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黑腹果蝇slmb新突变体mf917的鉴定
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作者 冯春霞 杨敏 +7 位作者 罗俊鹏 严江松 安云飞 符纯海 张博文 杨颜静 魏微 张庆海 《贵州医科大学学报》 2025年第8期1144-1155,共12页
目的鉴定果蝇品系mf917的突变基因slmb,并探究其造成果蝇翅及复眼发育缺陷的原因。方法突变品系mf917进行直接镶嵌克隆(direct mosaic clone)分析和镶嵌克隆(mosaic clone)分析,观察成虫翅及复眼的表型并解剖翅成虫盘;使用免疫荧光(immu... 目的鉴定果蝇品系mf917的突变基因slmb,并探究其造成果蝇翅及复眼发育缺陷的原因。方法突变品系mf917进行直接镶嵌克隆(direct mosaic clone)分析和镶嵌克隆(mosaic clone)分析,观察成虫翅及复眼的表型并解剖翅成虫盘;使用免疫荧光(immunofluorescent,IF)染色方法检测Notch、Wnt、Hippo和Hedgehog信号通路的靶基因或报告基因在mf917克隆中的表达情况,判断mf917与这些信号通路的相关性;使用反向PCR鉴定mf917中Minos转座子的插入位点及所影响的基因;利用转座子精确剪切方法检测插入mf917转座子跳除后表型是否恢复;使用mf917与已报道的slmb突变进行互补实验,进一步验证mf917与slmb的相关性。结果突变品系mf917存在翅发育缺陷以及复眼增生等表型,三龄幼虫翅成虫盘野生型区域出现明显增生;在mf917克隆中,Notch信号靶基因Cut和Wingless(Wg)表达无明显变化,Wnt信号报告基因Dll-lacZ和fz3-lacZ表达升高,Hippo信号报告基因CycE-lacZ和ex697-lacZ表达下降、bantam sensor-GFP表达升高,Hedgehog信号报告基因ptc-lacZ和Ci蛋白在翅成虫盘前部腔室克隆中表达升高;mf917突变影响的基因是slmb。结论mf917通过调控Wnt、Hippo和Hedgehog信号通路,从而影响果蝇翅和复眼的发育,mf917鉴定为一个slmb新突变体。 展开更多
关键词 黑腹果蝇 slmb基因 mf917 WNT信号通路 Hippo信号通路 HEDGEHOG信号通路
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