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mTORC1/2抑制剂与伊马替尼联用抑制Ph^+ ALL细胞株生长的作用机制
1
作者 吴佳慧 石芳芳 +1 位作者 龚玉萍 石睿 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期216-220,229,共6页
目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白C1/2(mTORC1/2)抑制剂PP242与伊马替尼(IM)联用对费城染色体阳性(Ph+)急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞株SUP-B15的抗白血病作用及机理。方法以SUP-B15细胞为研究模型,MTT法检测IM与PP242联合处理SUP-B15细胞... 目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白C1/2(mTORC1/2)抑制剂PP242与伊马替尼(IM)联用对费城染色体阳性(Ph+)急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞株SUP-B15的抗白血病作用及机理。方法以SUP-B15细胞为研究模型,MTT法检测IM与PP242联合处理SUP-B15细胞72h后的半数抑制浓度(IC50)及联合作用指数(CI);Western blot法检测PP242处理SUP-B15细胞后对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/mTOR通路的影响,以及IM与PP242联合处理SUP-B15细胞后对PI3K/Akt/mTOR通路及凋亡相关蛋白的影响。结果IM单用于SUP-B15细胞的IC50值为(1.50±0.09)μmol/L。而IM与20、30、50nmol/L PP242联用于SUP-B15细胞,其IC50分别下降为(0.81±0.030)μmol/L、(0.36±0.140)μmol/L、(0.02±0.002)μmol/L,CI值分别为0.764、0.545、0.507,提示两药有较高的协同作用。PP242单独作用于SUP-B15细胞后,磷酸化Akt(p-Akt)、p-4EBP1、p-elF4E、p-ABL、p-mTOR、p-P70等PI3K/Akt/mTOR通路上的关键磷酸化蛋白表达下调,且这种变化呈现浓度和时间依赖性。PP242与IM联合用于SUP-B15细胞时,SUP-B15细胞PI3K/Akt/mTOR通路的各关键蛋白下调较PP242或IM单用时更明显,凋亡相关蛋白Bax、cleaved Caspase-3上调也较两药单用时更明显。结论PP242与IM联合使用时可增强对于PI3K/Akt/mTOR通路的抑制,增加由Bax、Caspase-3所介导的凋亡作用。 展开更多
关键词 Ph+急性淋巴细胞白血病 mtorc1/2 AKT PP242 伊马替尼
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白头翁汤对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠结肠组织mTORC1-STAT3-COX-2信号通路的影响 被引量：22
2
作者 何琼姿 韦鹏 +5 位作者 刘欢欢 张俊芝 刘彤彤 石琨群 徐艺 刘史佳 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期50-56,共7页
目的探讨白头翁汤治疗溃疡性结肠炎(UC)的可能作用机制。方法40只C57BL/6雌鼠随机分为空白组、模型组、白头翁汤给药组及雷帕霉素给药组。采用3.5%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液构建小鼠UC模型。造模同时进行给药处理。白头翁汤组每日给予6.83 ... 目的探讨白头翁汤治疗溃疡性结肠炎(UC)的可能作用机制。方法40只C57BL/6雌鼠随机分为空白组、模型组、白头翁汤给药组及雷帕霉素给药组。采用3.5%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液构建小鼠UC模型。造模同时进行给药处理。白头翁汤组每日给予6.83 g·kg^(-1)白头翁汤灌胃,雷帕霉素组每日用2 mg·kg^(-1)雷帕霉素药液进行腹腔注射,空白组和模型组每日给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃。记录小鼠每日体质量变化及粪便性状,7 d后处死小鼠。测量结肠长度并观察结肠组织病理学变化。采用流式细胞术检测小鼠血清炎症因子含量,采用免疫印迹法检测结肠组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、转录激活因子3(STAT3)、核糖体S6蛋白激酶(P70S6K)及其磷酸化蛋白表达,免疫组化法检测结肠组织中磷酸化P70S6K的表达,qPCR检测结肠组织环氧化酶(COX-2)mRNA表达水平。结果与空白组相比,模型组小鼠体质量减轻,结肠长度缩短、疾病活动指数(DAI)和组织病理学评分升高(P<0.001),血清中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量升高(P<0.001),结肠组织中COX-2 mRNA表达水平、p-mTOR/mTOR、p-P70S6K/P70S6K、p-STAT3/STAT3均升高(P<0.01,P<0.001)。与模型组相比,白头翁汤组和雷帕霉素组小鼠上述表型症状均得到改善,血清中IL-6和TNF-α含量下降(P<0.01,P<0.001),结肠组织中p-mTOR/mTOR、p-P70S6K/P70S6K、p-STAT3/STAT3和COX-2 mRNA表达减少(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论白头翁汤能有效预防DSS诱导的小鼠结肠炎症,其作用机制可能与抑制mTORC1-STAT3-COX-2信号通路有关。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 白头翁汤 mtorc1-STAT3-COX-2信号通路 雷帕霉素
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人参炔三醇通过下调ERK1/2和mTORC1通路调控肺癌NCI-H1299细胞的增殖、凋亡 被引量：3
3
作者 郭伟强 鞠鑫 +2 位作者 许斌 秦粉菊 王桃云 《肿瘤药学》 CAS 2020年第5期536-539,563,共5页
目的研究人参炔三醇(PXT)对肺癌NCI-H1299细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其潜在作用机制。方法MTT检测PXT对NCI-H1299细胞增殖的影响;流式细胞术检测PXT对NCI-H1299细胞凋亡的影响;Western blotting检测PXT作用前后ERK1/2和mTORC1通路相... 目的研究人参炔三醇(PXT)对肺癌NCI-H1299细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其潜在作用机制。方法MTT检测PXT对NCI-H1299细胞增殖的影响;流式细胞术检测PXT对NCI-H1299细胞凋亡的影响;Western blotting检测PXT作用前后ERK1/2和mTORC1通路相关因子及凋亡相关因子Bcl-2的表达。结果PXT可有效抑制肺癌NCI-H1299细胞的增殖,且抑制效果与作用浓度和时间呈正相关(P<0.05)。PXT作用于NCI-H1299细胞后,凋亡细胞数明显增加(P<0.05)。PXT可降低p-ERK1/2、p-mTORC1及下游调控因子p65的磷酸化水平,并降低抗凋亡因子Bcl-2的蛋白表达水平(P<0.05)。结论PXT可通过下调ERK1/2和mTORC1通路来抑制肺癌NCI-H1299细胞的增殖,并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 人参炔三醇 肺癌细胞系NCI-H1299 ERK1/2 mtorc1
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CTP-NPRL2融合蛋白对肾癌原代细胞迁移侵袭能力的抑制及机制研究 被引量：1
4
作者 史晓博 叶茂 +5 位作者 曾洋 陈明龙 陈志雄 熊晶 吕不凡 唐伟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期2592-2599,共8页
目的将原核表达的氮酶调节因子2(nitrogen permease regulator 2-like,NPRL2)融合蛋白通过胞浆转导肽(cytoplasmic transduction peptide,CTP)转入肾癌原代细胞内,观察其对肾癌原代细胞迁移侵袭的影响,并分析与肾癌上皮间质转化(epithel... 目的将原核表达的氮酶调节因子2(nitrogen permease regulator 2-like,NPRL2)融合蛋白通过胞浆转导肽(cytoplasmic transduction peptide,CTP)转入肾癌原代细胞内,观察其对肾癌原代细胞迁移侵袭的影响,并分析与肾癌上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系。方法胶原酶消化法培养肾癌原代细胞;构建原核表达质粒pET15b-CTP-NPRL2和pET15b-NPRL2,表达融合蛋白CTP-NPRL2和NPRL2,并通过Western blot鉴定目的蛋白的表达。将培养成功的原代细胞分为BLANK组、NPRL2组和CTP-NPRL2组。免疫荧光检测目的蛋白的细胞定位;Transwell迁移侵袭实验检测导入NPRL2蛋白后,对肾癌细胞迁移侵袭能力的影响;Real-time PCR检测Raptor、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤粘蛋白(Fibronectin)m RNA表达水平;Western blot检测Raptor、E-cadherin、Vimentin、Fibronectin蛋白表达水平。结果成功培养出肾癌原代细胞并通过鉴定;测序结果及Western blot检测结果显示质粒构建成功并表达出目的蛋白;免疫荧光检测结果显示CTP-NPRL2融合蛋白可以穿过胞膜并定位于胞浆;迁移和侵袭实验显示CTP-NPRL2组肾癌细胞迁移侵袭能力明显下降(P<0.05);Real-time PCR和Western blot检测结果显示CTP-NPRL2组Raptor、Vimentin与Fibronectin的m RNA、蛋白表达水平与NPRL2组和BLANK组相比明显降低(P<0.05),而E-cadherin的mRNA、蛋白表达水平与NPRL2组与BLANK组相比明显升高(P<0.05)。结论 NPRL2可能通过与Raptor相互作用影响mTORC1的活性,进而调节EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、Fibronectin的表达量,影响肾癌细胞的迁移侵袭能力。 展开更多
关键词 NPRL2 mtorc1 迁移 侵袭 上皮间质转化
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米色脂肪,一种新型的产热脂肪 被引量：10
5
作者 蔡根响 景欣悦 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期116-121,共6页
肥胖是因机体能量代谢失衡导致的体脂过多堆积,已成为一种流行病,威胁人们的健康。研究发现,在冷刺激或β肾上腺素受体激动剂刺激下,小鼠皮下白色脂肪组织中散在出现棕色样脂肪细胞,命名为米色脂肪(beige adipocytes)。米色脂肪具有产... 肥胖是因机体能量代谢失衡导致的体脂过多堆积,已成为一种流行病,威胁人们的健康。研究发现,在冷刺激或β肾上腺素受体激动剂刺激下,小鼠皮下白色脂肪组织中散在出现棕色样脂肪细胞,命名为米色脂肪(beige adipocytes)。米色脂肪具有产热功能,促进能量消耗。米色脂肪调控通路的研究,为预防治疗肥胖等代谢性疾病提供了新的方向。本文就米色脂肪功能、产热机制及其激活途径等研究进展作一综述。 展开更多
关键词 米色脂肪 P38 MAPK PKA-mtorc1 Ⅱ型固有淋巴结细胞(ILC2s) 自噬 Zfp423 恒定自然杀伤T细胞(iNKT)
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白头翁汤治疗溃疡性结肠炎的信号通路机制分析 被引量：3
6
作者 孙巍琪 张旖晴 魏玮 《北京中医药》 2024年第9期981-985,共5页
溃疡性结肠炎(UC)是一种反复发作的炎症性肠病。目前研究认为,其发病与肠道上皮屏障缺陷、肠道菌群失调、免疫应答失调及遗传等因素密切相关。白头翁汤治疗UC具有一定的疗效。白头翁汤及其加减方可通过多种信号通路减少促炎细胞因子的表... 溃疡性结肠炎(UC)是一种反复发作的炎症性肠病。目前研究认为,其发病与肠道上皮屏障缺陷、肠道菌群失调、免疫应答失调及遗传等因素密切相关。白头翁汤治疗UC具有一定的疗效。白头翁汤及其加减方可通过多种信号通路减少促炎细胞因子的表达,增加机体抗炎因子,促进肠上皮细胞增殖以加速肠上皮修复,保护肠道黏液屏障,减轻肠道炎症反应,从而减少肠上皮细胞异常增殖,避免“炎-癌”的发生。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 白头翁汤 IL-6/JAK/STAT3信号通路 mtorc1-STAT3-COX-2信号通路 NOTCH信号通路
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