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乙酰胆碱及其拮抗剂对人SK-N-SH细胞增殖及mAchR1表达的影响 被引量：1
1
作者 胡昕 吕建新 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期287-296,共10页
用CCK-8比色法和流式细胞术,检测乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)及拮抗剂阿托品(at-ropine,Atro)对SK-N-SH细胞增殖活性和周期分布的调节作用;进一步用荧光定量PCR、免疫印迹和流式细胞间接免疫荧光技术,分析SK-N-SH细胞毒蕈碱受体亚型Ⅰ... 用CCK-8比色法和流式细胞术,检测乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)及拮抗剂阿托品(at-ropine,Atro)对SK-N-SH细胞增殖活性和周期分布的调节作用;进一步用荧光定量PCR、免疫印迹和流式细胞间接免疫荧光技术,分析SK-N-SH细胞毒蕈碱受体亚型Ⅰ型(mAchR1)和c-fos的表达差异。结果表明,1mmol/LAch对SK-N-SH细胞有明显促增殖作用,而1mmol/LAtro阻滞细胞从S期向G_2/M期移行;1mmol/LAch与1mmol/LAtro均反馈调节mAchR1的蛋白水平,但mAchR1mRNA的表达不受影响;1mmol/LAch显著上调c-fosmRNA和Fos蛋白的表达,但这种作用可被Atro逆转。提示胆碱类受体参与配基对肿瘤细胞的促增殖作用。 展开更多
关键词 乙酰胆碱 拮抗剂 人SK-N-SH 细胞增殖 machr1表达 胆碱受体途径 中枢神经 信息传递物质
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多重荧光定量PCR对mAchR1表达相对定量分析 被引量：1
2
作者 胡昕 吕建新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1864-1866,共3页
目的:建立多重荧光通道定量PCR方法研究乙酰胆碱Ach对毒蕈碱受体mAchRsⅠ型基因表达的影响。方法:分别用FAM和VIC不同荧光素标记的MGB-TaqMan探针同时对靶基因和看家基因的转录拷贝数进行多色多通道测定。结果:多重荧光通道定量PCR与单... 目的:建立多重荧光通道定量PCR方法研究乙酰胆碱Ach对毒蕈碱受体mAchRsⅠ型基因表达的影响。方法:分别用FAM和VIC不同荧光素标记的MGB-TaqMan探针同时对靶基因和看家基因的转录拷贝数进行多色多通道测定。结果:多重荧光通道定量PCR与单通道荧光定量PCR比较没有差异。Ach作用SK-N-SH细胞24h和72h后mAchR1表达分别上调1.38倍和下降6.71倍(P<0.01)。结论:MGB-TaqMan探针技术在多重荧光RT-qPCR技术中具有高灵敏度和高重复性。Ach对mAchR1 mRNA表达水平有调节作用,并有时间效应。 展开更多
关键词 多重荧光 基因 machr1 基因表达
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乙酰胆碱及其拮抗剂对人SK-N-SH细胞增殖及mAchR1表达的影响
3
作者 胡昕 吕建新 《检验医学教育》 2005年第2期33-41,共9页
用CCK-8比色法和流式细胞术,检测乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)及拮抗剂阿托品(atropine,Atro)对SK-N-SH细胞增殖活性和周期分布的调节作用;进一步用荧光定量PCR、免疫印迹和流式细胞间接免疫荧光技术,分析SK-N-SH细胞毒蕈碱受体亚型型(m... 用CCK-8比色法和流式细胞术,检测乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)及拮抗剂阿托品(atropine,Atro)对SK-N-SH细胞增殖活性和周期分布的调节作用;进一步用荧光定量PCR、免疫印迹和流式细胞间接免疫荧光技术,分析SK-N-SH细胞毒蕈碱受体亚型型(mAchR1)和c-fos的表达差异。结果表明,1mmol/L Ach对SK-N-SH细胞有明显促增殖作用,而1mmol/L Atro阻滞细胞从S期向G2/M期移行;1mmol/L Ach与1mmol/L Atro均反馈调节mAchR1的蛋白水平,但mAchR1mRNA的表达不受影响;1mmol/L Ach显著上调c-fos mRNA和Fos蛋白的表达,但这种作用可被Atro逆转。提示胆碱类受体参与配基对肿瘤细胞的促增殖作用。 展开更多
关键词 乙酰胆碱 SK—N—SH machr1 增殖 SK-N-SH细胞 细胞增殖活性 拮抗剂 毒蕈碱受体亚型 mol/L 间接免疫荧光技术
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