期刊文献+
共找到179篇文章
< 1 2 9 >
每页显示 20 50 100
绒毛样蛋白VILL通过与LMO7蛋白相互作用抑制鼻咽癌细胞的增殖
1
作者 曾玉梅 李继科 +1 位作者 黄仲曦 周毅波 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第5期954-961,共8页
目的探索绒毛样蛋白VILL抑制鼻咽癌增殖的分子机制。方法收集136例鼻咽癌和67例鼻咽非癌组织,采用免疫共沉淀(CO-IP)、质谱、Western blotting、免疫荧光和GST pull down实验在鼻咽癌细胞株中筛查并验证VILL相互作用丰度最高蛋白。采用... 目的探索绒毛样蛋白VILL抑制鼻咽癌增殖的分子机制。方法收集136例鼻咽癌和67例鼻咽非癌组织,采用免疫共沉淀(CO-IP)、质谱、Western blotting、免疫荧光和GST pull down实验在鼻咽癌细胞株中筛查并验证VILL相互作用丰度最高蛋白。采用转基因实验,在体外(鼻咽癌细胞株)和体内(裸鼠)验证VILL与靶蛋白对鼻咽癌增殖的调控作用。采用免疫组化实验在临床组织标本中验证VILL与靶蛋白表达水平与鼻咽癌临床特征的相关性。结果在鼻咽癌细胞(HONE1 EBV、S18)中,VILL与E3泛素连接酶LMO7相互作用的丰度最高,二者共定位于细胞浆,直接相互作用。过表达LMO7部分逆转VILL对鼻咽癌细胞增殖的抑制作用。与67例鼻咽非癌组织比较,VILL表达在136例鼻咽癌组织中下调(P<0.0001)且与临床T分期(P=0.04)、N分期(P=0.01)和M分期(P=0.013)显著相关,而LMO7在鼻咽癌普遍高表达。结论VILL可能通过抑制LMO7的促癌功能而抑制鼻咽癌增殖。 展开更多
关键词 鼻咽癌 VILL蛋白 lmo7蛋白 蛋白相互作用 增殖
暂未订购
σ^(B)激活因子样Lmo1642缺失对单核细胞增生李斯特菌环境应激和生物被膜形成的影响
2
作者 张亚萍 李能秀 +5 位作者 焦健 季春辉 王立霞 才学鹏 孟庆玲 乔军 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第1期1-8,共8页
单核细胞增生李斯特菌(LM)是一种对外界环境具有广泛适应性的人兽共患革兰氏阳性菌,σ^(B)因子(sigma B)是LM最重要的应激调控因子。为探究σ^(B)激活因子样Lmo1642的生物学功能,本研究以国际标准菌株LM EGD-e基因组为模板,扩增lmo1642... 单核细胞增生李斯特菌(LM)是一种对外界环境具有广泛适应性的人兽共患革兰氏阳性菌,σ^(B)因子(sigma B)是LM最重要的应激调控因子。为探究σ^(B)激活因子样Lmo1642的生物学功能,本研究以国际标准菌株LM EGD-e基因组为模板,扩增lmo1642基因,并分析其分子特征;通过同源重组技术构建lmo1642基因缺失株LM-Δlmo1642及回补株LM-CΔlmo1642,比较其在不同胁迫环境下的生长情况及生物被膜(BF)形成能力的差异,并通过qPCR检测与环境应激和BF形成相关基因的转录水平。结果显示:Lmo1642蛋白含有STAS结构域,属于STAS蛋白家族;与LM EGD-e和LM-CΔlmo1642相比,LM-Δlmo1642在42℃、pH9.0、3.8%乙醇以及不同渗透压环境下的适应能力明显减弱(P<0.05),但对LM生物被膜形成能力没有显著的影响(P>0.05);qPCR显示与环境应激有关基因sigB、opuCC、betL、clpP的相对转录水平显著降低(P<0.05),而BF相关基因actA没有显著的变化(P>0.05),表明lmo1642基因对LM的环境应激适应能力发挥了重要的调控作用。本研究为进一步揭示lmo1642基因调控LM环境应激能力的分子机制提供了前期研究基础。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 lmo1642 环境应激 生物被膜
在线阅读 下载PDF
Fur家族转录因子Lmo1956在单核细胞增生李斯特菌环境应激及生物被膜形成中的调控作用研究
3
作者 常意行 左雨霏 +5 位作者 钱亿宽 李能秀 焦健 才学鹏 孟庆玲 乔军 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第1期1-8,共8页
单核细胞增生李斯特菌(LM)是一种重要的人兽共患革兰氏阳性菌,对外界环境具有广泛适应性。为了探究铁摄取调节蛋白(Fur)家族转录因子Lmo1956的生物学功能,本研究以提取的LM EGD-e株基因组为模板,PCR扩增lmo1956基因并通过在线软件分析Lm... 单核细胞增生李斯特菌(LM)是一种重要的人兽共患革兰氏阳性菌,对外界环境具有广泛适应性。为了探究铁摄取调节蛋白(Fur)家族转录因子Lmo1956的生物学功能,本研究以提取的LM EGD-e株基因组为模板,PCR扩增lmo1956基因并通过在线软件分析Lmo1956蛋白的结构域特征;利用同源重组技术构建lmo1956基因缺失株LM-Δlmo1956及回补株LM-CΔlmo1956,采用特异性引物经PCR鉴定及测序鉴定。将LM EGD-e、LM-Δlmo1956及LM-CΔlmo1956菌株在不同应激环境下培养,通过绘制各菌株的生长曲线分析各菌株的生长情况;采用铬天青S(CAS)培养板定性定量检测方法及微量结晶紫法对2种菌株铁载体、生物被膜(BF)的形成能力鉴定,并通过荧光定量PCR(qPCR)检测BF形成相关基因gltB、gltC的转录水平。PCR扩增结果显示,从LM EGD-e株基因组中扩增到453 bp的lmo1956基因。Interpro软件分析结果显示Lmo1956蛋白含有Fur结构域,属于Fur蛋白家族转录因子。PCR及测序鉴定结果显示LM-Δlmo1956及LM-CΔlmo1956株均正确构建。不同应激环境下培养各菌株后检测结果显示,与LM EGD-e和LM-CΔlmo1956株相比,LM-Δlmo1956在铁限制、37℃、42℃、pH9、8%NaCl、7 mmol/L H2O2等环境下的生长能力明显减弱,铁载体、BF形成能力极显著下降(P<0.01)。qPCR结果显示,与LM EGD-e和LM-CΔlmo1956株相比,LM-Δlmo1956中BF形成相关基因gltB、gltC的相对转录水平极显著降低(P<0.01)。本研究结果首次证实Lmo1956在LM环境适应性和BF形成中发挥重要的调控作用,为揭示Lmo1956在调控LM环境适应性和BF形成中的分子机制奠定了研究基础。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 lmo1956 环境应激 生物被膜
在线阅读 下载PDF
单核增生李斯特氏菌LPXTG基序锚定蛋白Lmo0175介导的抗氧化应激和感染生物学研究
4
作者 葛泓睿 李豪杰 +5 位作者 高宇杰 徐加利 张蕊 宋厚辉 程昌勇 邓思敏 《微生物学报》 北大核心 2025年第10期4504-4516,共13页
【目的】通过比较单核增生李斯特氏菌参考菌株EGD-e、lmo0175基因缺失株Δlmo0175和回补株CΔlmo0175在细菌生长、抗氧化应激、细胞和宿主感染等方面的差异,明确LPXTG基序锚定蛋白Lmo0175在单核增生李斯特氏菌抗氧化应激和感染致病中的... 【目的】通过比较单核增生李斯特氏菌参考菌株EGD-e、lmo0175基因缺失株Δlmo0175和回补株CΔlmo0175在细菌生长、抗氧化应激、细胞和宿主感染等方面的差异,明确LPXTG基序锚定蛋白Lmo0175在单核增生李斯特氏菌抗氧化应激和感染致病中的作用。【方法】通过构建lmo0175的基因缺失株和回补株,探究Lmo0175对单核增生李斯特氏菌生长、抗氧化应激、细胞黏附、细胞侵袭、胞内增殖和组织定殖能力及小鼠致病力等方面的影响,从而明确Lmo0175在该菌抗氧化应激和感染宿主中的作用。【结果】lmo0175基因缺失后,单核增生李斯特氏菌在抗氧化应激、胞内增殖和小鼠脏器定殖等方面的能力显著降低,但在生长能力、细胞黏附和侵袭能力方面无显著差异。【结论】本研究阐明了LPXTG基序锚定蛋白Lmo0175参与单核增生李斯特氏菌抗氧化应激、胞内增殖和组织定殖等过程,且有助于该菌对小鼠的致病力。 展开更多
关键词 单核增生李斯特氏菌 氧化应激 宿主感染 LPXTG基序锚定蛋白lmo0175
原文传递
单核增生李斯特氏菌LPXTG基序锚定蛋白Lmo0130的感染生物学作用
5
作者 邓思敏 葛泓睿 +5 位作者 单䶮 毛敏杰 徐加利 夏菁 宋厚辉 程昌勇 《微生物学报》 北大核心 2025年第9期4188-4197,共10页
【目的】为了探究LPXTG基序锚定蛋白Lmo0130对单核增生李斯特氏菌EGD-e在感染致病中的影响,比较该菌EGD-e、lmo0130基因缺失株和回补株在生长、细胞和宿主感染等方面的差异。【方法】构建单核增生李斯特氏菌lmo0130基因缺失株Δlmo0130... 【目的】为了探究LPXTG基序锚定蛋白Lmo0130对单核增生李斯特氏菌EGD-e在感染致病中的影响,比较该菌EGD-e、lmo0130基因缺失株和回补株在生长、细胞和宿主感染等方面的差异。【方法】构建单核增生李斯特氏菌lmo0130基因缺失株Δlmo0130和回补株CΔlmo0130,探究Lmo0130对单核增生李斯特氏菌的生长能力、细胞表面的细菌黏附与侵袭能力、细胞内的细菌增殖能力、细胞间的迁移能力,以及感染小鼠的存活能力和细菌定殖能力等方面的影响,从而阐明Lmo0130对单核增生李斯特氏菌在细胞和宿主感染中的作用。【结果】LPXTG基序锚定蛋白Lmo0130有助于单核增生李斯特氏菌在细胞表面的黏附与侵袭、在细胞内的增殖、在感染小鼠组织中的定殖,并最终有助于在小鼠中的致病力,但对该菌的生长和胞间迁移能力无显著影响。【结论】本研究阐明了Lmo0130在单核增生李斯特氏菌感染细胞和宿主中的作用。 展开更多
关键词 LPXTG基序锚定蛋白lmo0130 感染致病 胞内增殖 单核增生李斯特氏菌
原文传递
单增李斯特菌lmo2300介导的氧化应激和感染生物学作用
6
作者 张晓荟 高宇杰 +6 位作者 葛同鑫 王温馨 许浩男 宋若菲 宋厚辉 程昌勇 韩月 《微生物学报》 北大核心 2025年第9期3946-3958,共13页
【目的】研究单增李斯特菌lmo2300基因在EGD-e株抗氧化应激和感染生物学特性中的作用。【方法】以单增李斯特菌1/2a血清型EGD-e为亲本株,利用同源重组法构建lmo2300的缺失株和回补株,检测Δlmo2300在体外的生长、运动能力,对氧化环境的... 【目的】研究单增李斯特菌lmo2300基因在EGD-e株抗氧化应激和感染生物学特性中的作用。【方法】以单增李斯特菌1/2a血清型EGD-e为亲本株,利用同源重组法构建lmo2300的缺失株和回补株,检测Δlmo2300在体外的生长、运动能力,对氧化环境的抵抗能力,还原酶活性,以及抗生素最小抑菌浓度;检验突变株感染细胞后的黏附、侵袭、增殖和细胞间迁移能力;使用荧光定量PCR技术检测lmo2300基因缺失后单增李斯特菌硫氧还蛋白相关基因和主要毒力基因的转录水平变化。【结果】经PCR鉴定及测序证明缺失株Δlmo2300和回补株CΔlmo2300构建成功。lmo2300基因缺失后,单增李斯特菌的生长、运动和对抗生素的敏感性均无显著变化,黏附、侵袭和增殖能力也未受显著影响。Lmo2300具有还原酶活性,Δlmo2300中硫氧还蛋白基因lmo1903和grx转录水平显著升高,对H_(2)O_(2)、Diamide、CdCl_(2)和MnSO_(4)的氧化应激抵抗能力显著增强;且该菌细胞间迁移能力显著提高,Δlmo2300中与细胞间迁移相关的actA基因转录水平上调约8倍。【结论】本研究表明lmo2300在细胞间迁移和抵抗氧化应激中发挥关键作用,这一发现对于深入理解单增李斯特菌的抗氧化应激和感染生物学机制具有重要意义。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 lmo2300 氧化应激 感染生物学
原文传递
LMO7在阿霉素诱导的心脏扩张中的作用及机制
7
作者 丁柯晗 王乐 +3 位作者 余文军 李养 王晨阳 赵金平 《武汉大学学报(医学版)》 2025年第6期716-722,共7页
目的:探讨LMO7在阿霉素诱导的心脏扩张中导致心肌细胞凋亡的作用及机制,为阿霉素(DOX)心脏毒性的改善提供新思路。方法:使用8周龄雄性小鼠,随机分为两组(n=7),一组腹腔注射4 mg·kg^(-1)剂量的DOX构建心脏扩张疾病模型,另一组注射... 目的:探讨LMO7在阿霉素诱导的心脏扩张中导致心肌细胞凋亡的作用及机制,为阿霉素(DOX)心脏毒性的改善提供新思路。方法:使用8周龄雄性小鼠,随机分为两组(n=7),一组腹腔注射4 mg·kg^(-1)剂量的DOX构建心脏扩张疾病模型,另一组注射等体积的PBS溶液。5周后进行心脏超声检测后,获取小鼠心脏组织、Masson染色、LMO7免疫组化染色。蛋白印迹法(Western Blot)检测小鼠心脏LMO7、α-SMA、CollagenⅠ、HSPA8、PI3K/p-PI3K、AKT/p-AKT的表达。体外实验:使用LMO7敲低腺病毒(Ad-GFP-SH LMO7)转染原代心肌细胞,分为对照组和LMO7敲低组。敲低组在不含血清的培养基中利用LMO7敲低腺病毒转染原代心肌细胞,12 h后使用含有1μmol·L^(-1)的DOX培养基(不含血清)换液,继续培养24 h后收取细胞;对照组则使用GFP对照腺病毒原代心肌细胞,步骤相同。检测LMO7、Caspase 9、Caspase 3、BAX/Bcl2、HSPA8、PI3K/p-PI3K、AKT/p-AKT的表达。采用t检验分析数据统计学差异。结果:心脏超声显示相比于对照组小鼠,DOX注射5周后的小鼠心脏功能出现了明显的下降(P<0.05),DOX注射小鼠心脏中LMO7、α-SMA、CollagenⅠ、Caspase 9、Caspase 3、BAX/Bcl2表达显著增加(P<0.05),免疫组化显示DOX注射组LMO7的含量显著高于对照组,Masson染色显示DOX注射组小鼠心脏中出现了大量的纤维化;相比于Ctrl组原代心肌细胞,DOX处理的原代心肌细胞中LMO7、Caspase 9、Caspase 3、BAX/Bcl2、HSPA8、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT表达显著增加(P<0.05);使用Ad-GFP-SH LMO7敲低LMO7后,相比于未敲低组,LMO7、Caspase 9、Caspase 3、BAX/Bcl2、表达显著降低(P<0.05),HSPA8、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT表达显著上升(P<0.05)。结论:LMO7的敲减会抑制阿霉素诱导的心脏扩张,其潜在机制可能是通过降低HSPA8含量来抑制PI3K-AKT通路活化。 展开更多
关键词 阿霉素 心脏扩张 lmo7
原文传递
Lmo7对ATDC5细胞体外成软骨分化及增殖、迁移影响的实验研究
8
作者 陶然 王佐林 《口腔颌面外科杂志》 2025年第1期7-13,共7页
目的:探究Lmo7(LIM domain 7)基因对ATDC5细胞体外成软骨分化及增殖、迁移的影响。方法:体外培养ATDC5细胞,通过免疫荧光染色观察Lmo7在细胞中的分布。对细胞进行成软骨诱导,通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymeras... 目的:探究Lmo7(LIM domain 7)基因对ATDC5细胞体外成软骨分化及增殖、迁移的影响。方法:体外培养ATDC5细胞,通过免疫荧光染色观察Lmo7在细胞中的分布。对细胞进行成软骨诱导,通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)观察分化过程中Lmo7表达水平的变化。转染小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)以干扰Lmo7基因在ATDC5细胞的表达水平,通过RT-qPCR检测成软骨分化标志物的基因表达变化,CCK8法和划痕实验分别检测Lmo7敲低对ATDC5细胞增殖、迁移能力的影响。结果:Lmo7分布于细胞核及细胞质内。在体外诱导ATDC5细胞成软骨分化后,成软骨分化标志物表达上调,Lmo7的表达也随之上调。使用siRNA敲降Lmo7后,成软骨分化标志物SRY相关高迁移率族盒蛋白9(SRY-related high mobility group-box gene9,Sox9)、Ⅱ型胶原蛋白(typeⅡcollagen,Col2)表达显著上升。CCK8实验显示敲降组的增殖水平高于对照组。在划痕实验中,敲降组的划痕愈合率低于对照组。结论:Lmo7基因在ATDC5细胞成软骨分化期间上调,干扰Lmo7基因表达可以促进ATDC5细胞的成软骨分化和增殖能力,并可抑制ATDC5细胞的迁移能力。 展开更多
关键词 lmo7 ATDC5细胞 分化 增殖 迁移
暂未订购
309LMo焊材热轧边裂原因分析及对策
9
作者 汤成莉 夏亚金 +2 位作者 吴汉民 徐肖锋 彭艳星 《冶金与材料》 2025年第1期172-174,共3页
309LMo是一种超低碳奥氏体不锈钢,文章针对HD309LMo焊材生产过程中产生边裂的情况,通过成分分析、拉伸试验和显微组织观察,分析该边裂产生原因,并优化热轧工艺中加热和冷却环节,解决了热轧后产生边裂的问题。文章的经验和改进措施不仅对... 309LMo是一种超低碳奥氏体不锈钢,文章针对HD309LMo焊材生产过程中产生边裂的情况,通过成分分析、拉伸试验和显微组织观察,分析该边裂产生原因,并优化热轧工艺中加热和冷却环节,解决了热轧后产生边裂的问题。文章的经验和改进措施不仅对于309LMo的生产有直接指导作用,对其他涉及热轧工艺的奥氏体不锈钢焊材的生产也有一定的借鉴作用。 展开更多
关键词 309lmo 超低碳不锈钢 热轧 边裂 工艺优化
在线阅读 下载PDF
脑胶质瘤患者LMO-1和LMO-4基因表达水平的改变及其意义 被引量:2
10
作者 董成亚 李昊文 +2 位作者 刘丽 康熙雄 王雅杰 《标记免疫分析与临床》 CAS 2014年第5期568-570,580,共4页
目的探讨脑胶质瘤患者脑组织中LMO-1和LMO-4基因表达水平的改变及其意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测46例脑胶质瘤手术患者脑组织及19例正常脑组织标本中LMO1和LMO4的表达水平,分析LMO1、LMO4与病理分级之间... 目的探讨脑胶质瘤患者脑组织中LMO-1和LMO-4基因表达水平的改变及其意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测46例脑胶质瘤手术患者脑组织及19例正常脑组织标本中LMO1和LMO4的表达水平,分析LMO1、LMO4与病理分级之间的关系。结果脑胶质瘤患者脑组织中LMO-1表达高于正常对照组(P<0.05);LMO1在不同分级的胶质瘤中表达并不相同,在Ⅲ、Ⅳ级中的相对表达量显著高于Ⅰ、Ⅱ级(P<0.01);LMO1表达水平与胶质瘤分级正相关,差异具有显著性意义(P<0.05)。在多形性胶质母细胞瘤患者脑组织中,LMO-4的表达明显高于其它级别胶质瘤和正常对照组(P<0.05)。结论脑胶质瘤患者肿瘤组织中LMO-1和LMO-4表达增高,可能参与了胶质瘤的发生、发展过程。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 lmo-1 lmo-4 表达
暂未订购
pGEX-5X-1-hLMO4原核质粒构建及重组蛋白表达 被引量:4
11
作者 张红艳 李彦姝 +3 位作者 姚远 王春玉 王迪 李丰 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2012年第2期139-143,共5页
目的:构建hLMO4的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法:hLMO4全长编码基因经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)在BL21大肠杆菌中诱导GST-hLMO4融合蛋白表达,利用Glutathione ... 目的:构建hLMO4的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法:hLMO4全长编码基因经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)在BL21大肠杆菌中诱导GST-hLMO4融合蛋白表达,利用Glutathione Sepharose 4B纯化诱导的融合蛋白,并经Western blot鉴定结果。结果:hLMO4编码序列克隆至pGEX-5X-1载体中,双酶切鉴定片段大小为500 bp,在E.coli BL21中IPTG诱导融合蛋白的表达,分子质量约为49 000 Da,成功纯化出GST及GST-hLMO4蛋白,Western blot检测到蛋白表达。结论:构建了hLMO4基因原核表达载体,鉴定了GST-hLMO4融合蛋白表达。 展开更多
关键词 lmo4 蛋白纯化 融合蛋白
在线阅读 下载PDF
癌基因LMO3的原核表达及多克隆抗体的制备及应用 被引量:3
12
作者 惠玲 石洁 +3 位作者 王晓辉 吕同德 杨金升 哈小琴 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2009年第11期817-820,共4页
目的:制备抗神经特异性表达的癌基因LMO3的多克隆抗体,进行LMO3分子检测和功能研究。方法:采用RT-PCR方法扩增LMO3的基因序列,构建其原核表达载体pET32a-LMO3。在大肠埃希菌中诱导融合蛋白表达,SDS-PAGE分离纯化原核表达的融合蛋白,PBS... 目的:制备抗神经特异性表达的癌基因LMO3的多克隆抗体,进行LMO3分子检测和功能研究。方法:采用RT-PCR方法扩增LMO3的基因序列,构建其原核表达载体pET32a-LMO3。在大肠埃希菌中诱导融合蛋白表达,SDS-PAGE分离纯化原核表达的融合蛋白,PBS溶解聚丙烯酰胺凝胶颗粒中的融合蛋白,乳化后免疫新西兰兔制备多克隆抗体。采用免疫印迹、免疫组化等对该抗体的特异性进行鉴定。结果:构建的重组质粒经酶切鉴定和测序证实序列正确。经诱导表达在相对分子质量为37×103处有一条明显的蛋白条带,与预期值一致;免疫动物所得抗血清效价为1∶16 000,该抗体能够识别原核表达的LMO3蛋白及细胞内源性表达的LMO3蛋白;免疫组化显示,LMO3在SHG44胶质瘤细胞株及脑胶质瘤组织中均有表达。结论:制备了能识别天然LMO3分子的抗LMO3的多克隆抗体,为检测LMO3分子的表达和进一步研究其功能提供了有力的工具。 展开更多
关键词 基因 lmo3 原核表达 抗体 多克隆
原文传递
GST-LMO1融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达 被引量:3
13
作者 顾卉 佟宇鑫 +3 位作者 刘彤 李慧 李丹妮 袁正伟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期961-963,978,共4页
目的构建GST-LMO1融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达。方法以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LMO1基因全长及各个截短突变体,通过BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点分别将其定向插入pGEX-5X-2载体中,构建原核表达质... 目的构建GST-LMO1融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达。方法以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LMO1基因全长及各个截短突变体,通过BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点分别将其定向插入pGEX-5X-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-5X-2-LMO1及其截短突变体,通过酶切电泳鉴定和DNA序列测定正确后,转入E.coli BL21中,经异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果酶切电泳及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒pGEX-5X-2-LMO1及其截短突变体,并用Western blot方法证实了GST-LMO1全长及各个截短突变体融合蛋白的表达。结论成功构建了LMO1全长及其截短突变体原核表达载体,并证实了其在原核细胞大肠埃希菌中的表达,为LMO1结构与功能的研究提供了前提基础。 展开更多
关键词 lmo1 截短突变体 质粒 原核表达
在线阅读 下载PDF
胃癌组织中LMO1与Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3蛋白表达的关系及意义 被引量:11
14
作者 孙云 胡晓杰 +2 位作者 马国娟 尹香云 彭彦辉 《肿瘤学杂志》 CAS 2016年第9期703-707,共5页
[目的]检测LMO1、Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3蛋白在胃癌组织中的表达,并对这些蛋白之间的关系和临床意义进行分析。[方法]对96例胃癌手术患者的肿瘤组织标本及50例癌旁组织标本进行免疫组化染色(SP法),检测LMO1、Bcl-2、Bax、Surv... [目的]检测LMO1、Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3蛋白在胃癌组织中的表达,并对这些蛋白之间的关系和临床意义进行分析。[方法]对96例胃癌手术患者的肿瘤组织标本及50例癌旁组织标本进行免疫组化染色(SP法),检测LMO1、Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3蛋白的表达情况。同时收集患者的病理学情况,对与各指标的关系进行分析。[结果]胃癌组织中LMO1、Bcl-2、Survivin表达均比癌旁组织增强(均P<0.05),Caspase-3蛋白在胃癌组织中表达低于癌旁组织(P<0.05),Bax在两种组织中表达无明显差异(P>0.05)。胃癌组织中细胞凋亡率明显低于癌旁组织(P<0.01)。胃癌组织中LOM1蛋白强表达者细胞凋亡率明显低于弱表达者(P<0.01)。Spearman相关分析发现,胃癌组织中LMO1与Bcl-2表达存在正相关(r=0.3058,P=0.002),LMO1与Caspase-3表达存在负相关(r=-0.2886,P=0.004);Bcl-2与Survivin表达存在正相关关系(r=0.2986,P=0.0315),Bcl-2与Bax表达呈负相关(r=-0.4062,P<0.001),Survivin与Caspase-3也呈负相关(r=-0.3142,P=0.002)。[结论 ]胃癌组织中LMO1蛋白可能通过调节Bcl-2、Caspase-3的表达和活性而参与肿瘤凋亡。 展开更多
关键词 胃肿瘤 lmo1 BCL-2 CASPASE-3 凋亡
原文传递
LMO3 mRNA在小鼠脑发育过程中的表达 被引量:4
15
作者 惠玲 蔡文琴 +3 位作者 纪华 吕同德 杨金升 赵治华 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第24期2209-2211,共3页
目的:研究不同发育时期小鼠脑内LMO3的表达.方法:采用以SYBR Green Ⅰ为荧光染料的定量RT-PCR及以地高辛标记的cRNA为探针的原位杂交组织化学法检测LMO3基因在小鼠脑发育过程中的表达.结果:FQRT-PCR结果表明,LMO3在出生前高表达,... 目的:研究不同发育时期小鼠脑内LMO3的表达.方法:采用以SYBR Green Ⅰ为荧光染料的定量RT-PCR及以地高辛标记的cRNA为探针的原位杂交组织化学法检测LMO3基因在小鼠脑发育过程中的表达.结果:FQRT-PCR结果表明,LMO3在出生前高表达,P7d后表达水平急剧下降,至成年都维持在一个较低的水平.LMO3 mRNA在小鼠胚胎期E10.5d即有表达,但仅限于整个脑泡组织内,胚体其他区域均为阴性;E11.5d脑区信号逐渐加强,无核团及脑区的特异性,胚体其他部分仍为阴性;E15.5~P0d期LMO3阳性信号在几乎所有观察的脑区均有广泛而较强的着色;P7d LMO3阳性信号较出生前变弱,分布逐渐集中;P14~P60d LMO3mRNA表达范围较P7d逐渐缩小,但仍有广泛表达,阳性信号主要集中于不同核团,表达有强弱之分.结论:LMO3基因可能与小鼠出生前脑的发育以及出生后特定脑区神经元的特化及特性维持有关. 展开更多
关键词 lmo3 原位杂交组织化学 小鼠
暂未订购
LMO3 mRNA在小鼠中枢神经系统的表达定位 被引量:5
16
作者 惠玲 蔡文琴 吕同德 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第13期1367-1369,共3页
目的 观察神经特异性转录因子LMO3mRNA在小鼠中枢神经系统中的定位。方法 原位杂交组织化学染色。结果LMO3mRNA阳性神经元可见于大脑、小脑、丘脑、脑干、脊髓,在小鼠中枢神经系统中,LMO3mRNA阳性反应产物主要位于细胞质和突起内。强... 目的 观察神经特异性转录因子LMO3mRNA在小鼠中枢神经系统中的定位。方法 原位杂交组织化学染色。结果LMO3mRNA阳性神经元可见于大脑、小脑、丘脑、脑干、脊髓,在小鼠中枢神经系统中,LMO3mRNA阳性反应产物主要位于细胞质和突起内。强阳性信号主要出现于大脑皮质的Ⅱ一Ⅵ层、梨状皮质、内嗅皮质、海马的CA1区、齿状回、中脑的黑质致密部、红核、室旁核、巨细胞网状核、外侧网状核、三叉神经脑桥核、面神经核、三叉神经运动核、舌下神经核等部位;中等强度着色主要分布于扣带前皮质、嗅球、海马的CA2区、梨状内核、杏仁核等部位;海马的CA3区、尾壳核、苍白球、杏仁复合体、丘脑、三叉神经脊束核、疑核、中缝核团、小脑间置核及外侧核、浦肯野细胞可见弱的阳性细胞。结论LMO3基因在CNS的广泛分布提示它除了在多巴胺神经递质的活动中起作用外,还参与了机体的学习记忆、嗅觉的调节。 展开更多
关键词 lmo3 LIM-only 中枢神经系统 原位杂交组织化学 小鼠
暂未订购
过量表达LMO2对成血管细胞增殖和造血分化的作用 被引量:2
17
作者 周海胜 李春 +2 位作者 查晓军 陈兵 刘德培 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期177-184,共8页
目的利用小鼠胚胎干细胞进行体外造血细胞分化,研究LMO2蛋白在成血管细胞分化过程中的作用。方法构建小鼠成血管细胞特异性表达lmo2或绿色荧光蛋白的表达载体,分别转染小鼠胚胎干细胞。经过筛选获得细胞克隆进行自发分化以形成胚胎体。... 目的利用小鼠胚胎干细胞进行体外造血细胞分化,研究LMO2蛋白在成血管细胞分化过程中的作用。方法构建小鼠成血管细胞特异性表达lmo2或绿色荧光蛋白的表达载体,分别转染小鼠胚胎干细胞。经过筛选获得细胞克隆进行自发分化以形成胚胎体。收集分化0~12 d的胚胎体细胞,检测造血细胞相关基因的表达;利用EB细胞进行细胞集落形成实验及血细胞集落形成单位实验,并统计集落形成数。结果成功构建了成血管细胞特异性表达目的基因的表达载体,转染目的基因的小鼠胚胎干细胞在其分化中产生的成血管细胞可特异表达目的基因。过量表达lmo2能够促进造血相关基因的表达,所产生细胞集落数是对照组的2倍,晚期造血分化的血细胞集落形成单位总数是对照组的2.5倍,其中红系集落单位数是对照组的3倍。结论在成血管细胞中过量表达LMO2,促进其细胞增殖及其造血细胞分化。 展开更多
关键词 lmo2 胚胎干细胞 成血管细胞 增殖 分化
暂未订购
单增李斯特菌新疆分离株lmo0160基因克隆及序列分析 被引量:5
18
作者 张奇文 凌晨 +3 位作者 马勋 杜冬冬 钱凌霄 李红欢 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2905-2913,共9页
【目的】单增李斯特菌是一种重要的食源性致病菌,常引起人和动物致病。其细胞壁表面LPXTG基序蛋白在单增李斯特菌致病过程中发挥重要作用,根据参考株全序列预测的41个LPXTG基序蛋白中仍有部分蛋白功能未知。对单增李斯特菌新疆绵羊脑分... 【目的】单增李斯特菌是一种重要的食源性致病菌,常引起人和动物致病。其细胞壁表面LPXTG基序蛋白在单增李斯特菌致病过程中发挥重要作用,根据参考株全序列预测的41个LPXTG基序蛋白中仍有部分蛋白功能未知。对单增李斯特菌新疆绵羊脑分离株LM90SB2的LPXTG基序蛋白Lmo0160的基因进行克隆及生物信息学分析,为功能验证提供基础。【方法】根据GenBank中收录的lmo0160序列设计特异性引物,利用PCR方法对新疆分离株的lmo0160基因进行扩增,将扩增产物克隆到pMD 19-T载体,进行PCR、双酶切鉴定及序列测定,并对基因核苷酸序列和蛋白序列进行分析。【结果】分离株LM90SB2的lmo0160序列全长为1 708 bp,包含1 428 bp的开放阅读框,共编码475个氨基酸;LM90SB2株lmo0160核苷酸序列与CFSAN008100株(4b型,美国)、CFSAN023463株(4b型,美国)、J2-064株(4b型,美国)、F2365株(4b型,奶酪,美国)和NTSN株(4b型,绵羊脑,中国扬州)相似性为99.0%-99.1%;与M7株(4a型,牛奶,中国浙江)相似性为97.2%,与Finland1998株(1/2a型,美国)、N53-1株(1/2a型,熟火腿,瑞士)、N1546株(1/2a型,鱼,丹麦)和EGD-e株(1/2a型,美国)相似性为87.2%-91.1%;其推导的氨基酸序列与上述菌株相似性为91.8%-99.4%。系统进化树显示,LM90SB2菌株的lmo0160基因与CFSAN023463、F2365和NSTN菌株亲缘关系较近,处于同一分支上,而与标准株EGD-e菌株亲缘关系较远。蛋白质二级结构预测表明,LM90SB2的Lmo0160蛋白为亲水性蛋白,无信号肽,不形成跨膜结构。蛋白结构域预测表明Lmo0160蛋白含有胶原蛋白结合域和Cna B结构域。【结论】克隆了LM90SB2的lmo0160基因,为进一步研究LM90SB2的lmo0160基因功能奠定了基础。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 lmo0160基因 克隆 生物信息学分析
原文传递
不同蛋白标签对LMO2融合蛋白沉淀实验的影响 被引量:3
19
作者 袁伟 孙伟 +6 位作者 杨爽 闫继东 翟春利 杜君 王兆琦 安迪 朱天慧 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期887-891,共5页
融合蛋白沉淀技术是一种用来研究蛋白质相互作用的新的体外实验技术,通常利用蛋白亲和标签与探针蛋白融合表达来钓取未知相互作用蛋白或验证已知蛋白间的相互作用,其中以谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签最为常用。LMO2(由LIMonly缩写得名,... 融合蛋白沉淀技术是一种用来研究蛋白质相互作用的新的体外实验技术,通常利用蛋白亲和标签与探针蛋白融合表达来钓取未知相互作用蛋白或验证已知蛋白间的相互作用,其中以谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签最为常用。LMO2(由LIMonly缩写得名,也称Ttg-2或Rbtn2)是一种小分子量难溶蛋白。利用原核系统分别表达了含有GST和麦芽糖结合蛋白(MBP)两种标签的LMO2融合蛋白,发现GST-LMO2融合蛋白以包涵体的形式表达,而MBP-LMO2融合蛋白则能够以可溶形式表达,而且MBP-LMO2的表达量明显高于GST-LMO2融合蛋白。将可溶性的MBP-LMO2融合蛋白和复性后的GST-LMO2融合蛋白分别用于钓取K562细胞中LMO2的结合蛋白,结果显示二者都可以结合K562细胞中内源性的GATA1蛋白,而MBP-LMO2融合蛋白捕获的GATA1蛋白明显多于复性后的GST-LMO2融合蛋白。这一结果提示,在研究一些分子量小、疏水性强的蛋白质时改变标签蛋白可能是一种有益的尝试。 展开更多
关键词 蛋白质沉淀技术 谷胱甘肽巯基转移酶 麦芽糖结合蛋白 lmo2
在线阅读 下载PDF
TGF-β1、LMO1在胃癌组织中的表达及意义 被引量:3
20
作者 孙云 胡晓杰 +3 位作者 马国娟 尹香云 冯博超 彭彦辉 《河北医药》 CAS 2017年第6期818-821,共4页
目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)、LMO1在胃癌组织的表达及二者的相关性,探讨TGF-β1、LMO1在胃癌发生发展中的作用。方法选取60例胃癌和50例正常胃组织,采用Real time-PCR和Western Blot检测TGF-β1、LMO1 mRNA和蛋白表达水平。采用... 目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)、LMO1在胃癌组织的表达及二者的相关性,探讨TGF-β1、LMO1在胃癌发生发展中的作用。方法选取60例胃癌和50例正常胃组织,采用Real time-PCR和Western Blot检测TGF-β1、LMO1 mRNA和蛋白表达水平。采用免疫组织化学SP法检测TGF-β1、LMO1蛋白表达,分析TGF-β1、LMO1表达与胃癌临床病理特征的关系。结果胃癌组织TGF-β1、LMO1基因的mRNA和蛋白表达水平均比正常胃黏膜组织明显增强(P<0.05)。TGF-β1、LMO1蛋白在胃癌组织中阳性表达率明显高于正常胃黏膜组织(P<0.05)。TGF-β1、LMO1表达与年龄、性别、发病部位无关(P>0.05),而与肿瘤浸润深度、分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。TGF-β1、LMO1表达呈正相关(r=0.875,P=0.001)。结论胃癌组织TGF-β1、LMO1表达异常增高,可能参与了胃癌发生发展。TGF-β1、LMO1可作为反映胃癌恶性生物学行为及治疗的分子指标之一。 展开更多
关键词 胃癌 TGF-Β1 lmo1 临床意义
暂未订购
上一页 1 2 9 下一页 到第
使用帮助 返回顶部