a表达水平及与新辅助化疗耐药的关系。方法随机选择骨肉瘤83例,将其纳入研究组。另选取同期体检健康受试者83例,将其纳入对照组。检测血清miR-34a、miR-449a表达水平。问卷调查骨肉瘤患者临床... 目的分析骨肉瘤患者血清中miR-34a、miR-449a表达水平及与新辅助化疗耐药的关系。方法随机选择骨肉瘤83例,将其纳入研究组。另选取同期体检健康受试者83例,将其纳入对照组。检测血清miR-34a、miR-449a表达水平。问卷调查骨肉瘤患者临床病理特征,给予新辅助化疗,统计耐药情况。结果研究组患者血清miR-34a水平(6.47±1.28)明显高于对照组(P<0.05),miR-449a水平(29.47±1.23)低于对照组(P<0.05)。不同年龄、性别、肿瘤位置患者血清miR-34a、miR-449a水平差异比较无统计学意义(P>0.05)。不同肿瘤大小、临床分期患者的血清miR-34a、miR-449a水平差异比较有统计学意义(P<0.05)。化疗有效组患者血清miR-34a表达水平(7.09±1.09)明显低于无效组(P<0.05),miR-449a表达水平(33.74±2.06)明显高于化疗无效组(P<0.05)。结论骨肉瘤患者血清miR-34a高表达,miR-449a低表达,且表达水平影响新辅助化疗效果,高表达会增加耐药性,增加化疗无效风险。 展开更多
关键词 骨肉瘤 mir-34A mir-449a 新辅助化疗 关系 表达
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miR-449b通过E2F3-p53途径抑制子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B的生长 被引量:2
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作者 陈慧君 黄亦波 +1 位作者 林蓉蓉 郑飞云 《医学研究杂志》 2015年第8期41-45,共5页
目的探讨miR-449b对子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B增殖和凋亡的影响及其作用的分子途径。方法脂质体lipofectamine 2000包被miR-449b并转染入HEC-1-B细胞,实时荧光定量PCR检测转染前后细胞内miR-449b的表达水平,CCK-8试验检测转染前后细胞活... 目的探讨miR-449b对子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B增殖和凋亡的影响及其作用的分子途径。方法脂质体lipofectamine 2000包被miR-449b并转染入HEC-1-B细胞,实时荧光定量PCR检测转染前后细胞内miR-449b的表达水平,CCK-8试验检测转染前后细胞活性,流式细胞仪来检测转染前后细胞凋亡情况。细胞克隆形成实验观察转染前后细胞克隆形成能力。Western blot方法检查转染前后细胞内E2F3蛋白和p53的表达情况。结果转染后实验组miR-449b表达量较NC组增加,细胞增殖能力和克隆能力减弱,而细胞凋亡增加(P<0.05)。miR-449b使E2F3表达下调,p53表达上调(P<0.05)。结论 miR-449b通过E2F3-p53途径抑制HEC-1-B细胞增殖并促进凋亡,可能作为治疗子宫内膜腺癌的新分子靶标。 展开更多
关键词 mir-449b HEC-1-B细胞 增殖 凋亡 E2F3 P53
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MiR-449,潜在的癌症治疗药物 被引量:1
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作者 张颖 寇现娟 陈宁 《生命的化学》 CAS CSCD 2020年第5期722-729,共8页
据报道,有超过50%的miRNA位于或靠近基因组中肿瘤相关的脆性区域,即经常发生缺失、扩增、易位的染色体片段,并且与人类肿瘤的发生及发展密切相关。MiRNA通过与靶mRNA的3’-未翻译区域内的互补结合位点结合,抑制或促进mRNA的翻译或降解。... 据报道,有超过50%的miRNA位于或靠近基因组中肿瘤相关的脆性区域,即经常发生缺失、扩增、易位的染色体片段,并且与人类肿瘤的发生及发展密切相关。MiRNA通过与靶mRNA的3’-未翻译区域内的互补结合位点结合,抑制或促进mRNA的翻译或降解。MiR-449已经被检测出有多种靶标,并且可以通过调控基因表达来作用于细胞发育、细胞分化、凋亡、增殖、应激反应和脂肪代谢。MiR-449家族的异常表达在多种癌症疾病中得到证实,如肝癌、胃癌、肺癌、乳腺癌、结直肠癌等。基于肿瘤与miR-449之间可能的致病关系,其有可能作为治疗某些类型癌症的潜在药物。本文综述了miR-449家族在癌症中的生物学功能和相关的分子机制,以期为miR-449作为潜在的癌症治疗药物提供证据。 展开更多
关键词 癌症 mir-449 迁移 细胞周期 侵袭 增殖
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circBIRC6靶向miR-449b-5p调控胃癌SUN-1细胞的增殖、细胞周期及凋亡 被引量:1
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作者 钟碧波 钟芳 +1 位作者 寇继光 李光曙 《中国临床研究》 CAS 2022年第11期1516-1522,共7页
目的探讨circBIRC6对胃癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响及可能的作用机制。方法收集2020年1月至5月武汉科技大学附属孝感医院收治的53例胃癌患者的癌组织及其癌旁组织标本,RT-qPCR法检测胃癌组织、癌旁组织与人胃黏膜细胞GES1、人胃... 目的探讨circBIRC6对胃癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响及可能的作用机制。方法收集2020年1月至5月武汉科技大学附属孝感医院收治的53例胃癌患者的癌组织及其癌旁组织标本,RT-qPCR法检测胃癌组织、癌旁组织与人胃黏膜细胞GES1、人胃癌细胞SNU-1、AGS、HS-746T中circBIRC6、miR-449b-5p的表达量;以SNU-1细胞为研究对象,随机分组为si-NC组、si-circBIRC6组、miR-NC组、miR-449b-5p组、si-circBIRC6+anti-miR-NC组、si-circBIRC6+anti-miR-449b-5p组;CCK-8法、流式细胞仪分别检测细胞增殖、细胞周期及凋亡率;双荧光素酶报告实验检测miR-449b-5p过表达对野生型载体WT-circBIRC6荧光素酶活性的影响;western blot检测cleaved caspase-3蛋白表达量。结果与癌旁组织比较,胃癌组织中circBIRC6的表达量升高(P<0.05),miR-449b-5p的表达量降低(P<0.05);与GES1细胞比较,SNU-1、AGS、HS-746T细胞中circBIRC6的表达量升高(P<0.05),miR-449b-5p的表达量降低(P<0.05)。与si-NC组比较,si-circBIRC6组细胞活力和S期细胞比例降低(P<0.05),G0/G1期细胞比例、细胞凋亡率和cleaved caspase-3蛋白水平升高(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-449b-5p组细胞活力和S期细胞比例降低(P<0.05),G0/G1期细胞比例、细胞凋亡率和cleaved caspase-3蛋白水平升高(P<0.05)。miR-449b-5p过表达可降低WT-circBIRC6的荧光素酶活性(P<0.05)。与si-circBIRC6+anti-miR-NC组比较,si-circBIRC6+anti-miR-449b-5p组细胞活力和S期细胞比例升高(P<0.05),G0/G1期细胞比例、细胞凋亡率和cleaved caspase-3蛋白水平降低(P<0.05)。结论干扰circBIRC6表达可通过上调miR-449b-5p表达而抑制胃癌细胞增殖、细胞周期进程及诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 circBIRC6 mir-449b-5p 细胞增殖 凋亡 细胞周期
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miR-449a靶向调节c-Met抑制Hela细胞的迁移和侵袭 被引量:2
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作者 夏雪梅 郑红枫 +2 位作者 陈迪文 程晓燕 严红艳 《浙江实用医学》 2016年第3期160-163,177,共5页
目的探讨micro RNA-449a(mi R-449a)在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌进展的作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(q PCR)测定mi R-449a及其靶向调节分子c-Met在宫颈癌组织及正常宫颈标本(对照组)中的表达水平。构建转染mi R-449a... 目的探讨micro RNA-449a(mi R-449a)在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌进展的作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(q PCR)测定mi R-449a及其靶向调节分子c-Met在宫颈癌组织及正常宫颈标本(对照组)中的表达水平。构建转染mi R-449a高表组(mi R-449a组)、转染c-Met干扰质粒组(si RNA组)和相应的空载质粒组(mock组),q PCR检测mi R-449a和c-Met m RNA表达量;免疫印迹法检测c-Met、MMP2和MMP9蛋白水平变化;细胞划痕修复和Transwell侵袭试验进一步观测mi R-449a和c-Met对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果 mi R-449a在宫颈癌组织中表达量低于对照组(P<0.05),c-Met m RNA在宫颈癌组织中的表达高于对照组(P<0.05),两者间呈负相关关系(r=-0.32,P<0.05)。在宫颈癌细胞Hela细胞中过表达mi R-449a后,c-Met m RNA的表达水平降低(P<0.05),并且蛋白水平也明显降低。mi R-449a能显著抑制细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05),抑制c-Met表达后也能显著抑制细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05)。结论 mi R-449a通过靶向抑制c-Met的表达抑制宫颈癌细胞的迁移和侵袭能力。mi R-449a可能是潜在的宫颈癌筛查和诊断分子标志物,并为宫颈癌个体化治疗提供一个新的方向。 展开更多
关键词 宫颈癌 mir-449a C-MET
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miR-449a在乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型中的作用
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作者 王红磊 肖奕 +1 位作者 武力 马大昌 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期833-838,共6页
目的探究敲低miR-449a对裸鼠皮下乳腺癌细胞移植瘤生长的影响。方法本实验通过采用乳腺癌MCF-7细胞系建立乳腺癌的裸鼠皮下移植瘤动物模型,将含有shRNA-miR-449a表达的质粒稳定转染MCF-7细胞,将筛选的稳转细胞采取多点注射的方法注入裸... 目的探究敲低miR-449a对裸鼠皮下乳腺癌细胞移植瘤生长的影响。方法本实验通过采用乳腺癌MCF-7细胞系建立乳腺癌的裸鼠皮下移植瘤动物模型,将含有shRNA-miR-449a表达的质粒稳定转染MCF-7细胞,将筛选的稳转细胞采取多点注射的方法注入裸鼠皮下,采用阴性质粒为阴性对照,PBS作为空白对照;处理裸鼠后检测成瘤体积并计算肿瘤生长抑制率;Real-time PCR检测肿瘤组织miR-449a、Notch 1表达情况;Western blot检测移植瘤组织内的Notch 1、β-catenin和E-cadherin蛋白水平;免疫组织化学技术检测肿瘤组织内Notch1、E-cadherin表达水平。结果移植瘤形成过程中裸鼠未出现死亡,肿瘤体积检测后发现miR-449a敲低后能够显著抑制肿瘤的生长(P<0.05);miR-449a在移植瘤组织内表达降低,同时Notch 1蛋白表达降低,β-catenin表达降低,而E-cadherin蛋白表达升高;免疫组化结果也显示Notch 1蛋白水平降低,E-cadherin蛋白的表达水平升高(P<0.05)。结论敲低miR-449a可能是通过下调Notch 1、β-catenin蛋白水平,促进E-cadherin蛋白表达,从而抑制乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的生长。 展开更多
关键词 mir-449a 乳腺癌 裸鼠 移植瘤
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绵羊miR-449a/b前体序列组织表达及生物信息学分析
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作者 王赛桥 赵路 +3 位作者 翟振翰 张丙雷 贾万航 王玉琴 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2175-2184,共10页
【目的】探究miR-449a/b在绵羊生长发育和繁殖性能方面的作用,为进一步研究miR-449a/b在绵羊繁殖调控中的作用提供参考。【方法】以湖羊为研究对象,利用实时荧光定量PCR技术鉴定miR-449a/b在湖羊下丘脑、垂体和卵巢中的相对表达量。使用... 【目的】探究miR-449a/b在绵羊生长发育和繁殖性能方面的作用,为进一步研究miR-449a/b在绵羊繁殖调控中的作用提供参考。【方法】以湖羊为研究对象,利用实时荧光定量PCR技术鉴定miR-449a/b在湖羊下丘脑、垂体和卵巢中的相对表达量。使用TargetScan、miRWalk、miRDB软件预测绵羊miR-449a/b前体序列的靶基因,利用微生信和KOBAS网站对其进行GO功能和KEGG通路富集分析。【结果】试验获得的前体序列与NCBI数据库中绵羊前体序列信息比对结果一致。实时荧光定量PCR结果显示,miR-449a在垂体中的相对表达量显著高于miR-449b(P<0.05),miR-449b在卵巢中的相对表达量极显著高于miR-449a(P<0.01)。利用3个靶基因预测软件做韦恩图分析,取其交集得到miR-449a/b的靶基因数目分别为299和23个。GO功能富集显示,miR-449a/b主要被富集到生物进程;KEGG通路富集结果取前20个通路进行分析发现,主要包括催产素、MAPK等与繁殖调控相关的信号通路。【结论】miR-449a在垂体中的表达量较高,miR-449b在卵巢中的表达量较高。miR-449a/b的靶基因数目分别为299和23个,其基因功能主要集中在生物过程,可能参与湖羊的繁殖调控。 展开更多
关键词 绵羊 mir-449a mir-449b 生物信息学 靶基因 繁殖调控
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miR-449b表达对慢性乙型肝炎合并肝细胞癌患者预后的影响
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作者 梁伊乐 胡新俊 +1 位作者 岳峰 徐芸 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2021年第6期516-518,523,共4页
目的:探讨miR-449b表达对慢性乙型肝炎(CHB)合并肝细胞癌(HCC)患者预后的影响。方法:选取2014年1月至2018年1月的100例CHB合并HCC患者为观察组,同期40例CHB患者作为对照组,使用qRT-PCR检测患者外周血中miR-449b水平,分析miR-449b与观察... 目的:探讨miR-449b表达对慢性乙型肝炎(CHB)合并肝细胞癌(HCC)患者预后的影响。方法:选取2014年1月至2018年1月的100例CHB合并HCC患者为观察组,同期40例CHB患者作为对照组,使用qRT-PCR检测患者外周血中miR-449b水平,分析miR-449b与观察组患者总生存期(OS)的关系。结果:观察组外周血miR-449b表达水平(0.27±0.10),低于对照组(0.64±0.10),差异有统计学意义(P<0.05)。miR-449b表达与HBV病毒载量、肿瘤分期、Child-Pugh分级具有相关性(P<0.05)。观察组共失访9例,成功随访率91.0%,平均随访时间(49.9±7.9)个月,死亡51例。miR-449b表达增高组2年死亡率为15.91%,miR-449b表达降低组2年死亡率为38.30%,差异具有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier联合Log-rank检验提示,miR-449b表达降低组OS短于miR-449b表达升高组(P<0.05)。Cox分析结果显示,miR-449b表达、年龄、TNM分期、病毒载量是CHB合并HCC OS的独立影响因素(P<0.05)。结论:CHB合并HCC患者外周血中miR-449b表达水平与TNM分期、病毒载量及Child-Pugh分级有关,且miR-449b表达降低患者的OS缩短,miR-449b可能是CHB合并HCC预后的标志物。 展开更多
关键词 肝细胞癌 慢性乙型肝炎 mir-449b 总生存期
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中国人群miR-449a单核苷酸多态性与胃癌易感性的相关性研究 被引量:4
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作者 张艳梅 马靖华 +2 位作者 刘阳晨 刘君 周娟 《现代检验医学杂志》 CAS 2016年第4期14-18,共5页
目的 探讨miR-449a rs112310158基因多态性与胃癌易感性的关系。方法 共纳入448例胃癌患者和452例健康对照者。miR-449a rs112310158基因型检测采用聚合酶链反应结合直接测序方法。miR-449a表达水平检测采用荧光定量PCR方法。此单核苷... 目的 探讨miR-449a rs112310158基因多态性与胃癌易感性的关系。方法 共纳入448例胃癌患者和452例健康对照者。miR-449a rs112310158基因型检测采用聚合酶链反应结合直接测序方法。miR-449a表达水平检测采用荧光定量PCR方法。此单核苷酸多态性位点功能由RT-PCR和免疫组化试验验证。结果 相对于对照组,胃癌病例组在吸烟者(OR=1.345,95%CI=1.028-1.761)、饮酒者(OR=1.910,95%CI=1.465-2.490)、有肿瘤家族史者(OR=4.178,95%CI=1.554-11.231)、幽门螺杆菌感染率较高者(OR=1.428,95%CI=1.098-1.857),差异均具有统计学意义。相较AA基因型,GG基因型显著增加胃癌的发病风险(OR=2.542,95%CI:1.304-4.954,P=0.005)。相较于A等位基因,携带G等位基因的个体罹患胃癌的风险升高(OR=1.279,95%CI:1.012-1.617,P=0.043)。GG型患者比AA型患者miR-449a表达水平下降。与AA基因型相比,miR-449a靶基因PRKCE在GG基因型胃癌患者中有更高的表达。结论 该研究发现miR-449a rs112310158是胃癌的遗传易感因素之一。 展开更多
关键词 胃癌 mir-449a 多态性
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miR-449a在乳腺癌组织中的表达及生物信息学分析
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作者 林慧 陈佳菁 +2 位作者 王灿明 郑素琼 邱建龙 《生物信息学》 2023年第3期171-178,共8页
探讨miR-449a在乳腺癌组织中的表达及其在乳腺癌发生发展过程中的作用。利用实时荧光定量PCR检测83例乳腺癌和癌旁组织中miR-449a的相对表达量,发现miR-449a在乳腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织,并与肿瘤组织学级别、大小、雌激素受... 探讨miR-449a在乳腺癌组织中的表达及其在乳腺癌发生发展过程中的作用。利用实时荧光定量PCR检测83例乳腺癌和癌旁组织中miR-449a的相对表达量,发现miR-449a在乳腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织,并与肿瘤组织学级别、大小、雌激素受体状态和孕激素受体状态有关(P<0.05)。miR-449a在三阴性乳腺癌中的表达水平显著低于管腔型。使用Kaplan-Meier Plotter数据库进行生存分析,结果显示在三阴性乳腺癌中miR-449a低表达组总生存率显著低于高表达组,而在管腔B型乳腺癌中miR-449a高表达组总生存率显著降低(P<0.05)。利用ENCORI数据库预测得到靶基因186个,通过metascape数据库进行富集分析,发现其功能涉及间充质细胞分化、细胞迁移、内分泌抵抗、粘附连接、肌动蛋白细胞骨架调节以及NOTCH、TGF-β、Wnt、PI3K-Akt等介导的信号通路。通过string数据库进行蛋白互作网络分析,并使用Cytoscape软件筛选出由NOTCH1、JAG1和cyclin D1等蛋白构成的关键子网络。应用ENCORI数据库分析miR-449a与NOTCH途径靶基因的相关性,发现miR-449a与NOTCH1在乳腺癌组织中的表达呈负相关。本研究结果表明miR-449a在乳腺癌组织中的表达具有明显的异质性,可通过影响多种信号通路参与肿瘤发展过程,调控NOTCH信号通路可能是其在乳腺癌中的重要机制。 展开更多
关键词 mir-449a 乳腺癌 靶基因 生物信息学
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