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miR-18a过表达及抑制表达人鼻咽癌细胞株的构建 被引量：3
1
作者 常利红 黄子真 +4 位作者 黄健聪 王君 陈晓红 赖晓萍 张革化 《中山大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期119-129,共11页
【目的】建立稳定miR-18a过表达及表达的人鼻咽癌细胞系,为研究miR-18a在鼻咽癌发生发展中的功能奠定基础。【方法】将miR-18a前体的编码基因片段及miR-18a反义寡核苷酸克隆到慢病毒载体中,DNA测序鉴定;将构建好的载体转染293T细胞,获... 【目的】建立稳定miR-18a过表达及表达的人鼻咽癌细胞系,为研究miR-18a在鼻咽癌发生发展中的功能奠定基础。【方法】将miR-18a前体的编码基因片段及miR-18a反义寡核苷酸克隆到慢病毒载体中,DNA测序鉴定;将构建好的载体转染293T细胞,获得重组miR-18a过表达及抑制表达的慢病毒载体,感染人鼻咽癌细胞CNE1和CNE2,嘌呤霉素筛选获得稳定干扰miR-18a表达及过表达miR-18a的细胞系,PCR及western blot鉴定。【结果】成功构建真核表达的慢病毒miR-18a干扰载体及过表达载体,滴度均为3×10~8TU/mL;转染miR-18a抑制表达的慢病毒载体的CNE1和CNE2中ATM表达增高;与对照病毒转染相比,转染miR-18a过表达慢病毒载体的CNE1(20.3倍,P<0.01)和CNE2(122.5倍,P<0.01)中miR-18a表达显著增高,靶蛋白ATM表达下调。【结论】成功构建人miR-18a慢病毒抑制表达和过表达载体,并获得相应的慢病毒稳转人鼻咽癌细胞株。 展开更多
关键词 mir-18a 慢病毒 过表达载体 抑制载体 鼻咽癌细胞
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MiR-18a-5p通过介导自噬加重同型半胱氨酸诱导的心肌损伤 被引量：3
2
作者 尹绢 胡龙龙 +3 位作者 韩雪玲 陈露 余玲玲 卢寅辉 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期24-33,共10页
目的:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平是心脑血管疾病的独立危险因素。MiR-18a-5p是微RNA(microRNA,miR)家族中的重要成员,与心血管疾病密切相关。本研究旨在探讨miR-18a-5p对Hcy损伤心肌细胞的影响。方法:对H9c2细胞进行miR-18a... 目的:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平是心脑血管疾病的独立危险因素。MiR-18a-5p是微RNA(microRNA,miR)家族中的重要成员,与心血管疾病密切相关。本研究旨在探讨miR-18a-5p对Hcy损伤心肌细胞的影响。方法:对H9c2细胞进行miR-18a-5p模拟物(mimic)/miR-18a-5p mimic阴性对照(negative control,NC)转染或与Hcy联合干预,另设未处理细胞作为对照组。采用实时反转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription PCR,real-time RT-PCR)验证转染效率,细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,蛋白质印迹法检测微管相关蛋白1轻链3(microtubuleassociated protein 1 light chain 3,LC3)-I、LC3-Ⅱ、Beclin1、p62、Bax、Bcl-2和Notch2的蛋白质表达水平,双荧光素酶报告分析检测miR-18a-5p与Notch2的相互作用。结果:与对照组相比,Hcy或转染miR-18a-5p mimic单独处理,或转染miR-18a-5p mimic/miR-18a-5p mimic NC与Hcy联合干预均显著降低H9c2细胞的活力,增加H9c2细胞的凋亡率和ROS的生成,上调Bax和Beclin1的蛋白质表达水平,下调Bcl-2、p62和Notch2的蛋白质表达水平,同时使LC3-Ⅱ/LC3-I值增加(均P<0.05)。与miR-18a-5p mimic NC和Hcy联合干预相比,miR-18a-5p mimic和Hcy联合干预的H9c2细胞上述指标的改变更显著,且2组之间差异有统计学意义(均P<0.05)。Notch2与miR-18a-5p存在靶向结合。结论:MiR-18a-5p通过增加心肌细胞内ROS的生成,诱导自噬和凋亡,加重Hcy诱导的心肌损伤。Notch2是miR-18a-5p的作用靶点。 展开更多
关键词 mir-18a-5p 心肌损伤 同型半胱氨酸 活性氧 自噬 NOTCH2
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miR-18a和miR-18b在结肠癌中的表达及其临床意义 被引量：3
3
作者 戴功建 李小华 +1 位作者 夏建国 金黑鹰 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期2284-2286,共3页
目的探讨miR-18a和miR-18b在结肠癌中的表达及其临床意义。方法选取手术切除的原发性结肠癌标本20例,采用实时荧光定量PCR分析miR-18a和miR-18b的表达。结果相对于癌旁组织,20例结肠癌组织中miR-18a表达下调(P<0.05);其表达与TNM分... 目的探讨miR-18a和miR-18b在结肠癌中的表达及其临床意义。方法选取手术切除的原发性结肠癌标本20例,采用实时荧光定量PCR分析miR-18a和miR-18b的表达。结果相对于癌旁组织,20例结肠癌组织中miR-18a表达下调(P<0.05);其表达与TNM分期及浸润深度有关(P<0.05)。而miR-18b在癌组织中的表达则上调(P<0.05),其表达与TNM分期、浸润深度和远处转移无明显关联。结论 miR-18a可能参与了结肠癌的发展。 展开更多
关键词 结直肠癌 mir-18a mir-18b
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MiR-18a通过靶定ATM调节白血病细胞HL-60对VP-16和VCR化疗敏感性 被引量：5
4
作者 肖悦 胡蓉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期999-1004,共6页
目的:研究miR-18a调控白血病细胞HL-60对VP-16和VCR化疗敏感性的分子机制。方法:构建稳定过表达miR-18a的HL-60-pc DNA3.1-miR-18a细胞系,检测其对VP-16和VCR的敏感性;构建ATM 3'UTR区的荧光素酶报告载体,验证miR-18a对ATM的靶向作... 目的:研究miR-18a调控白血病细胞HL-60对VP-16和VCR化疗敏感性的分子机制。方法:构建稳定过表达miR-18a的HL-60-pc DNA3.1-miR-18a细胞系,检测其对VP-16和VCR的敏感性;构建ATM 3'UTR区的荧光素酶报告载体,验证miR-18a对ATM的靶向作用;Western blot检测过表达miR-18a的HL-60细胞内ATM的表达水平;siRNA敲减HL-60细胞中ATM水平,CCK-8检测细胞对VP-16和VCR的敏感性;在稳定过表达miR-18a的HL-60细胞内转染miR-18a inhibitor,Western blot检测ATM的表达水平,并检验细胞对VP-16和VCR的敏感性变化。结果:过表达miR-18a后,用相同浓度的VP-16和VCR处理时HL-60细胞存活率降低;荧光素酶活性检测表明,miR-18a能够抑制ATM的荧光素酶活性;过表达miR-18a后HL-60细胞内ATM的表达降低;敲减ATM后的HL-60细胞经VP-16和VCR处理后存活率降低;转染miR-18a inhibitor后,ATM表达水平显著上调,经VP-16和VCR处理的细胞存活率明显高于对照组。结论:miR-18a能够通过靶定ATM而调控白血病细胞HL-60对VP-16和VCR的敏感性。 展开更多
关键词 mir-18a ATM 白血病 VP-16 VCR
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miR-18a和雌激素受体α在单发及多发子宫肌瘤中的表达 被引量：3
5
作者 廖治 肖洪涛 《中国生化药物杂志》 CAS 2015年第9期54-56,共3页
目的检测单发及多发子宫肌瘤组织中miR-18a及雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)的表达,探讨miR-18a与ERα的关系及2者在单发及多发子宫肌瘤发生中的作用。方法采用原位杂交法检测miR-18a在单发及多发子宫肌瘤组织石蜡切片中... 目的检测单发及多发子宫肌瘤组织中miR-18a及雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)的表达,探讨miR-18a与ERα的关系及2者在单发及多发子宫肌瘤发生中的作用。方法采用原位杂交法检测miR-18a在单发及多发子宫肌瘤组织石蜡切片中的表达;采用免疫组化法检测ERα在单发及多发子宫肌瘤组织石蜡切片的表达。采用相关分析研究miR-18a和ERα的表达相关性。结果多发子宫肌瘤组织中的ERα表达水平均明显高于单发子宫肌瘤组织(P<0.05);但miR-18a水平明显低于单发子宫肌瘤组织(P<0.05);相关分析结果表明,2者表达呈负相关(r单发=-0.4421,r多发=-0.4181)。结论多发性子宫肌瘤中miR-18a的表达更低,ERα表达更高。miR-18a可作为治疗多发性子宫肌瘤的新靶标。 展开更多
关键词 mir-18a 雌激素受体Α 多发子宫肌瘤 单发子宫肌瘤
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miR-18a对结肠癌血管生成的影响 被引量：2
6
作者 罗芳 胡铁辉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期37-41,共5页
目的探讨miR-18a对结肠癌血管生成的影响及其机制。方法以用合成的miR-18a模拟物转染人结肠癌细胞系SW620细胞。应用MTT法检测过表达miR-18a对细胞增殖活性的影响。分别用稳转miR-18a的SW620细胞接种建立裸鼠人结肠癌移植瘤模型。每周... 目的探讨miR-18a对结肠癌血管生成的影响及其机制。方法以用合成的miR-18a模拟物转染人结肠癌细胞系SW620细胞。应用MTT法检测过表达miR-18a对细胞增殖活性的影响。分别用稳转miR-18a的SW620细胞接种建立裸鼠人结肠癌移植瘤模型。每周测量瘤体积。5周后麻醉处死裸鼠。免疫组化法检测增殖细胞核标志物Ki 67和血管内皮细胞标志物CD31的表达。应用Western blotting法检测血管生成相关的mTOR通路中mTOR下游靶蛋白S6K1和4E BP1的磷酸化情况,并检测肿瘤组织血管生成相关因子缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长凶子(VEGF)的表达。结果 miR-18a过表达显著降低SW620细胞的增殖能力(P<0.01)。并且,该基因对裸鼠人结肠癌移植瘤有明显的生长抑制作用,SW620组瘤体显著减小,抑瘤率达71.8%(P<0.01)。免疫组化检测显示,miR-18a显著抑制细胞增殖核抗原蛋白Ki-67(P<0.01)和血管内皮细胞标记物CD31(P<0.05)的表达。Western blot法检测显示,miR-18a显著抑制S6K(IP<0.01)和4E-BP(IP<0.05)的磷酸化,而且抑制肿瘤组织中HIF-1α(P<0.05)和VEGF蛋白(P<0.01)的表达。结论过表达miR-18a抑制结肠癌生长和血管生成,这可能与其抑制mTOR/VEGF通路有关,提示过表达miR-18a可能成为结肠癌治疗的新方法。 展开更多
关键词 mir-18a 结肠癌 血管生成
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miR-18a在子宫肌瘤组织中的表达水平及与性激素水平和子宫内膜容受性的关系 被引量：9
7
作者 徐宁 王小保 《中国妇幼保健》 CAS 2021年第21期5056-5058,共3页
目的探讨子宫肌瘤组织中miR-18a的表达及其临床意义。方法回顾性分析医院收治的64例因子宫肌瘤行子宫全切或子宫肌瘤挖除术患者的资料,以子宫肌瘤中心和肌瘤边缘连线的中间处选取直径为2~5 cm的子宫肌瘤组织,距离子宫肌瘤至少1 cm处取样... 目的探讨子宫肌瘤组织中miR-18a的表达及其临床意义。方法回顾性分析医院收治的64例因子宫肌瘤行子宫全切或子宫肌瘤挖除术患者的资料,以子宫肌瘤中心和肌瘤边缘连线的中间处选取直径为2~5 cm的子宫肌瘤组织,距离子宫肌瘤至少1 cm处取样(大小为1.0 cm×1.0 cm×0.5 cm)记为A组,另回顾性分析58例同期在该院因子宫脱垂行子宫切除术的与A组同年龄段的患者的资料,于切除组织中间处取大小为1.0 cm×1.0 cm×0.5 cm的肌层组织记为B组。采用实时荧光定量PCR技术检测子宫肌层组织miR-18a表达水平,对比两组患者子宫肌层组织中miR-18a表达水平,对比不同年龄段子宫肌瘤患者子宫肌层组织中miR-18a表达水平,对比不同分型子宫肌瘤患者子宫肌层组织中miR-18a表达水平。结果A组患者子宫肌层组织中miR-18a表达水平低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄段患者子宫肌层组织中miR-18a表达水平对比差异均有统计学意义(P<0.05)。与绝经期相比,育龄期和围绝经期患者子宫肌层组织中miR-18a表达水平均显著降低,育龄期患者又显著低于围绝经期,差异有统计学意义(P<0.05)。不同分型患者子宫肌层组织中miR-18a表达水平对比差异均有统计学意义(P<0.05),与黏膜下肌瘤相比,肌壁间肌瘤和浆膜下肌瘤患者子宫肌层组织中miR-18a表达水平均显著降低,肌壁间肌瘤患者又显著低于浆膜下肌瘤,差异有统计学意义(P<0.05)。结论子宫肌瘤组织中miR-18a表达水平降低,育龄期子宫肌瘤患者和肌壁间肌瘤患者子宫肌瘤组织中miR-18a表达水平降低。 展开更多
关键词 子宫肌瘤 mir-18a 年龄段 病理分型
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血浆miR-18a-5p表达对宫颈癌的诊断及预后价值研究 被引量：2
8
作者 危敏 雷洁 +2 位作者 韩璐好 余海浪 王涵多 《中国卫生检验杂志》 CAS 2019年第17期2053-2056,共4页
目的探讨血浆miR-18a-5p对宫颈癌诊断及预后的预测价值。方法采用qRT-PCR法检测60例宫颈癌患者血浆miR-18a-5p表达量,并分析其对宫颈癌的临床病理特征、诊断及预后的关系。结果宫颈癌患者血浆miR-18a-5p表达水平明显高于术后组及对照组... 目的探讨血浆miR-18a-5p对宫颈癌诊断及预后的预测价值。方法采用qRT-PCR法检测60例宫颈癌患者血浆miR-18a-5p表达量,并分析其对宫颈癌的临床病理特征、诊断及预后的关系。结果宫颈癌患者血浆miR-18a-5p表达水平明显高于术后组及对照组,差异均有统计学意义(P<0.001)。ROC曲线显示血浆miR-18a-5p诊断宫颈癌的曲线下面积为0.928,95%置信区间为0.876-0.979;诊断灵敏度为76.7%,特异度为96.7%。血浆miR-18a-5p表达水平与宫颈癌患者肿瘤分化程度(P=0.032)、临床分期(P=0.001)及淋巴结转移(P=0.001)相关,而与其他临床特征无关。Kaplan-Meier分析表明miR-18a-5p高表达患者的总体生存率显著低于低表达患者(P<0.05)。结论血浆miR-18a-5p表达水平可作为宫颈癌潜在标志物用于临床诊断及预后评估。 展开更多
关键词 血浆 mir-18a-5p 宫颈癌 诊断
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miR-18a表达在HPV感染及宫颈癌发生发展中的意义 被引量：9
9
作者 危敏 余海浪 +2 位作者 王涵多 雷洁 韩璐好 《中国妇幼健康研究》 2019年第2期198-202,共5页
目的研究宫颈脱落细胞中miR-18a的表达水平在人乳头状瘤病毒(HPV)感染及宫颈癌发生发展中的意义。方法收集2015年6月至2017年6月深圳市南山区妇幼保健院及广州南方医院门诊及住院患者宫颈脱落细胞标本,通过HPV DNA分型检测将宫颈脱落细... 目的研究宫颈脱落细胞中miR-18a的表达水平在人乳头状瘤病毒(HPV)感染及宫颈癌发生发展中的意义。方法收集2015年6月至2017年6月深圳市南山区妇幼保健院及广州南方医院门诊及住院患者宫颈脱落细胞标本,通过HPV DNA分型检测将宫颈脱落细胞标本分为HPV未感染组(NE-HPV)、低危型HPV感染组(LR-HPV)、高危型HPV感染组(HR-HPV),采用荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测各组间miR-18a相对表达量;收集HR-HPV感染阳性的宫颈脱落细胞标本,依据病理检查结果分为宫颈上皮内瘤变(CIN)组及宫颈癌组各30例,对照组选取年龄、体重配对的30例宫颈上皮细胞正常无化生的标本,采用qRT-PCR检测各组间miR-18a相对表达量,分析miR-18a表达与HPV感染及宫颈癌发生发展的关系。结果 HR-HPV感染组宫颈脱落细胞中miR-18a相对表达量高于LR-HPV组与NE-HPV组,差异均有统计学意义(t值分别为11.144、18.482,均P<0.05);宫颈癌组、CIN组中miR-18a表达较对照组显著增高(t值分别为25.02、15.355,均P<0.05),但宫颈癌组与CIN组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线显示宫颈脱落细胞中miR-18a用于诊断CIN的曲线下面积(AUC)为0.699(95%CI:0.606～0.791,P<0.001),用于诊断宫颈癌的AUC为0.801(95%CI:0.724～0.879,P<0.001)。结论 HR-HPV感染者宫颈脱落细胞中miR-18a相对表达量明显升高,并与宫颈癌的发生发展密切相关。宫颈脱落细胞中miR-18a可能作为宫颈癌或癌前病变潜在标志物用于早期无创诊断。 展开更多
关键词 mir-18a 人乳头状瘤病毒 宫颈脱落细胞 宫颈上皮内瘤变 宫颈癌
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过表达miR-18a靶向ATM对结肠癌细胞增殖和迁移的影响
10
作者 刘明佳 陈利弘 +3 位作者 胡开锋 杨晓龙 董婧颖 刘戟 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期451-457,共7页
目的研究miR-18a通过靶基因共济失调-毛细血管扩张突变基因(ataxia telangiectasia mutated gene,ATM)调控结肠癌细胞的生物学特性。方法通过软件预测miR-18a其中一个靶基因。设计合成miR-18a的模拟剂(mimics)和抑制剂(inhibitor),通过... 目的研究miR-18a通过靶基因共济失调-毛细血管扩张突变基因(ataxia telangiectasia mutated gene,ATM)调控结肠癌细胞的生物学特性。方法通过软件预测miR-18a其中一个靶基因。设计合成miR-18a的模拟剂(mimics)和抑制剂(inhibitor),通过转染不同组分上调或下调内源性miR-18a在结肠癌细胞株HCT116中的表达。采用实时荧光定量(qRT)-PCR、Western blot、MTT法、克隆形成实验、Transwell等方法,检测过表达miR-18a调控ATM基因的表达对体外结肠癌细胞增殖及迁移能力的影响。结果软件预测发现miR-18a的其中一个靶基因是ATM。通过瞬时转染,过表达内源性miR-18a,可降低HCT116细胞内靶基因ATM蛋白的表达水平。转染miR-18amimics后能够下调HCT116细胞的增殖活力,同时显著降低HCT116细胞的克隆形成能力、横向迁移能力及纵向侵袭能力,以上各项改变均与miR-18a过表达有关。结论证实了miR-18a通过负向调控ATM的表达,抑制结肠癌细胞HCT116的增殖和迁移能力。 展开更多
关键词 mir-18a ATM 增殖 迁移 结肠癌细胞 HCT116
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miR-18a对结直肠癌SW116细胞辐射敏感性的影响 被引量：2
11
作者 燕蒙蒙 徐珊 +6 位作者 高岩 刘扬 贺梦子 陈司霖 李鹏武 刘晓冬 马淑梅 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期240-244,I0002,共6页
目的:探讨miR-18a与结直肠癌SW116细胞辐射敏感性之间的关系,阐明miR-18a影响细胞凋亡和自噬的可能机制。方法:人结直肠癌SW116细胞分为miR-18aNC组、miR-18amimic组、miR-18aNC+4Gy组和miR-18amimic+4Gy组。qRT-PCR法检测照射前后SW11... 目的:探讨miR-18a与结直肠癌SW116细胞辐射敏感性之间的关系,阐明miR-18a影响细胞凋亡和自噬的可能机制。方法:人结直肠癌SW116细胞分为miR-18aNC组、miR-18amimic组、miR-18aNC+4Gy组和miR-18amimic+4Gy组。qRT-PCR法检测照射前后SW116细胞中miR-18a的表达;集落形成实验观察miR-18a对SW116细胞辐射敏感性的影响;GFPLC3形态学方法检测SW116细胞自噬率;流式细胞术检测SW116细胞凋亡率;采用生物信息学方法预测miR-18a的靶基因,以荧光素酶报告基因验证miR-18a与靶基因3′UTR结合;Western blotting法检测SW116细胞中共济失调-毛细血管扩张突变基因(ATM)蛋白表达。结果:与照射前比较,照射后SW116细胞中miR-18a表达水平明显降低(P<0.05)。集落形成实验,与miR-18aNC组比较,miR-18amimic组SW116细胞辐射敏感性增强(P<0.05),细胞凋亡率和自噬率明显增加(P<0.05)。与miR-18aNC+4Gy组比较,miR-18amimic+4Gy组SW116细胞中ATM蛋白表达减少。结论:miR-18a的靶基因为ATM;miR-18amimic可促进辐射诱导的细胞凋亡和自噬,且能增加结直肠癌SW116细胞辐射敏感性。 展开更多
关键词 mir-18a 结直肠肿瘤 辐射敏感性 细胞凋亡 自噬
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miR-18a-5p在鸡不同生长时期的表达及其生物信息学分析与靶基因预测 被引量：2
12
作者 黄正洋 黄华云 +4 位作者 穆春宇 李春苗 王钱保 黎寿丰 赵振华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第12期4361-4371,共11页
为探究miR-18a-5p在鸡不同生长时期组织表达变化规律及其生物信息学特点,本研究以苏禽3号鸡为试验动物,利用实时荧光定量PCR技术检测不同生长时期鸡miR-18a-5p的组织表达变化。通过文献和miRBase检索脊椎动物的miR-18a-5p序列,利用Ense... 为探究miR-18a-5p在鸡不同生长时期组织表达变化规律及其生物信息学特点,本研究以苏禽3号鸡为试验动物,利用实时荧光定量PCR技术检测不同生长时期鸡miR-18a-5p的组织表达变化。通过文献和miRBase检索脊椎动物的miR-18a-5p序列,利用Ensembl数据库确定miR-18a-5p在基因组中的位置,根据成熟序列构建系统进化树;使用miRmap、microT、miRanda和TargetScan网站预测miR-18a-5p靶基因,并进行GO和KEGG分析。组织表达分析结果显示,miR-18a-5p序列在鸡心脏、脾脏、肾脏和下丘脑中的表达量显著高于除大脑以外的其他组织(P<0.05)。与3日龄雏鸡相比,90日龄鸡心脏、脾脏、肾脏、腿肌和下丘脑中miR-18a-5p的表达量均显著上升(P<0.05)。在50种脊椎动物中共发现52条miR-18a-5p序列,几乎所有物种都只有1条成熟序列;基因定位分析发现,鸡miR-18a-5p位于1号染色体上的基因间隔区。多序列比对分析表明,不同物种miR-18a-5p的成熟序列同源性较高,物种间较为保守。系统进化树分析发现,鸡miR-18a-5p与原鸽、斑胸草雀等其他鸟类聚为一类,这表明miR-18a-5p进化过程中是保守的。靶基因预测和功能分析发现,miR-18a-5p共有121个靶基因。GO分析结果显示,靶基因主要富集到蛋白质泛素化、细胞周期阻滞、白细胞介素-6产生的负调控等功能。KEGG通路分析表明,靶基因主要富集到细胞周期及Wnt和FoxO信号通路等。多个与肌肉生长及细胞增殖等相关的基因富集到相关通路之上。综上,鸡miR-18a-5p是组织广泛表达的miRNA,其可能通过Wnt及FoxO信号通路调控肌肉生长及细胞增殖分化。本研究为miR-18a-5p功能及调控机制的深入研究提供参考依据。 展开更多
关键词 鸡 mir-18a-5p 靶基因 表达分析 生物信息学
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高危型HPV感染对宫颈阴道微生态菌群及miR-222、miR-18a表达的影响 被引量：19
13
作者 李阳芳 程群仙 +4 位作者 徐灵 李航 杨杰 倪秀文 卢雨晴 《临床和实验医学杂志》 2023年第4期389-393,共5页
目的分析高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染对宫颈阴道微生态菌群及miR-222、miR-18a表达的影响。方法前瞻性选取2020年1月至2021年5月复旦大学附属闵行医院妇产科门诊随机行宫颈筛查的妇女共1500例,均行HPV检测,根据是否感染,分为HR-HPV... 目的分析高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染对宫颈阴道微生态菌群及miR-222、miR-18a表达的影响。方法前瞻性选取2020年1月至2021年5月复旦大学附属闵行医院妇产科门诊随机行宫颈筛查的妇女共1500例,均行HPV检测,根据是否感染,分为HR-HPV阴性组(n=1338)和HR-HPV阳性组(n=162)。采用PCR法检测宫颈和阴道脱落细胞中HR-HPV的感染情况;DNA探针技术检测阴道分泌物中加德纳细菌(BV)、霉菌(VVC)和滴虫(TV)感染情况;阴道微生态检测仪Unit-500检测过氧化氢(H_(2)O_(2))、唾液酸苷酶和白细胞酯酶;实时定量荧光PCR检测miR-222和miR-18a的表达;Spearman法分析阴道微生态和miR-222、miR-18a的相关性。采用单因素和多因素Logistic回归模型分析HR-HPV感染的影响因素。结果1500例筛查人群中,检出的HR-HPV感染者162例,HPV16检出率最高,为91例,占比56.17%。HR-HPV阳性组受试者菌群多样性Ⅱ~Ⅲ级比率、BV阳性率、H_(2)O_(2)阳性率为33.95%、30.86%、95.06%,均显著高于HR-HPV阴性组(25.64%、20.25%、89.91%),差异均有统计学意义(P<0.05),两组VVC、TV、唾液酸苷酶和白细胞酯酶比较,差异无统计学意义(P>0.05)。HR-HPV阳性组中miR-222和miR-18a的表达量为2.73±0.46、3.11±0.52,明显高于HR-HPV阴性组(0.56±0.08、0.82±0.13),差异有统计学意义(P<0.05)。BV阳性率和miR-222、miR-18a呈正相关(r=0.397、0.256,P<0.05),H_(2)O_(2)阳性率与miR-222、miR-18a也呈正相关(r=0.321、0.373,P<0.05)。单多因素回归分析结果显示,BV阳性率、H_(2)O_(2)阳性率、miR-222、miR-18a是影响HR-HPV感染危险因素(OR=1.963,95%CI=1.032~3.735;OR=1.671,95%CI=0.584~4.779;OR=1.296,95%CI=0.802~2.094;OR=1.374,95%CI=1.003~2.753,P<0.05)。结论HR-HPV感染患者的微生态环境紊乱,miR-222、miR-18a的表达明显升高,且BV阳性率、H_(2)O_(2)阳性率、miR-222、miR-18a是影响HR-HPV感染危险因素。治疗中了解HR-HPV感染的危险因素,有利于针对HR-HPV感染患者制定个体化治疗方案。 展开更多
关键词 高危型人乳头瘤病毒 宫颈阴道微生态 mir-222 mir-18a
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miR-18a对人主动脉内皮细胞血管生成能力的影响 被引量：4
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作者 莫倩 李丹 凌文华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1187-1191,共5页
目的:观察miR-18a对人主动脉内皮细胞血管生成能力的影响。方法:分别将10 nmol/L miR-18a mimics和20 nmol/L miR-18a inhibitor转染至人主动脉内皮细胞,qRT-PCR法检测miR-18a表达情况并观察内皮细胞的迁移、黏附和管腔形成能力。结果:... 目的:观察miR-18a对人主动脉内皮细胞血管生成能力的影响。方法:分别将10 nmol/L miR-18a mimics和20 nmol/L miR-18a inhibitor转染至人主动脉内皮细胞,qRT-PCR法检测miR-18a表达情况并观察内皮细胞的迁移、黏附和管腔形成能力。结果:转染48 h后,miR-18a mimics组miR-18a表达为对照组的608倍(P<0.05);miR-18a inhibitor组miR-18a表达降低至对照组的31%(P<0.05)。与对照组相比,miR-18a mimics转染后迁移至Transwell小室下层的内皮细胞数目和毛细血管管腔形成数目分别减少60%和52%(P<0.01);而miR-18a inhibitor转染后分别增加100%(P<0.05)和84%(P<0.01),细胞黏附能力增加43%(P<0.05)。结论:miR-18a的表达水平与人主动脉内皮细胞的血管生成能力相关,可能成为血管性疾病治疗的分子靶点。 展开更多
关键词 mir-18a 人主动脉内皮细胞 血管生成
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miR-18a-5p靶向调控RORA在结直肠癌增殖进展中的作用及临床意义 被引量：2
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作者 陈一锋 王帅 +7 位作者 柴明明 张迪 王春霞 赵丽霞 张洪来 杨熊飞 张维胜 王涛 《肿瘤防治研究》 CAS 2024年第8期667-677,共11页
目的探讨miR-18a-5p和RORA在结直肠癌增殖中的作用机制及临床意义。方法采用qRT-PCR、FISH、IHC方法检测miR-18a-5p和RORA在结直肠癌细胞和组织中的表达情况。通过EdU和CFSE实验检测细胞增殖能力、FCM实验检测细胞凋亡情况,细胞划痕实验... 目的探讨miR-18a-5p和RORA在结直肠癌增殖中的作用机制及临床意义。方法采用qRT-PCR、FISH、IHC方法检测miR-18a-5p和RORA在结直肠癌细胞和组织中的表达情况。通过EdU和CFSE实验检测细胞增殖能力、FCM实验检测细胞凋亡情况,细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力。进一步通过双荧光素酶报告实验、细胞功能挽救实验、RT-PCR和Western blot实验验证miR-18a-5p对RORA的靶向调控作用。最后运用生物信息学探究miR-18a-5p调控RORA促进结直肠癌恶性增殖和侵袭进展的分子机制。结果miR-18a-5p在结直肠癌组织和细胞中高表达(P<0.05),并且能够促进结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。此外RORA是miR-18a-5p的靶基因,过表达RORA能够有效消减miR-18a-5p促结直肠癌细胞恶性生物学表型的作用(P<0.05)。RORA在结直肠癌组织中的表达与CD8+T细胞浸润及其表面标志蛋白CD8A的表达显著正相关(P<0.05)。结论miR-18a-5p可能通过靶向调控RORA促进结直肠癌的进展;miR-18a-5p/RORA调控通路可能参与了结直肠癌免疫微环境的塑造,是结直肠癌的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 mir-18a-5p RORA 结直肠癌 增殖
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miR-18a-5p调控PSORS1C1对类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞迁移、侵袭及炎症反应的影响 被引量：2
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作者 蒋磊 陈汉玉 +4 位作者 彭旭玲 胡周静 罗茜 张永红 兰培敏 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第1期174-178,共5页
目的探讨微小RNA-18a-5p(miR-18a-5p)对类风湿关节炎成纤维细胞(SFs)样滑膜细胞迁移、侵袭及炎症反应的影响及其作用机制。方法体外培养人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞MH7A,分为miR-18a-5p组、miR-NC组、si-PSORS1C1组、si-NC组、miR-18a... 目的探讨微小RNA-18a-5p(miR-18a-5p)对类风湿关节炎成纤维细胞(SFs)样滑膜细胞迁移、侵袭及炎症反应的影响及其作用机制。方法体外培养人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞MH7A,分为miR-18a-5p组、miR-NC组、si-PSORS1C1组、si-NC组、miR-18a-5p+pcDNA3.1-PSORS1C1组、miR-18a-5p+pcDNA3.1组。qRT-聚合酶链反应(PCR)检测miR-18a-5p表达;分别采用Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭的情况。双荧光素酶报告基因实验检测miR-18a-5p与PSORS1C1的靶向关系;Western印迹检测PSORS1C1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、钙黏附蛋白-E(E-cadherin)蛋白表达;测定细胞上清液中白细胞介素(IL)-1、IL-2水平。结果miR-18a-5p在MH7A细胞中的表达水平显著降低(P<0.05),miR-18a-5p过表达可明显抑制MH7A细胞迁移及侵袭能力,IL-1水平与MMP-2表达水平显著降低(P<0.05),而IL-2水平与E-cadherin表达水平均显著升高(P<0.05);miR-18a-5p可靶向结合PSORS1C1;抑制PSORS1C1表达后,与si-NC组相比,MH7A细胞迁移及侵袭能力显著降低(P<0.05),IL-1水平与MMP-2表达水平显著降低(P<0.05),而IL-2水平与E-cadherin表达水平显著升高(P<0.05);过表达PSORS1C1可逆转miR-18a-5p对MH7A细胞迁移、侵袭及炎症因子的作用。结论miR-18a-5p过表达通过抑制PSORS1C1表达而减弱SFs样滑膜细胞迁移、侵袭能力,并可减轻炎症反应。 展开更多
关键词 mir-18a-5p PSORS1C1 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞 迁移 侵袭
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miR-18a在老年胃癌患者血清中的表达及意义 被引量：5
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作者 汤光华 张英志 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2969-2970,共2页
目的探讨胃癌患者血清microRNA-18a表达变化及其临床诊断意义。方法采用实时荧光定量PCR检测52例老年胃癌患者和33例健康体检者血清mi R-18a表达水平。通过分析受试者工作特征曲线(ROC)判断mi R-18a表达水平在胃癌诊断中的灵敏度和特异... 目的探讨胃癌患者血清microRNA-18a表达变化及其临床诊断意义。方法采用实时荧光定量PCR检测52例老年胃癌患者和33例健康体检者血清mi R-18a表达水平。通过分析受试者工作特征曲线(ROC)判断mi R-18a表达水平在胃癌诊断中的灵敏度和特异度。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测患者血清肿瘤标记物水平。结果胃癌患者血清mi R-18a较健康对照组高(P<0.05)。血清mi R-18a水平与患者年龄、性别无关(P>0.05),与分化程度、临床分期、浸润深度和淋巴结转移明显相关(P<0.05或P<0.01)。ROC分析结果显示最佳的mi R-18a相对表达量的临界值为2.77,诊断灵敏度77.2%,特异度82.8%,ROC曲线下面积为0.791。血清mi R-18a水平与胃癌相关抗原MG7-Ag明显正相关,与糖抗原(CA)-72-4、CA-50和甲胎蛋白(AFP)正相关,与癌胚抗原(CEA)无明显相关性。结论 mi R-18a在胃癌患者血清中水平升高,作为新的血清学指标在胃癌筛查诊断中有重要参考价值。 展开更多
关键词 胃癌 mir-18a 实时荧光定量PCR 诊断
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子宫肌瘤及瘤旁平滑肌组织中miR-18a及ERα的表达分析 被引量：5
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作者 邢景娜 王世荣 +2 位作者 薛娟 庞旭娇 刘叶 《中国临床医生杂志》 2017年第1期81-83,共3页
目的子宫肌瘤及瘤旁平滑肌组织中miR-18a及ERα的表达分析。方法选取子宫肌瘤患者的肌瘤组织标本68例,取其瘤旁组织作为对照,比较子宫肌瘤组织和瘤旁组织、单发肌瘤组织和多发肌瘤组织中miR-18a和ERα表达的差异,分析子宫肌瘤组织中miR-... 目的子宫肌瘤及瘤旁平滑肌组织中miR-18a及ERα的表达分析。方法选取子宫肌瘤患者的肌瘤组织标本68例,取其瘤旁组织作为对照,比较子宫肌瘤组织和瘤旁组织、单发肌瘤组织和多发肌瘤组织中miR-18a和ERα表达的差异,分析子宫肌瘤组织中miR-18a和ERα表达的相关性。结果子宫肌瘤组织的miR-18a表达平均光密度(95.28±4.50)低于瘤旁组织(138.54±5.62),差异具有显著性(P<0.05):子宫肌瘤组织的ERα表达平均光密度(381.49±18.35)高于瘤旁组织(935.21±24.68),差异具有显著性(P<0.05)。多发肌瘤组织的miR-18a表达平均光密度(89.35±4.05)低于单发肌瘤组织(102.84±4.18),差异具有显著性(P<0.05);多发肌瘤组织的ERα表达平均光密度(367.54±25.17)高于单发肌瘤组织(392.71±22.29),差异具有显著性(P<0.05);子宫肌瘤组织的miR-18a表达平均光密度与ERα表达平均光密度呈负相关(r=-0.485,P<0.001)。结论miR-18a在子宫肌瘤组织特别是多发肌瘤组织中呈低表达,而ERα呈高表达,可能为miR-18a影响了子宫肌瘤组织中ERα的表达。 展开更多
关键词 子宫肌瘤 瘤旁组织 mir-18a ERΑ
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下调miR-18a和miR-328抑制肺腺癌A549细胞的侵袭和迁移 被引量：3
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作者 杜传冲 郑金旭 +1 位作者 陆小威 汪毅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1051-1054,共4页
目的分析miR-18a和miR-328在肺腺癌A549细胞中的表达,并探讨下调miR-18a或miR-328的表达对其侵袭和迁移能力的影响。方法用荧光定量PCR检测A549细胞中miR-18a和miR-328的表达;通过转染miR-18a抑制物(miR-18a inhibitor)或miR-328 inhibi... 目的分析miR-18a和miR-328在肺腺癌A549细胞中的表达,并探讨下调miR-18a或miR-328的表达对其侵袭和迁移能力的影响。方法用荧光定量PCR检测A549细胞中miR-18a和miR-328的表达;通过转染miR-18a抑制物(miR-18a inhibitor)或miR-328 inhibitor,下调miR-18a或miR-328的表达,采用TranswellTM侵袭、迁移实验分析A549细胞侵袭和迁移能力的变化。结果 A549细胞中miR-18a和miR-328均呈高表达;而转染相应抑制物后miR-18a、miR-328表达下降,A549细胞的侵袭、迁移能力均明显降低。结论下调A549细胞miR-18a或miR-328水平可有效抑制肿瘤细胞的侵袭、迁移。 展开更多
关键词 mir-18a mir-328 A549细胞 侵袭 迁移
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