巨大芽胞杆菌luxAB标记菌株的根际定殖研究 被引量：20

1

作者 刘健 李俊 +3 位作者 姜昕 徐玲玫 樊蕙 葛诚 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期1-4,共4页

通过三亲本杂交方法成功地用发光酶基因luxAB标记巨大芽胞杆菌ATCC1 45 81 ,所获得的标记菌株ATCC1 45 81 L在不同的条件下能稳定发光。将该标记菌株制成微生物接种剂 ,并利用土壤微缩系统将其接种小麦进一步研究它在小麦根际的定殖动... 通过三亲本杂交方法成功地用发光酶基因luxAB标记巨大芽胞杆菌ATCC1 45 81 ,所获得的标记菌株ATCC1 45 81 L在不同的条件下能稳定发光。将该标记菌株制成微生物接种剂 ,并利用土壤微缩系统将其接种小麦进一步研究它在小麦根际的定殖动态和散布规律。结果发现 ,ATCC1 45 81 L在灭菌土壤中的定殖水平高于不灭菌土壤 ,在垂直方向上主要的定殖在 0～ 7cm根段间 ,且随深度增加而降低。ATCC1 45 81 L在小麦种后第 7d之前就已达到最高定殖水平 ,在初始接种量为 3 40× 1 0 7cfu/g根情况下 ,第 7d时灭菌土壤处理的根际菌数为 2 5 4× 1 0 5cfu/g根 ,而不灭菌土壤的根际菌数为 8 87× 1 0 4 cfu/g根 ;随着时间的增长 ,定殖数量明显降低。 展开更多

关键词 巨大芽胞杆菌 发光酶基因 luxab 小麦根际定殖 基因标记

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用发光酶基因(luxAB)标记法研究慢生花生根瘤菌的竞争结瘤能力 被引量：10

2

作者 罗明云 张小平 +2 位作者 李登煜 陈强 周俊初 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期278-283,共6页

lux AB基因标记是一种新型基因标记技术 ,在很多研究领域都有着良好的应用前景。研究通过三亲本杂交将 lux AB基因成功地向慢生型花生根瘤菌进行了转移 ,并获得了一株带 Lux AB基因标记的菌株Cspr7- 1。对 Cspr7- 1进行性状、标记基因... lux AB基因标记是一种新型基因标记技术 ,在很多研究领域都有着良好的应用前景。研究通过三亲本杂交将 lux AB基因成功地向慢生型花生根瘤菌进行了转移 ,并获得了一株带 Lux AB基因标记的菌株Cspr7- 1。对 Cspr7- 1进行性状、标记基因的遗传稳定性检测 ,结果表明 ,Lux AB基因不仅能有效表达 ,而且性状稳定。在无氮水培条件下进行标记菌株与土著根瘤菌的竞争结瘤试验。结果证实 ,Cspr7- 1在植物根系上的占瘤率平均达到 61 .3% ,比土著根瘤菌的竞争结瘤能力强 ,而且 Cspr7- 1在主根上的侵染能力远较侧根上的强 ,平均高出 2 2 .3%～ 39.6%。 展开更多

关键词 发光酶基因 竞争结瘤能力 luxab基因标记 慢生型花生根瘤菌

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luxAB基因标记的K2116L菌株在棉花根际中的定殖 被引量：12

3

作者 齐飞飞 夏觅真 +4 位作者 唐欣昀 甘旭华 常慧萍 祝凌云 曹媛媛 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期192-196,共5页

采用三亲本杂交法将发光酶luxAB基因转移进棉花根际促生菌芽胞杆菌K2116菌株中,获得标记菌株K2116L。标记菌株连续传代15次均未发生质粒丢失现象,表明标记菌株具有较好的遗传稳定性;K2116L菌株的生长及其释钾能力未受到标记质粒的影响。... 采用三亲本杂交法将发光酶luxAB基因转移进棉花根际促生菌芽胞杆菌K2116菌株中,获得标记菌株K2116L。标记菌株连续传代15次均未发生质粒丢失现象,表明标记菌株具有较好的遗传稳定性;K2116L菌株的生长及其释钾能力未受到标记质粒的影响。K2116L菌株在灭菌和非灭菌的黄褐土、黄潮土和红壤3种土壤中均能长期存活;在灭菌土壤中的数量稍高于非灭菌土壤;在3种土壤中的数量依次为:黄褐土>黄潮土>红壤;在不同土壤中,K2116L菌株具有与土著菌株进行空间和营养竞争的能力。采用根盒试验追踪标记菌株在棉花根部的定殖动态,棉花播种12d时标记菌株在0～2、2～4cm深度根际土壤定殖密度达到最大;18d时在4cm以下的深度达到最高水平。棉花播种18d时标记菌株在所有深度的根表均达到最高定殖水平,0～2cm根段定殖密度为1.76×106cfu.g-1,8cm以下根段达到1.6×105cfu.g-1。补充营养后,根际和根表标记的菌株数量均有明显上升。试验数据显示,随着根的生长标记菌株不断向根尖方向扩散。 展开更多

关键词 棉花根际促生菌 K2116菌株 luxab基因 三亲本杂交 定殖动态

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LuxAB标记的N2106-L在小麦根圈的定植动态 被引量：6

4

作者 常慧萍 曹媛媛 +3 位作者 马忠友 甘旭华 姚丽娟 唐欣昀 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期213-216,共4页

目的研究小麦PGPR（植物根际促生菌）菌株的个体生态学及其在小麦根圈的定植动态。方法采用三亲本杂交法将发光酶基因luxAB转人具有固氮能力的小麦根际促生菌Azotobacter N2106菌株中，获得标记菌株N2106-L，将标记菌株接种到灭菌和非... 目的研究小麦PGPR（植物根际促生菌）菌株的个体生态学及其在小麦根圈的定植动态。方法采用三亲本杂交法将发光酶基因luxAB转人具有固氮能力的小麦根际促生菌Azotobacter N2106菌株中，获得标记菌株N2106-L，将标记菌株接种到灭菌和非灭菌的黄褐土、红壤和黄潮土中研究其存活状况，采用根盒试验追踪标记菌株在小麦根圈的定植动态。结果标记菌株N2106-L具有发光活性和对km、str、tet三种抗生素的抗性，且具有较好的遗传稳定性。N2106-L在灭菌土壤中的数量稍高于非灭菌土壤；在3种土壤中的数量依次为：黄褐土〉黄潮土〉红壤。N2106-L在小麦根表定植密度大于根际定植密度；在小麦根际，小麦播种10d时标记菌株在0-2cm深度根际土壤定植达到最大值（2．17±0．25）×10^6CFU／g土，20d时在2-4cm深度的根际土壤中达到最高定植水平（3．92±0．47）×10^5CFU／g土；在小麦根表，标记菌株在小麦播种10d时在所有深度的根段均达到最高定植水平，0-2cm根段定植密度为（3．60±0．60）×10^6CFU／g鲜根，12cm以下根段达到（2．78±0．56）×10^4CFU／g鲜根。结论标记菌株随着根的伸长不断向根尖方向扩散，且较为稳定地在小麦根圈定植，研究结果为小麦PGPR菌株的应用提供了可靠实验数据。 展开更多

关键词 luxab基因 三亲本杂交 N2106-L菌株 小麦根圈 定植动态 基因标记

原文传递

荧光假单胞菌AS1.867和3-PHB的luxAB基因标记及其在小麦根际的定殖 被引量：5

5

作者 刘健 李俊 +3 位作者 姜昕 徐玲玫 樊蕙 葛诚 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期606-609,共4页

通过三亲本杂交方法成功地用发光酶基因 lux AB标记荧光假单胞菌 ( Pseudomonasflu-orescens) AS1 .86 7- L和 3 - PHB菌株 ,获得的标记菌株 AS1 .86 7- L和 3 - PHB- L在不同的条件下能稳定发光。将 AS1 .86 7- L和 3 - PHB- L制成固... 通过三亲本杂交方法成功地用发光酶基因 lux AB标记荧光假单胞菌 ( Pseudomonasflu-orescens) AS1 .86 7- L和 3 - PHB菌株 ,获得的标记菌株 AS1 .86 7- L和 3 - PHB- L在不同的条件下能稳定发光。将 AS1 .86 7- L和 3 - PHB- L制成固体微生物接种剂 ,并利用土壤微缩系统将其接种于小麦 ,研究它们在小麦根际的定殖动态和散布规律。结果发现 ,二株标记菌株在灭菌土壤上的定殖水平高于不灭菌土壤 ,在垂直方向上定殖主要发生于 0～ 8cm根段间 ,且随着深度的增加而降低。接种菌株在第 7天之前就已达到最高定殖水平 ,在每克根的初始接种量为 2 .3 2× 1 0 8cfu时 ,第 7天的灭菌土壤中 AS1 .86 7- L和 3 - PHB- L的根际菌数分别为 9.6 7× 1 0 6cfu和 6 .90× 1 0 6cfu,不灭菌土壤的根际菌数为 1 .41× 1 0 5cfu和 7.71× 1 0 5cfu。随着时间的延长 ,定殖数量均明显降低 ,3 - PHB- L在 40 展开更多

关键词 荧光假单胞菌 微生物肥料(接种剂) 发光酶基因luxab 小麦根际 定殖

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以luxAB为报告基因的大豆根瘤菌的竞争结瘤研究 被引量：5

6

作者 杨江科 刘墨青 +1 位作者 周琴 周俊初 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期110-112,共3页

将来自pHN101的luxAB基因和来自pTR102的parCBA /DE基因,经过一系列中间载体整合到PLAFR3上构建成广宿主、稳定性质粒PHN158。通过三亲本杂交将pHN158导入费氏中华根瘤菌得到4株能在癸醛的激发下发出荧光的转移接合子WZRL、HWRL、HZRL和... 将来自pHN101的luxAB基因和来自pTR102的parCBA /DE基因,经过一系列中间载体整合到PLAFR3上构建成广宿主、稳定性质粒PHN158。通过三亲本杂交将pHN158导入费氏中华根瘤菌得到4株能在癸醛的激发下发出荧光的转移接合子WZRL、HWRL、HZRL和WWRL。将它们与3株大豆慢生根瘤菌WHB1、WHB2和WWB组配成12对组合,并以黑龙33和Williams为宿主以luxAB为报告基因进行竞争结瘤试验。结果表明,费氏中华根瘤菌与大豆慢生根瘤菌之间的平均竞争结瘤能力相当;同类型根瘤菌不同菌株之间的竞争结瘤能力存在着显著的差异;同时根瘤菌的竞争结瘤能力也明显受到宿主的影响。表明费氏中华根瘤菌与大豆慢生根瘤菌之间的竞争结瘤是一个菌株之间、菌植之间复杂的相互作用的过程。 展开更多

关键词 luxab 费氏中华根瘤菌 大豆慢生根瘤菌 竞争结瘤 报告基因

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基模势对luxAB标记的快生型大豆根瘤菌在土壤中存活的影响 被引量：5

7

作者 崔明学 张成刚 +1 位作者 靳素英 李明祺 《应用生态学报》 CAS CSCD 1997年第5期519-526,共8页

经接合转移将luxAB基因插入快生型大豆根瘤菌 (Rhizobiumfredii)染色体 ,取可高效结瘤固氮的R .frediilux3菌株用于分子生态学研究 .在不同基模势下 ,研究了lux3在土壤中的存活 ,基模势为 - 30和 - 750kPa时 ,lux3在灭菌土中的生存能力... 经接合转移将luxAB基因插入快生型大豆根瘤菌 (Rhizobiumfredii)染色体 ,取可高效结瘤固氮的R .frediilux3菌株用于分子生态学研究 .在不同基模势下 ,研究了lux3在土壤中的存活 ,基模势为 - 30和 - 750kPa时 ,lux3在灭菌土中的生存能力明显 (P<0 .0 5)高于未灭菌土 ,当基模势为 - 1 50 0kPa时 ,土壤是否灭菌对lux3的存活影响没有差异 .不同基模势对lux3活性影响显著 ,在 - 1 50 0kPa的未灭菌土中 ,随着饥饿时间延长 ,可恢复活性的细菌数量显著下降 .同时比较了测定微生物活性的 3种方法 (即生物发光、脱氢酶活性和微生物呼吸 ) ,发光值变化与活细胞密度变化一致 ,PLf值 (即潜在发光 ,Potentialluminescence)反映了可恢复活性的饥饿种群密度 . 展开更多

关键词 大豆根瘤菌 基模势 存活 luxab基因 土壤

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一种应用luxAB基因标记大豆根瘤菌的新方法 被引量：8

8

作者 李杰 陈丽华 +1 位作者 李希臣 朱延明 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期172-175,共4页

研究构建了带有luxAB基因和 parCBA/DE基因的重组质粒 pHN2 0 8,并通过三亲本杂交法将该质粒导入 6株大豆根瘤菌中 ,获得工程菌株。工程菌株在自生条件下和共生条件下的发光稳定性研究结果表明 ,重组质粒 pHN2 0 8可在根瘤菌中稳定传代... 研究构建了带有luxAB基因和 parCBA/DE基因的重组质粒 pHN2 0 8,并通过三亲本杂交法将该质粒导入 6株大豆根瘤菌中 ,获得工程菌株。工程菌株在自生条件下和共生条件下的发光稳定性研究结果表明 ,重组质粒 pHN2 0 8可在根瘤菌中稳定传代。比较了工程菌与出发菌株的竞争结瘤能力 ,结果表明 pHN2 0 8的导入不影响根瘤菌的竞争结瘤能力。从而建立了一种更为简便的应用luxAB基因标记大豆根瘤菌的新方法 ,为检测大豆根瘤菌的结瘤情况以及进一步筛选强竞争结瘤大豆根瘤菌提供了一种适用的方法。 展开更多

关键词 luxab基因 大豆 根瘤菌 parCBA/DE基因 重组质粒 pHN208

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luxAB基因标记甲基对硫磷降解菌DLL-1在土壤和植株根部的生态行为研究 被引量：6

9

作者 孙洁梅 崔中利 +1 位作者 邱珊莲 李顺鹏 《农村生态环境》 CSSCI CSCD 北大核心 2003年第1期43-46,共4页

发光酶标记是 1种有效的跟踪微生物在生态环境中动态行为的技术手段。采用luxAB基因标记技术对甲基对硫磷降解菌DLL - 1在土壤中的分布和植株内的定殖情况进行了研究。结果表明 ,DLL - 1可以较长时间的在植株根际定殖 ,3 0d后仍可用X -... 发光酶标记是 1种有效的跟踪微生物在生态环境中动态行为的技术手段。采用luxAB基因标记技术对甲基对硫磷降解菌DLL - 1在土壤中的分布和植株内的定殖情况进行了研究。结果表明 ,DLL - 1可以较长时间的在植株根际定殖 ,3 0d后仍可用X -感光片检测到菌体的存在 ,而根际外未检测到DLL - 1。植株根剖开后在培养基上培养 2 4h后进行X -光片曝光 ,发现DLL - 1能够进入植株根内并定殖。菌株回收后采用测定其农药降解活力和检查质粒图谱 2种方法证实 ,所观测的回收菌株就是接种的DLL - 展开更多

关键词 农药 甲基对硫磷 降解菌 假单胞菌DLL-1 luxab 分子标记 定殖

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一株克服地黄连作障碍有益菌的鉴定及其LuxAB基因标记 被引量：7

10

作者 谭亚男 马汇泉 +1 位作者 温学森 刘舒 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第17期8967-8969,共3页

[目的]研究对克服地黄(Rehmannia glutinosa)连作障碍有益的43号菌的性质及其对地黄连作障碍的作用效果。[方法]利用细菌16S rDNA的保守序列进行比对,结合形态学观察、革兰氏染色和生理生化等特征对筛选得到的能够克服地黄连作障碍的43... [目的]研究对克服地黄(Rehmannia glutinosa)连作障碍有益的43号菌的性质及其对地黄连作障碍的作用效果。[方法]利用细菌16S rDNA的保守序列进行比对,结合形态学观察、革兰氏染色和生理生化等特征对筛选得到的能够克服地黄连作障碍的43号菌进行鉴定;利用LuxAB发光酶基因对其进行标记,经抗性平板筛选,滴加葵醛在暗室进行检测,看是否得到了重组菌株;比较标记前后菌株对培养基中加入生地提取液的组培苗的作用效果。[结果]鉴定结果表明,43号菌为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。检测结果表明,得到重组菌株,命名为C-43。经过比较,标记前后菌株的生理生化特性基本没有变化,确定C-43对克服地黄连作障碍仍然有益。[结论]经过标记后的恶臭假单胞菌C-43号菌可用于后续的大田研究。 展开更多

关键词 地黄 恶臭假单胞菌 生理生化特性 16S RDNA luxab发光酶基因

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luxAB发光基因标记的铜绿假单胞菌株的构建 被引量：2

11

作者 李闻 刘红艳 黄正 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期57-60,共4页

目的构建表达luxAB发光基因的铜绿假单胞基因工程菌。方法用BglⅡ酶切pUC-luxAB质粒,回收luxAB片段与BamHⅠ酶切的质粒载体pBBR1MCS-5连接形成重组质粒pBBR-luxAB,再转化E.coliDH5α感受态细胞,经庆大霉素抗性、氯霉素抗性、发光检测多... 目的构建表达luxAB发光基因的铜绿假单胞基因工程菌。方法用BglⅡ酶切pUC-luxAB质粒,回收luxAB片段与BamHⅠ酶切的质粒载体pBBR1MCS-5连接形成重组质粒pBBR-luxAB,再转化E.coliDH5α感受态细胞,经庆大霉素抗性、氯霉素抗性、发光检测多重筛选含有pBBR-luxAB重组质粒的的阳性克隆,并设立对照菌株。抽提pBBR-luxAB质粒、酶切、凝胶电泳,验证质粒构建的正确性。通过二亲本杂交方式将pBBR-luxAB质粒导入铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),构建基因工程菌铜绿假单胞菌(pBBR-luxAB)并对其进行质粒传代稳定性、发光动力学曲线以及发光度和活菌数关系进行测定。结果成功构建pBBR-luxAB重组质粒并且确定其成功转入铜绿假单胞菌中,连续转接4次后质粒保持率仍可达93%。在加入底物20min后,重组菌发光强度趋于稳定水平(1.32mV/ml),其发光强度与活菌量呈显著正相关(r=0.96,P<0.05)。结论该研究成功构建luxAB发光基因标记的铜绿假单胞菌(pBBR-luxAB)。 展开更多

关键词 luxab基因 铜绿假单胞菌 接合转移 二亲本杂交 生物检测

原文传递

黄单胞菌属(Xanthomonas)P2126菌株luxAB基因标记及其生理活性的研究 被引量：3

12

作者 齐飞飞 夏觅真 +2 位作者 唐欣昀 沈黄亮 常慧萍 《安徽农学通报》 2007年第10期31-32,共2页

为了研究棉花PGPR菌株黄单胞菌属(Xanthomonas)P2126的有效使用条件,以提高其根圈适应性,充分发挥其促生防病的应用潜力,本项研究采用发光酶基因(luxAB)标记检测技术研究了棉花PGPR菌株黄单胞菌属(Xanthomonas)P2126。研究菌株被luxAB... 为了研究棉花PGPR菌株黄单胞菌属(Xanthomonas)P2126的有效使用条件,以提高其根圈适应性,充分发挥其促生防病的应用潜力,本项研究采用发光酶基因(luxAB)标记检测技术研究了棉花PGPR菌株黄单胞菌属(Xanthomonas)P2126。研究菌株被luxAB基因标记后标记基因的遗传稳定性及标记菌株的生理生化特性。采用三亲本杂交法将发光酶luxAB基因转移进与棉花根际促生菌黄单胞菌P2126菌株中,获得标记菌株P2126L。标记菌株连续传代15次均未发生质粒丢失现象,表明标记菌株具有较好的遗传稳定性;P2126L菌株的生长及其解磷能力也没有受到标记质粒的影响,证明可以应用P2126L进行菌株根际定植生态学研究。 展开更多

关键词 棉花根际促生菌 P2126菌株 luxab基因 三亲本杂交

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不同基模势下luxAB标记的弗氏中华根瘤菌在土壤中的存活能力

13

作者 靳素英 张成刚 +1 位作者 田威 仲崇斌 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2001年第5期465-468,共4页

经接合转移将luxAB基因插入弗氏中华根瘤菌 (Rhizobiumfredii)染色体 ,取可高效结瘤固氮的R .frediilux3菌株用于分子生态学研究 .在不同基模势下 ,研究了lux3在土壤中的存活 ,基模势为 - 30和 - 75 0kPa时 ,lux3在灭菌土中的存活能力明... 经接合转移将luxAB基因插入弗氏中华根瘤菌 (Rhizobiumfredii)染色体 ,取可高效结瘤固氮的R .frediilux3菌株用于分子生态学研究 .在不同基模势下 ,研究了lux3在土壤中的存活 ,基模势为 - 30和 - 75 0kPa时 ,lux3在灭菌土中的存活能力明显 (P <0 .0 5 )高于未灭菌土 ,当基模势为 - 15 0 0kPa时 ,土壤是否灭菌对lux3的存活影响没有差异 .不同基模势对lux3活性影响显著 ,在 - 15 0 0kPa的未灭菌土中随着饥饿时间的延长 ,可恢复活性的细菌数量显著下降 .比较了测定微生物活性的 3种方法 (即脱氢酶活性、生物发光和微生物呼吸 ) ,发光值变化与活细胞密度变化一致 .图 4表 2参 展开更多

关键词 弗氏中华根瘤菌 luxab基因 基模势 存活能力 土壤

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LuxAB标记荧光假单胞菌的菜心根际定殖研究 被引量：5

14

作者 夏枫耿 张玲华 +4 位作者 梁淑娃 李姣清 王彦 程庆 徐臣超 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期25-27,共3页

目的:利用三亲本杂交方法将luxAB发光酶基因标记至荧光假单胞菌PF20001上,所获得的标记菌株PF20001-Lux能稳定发光。将该标记菌株制成微生物制剂,接种菜心进一步研究它在菜心根际的定殖动态和散布规律。方法:利用三亲本杂交方法将luxAB... 目的:利用三亲本杂交方法将luxAB发光酶基因标记至荧光假单胞菌PF20001上,所获得的标记菌株PF20001-Lux能稳定发光。将该标记菌株制成微生物制剂,接种菜心进一步研究它在菜心根际的定殖动态和散布规律。方法:利用三亲本杂交方法将luxAB发光酶基因标记至荧光假单胞菌PF20001上,将该菌施与菜心生长土壤中,通过接合子发光检测及发光菌落的平板计数来分析荧光假单胞菌在菜心根际的定殖分布情况。结果:PF20001-Lux在根系周围的土壤中的有一定的定殖率,在根内主要定殖在3～4cm根内。PF20001-Lux在菜心种植后7d前就达到最高定殖水平达3.8×105CFU/g,随后逐渐下降。结论:PF20001-lux在菜心根际具备良好的适应能力。 展开更多

关键词 荧光假单胞菌 发光酶基因luxab 菜心 定殖

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黄单胞菌P5310-luxAB菌株在水稻根际的吸附与土壤中的存活 被引量：4

15

作者 程美霞 张建 +3 位作者 唐欣昀 曹媛媛 甘旭华 孙乐妮 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2011年第7期589-592,596,共5页

目的研究标记菌株在水稻国丰1号幼根根表的吸附动态规律和不同类型土壤中存活情况,为禾本科植物凝集素介导作用、吸附的影响参数和联合固氮的研究及应用提供科学依据。方法采用三亲本杂交法将发光基因luxAB导入水稻根际促生菌黄单胞菌(X... 目的研究标记菌株在水稻国丰1号幼根根表的吸附动态规律和不同类型土壤中存活情况,为禾本科植物凝集素介导作用、吸附的影响参数和联合固氮的研究及应用提供科学依据。方法采用三亲本杂交法将发光基因luxAB导入水稻根际促生菌黄单胞菌(Xanthom onassp)P5310菌株中,标记菌株P5310-luxAB能稳定遗传,luxAB基因的导入不影响标记菌株生长特性。结果 P5310-luxAB菌株存在稳定型和松散型两种吸附,随标记菌株浓度变化的吸附规律符合Langmu ir等温吸附方程,水稻根表最大吸附量qm=3.33×109CFU/g,吸附系数α=2.86×10-8。凝集素处理的水稻根表对标记菌株的亲和力增强,吸附量也随之增大。标记菌株在灭菌土壤和不灭菌土壤中都能很好的存活。在前25 d,不灭菌土壤中菌落数要低于灭菌土壤,随着营养的消耗,细菌明显减少;但补充营养后,在灭菌土壤和不灭菌土壤中标记菌株数量都快速增加,证明标记菌株与不灭菌土壤中的土著微生物的竞争占优势,很快与灭菌土壤中的菌数接近,证明菌株能在土壤中很好地存活与定植。结论以上研究结果为菌株P5310的开发应用提供了可靠的实验数据。 展开更多

关键词 三亲本杂交 黄单胞菌 P5310-luxab 吸附 定植

原文传递

基于luxAB标记菌株的发光定量分析及其在镉毒性检测方面的应用 被引量：2

16

作者 曾军 黄巧云 陈雯莉 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期135-139,共5页

以E.coli(pHN102)为研究对象,探讨了luxAB标记菌株的发光定量方法以及影响其发光测定的相关因素.结果表明,该标记菌株在癸醛诱导发光后存在动态变化的发光曲线,发光强度随时间变化先升后降.增大癸醛浓度会提高发光强度,当癸醛浓度达到1... 以E.coli(pHN102)为研究对象,探讨了luxAB标记菌株的发光定量方法以及影响其发光测定的相关因素.结果表明,该标记菌株在癸醛诱导发光后存在动态变化的发光曲线,发光强度随时间变化先升后降.增大癸醛浓度会提高发光强度,当癸醛浓度达到1%时出现最大发光值;供试菌株在35℃和pH6条件下的发光强度最大,与E.coli的最适生长条件相一致.应用此标记菌株检测镉(Cd)毒性,其相对发光度与Cd浓度存在负相关,线性回归分析可达到1%显著水平.Cd在LB培养基、M9培养基和水中的EC50值分别为4.27mmol/L、34.8mmol/L和62μmol/L,说明Cd在水介质中的毒性远大于在LB、M9培养基中的毒性. 展开更多

关键词 luxab 发光 镉(CD) 毒性

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发光酶基因(luxAB)标记的荧光假单胞菌CP1108的定殖能力研究 被引量：1

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作者 魏永涛 唐欣昀 《中国土壤与肥料》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期72-75,共4页

利用三亲本杂交方法,将luxAB发光酶基因标记至荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)CP1108上,研究标记菌株CP1108L的个体生态学特征及其在棉花根圈的定殖动态。结果表明,标记菌株连续传代20次均未发生质粒丢失现象,标记质粒在受体菌... 利用三亲本杂交方法,将luxAB发光酶基因标记至荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)CP1108上,研究标记菌株CP1108L的个体生态学特征及其在棉花根圈的定殖动态。结果表明,标记菌株连续传代20次均未发生质粒丢失现象,标记质粒在受体菌株中较为稳定,CP1108L菌株的生长及部分生理生化特性没有受到标记质粒的影响;标记菌株能够在棉花根圈中成功定殖,棉花生长14 d时,CP1108L在所有深度的根段均达到最高定殖水平,定殖密度分别为2.31×105 cfu.g-1根土、3.18×105 cfu.g-1鲜根,而其中以0～2 cm根段处标记菌株的定殖密度最大,根际和根表的菌数分别为9.08×104 cfu.g-1根土、1.44×105 cfu.g-1鲜根;接种CP1108和CP1108L菌液处理棉花植株的干重、主根长和株高显著高于对照组;两个菌株处理之间差异不显著。 展开更多

关键词 解磷微生物 荧光假单胞菌 luxab基因 三亲本杂交 盆栽试验

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电转化法将luxAB基因导入毒死蜱降解菌β菌株的研究 被引量：2

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作者 王昀璐 花日茂 +3 位作者 唐欣昀 李瑞雪 张君 王道胜 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期40-45,共6页

采用电转化法将带发光酶基因luxAB的质粒pTR102导入毒死蜱降解菌β菌株,研究了细胞生长状态、电压强度、电击时间和质粒浓度对转化效率的影响,并对转化子的生理特性进行研究.实验结果表明,以处于对数生长早期的菌液制备感受态细胞,在质... 采用电转化法将带发光酶基因luxAB的质粒pTR102导入毒死蜱降解菌β菌株,研究了细胞生长状态、电压强度、电击时间和质粒浓度对转化效率的影响,并对转化子的生理特性进行研究.实验结果表明,以处于对数生长早期的菌液制备感受态细胞,在质粒浓度16.5μg·mL-1、电压2.5kV,电击时间3ms条件下的转化率最高,可达2.73×102个.μg-1(以每μg质粒DNA中所含转化子个数计).转化子lux-β分别在抗生素平板和LB平板中传代10次,仍具有发光活性和对卡那霉素(Km)的抗性,说明质粒pTR102在转化子中可以稳定遗传.转化子的生理特性变化不显著,对毒死蜱的降解能力较出发菌株提高了近1倍. 展开更多

关键词 电转化 发光酶基因 β菌株 毒死蜱 微生物降解

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应用luxAB基因和gusA基因标记大豆根瘤菌的效果 被引量：5

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作者 莫才清 李阜棣 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期19-22,共4页

应用发光酶基因ｌｕｘＡＢ和β－葡萄糖苷酶基因ｇｕｓＡ分别对快生型大豆根瘤菌ＨＮ０１进行了标记，研究了这两种标记系统的检测方法和检测效果，并对这两种标记系统在大豆根瘤菌中的应用进行了分析比较。

关键词 发光酶基因 葡萄糖苷酶基因 大豆 根瘤菌

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钝顶螺旋藻luxAB载体的构建

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作者 朱一伟 唐欣昀 《生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期68-70,共3页

实验拟构建钝顶螺旋藻luxAB载体,为螺旋藻遗传转化操作系统的建立提供技术参考和支持。使用EcoRI和SmaI双酶切质粒pUCΩGUS,胶回收获得含有Ubil启动子基因及amp基因的载体大片段;根据质粒pRL1063a中luxAB基因的序列设计引物,以质粒pRL10... 实验拟构建钝顶螺旋藻luxAB载体,为螺旋藻遗传转化操作系统的建立提供技术参考和支持。使用EcoRI和SmaI双酶切质粒pUCΩGUS,胶回收获得含有Ubil启动子基因及amp基因的载体大片段;根据质粒pRL1063a中luxAB基因的序列设计引物,以质粒pRL1063a为模板(SalI酶切),PCR扩增luxAB基因片段;在T4 DNA连接酶的作用下将载体大片段和luxAB基因片段进行体外连接重组并转化感受态细胞,构建成新型质粒载体pUCΩluxAB。 展开更多

关键词 钝顶螺旋藻 报告基因luxab 质粒 酶切

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