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基于“玄府理论”补肾祛毒汤调控lncRNAGAS5吸附miR-96-5P对肾间质纤维化的影响
1
作者 石伟荣 吴强 +2 位作者 吴秋红 朱淑瑜 林杰 《临床合理用药》 2025年第4期95-98,共4页
目的 基于“玄府理论”探讨补肾祛毒汤通过调控长链非编码RNA(lncRNA)GAS5吸附微小RNA(miRNA)miR-96-5P,进而影响肾间质纤维化的机制。方法 取SPF级SD大鼠60只,适应性喂养1周后,随机分为5组,分别为空白对照组、模型组、补肾祛毒汤低剂... 目的 基于“玄府理论”探讨补肾祛毒汤通过调控长链非编码RNA(lncRNA)GAS5吸附微小RNA(miRNA)miR-96-5P,进而影响肾间质纤维化的机制。方法 取SPF级SD大鼠60只,适应性喂养1周后,随机分为5组,分别为空白对照组、模型组、补肾祛毒汤低剂量组、补肾祛毒汤中剂量组、补肾祛毒汤高剂量组,每组12只,给药后,观察大鼠各项标本数据。结果 模型组HE和Masson染色结果数值均显著高于空白对照组(P<0.05);补肾祛毒汤各剂量组数值低于模型组,且高剂量组效果最为显著(P<0.05)。模型组中,α-SMA、FN1、COL1、CTGF、TGF-β1、miR-96-5PmRNA的相对表达量显著高于空白对照组,lncRNAGAS5mRNA则显著降低(P<0.05)。与模型组相比,补肾祛毒汤各剂量组的α-SMA、FN1、COL1、CTGF、TGF-β1、miR-96-5PmRNA相对表达量均降低,lncRNAGAS5mRNA则升高,其中高剂量组变化尤为显著(P<0.05)。模型组中,α-SMA、FN1、COL1、CTGF、TGF-β1光密度值(OD值)较空白对照组显著升高(P<0.05)。与模型组相比,补肾祛毒汤各剂量组蛋白OD值降低,且高剂量组效果更明显(P<0.05)。模型组中,α-SMA、FN1、COL1、CTGF、TGF-β1、miR-96-5P值较空白对照组显著升高(P<0.05)。与模型组相比,补肾祛毒汤各剂量组蛋白OD值降低,且高剂量组效果更明显(P<0.05)。结论 基于玄府理论,通过体内实验和统计学对比分析证实了补肾祛毒汤可减轻肾间质纤维化程度,其机制与调控lncRNAGAS5吸附miR-95-5P有关。 展开更多
关键词 肾间质纤维化 玄府理论 补肾祛毒汤 lncrnagas5 miR-96-5P
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lncRNA GAS5调控Notch通路对骨髓间充质干细胞软骨分化的影响 被引量：2
2
作者 王勇超 粟钦 +3 位作者 林昕 田强 傅美淳 张克云 《山东医药》 CAS 2021年第35期26-30,共5页
目的观察长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异性转录本5(GAS5)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)软骨分化的影响,并探讨其机制是否与Notch通路有关。方法分离、培养大鼠BMSCs,并经倒相差显微镜观察细胞形态及流式细胞仪检测表面标志物表达鉴定... 目的观察长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异性转录本5(GAS5)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)软骨分化的影响,并探讨其机制是否与Notch通路有关。方法分离、培养大鼠BMSCs,并经倒相差显微镜观察细胞形态及流式细胞仪检测表面标志物表达鉴定证实。将第3代BMSCs分为对照组、p-EGFP-C1组(转染p-EGFP-C1空载体质粒)、p-EGFP-C1-lncRNAGAS5组(转染p-EGFP-C1-lncRNAGAS5过表达质粒)、p-EGFP-C1-lncRNAGAS5+DAPT组[转染p-EGFP-C1-lncRNAGAS5过表达质粒+100 ng/mLNotch信号通路特异性阻断剂2,4-二氨基-5-苯噻唑(DAPT)],采用qRT-PCR法检测各组细胞lncRNAGAS5表达。各组细胞进行软骨分化诱导,HE染色观察细胞形态及数量,免疫细胞化学法检测Ⅱ型胶原纤维α1(COL2a1)、蛋白聚糖(Aggrecan)阳性表达率,Westernblotting法检测Notch1和兔抗Split多毛增强子1(Hes-1)蛋白表达。结果p-EGFP-C1-lncRNAGAS5组、p-EGFP-C1-lncRNAGAS5+DAPT组细胞lncRNAGAS5相对表达量均明显高于对照组、p-EGFP-C1组(P均<0.05)。各组细胞均呈软骨细胞形态改变,即呈三角或多角形,细胞核为蓝紫色,细胞质和细胞外基质为红色,成团生长;p-EGFP-C1-lncRNAGAS5组与p-EGFP-C1-lncRNAGAS5+DAPT组软骨细胞数量明显多于对照组和p-EGFP-C1组,以p-EGFP-C1-lncRNAGAS5+DAPT组软骨细胞数量最多。与对照组及p-EGFP-C1组比较,p-EGFP-C1-lncRNAGAS5组及p-EGFP-C1-lncRNA GAS5+DAPT组细胞COL2a1、Aggrecan阳性表达率均升高,Notch1、Hes-1蛋白相对表达量均降低,且p-EGFP-C1-lncRNAGAS5+DAPT组变化更明显(P均<0.05)。结论lncRNAGAS5可通过抑制Notch通路激活来促进BMSCs的软骨分化。 展开更多
关键词 lncrnagas5 NOTCH通路 骨髓间充质干细胞 软骨分化 NOTCH1 Hes-1
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