ssc-miR-331-3p的靶基因预测及生物信息学分析

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作者 王芳 马红 +4 位作者 张冬杰 付博 郭镇华 汪亮 刘娣 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2026年第2期53-59,共7页

为了研究ssc-miR-331-3p在猪脂肪沉积过程中的调控机制,试验采用生物信息学方法对ssc-miR-331-3p的序列保守性、转录因子和靶基因进行分析。利用在线数据库miRBase获得不同物种miR-331-3p成熟序列,通过MEGA 7.0软件和在线软件WebLogo对m... 为了研究ssc-miR-331-3p在猪脂肪沉积过程中的调控机制,试验采用生物信息学方法对ssc-miR-331-3p的序列保守性、转录因子和靶基因进行分析。利用在线数据库miRBase获得不同物种miR-331-3p成熟序列,通过MEGA 7.0软件和在线软件WebLogo对miR-331-3p的成熟序列进行保守性分析;利用在线数据库JASPAR和AnimalTFDB对ssc-miR-331-3p的启动子区的转录因子结合位点进行预测;利用在线数据库miRDB、TargetScan、miRTarBase对ssc-miR-331-3p潜在的靶基因进行预测,利用Kobas在线软件对靶基因进行GO功能注释和KEGG富集分析,并使用R 4.4.3软件进行可视化分析;最后通过在线数据库String建立ssc-miR-331-3p靶基因的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并利用Cytoscape v3.10.3软件进行可视化分析。结果表明:miR-331-3p成熟序列在猪、人、大鼠、小鼠、牛等13个物种间序列高度保守。ssc-miR-331-3p的启动子区分布有GATA3、TCF21和TWIST1等转录因子结合位点。共预测到AP2A1、ARID3A、ARRB1、ATXN7L3等250个靶基因,上述靶基因主要富集在RNA聚合酶II介导的转录正调控、RNA聚合酶II介导的转录负调控、有丝分裂细胞周期G1/S期转换的调控等生物学过程,染色质结合、蛋白激酶结合、丝裂原活化蛋白激酶激酶结合等分子功能,以及细胞核、细胞质、核质等细胞组分中。靶基因主要富集在MAPK和Apelin等11条信号通路中。CHST11、XYLT1、XYLT2和CSPG4基因是ssc-miR-331-3p潜在靶基因的PPI网络中的关键基因,其中CHST11、XYLT2、CSPG4基因与脂肪沉积有关。说明ssc-miR-331-3p可能通过上游转录因子GATA3、TCF21、TWIST1和下游靶基因CHST11、XYLT2、CSPG4基因协同MAPK和Apelin信号通路组成的分子网络调控猪脂肪沉积过程。 展开更多

关键词 ssc-mir-331-3p 生物信息学 靶基因预测 信号通路 脂肪沉积

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lncRNA-LAMTOR5-AS1通过缺氧胃癌细胞外泌体靶向miR-331-3p调控胃癌BGC-823细胞恶性行为

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作者 张婧博 高瑞君 +1 位作者 王力彬 杨柳 《中南医学科学杂志》 2025年第6期957-962,共6页

目的探讨lncRNA-LAMTOR5-AS1通过缺氧胃癌细胞外泌体靶向miR-331-3p对胃癌BGC-823细胞的影响。方法于常氧和缺氧条件下培养胃癌BGC-823细胞,收集对应外泌体为N-exo和H-exo;于缺氧条件下转染短发夹(sh)-LAMTOR5-AS1及其阴性对照sh-NC,收... 目的探讨lncRNA-LAMTOR5-AS1通过缺氧胃癌细胞外泌体靶向miR-331-3p对胃癌BGC-823细胞的影响。方法于常氧和缺氧条件下培养胃癌BGC-823细胞,收集对应外泌体为N-exo和H-exo;于缺氧条件下转染短发夹(sh)-LAMTOR5-AS1及其阴性对照sh-NC,收集对应外泌体为sh-LAMTOR5-AS1-H-exo和sh-NC-H-exo。透射电镜和蛋白质印迹法鉴定外泌体。将BGC-823细胞分为CK组(PBS培养)、N-EXO组(N-exo培养)、H-EXO组(H-exo培养)、sh-NC-H-EXO组(sh-NC-H-exo培养)、sh-LAMTOR5-AS1-H-EXO组(sh-LAMTOR5-AS1-H-exo培养)、sh-LAMTOR5-AS1-H-EXO+inhibitor NC组(sh-LAMTOR5-AS1-H-exo+inhibitor NC培养)和sh-LAMTOR5-AS1-H-EXO+miR-331-3p inhibitor组(sh-LAMTOR5-AS1-H-exo+miR-331-3p inhibitor培养)。采用qRT-PCR检测细胞LAMTOR5-AS1、miR-331-3p表达水平。采用CCK-8法、Transwell实验、流式细胞术分别检测各组细胞增殖、迁移和侵袭能力、细胞凋亡率。Western blotting检测各组细胞相关蛋白表达水平。结果N-exo和H-exo均可促进BGC-823细胞恶性生物学行为(P<0.05);H-exo对BGC-823细胞的促进作用优于N-exo(P<0.05);敲除LAMTOR5-AS1可降低H-exo对BGC-823细胞的恶性生物学行为的促进作用(P<0.05);下调miR-331-3p表达可部分逆转敲除LAMTOR5-AS1的作用(P<0.05)。结论缺氧诱导胃癌细胞外泌体LAMTOR5-AS1可促进胃癌细胞恶性生物学行为,其机制可能与调控miR-331-3p表达,激活磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路有关。 展开更多

关键词 外泌体 LAMTOR5-AS1 mir-331-3p 胃癌 BGC-823 缺氧

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苦木碱F通过miR-331-3p调控宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的机制研究 被引量：9

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作者 张琳 邓贵华 +1 位作者 杨亮 肖大立 《陕西中医》 CAS 2022年第1期17-22,共6页

目的:探讨苦木碱F调控miR-331-3p在宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡中的作用及机制。方法:MTT法检测苦木碱F对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响;流式细胞术检测苦木碱F对宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响;RT-qPCR检测苦木碱F处理HeLa细胞后miR-331-3p的表达;... 目的:探讨苦木碱F调控miR-331-3p在宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡中的作用及机制。方法:MTT法检测苦木碱F对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响;流式细胞术检测苦木碱F对宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响;RT-qPCR检测苦木碱F处理HeLa细胞后miR-331-3p的表达;miR-331-3p mimic或miR-331-3p inhibitor转染HeLa细胞,经苦木碱F处理后检测HeLa细胞的增殖及凋亡情况;使用生物信息学和双荧光素酶报告基因实验预测及验证miR-331-3p与蛋白酶体活化复合物3(PSME3)的靶向关系;Western blot检测HeLa细胞中凋亡相关蛋白表达情况。结果:苦木碱F能显著抑制HeLa细胞增殖,促进凋亡,且具有浓度依赖性(P<0.01);苦木碱F显著上调HeLa细胞中miR-331-3p的表达(P<0.01);miR-331-3p mimic能显著抑制HeLa细胞增殖能力,促进细胞凋亡;miR-331-3p inhibitor能显著降低苦木碱F对HeLa细胞增殖的抑制以及凋亡的促进作用(P<0.05);生物信息学预测PSME3是miR-331-3p的靶基因之一,双荧光素酶报告基因结果显示miR-331-3p与PSME33’UTR靶向结合;与苦木碱F+NC inhibitor+NC-siRNA组比较,苦木碱F+miR-331-3p inhibitor+NC-siRNA组中细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,β-catenin和Bcl-2蛋白水平升高,Bax蛋白水平降低,而敲低PSME3能逆转这一结果,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:苦木碱F通过介导miR-331-3p/PSME3轴抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,促进凋亡,发挥抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 苦木碱F mir-331-3p 宫颈癌 增殖 凋亡 蛋白酶体活化复合物3

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猪miR-331-3p过表达载体的构建及其对细胞增殖的影响 被引量：2

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作者 陈涛 马立霞 +3 位作者 崔景香 耿进红 曾勇庆 陈伟 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期892-900,共9页

本研究旨在阐明猪miR-331-3p对细胞增殖的影响,探讨其对细胞增殖的作用机制首先构建了miR-331-3p的过表达载体pcDNA 3.1 (+)-miR-331-3p,并将将PK15细胞分为4组,分别为实验组、实验组对照组、抑制剂组和抑制剂对照组。实验组和对照组分... 本研究旨在阐明猪miR-331-3p对细胞增殖的影响,探讨其对细胞增殖的作用机制首先构建了miR-331-3p的过表达载体pcDNA 3.1 (+)-miR-331-3p,并将将PK15细胞分为4组,分别为实验组、实验组对照组、抑制剂组和抑制剂对照组。实验组和对照组分别转染pcDNA 3.1(+)-miR-331-3p和pcDNA 3.1(+)。抑制剂组和抑制剂对照组分别转染miR-331-3p Inhibitor和miR-331-3p阴性对照(miR-331-3p NC)。通过在各组添加CCK-8试剂绘制细胞增殖曲线,并使用PI染色检测细胞所处周期比例。同时,利用实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qPCR)检测生长抑制蛋白家族成员5 (Inhibitor of growth family member 5,ING5)、细胞周期蛋白依赖性激酶2 (Cyclin dependent kinase 2,CDK2)、细胞周期蛋白依赖性激酶3 (Cyclin dependent kinase 3,CDK3)、细胞周期蛋白依赖性激酶4 (Cyclin dependent kinase 4,CDK4)、细胞周期蛋白B (Cyclin B)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(Cyclindependentkinaseinhibitor1A,CDKN1A)的表达变化。结果表明,实验组miR-331-3p表达量显著升高,细胞增殖曲线表明48 h和72 h时细胞数目均呈现出实验组>实验对照组和抑制剂对照组>抑制剂组的趋势(P<0.05)。与实验对照组相比,实验组处于G0/G1期的细胞比例下调,S期和G2/M细胞的比例上调,抑制剂对照组趋势与之相反;同时,实验组中与促进增殖的基因CDK2、CDK3、CDK4和CyclinB的mRNA表达水平均显著升高,而抑制增殖的基因ING5和CDKN1A均表现出显著下降的趋势。本研究成功构建了miR-331-3p过表达载体,且发现miR-331-3p具有促进猪肾上皮细胞增殖的能力,研究结果为深入研究miR-331-3p在猪生长发育中的作用机制奠定了基础。 展开更多

关键词 mir-331-3p 细胞增殖 过表达载体 PK15 猪

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miR-331-3p在肝细胞癌中表达的研究 被引量：1

5

作者 贺军 文武 +3 位作者 陈国栋 丁成明 黄秋林 贺更生 《中国当代医药》 2014年第17期4-7,共4页

目的运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测miR-331-3p在肝癌细胞株和肝癌组织中的表达,探讨其在肝癌中表达的临床意义及潜在临床价值。方法采用基于2-ΔΔCt的qRT-PCR检测miR-331-3p在正常肝细胞株(HL-7702)、不同侵袭转移能力的肝癌... 目的运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测miR-331-3p在肝癌细胞株和肝癌组织中的表达,探讨其在肝癌中表达的临床意义及潜在临床价值。方法采用基于2-ΔΔCt的qRT-PCR检测miR-331-3p在正常肝细胞株(HL-7702)、不同侵袭转移能力的肝癌细胞株(HepG2、MHCC97-H、HCCLM3)的表达,同时收集5例正常肝组织、30例肝癌组织及癌旁组织,进行定量分析,并分析miR-331-3p与肝癌患者临床病理特征的关系。结果与正常肝细胞株相比,miR-331-3p在肝癌细胞株中表达下调,且随着肝癌细胞株侵袭转移程度增加,其表达下调越明显(P<0.05);与正常肝组织相比,肝癌组织中miR-331-3p有不同程度的表达下调(P<0.05),且与肝癌患者肿瘤多发结节(P=0.036)、低分化程度(P=0.035)以及伴有静脉浸润(P=0.016)等临床病理特征相关。结论 miR-331-3p在肝癌的发生、发展过程可能发挥重要作用,miR-331-3p有望成为肝癌新的生物标志物或预后因子。 展开更多

关键词 MIRNA mir-331—3p 肝细胞癌 临床病理特征

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miR-331-3p在恶性肿瘤中的研究进展 被引量：5

6

作者 李静 张云艳 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2018年第2期125-129,共5页

miRNA是一种存在于真核生物细胞中的一类内源性非编码的RNA小分子,miR-331-3p作为miRNA家族中的一员,在细胞生理过程中发挥重要作用。近年来,miR-331-3p在恶性肿瘤中的作用日益受到关注。已有研究显示,miR-331-3p在宫颈癌、肝癌、胶质... miRNA是一种存在于真核生物细胞中的一类内源性非编码的RNA小分子,miR-331-3p作为miRNA家族中的一员,在细胞生理过程中发挥重要作用。近年来,miR-331-3p在恶性肿瘤中的作用日益受到关注。已有研究显示,miR-331-3p在宫颈癌、肝癌、胶质母细胞瘤及前列腺癌等恶性肿瘤的发生发展及复发转移过程中均发挥着重要作用。这些研究结果对恶性肿瘤的诊断及预后起到帮助作用。 展开更多

关键词 mir-331-3p 恶性肿瘤 基因表达

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血清胞外囊泡miR-331-5p在早发性帕金森病患者中表达水平的研究 被引量：2

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作者 刘郁 张静静 +1 位作者 吕荣祥 王文盛 《全科医学临床与教育》 2021年第6期501-505,共5页

目的探讨早发性帕金森病(EOPD)及晚发性帕金森病(LOPD)患者血清胞外囊泡差异表达的miRNAs及潜在生物学功能。方法收集帕金森病患者18例,分为EOPD组(发病年龄≤50岁)7例及LOPD组(发病年龄>50岁)11例,收集两组患者血清并提取胞外囊泡RN... 目的探讨早发性帕金森病(EOPD)及晚发性帕金森病(LOPD)患者血清胞外囊泡差异表达的miRNAs及潜在生物学功能。方法收集帕金森病患者18例,分为EOPD组(发病年龄≤50岁)7例及LOPD组(发病年龄>50岁)11例,收集两组患者血清并提取胞外囊泡RNA。选择11个在EOPD及LOPD患者外周血中差异表达的miRNAs,通过qRT-PCR方法检验在两组患者血清胞外囊泡中的相对水平,TargetScan数据库用于miRNA靶基因分析,String数据库用于靶基因的基因本体(GO)分析和蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析,预测胞外囊泡中差异表达的miRNAs可能调控的关键靶基因及参与的生物学功能。结果与LOPD组患者相比,miR-214、miR-30b、miR-141、miR-146b-5p在EOPD患者血清胞外囊泡中表达水平下调(t分别=-7.12、-6.84、-3.61、-3.52,P均<0.05),miR-193a-3p和miR-331-5p在EOPD患者胞外囊泡中表达水平上调(t分别=23.14、25.22,P均<0.05),其中以miR-331-5p上调最为明显。GO分析发现miR-331-5p靶基因中有181个基因参与神经系统发育,在其构成的PPI网络中,节点数最高的前20个互作蛋白中MAPK1和PTEN又与神经元组成有关。结论EOPD患者血清胞外囊泡miR-331-5p表达水平上调,其可能通过靶向PTEN和MAPK1影响神经元功能,进而调节EOPD的发生发展。 展开更多

关键词 胞外囊泡 mir-331-5p 早发性帕金森病 神经元

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LncRNA ANCR调控miR-331表达影响胃癌细胞的生物学行为 被引量：8

8

作者 刘玉华 魏蔚 崔淑萍 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期19-25,共7页

背景与目的:胃癌是导致癌症死亡的第二大原因,是东亚、东欧及中南美洲部分地区最常见的胃肠道恶性肿瘤。该研究旨在探讨长链非编码RNA(long-chain noncoding RNA,lncRNA)抗分化非编码RNA(antidifferentiation noncodingRNA,ANCR)靶向miR... 背景与目的:胃癌是导致癌症死亡的第二大原因,是东亚、东欧及中南美洲部分地区最常见的胃肠道恶性肿瘤。该研究旨在探讨长链非编码RNA(long-chain noncoding RNA,lncRNA)抗分化非编码RNA(antidifferentiation noncodingRNA,ANCR)靶向miR-331调节胃癌细胞的增殖、侵袭行为及其机制。方法:河南省肿瘤医院2016年1月1日—2016年12月1日获得60例临床胃癌样本和20例对应的癌旁组织标本(距癌组织2 cm)。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测ANCR在胃癌组织和不同胃癌细胞株中的表达情况;分析ANCR的表达和胃癌患者临床病理学特征之间的关系;平板克隆实验检测ANCR对胃癌细胞增殖能力的影响;Transwell侵袭实验检测ANCR对胃癌细胞侵袭能力的影响;裸鼠成瘤实验检测ANCR对胃癌细胞肿瘤异种移植的影响;双荧光素酶报告基因检测ANCR与miR-331之间的相互作用。结果:胃癌组织中ANCR的表达(4.18±0.28)高于正常组织(1.45±0.15),差异有统计学意义(t=12.36,P=0.045);与其他胃癌细胞株相比,BGC-823和MGC-803细胞中ANCR的表达水平较高(9.12±0.52),差异有统计学意义(P=0.019);抑制ANCR的表达可以减弱胃癌细胞的增殖能力(98.8±10.4)和侵袭能力(175.9±5.7);抑制ANCR的表达后胃癌细胞在裸鼠体内异种移植能力(223.4±13.4)弱于NC组(115.6±10.7),差异有统计学意义(t=13.28,P=0.014);双荧光素酶实验证实ANCR可以直接调控miR-331的表达及荧光活性。结论:ANCR可以靶向调节miR-331的表达影响胃癌细胞的增殖、侵袭行为,影响胃癌细胞在裸鼠体内的生长情况。 展开更多

关键词 抗分化非编码RNA mir-331 胃癌 增殖 侵袭

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LncRNA MFI2-AS1靶向miR-331-3p调节LPS诱导的心肌细胞损伤 被引量：1

9

作者 雷肖蠢 张海良 丁鹏 《河北医药》 CAS 2021年第8期1142-1146,共5页

目的探讨长链非编码RNA MFI2-AS1(LncRNA)MFI2-AS1靶向调控微小RNA-331-3p(miR-331-3p)对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞损伤的影响及其分子机制。方法体外培养大鼠心肌细胞H9c2,使用10μg/ml的LPS处理H9c2细胞24 h建立心肌细胞损伤模型。... 目的探讨长链非编码RNA MFI2-AS1(LncRNA)MFI2-AS1靶向调控微小RNA-331-3p(miR-331-3p)对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞损伤的影响及其分子机制。方法体外培养大鼠心肌细胞H9c2,使用10μg/ml的LPS处理H9c2细胞24 h建立心肌细胞损伤模型。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测MFI2-AS1与miR-331-3p的表达水平。利用脂质体转染法分别将si-NC、si-MFI2-AS1、miR-NC、miR-331-3p mimics、si-MFI2-AS1与anti-miR-NC、si-MFI2-AS1与anti-miR-331-3p转染至H9c2细胞,使用LPS处理24 h。甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验验证MFI2-AS1与miR-331-3p的靶向关系;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase-3)、细胞周期蛋白1(CyclinD1)蛋白表达量。结果LPS处理后,细胞中MFI2-AS1的表达水平升高(P<0.05),miR-331-3p的表达水平降低(P<0.05),细胞存活率降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),Cleaved-caspase-3蛋白水平升高(P<0.05),CyclinD1蛋白水平降低(P<0.05);转染si-MFI2-AS1或miR-331-3p mimics后,细胞存活率升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Cleaved-caspase-3蛋白水平降低(P<0.05),CyclinD1蛋白水平升高(P<0.05);miR-331-3p过表达可抑制野生型质粒WT-MFI2-AS1转染细胞的荧光素酶活性(P<0.05);si-MFI2-AS1与anti-miR-331-3p共转染入H9c2细胞,细胞存活率降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),Cleaved-caspase-3蛋白水平升高(P<0.05),CyclinD1蛋白水平降低(P<0.05)。结论LncRNA MFI2-AS1通过靶向负调控miR-331-3p表达加重LPS诱导的心肌细胞损伤。 展开更多

关键词 LncRNA MFI2-AS1 mir-331-3p LPS 心肌细胞 增殖 凋亡

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帕金森病患者血浆外泌体miR-331-5p表达水平及意义 被引量：5

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作者 傅曼 许盼 王娟 《中国煤炭工业医学杂志》 2019年第4期337-341,共5页

目的探讨帕金森病患者血浆外泌体miR-331-5p表达水平及意义。方法选取2016年8月—2018年7月我院收治的75例帕金森病患者作为研究对象。选取同期体检健康者50例作为对照组。采用RTqPCR法检测二组受试者血浆外泌体miR-331-5p表达水平。比... 目的探讨帕金森病患者血浆外泌体miR-331-5p表达水平及意义。方法选取2016年8月—2018年7月我院收治的75例帕金森病患者作为研究对象。选取同期体检健康者50例作为对照组。采用RTqPCR法检测二组受试者血浆外泌体miR-331-5p表达水平。比较不同分期帕金森病患者血浆外泌体miR-331-5p表达水平。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血浆外泌体miR-331-5p诊断Ⅱ~Ⅲ期及Ⅳ~Ⅴ期帕金森病的效能。结果帕金森病组患者血浆外泌体miR-331-5p表达水平为(1.03±0.36),明显高于对照组[(0.22±0.06),P<0.05]。不同分期帕金森病患者血浆外泌体miR-331-5p表达水平比较,差异有统计学意义(均P<0.05),其中Ⅴ期患者血浆外泌体miR-331-5p表达水平明显高于Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ期患者(均P<0.05)。血浆外泌体miR-331-5p诊断Ⅱ~Ⅲ期帕金森病的AUC、敏感度、特异度分别为0.863、70.67%、92.00%;血浆外泌体miR-331-5p诊断Ⅳ~Ⅴ期帕金森病的曲线下面积(AUC)、敏感度及特异度分别为0.768、75.00%、74.58%。结论帕金森病患者血浆外泌体miR-331-5p表达水平升高,检测血浆外泌体miR-331-5p表达量有助于评估帕金森病临床分期。 展开更多

关键词 帕金森病 血浆外泌体 mir-331-5p

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胃癌中靶向E2F1基因的miR-331真核表达载体的构建及功能 被引量：1

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作者 程力 李乐平 +4 位作者 张黎 靖昌庆 徐韬 李辰生 郭晓波 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第14期1451-1456,共6页

目的:研究构建靶向E2F1基因的miR-331真核表达载体,评估其转染人胃癌细胞株SGC-7901细胞后对E2F1基因的干扰效果及其功能,探讨miR-331在胃癌中可能的作用机制.方法:将外源性重组真核表达载体pSuper/miR-331转染到人胃癌细胞株SGC-7901内... 目的:研究构建靶向E2F1基因的miR-331真核表达载体,评估其转染人胃癌细胞株SGC-7901细胞后对E2F1基因的干扰效果及其功能,探讨miR-331在胃癌中可能的作用机制.方法:将外源性重组真核表达载体pSuper/miR-331转染到人胃癌细胞株SGC-7901内,经G418筛选并建立高表达miR-331的稳定转染细胞株.稳定表达该miR-331的细胞为SGC-7901-pSuper/miR-331组,转染空质粒细胞及未处理细胞SGC-7901-pSuper组和SGC-7901组作为对照,采用实时荧光定量PCR验证miR-331在稳定转染细胞的表达,蛋白印迹检测其对E2F1基因表达的干扰效果和SGC-7901细胞的功能.结果:与SGC-7901-pSuper组相比,转染了pSu-per/miR-331高表达质粒的SGC-7901细胞中E2F1蛋白表达明显减少,降低了4.27倍(0.206±0.037vs0.879±0.082,P<0.05);与SGC-7901-pSuper组相比,转染了pSuper/miR-331高表达质粒的SGC-7901细胞的克隆形成明显减少,降低了3.80倍(1.863±0.098vs7.074±0.182,P<0.05),而SGC-7901-pSuper组与SGC-7901组组间无统计学意义.结论:miR-331真核表达载体构建和稳定表达胃癌细胞筛选成功,为继续深入的研究miR-331在胃癌中的功能奠定了基础. 展开更多

关键词 胃癌 微小RNA-331 表达载体 SGC-7901细胞

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帕金森病患者血浆外泌体中miR-331-5p的表达及临床意义 被引量：1

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作者 马娟 马建华 +1 位作者 邵华 雷晶 《中国实用神经疾病杂志》 2023年第9期1057-1061,共5页

目的探索帕金森病(PD)患者血浆外泌体中微小RNA-331-5p(miR-331-5p)的表达及临床意义。方法选取2020-01—2022-12于新疆医科大学第一附属医院诊治的PD患者78例作为研究对象(PD组),另纳入同期无任何基础疾病的健康志愿者36例为对照组。检... 目的探索帕金森病(PD)患者血浆外泌体中微小RNA-331-5p(miR-331-5p)的表达及临床意义。方法选取2020-01—2022-12于新疆医科大学第一附属医院诊治的PD患者78例作为研究对象(PD组),另纳入同期无任何基础疾病的健康志愿者36例为对照组。检测2组患者血浆外泌体中miR-331-5p水平、血清中炎症及氧化应激指标水平,评估2组患者认知功能及精神行为症状,分析miR-331-5p与炎症、氧化应激、认知功能及精神行为症状的关系,探讨PD发病的影响因素,计算miR-331-5p对PD发病的诊断价值。结果PD组患者血浆外泌体miR-331-5p水平显著高于对照组(P<0.05)。PD组患者神经精神调查问卷(NPI)评分、PD评定量表运动检查(UPDRS)评分显著高于对照组,生活活动能力量表(ADL)评分、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分及简易精神状态检查表(MMSE)评分明显低于对照组(P<0.05)。PD组患者血清髓过氧化物酶(MPO)、白细胞介素-1β(IL-1β)、超氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)水平显著高于对照组(P<0.05)。PD组患者血浆外泌体miR-331-5p与IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD、MDA、AOPP呈正相关(P<0.05)。PD组患者血浆外泌体miR-331-5p与NPI评分、UPDRS评分呈正相关,与MoCA评分、MMSE评分、ADL评分呈负相关(P<0.05)。Logistic多因素回归分析显示miR-331-5p(OR=2.024)、MDA(OR=1.925)、UPDRS评分(OR=2.447)、MoCA评分(OR=0.544)均是PD发病的影响因素(P<0.05)。miR-331-5p诊断PD的ROC曲线下面积(AUC)为0.809(95%CI:0.715~0.903),截断值为0.833(2-ΔΔCt),灵敏度为75.6%,特异度为77.8%。结论血浆外泌体miR-331-5p与PD患者炎症、氧化应激反应、认知功能及精神行为症状密切相关,且对PD的发生具有良好的诊断价值,可为早期诊治提供新方向。 展开更多

关键词 帕金森病 微小RNA-331-5p 炎症 氧化应激

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高表达miR-331-3p下调PI3K/AKT通路抑制人肺癌A549细胞增殖 被引量：3

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作者 伊敏努尔·吐尔逊 张茜 白文梅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期689-693,共5页

目的:探讨高表达miR-331-3p对PI3K/AKT通路及肺癌A549细胞增殖的影响。方法:体外培养正常肺上皮BEAS-2B细胞和肺癌A549细胞,qRT-PCR检测miR-331-3p表达水平。阳离子脂质体LipofectamineTM 2000瞬时转染miR-331-3p mimics和mimics NC至A... 目的:探讨高表达miR-331-3p对PI3K/AKT通路及肺癌A549细胞增殖的影响。方法:体外培养正常肺上皮BEAS-2B细胞和肺癌A549细胞,qRT-PCR检测miR-331-3p表达水平。阳离子脂质体LipofectamineTM 2000瞬时转染miR-331-3p mimics和mimics NC至A549细胞为mimics阴性对照组和miR-331-3p mimics组,细胞不做任何处理为空白对照组。48 h采用qRT-PCR法检测miR-331-3p表达情况;CCK-8法检测细胞增殖情况;平板克隆实验检测菌落形成情况;Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞核相关抗原(Ki67)、脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(PI3K)、蛋白激酶B(PKB,又称AKT)、p-AKT蛋白表达情况。瞬时转染si-PI3K和si-NC后Western blot法检测PI3K蛋白表达情况。结果:与正常肺上皮BEAS-2B细胞比较,肺癌A549细胞中miR-331-3p表达水平降低(P<0.05)。与空白组、mimic阴性对照组相比,miR-331-3p mimics组miR-331-3p表达水平升高(P<0.05);36 h、48 h、60 h、72 h OD450降低(P<0.05);细胞克隆数量、PCNA、Ki67、PI3K、p-AKT蛋白表达水平降低(P<0.05)。与空白组、siRNA NC组相比,siR-PI3K组PI3K的蛋白表达量降低,miR-331-3p表达水平升高(P<0.05)。结论:高表达miR-331-3p可能通过下调PI3K/AKT通路抑制人肺癌A549细胞增殖。 展开更多

关键词 mir-331-3p 肺癌 脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B/蛋白激酶B通路 增殖

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PARK7、miR-331-5p及抗氧化酶水平与帕金森痴呆精神行为症状的相关性 被引量：7

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作者 姜黎梅 王英 郭小锋 《贵州医药》 CAS 2021年第9期1360-1363,共4页

目的探讨PARK7、miR-331-5p及抗氧化酶水平与PDD患者精神行为症状的相关性。方法将80例PDD患者依照CDR量表分为轻度组(n=50)和中重度组(n=30),另选取同期50名接受体检的健康志愿者作为对照组,所有研究对象采用NPI、UPDRS、MoCA、MMSE、... 目的探讨PARK7、miR-331-5p及抗氧化酶水平与PDD患者精神行为症状的相关性。方法将80例PDD患者依照CDR量表分为轻度组(n=50)和中重度组(n=30),另选取同期50名接受体检的健康志愿者作为对照组,所有研究对象采用NPI、UPDRS、MoCA、MMSE、ADL评估认知功能及精神行为症状,并测定各组研究对象CRP、TNF-α、MCP-1、PARK7、miR-331-5p、GSH-PX、SOD、CAT水平,分析PARK7、miR-331-5p及抗氧化酶水平与各炎症因子水平及各量表评分的相关性。结果中重度组的NPI、UPDRS评分显著高于轻度组和对照组,MoCA、MMSE、ADL评分均显著低于轻度组和对照组(P<0.05)。中重度组的血清炎症因子CRP、TNF-α、MCP-1水平显著高于轻度组(P<0.05);PD痴呆患者的CRP、TNF-α、MCP-1水平显著高于对照组(P<0.05)。中重度组患者血清PARK7、miR-331-5p表达水平显著高于轻度组和对照组,GSH-PX、SOD、CAT水平显著低于轻度组和对照组(P<0.05)。相关性分析结果显示,PARK7、miR-331-5p、GSH-PX、SOD、CAT水平与炎症因子及各量表评分存在明显相关性。结论PARK7、miR-331-5p及抗氧化酶水平与帕金森痴呆患者炎症水平及精神行为症状有关,检测其水平有助于PDD患者的临床诊断和治疗。 展开更多

关键词 帕金森痴呆 重组人帕金森病蛋白7 外泌体mir-331-5p 抗氧化酶

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miR-331-5p靶向AQP4对大鼠星形胶质细胞中DEACMP标志物表达的影响 被引量：2

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作者 贾敏 王从平 +1 位作者 刘慧纯 刘群会 《解剖学研究》 CAS 2021年第3期241-246,共6页

目的探讨一氧化碳中毒后迟发性脑病(DEACMP)标志物表达的潜在机制。方法纳入2018年7月至2020年7月于我院接受治疗的DEACMP患者36例,健康体检者32例,检测其血清中DEACMP标志物髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达水平。给大鼠腹膜内注射CO以建造大... 目的探讨一氧化碳中毒后迟发性脑病(DEACMP)标志物表达的潜在机制。方法纳入2018年7月至2020年7月于我院接受治疗的DEACMP患者36例,健康体检者32例,检测其血清中DEACMP标志物髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达水平。给大鼠腹膜内注射CO以建造大鼠DECAMP模型。造模成功的为DECAMP组大鼠,相应PBS处理的为对照组大鼠。水迷宫测试两组大鼠逃脱时间。苏木精伊红染色分析两组大鼠海马结构。高通量测序检测两组大鼠星形胶质细胞中的差异miRNA。过表达差异miRNA后,检测大鼠星形胶质细胞中DEACMP标志物MBP的表达水平。通过miRDB在线分析miRNA的潜在底物并通过荧光素酶报告实验验证。结果与健康体检者相比,DECAMP患者血清中MBP的表达水平升高(P<0.05)。DEACMP组中毒大鼠在第7天和第14天的逃脱时间比正常大鼠要长(P<0.05)。对照组海马的结构和细胞形状是正常的,而在DEACMP组中观察到神经元损伤,例如细胞萎缩,核固体收缩和结构模糊。与对照组相比,大鼠血清DEACMP标志物MBP的蛋白水平在第7天和第14天均上升(P<0.05)。过表达miR-331-5p时大鼠星形胶质细胞的MBP表达水平上升(P<0.05)。敲低miR-331-5p后,大鼠星形胶质细胞的MBP表达水平下降(P<0.05)。敲低AQP4时大鼠星形胶质细胞的MBP表达水平上升(P<0.05)。过表达AQP4后,大鼠星形胶质细胞的MBP表达水平下降(P<0.05)。过表达miR-331-5p后,AQP4的蛋白水平下降(P<0.05)。敲低miR-331-5p后,AQP4的蛋白水平上升(P<0.05)。miR-331-5p靶向AQP4的3端非编码区(P<0.05)。DEACMP模型中毒大鼠海马在AQP4上的阳性染色少于正常大鼠。结论miR-331-5p通过靶向AQP4mRNA的3端非编码区,减少了AQP4的蛋白表达水平,最终增加了大鼠星形胶质细胞中DEACMP标志物MBP的表达。 展开更多

关键词 一氧化碳中毒后迟发性脑病 mir-331-5p 水通道蛋白4 星形胶质细胞 髓磷脂碱性蛋白 大鼠

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LINC01006靶向miR-331-3p调控多发性骨髓瘤细胞的增殖、凋亡和转移的机制研究 被引量：1

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作者 李行 李强 +5 位作者 朱品伟 柘娜娜 葛金丽 周震沧 刘兆玉 陈登科 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第1期7-12,共6页

目的:探讨LINC01006靶向miR-331-3p在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)进展中的功能。方法:RT-qPCR检测39例MM患者和22例正常对照者骨髓标本来源的浆细胞中LINC01006和miR-331-3p的表达。分别转染si-LINC01006、si-NC、miR-331-3p mim... 目的:探讨LINC01006靶向miR-331-3p在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)进展中的功能。方法:RT-qPCR检测39例MM患者和22例正常对照者骨髓标本来源的浆细胞中LINC01006和miR-331-3p的表达。分别转染si-LINC01006、si-NC、miR-331-3p mimics、miR-NC、si-LINC01006+anti-miR-NC、si-LINC01006+anti-miR-331-3p至MM细胞U266,通过CCK-8、流式细胞术和Transwell法评估U266细胞抑制率、凋亡率和转移数。DIANA Tools网站预测LINC01006与miR-331-3p的相互作用,并通过双荧光素酶报告基因法进一步验证。结果:MM患者骨髓标本来源的浆细胞中LINC01006表达升高,miR-331-3p表达降低。转染si-LINC01006可增加细胞抑制率和凋亡率(P<0.05),减少细胞转移数(P<0.05),并上调miR-331-3p表达(P<0.05)。转染miR-331-3p mimics可增加细胞抑制率和凋亡率(P<0.05),减少细胞转移数(P<0.05)。miR-331-3p与LINC01006直接结合。转染anti-miR-331-3p显著逆转转染si-LINC01006对MM细胞抑制率、凋亡率和转移数的影响。结论:沉默LINC01006通过促进miR-331-3p表达来抑制MM细胞增殖和转移,诱导凋亡,从而抑制MM进展。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 LINC01006 mir-331-3p 增殖 转移 凋亡

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LINC00943调节miR-331-3p/KMT2A轴对宫颈癌细胞恶性生物学行为和上皮间质转化的影响 被引量：1

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作者 葛新苗 高倩 +2 位作者 刁丛 温美侠 李帅 《生殖医学杂志》 CAS 2024年第3期344-354,共11页

目的探讨LINC00943调节miR-331-3p/KMT2A轴对宫颈癌(CC)细胞恶性生物学行为和上皮间质转化(EMT)的影响。方法检测正常宫颈上皮细胞Ect1/E6E7和人CC细胞系(HeLa、SiHa、C33A、CaSki)中LINC00943表达,筛选HeLa细胞为最佳细胞系。Targetsca... 目的探讨LINC00943调节miR-331-3p/KMT2A轴对宫颈癌(CC)细胞恶性生物学行为和上皮间质转化(EMT)的影响。方法检测正常宫颈上皮细胞Ect1/E6E7和人CC细胞系(HeLa、SiHa、C33A、CaSki)中LINC00943表达,筛选HeLa细胞为最佳细胞系。Targetscan检索预测miR-331-3p与LINC00943、KMT2A的结合位点,培养HeLa细胞并分为sh-NC组、sh-LINC00943组、sh-LINC00943+NC inhibitor组、sh-LINC00943+miR-331-3p inhibitor组、miR-NC组、miR-331-3p mimics组、miR-331-3p mimics+pcDNA组、miR-331-3p mimics+KMT2A组,检测各组细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭情况以及EMT相关蛋白的表达水平。结果LINC00943在CC细胞系的HeLa细胞中表达量最高(P<0.05)。双荧光素酶报告实验表明,LINC00943靶向下调miR-331-3p,miR-331-3p靶向下调KMT2A。细胞实验结果显示:沉默LINC00943或过表达miR-331-3p可抑制HeLa细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,促进细胞凋亡(P<0.05);抑制miR-331-3p表达或过表达KMT2A可逆转沉默LINC00943或过表达miR-331-3p对HeLa细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的抑制作用(P<0.05)。体内肿瘤形成实验证实,沉默LINC00943可显著抑制肿瘤生长和EMT。结论LINC00943在CC细胞中高表达,沉默LINC00943可调节miR-331-3p/KMT2A轴抑制CC细胞增殖、迁移、侵袭和EMT等恶性生物学行为,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 LINC00943 mir-331-3p/KMT2A轴 宫颈癌 凋亡 上皮间质转化

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LncRNA NEAT1调控miR-331表达对鼻咽癌细胞辐射敏感性的影响 被引量：1

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作者 梁卫勤 林智 《河北医药》 CAS 2020年第19期2885-2890,共6页

目的探讨长链非编码(Lnc)RNA NEAT1通过靶向调控miR-331对鼻咽癌细胞辐射敏感性的影响。方法选取2018年1月至2019年1月手术切除鼻咽癌组织及对应的癌旁组织的患者48例样本,qRT-PCR检测Lnc RNA NEAT1在鼻咽癌及相应的癌旁组织、不同的鼻... 目的探讨长链非编码(Lnc)RNA NEAT1通过靶向调控miR-331对鼻咽癌细胞辐射敏感性的影响。方法选取2018年1月至2019年1月手术切除鼻咽癌组织及对应的癌旁组织的患者48例样本,qRT-PCR检测Lnc RNA NEAT1在鼻咽癌及相应的癌旁组织、不同的鼻咽癌细胞系中的表达情况;构建Lnc RNA NEAT1沉默细胞系SUNE-1-siNEAT1及阴性对照SUNE-1-siNC,并以SUNE-1作为空白对照;电离辐射后,采用MTT实验、Transwell、免疫荧光标记检测Lnc RNA NEAT1对SUNE-1细胞辐射敏感性、侵袭能力及DNA损伤修复的影响;使用生物信息学网站starBase预测NEAT1可互补结合的微小RNA(microRNA,miRNA),再经双荧光基因报告验证Lnc RNA NEAT1与miR-331的靶向关系。结果qRT-PCR结果显示,鼻咽癌组织中Lnc RNA NEAT1的表达水平高于癌旁正常组织,且差异有统计学意义(P<0.05),Lnc RNA NEAT1在SUNE-1细胞中表达量最高,与其他细胞株相比差异均具有统计学意义(P<0.05);成功构建Lnc RNA NEAT1沉默细胞系后,与SUNE-1组和SUNE-1-siNC组相比,SUNE-1-siNEAT1组细胞辐射后OD492nm值明显下降,细胞侵袭数量明显减少,γH2AX荧光强度明显增加,差异均具有统计学意义(P<0.05),SUNE-1组与SUNE-1-siNC组相比,差异无统计学意义(P>0.05);starBase网站预测结果显示,Lnc RNA NEAT1与miR-331存在互补结合位点,双荧光基因报告结果显示Lnc RNA NEAT1与miR-331可靶向结合。qRT-PCR证实LncRNA NEAT1负向调控miR-331的表达。结论lnc RNA NEAT1在鼻咽癌中呈高表达,沉默Lnc RNA NEAT1表达可能通过上调miR-331水平抑制鼻咽癌细胞增殖、侵袭能力,增加鼻咽癌细胞辐射敏感性。 展开更多

关键词 Lnc RNA NEAT1 mir-331 鼻咽癌细胞 辐射敏感性

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乳腺癌患者血清HOTAIR、miR-331-3p水平预测术后复发的风险模型构建与验证 被引量：1

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作者 张耀晴 段梅梅 +1 位作者 胡金华 付佳佳 《四川医学》 CAS 2024年第11期1198-1202,共5页

目的探讨乳腺癌患者血清HOX转录反义RNA(HOTAIR)、miR-331-3p水平与术后复发的关系,并构建风险模型。方法选取2019年6月至2021年6月我院乳腺癌手术患者108例为研究组,另选取同期健康体检者45例为对照组。比较两组血清HOTAIR、miR-331-3... 目的探讨乳腺癌患者血清HOX转录反义RNA(HOTAIR)、miR-331-3p水平与术后复发的关系,并构建风险模型。方法选取2019年6月至2021年6月我院乳腺癌手术患者108例为研究组,另选取同期健康体检者45例为对照组。比较两组血清HOTAIR、miR-331-3p水平,统计乳腺癌患者术后2年复发情况,采用Cox回归分析乳腺癌患者术后复发影响因素,建立列线图预测模型并验证。结果研究组血清HOTAIR、miR-331-3p水平高于对照组(P<0.05);Cox回归模型分析结果显示,临床分期Ⅲ期、人表皮生长因子受体2(HER2)阳性、血清HOTAIR与miR-331-3p高表达均为乳腺癌患者术后复发独立危险因素,雌激素受体(ER)表达阳性、孕激素受体(PR)表达阳性、术后化疗、术后内分泌治疗是保护因素(P<0.05);列线图模型预测的准确性和有效性较好。结论临床分期Ⅲ期、HER2阳性、血清HOTAIR与miR-331-3p高表达均为乳腺癌患者术后复发独立危险因素,ER阳性、PR阳性、术后化疗、术后内分泌治疗是保护因素,且据此建立的列线图模型具有较高的预测价值。 展开更多

关键词 乳腺癌 HOX转录反义RNA mir-331-3p 术后复发 列线图预测模型

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LncRNA LINC01503调控miR-331-3p/Nrf2/Keap1信号通路对缺氧诱导PC12细胞损伤的影响 被引量：1

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作者 符瑾 文立 陈丽丽 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期710-715,共6页

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)LINC01503对缺氧诱导的PC12细胞增殖、凋亡、氧化应激的影响及其对miR-331-3p/核因子相关因子(Nrf)2/Kelch样ECH相关蛋白(Keap)1信号通路的调控作用。方法采用缺氧诱导PC12细胞建立细胞损伤模型,分别将si... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)LINC01503对缺氧诱导的PC12细胞增殖、凋亡、氧化应激的影响及其对miR-331-3p/核因子相关因子(Nrf)2/Kelch样ECH相关蛋白(Keap)1信号通路的调控作用。方法采用缺氧诱导PC12细胞建立细胞损伤模型,分别将si-NC、si-LINC01503、miR-NC、miR-331-3p mimics、anti-miR-NC、anti-miR-331-3p、si-LINC01503与anti-miR-NC、si-LINC01503与anti-miR-331-3p转染至PC12细胞48 h后进行缺氧处理24 h;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测LINC01503、miR-331-3p的表达量;噻唑蓝(MTT)、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡率;检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量;双荧光素酶报告实验检测LINC01503与miR-331-3p的靶向关系;Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、裂解半胱天冬酶(Cleaved-caspase)-3、Nrf2、Keap1蛋白表达量。结果缺氧诱导的PC12细胞中LINC01503的表达水平明显升高,miR-331-3p表达、细胞活力及CyclinD1蛋白水平明显降低,凋亡率及Cleaved-caspase-3、Nrf2、Keap1蛋白水平、MDA、LDH的含量明显升高,而SOD的含量明显降低(均P<0.05);转染si-LINC01503或转染miR-331-3p mimics后可明显提高细胞活力、CyclinD1蛋白水平及SOD的含量(P<0.05),降低凋亡率、Cleaved-caspase-3、Nrf2、Keap1蛋白水平及MDA、LDH的含量(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实LINC01503可充当miR-331-3p竞争性内源RNA;共转染si-LINC01503与anti-miR-331-3p可明显逆转抑制LINC01503表达对缺氧诱导的PC12细胞增殖、凋亡、氧化应激及Nrf2/Keap1信号通路的作用。结论抑制LINC01503表达可通过上调miR-331-3p的表达而促进细胞增殖及抑制氧化应激、凋亡从而减轻缺氧诱导的PC12细胞损伤,其作用机制可能与抑制Nrf2/Keap1信号通路的活化有关。 展开更多

关键词 LncRNA LINC01503 mir-331-3p 核因子相关因子(Nrf2)/Kelch样ECH相关蛋白(Keap)1信号通路 缺氧 PC12细胞

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