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粉防己碱通过miR-149-5p/HMGA2轴调节食管癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭
1
作者 常健 刘清娥 +4 位作者 闫丽娟 田利 李森 李志国 徐建萍 《中国细胞生物学学报》 2025年第6期1379-1387,共9页
该文旨在探讨粉防己碱(Tet)通过miR-149-5p/高迁移率族蛋白A2(HMGA2)轴对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR检测食管癌细胞系(EC9706、Eca109、TE-13、TE-1)以及正常食管上皮细胞(HEEC)中mi R-149-5p、HMGA2 mRNA表达水... 该文旨在探讨粉防己碱(Tet)通过miR-149-5p/高迁移率族蛋白A2(HMGA2)轴对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR检测食管癌细胞系(EC9706、Eca109、TE-13、TE-1)以及正常食管上皮细胞(HEEC)中mi R-149-5p、HMGA2 mRNA表达水平,筛选最佳细胞系进行后续实验;分别用不同浓度(5、10、20μmol/L)Tet处理筛选得到的最佳细胞系EC970648 h,利用CCK-8法检测细胞的存活率获得合适的Tet浓度;取对数生长期EC9706细胞,随机分为对照组、Tet组、Tet+抑制剂阴性对照(inhibitor NC)组、Tet+miR-149-5p抑制剂(miR-149-5p inhibitor)组,qRT-PCR检测各细胞中miR-149-5p、HMGA2 mRNA表达水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡;Western blot检测间充质标志物N-钙黏蛋白(N-cadherin)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、HMGA2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、细胞周期素D1(CyclinD1)表达水平;Transwell测定细胞迁移与侵袭情况;CCK-8法检测细胞增殖情况;双荧光素酶实验检验miR-149-5p、HMGA2靶向关系。10μmol/L Tet为该研究最佳浓度。HMGA2为miR-149-5p的靶向结合位点。与HEEC细胞相比,食管癌细胞系中miR-149-5p表达水平显著降低,HMGA2 mRNA表达水平升高(P<0.05),其中EC9706细胞中两者水平变化最为显著,因此,EC9706细胞作为后续实验的最佳实验细胞。与对照组相比,Tet组EC9706细胞24 h、48 h的D_(450)值,迁移与侵袭细胞数,CyclinD1、N-cadherin、HMGA2表达水平显著下降,凋亡率及Bax、E-cadherin表达水平显著上升(P<0.05);与Tet+inhibitor NC组相比,Tet+miR-149-5p inhibitor组EC9706细胞24 h、48 h的D_(450)值,迁移与侵袭细胞数,CyclinD1、N-cadherin、HMGA2表达水平显著上升,凋亡率及Bax、E-cadherin表达水平显著下降(P<0.05)。Tet可能通过上调miR-149-5p,抑制HMGA2表达,进而诱导食管癌细胞凋亡,抑制其增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 粉防己碱 mir-149-5p/HMGA2轴 食管癌细胞 迁移 侵袭 增殖 凋亡
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长链非编码RNA-AP001528.2通过靶向调控miR-149-5p介导宫颈癌的发生发展
2
作者 叶文蔚 应柳青 +2 位作者 蒋梦亭 修丽梦 柴芝红 《全科医学临床与教育》 2025年第4期298-302,F0002,F0003,共7页
目的研究长链非编码RNA AP001528.2对宫颈癌C-33A细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨其调控机制。方法采用qRT-PCR实验检测61例宫颈癌组织及癌旁组织中miR-149-5p的表达量,再分析AP001528.2和miR-149-5p的表达水平的相关性;采用CCK-... 目的研究长链非编码RNA AP001528.2对宫颈癌C-33A细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨其调控机制。方法采用qRT-PCR实验检测61例宫颈癌组织及癌旁组织中miR-149-5p的表达量,再分析AP001528.2和miR-149-5p的表达水平的相关性;采用CCK-8法、Transwell测定与划痕实验方法,检测AP001528.2基因表达下调对C-33A细胞增殖活性、迁移速率及侵袭潜能的影响变化;荧光原位杂交试验检测miR-149-5p与AP001528.2在宫颈癌组织和细胞中的共定位情况,通过生物信息学预测网站预测到miR-149-5p与AP001528.2有互补结合位点,并利用双荧光素酶报告系统鉴定它们的靶向关系;再记录敲低或者上调AP001528.2表达后miR-149-5p的表达变化情况;将miR-149-5p inhibitor与siRNA-AP001528.2共转染C-33A细胞后,检测C-33A细胞增殖、迁移和侵袭情况。结果在宫颈癌组织中miR-149-5p呈低表达,且与AP001528.2的表达呈负相关;敲低AP001528.2的表达可以明显抑制C-33A细胞的增殖、迁移和侵袭能力;AP001528.2靶向调控miR-149-5p的表达,下调AP001528.2水平能升高miR-149-5p的表达,而上调AP001528.2水平能降低miR-149-5p的表达;下调miR-149-5p表达能明显逆转敲低AP001528.2水平对C-33A细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用。AP001528.2与miR-149-5p在细胞质中存在共定位,且两者间存在靶向调控关系。结论AP001528.2与宫颈癌的发展及预后密切相关,AP001528.2可通过靶向调控miR-149-5p表达促进宫颈癌C-33A细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 AP001528.2 mir-149-5p 宫颈癌 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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Circ_0085315通过miR-149-5p/IRGQ通路对Treg介导的结肠癌免疫逃逸的机制探讨
3
作者 廖汉琪 唐羿 +1 位作者 胡凯 姜耕 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第4期915-924,共10页
目的:探讨Circ_0085315通过miR-149-5p/免疫相关GTP酶Q(IRGQ)通路对Treg介导的结肠癌(CC)免疫逃逸的机制。方法:收集50例CC患者癌组织及正常组织,体外培养CC细胞系(SW480、HCT116、HT29、SW620、Lovo)和人正常结肠上皮细胞HCoEpiC,qRT-... 目的:探讨Circ_0085315通过miR-149-5p/免疫相关GTP酶Q(IRGQ)通路对Treg介导的结肠癌(CC)免疫逃逸的机制。方法:收集50例CC患者癌组织及正常组织,体外培养CC细胞系(SW480、HCT116、HT29、SW620、Lovo)和人正常结肠上皮细胞HCoEpiC,qRT-PCR检测组织和细胞中Circ_0085315表达水平。以CC细胞系SW480细胞为研究对象,通过生物信息学分析、双荧光素酶报告基因实验、RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验验证Circ_0085315、miR-149-5p、IRGQ三者间的关系,qRT-PCR检测细胞中Circ_0085315、miR-149-5p和IRGQ mRNA表达水平,CCK-8检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞中IRGQ、Ki-67、PCNA、Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达,ELISA检测CC细胞与Treg共培养体系中免疫相关细胞因子水平,流式细胞术检测CC细胞与Treg共培养体系中FOXP3^(+)CD25^(+)、FOXP3^(+)CD4^(+)、FOXP3^(+)CD8^(+)比例。通过小鼠成瘤实验验证Circ_0085315对CC肿瘤生长、miR-149-5p/IRGQ通路以及免疫相关细胞因子的影响。结果:Circ_0085315在CC组织和细胞系中过表达。经生物信息学分析、双荧光素酶报告基因实验、RIP实验验证,miR-149-5p可能是Circ_0085315的下游靶点,IRGQ可能是miR-149-5p的一个靶基因。沉默Circ_0085315可降低CC细胞中IRGQ mRNA和蛋白表达水平、提高miR-149-5p表达水平(P<0.05);降低CC细胞存活率并提高细胞凋亡率,同时降低Ki-67、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平,提高Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达水平(P<0.05);还可降低CC细胞与Treg共培养体系中IL-10、TGF-β含量及FOXP3^(+)CD25^(+)、FOXP3^(+)CD4^(+)比例,提高IL-2、IFN-γ含量及FOXP3^(+)CD8^(+)比例(P<0.05)。进一步研究结果显示,抑制miR-149-5p表达可提高IRGQ mRNA表达水平,并减弱沉默Circ_0085315对CC细胞增殖、凋亡以及免疫逃逸的影响。体内小鼠成瘤实验显示,沉默Circ_0085315后肿瘤中IRGQ mRNA表达水平以及肿瘤体积、重量降低,而miR-149-5p表达水平升高(P<0.05);此外,外周血血清中IL-10、TGF-β含量降低,IL-2、IFN-γ含量升高(P<0.05)。结论:沉默Circ_0085315通过调控miR-149-5p/IRGQ通路不仅可抑制CC细胞增殖并诱导细胞凋亡,还可抑制Treg介导的CC免疫逃逸。 展开更多
关键词 Circ_0085315 mir-149-5p 免疫相关GTP酶Q TREG 结肠癌 免疫逃逸
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血清miR-513a-5p、miR-149-3p与2型糖尿病合并骨质疏松症患者骨代谢指标及胰岛素抵抗的关系 被引量：1
4
作者 郝敏 刘婕妤 郭玲玲 《四川医学》 2025年第6期653-658,共6页
目的研究miR-513a-5p、miR-149-3p与2型糖尿病(T2DM)合并骨质疏松症患者骨代谢指标及胰岛素抵抗的关系及临床应用价值。方法选取2022年4月至2024年4月我院诊断治疗的T2DM患者263例,分为合并骨质疏松组(106例)和未合并骨质疏松组(157例)... 目的研究miR-513a-5p、miR-149-3p与2型糖尿病(T2DM)合并骨质疏松症患者骨代谢指标及胰岛素抵抗的关系及临床应用价值。方法选取2022年4月至2024年4月我院诊断治疗的T2DM患者263例,分为合并骨质疏松组(106例)和未合并骨质疏松组(157例),比较两组血清miR-513a-5p、miR-149-3p表达水平,Pearson分析血清miR-513a-5p、miR-149-3p与骨代谢指标及胰岛素抵抗的相关性,Logistic分析T2DM患者合并骨质疏松症的因素,ROC分析血清miR-513a-5p、miR-149-3p对T2DM患者合并骨质疏松症的预测价值。结果合并骨质疏松组与未合并骨质疏松组相比血清miR-513a-5p、miR-149-3p水平都显著降低(P<0.05);合并骨质疏松组与未合并骨质疏松组糖尿病病程、补充钙剂情况、β-CTX、N-MID、PINP、25(OH)D3、胰岛素抵抗指数(χ^(2)/t=3.162、6.567、5.575、16.045、15.980、5.034、4.781)差异有统计学意义(P<0.05)。合并骨质疏松组血清miR-513a-5p与β-CTX、N-MID、胰岛素抵抗指数呈负相关(r=-0.342、-0.461、-0.318,P<0.05),与PINP、25(OH)D3呈正相关(r=0.427、0.353,P<0.05);miR-149-3p水平与β-CTX、N-MID、胰岛素抵抗指数呈负相关(r=-0.437、-0.341、-0.373,P<0.05),与PINP、25(OH)D3呈正相关(r=0.442、0.409,P<0.05)。糖尿病病程、β-CTX、N-MID、胰岛素抵抗指数(OR=1.726、1.857、3.784、2.281)是影响T2DM患者合并骨质疏松症的危险因素,补充钙剂、PINP、25(OH)D3、miR-513a-5p、miR-149-3p(OR=0.844、0.653、0.778、0.937、0.752)是影响T2DM患者合并骨质疏松症的保护因素(P<0.05)。血清miR-513a-5p、miR-149-3p、两者联合对T2DM患者合并骨质疏松症诊断的AUC分别为0.833(95%CI 0.783~0.883)、0.773(95%CI 0.717~0.830)、0.883(95%CI 0.843~0.923),敏感度分别为80.19%、77.36%、90.57%,特异度分别为77.71%、75.80%、73.89%,血清miR-513a-5p、miR-149-3p两者联合对T2DM患者合并骨质疏松症的预测价值高于单独诊断(Z_(两者联合-miR-513a-5p)=2.717、P=0.007,Z_(两者联合-miR-149-3p)=4.327、P<0.001)。结论T2DM合并骨质疏松症患者血清miR-513a-5p、miR-149-3p表达水平降低,血清miR-513a-5p、miR-149-3p与骨代谢指标及胰岛素抵抗有关,两者联合对T2DM患者合并骨质疏松症具有一定预测价值。 展开更多
关键词 mir-513a-5p mir-149-3p 2型糖尿病 骨质疏松症 骨代谢指标 胰岛素抵抗
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LncRNA FBXL19-AS1靶向miR-149-5p/RAB31对膀胱癌细胞增殖、侵袭及EMT的影响
5
作者 闫志胜 何正光 彭心霞 《中国细胞生物学学报》 2025年第8期1900-1908,共9页
该文探讨了长链非编码RNA F-box和富含亮氨酸的重复蛋白19反义RNA1(LncRNA FBXL19-AS1)靶向微小RNA-149-5p/Ras相关蛋白31(miR-149-5p/RAB31)对膀胱癌细胞增殖、侵袭、上皮–间质转化(EMT)的影响。将T24细胞分为5组:Control组、sh-NC组... 该文探讨了长链非编码RNA F-box和富含亮氨酸的重复蛋白19反义RNA1(LncRNA FBXL19-AS1)靶向微小RNA-149-5p/Ras相关蛋白31(miR-149-5p/RAB31)对膀胱癌细胞增殖、侵袭、上皮–间质转化(EMT)的影响。将T24细胞分为5组:Control组、sh-NC组、sh-FBXL19-AS1组、sh-FBXL19-AS1+anti-miR-NC组、sh-FBXL19-AS1+anti-miR-149-5p组。RT-qPCR检测LncRNA FBXL19-AS1、miR-149-5p和RAB31 mRNA表达情况,MTT法检测细胞活力,平板克隆实验检测细胞增殖情况,Transwell小室法检测细胞侵袭情况,双荧光素酶报告实验检测LncRNA FBXL19-AS1与miR-149-5p、miR-149-5p与RAB31的靶向关系,Western blot法检测E-cadherin、N-cadherin蛋白含量,裸鼠成瘤实验检测肿瘤体积、质量以及miR-149-5p、RAB31蛋白水平。结果显示,与sh-NC组相比,sh-FBXL19-AS1组T24细胞miR-149-5p水平、E-cadherin蛋白水平显著升高,而LncRNA FBXL19-AS1水平、RAB31 mRNA水平、D值、克隆形成数、侵袭数、N-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05);而sh-FBXL19-AS1+anti-miR-149-5p组可以逆转上述结果;双荧光素酶报告结果显示LncRNA FBXL19-AS1与miR-149-5p以及mi R-149-5p与RAB31之间存在靶向关系;裸鼠成瘤实验表明沉默LncRNA FBXL19-AS1后,肿瘤的体积、质量以及RAB31蛋白表达量显著减少,miR-149-5p表达水平显著升高(P<0.05)。该研究首次发现,干扰LncRNA FBXL19-AS1可能通过上调miR-149-5p、下调RAB31的表达,抑制膀胱癌细胞增殖、侵袭、EMT,为临床治疗膀胱癌提供了新的靶点。 展开更多
关键词 LncRNA FBXL19-AS1 mir-149-5p RAB31 膀胱癌 EMT
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miR-149-5p在肝细胞癌中的表达及其临床意义 被引量：5
6
作者 曹亚玲 陈陵 +5 位作者 吕沐瀚 魏晓林 吴玉云 罗刚 刘祥德 杨仕明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期627-631,共5页
目的分析miR-149-5p在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法应用qRT-PCR方法检测40对HCC癌组织和癌旁肝组织中miR-149-5p的表达,并分析miR-149-5p的表达与肝癌患者临床病理之间的关系,进一步将以红色... 目的分析miR-149-5p在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法应用qRT-PCR方法检测40对HCC癌组织和癌旁肝组织中miR-149-5p的表达,并分析miR-149-5p的表达与肝癌患者临床病理之间的关系,进一步将以红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)为报告基因的miR-149-5p慢病毒(LV-miR-149-5p)感染MHCC97-H肝癌细胞,以过表达miR-149-5p,采用MTT检测感染后细胞增殖的变化,采用流式细胞仪测定感染后细胞周期的变化,并采用Transwell侵袭实验检测感染后细胞的体外侵袭能力的变化。结果 qRT-PCR结果提示miR-149-5p在HCC癌组织中的相对含量(5.522±1.104)低于癌旁肝组织(9.279±1.594)(P<0.05),统计分析表明miR-149-5p在癌和癌旁肝组织中相对含量的比值与AFP含量负相关(P<0.05)。体外实验证实,miR-149-5p过表达不能影响细胞周期但能抑制细胞增殖(P<0.05),而在Transwell侵袭实验中,LV-miR-149-5p感染MHCC97-H细胞后,对照细胞组透膜细胞数为(86.3±11.8)/视野,对照慢病毒组透膜细胞数为(83.7±4.0)/视野,LV-miR-149-5p组透膜细胞数为(50.6±3.4)/视野,实验组细胞侵袭能力较对照组细胞显著降低(P<0.05)。结论 miR-149-5p的过表达可抑制MHCC97-H细胞的增殖和侵袭,因此,miR-149-5p可作为一种抑癌基因在HCC的诊断及治疗中发挥作用。 展开更多
关键词 mir-149-5p mir-149 肝癌 肝细胞癌
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miR-146aC>G,miR-149T>C基因多态性与缺血性脑卒中易感性的研究 被引量：6
7
作者 胡亚梅 李书剑 +4 位作者 姜晓峰 李刚 张弥兰 张钱林 向莉 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第29期5648-5650,5643,共4页
目的:探讨中国汉族人群中miR-146aC>G,miR-149T>C基因多态性与缺血性脑卒中易感性的关系。方法:利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法检测196例缺血性脑卒中患者和205例健康对照中miR-146aC>G,miR-149T&g... 目的:探讨中国汉族人群中miR-146aC>G,miR-149T>C基因多态性与缺血性脑卒中易感性的关系。方法:利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法检测196例缺血性脑卒中患者和205例健康对照中miR-146aC>G,miR-149T>C的基因型,统计学方法比较两组间基因型及等位基因分布差异。结果:miR-146aC>G位点各基因型在病例组和对照组分布无明显差异,但等位基因G会增加缺血性脑卒中的患病风险;miR-149T>C位点各基因型在病例组和对照组分布无明显差异。在分层分析中,miR-146aC>G会增加女性和非高血压患者缺血性脑卒中的患病风险,miR-149T>C会增加非高血压患者缺血性脑卒中的患病风险。结论:miR-146aG等位基因,miR-149C等位基因与汉族人群缺血性脑卒中易感性有一定的相关性。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 mir-146aC〉G mir-149T〉C 易感性
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miR-149-3p 通过靶向FOXP3 抑制宫颈癌HeLa细胞的恶性生物学行为 被引量：3
8
作者 王慧玲 杨君 +1 位作者 陈瑞香 蔡政 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期704-710,共7页
目的:探索miR-149-3p对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响及其机制。方法:HeLa细胞随机分为5组:未转染(HeLa)组、mimic-scramble组、miR-149 mimic组、FOXP3过表达(pc-FOXP3)组、共转染(mimic+pc-FOXP3)组,Mimicscramble为miR... 目的:探索miR-149-3p对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响及其机制。方法:HeLa细胞随机分为5组:未转染(HeLa)组、mimic-scramble组、miR-149 mimic组、FOXP3过表达(pc-FOXP3)组、共转染(mimic+pc-FOXP3)组,Mimicscramble为miR-149 mimic的阴性对照随机序列。荧光素酶实验验证miR-149-3p与FOXP3的靶向结合关系。实时定量PCR(q RT-PCR)检测HeLa细胞中miR-149-3p表达及FOXP3的m RNA水平,Western blotting检测FOXP3的蛋白水平。CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞凋亡,Transwell实验检测细胞侵袭,划痕实验分析细胞迁移。结果:荧光素酶实验显示miR-149-3p可靶向结合FOXP3。与未转染组相比miR-149 mimic组miR-149-3p表达升高、FOXP3 m RNA水平下降(P<0.01),而且miR-149mimic组FOXP3蛋白水平低于未转染组(P<0.01)、pc-FOXP3组FOXP3蛋白水平高于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组FOXP3蛋白水平降低(P<0.01)。miR-149 mimic组细HeLa胞增殖倍数低于未转染组(P<0.01),pc-FOXP3组细胞增殖倍数高于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组细胞增殖倍数下降(P<0.01);miR-149 mimic组HeLa细胞凋亡率高于未转染组(P<0.01),pc-FOXP3组细胞凋亡率低于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组细胞凋亡率上升(P<0.01);miR-149 mimic组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率低于未转染组(P<0.01),pc-FOXP3组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率高于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率下降(P<0.01)。结论:miR-149-3p通过靶向FOXP3抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭和迁移,同时促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 mir-149-3p FOXP3基因 宫颈癌 HELA细胞 增殖 凋亡 侵袭 迁移
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妊娠期糖尿病患者血清miR-149水平与胰岛素抵抗的关系 被引量：11
9
作者 董春萍 吴贵福 +1 位作者 张雅 高珊 《西部医学》 2020年第5期700-703,共4页
目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者血清miR-149水平与胰岛素抵抗的关系。方法选取2017年1月~2018年8月陕西省人民医院收治的63例妊娠期糖尿病患者设为观察组,选择本院同期产检健康妊娠产妇63例设为对照组,用自动糖化血红蛋白检测仪测定糖... 目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者血清miR-149水平与胰岛素抵抗的关系。方法选取2017年1月~2018年8月陕西省人民医院收治的63例妊娠期糖尿病患者设为观察组,选择本院同期产检健康妊娠产妇63例设为对照组,用自动糖化血红蛋白检测仪测定糖化血红蛋白(HbA1c),用生化分析仪检测受试者餐前空腹血糖(FPG),用免疫测定分析仪检测血清空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)=FPG×FINS/22.5。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测所有研究对象血清miR-149表达水平。用Pearson分析miR-149与血糖、胰岛素等指标的相关性。对影响胰岛素抵抗的相关因素进行Logistic回归分析。结果与对照组相比,观察组孕妇HOMA-IR、FPG、FINS、HbA1C水平、miR-149水平较高(P<0.05);Pearson法分析显示观察组孕妇血清miR-149水平与FPG、FINS、HOMA-IR呈正相关(P<0.05),与HbA1C无相关性(P>0.05);多因素Logistic回归分析显示血清miR-149水平升高是影响胰岛素抵抗的危险因素。结论妊娠期糖尿病患者血清miR-149水平上调,可能与妊娠期糖尿病孕妇胰岛素抵抗有关。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 血清mir-149 胰岛素抵抗 血糖
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miR-149通过靶向FOXM1基因抑制前列腺癌细胞的生长和侵袭 被引量：7
10
作者 赵涛 刘家骥 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期1080-1083,共4页
目的:探讨miR-149对前列腺癌细胞生长和侵袭的影响,并研究miR-149的靶基因及其功能。方法:利用实时荧光定量PCR检测前列腺癌和癌旁组织miR-149和FOXM1 mRNA表达水平。在人前列腺癌细胞系PC3和DU145细胞中瞬时转染miR-149模拟物和阴性对... 目的:探讨miR-149对前列腺癌细胞生长和侵袭的影响,并研究miR-149的靶基因及其功能。方法:利用实时荧光定量PCR检测前列腺癌和癌旁组织miR-149和FOXM1 mRNA表达水平。在人前列腺癌细胞系PC3和DU145细胞中瞬时转染miR-149模拟物和阴性对照miRNA,运用平板克隆形成和Transwell侵袭实验检测细胞生长和侵袭。在细胞中分别转染miR-149靶基因FOXM1的siRNA和siRNA阴性对照,利用Western blot检测FOXM1蛋白表达情况,并检测细胞的克隆形成和侵袭能力。结果:在前列腺癌中miR-149低表达(P<0.01),FOXM1 mRNA高表达(P<0.01)。与对照组细胞相比,转染miR-149模拟物的PC3和DU145细胞克隆数目减少(P<0.01),发生侵袭的细胞减少(P<0.01);FOXM1蛋白水平在转染miR-149模拟物的PC3(P<0.01)和DU145细胞(P<0.05)中较对照组细胞降低。转染FOXM1 siRNA的PC3和DU145细胞中FOXM1蛋白水平较对照组降低,且克隆形成和侵袭能力较对照组明显降低(P<0.01)。结论:miR-149通过靶向FOXM1抑制前列腺癌细胞生长和侵袭,发挥着抑癌基因的作用,可作为前列腺癌分子治疗的有效靶点。 展开更多
关键词 前列腺癌 mir-149 FOXM1 生长侵袭
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miR-149-5p对变应性鼻炎小鼠Notch1表达和Treg/Th17免疫平衡的影响 被引量：9
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作者 闫智永 张爽 唐桥斐 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第6期660-667,共8页
目的:探讨miR-149-5p对变应性鼻炎(AR)小鼠神经源性位点缺口同系物蛋白1(Notch1)表达和调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响。方法:12只BALB/c小鼠,3只为正常组,余9只小鼠采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]建立AR模型... 目的:探讨miR-149-5p对变应性鼻炎(AR)小鼠神经源性位点缺口同系物蛋白1(Notch1)表达和调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响。方法:12只BALB/c小鼠,3只为正常组,余9只小鼠采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]建立AR模型,再随机均分为模型组(仅造模)、miR-149-5p激动剂对照组(鼻内滴注miR-149-5p agomir阴性对照)及miR-149-5p激动剂组(鼻内滴注miR-149-5p agomir);采用行为学评分考察各组各组小鼠过敏症状、苏木精/伊红染色(HE)分析各组小鼠鼻黏膜病理学变化、实时荧光定量PCR(q PCR)检测各组小鼠鼻黏膜组织miR-149-5p,采用酶联免疫吸附法(ELISA)分析各组小鼠血清免疫球蛋白E(Ig E)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)水平,采用蛋白印迹法检测各组小鼠鼻黏膜组织Notch1、维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)及叉头状螺旋转录因子3(Foxp3)蛋白表达;利用miRDB网站预测miR-149-5p与Notch1 3’-UTR结合位点,构建Notch1 3’-UTR区野生型(WT)和突变型(MUT)荧光素酶报告载体,转染293T细胞,设置NC+Notch1(MUT)组、miR-149-5p agomir+Notch1(MUT)组、NC+Notch1(WT)组及miR-149-5p agomir+Notch1(WT)组,采用双荧光素酶实验分析并计算荧光素酶相对活性。结果:与模型组比较,miR-149-5p激动剂组小鼠行为学评分明显下降,鼻黏膜炎症反应减轻,上皮结构趋于完整,miR-149-5p的表达显著增加,血清中Ig E、IL-6水平下降,IL-10水平升高,Foxp3蛋白的表达增加,Notch1和RORγt蛋白的表达减少(P <0. 05或P <0. 01);miRDB网站预测miR-149-5p与Notch1 3’-UTR存在互补位点,双荧光素酶实验结果显示,miR-149-5p agomir+Notch1(WT)组的荧光素酶相对活性较NC+Notch1(WT)组降低(P <0. 05)。结论:miR-149-5p可能通过靶向Notch1调节Foxp3和RORγt蛋白表达,影响Treg/Th17细胞平衡,从而改善AR小鼠鼻部过敏症状。 展开更多
关键词 变应性鼻炎 mir-149-5 p基因 神经源性位点缺口同系物蛋白1 辅助性T细胞17 调节性T细胞 叉头状螺旋转录因子3 维甲酸相关核孤儿受体γt
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延龄草总皂苷调控hsacirc0025033/miR-149对非小细胞肺癌细胞生物学行为的影响 被引量：5
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作者 林庆胜 郑勇 +1 位作者 李慎科 杨保参 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第21期3841-3847,共7页
目的:研究延龄草总皂苷对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞A549增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:将不同浓度的延龄草总皂苷作用于A549细胞,应用实时定量PCR检测hsa_circ_0025033和miR-149的表达,应用双荧光素酶... 目的:研究延龄草总皂苷对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞A549增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法:将不同浓度的延龄草总皂苷作用于A549细胞,应用实时定量PCR检测hsa_circ_0025033和miR-149的表达,应用双荧光素酶基因系统验证hsa_circ_0025033与miR-149的靶向关系。分析干扰hsa_circ_0025033表达对A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。结果:延龄草总皂苷可抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,下调hsa_circ_0025033表达,上调miR-149表达(P<0.05)。干扰hsa_circ_0025033可抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡(P<0.05)。hsa_circ_0025033可靶向结合miR-149,干扰hsa_circ_0025033表达可上调miR-149表达(P<0.05)。过表达hsa_circ_0025033逆转延龄草总皂苷对A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响(P<0.05)。结论:延龄草总皂苷能够抑制NSCLC细胞A549增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,可能与调节hsa_circ_0025033/miR-149通路有关。 展开更多
关键词 延龄草总皂苷 非小细胞肺癌 hsa_circ_0025033 mir-149 增殖 迁移 侵袭 凋亡
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miR-149-3p靶向FOXM1抑制人胃癌细胞SGC-7901生长和迁移 被引量：3
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作者 林志金 张长青 +3 位作者 陈新琦 许伯明 李颖怡 陈雅妮 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1212-1216,共5页
目的:探究miR-149-3p靶向FOXM1抑制人胃癌细胞SGC-7901生长和迁移的机制。方法:体外培养人胃癌细胞SGC-7901,并分为:Ctrl组、miR-NC组、miR-149-3p mimic组、pLV-FOXM1组和pLV-FOXM1+miR-149-3p mimic组;使用RT-PCR分别检测正常组织、... 目的:探究miR-149-3p靶向FOXM1抑制人胃癌细胞SGC-7901生长和迁移的机制。方法:体外培养人胃癌细胞SGC-7901,并分为:Ctrl组、miR-NC组、miR-149-3p mimic组、pLV-FOXM1组和pLV-FOXM1+miR-149-3p mimic组;使用RT-PCR分别检测正常组织、原位肿瘤组织和转移后肿瘤组织中miR-149-3p和FOXM1 mRNA的表达水平并分析miR-149-3p与FOXM1的线性关系;使用miR-NC、miR-149-3p mimic转染细胞后检测miR-149-3p和FOXM1 mRNA表达水平;双荧光素酶检测miR-149-3p与FOXM1的靶向关系;CCK-8检测细胞增殖情况,体外侵袭实验检测细胞侵袭情况,划痕实验检测细胞迁移情况;蛋白质印迹检测N-cadherin、E-cadherin、MMP-2、MMP-9、FOXM1、PCNA、p21的表达水平。结果:相比原位肿瘤组织和转移后肿瘤组织,正常组织中FOXM1 mRNA表达较低、miR-149-3p表达较高。荧光素酶报告实验表明miR-149-3p序列上有FOXM1的结合位点。相比空白对照组(Ctrl),miR-149-3p mimic组细胞增长受到显著抑制,FOXM1、P21、E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05);单位面积细胞侵袭数目、细胞迁移能力、PCNA、N-cadherin、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。相比Ctrl组,pLV-FOXM1组细胞生长受到促进,FOXM1、P21、E-cadherin蛋白表达水平显著降低(P<0.05);单位面积细胞侵袭数目、细胞迁移能力、PCNA、N-cadherin、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。相比pLV-FOXM1组,miR-149-3p+pLV-FOXM1组细胞增长受到显著抑制,FOXM1、P21、E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05);单位面积细胞侵袭数目、细胞迁移能力、PCNA、N-cadherin、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:miR-149-3p可以靶向FOXM1抑制人胃癌细胞SGC-7901的生长侵袭和迁移,其机制与调控细胞生长侵袭和迁移的蛋白有关。 展开更多
关键词 胃癌 mir-149-3p 细胞迁移 细胞生长
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陕西省汉族人群miR-149基因多态性与缺血性脑卒中相关性研究 被引量：5
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作者 何三军 韩亦非 《现代检验医学杂志》 CAS 2013年第6期32-34,38,共4页
目的探讨陕西省汉族人群miR-149基因多态性的分布情况及其与缺血性脑卒中（ischemicstroke,IS）的关系。方法缺血性脑卒中组357例，对照组373例，应用聚合酶链反应一限制性内切酶片段长度多态性方法进行基因分型。比较各基因型和等位基... 目的探讨陕西省汉族人群miR-149基因多态性的分布情况及其与缺血性脑卒中（ischemicstroke,IS）的关系。方法缺血性脑卒中组357例，对照组373例，应用聚合酶链反应一限制性内切酶片段长度多态性方法进行基因分型。比较各基因型和等位基因频率分布及其与缺血性脑卒中的关系。结果受试者携带CC基因型比携带TT基因型[（0R（95％CI）：1．739（1．088-2．781），P=0．020]患IS的风险要高。或至少携带一个C等位基因的受试者比携带T等位基因的受试者更易患IS[OR（95％CI）：1．243（1．003-1．539），P=0．046]。CC基因型患者血浆叶酸水平低于TT基因型患者。结论在汉族人群中，microRNA-149C〉T单核苷酸多态性与缺血性脑卒中有关。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中mir-149 单核苷酸多态性
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猪miR-149靶基因预测及生物信息学分析 被引量：1
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作者 张家庆 武松霞 +5 位作者 任巧玲 王献伟 陈俊峰 王璟 白献晓 邢宝松 《河南农业科学》 北大核心 2019年第3期123-131,144,共10页
通过对猪miR-149进行靶基因预测及相关生物信息学分析,探索其影响猪颗粒细胞凋亡和卵泡闭锁的作用机制。首先利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ssc-miR-149在氧化应激组和正常组表达量的变化,通过转染miR-149 mimic并利用MTT和qRT-PCR... 通过对猪miR-149进行靶基因预测及相关生物信息学分析,探索其影响猪颗粒细胞凋亡和卵泡闭锁的作用机制。首先利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ssc-miR-149在氧化应激组和正常组表达量的变化,通过转染miR-149 mimic并利用MTT和qRT-PCR检测细胞活性和凋亡基因的表达情况,同时预测ssc-miR-149与细胞凋亡相关基因的靶向关系;然后利用JASPAR、PROMO、TargetScan、miRanda、RNAhybrid、DAVID等软件和NCBI、miRBase、Ensembl等数据库对ssc-miR-149进行转录因子结合位点预测、保守性分析、靶基因预测、GO富集分析和KEGG信号通路富集分析。结果表明,氧化应激组ssc-miR-149的表达量极显著下调;但过表达ssc-miR-149时,能极显著提高细胞活性,并抑制H_2O_2诱导的凋亡相关基因(Caspase-3、PUMA和FAS)的表达;ssc-miR-149启动子区域具有SP1、p53等多个转录因子结合位点,其靶基因显著富集于TNF信号通路、Rap1信号通路和NOD样受体信号通路等。由此推测,ssc-miR-149受到SP1等多种转录因子调控,它可能通过抑制TNF、Rap1和NOD信号通路中的靶基因PUMA、Caspase-9和FAF-1来调控猪颗粒细胞的凋亡,进而影响猪的卵泡发育。 展开更多
关键词 ssc-mir-149 靶基因 生物信息学 颗粒细胞凋亡 卵泡闭锁
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miR-149-3p靶向调节Akt1介导牙周膜干细胞成骨分化的作用机制研究 被引量：1
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作者 袁琴 张玲玲 +2 位作者 戴丽 章茜 卫峥 《联勤军事医学》 CAS 2024年第1期1-5,共5页
目的探讨miR-149-3p靶向调节蛋白激酶B(protein kinase B,Akt1)介导牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨分化的作用及机制。方法选取2022-01月在作者医院口腔科就诊的18~25岁患者因正畸而拔除的前磨牙或第三磨牙... 目的探讨miR-149-3p靶向调节蛋白激酶B(protein kinase B,Akt1)介导牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨分化的作用及机制。方法选取2022-01月在作者医院口腔科就诊的18~25岁患者因正畸而拔除的前磨牙或第三磨牙,分离牙周膜组织,提取人PDLSCs。免疫组织化学染色法检测角蛋白(pan-cytokeratin)和波形蛋白(vimentin)鉴定人PDLSCs。将人PDLSCs分为对照组、空载组、miR-149-3p inhibitor组和miR-149-3p mimic组。对照组人PDLSCs不进行处理,空载组、miR-149-3p inhibitor组和miR-149-3p mimic组按Lipofectamine 3000说明书方法分别将空载质粒和miR-149-3p inhibitor、miR-149-3p mimic转染到人PDLSCs。实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测细胞内miR-149-3p、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、Akt1 mRNA表达;Western blot检测细胞内ALP、Runx2、Akt1蛋白表达。采用Fluo-3 AM探针检测细胞内钙离子。结果免疫组织化学结果显示,人PDLSCs二氨基联苯胺(diaminobenzidine,DAB)染色vimentin呈阳性,pan-cytokeratin呈阴性,提示PDLSCs提取成功。与对照组和空载组相比,miR-149-3p inhibitor组miR-149-3p表达显著降低,ALP、Runx2、Akt1 mRNA和蛋白表达、细胞内钙离子荧光强度均显著升高(P均<0.05);miR-149-3p mimic组miR-149-3p表达显著升高,ALP、Runx2、Akt1 mRNA和蛋白表达、细胞内钙离子荧光强度均显著降低(P均<0.05)。与miR-149-3p inhibitor组相比,miR-149-3p mimic组miR-149-3p表达显著升高,ALP、Runx2、Akt1 mRNA和蛋白表达、细胞内钙离子荧光强度均显著降低(P均<0.05)。对照组与空载组各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论过表达miR-149-3p可靶向抑制Akt1蛋白的表达,从而抑制成骨标志物ALP和Runx2表达,降低人PDLSCs内钙离子浓度,不利于人PDLSCs成骨分化。 展开更多
关键词 mir-149-3p 蛋白激酶B 牙周膜干细胞 成骨分化
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miR-149-5p/PANX1轴对垂体瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量：1
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作者 张盈妍 王宇思 +1 位作者 任新宇 沈静雪 《解剖科学进展》 CAS 2022年第6期677-680,685,共5页
目的探究miR-149-5p对垂体瘤细胞增殖、迁移和侵袭的作用及可能机制。方法qRT-PCR检测垂体瘤组织及正常垂体组织中miR-149-5p表达;将miR-149-5p模拟物转染垂体瘤细胞,Edu实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;生物信息学分... 目的探究miR-149-5p对垂体瘤细胞增殖、迁移和侵袭的作用及可能机制。方法qRT-PCR检测垂体瘤组织及正常垂体组织中miR-149-5p表达;将miR-149-5p模拟物转染垂体瘤细胞,Edu实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;生物信息学分析PANX1 mRNA 3′UTR上miR-149-5p的潜在结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证;qRT-PCR和Western blot检测转染miR-149-5p模拟物后垂体瘤细胞PANX1表达;转染miR-149-5p模拟物后,Edu实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。结果miR-149-5p在垂体瘤组织中下调;过表达miR-149-5p抑制垂体瘤细胞增殖、迁移和侵袭;miR-149-5p靶向结合PANX1并抑制其表达;过表达PANX1逆转了过表达miR-149-5p对垂体瘤细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论miR-149-5p抑制PA细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向抑制PANX1表达有关。 展开更多
关键词 mir-149-5p PANX1 垂体瘤 增殖 迁移 侵袭
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干扰DBH-AS1上调miR-149抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移与侵袭 被引量：2
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作者 徐海霞 伊碧霞 胡娥 《中国优生与遗传杂志》 2021年第11期1538-1543,共6页
目的研究干扰长链非编码RNA(lncRNA)DBH-AS1是否通过上调微小RNA-149(miR-149)影响子宫内膜癌细胞的增殖、迁移与侵袭。方法将子宫内膜癌细胞RL95-2分为si-DBH-AS1组(转染DBH-AS1小干扰RNA si-DBH-AS1)、si-NC组(转染小干扰RNA阴性对照s... 目的研究干扰长链非编码RNA(lncRNA)DBH-AS1是否通过上调微小RNA-149(miR-149)影响子宫内膜癌细胞的增殖、迁移与侵袭。方法将子宫内膜癌细胞RL95-2分为si-DBH-AS1组(转染DBH-AS1小干扰RNA si-DBH-AS1)、si-NC组(转染小干扰RNA阴性对照si-NC)、si-DBH-AS1+anti-miR-149组(同时转染si-DBH-AS1和miR-149抑制剂anti-miR-149)、si-DBH-AS1+anti-miR-NC组(同时转染si-DBH-AS1和miR-149抑制剂阴性对照anti-miR-NC)。采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中DBH-AS1和miR-149的表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期,Transwell检测迁移、侵袭细胞数目,免疫印迹实验(Western blot)检测细胞核相关抗原Ki67、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白的表达。生物信息学预测与双荧光素酶实验DBH-AS1与miR-149的靶向结合。结果24例子宫内膜癌组织中DBH-AS1的表达水平显著升高,miR-149的表达水平显著降低,二者呈显著负相关(P<0.05)。与si-NC组相比,si-DBH-AS1组子宫内膜癌细胞的存活率、S期细胞比例、迁移细胞数、侵袭细胞数、Ki67、N-cadherin蛋白表达水平显著减少,miR-149表达水平、G0-G1期细胞比例、E-cadherin的蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。与si-DBH-AS1+anti-miR-NC组相比,si-DBH-AS1+anti-miR-149组显著提高子宫内膜癌细胞的存活率、S期细胞比例、迁移细胞数、侵袭细胞数、Ki67、N-cadherin蛋白表达水平,显著降低miR-149表达水平、G0-G1期细胞比例、E-cadherin的蛋白表达水平(P<0.05)。DBH-AS1可以靶向调控miR-149的表达。结论干扰DBH-AS1可以上调miR-149的表达,抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移与侵袭。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 DBH-AS1 mir-149 增殖 迁移 侵袭
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miR-149-3p在IL-6诱导胃癌细胞NCI-N87黏附中的作用 被引量：1
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作者 张锋 吴震 +2 位作者 徐宁 杜红蕾 郭海彦 《解剖科学进展》 CAS 2023年第2期169-172,176,共5页
目的观察miR-149-3p在白介素6(IL-6)诱导胃癌细胞NCI-N87黏附中的作用。方法胃癌细胞NCI-N87分成Control(对照)、IL-6(IL-6处理)、miR-NC+IL-6(转染mimics control后IL-6处理)、miR-149-3p+IL-6(转染miR-149-3p mimics后IL-6处理)组,MT... 目的观察miR-149-3p在白介素6(IL-6)诱导胃癌细胞NCI-N87黏附中的作用。方法胃癌细胞NCI-N87分成Control(对照)、IL-6(IL-6处理)、miR-NC+IL-6(转染mimics control后IL-6处理)、miR-149-3p+IL-6(转染miR-149-3p mimics后IL-6处理)组,MTT方法测定细胞增殖和黏附能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Western blot检测细胞中MMP-2、MMP-9、Twist1蛋白表达。荧光素酶报告系统鉴定miR-149-3p和Twist1靶向关系。在胃癌细胞中共转染miR-149-3p mimics、pCDNA3.1(+)-Twist1,检测细胞增殖、黏附、侵袭、迁移和MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果IL-6组细胞miR-149-3p表达水平降低,细胞增殖、黏附、侵袭、迁移和MMP-2、MMP-9、Twist1蛋白表达水平升高。miR-149-3p+IL-6组细胞miR-149-3p表达水平升高,细胞增殖、黏附、侵袭、迁移和MMP-2、MMP-9、Twist1蛋白表达水平降低。miR-149-3p靶向负调控Twist1表达。过表达Twist1可以逆转miR-149-3p对IL-6条件下胃癌细胞增殖、黏附、侵袭、迁移和MMP-2、MMP-9蛋白表达影响。结论miR-149-3p靶向下调Twist1表达抑制IL-6诱导的胃癌细胞NCI-N87黏附和迁移。 展开更多
关键词 胃癌 mir-149-3p IL-6 黏附 TWIST1
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lncRNA SNHG14靶向miR-149-5p调控MIA诱导的骨关节炎模型细胞损伤 被引量：1
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作者 黄炜 贺媛 张卫涛 《河北医药》 CAS 2022年第5期645-649,共5页
目的探讨长链非编码RNA SNHG14(lncRNA SNHG14)对碘乙酸钠(MIA)诱导的大鼠软骨细胞损伤的影响及分子机制。方法4μmol/L MIA诱导软骨细胞损伤模型,将其分为对照组、MIA组、MIA+si-NC组、MIA+si-SNHG14组、MIA+miR-NC组、MIA+miR-149-5p... 目的探讨长链非编码RNA SNHG14(lncRNA SNHG14)对碘乙酸钠(MIA)诱导的大鼠软骨细胞损伤的影响及分子机制。方法4μmol/L MIA诱导软骨细胞损伤模型,将其分为对照组、MIA组、MIA+si-NC组、MIA+si-SNHG14组、MIA+miR-NC组、MIA+miR-149-5p组、MIA+si-SNHG14+anti-miR-NC组、MIA+si-SNHG14+anti-miR-149-5p组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA SNHG14和miR-149-5p的表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)水平;双荧光素酶报告实验检测lncRNA SNHG14和miR-149-5p的靶向关系。结果与对照组相比,经MIA诱导的软骨细胞损伤中,lncRNA SNHG14表达水平升高,miR-149-5p表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡率升高,Bcl-2表达水平与SOD和CAT活性降低,Bax和MDA表达水平升高(P<0.05)。抑制lncRNA SNHG14和过表达miR-149-5p均降低细胞凋亡率,提高Bcl-2表达水平与SOD和CAT活性,降低Bax和MDA表达水平(P<0.05)。lncRNA SNHG14靶向调控miR-149-5p表达,且下调miR-149-5p能逆转抑制lncRNA SNHG14表达对细胞凋亡及氧化应激反应的影响(P<0.05)。结论抑制lncRNA SNHG14通过靶向上调miR-149-5p减轻MIA诱导的软骨细胞损伤。 展开更多
关键词 lncRNA SNHG14 mir-149-5p MIA 骨关节炎 软骨细胞
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