乳糜泻中lncRNA GAS5通过靶向miR-155调节Th17/Treg失衡

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作者 冯燕 李婷 +3 位作者 王曼 刘卫东 王春 高峰 《医学分子生物学杂志》 2025年第6期539-547,共9页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)GAS5通过靶向miR-155调节Th17/Treg失衡在乳糜泻中的作用。方法收集20例乳糜泻患者(乳糜泻组)及同时期20例无乳糜泻或其他自身免疫性疾病的健康体检者(健康组)的外周血,分选两组的CD4^(+)T细胞。q RT-PCR... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)GAS5通过靶向miR-155调节Th17/Treg失衡在乳糜泻中的作用。方法收集20例乳糜泻患者(乳糜泻组)及同时期20例无乳糜泻或其他自身免疫性疾病的健康体检者(健康组)的外周血,分选两组的CD4^(+)T细胞。q RT-PCR法检测乳糜泻患者与对照组CD4^(+)T细胞中lncRNA GAS5以及miR-155的表达,流式细胞术分析Th17/Treg比例。Pearson统计分析lnc RNA GAS5、miR-155的表达水平与Th17/Treg比例的相关性。体外实验中,将乳糜泻组患者的CD4^(+)T细胞分为7组:对照组,pcDNA3.1-NC组,pc DNA3.1-GAS5组,miR-NC组,miR-155-mimics组,pc DNA3.1-GAS5+miRNC组,pc DNA3.1-GAS5+miR-155-mimics组。q RT-PCR法检测各组细胞中lnc RNA GAS5和miR-155的表达。Edu染色和Hoest33342染色法分别检测各组CD4^(+)T细胞的增殖和凋亡。细胞免疫荧光染色检测各组CD4^(+)T细胞中IL-17和Foxp3的表达。流式细胞术检测CD4^(+)T细胞中IL-17^(+)细胞和Foxp3^(+)细胞的比例。结果与健康组相比,乳糜泻组lnc RNA GAS5的表达水平降低,miR-155的表达水平增加。lnc RNA GAS5表达与Th17/Treg比例呈负相关性(r=-0.65,P<0.05),miR-155表达与Th17/Treg比例呈正相关性(r=0.70,P<0.05)。乳糜泻组CD4^(+)T细胞中,与pc DNA3.1-NC组相比,pc DNA3.1-GAS5组中lnc RNA GAS5和Foxp3的表达水平、CD4^(+)T细胞的增殖率和Foxp3^(+)细胞比例均增加(P_(均)<0.05),而miR-155和IL-17的表达水平、CD4^(+)T细胞的凋亡率及IL-17^(+)细胞比例均降低(P_(均)<0.05);与miR-NC组相比,miR-155-mimics组中Foxp3的表达水平、CD4^(+)T细胞的增殖率和Foxp3^(+)细胞比例均降低(P_(均)<0.05),而miR-155和IL-17的表达水平、CD4^(+)T细胞的凋亡率及IL-17^(+)细胞比例均增加(P_(均)<0.05);与pc DNA3.1-GAS5+miR-NC组比,pcDNA3.1-GAS5+miR-155-mimics组中Foxp3的表达水平、CD4^(+)T细胞的增殖率和Foxp3^(+)细胞比例均降低(P_(均)<0.05),而miR-155和IL-17的表达水平、CD4^(+)T细胞的凋亡率及IL-17^(+)细胞比例均增加(P_(均)<0.05)。结论lncRNA GAS5通过靶向miR-155调节Th17/Treg失衡,影响乳糜泻患者CD4^(+)T细胞的增殖和凋亡,进而影响IL-17和Foxp3的表达,提示lncRNA GAS5可能是乳糜泻治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 乳糜泻 长链非编码rna gas5 微小rna-155 辅助性T细胞17 调节性T细胞

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lncRNA GAS5靶向miR-21通过PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制肺癌细胞的上皮-间质转化和自噬

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作者 张茜 刘杰 马红霞 《国际检验医学杂志》 2025年第5期568-574,共7页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)GAS5靶向微小RNA-21(miR-21)通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路抑制肺癌细胞的上皮-间质转化和自噬。方法实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测lncRNA GAS5在5... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)GAS5靶向微小RNA-21(miR-21)通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路抑制肺癌细胞的上皮-间质转化和自噬。方法实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测lncRNA GAS5在5例非小细胞肺癌(NSCLC)组及癌旁组中的表达。用双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA GAS5对miR-21的靶向作用。另将A549细胞分为5组,包括pcDNA-null组、pcDNA-GAS5组、pcDNA-GAS5+mimic-NC组、pcDNA-GAS5+mimic组、pcDNA-GAS5+mimic+BEZ235组。用qPCR检测lncRNA GAS5和miR-21表达。用蛋白质印迹法检测PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、贝克兰蛋白1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ、LC3-Ⅰ、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、扭转蛋白1(Twist1)、核增殖相关抗原(Ki67)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物法检测细胞增殖活力。结果NSCLC组lncRNA GAS5表达明显高于癌旁组,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验确定A549细胞中lncRNA GAS5对miR-21有直接靶向作用。与pcDNA-null组比较,pcDNA-GAS5组细胞增殖活力减少,lncRNA GAS5、PI3K、p-Akt、p-mTOR、Beclin1、LC3-Ⅱ、N-cadherin、Vimentin、Twist1、Ki67、PCNA表达下调,miR-21、LC3-Ⅰ、E-cadherin表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA-GAS5+mimic-NC组比较,pcDNA-GAS5+mimic组细胞增殖活力上调,PI3K、p-Akt、p-mTOR、Beclin1、LC3-Ⅱ、N-cadherin、Vimentin、Twist1、Ki67、PCNA表达上调,miR-21、LC3-Ⅰ、E-cadherin表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA-GAS5+mimic组比较,pcDNA-GAS5+mimic+BEZ235组细胞增殖活力下调,PI3K、p-Akt、p-mTOR、Beclin1、LC3-Ⅱ、N-cadherin、Vimentin、Twist1、Ki67、PCNA表达下调,LC3-Ⅰ和E-cadherin表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA GAS5通过miR-21抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,从而抑制肺癌细胞的上皮-间质转化和自噬,减少细胞增殖活力。 展开更多

关键词 长链非编码rna gas5 微小rna-21 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 肺癌

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芪玉三龙方调控LncRNA GAS5及FAS/FADD通路促进肺癌荷瘤小鼠肿瘤凋亡的作用 被引量：1

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作者 刘桐 张星星 +3 位作者 高雅婷 黄谭谭 童佳兵 李泽庚 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第5期2291-2297,共7页

目的:基于动物实验和长链非编码RNA(LncRNA)转录组学,探究芪玉三龙方治疗肺癌荷瘤小鼠的潜在作用机制。方法:构建肺癌A549皮下瘤模型,选择模型组及芪玉三龙方组的肿瘤组织进行LncRNA高通量测序,结合生物信息学分析寻找差异基因,进行基... 目的:基于动物实验和长链非编码RNA(LncRNA)转录组学,探究芪玉三龙方治疗肺癌荷瘤小鼠的潜在作用机制。方法:构建肺癌A549皮下瘤模型,选择模型组及芪玉三龙方组的肿瘤组织进行LncRNA高通量测序,结合生物信息学分析寻找差异基因,进行基因本体(GO)生物过程富集分析,构建内源性竞争RNA(ceRNA)网络,最后使用动物肿瘤组织进行验证。结果:动物实验中,芪玉三龙组肿瘤组织可见片状坏死细胞。与模型组比较,芪玉三龙方组能够抑制Ki67蛋白表达。LncRNA测序结果筛选出667个差异mRNAs,234个差异LncRNAs,其中,LncRNA GAS5有显著的差异表达水平。对差异mRNA进行GO生物学过程分析筛选出细胞的凋亡过程。构建的ceRNA网络结果显示,LncRN GAS5能够与miR-23a-3p作用,影响下游的FAS/FADD凋亡信号通路。TUNEL结果显示,使用芪玉三龙方后肿瘤组织的细胞凋亡增加。RT-qPCR结果显示,与模型组比较,芪玉三龙高剂量组显著促进LncRNA GAS5、FAS、FADD mRNA表达(P<0.01)。结论:芪玉三龙方能够抑制肺癌肿瘤组织的生长,促进肿瘤组织的凋亡,其作用机制可能是通过上调LncRNA GAS5表达,调控miR-23a-3p表达水平,继而影响下游FAS/FADD凋亡通路。 展开更多

关键词 芪玉三龙方 肺癌 转录组学 Lncrna gas5 凋亡 机制 FAS/FADD通路 内源性竞争rna

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血清外泌体LncRNA GAS5在胃癌患者中的表达水平及其临床意义 被引量：1

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作者 张向前 韩笑 张坤 《临床检验杂志》 2025年第5期336-340,共5页

目的探讨血清外泌体长链非编码RNA(LncRNA)GAS5在胃癌患者中的表达水平,并分析其临床意义。方法选取2019年1月至2020年12月于河南电力医院就诊的70例胃癌患者以及同期70例体检健康者作为研究对象,分别收集2组研究对象血清标本及临床病... 目的探讨血清外泌体长链非编码RNA(LncRNA)GAS5在胃癌患者中的表达水平,并分析其临床意义。方法选取2019年1月至2020年12月于河南电力医院就诊的70例胃癌患者以及同期70例体检健康者作为研究对象,分别收集2组研究对象血清标本及临床病理资料。另收集20例接受手术治疗的胃癌患者癌组织及癌旁组织标本。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组研究对象组织及血清外泌体LncRNA GAS5的表达水平,采用化学发光法检测血清癌胚抗原(CEA)与糖类抗原(CA19-9)的表达水平。采用ROC曲线评价不同检测指标对胃癌的筛查效能,并分析其与胃癌患者临床病理参数及预后的关系。结果胃癌患者血清外泌体LncRNA GAS5的表达水平显著低于健康人对照组(t=10.84,P<0.001),且胃癌组织中LncRNA GAS5的表达水平亦低于癌旁组织(t=14.94,P<0.001)。ROC曲线分析结果表明,血清外泌体LncRNA GAS5用于胃癌筛查的ROC曲线下面积(AUC^(ROC))为0.807,当cut-off值为1.96时,其敏感性为81.43%,特异性为67.14%,均显著优于传统肿瘤标志物CEA、CA19-9的筛查效能(AUC^(ROC)分别为0.664和0.713)。对胃癌患者的临床病理参数分析结果显示,血清外泌体LncRNA GAS5低表达与肿瘤大小、TNM分期及远处转移等密切相关(P<0.05)。血清外泌体LncRNA GAS5低表达组患者的总生存时间显著低于高表达组患者(中位总生存时间:23个月vs 35个月,P=0.03)。结论胃癌患者血清外泌体LncRNA GAS5呈低表达,对胃癌具有较高的筛查效能,有望成为胃癌患者筛查和预后评估的潜在生物学标志物。 展开更多

关键词 胃癌 外泌体 血清 长链非编码rna gas5 生物学标志物 诊断

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柚皮苷调控lncRNA GAS5改善骨关节炎软骨细胞线粒体凋亡 被引量：1

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作者 林琴 朱瑛凯 +3 位作者 林艳铭 兰书洁 陈长兴 付长龙 《康复学报》 2025年第3期265-274,共10页

目的基于lncRNA GAS5探讨柚皮苷抑制软骨细胞线粒体凋亡改善骨关节炎(OA)的机制研究。方法体内实验,选择2月龄SD雄性大鼠30只,并采用随机数字法将其分为假手术组、模型组和柚皮苷组,每组10只。模型组和柚皮苷组采用改良的Hulth法构建大... 目的基于lncRNA GAS5探讨柚皮苷抑制软骨细胞线粒体凋亡改善骨关节炎(OA)的机制研究。方法体内实验,选择2月龄SD雄性大鼠30只,并采用随机数字法将其分为假手术组、模型组和柚皮苷组,每组10只。模型组和柚皮苷组采用改良的Hulth法构建大鼠OA模型,假手术组大鼠在相同位置仅打开关节腔,随即缝合伤口。术后4周,柚皮苷组采用75 mg/kg柚皮苷溶液进行灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水,每周灌胃6次,连续灌胃4周。采用甲苯胺蓝和番红O染色分析观察大鼠关节软骨组织病理切片的形态变化;qPCR和Western blot法检测大鼠关节软骨组织中lncRNA GAS5表达水平及Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C蛋白表达量;TUNEL法检测柚皮苷对大鼠软骨组织中软骨细胞凋亡率的影响。体外实验,(1)将细胞随机分为空白组、SNP组、柚皮苷组和SNP+柚皮苷组4组,采用荧光原位杂交(FISH)法检测各组lncRNA GAS5的表达量。(2)将细胞随机分为空白+sh-NC组、SNP+sh-NC组、空白+sh-GAS5组和SNP+sh-GAS5组4组,采用qPCR法检测各组lncRNA GAS5表达水平。(3)将细胞分为空白组、SNP+柚皮苷组、SNP组和SNP+柚皮苷+sh-GAS5组4组,采用Western blot法检测各组Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C的蛋白表达量。结果(1)体内实验结果:甲苯胺蓝和番红O染色结果显示,假手术组膝关节软骨层展现出清晰的层次结构,表面光滑完整,软骨细胞排列整齐有序,潮线清晰可见;模型组膝关节软骨层表面粗糙不平,存在明显缺损,结构变得模糊不清,并可见到空洞;与模型组比较,柚皮苷组软骨表面相对光滑,软骨细胞排列更加整齐,潮线保持完整,软骨染色呈现出更为均匀的状态。qPCR结果显示,与假手术组比较,模型组lncRNA GAS5表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,柚皮苷组lncRNA GAS5表达水平下降(P<0.05)。Western blot结果显示,与假手术组比较,模型组Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C的蛋白表达量升高(P<0.05);与模型组比较,柚皮苷组Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C的蛋白表达量降低(P<0.05)。TUNEL法检测结果显示,与假手术组比较,模型组软骨细胞凋亡率增加(P<0.05);与模型组相比,柚皮苷组软骨细胞凋亡率减少(P<0.05)。(2)体外实验结果:FISH结果显示,与空白组比较,SNP组软骨细胞中lncRNA GAS5荧光表达量增加(P<0.05);与SNP组比较,SNP+柚皮苷组lncRNA GAS5荧光表达量减少(P<0.05)。qPCR结果显示,与空白+sh-NC组比较,SNP+sh-NC组的lncRNA GAS5 mRNA表达水平明显升高(P<0.05);与空白+sh-NC组比较,空白+sh-GAS5组的lncRNA GAS5 mRNA水平明显下降(P<0.05),证明sh-GAS5转染成功;与SNP+sh-NC组比较,SNP+sh-GAS5组的lncRNA GAS5 mRNA相对表达量降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与空白组比较,SNP组的Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C蛋白表达量升高(P<0.05);与SNP组比较,SNP+柚皮苷组Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C蛋白表达量下降(P<0.05);与SNP+柚皮苷组比较,SNP+柚皮苷组+sh-GAS5组Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C蛋白表达量上升(P<0.05)。结论柚皮苷可通过抑制lncRNA GAS5表达,减少软骨细胞线粒体凋亡,延缓软骨退变进程,改善OA。 展开更多

关键词 骨关节炎 线粒体凋亡 柚皮苷 长链非编码rna生长停滞特异性5(lncrna gas5) 软骨细胞

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长链非编码RNA GAS5和基质金属蛋白酶9在非小细胞肺癌病人血清中的表达及临床价值

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作者 梁志伟 辛鑫 余会敏 《临床外科杂志》 2025年第5期498-502,共5页

目的 探究长链非编码RNA GAS5(lncRNA GAS5)和基质金属蛋白酶9(MMP9)在非小细胞肺癌(NSCLC)病人血清中的表达及临床价值。方法 选取2018年12月~2019年12月收治的NSCLC病人115例为NSCLC组,根据预后将其分为生存组94例,死亡组21例;同期在... 目的 探究长链非编码RNA GAS5(lncRNA GAS5)和基质金属蛋白酶9(MMP9)在非小细胞肺癌(NSCLC)病人血清中的表达及临床价值。方法 选取2018年12月~2019年12月收治的NSCLC病人115例为NSCLC组,根据预后将其分为生存组94例,死亡组21例;同期在本院体检健康的志愿者115例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定血清lncRNA GAS5水平;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清MMP9水平;采用Pearson分析NSCLC病人血清lncRNA GAS5水平与MMP9水平相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC)评价血清lncRNA GAS5、MMP9水平在诊断NSCLC中的价值;采用多因素Cox回归分析NSCLC病人预后的影响因素。结果 与对照组相比较,NSCLC组血清lncRNA GAS5水平降低,MMP9水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson显示,NSCLC病人血清lncRNA GAS5水平与MMP9水平呈负相关(r=-0.523,P<0.05);血清lncRNA GAS5、MMP9水平均与肿瘤直径、TNM分期、淋巴结是否转移相关(P<0.05);血清lncRNA GAS5、MMP9水平诊断NSCLC的曲线下面积(AUC)分别为0.842、0.916,两者联合诊断的AUC为0.952,均优于两者单独诊断(Z=3.904、1.982,P<0.05);死亡组血清lncRNA GAS5水平较生存组显著降低,血清MMP9水平较生存组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Cox回归分析显示,高水平lncRNA GAS5为NSCLC预后不良的独立保护因素,高水平MMP9和淋巴结转移均为NSCLC预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论 NSCLC病人血清lncRNA GAS5水平显著降低,MMP9水平显著升高,两者在临床诊断NSCLC中具有一定潜在价值,且是NSCLC预后不良的影响因素。 展开更多

关键词 长链非编码rna gas5 基质金属蛋白酶9 非小细胞肺癌 临床价值

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长链非编码RNAGAS5对人乳腺癌细胞株增殖和侵袭能力的影响 被引量：7

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作者 吴海华 李钰 +6 位作者 张凌宇 王海凤 陈丽 黄文明 陈素莲 陈昌杰 杨清玲 《蚌埠医学院学报》 CAS 2016年第7期849-853,共5页

目的:探讨长链非编码RNA GAS5对人乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移生物学活性的影响。方法:qRT-PCR方法检测3株乳腺癌细胞株SKBR-3、MDA-MB-231及MCF-7中LncRNA GAS5的表达;LncRNA GAS5干扰片段和过表达载体分别转染LncRNA GAS5高表达以及... 目的:探讨长链非编码RNA GAS5对人乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移生物学活性的影响。方法:qRT-PCR方法检测3株乳腺癌细胞株SKBR-3、MDA-MB-231及MCF-7中LncRNA GAS5的表达;LncRNA GAS5干扰片段和过表达载体分别转染LncRNA GAS5高表达以及低表达的乳腺癌细胞株,qRT-PCR方法检测转染后LncRNA GAS5的表达;磺酰罗丹明B染色法检测细胞的增殖能力;Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭及迁移能力。结果:LncRNA GAS5在乳腺癌SKBR-3细胞中表达量最低,MCF-7细胞中表达量最高(P<0.01);SKBR-3以及MCF-7细胞分别转染LncRNA GAS5过表达载体和干扰片段后,SKBR-3细胞LncRNA GAS5表达量增高,MCF-7表达量降低(P<0.01);下调LncRNA GAS5的表达,细胞的增殖能力升高,侵袭及迁移能力增强(P<0.01);过表达LncRNA GAS5之后,细胞的增殖能力、侵袭和迁移能力减弱(P<0.01)。结论:LncRNA GAS5是涉及到乳腺癌发展的一个新型的分子,有可能成为乳腺癌治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 长链非编码rna gas5 增殖 迁移 侵袭

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长非编码RNA GAS5在卵巢癌患者中的低表达及其临床意义（英文） 被引量：3

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作者 李婕 李银广 +3 位作者 陈爱月 李珠玉 侯文汇 游泽山 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期746-751,共6页

【目的】探讨长链非编码RNA GAS5在卵巢癌中的表达水平及其临床意义。【方法】收集卵巢癌患者的瘤体组织标本,通过实时荧光定量PCR检测GAS5在卵巢癌组织中的表达水平。采用相关性分析,分析其表达水平与临床病理特征之间的关系、及其与... 【目的】探讨长链非编码RNA GAS5在卵巢癌中的表达水平及其临床意义。【方法】收集卵巢癌患者的瘤体组织标本,通过实时荧光定量PCR检测GAS5在卵巢癌组织中的表达水平。采用相关性分析,分析其表达水平与临床病理特征之间的关系、及其与疾病预后之间的关系。【结果】在卵巢癌瘤体组织中GAS5表达显著下降(P=0.0004);GAS5的表达与瘤体体积呈负相关(d<5 cm vs.d>5 cm,P<0.000 1);GAS5的表达与肿瘤期别呈负相关(Ⅰ~Ⅱgrades vs.Ⅲ~Ⅳgrades,P=0.0086)。采用Kaplan-Meier分析表明,GAS5表达水平越低患者预后和生存越差。【结论】GAS5在卵巢癌中的表达情况与临床病理特征以及预后相关,可作为潜在的卵巢癌检测标记物。 展开更多

关键词 长非编码rna gas5 卵巢癌 临床意义

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长链非编码RNA GAS5在绝经后骨质疏松症肾阴虚证的表达及对骨免疫细胞因子的调控作用 被引量：5

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作者 陈娟 李生强 +3 位作者 叶云金 谢丽华 陈赛楠 葛继荣 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1691-1695,共5页

目的研究长链非编码RNA GAS5(long non-coding RNA GAS5,lncRNA GAS5)在绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)肾阴虚证的表达及其对骨免疫相关细胞因子的调控作用。方法随机选择绝经后妇女,经骨密度检测和中医辨证分型,... 目的研究长链非编码RNA GAS5(long non-coding RNA GAS5,lncRNA GAS5)在绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)肾阴虚证的表达及其对骨免疫相关细胞因子的调控作用。方法随机选择绝经后妇女,经骨密度检测和中医辨证分型,分为肾阴虚证组(38例)、肾阳虚证组(32例)和健康对照组(35名)。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外周血单核细胞中lncRNA GAS5的表达。通过慢病毒介导的RNA干扰技术,抑制THP-1人单核细胞中lncRNA GAS5基因的表达,并应用细胞因子抗体芯片技术检测骨免疫相关细胞因子的表达变化。结果与对照组比较,lncRNA GAS5在PMOP肾阴虚证组和肾阳虚证组的表达水平均明显降低(P<0.01);与肾阳虚证组比较,肾阴虚证组lncRNA GAS5的降低趋势更明显(P<0.05);RNA干扰抑制lncRNA GAS5表达后,与对照组比较,干扰组lncRNA GAS5的表达下调67.58%,而白细胞介素(IL-6、IL-7、IL-17)、转化生长因子β(TGF-β1)、集落刺激因子(G-CSF、M-CSF)等23种骨代谢相关细胞因子的表达水平显著上调,重组人巨噬细胞炎症蛋白-1β(MIP-1b)、白细胞介素1 b(IL-1 b)、胞间黏附分子-1(ICAM-1)等3种因子的表达下调。结论lncRNA GAS5在PMOP肾阴虚证中低表达;体外抑制lncRNA GAS5的表达可影响骨免疫相关细胞因子水平。 展开更多

关键词 中医中药 绝经后骨质疏松症 肾阴虚证 长链非编码rna gas5 细胞因子 骨免疫

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血浆中LncRNA GAS5在多囊卵巢综合征合并胰岛素抵抗患者中的表达及意义 被引量：6

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作者 林海燕 张琳玥 +3 位作者 罗皓予 谢言信 唐小饰 张清学 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第21期3270-3272,3276,共4页

目的初步探索LncRNA GAS5与多囊卵巢综合征(PCOS)胰岛素抵抗的关系,为PCOS分子机制研究提供新思路。方法收集合并胰岛素抵抗的PCOS不孕患者(PCOS组)和单纯输卵管因素不孕或男方因素非PCOS患者(非PCOS组)外周血标本各30例及相应临床病例... 目的初步探索LncRNA GAS5与多囊卵巢综合征(PCOS)胰岛素抵抗的关系,为PCOS分子机制研究提供新思路。方法收集合并胰岛素抵抗的PCOS不孕患者(PCOS组)和单纯输卵管因素不孕或男方因素非PCOS患者(非PCOS组)外周血标本各30例及相应临床病例资料,比较分析两组患者临床相关指标如BMI、空腹血糖、胰岛素、HOMA-IR等,以及血清中LncRNA GAS5的表达水平。结果 HOMA-IR在两组间比较差异无统计学意义(P>0.05),但PCOS组平均HOMA-IR指数为5.85,高于非PCOS组;PCOS组空腹血糖明显高于非PCOS组(P=0.000);PCOS组患者血浆中IL-18浓度要明显高于非PCOS组(P<0.000 1);PCOS组血浆中LncRNA GAS5表达要明显低于非PCOS组(P<0.000 1),GAS5的表达与HOMA-IR呈负相关(P=0.003 5,r=0.515 6)。结论 PCOS组LncRNA GAS5明显下调,而且GAS5低表达和胰岛素抵抗有密切关系,LncRNAGAS5的低表达有可能是PCOS发生和进展的一个重要因素。 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 胰岛素抵抗 长非编码rna gas5 白细胞介素-18

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长链非编码RNA GAS5通过调控miR-196b-5p抑制非小细胞肺癌细胞增殖侵袭迁移的机制 被引量：2

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作者 刘向前 赵天增 杨金华 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第1期161-164,共4页

目的研究长链非编码RNA(LncRNA)GAS5对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,探讨其作用机制。方法运用qRT-PCR检测非小细胞肺癌细胞A549和肺支气管正常细胞16HBE中LncRNA GAS5、miR-196b-5p的表达;将miR-196b-5p组(转染miR-196b-5p ... 目的研究长链非编码RNA(LncRNA)GAS5对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,探讨其作用机制。方法运用qRT-PCR检测非小细胞肺癌细胞A549和肺支气管正常细胞16HBE中LncRNA GAS5、miR-196b-5p的表达;将miR-196b-5p组(转染miR-196b-5p mimics)、miR-NC组(转染miR-NC)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-196b-5p组(转染anti-miR-196b-5p)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1)、pcDNA3.1-GAS5+miR-196b-5p组(pcDNA3.1-GAS5和miR-196b-5p mimics共转染)均用脂质体法转染至A549细胞。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞的增殖;Transwell法检测各组细胞的迁移、侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性。结果与肺支气管正常细胞16HBE相比,非小细胞肺癌细胞A549中LncRNA GAS5的表达显著降低,miR-196b-5p的表达显著升高(P<0.05);过表达GAS5、抑制miR-196b-5p均可显著抑制A549细胞增殖、迁移、侵袭;LncRNA GAS5靶向miR-196b-5p,且过表达miR-196b-5p可逆转LncRNA GAS5对A549细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论LncRNA GAS5可抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与靶向负调控LncRNA GAS5有关,将可为非小细胞肺癌的靶向治疗提供新靶点。 展开更多

关键词 长链非编码rna gas5 miR-196b-5p 非小细胞肺癌 增殖 迁移 侵袭

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经皮冠状动脉介入治疗后患者血清长链非编码RNA GAS5水平与冠状动脉支架内再狭窄的相关性 被引量：7

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作者 陈晓杰 梁春玲 +1 位作者 于洁 谢宇端 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2021年第12期1066-1070,共5页

目的探究血清长链非编码RNA GAS5(lncRNA GAS5)水平与急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者冠状动脉支架内再狭窄的相关性。方法选取接受择期经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的STEMI患者144例,根据随访结果将患者分为支架内再狭窄(ISR)组27例和... 目的探究血清长链非编码RNA GAS5(lncRNA GAS5)水平与急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者冠状动脉支架内再狭窄的相关性。方法选取接受择期经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的STEMI患者144例,根据随访结果将患者分为支架内再狭窄(ISR)组27例和非ISR组109例,失访8例。收集STEMI患者临床资料。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测所有患者PCI术后血清lncRNA GAS5水平。结果与非ISR组相比,ISR组患者术前吸烟及合并糖尿病比例、总胆红素(TBIL)、血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平较高(P<0.05),血清中lncRNA GAS5水平较低(P<0.05);与lncRNA GAS5高水平者相比,lncRNA GAS5低水平者ISR发生率较高(P<0.05),无再狭窄平均时间较短(P<0.05);Logistic回归分析显示,低水平lncRNA GAS5是STEMI患者冠状动脉支架内再狭窄的危险因素。结论lncRNA GAS5在STEMI冠状动脉支架内再狭窄患者血清中水平下调,低水平lncRNA GAS5是STEMI患者冠状动脉支架内再狭窄的危险因素。 展开更多

关键词 急性ST段抬高型心肌梗死 经皮冠状动脉介入治疗 支架内再狭窄 长链非编码rna gas5

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吡格列酮调控lncRNA GAS5/JNK信号通路对高糖诱导的胰岛β细胞损伤的影响 被引量：3

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作者 乌日娜 丁海东 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期957-962,共6页

目的 探讨吡格列酮是否通过调控lncRNA GAS5/JNK信号通路表达,影响高糖诱导的胰岛β细胞MIN6的凋亡、存活和胰岛素分泌。方法 体外培养胰岛β细胞MIN6,转染小干扰RNA(siRNA)阴性对照和lncRNA GAS5 siRNA,将细胞分为5组:对照组;高糖组;高... 目的 探讨吡格列酮是否通过调控lncRNA GAS5/JNK信号通路表达,影响高糖诱导的胰岛β细胞MIN6的凋亡、存活和胰岛素分泌。方法 体外培养胰岛β细胞MIN6,转染小干扰RNA(siRNA)阴性对照和lncRNA GAS5 siRNA,将细胞分为5组:对照组;高糖组;高糖+吡格列酮组;高糖+吡格列酮+si-NC组;高糖+吡格列酮+si-lncRNA GAS5组。采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,CCK8实验检测细胞存活,ELISA法检测细胞胰岛素分泌情况,Western blot实验检测凋亡相关蛋白Cleaved-caspase3和JNK通路蛋白表达,qRT-PCR检测lncRNA GAS5表达。结果 与对照组比较,高糖组MIN6细胞凋亡率和Cleaved-caspase3蛋白表达均明显升高,细胞存活率明显降低,细胞培养液中胰岛素含量明显减少,细胞中lncRNA GAS5表达明显减少,p-JNK蛋白表达明显升高;与高糖组比较,高糖+吡格列酮组MIN6细胞凋亡率和Cleaved-caspase3蛋白表达均明显降低,细胞存活率明显升高,细胞培养液中胰岛素含量明显增多,细胞中lncRNA GAS5表达明显升高,p-JNK蛋白表达明显降低;与高糖+吡格列酮+si-NC组比较,高糖+吡格列酮+si-lncRNA GAS5组MIN6细胞凋亡率和Cleaved-caspase3蛋白表达均明显升高,细胞存活率明显降低,细胞培养液中胰岛素含量明显减少,p-JNK蛋白表达明显升高。结论 吡格列酮对高糖诱导的胰岛β细胞MIN6损伤具有一定保护作用,其作用机制与上调lncRNA GAS5,抑制JNK信号通路活性有关。 展开更多

关键词 吡格列酮 高糖 胰岛Β细胞 长链非编码rna gas5 JNK信号通路

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长链非编码RNA GAS5在原发性肝癌中的表达及侵袭作用 被引量：5

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作者 张洪军 马鹏飞 《中国现代普通外科进展》 CAS 2019年第3期169-172,共4页

目的:探讨长链非编码RNA Gas5(lncRNA Gas5)在原发性肝癌组织中的表达及其对Hep3B细胞的侵袭作用。方法:采用RT-PCR检测50例肝癌患者肿瘤和癌旁组织中lncRNA Gas5的表达水平,分析其与临床病理特征的相关性;通过在Hep3B细胞中过表达lncRN... 目的:探讨长链非编码RNA Gas5(lncRNA Gas5)在原发性肝癌组织中的表达及其对Hep3B细胞的侵袭作用。方法:采用RT-PCR检测50例肝癌患者肿瘤和癌旁组织中lncRNA Gas5的表达水平,分析其与临床病理特征的相关性;通过在Hep3B细胞中过表达lncRNA Gas5,利用Transwell小室检测过表达lncRNA Gas5后肿瘤细胞侵袭变化,RT-PCR和Western blot检测PTEN蛋白表达变化。结果:肝癌组织中的lncRNA Gas5表达水平较癌旁组织显著降低(t=9.759,P<0.01),并与肝门淋巴结转移(t=7.748,P<0.001)和肿瘤TNM分期(t=2.489,P=0.016)相关;过表达lncRNA Gas5后的Hep3B细胞侵袭能力减弱(P<0.01),PTEN基因和蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:lncRNA Gas5在肝癌组织中的表达下调增强肝癌细胞的侵袭能力,可能成为原发性肝癌术后判断复发的分子标志物。 展开更多

关键词 长链非编码rna gas5 原发性肝癌 实时荧光定量PCR 蛋白质免疫印迹法

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Lnc RNA GAS 5在恶性肿瘤中的研究进展 被引量：1

15

作者 王江峰 陈晟 毛伟敏 《医学研究杂志》 2016年第9期27-29,3,共4页

长链非编码RNA GAS 5(Lnc RNA GAS 5)是一类非转录翻译蛋白的长片段RNA,片段大小一般>200bt,在许多恶性肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭和浸润中发挥着重要的作用。目前研究者们认为长链非编码RNAs不仅只有转录功能,还能调控下游基因的... 长链非编码RNA GAS 5(Lnc RNA GAS 5)是一类非转录翻译蛋白的长片段RNA,片段大小一般>200bt,在许多恶性肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭和浸润中发挥着重要的作用。目前研究者们认为长链非编码RNAs不仅只有转录功能,还能调控下游基因的表达或被上游基因调控表达,从而发挥着癌基因或抑癌基因的作用。目前对Lnc RNA GAS 5的作用机制仍不十分清楚,本文对Lnc RNA GAS 5在各种恶性肿瘤中的作用的最新研究进展进行综述,明确其作用并总结可能的机制。 展开更多

关键词 Lnc rna gas 5恶性肿瘤基因调控

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儿童淋巴瘤患者化疗前后血液中lncRNA GAS5水平变化的临床意义 被引量：2

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作者 惠军朋 梁西强 +2 位作者 高文瑾 白洁 程继文 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2021年第23期4213-4217,共5页

目的:探究儿童淋巴瘤患者化疗前后血液中长链非编码RNA GAS5(lncRNA GAS5)水平变化的临床意义。方法:收集淋巴瘤患儿(81例)及健康儿童(52例)的血液样本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组样本血液中的lncRNA GAS5含量。分析不同临... 目的:探究儿童淋巴瘤患者化疗前后血液中长链非编码RNA GAS5(lncRNA GAS5)水平变化的临床意义。方法:收集淋巴瘤患儿(81例)及健康儿童(52例)的血液样本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组样本血液中的lncRNA GAS5含量。分析不同临床分期儿童淋巴瘤化疗有效和无效患儿血液中lncRNA GAS5表达及凝血功能在化疗前后的变化差异。淋巴瘤患儿血液中lncRNA GAS5水平与凝血指标的相关性利用皮尔森(Pearson)相关性分析。结果:患儿组lncRNA GAS5水平与凝血指标均显著高于对照组(P<0.01);淋巴瘤Ⅰ-Ⅱ期(n=45)与Ⅲ-Ⅳ期(n=36)患儿的lncRNA GAS5水平以及凝血功能间无统计学差异(P>0.05);化疗有效患儿(n=60)化疗后凝血指标及lncRNA GAS5水平与化疗前相比均显著降低(P<0.01);而化疗无效患儿组凝血指标lncRNA GAS5水平化疗前后差异无统计学意义(P>0.05)。lncRNA GAS5水平分别与PT(r^(2)=0.792)、APTT(r^(2)=0.776)和FIB含量(r^(2)=0.750)呈正相关(P<0.001)。结论:血液中lncRNA GAS5水平可能是反映淋巴瘤患儿化疗疗效和血栓发生风险的潜在标志物。 展开更多

关键词 儿童 淋巴瘤 长链非编码rna gas5 凝血指标 预后

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长链非编码RNA GAS5对膀胱尿路上皮癌细胞的多柔比星耐药性研究 被引量：1

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作者 孙天牧 刘重远 +1 位作者 宋永胜 张辉 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第18期2861-2865,共5页

目的:研究长链非编码RNA-Growth arrest-specific 5(GAS5)对膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)细胞的多柔比星耐药性的调控作用。方法:实时定量PCR法检测GAS5基因在BUC组织及细胞中的表达。将GAS5基因的表达载体转染多... 目的:研究长链非编码RNA-Growth arrest-specific 5(GAS5)对膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)细胞的多柔比星耐药性的调控作用。方法:实时定量PCR法检测GAS5基因在BUC组织及细胞中的表达。将GAS5基因的表达载体转染多柔比星耐药的BUC细胞T24/DOX,实时定量PCR验证转染效果。MTT法检测T24/DOX细胞对多柔比星的耐药性。应用0.5μg/ml多柔比星处理T24/DOX细胞,流式细胞仪检测T24/DOX细胞的凋亡率,Western blot法检测T24/DOX细胞中Bcl2蛋白的表达。结果:与CCCHB-2细胞相比,GAS5基因在J82和T24细胞中的表达显著下调,而其在T24/DOX细胞中表达下调更为显著。GAS5基因的表达载体能够显著上调T24/DOX细胞中GAS5基因的表达。GAS5高表达能够抑制T24/DOX细胞对多柔比星的耐药性。GAS5高表达能够显著促进多柔比星诱导的T24/DOX细胞的凋亡,并抑制抗凋亡蛋白Bcl2的表达。结论:长链非编码RNA GAS5在BUC中低表达,且与BUC的化疗耐药相关,其过表达能够抑制BUC细胞的多柔比星耐药性。 展开更多

关键词 膀胱尿路上皮癌 长链非编码rna gas5 化疗耐药 多柔比星

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LncRNA GAS5通过TIMP-3启动子甲基化促进软骨胶原蛋白降解的实验研究 被引量：5

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作者 何小文 丁徐 +3 位作者 张东华 陈羿丞 宋登新 王健 《实用骨科杂志》 2021年第11期999-1004,共6页

目的骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种常见的关节疾病,可由内源性和表观遗传因素引起。软骨退变可恶化为OA。本研究旨在探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)GAS5在OA中的基本机制。方法14例正常膝关节软骨组织取自2018年7... 目的骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种常见的关节疾病,可由内源性和表观遗传因素引起。软骨退变可恶化为OA。本研究旨在探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)GAS5在OA中的基本机制。方法14例正常膝关节软骨组织取自2018年7月至2020年7月因胫骨平台骨折在复旦大学附属中山医院吴淞医院行骨折内固定的患者,男8例,女6例;年龄19~40岁,平均(31±5)岁。35例OA膝关节软骨组织取自2018年7月至2020年7月在复旦大学附属中山医院吴淞医院就诊,诊断为OA且有膝关节置换手术指征的患者,男17例,女18例;年龄62~86岁,平均年龄(70±4)岁。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP)-3 mRNA的表达情况。使用白细胞介素(interleukin,IL)-1β(10 ng/mL)建立OA细胞模型,分析OA基因芯片GSE16464。RT-qPCR和western-blot检测软骨分解代谢抑制因子TIMP-3的表达。用芯片定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测TIMP-3启动子区富集的CpG岛情况。用生物信息学方法预测GAS5与TIMP-3的靶向关系,并用双荧光素酶报告基因检测法进行验证。结果在OA患者组织中TIMP-3 mRNA表达显著低于正常软骨组织,OA患者组与正常软骨组织软骨细胞TIMP-3启动子区甲基化阳性率分别为72.1%和35.7%。LncRNAGAS5在OA中高表达,LncRNAGAS5在OA中表达较正常软骨组织中表达明显上调(P<0.05)。Blast序列比对GAS5序列与TIMP-3启动子序列具有结合位点。沉默LncRNA GAS5促进TIMP-3表达,抑制OA软骨细胞胶原降解。双荧光素酶报告基因实验验证GAS5与TIMP-3具有靶向调控关系。结论OA软骨组织中TIMP-3低表达,而LncRNA GAS5表达上调;LncRNA GAS5可富集DNA甲基化转移酶,抑制TIMP-3的表达,促进软骨细胞胶原蛋白降解。 展开更多

关键词 长链非编码rna gas5 骨关节炎 DNA甲基化转移酶 金属蛋白酶抑制剂-3

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黄芪糖蛋白干扰lncRNA GAS5/miR-21/TLR4信号轴抑制细胞焦亡改善佐剂性关节炎大鼠心肌损伤 被引量：2

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作者 付皖兰 曹云祥 +1 位作者 束开艳 朱南飞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期872-879,共8页

目的基于长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5/微小RNA 21/Toll样受体4(lncRNA GAS5/miR-21/TLR4)信号轴探究黄芪糖蛋白(HQGP)对佐剂性关节炎(AA)大鼠心肌损伤的作用及机制。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、甲氨蝶呤(MTX)组、... 目的基于长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5/微小RNA 21/Toll样受体4(lncRNA GAS5/miR-21/TLR4)信号轴探究黄芪糖蛋白(HQGP)对佐剂性关节炎(AA)大鼠心肌损伤的作用及机制。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、甲氨蝶呤(MTX)组、HQGP组,每组6只。复制AA模型,第19天开始给药,连续4周。检测各组AA大鼠足趾肿胀度、关节炎指数(AI),HE染色观察大鼠心肌组织病理变化,透射电镜观察心肌组织超微结构的变化及焦亡小体情况,ELISA检测血清白细胞介素6(IL-6)、IL-18、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测心肌组织LDH释放量,实时荧光定量PCR检测心肌组织核因子κB p65(NF-κB p65)、胱天蛋白酶1(caspase-1)、含pyrin结构域核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)的mRNA以及lncRNA GAS5/miR-21/TLR4信号轴分子的表达,Western blot法检测心肌组织TLR4、NF-κB p65、caspase-1、NLRP3和GSDMD蛋白水平。结果与正常对照组相比,模型组大鼠足趾肿胀度、AI显著升高;大鼠心肌纤维溶解、断裂,肌节结构模糊,心肌纤维排列紊乱,组织间有炎性细胞浸润,线粒体嵴明显断裂稀疏,焦亡小体数量增加;血清促炎细胞因子IL-6、IL-18、IL-1β和TNF-α表达显著升高;心肌组织中GAS5表达显著降低,miR-21表达显著升高,LDH释放量、TLR4、NF-κB p65、caspase-1、NLRP3、GSDMD的mRNA和蛋白表达水平显著升高。与模型组比较,HQGP组大鼠足趾肿胀度、AI和心肌组织病理状态明显改善;血清IL-6、IL-18、IL-1β和TNF-α表达显著降低;心肌组织中GAS5表达显著升高,miR-21表达显著降低,LDH释放量、TLR4、NF-κB p65、caspase-1、NLRP3的mRNA和蛋白表达水平显著降低,GSDMD的mRNA表达降低且蛋白水平显著降低。结论HQGP通过上调lncRNA GAS5抑制miR-21/TLR4信号传导,抑制细胞焦亡,减少促炎细胞因子表达,改善AA大鼠心肌损伤。 展开更多

关键词 佐剂性关节炎 心肌损伤 长链非编码rna生长停滞特异性转录本5(lncrna gas5) MIR-21 Toll样受体4(TLR4) 细胞焦亡 黄芪糖蛋白

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LncRNA GAS5通过miR-182-5p/FOXF2轴对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响 被引量：1

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作者 张宗敏 那思家 郭治辰 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第8期1160-1169,共10页

目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(LncRNA GAS5)调节微小RNA-182-5p(miR-182-5p)/叉头盒蛋白F2(FOXF2)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法收集45例确诊为OSCC的癌组织以及癌旁组织,体外培养人口... 目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(LncRNA GAS5)调节微小RNA-182-5p(miR-182-5p)/叉头盒蛋白F2(FOXF2)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法收集45例确诊为OSCC的癌组织以及癌旁组织,体外培养人口腔上皮细胞系HOEC及人OSCC细胞系CAL-27、HSC-3、SCC-25,qRT-PCR检测组织、细胞中LncRNA GAS5、miR-182-5p、FOXF2的表达;择细胞株CAL-27分为ctrl组、pcDNA组、pcDNA-GAS5组、pcDNA-GAS5+miR-NC组及pcDNA-GAS5+miR-182-5p mimics组,采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western Blot检测癌细胞中FOXF2、bax、Bcl-2、cleaved caspase-3及E-cadherin蛋白表达,双萤光素酶报告实验验证miR-182-5p与LncRNA GAS5、FOXF2的关系。结果与癌旁组织相比,OSCC组织中LncRNA GAS5、FOXF2 mRNA表达降低,miR-182-5p表达升高(P<0.05);CAL-27、HSC-3、SCC-25细胞与HOEC相比,LncRNA GAS5、miR-182-5p、FOXF2表达趋势与OSCC组织内一致,且在CAL-27表达最明显,选择其作为后续实验的细胞株;与ctrl组、pcDNA组比较,pcDNA-GAS5组CAL-27细胞中GAS5、FOXF2 mRNA、细胞凋亡率及BAX、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),miR-182-5p表达、细胞增殖、迁移和侵袭数及Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);上调miR-182-5p可减弱过表达LncRNA GAS5对CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用,也可抑制癌细胞凋亡;LncRNA GAS5靶向负调控miR-182-5p表达,miR-182-5p靶向负调控FOXF2表达。结论上调GAS5可能通过抑制miR-182-5p来增加FOXF2表达,进而抑制CAL-27细胞增殖、迁移及侵袭,促进CAL-27细胞的凋亡。 展开更多

关键词 长链非编码rna gas5 miR-182-5p 叉头盒蛋白F2 口腔鳞癌 细胞增殖 凋亡 迁移和侵袭

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