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miR-252-5p通过靶向调控保幼激素酸甲基转移酶基因JHAMT的表达而影响果蝇变态发育 被引量：3
1
作者 张泽麟 嵇杰 +4 位作者 徐文雨 刘卓 范晓春 邓昌鑫 何倩毓 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期799-806,共8页
【目的】保幼激素酸甲基转移酶(juvenile hormone acid methyl transferase,JHAMT)是保幼激素(juvenile hormone,JH)合成通路中的关键限速酶。本研究旨在筛选并验证靶向调控黑腹果蝇Drosophila melanogaster JHAMT转录表达的miRNA,揭示m... 【目的】保幼激素酸甲基转移酶(juvenile hormone acid methyl transferase,JHAMT)是保幼激素(juvenile hormone,JH)合成通路中的关键限速酶。本研究旨在筛选并验证靶向调控黑腹果蝇Drosophila melanogaster JHAMT转录表达的miRNA,揭示miRNA在JH生物合成中的作用机理。【方法】首先通过miRanda,TargetScan和microT-CDS在线网站对靶向黑腹果蝇JHAMT的miRNA进行预测,取3个网站均能预测到的miRNA作为候选靶向JHAMT的miRNA;利用双荧光素酶系统对候选miRNA与JHAMT的靶向关系进行验证;qRT-PCR检测候选miRNA与JHAMT在黑腹果蝇生长发育中的表达模式;利用qRT-PCR和果蝇GAL4-UAS系统分别检测黑腹果蝇咽侧体中超表达miRNA对JHAMT的表达以及对黑腹果蝇变态发育的影响。【结果】miRanda,TargetScan和microT-CDS分别预测到5,18和16个靶向JHAMT的miRNA,共同预测到4个miRNA,分别是miR-252-5p,miR-277-3p,miR-1002-5p和miR-987-5p。双荧光素酶检测结果表明,miR-252-5p mimics可显著降低野生型JHAMT 3′UTR荧光素酶报告基因载体所表达的荧光素酶活性,而JHAMT 3′UTR区中miR-252-5p结合位点突变后,该抑制作用被解除。qRT-PCR检测结果表明,miR-252-5p与JHAMT在黑腹果蝇卵、幼虫及预蛹期的转录表达模式相反。咽侧体中超表达miR-252后,可显著降低JHAMT和JH初级反应基因Kr-h1的表达水平;且表现出类似JH缺失的表型,如化蛹时间推迟、体重变轻以及蛹期死亡增加。【结论】miR-252-5p可通过靶向作用于JHAMT参与JH生物合成调控,从而影响果蝇变态发育。 展开更多
关键词 黑腹果蝇 miRNA 靶基因 保幼激素甲基转移酶 mir-252-5p 变态发育
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miR-188-5p在激素性股骨头坏死中的表达
2
作者 李从达 袁峰 +5 位作者 林祥波 周洪杰 王国宗 李国鹏 韦标方 秦明 《中国矫形外科杂志》 北大核心 2026年第1期75-80,共6页
[目的]探究miR-188-5p在激素性股骨头坏死(glucocorticoid-induced osteonecrosis of the femoral head, GIONFH)中的表达及其作用机制。[方法]采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription polymerase ... [目的]探究miR-188-5p在激素性股骨头坏死(glucocorticoid-induced osteonecrosis of the femoral head, GIONFH)中的表达及其作用机制。[方法]采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction, qRT-PCR)和免疫蛋白印迹(Western blot, WB)检测5例GIONFH患者和5例股骨颈骨折患者髋关节置换术后的股骨头组织中miR-188-5p和HDAC9的表达情况。在体外将人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stromal cells, BMSCs)分别转染miR-188-5p mimics(过表达组)、miR-188-5p inhibitor(抑制组)、miR-NC(对照组)、miR-188-5p mimics及HDAC9质粒的过表达HDAC9组(HDAC9组)。行相应标志物q RT-PCR和WB检测。[结果]与股骨颈骨折患者相比,GIONFH患者骨样本中miR-188-5p表达显著上调[(0.6±0.3) vs(2.8±0.5), P<0.001],而HDAC9表达显著下降[(3.0±1.2) vs(0.8±0.3), P<0.001]。体外试验方面,与对照组相比,miR-188-5p过表达时BMSCs中Runx2、Osterix和HDAC9 mRNA和蛋白的表达水平显著下调(P<0.05),而HDAC9过表达则逆转了这一结果(P<0.05)。生物信息学分析及双荧光素酶报告基因实验验证了HDAC9是miR-188-5p的靶基因。[结论]在GIONFH患者骨组织中miR-188-5p表达增加,HDAC9表达减少。miR-188-5p可抑制BMSC成骨细胞分化,作用机制可能与靶向作用HDAC9有关。 展开更多
关键词 激素性股骨头坏死 骨髓间充质干细胞 成骨分化 mir-188-5p HDAC9
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紫花前胡素通过miR-17-5p靶向PI3K/Akt通路对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响
3
作者 吕九娣 彭昕 +2 位作者 邢玉广 王俊杰 胡军红 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2026年第1期76-81,共6页
目的探讨紫花前胡素(Decursin,DE)对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响及其具体机制。方法选取SW480、HCoEpiC细胞进行实验,qRT-PCR法检测两种细胞系中miR-17-5p表达水平。CCK-8法检测不同DE浓度梯度(0、10、30、60和100μmol/L)下SW480细... 目的探讨紫花前胡素(Decursin,DE)对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响及其具体机制。方法选取SW480、HCoEpiC细胞进行实验,qRT-PCR法检测两种细胞系中miR-17-5p表达水平。CCK-8法检测不同DE浓度梯度(0、10、30、60和100μmol/L)下SW480细胞增殖活性。qRT-PCR法检测SW480细胞中miR-17-5p(mimic/inhibitor)的转染效率,CCK-8法检测转染后细胞增殖活性,Transwell实验检测迁移细胞数。建立转染(mimic/inhibitor)组与转染(mimic/inhibitor)+DE组SW480细胞,采用qRT-PCR法检测miR-17-5p表达量变化,CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell实验检测迁移细胞数,Western blot法检测PIK3R1、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白表达量变化。双荧光素酶报告基因实验检测miR-17-5p与PI3K的靶向作用。结果SW480细胞miR-17-5p表达水平高于HCoEpiC细胞(P<0.05)。SW480细胞增殖活性随DE处理浓度的升高呈现浓度依赖性降低(P<0.05);选择60μmol/L DE用于后续实验。miR-17-5p mimic/inhibitor可显著升高/降低SW480细胞中miR-17-5p的表达量、细胞增殖活性和细胞迁移数(均P<0.05)。加入DE后各组miR-17-5p表达量、细胞增殖活性、细胞迁移数以及p-PI3K和p-Akt蛋白表达量降低(均P<0.05),PIK3R1蛋白表达量升高(P<0.05),PI3K、Akt蛋白表达量无明显变化。共转染miR-17-5p与Wt-PIK3R1,荧光素酶相对活性随miR-17-5p表达量的升高/降低而降低/升高(均P<0.05)。共转染miR-17-5p与Mut-PIK3R1,荧光素酶相对活性无显著变化(P>0.05)。结论DE可抑制结直肠癌细胞增殖和迁移,其机制可能是通过下调miR-17-5p从而促进PIK3R1表达,抑制PI3K/Akt通路发挥作用。 展开更多
关键词 结直肠癌 紫花前胡素 细胞增殖 细胞迁移 mir-17-5p
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lncRNA FGD5-AS1靶向miR-512-3p/RAB31抑制膀胱癌细胞增殖、侵袭和上皮-间质转化
4
作者 李富博 李爱科 +5 位作者 饶井芬 刘宝兴 石方玉 李文鑫 杨春丽 林萍萍 《中国医科大学学报》 北大核心 2026年第1期33-40,共8页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FGD5反义RNA 1(FGD5-AS1)、miR-512-3p和Ras相关蛋白31(RAB31)在膀胱癌进展中的作用和调控机制。方法收集2019年1月至2021年12月于承德医学院附属医院行手术治疗的60例膀胱癌患者肿瘤组织及癌旁组织,并体... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FGD5反义RNA 1(FGD5-AS1)、miR-512-3p和Ras相关蛋白31(RAB31)在膀胱癌进展中的作用和调控机制。方法收集2019年1月至2021年12月于承德医学院附属医院行手术治疗的60例膀胱癌患者肿瘤组织及癌旁组织,并体外培养膀胱癌细胞系(5637、KU-19-19、T24、UM-UC-3)和正常尿路上皮细胞系(SV-HUC-1)。采用实时定量PCR检测肿瘤组织和癌旁组织以及膀胱癌细胞中FGD5-AS1、miR-512-3p和RAB31 mRNA表达,Pearson相关分析确定膀胱癌患者癌组织中miR-512-3p与FGD5-AS1、RAB31 mRNA表达之间的相关性。将sh-NC、sh-FGD5-AS1、sh-FGD5-AS1和NC抑制剂、sh-FGD5-AS1和miR-512-3p抑制剂转染至T24细胞中,分别记为阴性对照组、FGD5-AS1沉默组、抑制剂对照组、联合组;另设置正常组(不转染)。用CCK-8法检测细胞活力;Transwell小室测定细胞迁移和侵袭能力;Western blotting检测RAB31和E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)表达;双萤光素酶报告基因和RNA Pull down实验检测miR-512-3p与FGD5-AS1和RAB31的靶向关系。结果膀胱癌组织与细胞中FGD5-AS1、RAB31 mRNA呈高表达,miR-512-3p呈低表达(P<0.05),且膀胱癌患者癌组织中FGD5-AS1、RAB31 m RNA的表达与mi R-512-3p表达呈负相关,FGD5-AS1与RAB31 mRNA表达呈正相关(r=-0.779、-0.649、0.652,均P<0.001)。沉默FGD5-AS1可上调miR-512-3p表达,下调RAB31 mRNA和蛋白表达,降低细胞活力、迁移和侵袭数以及N-cadherin、vimentin水平,升高E-cadherin水平(P<0.05);敲低miR-512-3p表达可明显减弱沉默FGD5-AS1对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭以及上皮-间质转化(EMT)进程的抑制作用(P<0.05);FGD5-AS1可以海绵化miR-512-3p,而RAB31是miR-512-3p的靶标。结论沉默FGD5-AS1可能通过上调miR-512-3p、下调RAB31表达抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT进程。 展开更多
关键词 膀胱癌 增殖 上皮-间质转化 长链非编码RNA FGD5-AS1 mir-512-3p/Ras相关蛋白31
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MiR-138-5p对慢性压迫性损伤大鼠神经病理性疼痛的作用及可能机制
5
作者 毛轲 高誉华 +4 位作者 周松林 赵彦芬 张原源 杜思龙 李喜龙 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2026年第1期60-66,共7页
目的:探讨miR-138-5p对慢性压迫性损伤(CCI)大鼠神经病理性疼痛的作用及可能机制。方法:采用双荧光素酶报告实验验证miR-138-5p与肿瘤坏死因子诱导蛋白1(Tnfaip1)的靶向关系。大鼠分为假手术组、模型组(CCI)、阴性对照组(CCI+转染模拟... 目的:探讨miR-138-5p对慢性压迫性损伤(CCI)大鼠神经病理性疼痛的作用及可能机制。方法:采用双荧光素酶报告实验验证miR-138-5p与肿瘤坏死因子诱导蛋白1(Tnfaip1)的靶向关系。大鼠分为假手术组、模型组(CCI)、阴性对照组(CCI+转染模拟物阴性对照)、miR-138-5p组(CCI+转染miR-138-5p模拟物)和阳性对照组(CCI+加巴喷丁),每组45只。每组各取10只大鼠,于CCI术后第0、3、7、14、21天,测量机械缩爪阈值(PWT)和缩爪潜伏期(PWL);余35只在上述5个时间点各处死7只,取背根神经节组织,采用RT-qPCR检测miR-138-5p,采用ELISA法检测IL-6、TNF-α含量(仅检测第0、7、14天)。分离正常大鼠背根神经节卫星胶质细胞,分为空白对照组、LPS组(1 mg/L LPS处理2 h)、阴性对照组、miR-138-5p组和miR-138-5p+Tnfaip1组,后3组分别转染相应质粒后再用LPS处理2 h。分别采用RT-qPCR和Western blot法检测miR-138-5p和Tnfaip1、核NF-κB蛋白的表达,ELISA法检测IL-6、TNF-α分泌量,双染法检测细胞凋亡率。结果:双荧光素酶报告实验证实miR-138-5p和Tnfaip1存在靶向关系。与假手术组相比,模型组PWT和PWL降低,背根神经节组织中miR-138-5p表达水平降低,IL-6和TNF-α含量升高(P<0.05);与模型组相比,miR-138-5p组PWT和PWL升高,IL-6和TNF-α含量降低(P<0.05)。体外细胞实验表明,与空白对照组相比,LPS组miR-138-5p表达水平降低,IL-6和TNF-α分泌量增加,细胞凋亡率升高,Tnfaip1、核NF-κB p65蛋白表达水平升高(P<0.05);与LPS组相比,miR-138-5p组上述指标的变化发生逆转,而miR-138-5p+Tnfaip1组上述逆转作用减弱(P<0.05)。结论:miR-138-5p可能通过靶向抑制Tnfaip1介导的NF-κB信号通路减轻CCI大鼠神经病理性疼痛。 展开更多
关键词 神经病理性疼痛 慢性压迫性损伤 mir-138-5p 肿瘤坏死因子诱导蛋白1 NF-ΚB信号通路 大鼠
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二参真武汤对慢性心力衰竭miR-423-5p/Smad7/TGF-β1/Smads轴及心肌纤维化指标的临床疗效
6
作者 葛岚 朱振鹏 +4 位作者 王新悦 程丹 刘玉龙 张毛毛 程晓昱 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2026年第3期157-165,共9页
目的:探讨二参真武汤治疗慢性心力衰竭(以下简称心衰)心肾阳虚血瘀证的临床疗效及对miR-423-5p/Smad7/转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads轴和心肌纤维化指标的调节作用。方法:以114例射血分数降低的心衰(HFrEF)和射血分数轻度降低的心衰(... 目的:探讨二参真武汤治疗慢性心力衰竭(以下简称心衰)心肾阳虚血瘀证的临床疗效及对miR-423-5p/Smad7/转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads轴和心肌纤维化指标的调节作用。方法:以114例射血分数降低的心衰(HFrEF)和射血分数轻度降低的心衰(HFmrEF)为研究对象,随机分成对照组和观察组,每组57例。对照组给予达格列净片、沙库巴曲缬沙坦钠片、琥珀酸美托洛尔及螺内酯等常规治疗,观察组在对照组基础上加用二参真武汤治疗;疗程8周。观察两组治疗前后6 min步行距离(6MWT)、纽约心脏协会(NYHA)心功能分级、明尼苏达心力衰竭生活质量调查表(MLHFQ)、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)、血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、左心室射血分数(LVEF)、左室舒张末内径(LVIDd)、左室收缩末内径(LVIDs)、室间隔厚度(IVSd)、左室舒张末期后壁厚度(LVPWd)、左心室缩短分数(FS)、miR-423-5p、Smad7、Smad2、Smad3、Smad4、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原(Co Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)、心肌组织纤连蛋白(Fn)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) mRNA,评价心功能疗效和药物安全性。结果:与本组治疗前比较,治疗后两组患者NT-proBNP、Ang Ⅱ、miR-423-5p、Smad2、Smad3、Smad4、TGF-β1、Col Ⅰ、Col Ⅲ、Fn及α-SMA mRNA明显下降(P<0.05),与对照组治疗后比较,观察组上述指标水平更低(P<0.05);与本组治疗前比较,治疗后两组Smad7明显升高(P<0.05),与对照组治疗后比较,观察组Smad7更高(P<0.05)。与本组治疗前比较,治疗后两组MLHFQ评分明显下降,6MWT明显升高(P<0.05);与对照组治疗后比较,观察组MLHFQ评分明显降低(P<0.05),6MWT明显升高(P<0.05)。与本组治疗前比较,治疗后对照组LVEF、FS明显升高(P<0.05),观察组LVIDd、LVIDs明显减少,LVEF、FS明显升高(P<0.05),与对照组治疗后比较,观察组LVIDd、LVIDs明显降低(P<0.05),LVEF、FS明显升高(P<0.05)。观察组心功能疗效总有效率为90.38%(47/52),高于对照组的70.59%(36/51)(X2=8.273,P<0.05)。研究过程中没有发现服用二参真武汤相关不良反应。结论:采用二参真武汤治疗HFrEF、HFmrEF(心肾阳虚血瘀证)患者,能提高心功能,改善运动耐量和生活质量,调节神经内分泌因子,还能减缓/逆转心肌重构,其作用机制可能与调节miR-423-5p/Smad7/TGF-β1/Smads轴,抑制α-SMA、Fn表达,减轻心肌纤维化有关,值得进一步深入研究。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 心肾阳虚血瘀证 二参真武汤 心肌纤维化 转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路 mir-423-5p SMAD7 纤连蛋白 Α-平滑肌肌动蛋白
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超声参数联合血清miR-129-5p、miR-654-5p对乳腺癌的诊断价值
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作者 代妮娜 张文君 张华 《检验医学与临床》 2026年第1期1-6,共6页
目的探讨超声参数联合血清miR-129-5p、miR-654-5p对乳腺癌的诊断价值。方法选取2021年12月至2023年12月在湖北省十堰市太和医院住院进行手术治疗的93例女性乳腺癌患者作为乳腺癌组,同期收治的93例女性乳腺良性病变患者作为良性组,另选... 目的探讨超声参数联合血清miR-129-5p、miR-654-5p对乳腺癌的诊断价值。方法选取2021年12月至2023年12月在湖北省十堰市太和医院住院进行手术治疗的93例女性乳腺癌患者作为乳腺癌组,同期收治的93例女性乳腺良性病变患者作为良性组,另选取同期在湖北省十堰市太和医院体检的93例女性健康体检者作为对照组。所有研究对象均进行超声检查,并记录相关参数[最大血流速度(V_(max))、血流阻力指数(RI)、搏动指数(PI)];采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测所有研究对象血清miR-129-5p、miR-654-5p水平;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析V_(max)、RI、PI及血清miR-129-5p、miR-654-5p对乳腺癌的诊断价值。结果良性组、乳腺癌组血清miR-129-5p、miR-654-5p水平均明显低于对照组,且乳腺癌组血清miR-129-5p、miR-654-5p水平均低于良性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。良性组、乳腺癌组V_(max)、RI、PI均明显高于对照组,且乳腺癌组V_(max)、RI、PI均高于良性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、中低分化程度的乳腺癌患者血清miR-129-5p、miR-654-5p低表达比例均高于TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、高分化程度的乳腺癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,V_(max)、RI、PI、miR-129-5p、miR-654-5p联合诊断乳腺癌的曲线下面积(AUC)为0.892,大于5项单独诊断的AUC(0.712、0.783、0.720、0.648、0.718),差异均有统计学意义(Z=4.013、4.215、3.889、6.223、3.887,P<0.05)。结论乳腺癌患者血清miR-129-5p、miR-654-5p水平均降低,超声参数(V_(max)、RI、PI)均升高,超声参数联合血清miR-129-5p、miR-654-5p诊断乳腺癌的价值较高。 展开更多
关键词 超声参数 mir-129-5p mir-654-5p 乳腺癌 诊断价值 微小RNA
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帕金森病患者血清miR-152-3p和miR-384-5p表达与疾病分期及认知功能的关系
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作者 宋世雄 牛荣荣 +1 位作者 宋蕾 王琰 《脑与神经疾病杂志》 2026年第1期30-34,共5页
目的探讨帕金森病(PD)患者血清中miR-152-3p和miR-384-5p的表达变化,探讨其与疾病进展阶段及患者认知功能之间的联系。方法选取2021年3月至2024年3月在邯郸市中医院确诊的PD患者140例为试验组,并参考Hoehn-Yahr分级(H-Y分级),分为早期P... 目的探讨帕金森病(PD)患者血清中miR-152-3p和miR-384-5p的表达变化,探讨其与疾病进展阶段及患者认知功能之间的联系。方法选取2021年3月至2024年3月在邯郸市中医院确诊的PD患者140例为试验组,并参考Hoehn-Yahr分级(H-Y分级),分为早期PD组、中期PD组、晚期PD组。选取同期入院的健康志愿者70例为对照组。分别检测两组人群miR-152-3p和miR-384-5p的表达水平。结果试验组血清中miR-384-5p表达水平(1.42±0.39)高于对照组(1.08±0.36)(t=6.107,P<0.05),试验组血清中miR-152-3p表达水平(0.57±0.21)低于对照组(1.11±0.37),差异有统计学意义(t=10.984,P<0.05);miR-384-5p表达水平晚期PD组高于中期PD组、中期PD组高于早期PD组(F=17.899,P<0.05),miR-152-3p表达水平早期PD组高于中期PD组、中期PD组高于晚期PD组,差异有统计学意义(F=34.008,P<0.05);不同病程阶段有无认知功能障碍者比较,差异有统计学意义(t=2.243,P<0.05);有认知功能障碍者血清中miR-152-3p表达水平低于无认知功能障碍者,差异有统计学意义(t=2.830,P<0.05);有认知功能障碍者血清中miR-384-5p表达水平高于无认知功能障碍者,差异有统计学意义(t=8.082,P<0.05);病程、miR-384-5p水平是独立发生PD认知功能障碍的危险因素,差异有统计学意义(OR_(病程)=1.894,OR_(miR-384-5p)=1.307,P<0.05);miR-152-3p水平是发生PD认知功能障碍的保护因素,差异有统计意义(OR_(miR-152-3p)=0.856,P<0.05);两者联合诊断的曲线下面积(AUC)为0.925,敏感性、特异性分别为94.81%、79.37%,优于各自单独诊断(Z_(两者联合-miR-384-5p)=2.125、Z_(两者联合-miR-152-3p)=2.508,P=0.034、0.012)。结论PD患者血清中,miR-384-5p表达升高,而miR-152-3p表达下降,miR-152-3p与miR-384-5p的表达水平进行联合分析,能够为PD患者的疾病分期及认知功能评估提供强有力的临床依据,展现出重要的诊断与监测价值。 展开更多
关键词 mir-152-3p mir-384-5p 帕金森病 分期 认知功能
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非小细胞肺癌患者血清miR-515-5p、HOXB13水平及其与临床病理特征和预后的关系
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作者 魏晓群 陈耀丰 +2 位作者 赖其廷 刘剑 张培芳 《中国临床新医学》 2026年第2期207-213,共7页
目的 分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清miR-515-5p、同源盒蛋白B13(HOXB13)水平及其与临床病理特征和预后的关系。方法 招募2019年7月至2021年7月佛山市第一人民医院收治的118例NSCLC患者作为研究组,另选取同期118名体检健康者作为对照... 目的 分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清miR-515-5p、同源盒蛋白B13(HOXB13)水平及其与临床病理特征和预后的关系。方法 招募2019年7月至2021年7月佛山市第一人民医院收治的118例NSCLC患者作为研究组,另选取同期118名体检健康者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测血清miR-515-5p、HOXB13 mRNA的相对表达量。患者出院后随访3年。根据随访期间患者生存情况将其分为预后不良组(51例)和预后良好组(67例)。采用Pearson相关分析miR-515-5p水平与HOXB13水平的相关性。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,以log-rank检验进行组间比较。采用Cox回归分析NSCLC患者发生死亡的影响因素。结果 研究组miR-515-5p水平显著低于对照组(P<0.05),HOXB13水平显著高于对照组(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,NSCLC患者miR-515-5p水平与HOXB13水平呈负相关(r=-0.742,P<0.001)。miR-515-5p、HOXB13水平与临床分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05),与年龄、性别、病理类型、肿瘤直径无显著关联(P >0.05)。预后不良组血清miR-515-5p水平显著低于预后良好组(P<0.05),HOXB13水平显著高于预后良好组(P<0.05)。miR-515-5p高表达(≥0.50)患者的生存预后显著优于低表达(<0.50)患者(log-rank检验:χ^(2)=36.627,P<0.001)。HOXB13低表达(<2.08)患者的生存预后显著优于高表达(≥2.08)患者(log-rank检验:χ^(2)=12.755,P<0.001)。多因素Cox回归分析结果显示,高表达HOXB13、临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、低分化程度、淋巴结转移是患者发生死亡的危险因素(P<0.05),高表达miR-515-5p是抑制患者发生死亡的保护因素(P<0.05)。结论 NSCLC患者血清miR-515-5p水平降低,HOXB13水平升高,二者与患者临床病理特征及预后有关。 展开更多
关键词 mir-515-5p 同源盒蛋白B13 非小细胞肺癌 临床病理特征 预后
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BANCR/miR-145-5p-Reg3A/DMBT1轴驱动AKT-GLUT1/HK2介导的胃癌Warburg效应
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作者 王亮 梁育飞 +1 位作者 赵艳 林杉 《肿瘤防治研究》 2026年第2期112-120,共9页
目的探究BANCR/miR-145-5p轴通过下游靶点Reg3A/DMBT1调控AKT-GLUT1/HK2通路介导胃癌Warburg效应的分子机制。方法采用RT-qPCR、Western blot检测胃癌组织及细胞系中BANCR、miR-145-5p、Reg3A/DMBT1的表达;双荧光素酶报告基因实验验证... 目的探究BANCR/miR-145-5p轴通过下游靶点Reg3A/DMBT1调控AKT-GLUT1/HK2通路介导胃癌Warburg效应的分子机制。方法采用RT-qPCR、Western blot检测胃癌组织及细胞系中BANCR、miR-145-5p、Reg3A/DMBT1的表达;双荧光素酶报告基因实验验证靶向调控关系;葡萄糖摄取检测评估糖酵解能力;免疫组织化学分析60对临床样本分子表达;Kaplan-Meier和Cox回归评估BANCR/miR-145-5p-Reg3A/DMBT1轴关键分子的预后价值。结果胃癌组织中BANCR显著高表达而miR-145-5p低表达,与TNM分期晚、淋巴结转移及低分化显著相关。Reg3A和DMBT1被证实为miR-145-5p直接靶标。敲低BANCR或过表达miR-145-5p可显著抑制Reg3A/DMBT1表达,降低AKT磷酸化及GLUT1/HK2水平,从而抑制糖酵解过程。临床分析显示Reg3A/DMBT1高表达与糖酵解标志物呈正相关,且是胃癌不良预后的独立危险因素。结论BANCR/miR-145-5p轴通过靶向Reg3A/DMBT1激活AKT信号通路,促进GLUT1/HK2/LDHA介导的糖酵解,驱动胃癌Warburg效应。该轴可作为胃癌治疗的潜在靶点及预后评估标志物。 展开更多
关键词 胃癌 Warburg效应 BANCR/mir-145-5p轴 糖酵解调控 AKT信号通路
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miR-218-5p减轻高糖诱导的小鼠肾足细胞系MPC5损伤
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作者 余渊 胡艺琼 向庆伟 《基础医学与临床》 2026年第2期170-176,共7页
目的探讨miR-218-5p调控基质金属蛋白酶组织抑制因子2(TIMP2)在高糖(HG)诱导小鼠肾足细胞系MPC5损伤中的作用及其机制。方法将MPC5细胞分为对照组、HG组、NC-mimics组、miR-218-5p-mimics组、miR-218-5p-mimics+pcDNA-NC组和miR-218-5p-... 目的探讨miR-218-5p调控基质金属蛋白酶组织抑制因子2(TIMP2)在高糖(HG)诱导小鼠肾足细胞系MPC5损伤中的作用及其机制。方法将MPC5细胞分为对照组、HG组、NC-mimics组、miR-218-5p-mimics组、miR-218-5p-mimics+pcDNA-NC组和miR-218-5p-mimics+pcDNA-TIMP2组。除对照组外,其余各组均采用30 mmol/L葡萄糖处理24 h。采用RT-qPCR检测miR-218-5p和TIMP2 mRNA的表达水平;CCK-8法与流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡;ELISA试剂盒检测活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;Western blot检测相关蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-218-5p与TIMP2的靶向关系。结果与对照组相比,HG组A 450值、miR-218-5p表达和SOD活性降低,细胞凋亡率、TIMP2 mRNA和蛋白表达、ROS活性、MDA含量及cleaved caspase-3表达均升高(P<0.05)。与HG组和NC-mimics组相比,miR-218-5p-mimics组的A 450值、miR-218-5p表达和SOD活性升高,而凋亡率、TIMP2 mRNA和蛋白表达、ROS活性、MDA含量及cleaved caspase-3表达均降低(P<0.05)。与miR-218-5p-mimics组和miR-218-5p-mimics+pcDNA-NC组相比,miR-218-5p-mimics+pcDNA-TIMP2组的A 450值和SOD活性降低,而凋亡率、TIMP2 mRNA和蛋白表达、ROS活性、MDA含量及cleaved caspase-3表达均升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-218-5p可靶向负调控TIMP2。结论miR-218-5p过表达可减轻高糖诱导的足细胞损伤,其保护作用可能通过靶向负调控TIMP2实现。 展开更多
关键词 mir-218-5p 基质金属蛋白酶抑制因子2 高糖 糖尿病肾病 足细胞损伤
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miR-488-5p促进大鼠骨髓间充质干细胞成神经、成骨分化及神经化骨再生
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作者 曾立婷 程凯远 +3 位作者 刘中宁 李健 杨静文 姜婷 《北京大学学报(医学版)》 北大核心 2026年第1期10-21,共12页
目的:探讨miR-488-5p促进大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs)成神经或成骨分化的作用,以及对神经化骨再生的影响。方法:体外诱导rBMSCs向成神经或成骨向分化,实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative ... 目的:探讨miR-488-5p促进大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs)成神经或成骨分化的作用,以及对神经化骨再生的影响。方法:体外诱导rBMSCs向成神经或成骨向分化,实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测成神经或成骨分化过程中不同时间点(第0、2、4、7天)miR-488-5p的表达水平。建立miR-488-5p模拟物组、miR-488-5p抑制剂组以及各自的阴性对照组(negative control,NC)共四组,分别探讨miR-488-5p对rBMSCs神经向分化及成骨向分化的影响。构建大鼠颅骨缺损模型(直径5 mm全层圆形临界骨缺损),光固化甲基丙烯酰化明胶(gelatin methacryloyl,GelMA)负载rBMSCs形成以下四组并进行体内成骨实验:(1)BLANK组:GelMA;(2)BMSCs组:GelMA+rBMSCs;(3)NC-BMSCs组:GelMA+转染miR-488-5p模拟物NC的rBMSCs;(4)miR-488-5p-BMSCs组:GelMA+转染miR-488-5p模拟物的rBMSCs。术后4周和8周获取标本,进行显微CT扫描及影像学骨参数分析,并通过苏木精-伊红染色、Masson染色和神经特异性蛋白可溶性蛋白100(soluble protein-100,S100)组织免疫荧光染色,评估缺损区神经化组织工程骨的生成效果。结果:成功诱导rBMSCs向成神经或成骨向分化,在rBMSCs成神经或成骨向分化过程中,miR-488-5p从第0天至第7天表达水平均显著升高。给予干预后,rBMSCs的模拟物组成神经相关基因及蛋白表达较其对照组增高,抑制剂组则呈相反结果;模拟物组的成骨相关基因及蛋白表达较其对照组增高,碱性磷酸梅(alkaline phosphatase,ALP)染色及茜素红染色加深,ALP活性增强,抑制剂组则呈相反结果。骨缺损动物模型结果显示,术后4周和8周,BLANK组新生骨量最少,BMSCs组和NC-BMSCs组新生骨量居中且相近,miR-488-5p-BMSCs组新生骨量最多,4周时miR-488-5p-BMSCs组骨矿物质密度[(0.63±0.05)g/cm^(3)vs.(0.51±0.03)g/cm^(3)]、骨体积分数(33.17%±6.43%vs.18.11%±1.52%)、骨表面积密度[(3.43±0.69)/mm vs.(2.46±0.20)/mm]及骨小梁数量[(0.92±0.21)/mm vs.(0.59±0.07)/mm]显著高于NC-BMSCs组,8周时miR-488-5p-BMSCs组的骨矿物质密度[(0.80±0.04)g/cm^(3)vs.(0.68±0.04)g/cm^(3)]、骨体积分数(56.69%±6.22%vs.42.36%±3.86%)及新生骨周围被S100标记的神经细胞数量(46.33±4.04 vs.26.00±3.61)显著高于NC-BMSCs组。结论:miR-488-5p同时具有促进rBMSCs成神经及成骨分化的作用,并促进大鼠颅骨缺损神经化组织工程骨的形成。 展开更多
关键词 mir-488-5p 骨髓间充质干细胞 成骨分化 神经向分化 神经-骨组织工程
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miR-17-5p在口腔鳞癌热疗中调控机制的研究
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作者 许春炜 周昊 +2 位作者 廖楚航 叶美智 白云 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2026年第1期38-42,共5页
目的:研究热疗对口腔鳞状细胞癌(OSCC)动物模型中miR-17-92基因簇表达的影响。方法:将口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞接种于裸鼠,使用水浴加热法构建荷瘤裸鼠肿瘤加热模型,使用RT-PCR与Westernblot筛选目标基因簇。使用生理盐水、miR-17-5p... 目的:研究热疗对口腔鳞状细胞癌(OSCC)动物模型中miR-17-92基因簇表达的影响。方法:将口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞接种于裸鼠,使用水浴加热法构建荷瘤裸鼠肿瘤加热模型,使用RT-PCR与Westernblot筛选目标基因簇。使用生理盐水、miR-17-5p模拟物与阴性模拟物(n=10),分别注射于裸鼠瘤体内,用RT-PCR与Western blot检测裸鼠体内基因变化,并进行凋亡实验验证。结果:肿瘤加热时,miR-17-5p表达明显降低,注射了miR-17-5p模拟物的移植瘤模型中肿瘤生长趋势加快,肿瘤大体生长迅速,HIF-1α和VEGF的表达水平升高,凋亡减少。结论:miR-17-5p可能作为口腔鳞状细胞癌新的诊断生物标志物和治疗靶点。 展开更多
关键词 mir-17-5p 口腔鳞状细胞癌 热疗 miRNA模拟物 SMAD7
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6-姜烯酚通过调节CDX2/miR-216a-5p轴缓解棕榈酸诱导的Caco-2细胞紧密连接损伤
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作者 王文宇 董婧潇 +3 位作者 张贺 李宇 李大鹏 李锋 《山东农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第1期23-36,共14页
棕榈酸(Palmitic acid,PA)会损伤人体肠道上皮细胞紧密连接,导致肠道屏障功能紊乱。我们前研究发现,6-姜烯酚可通过调控miR-216a-5p靶向抑制Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)进而抑制炎症因子,保护肠道细胞免受PA诱导的损伤。然... 棕榈酸(Palmitic acid,PA)会损伤人体肠道上皮细胞紧密连接,导致肠道屏障功能紊乱。我们前研究发现,6-姜烯酚可通过调控miR-216a-5p靶向抑制Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)进而抑制炎症因子,保护肠道细胞免受PA诱导的损伤。然而,6-姜烯酚调控miR-216a-5p表达的具体机制不清楚。本研究采用PA处理人结直肠腺癌Caco-2细胞建立肠道紧密连接损伤模型,通过DNA pulldown实验和双荧光素酶报告基因实验,初步确定尾型同源框转录因子2(Caudal-related homeobox transcription factor 2,CDX2)是miR-216a-5p的候选调控因子。通过染色质免疫共沉淀-聚合酶链反应(Chromatin immunoprecipitation followed by polymerase chain reaction,ChIP-PCR)实验和电泳迁移率实验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)实验相结合,证实转录因子CDX2可以与miR-216a-5p启动子相结合并促进其转录。最后评估了转录因子CDX2在促炎因子和紧密连接相关蛋白表达中的作用,证明了CDX2是6-姜烯酚调节miR-216a-5p表达的靶标。本研究首次揭示CDX2是miR-216a-5p的直接转录激活因子,为揭示生姜的健康调节作用和相关功能食品的研究提供了参考和依据。 展开更多
关键词 6-姜烯酚 转录因子 CDX2 mir-216a-5p 紧密连接
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雷公藤多苷调控HIF-1α/miR-155-5p/Nrf2通路改善大鼠肾病综合征的机制研究
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作者 陶伊璠 宋纯东 +4 位作者 王旭 张冲 苏颖 郏溪栋 姜浩然 《中国药房》 北大核心 2026年第5期602-606,共5页
目的研究雷公藤多苷(TWM)对大鼠肾病综合征的改善作用机制。方法采用尾静脉注射阿霉素的方法复制肾病综合征模型大鼠。将造模成功的大鼠随机分为模型组(蒸馏水)、泼尼松组(10 mg/kg)和TWM高、低剂量组(10、5 mg/kg),另设置不造模的空白... 目的研究雷公藤多苷(TWM)对大鼠肾病综合征的改善作用机制。方法采用尾静脉注射阿霉素的方法复制肾病综合征模型大鼠。将造模成功的大鼠随机分为模型组(蒸馏水)、泼尼松组(10 mg/kg)和TWM高、低剂量组(10、5 mg/kg),另设置不造模的空白组(蒸馏水),每组9只。各组大鼠灌胃相应药液/蒸馏水,每天1次,连续6周。观察大鼠肾组织病理学形态;检测大鼠24 h尿蛋白(24 h-UTP)和血清中生化指标[白蛋白(ALB)、血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)]水平;检测大鼠肾组织中氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)]水平;检测大鼠肾组织中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/微小RNA-155-5p(miR-155-5p)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路相关mRNA和蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠肾组织结构紊乱,肾小球少量坏死,肾小管上皮细胞水肿;24 h-UTP,血清中SCr、BUN、CHOL、TG水平,肾组织中MDA水平,肾组织中HIF-1α、Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)mRNA和蛋白表达水平以及miR-155-5p表达水平均显著升高(P<0.05);血清中ALB水平、肾组织中SOD水平以及Nrf2 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,TWM高、低剂量组大鼠肾损伤明显改善,上述定量指标水平均显著逆转(P<0.05)。结论TWM可通过调控HIF-1α/miR-155-5p/Nrf2信号通路,减轻氧化应激损伤,从而改善大鼠肾病综合征。 展开更多
关键词 雷公藤多苷 肾病综合征 氧化应激 HIF-1α/mir-155-5p/Nrf2信号通路
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血清miR-98-5p和miR-335-5p表达与癫痫患儿认知功能损害的关系
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作者 刘丹丹 冯娇娇 +2 位作者 胡丽敏 任晋峰 王立华 《安徽医学》 2026年第1期57-63,共7页
目的探究微小核糖核酸-98-5p(miR-98-5p)、微小核糖核酸-335-5p(miR-335-5p)表达与癫痫患儿认知功能损害的相关性。方法选择2022年9月至2023年12月在邯郸市中心医院儿科就诊的120例癫痫患儿为研究对象(癫痫组),根据韦氏儿童智力量表评分... 目的探究微小核糖核酸-98-5p(miR-98-5p)、微小核糖核酸-335-5p(miR-335-5p)表达与癫痫患儿认知功能损害的相关性。方法选择2022年9月至2023年12月在邯郸市中心医院儿科就诊的120例癫痫患儿为研究对象(癫痫组),根据韦氏儿童智力量表评分,将认知功能损害患儿60例作为认知功能损害组,无认知功能损害患儿60例作为无认知功能损害组,同时纳入在本院体检的健康儿童60例。采用定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组miR-98-5p、miR-335-5p表达,受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-98-5p、miR-335-5p对癫痫患儿认知功能损害的预测价值,Spearman法分析认知功能损害患儿血清miR-98-5p、miR-335-5p水平与韦氏儿童智力量表评分的相关性。多因素logistic回归分析癫痫患儿发生认知功能损害的影响因素。结果3组儿童miR-98-5p、miR-335-5p表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,癫痫患儿血清miR-98-5p、miR-335-5p表达水平降低(P<0.05)。不同发病频率、发作形式、病程和脑电图情况的癫痫患儿miR-98-5p、miR-335-5p表达比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清miR-98-5p、miR-335-5p单独及二者联合诊断癫痫患儿认知功能损害的曲线下面积分别为0.751(95%CI:0.664~0.826)、0.864(95%CI:0.762~0.901)和0.919(95%CI:0.855~0.961);认知功能损害组患儿韦氏儿童智力量表评分与miR-98-5p、miR-335-5p呈正相关(r_(miR-98-5p)=0.496,r_(miR-335-5p)=0.515,P<0.001)。miR-98-5p(OR=0.621)、miR-335-5p(OR=0.518)表达水平均是癫痫患儿发生认知功能损害的重要影响因素(P<0.05)。结论癫痫认知功能损害患儿血清中miR-98-5p、miR-335-5p表达水平下调,二者联合检测对癫痫患儿合并认知功能损害的诊断效能更高。 展开更多
关键词 癫痫 儿童 认知功能 mir-98-5p mir-335-5p
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补中益气汤调控miR-146-5p介导TLR4/MyD88/TRAF6通路干预自身免疫性甲状腺炎免疫调控的机制研究
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作者 鞠首信 陈怡然 +7 位作者 李娜 翟钊晗 王兰亭 丁杰 肖瑶 张丽丽 高天舒 王智民 《北京中医药大学学报》 北大核心 2026年第1期49-59,共11页
目的基于miR-146-5p介导Toll样受体4(TLR4)/髓分化因子88(MyD88)/肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)通路探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠免疫调控的干预机制。方法将48只8周龄NOD.H-2h4小鼠按随机数字表法分为正常组、模... 目的基于miR-146-5p介导Toll样受体4(TLR4)/髓分化因子88(MyD88)/肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)通路探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠免疫调控的干预机制。方法将48只8周龄NOD.H-2h4小鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、补中益气汤低剂量组、补中益气汤中剂量组、补中益气汤高剂量组、硒酵母片组共6组,每组8只。正常组自由饮用蒸馏水,其余各组自8周龄起自由饮用含0.05%碘化钠水,持续8周以诱导AIT模型。造模成功后,补中益气汤低、中、高剂量组分别予4.10、8.19、16.38 g/kg补中益气汤灌胃,硒酵母片组给予0.026 mg/kg硒酵母片混悬液灌胃,正常组和模型组予等量蒸馏水灌胃,每灌胃6 d休息1 d,连续8周。HE染色法观察小鼠甲状腺组织病理学形态变化;酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17A(IL-17A)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;实时荧光PCR加尾法检测小鼠甲状腺组织miR-146-5p表达;流式细胞术检测脾脏辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)细胞亚群分布;蛋白质印迹法检测小鼠甲状腺组织TLR4、MyD88、TRAF6、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白水平。结果与正常组比较,模型组甲状腺滤泡上皮细胞结构被破坏,淋巴细胞浸润明显;血清TgAb、TPOAb水平升高(P<0.05),IL-6、IL-17A、TNF-α水平升高(P<0.01),IL-10水平降低(P<0.05);甲状腺组织miR-146-5p的表达升高(P<0.01);脾脏Th17细胞比例及Th17/Treg比例升高(P<0.01);甲状腺组织TLR4、MyD88、TRAF6、p-JNK/JNK、p-p38MAPK/p38MAPK及p-p38MAPK蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,中药各组和硒酵母片组上皮细胞结构有不同程度改善,淋巴细胞浸润程度有所缓解;补中益气汤高剂量组和硒酵母片组血清中TPOAb水平降低(P<0.05),中药各组和硒酵母片组血清中TgAb水平降低(P<0.05),IL-6、IL-17A、TNF-α水平降低(P<0.01),补中益气汤中、高剂量组和硒酵母片组血清中IL-10水平升高(P<0.05);补中益气汤低剂量组甲状腺组织miR-146-5p水平升高(P<0.01),而补中益气汤中、高剂量组和硒酵母片组甲状腺组织miR-146-5p水平降低(P<0.05);补中益气汤高剂量组和硒酵母片组脾脏Treg细胞比例升高(P<0.05),中药各组和硒酵母片组Th17细胞比例及Th17/Treg比例降低(P<0.05);中药各组和硒酵母片组甲状腺组织TLR4、TRAF6、p-p38MAPK/p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达水平降低(P<0.05),补中益气汤中、高剂量组和硒酵母片组甲状腺组织MyD88、p-JNK/JNK蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论补中益气汤可能是通过干预miR-146-5p介导的TLR4/MyD88/TRAF6通路,对AIT小鼠进行免疫调控减轻甲状腺淋巴细胞浸润,发挥治疗AIT的作用。 展开更多
关键词 补中益气汤 mir-146-5p 自身免疫性甲状腺炎 免疫调控 Toll样受体4/髓分化因子88/肿瘤坏死因子受体相关因子6通路 小鼠
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miR-145-5p在猪卵巢颗粒细胞凋亡中的作用
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作者 秦鑫鑫 李文洁 +3 位作者 程晓龙 陈芳 王昱皓 潘增祥 《畜牧与兽医》 北大核心 2026年第1期14-21,共8页
旨在分析猪miR-145-5p的序列特征及其生物学功能,验证其在猪卵巢颗粒细胞(GCs)凋亡中的作用。利用生物信息学方法获取猪miR-145-5p前体序列并分析其序列信息、结构和生物学功能;设计合成miR-145-5p反义寡核苷酸抑制剂,转染至体外培养的... 旨在分析猪miR-145-5p的序列特征及其生物学功能,验证其在猪卵巢颗粒细胞(GCs)凋亡中的作用。利用生物信息学方法获取猪miR-145-5p前体序列并分析其序列信息、结构和生物学功能;设计合成miR-145-5p反义寡核苷酸抑制剂,转染至体外培养的猪卵巢GCs中,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-145-5p抑制效率;通过流式细胞术检测GCs凋亡率。结果:猪miR-145-5p前体序列长度为86 bp,其核苷酸序列在哺乳动物中保守性较高;功能富集分析发现miR-145-5p靶基因主要富集在与细胞增殖、存活、代谢和凋亡调控作用相关的磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶(PI3K-Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、叉头框O蛋白(FoxO)、转化生长因子β(TGF-β)等信号通路;转染miR-145-5p抑制剂,流式细胞术分析发现抑制miR-145-5p的表达,能显著降低GCs的凋亡率(P<0.05)。研究表明,miR-145-5p具有促进猪卵巢GCs凋亡的生物学作用。 展开更多
关键词 猪 卵巢颗粒细胞 细胞凋亡 mir-145-5p
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黄芪甲苷介导外泌体miR-126-5p对糖尿病皮肤溃疡创面血管新生的影响
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作者 胡清睿 曾楚若 +7 位作者 宋小琴 广可颜 刘怡萍 陈奕仁 宾马赢 熊武 韩芳 张熙 《中医药导报》 2026年第1期14-20,共7页
目的:探讨黄芪甲苷(AS-IV)介导内皮祖细胞(EPCs)外泌体miR-126-5p对糖尿病皮肤溃疡(DCU)创面血管新生的影响。方法:分离培养人外周血EPCs,通过观察细胞形态、DAPI核染及FITC-UEA-I联合Dil-acLDL双荧光染色法鉴定EPCs。将鉴定成功的EPCs... 目的:探讨黄芪甲苷(AS-IV)介导内皮祖细胞(EPCs)外泌体miR-126-5p对糖尿病皮肤溃疡(DCU)创面血管新生的影响。方法:分离培养人外周血EPCs,通过观察细胞形态、DAPI核染及FITC-UEA-I联合Dil-acLDL双荧光染色法鉴定EPCs。将鉴定成功的EPCs分别用PBS、AS-IV处理,培养24 h收集上清液中EPCexos和ASIVEPCexos,用透射电镜观察两者形态。另用miR-126-5p inhibitor和inhibitor-NC脂质体转染ASIV-EPCexos,检测上述4种外泌体中miR-126-5p水平。建立2型糖尿病SD大鼠DCU模型。造模成功的大鼠随机分为EPCexos组、ASIVEPCexos组、ASIV-EPCexos+miR-126-5p inhibitor组、ASIV-EPCexos+inhibitor-NC组、模型组,另设空白组。第10天采集创面新生组织,用蛋白质印迹法(Western blotting)与RT-qPCR法检测VEGFa、VEGFb、VEGFc、FGF、Ang-1血管生长因子表达,免疫荧光和PAS染色检测血管新生。结果:培养24 h后,两组大鼠外泌体呈圆形或椭圆形微囊泡结构。与EPCexos组大鼠相比,ASIV-EPCexos组miR-126-5p表达上调(P<0.05);与ASIV-EPCexos组大鼠相比,ASIV-EPCexos+miR-126-5p inhibitor组miR-126-5p表达下调(P<0.05)。与空白组大鼠相比,模型组血管生长因子表达量、VEGF荧光强度、BrdU阳性率和内皮细胞数均显著降低(P<0.05);与模型组大鼠相比,ASIV-EPCexo组血管生长因子表达量、VEGF荧光强度、BrdU阳性率和内皮细胞数均增加(P<0.05);与ASIV-EPCexo组大鼠相比,ASIV-EPCexo+miR-126-5pinhibitor组血管生长因子表达量、VEGF荧光强度、BrdU阳性率和内皮细胞数均显著降低(P<0.05)。结论:AS-IV可通过介导EPCs表达负载miR-126-5p的外泌体促进DCU创面血管新生。 展开更多
关键词 糖尿病皮肤溃疡 黄芪甲苷 外泌体 mir-126-5p 血管新生
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miR-339-5p对胃癌细胞恶性生物学行为的影响机制研究
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作者 赵鸿鹰 江荣科 +4 位作者 李艳芳 朱梅 张桂华 王宇 曹生亚 《局解手术学杂志》 2026年第1期12-17,共6页
目的 探究miR-339-5p调控Akt/MDM2/p53信号通路对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 收集2023年10月至2024年9月在我院手术切除的48例胃癌患者的癌组织及癌旁组织样本。利用qRT-PCR检测miR-339-5p在胃癌组织及细胞中的表达。将胃癌细... 目的 探究miR-339-5p调控Akt/MDM2/p53信号通路对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 收集2023年10月至2024年9月在我院手术切除的48例胃癌患者的癌组织及癌旁组织样本。利用qRT-PCR检测miR-339-5p在胃癌组织及细胞中的表达。将胃癌细胞NCI-N87分为control组(未进行转染)、miR-NC组(转染miR-339-5p mimics阴性对照质粒)、miR-339-5p mimics组(转染miR-339-5p mimics)、miR-339-5p mimics+SC-79组(转染miR-339-5p mimic后加入Akt激活剂SC-79)、miR-339-5p mimics+pcDNA组(共转染miR-339-5p mimics和空载质粒pcDNA)、miR-339-5p mimics+pc-MDM2组(共转染miR-339-5p mimics与MDM2过表达质粒pc-MDM2)。采用平板克隆形成实验和细胞划痕实验检测胃癌细胞增殖能力,Transwell实验检测胃癌细胞迁移和侵袭能力;通过双荧光素酶基因实验验证MDM2和miR-339-5p之间的靶向关系;Western blot检测Akt/MDM2/p53信号通路相关蛋白的表达水平。结果 胃癌组织及细胞中miR-339-5p表达显著降低。与control组和miR-NC组比较,miR-339-5p mimics组细胞克隆形成数、划痕愈合率、细胞迁移数和侵袭数显著减少/下降,pAkt/Akt和pMDM2/MDM2水平降低,p53蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。激活Akt和过表达MDM2均可逆转miR-339-5p mimics对NCI-N87细胞上述指标的影响。双荧光素酶基因实验证实,miR-339-5p与MDM2存在靶向关系。结论 miR-339-5p可能通过抑制Akt/MDM2/p53信号通路,影响胃癌细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 mir-339-5p 胃癌 Akt/MDM2/p53信号通路 恶性生物学行为
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