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长链非编码RNA MSC-AS1通过调控miR-302c-3p/SSX2IP促进非小细胞肺癌细胞增殖 被引量:2
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作者 李永超 张天择 +1 位作者 雷加吉 徐广全 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2021年第17期2945-2951,共7页
目的:检测长链非编码RNA肌蛋白反义RNA1(musculin antisense RNA 1,MSC-AS1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织和细胞中的表达,研究其对肿瘤细胞增殖的影响并探索其机制。方法:采用qRT-PCR技术检测NSCLC肿瘤组织、... 目的:检测长链非编码RNA肌蛋白反义RNA1(musculin antisense RNA 1,MSC-AS1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织和细胞中的表达,研究其对肿瘤细胞增殖的影响并探索其机制。方法:采用qRT-PCR技术检测NSCLC肿瘤组织、癌旁组织、肺癌细胞及正常肺上皮细胞中MSC-AS1的表达;分析患者的临床病理资料与MSC-AS1表达的相关性。利用Lipofectamine TM 2000对肺癌细胞进行转染;MTT及克隆形成实验测定细胞的增殖能力;同时利用qRT-PCR测定细胞中miR-302c-3p及SSX2IP的表达变化。生物信息学方法预测MSC-AS1及miR-302c-3p的下游靶基因;双荧光素酶报告实验验证基因间的靶向结合关系。结果:MSC-AS1在肺癌组织及肺癌细胞(A549、SPC-A1和SK-MES-1)中较癌旁组织及正常肺上皮细胞BEAS-2B中表达升高(P<0.05);MSC-AS1的表达水平与癌肿TNM分期、肿瘤大小及淋巴结转移密切相关(P<0.01),并提示患者的预后不良(P<0.01);敲低MSC-AS1能够抑制肿瘤细胞的增殖(P<0.05)。MSC-AS1通过miR-302c-3p/SSX2IP轴调控NSCLC细胞的增殖。结论:LncRNA MSC-AS1能够促进NSCLC细胞的增殖并可能成为潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 长链非编码RNA MSc-AS1 mir-302c-3p SSX2IP
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bta-miR-302c影响牛病毒性腹泻病毒复制的研究
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作者 付强 陈俊贞 +7 位作者 郭妍婷 董文丽 贺渊秀 李泽宇 王万顺 姚刚 冉多良 史慧君 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第13期81-85,90,共6页
为了探索bta-miR-302c通过调控天然免疫(JAK/STAT)信号通路影响牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)复制的作用机理,试验应用miRbase、Microcosm Targets、TargetScan等生物信息学平台预测与抗病毒JAK/STAT信号通路相关... 为了探索bta-miR-302c通过调控天然免疫(JAK/STAT)信号通路影响牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)复制的作用机理,试验应用miRbase、Microcosm Targets、TargetScan等生物信息学平台预测与抗病毒JAK/STAT信号通路相关的bta-miR-302c靶基因及miRNA识别位点;将bta-miR-302c模拟物(Agomir)和阻抑物(Antagomir)以及阴性对照物(Control Agomir)转染至MDBK细胞中,采用Western-blot和实时荧光定量PCR检测SOCS3蛋白及mRNA表达情况;将SOCS3基因3′UTR miRNA识别位点及其突变体克隆至双荧光素酶报告载体pmiRGLO中,构建pmiRGLO-SOCS3-MRS和pmiRGLO-SOCS3-MRS-M质粒,再分别与bta-miR-302c Agomir共转染至HEK-293T细胞中,48 h后测定相对荧光素酶反应强度;分别将bta-miR-302c Agomir和Antagomir以及Control Agomir转染至MDBK细胞中,然后感染BVDV新疆分离株TC株,于感染后不同时间采用实时荧光定量PCR测定BVDV 5′UTR mRNA水平,Reed-Muench法测定BVDV的效价变化。结果表明:bta-miR-302c成熟序列中的UCGUGA能特异性结合SOCS3基因3′UTR的miRNA识别位点AGCACU;与pmiRGLO相比,转染pmiRGLO-SOCS3-MRS可极显著降低相对荧光素酶反应强度(P<0.01);与转染Control Agomir和bta-miR-302c Antagomir相比,转染bta-miR-302c Agomir极显著降低SOCS3蛋白表达和mRNA转录水平(P<0.01);与转染Control Agomir和bta-miR-302c Antagomir相比,BVDV感染bta-miR-302c Agomir转染的MDBK细胞12 h后其5′UTR mRNA水平和病毒效价显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。说明bta-miR-302c靶向于SOCS3基因3′UTR的miRNA识别位点,抑制靶基因的mRNA转录并降低其蛋白表达,以及抑制BVDV的复制。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 bta-mir-302c SOcS3基因 天然免疫信号通路 双荧光素酶报告系统 靶基因
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miR-302c在胃癌中表达及对胃癌细胞侵袭和迁移影响的机制研究 被引量:3
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作者 刘浩 孙丽娜 +3 位作者 卢瑗瑗 赵晓迪 王新 樊代明 《中国肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期150-154,共5页
[目的]探讨miR-302c对人胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响及机制。[方法]实时荧光定量PCR法检测miR-302c在胃癌细胞系和正常胃黏膜上皮细胞中的表达情况。在SGC7901和AGS细胞中分别转染miR-302c mimic和inhibitor后,Tranwell实验检测细胞... [目的]探讨miR-302c对人胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响及机制。[方法]实时荧光定量PCR法检测miR-302c在胃癌细胞系和正常胃黏膜上皮细胞中的表达情况。在SGC7901和AGS细胞中分别转染miR-302c mimic和inhibitor后,Tranwell实验检测细胞侵袭和迁移能力变化。实时荧光定量PCR和Western blot法检测转染后环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1(CREB1)的变化情况。[结果]与永生化的正常胃黏膜上皮细胞GES-1相比,miR-302c在胃癌细胞系SGC7901、MKN28、N87、MKN45和AGS中表达降低。转染mimic和inhibitor后,miR-302c在SGC7901和AGS中表达分别明显上调和下调(P<0.001)。Transwell实验发现,上调miR-302c后,SGC7901细胞的侵袭和迁移能力明显降低,而下调miR-302c后,AGS细胞的侵袭和迁移能力明显增强。进一步研究发现,miR-302c可抑制CREB1的表达。功能挽救实验证明CREB1可部分恢复miR-302c上调对SGC7901细胞侵袭和迁移的抑制作用。[结论] miR-302c抑制胃癌细胞的侵袭和迁移,其机制可能是通过直接靶向CREB1。 展开更多
关键词 mir-302c 胃肿瘤 侵袭 转移 cREB1
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miR-302c调控CXCL8表达抑制食管鳞状细胞癌细胞的增殖和侵袭
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作者 龚向南 苏静 +1 位作者 陈玮煦 李祥全 《蚌埠医学院学报》 CAS 2023年第12期1627-1633,共7页
目的:探讨miR-302c调控CXC趋化因子配体8(CXCL8)表达对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖和侵袭的影响。方法:收集行手术治疗的ESCC病人ESCC组织和其对应的癌旁组织,以及人ESCC细胞系Eca109、Ec9706、TE-11、TE-10、食管正常上皮细胞系Het-1... 目的:探讨miR-302c调控CXC趋化因子配体8(CXCL8)表达对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖和侵袭的影响。方法:收集行手术治疗的ESCC病人ESCC组织和其对应的癌旁组织,以及人ESCC细胞系Eca109、Ec9706、TE-11、TE-10、食管正常上皮细胞系Het-1A为研究对象,qRT-PCR检测miR-302c表达;利用LipofectamineTM2000转染试剂盒对Eca109细胞进行转染,分组为:空白组(细胞未转染)、miR-NC组、miR-302c mimics组、si-CXCL8组、si-NC组、miR-302c mimics+OE-NC组、miR-302c mimics+OE-CXCL8组,qRT-PCR检测各组细胞中miR-302c表达;MTT法检测各组细胞增殖情况;Transwell实验检测各组细胞侵袭情况;双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-302c与CXCL8靶向关系;Western blotting检测CXCL8、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达情况。结果:miR-302c在ESCC组织中的表达水平低于癌旁组织(P<0.05),与人食管正常上皮细胞系Het-1A比较,人ESCC细胞系Eca109、Ec9706、TE-11、TE-10中miR-302c表达水平降低(P<0.05),且Eca109细胞中miR-302c表达水平最低,因此,选择Eca109细胞进行后续研究;miR-302c靶向负调控CXCL8表达;上调miR-302c和沉默CXCL8均能抑制Eca109细胞的增殖与侵袭,并降低Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05);过表达CXCL8可逆转上调miR-302c对Eca109细胞增殖与侵袭的影响。结论:上调miR-302c表达可通过靶向抑制CXCL8表达,抑制ESCC细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 mir-302c cXc趋化因子配体8
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miRNA-302c在子宫内膜癌组织中的表达及其与临床病理资料的关系 被引量:8
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作者 安琪 马晓欣 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第1期127-130,共4页
目的:探讨miRNA-302c在子宫内膜癌组织中的表达及其与临床病理资料之间的关系。方法:收集中国医科大学附属盛京医院2012年-2015年子宫内膜癌患者手术标本49例及对照组正常子宫内膜组织39例,应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测... 目的:探讨miRNA-302c在子宫内膜癌组织中的表达及其与临床病理资料之间的关系。方法:收集中国医科大学附属盛京医院2012年-2015年子宫内膜癌患者手术标本49例及对照组正常子宫内膜组织39例,应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测子宫内膜癌组织及正常子宫内膜组织中miRNA-302c的表达情况,分析miRNA-302c在子宫内膜癌组织中的表达与临床病理资料之间的关系。结果:miRNA-302c在子宫内膜癌组织中的表达水平低于正常子宫内膜组织,其差异具有统计学意义(P=0.048,<0.05)。miRNA-302c在手术分期为Ⅰ期的子宫内膜癌组织中的表达与其在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期的表达进行比较,差异有统计学意义(P=0.010,<0.05);miRNA-302c在不同组织学分化程度(高、中、低分化)的子宫内膜癌组织中的表达的差异具有统计学差异(P=0.035,<0.05);有淋巴结转移与无淋巴结转移的子宫内膜癌组织中,miRNA-302c表达水平差异具有统计学意义(P=0.008,<0.05);而miRNA-302c在子宫内膜癌组织中的表达情况与其他临床病理资料之间无明显统计学关系。结论:miRNA-302c在子宫内膜癌组织中的表达低于正常子宫内膜组织,其差异具有统计学意义。另外,在不同手术病理分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期),不同的组织学分化程度(高、中、低分化),有、无淋巴结转移的子宫内膜癌组织中,miRNA-302c表达水平具有统计学差异。综上所述,miRNA-302c与子宫内膜癌的发生、手术分期、组织学分化程度,有无淋巴结转移存在一定的相关性。 展开更多
关键词 miRNA-302c 子宫内膜癌 临床病理资料
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