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lncRNA PCGEM1对口腔鳞癌细胞生物学行为的调控作用 被引量：6
1
作者 陈苑 景向东 +1 位作者 刘彩奇 李佳殷 《中华实用诊断与治疗杂志》 2021年第4期329-334,共6页
目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)前列腺癌基因表达标记1(prostate cancer gene expression marker 1, PCGEM1)对调控miR-506-3p/RAB22A轴介导口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用。方法正常人口腔角质形成细胞(norm... 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)前列腺癌基因表达标记1(prostate cancer gene expression marker 1, PCGEM1)对调控miR-506-3p/RAB22A轴介导口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用。方法正常人口腔角质形成细胞(normal human oral keratinocyte, NHOK)及口腔鳞癌细胞HSC-3、SCC-25、CAL27,采用实时荧光定量PCR检测细胞lncRNA PCGEM1、miR-506-3p和RAB22A mRNA相对表达量,采用Western blot检测RAB22A蛋白相对表达量,筛选与NHOK细胞差异最明显的细胞进行后续实验。HSC-3细胞分为5组,分别转染si-PCGEM1(si-PCGEM1组)、miR-506-3p mimics(miR-506-3p组)、si-RAB22A(si-RAB22A组)、si-PCGEM1+anti-miR-506-3p(si-PCGEM1+anti-miR-506-3p组)、si-PCGEM1+pcDNA-RAB22A(si-PCGEM1+pcDNA-RAB22A组),转染48 h后,采用MTT比色法检测5组细胞存活率,采用Transwell小室实验检测迁移细胞数和侵袭细胞数,采用Western blot检测5组细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶(matrix metalloprotease, MMP)-2和MMP-9蛋白相对表达量。采用双荧光素酶活性检测lncRNA PCGEM1、miR-506-3p、RAB22A之间的靶向关系。结果口腔鳞癌细胞HSC-3、SCC-25、CAL27中lncRNA PCGEM1、RAB22A mRNA和蛋白相对表达量高于NHOK细胞(P<0.05),miR-506-3p相对表达量低于NHOK细胞(P<0.05);SCC-25、CAL-27细胞miR-506-3p相对表达量低于HSC-3细胞(P<0.05),HSC-3细胞与NHOK细胞差异最大。si-PCGEM1+anti-miR-506-3p组、si-PCGEM1+pcDNA-RAB22A组细胞存活率[(92.14±9.21)%、(87.26±8.73)%]、迁移细胞数[(201.56±20.16)、(196.08±19.61)个]、侵袭细胞数[(134.36±13.43)、(130.57±13.06)个]高于si-PCGEM1组[(53.07±5.31)%、(105.67±10.57)个、(71.24±7.12)个]、miR-506-3p组[(63.04±6.31)%、(102.02±10.20)个、(61.02±6.10)个]、si-RAB22A组[(47.25±4.73)%、(135.29±13.53)个、(51.01±5.11)个](P<0.05),RAB22A、cyclin D1、MMP-2和MMP-9蛋白相对表达量高于si-PCGEM1组、miR-506-3p组、si-RAB22A组(P<0.05);以上指标si-PCGEM1组、miR-506-3p组、si-RAB22A组组间两两比较及si-PCGEM1+anti-miR-506-3p组与si-PCGEM1+pcDNA-RAB22A组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。lncRNA PCGEM1靶向miR-506-3p, miR-506-3p靶向RAB22A。结论下调lncRNA PCGEM1表达可通过调控miR-506-3p/RAB22A轴抑制口腔鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 lncrna pcgem1 miR-506-3p RAB22A 增殖 迁移 侵袭
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lncRNA PCGEM1通过靶向miR-155-5p抑制LPS诱导的气管平滑肌细胞增殖及炎症反应 被引量：1
2
作者 唐瑞琪 皮光环 +4 位作者 蔡艳 雷勋明 庞英 谢娜 刘韦 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期521-529,共9页
目的研究lncRNA PCGEM1/miR-155-5p轴对LPS诱导的气管平滑肌细胞增殖和凋亡及炎症反应的影响。方法采用100μg/ml LPS刺激支气管平滑肌细胞BSMC 12 h以诱导细胞损伤。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞lncRNA PCGEM1和miR-155-5p表达水... 目的研究lncRNA PCGEM1/miR-155-5p轴对LPS诱导的气管平滑肌细胞增殖和凋亡及炎症反应的影响。方法采用100μg/ml LPS刺激支气管平滑肌细胞BSMC 12 h以诱导细胞损伤。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞lncRNA PCGEM1和miR-155-5p表达水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞CyclinD1、Cleaved-caspase-3蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测lncRNA PCGEM1和miR-155-5p靶向关系。结果与NC组比较,LPS组细胞lncRNA PCGEM1表达水平显著降低,miR-155-5p表达水平显著升高(P<0.05)。与pcDNA+LPS组比较,pcDNA-lncRNA PCGEM1+LPS组lncRNA PCGEM1表达水平显著升高,吸光度值、CyclinD1蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白表达显著升高,TNF-α、IL-6、IL-33水平显著降低(P<0.05)。与anti-miR-NC+LPS组比较,antimiR-155-5p+LPS组miR-155-5p表达水平显著降低,吸光度值、CyclinD1蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白表达显著升高,TNF-α、IL-6、IL-33水平显著降低(P<0.05)。与miR-NC+pcDNA-lncRNA PCGEM1+LPS组比较,miR-155-5p+pcDNA-lncRNA PCGEM1+LPS组细胞miR-155-5p表达水平显著升高,吸光度值、CyclinD1蛋白表达显著升高,细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白表达显著降低,TNF-α、IL-6、IL-33水平显著升高(P<0.05)。结论lncRNA PCGEM1下调miR-155-5p降低LPS诱导的气管平滑肌细胞凋亡及炎症反应,抑制增殖。 展开更多
关键词 lncrna pcgem1 miR-155-5p 气管平滑肌 增殖 凋亡
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LncRNA PCGEM1对结肠癌SW480细胞增殖与侵袭的影响 被引量：6
3
作者 王劲 张隆陶 +3 位作者 张贻庆 崔贵医 杨磊 刘刚 《中国现代普通外科进展》 CAS 2018年第11期850-854,共5页
目的 :探讨lncRNA PCGEM1对结肠癌SW480细胞的增殖与侵袭的影响。方法 :培养人结肠癌SW480细胞,将结肠癌细胞系SW480细胞分成3组进行处理,即空白对照组:不转染慢病毒;阴性对照组:转染无序序列慢病毒载体;试验组:转染沉默lncRNA PCGEM1... 目的 :探讨lncRNA PCGEM1对结肠癌SW480细胞的增殖与侵袭的影响。方法 :培养人结肠癌SW480细胞,将结肠癌细胞系SW480细胞分成3组进行处理,即空白对照组:不转染慢病毒;阴性对照组:转染无序序列慢病毒载体;试验组:转染沉默lncRNA PCGEM1序列慢病毒载体。荧光定量PCR(RT-PCR)检测RNA表达,CCK-8试剂盒、Transwell和AV-PI试剂盒检测增殖、侵袭与凋亡。结果:lncRNA PCGEM1沉默表达慢病毒载体的滴度为1×10~8TU/mL。RT-PCR结果显示:试验组与阴性对照组相比,lncRNA PCGEM mRNA表达较低,差异有统计学意义(q=8.141,P<0.05);Caspase-3 mRNA和Caspase-9 mRNA的表达具有同样的表达趋势(P<0.05)。Transwell实验结果显示,3组之间差异有统计学意义(F=21.982,P<0.05),试验组和阴性对照组比较差异有统计学意义(q=4.223,P<0.05)。CCK-8检测结果显示,3组差异有统计学意义(F=21.214,P<0.05),试验组与阴性对照组比较差异有统计学意义(q=5.272,P<0.05)。AV-PI检测结果显示,3组比较差异有统计学意义(F=31.009,P<0.05),试验组与空白载体病毒组比较差异有统计学意义(q=9.131,P<0.05)。结论:lncRNA PCGEM1在结肠癌细胞中高表达。沉默lncRNA PCGEM1表达可以抑制结肠癌细胞增殖和侵袭,促进凋亡。 展开更多
关键词 lncrna pcgem1 结肠癌细胞 增殖 侵袭 凋亡
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血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-129-5p与非小细胞肺癌患者临床病理特征及预后的关系 被引量：1
4
作者 潘宴青 王尊乔 +1 位作者 周泽军 夏宁 《现代生物医学进展》 CAS 2024年第3期464-469,453,共7页
目的:研究血清外泌体长链非编码核糖核酸(lncRNA)前列腺癌基因表达标记1(PCGEM1)、微小核糖核酸(miR)-129-5p与非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床病理特征及预后的关系。方法:选取2016年2月-2018年1月南京脑科医院收治的125例NSCLC患者作为NS... 目的:研究血清外泌体长链非编码核糖核酸(lncRNA)前列腺癌基因表达标记1(PCGEM1)、微小核糖核酸(miR)-129-5p与非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床病理特征及预后的关系。方法:选取2016年2月-2018年1月南京脑科医院收治的125例NSCLC患者作为NSCLC组,同期选取体检的70例健康人群作为健康组。采集两组静脉血,提取血清外泌体;采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-129-5p表达情况;采用Pearson相关性分析lncRNA PCGEM1与miR-129-5p的关系。并分析血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-129-5p与NSCLC患者临床病理特征的关系。对NSCLC患者行5年随访,绘制Kaplan-Meier曲线分析预后情况,多因素Cox比例风险回归模型分析预后不良危险因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析lncRNA PCGEM1、miR-129-5p对NSCLC预后的预测价值。结果:NSCLC组lncRNA PCGEM1相对表达量高于健康组,miR-129-5p相对表达量低于健康组(P<0.05)。血清外泌体lncRNA PCGEM1相对表达量与miR-129-5p表达呈负相关(r=-0.420,P<0.05)。血清外泌体lncRNA PCGEM1、miR-129-5p表达与患者TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。Kplan-Meier生存曲线显示,lncRNA PCGEM1低表达组5年生存率69.05%高于lncRNA PCGEM1高表达组35.53%,miR-129-5p高表达组5年生存率68.09%高于miR-129-5p低表达组33.80%。多因素Cox比例风险回归显示,TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移、lncRNA PCGEM1高表达、miR-129-5p低表达为NSCLC患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,lncRNA PCGEM1、miR-129-5p联合检测对NSCLC预后的预测曲线下面积(AUC)为0.865,预测价值高于两者单独预测。结论:NSCLC患者血清外泌体lncRNA PCGEM1表达上调、miR-129-5p表达下调,二者表达与NSCLC患者TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关,且与患者预后密切相关,对NSCLC预后不良具有较好预测价值。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 血清外泌体 lncrna pcgem1 miR-129-5p 临床病理特征 预后
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lncRNA PCGEM1在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移和上皮间质转化的影响 被引量：1
5
作者 付桥 张炜 +8 位作者 杨军 胡志 张志超 孙伟 张朝阳 徐律 王潇 褚浩 张景宇 《临床泌尿外科杂志》 CAS 2023年第11期856-861,866,共7页
目的探究lncRNA PCGEM1在前列腺癌组织中的表达情况及lncRNA PCGEM1对前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭和上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。方法选取2018年1月—2020年12月在武汉市第三医院确诊的前... 目的探究lncRNA PCGEM1在前列腺癌组织中的表达情况及lncRNA PCGEM1对前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭和上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。方法选取2018年1月—2020年12月在武汉市第三医院确诊的前列腺癌患者35例,分别取其癌组织和癌旁组织,检测其lncRNA PCGEM1表达情况;体外培养前列腺癌PC3细胞并构建lncRNA PCGEM1沉默细胞系(siPCGEM1)、过表达lncRNA PCGEM1细胞系(lncRNA PCGEM1)和阴性对照(NC);采用克隆形成实验检测各组细胞增殖并用蛋白质印迹法检测增殖蛋白Ki67和PCNA表达情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用蛋白免疫印迹(Western blot,WB)检测检测凋亡蛋白Bcl-2和Bax表达情况;采用Transwell小室实验检测各组细胞侵袭情况并用WB检测E钙粘蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)的表达情况。结果35例患者的癌组织中lncRNA PCGEM1表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05);与siPCGEM1组比校,lncRNA PCGEM1和NC组细胞中lncRNA PCGEM1水平、Ki67蛋白相对表达水平、PCNA蛋白相对表达水平、克隆形成率、Bcl-2蛋白相对表达水平、Vimentin蛋白相对表达水平、单位面积侵袭细胞数目显著升高(P<0.05),E-cadherin蛋白相对表达水平和Bax蛋白相对表达水平显著降低(P<0.05);与lncRNA PCGEM1组比较,NC组细胞lncRNA PCGEM1水平、Ki67蛋白相对表达水平、PCNA蛋白相对表达水平、克隆形成率、Bcl-2蛋白相对表达水平、Vimentin蛋白相对表达水平、单位面积侵袭细胞数目显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白相对表达水平和Bax蛋白相对表达水平显著升高(P<0.05)。结论前列腺癌组织中lncRNA PCGEM1表达水平会异常升高,降低其表达水平可以有效抑制前列腺癌PC3细胞增殖、侵袭并促进其凋亡,同时通过调控EMT过程降低PC3细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 lncrna pcgem1 PC3细胞 细胞增殖 细胞凋亡 上皮间质转化
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lncRNA PCGEM1对肺癌A549细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制 被引量：3
6
作者 余丹 周靖 汤显斌 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期646-652,共7页
目的:探讨长链非编码RNA(long-chain noncoding,lncRNA)PCGEM1对肺癌A549细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制。方法:收集2016年3月至2018年5月湖北医药学院附属太和医院胸外科接受手术治疗的62例肺癌(lung cancer,LC)患者癌组织及相... 目的:探讨长链非编码RNA(long-chain noncoding,lncRNA)PCGEM1对肺癌A549细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制。方法:收集2016年3月至2018年5月湖北医药学院附属太和医院胸外科接受手术治疗的62例肺癌(lung cancer,LC)患者癌组织及相应的癌旁组织标本,并用以上组织构建LC组织芯片。用qPCR检测lncRNA PCGEM1及miR-148a在LC组织相应的癌旁组织及LC细胞株中的表达。构建lncRNA PCGEM1沉默细胞系A549-siPCGEM1和阴性对照A549-NC,并以A549细胞作为空白对照(Control组),用MTT和平板克隆实验检测敲减PCGEM1对A549细胞增殖能力的影响,Transwell和划痕实验检测敲减PCGEM1对A549细胞侵袭和迁移能力的影响。使用生物信息学网站StarBase预测可互补结合PCGEM1的miRNA,再根据Targetscan网站预测相应可靶向结合miRNA的基因;Western blotting实验检测TGF-β2/Smad2信号通路蛋白表达情况。结果:在LC组织中PCGEM1的表达水平高于癌旁组织而miR-148a的表达量明显低于癌旁组织(均P<0.05),PCGEM1在5种LC细胞株中的表达明显高于人肺成纤维细胞HLF-02(均P<0.05),且以A549细胞中表达最高。敲减PCGEM1后,与Control组和A549-NC组比较,A549-siPCGEM1组A549细胞增殖、侵袭和迁移能力显著降低(均P<0.05)。StarBase和Targetscan网站预测结果显示,PCGEM1可与miR-148a互补结合,miR-148a与TGF-β2存在靶向结合位点。与Control组和A549-NC组比较,A549-siPCGEM1组中miR-148a表达明显升高,TGF-β2及p-Smad2蛋白的表达明显降低(均P<0.05)。结论:lncRNA PCGEM1在LC组织和细胞株中高表达,高表达的PCGEM1可通过下调miR-148a水平强化TGFβ2/Smad2信号通路,从而促进A549细胞恶性生物学行为的进展。 展开更多
关键词 长链非编码RNA pcgem1 miR-148a 肺癌 A549细胞 TGF-Β/SMAD信号通路
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长链非编码RNA PCGEM1促进胰腺癌细胞增殖和迁移 被引量：7
7
作者 徐岷 倪鑫 +7 位作者 葛璐 刘鑫 周海浪 黄红梅 蒋小猛 彭琬昕 张尤历 龚爱华 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2016年第2期157-163,共7页
该文的目的为探讨长链非编码RNA PCGEM1(long non-coding RNA PCGEM1,lnc RNAPCGEM1)对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响。通过荧光定量PCR检测三种胰腺癌细胞以及人胰腺癌组织和癌旁组织中PCGEM1的表达水平,分别在Bx PC3和Pa Tu8988细胞中转... 该文的目的为探讨长链非编码RNA PCGEM1(long non-coding RNA PCGEM1,lnc RNAPCGEM1)对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响。通过荧光定量PCR检测三种胰腺癌细胞以及人胰腺癌组织和癌旁组织中PCGEM1的表达水平,分别在Bx PC3和Pa Tu8988细胞中转染p CDH-PCGEM1及其空载质粒p CDH,在SW1990细胞中转染si RNA和其对照si RNA,分别上调或下调PCGEM1在不同胰腺癌细胞中的表达;细胞克隆形成、CCK-8实验检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移能力;Western blot法检测MMP2、MMP9和E-钙黏着蛋白的蛋白表达以及荧光定量PCR检测MMP2和MMP9水平。结果表明,PCGEM1差异性表达于三种胰腺癌细胞中,其中SW1990表达水平相对较高,Bx PC3和Pa Tu8988表达水平相对较低。胰腺癌组织中PCGEM1水平高于癌旁组织。过表达PCGEM1后,细胞增殖和迁移能力增强,MMP2和MMP9的蛋白质水平增加,E-钙黏着蛋白的蛋白质水平降低;相反,降低PCGEM1表达,细胞增殖和迁移能力减弱,MMP2和MMP9的蛋白质水平降低,E-钙黏着蛋白的蛋白质水平升高。由此说明,lnc RNA PCGEM1可促进胰腺癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 长链非编码RNA pcgem1 胰腺癌 增殖 迁移
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长链非编码RNA PCGEM1、microRNA-642a-5p表达与HPV阳性宫颈癌根治术术后复发的关系研究 被引量：6
8
作者 谭立凤 赵萌 祝愿 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期6-12,共7页
目的 探讨长链非编码RNA PCGEM1(LncRNA PCGEM1)、microRNA-642a-5p(miR-642a-5p)表达与人乳头状瘤病毒(HPV)阳性宫颈癌根治术术后复发的关系。方法 选取2018年2月-2020年4月淄博市妇幼保健院184例HPV阳性宫颈癌患者为研究对象,所有患者... 目的 探讨长链非编码RNA PCGEM1(LncRNA PCGEM1)、microRNA-642a-5p(miR-642a-5p)表达与人乳头状瘤病毒(HPV)阳性宫颈癌根治术术后复发的关系。方法 选取2018年2月-2020年4月淄博市妇幼保健院184例HPV阳性宫颈癌患者为研究对象,所有患者行HPV阳性宫颈癌根治术。比较不同临床分期HPV阳性宫颈癌LncRNA PCGEM1、miR-642a-5p的表达。统计HPV阳性宫颈癌患者术后2年复发情况,并依据术后是否复发分为复发组和未复发组,比较复发组与未复发组患者的临床资料。多因素Logistic逐步回归分析影响HPV阳性宫颈癌患者术后复发的因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,以ROC曲线下面积(AUC)评价宫颈癌组织LncRNA PCGEM1、miR-642a-5p表达及两者联合对HPV阳性宫颈癌患者术后复发的预测价值。结果 临床分期Ⅲ期和Ⅱ期宫颈癌组织LncRNAPCGEM1mRNA相对表达量高于Ⅰ期(P <0.05),miR-642a-5p mRNA相对表达量低于Ⅰ期(P <0.05);临床分期Ⅲ期宫颈癌组织LncRNA PCGEM1 mRNA相对表达量高于Ⅱ期(P <0.05),miR-642a-5p mRNA相对表达量低于Ⅱ期(P <0.05)。HPV阳性宫颈癌患者术后复发率为15.22%。复发组与未复发组临床分期、分化程度、宫颈浸润深度、盆腔淋巴结转移、肿瘤最大直径比较,差异有统计学意义(P <0.05),复发组宫颈癌组织LncRNA PCGEM1 mRNA相对表达量高于未复发组(P <0.05),miR-642a-5p mRNA相对表达量低于未复发组(P <0.05)。多因素Logistic逐步回归分析显示,临床分期为Ⅲ期[■=2.815(95%CI:1.226,6.462)、盆腔淋巴结转移■[=2.892(95%CI:1.202,6.968)、宫颈癌组织LncRNA PCGEM1表达■[=3.267(95%CI:1.642,8.754)、miR-642a-5p表达[■=3.337(95%CI:2.031,9.846)为影响HPV阳性宫颈癌患者术后复发的危险因素(P <0.05)。ROC曲线分析结果显示,宫颈癌组织LncRNA PCGEM1、miR-642a-5p及两者联合预测HPV阳性宫颈癌患者术后复发的敏感性分别为75.00%(95%CI:0.548,0.886)、78.57%(95%CI:0.586,0.910)和75.00%(95%CI:0.548,0.886),特异性分别为78.21%(95%CI:0.708,0.842)、73.08%(95%CI:0.653,0.797)和96.15%(95%CI:0.914,0.984),AUC分别为0.724(95%CI:0.653,0.787)、0.796(95%CI:0.730,0.851)和0.856(95%CI:0.797,0.904)。结论 宫颈癌组织LncRNA PCGEM1、miR-642a-5p与HPV阳性宫颈癌根治术术后复发相关,且两者联合对宫颈癌根治术术后复发的预测效能较高。 展开更多
关键词 宫颈癌 人乳头状瘤病毒 宫颈癌根治术 长链非编码RNA pcgem1 microRNA-642a-5p
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