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Let-7b诱导白血病相关巨噬细胞复极抑制AML的发展
1
作者 姜天佑 李敏 +3 位作者 孙碧文 李越洋 邢丽静 田晨 《天津医药》 2026年第3期225-231,共7页
目的研究白血病相关巨噬细胞(LAM)通过let-7b调控急性髓系白血病(AML)的机制。方法治疗前采集AML患者骨髓细胞保存,给予患者“DA 3+7”方案诱导治疗后评价疗效,分为完全缓解(CR)组和未完全缓解(难治)组。将预保存的患者骨髓AML细胞分别... 目的研究白血病相关巨噬细胞(LAM)通过let-7b调控急性髓系白血病(AML)的机制。方法治疗前采集AML患者骨髓细胞保存,给予患者“DA 3+7”方案诱导治疗后评价疗效,分为完全缓解(CR)组和未完全缓解(难治)组。将预保存的患者骨髓AML细胞分别回输到NOD/SCID小鼠,由此建立CR组和难治组的AML小鼠模型。经微RNA(miRNA)测序和实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)验证,选择let-7b为靶基因,研究其在AML中的作用。构建let-7b小分子干扰RNA(shRNA)转染MLL-AF9诱导的AML小鼠的LAM细胞,应用RT-qPCR、蛋白质印迹法、酶联免疫吸附试验(ELISA)和体内体外实验进行验证。结果相较AML CR组,AML难治组中LAM细胞凋亡率较低。干扰MLL-AF9诱导的AML小鼠骨髓LAM中let-7b,可促进LAM向M1亚型特征分化并激活核因子(NF)-κB通路,白血病细胞的增殖受抑,向脾的浸润下降,抑制AML进展。结论干扰LAM中的let-7b后可活化Toll样受体(TLR)和NF-κB通路,促使LAM向M1型巨噬细胞复极,从而抑制AML的发展。 展开更多
关键词 白血病 髓样 急性 肿瘤相关巨噬细胞 NF-κB Toll样受体 let-7b 白血病相关巨噬细胞
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let-7 miRNA基因标志物在甲状腺癌中的表达分析 被引量：1
2
作者 冯琨 《中国现代药物应用》 2017年第19期41-42,共2页
目的探讨let-7 miRNA基因标志物在甲状腺癌组织中的表达及诊断意义。方法选取临床确诊的26例甲状腺癌患者,提取患者的甲状腺癌组织和甲状腺癌旁组织,并采用Real-time PCR检测技术检测患者的甲状腺癌组织和甲状腺癌旁组织中let-7 miRNA... 目的探讨let-7 miRNA基因标志物在甲状腺癌组织中的表达及诊断意义。方法选取临床确诊的26例甲状腺癌患者,提取患者的甲状腺癌组织和甲状腺癌旁组织,并采用Real-time PCR检测技术检测患者的甲状腺癌组织和甲状腺癌旁组织中let-7 miRNA基因标志物的含量,并进行比较。结果应用Real-time PCR检测技术发现,甲状腺癌组织中的平均let-7 miRNA表达为(0.71±0.19),显著低于甲状腺癌旁组织的(1.35±0.32),比较差异具有统计学意义(t=8.769,P<0.05)。结论 let-7 miRNA在甲状腺癌发生中具有重要意义,可成为甲状腺癌新的基因诊断标记物以及基因治疗靶点。 展开更多
关键词 let-7mirna 基因标志物 甲状腺癌
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糖尿病合并冠心病患者外泌体来源miRNA hsa-let-7b-5p与冠状动脉粥样硬化程度相关性
3
作者 王亦男 晋群 +2 位作者 宋颖 韩淑芳 胡毓洪 《中国循证心血管医学杂志》 2025年第11期1339-1343,共5页
目的探讨糖尿病(DM)合并冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD,冠心病)患者外泌体来源miRNA hsa-let-7b-5p与冠状动脉粥样硬化程度的相关性。方法纳入解放军联勤保障部队第九六〇医院心内科确诊的CHD患者316例及冠状动脉造影正常的对照组59例,... 目的探讨糖尿病(DM)合并冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD,冠心病)患者外泌体来源miRNA hsa-let-7b-5p与冠状动脉粥样硬化程度的相关性。方法纳入解放军联勤保障部队第九六〇医院心内科确诊的CHD患者316例及冠状动脉造影正常的对照组59例,CHD患者根据血糖水平分为DM+CHD组(163例)和CHD组(153例);DM+CHD患者并根据SYNTAX评分分为轻度狭窄组(SYNTAX评分<22分,86例),中重度狭窄组(SYNTAX评分≥22分,77例)。收集所有研究对象的临床资料并测定其外泌体来源miRNA hsa-let-7b-5p水平,分析miRNA hsa-let-7b-5p与冠状动脉粥样硬化程度的相关性。应用logistic回归分析DM+CHD患者冠状动脉粥样硬化的影响因素,ROC曲线分析miRNA hsalet-7b-5p对DM+CHD患者冠状动脉粥样硬化严重程度的预测价值。结果DM+CHD组高血压、糖化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯(TG)较CHD组、对照组明显升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)较CHD组、对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。DM+CHD组、CHD组外泌体hsa-let-7b-5p高于对照组,且DM+CHD组外泌体hsa-let-7b-5p高于CHD组,差异有统计学意义(P<0.05)。中重度狭窄组外泌体hsa-let-7b-5p水平高于轻度狭窄组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析发现,DM+CHD组患者外泌体hsa-let-7b-5p表达水平分别与SYNTAX评分呈正相关(r=0.158)。logistic回归分析显示高血压病(OR=8.684)、HbAlc(OR=1.698)、TG水平(OR=1.715)、HDL-C(OR=0.050)、外泌体hsa-let-7b-5p水平(OR=2.2925)是冠状动脉中重度狭窄(SYNTAX评分≥22分)的危险因素(P<0.05)。外泌体miRNA hsa-let-7b-5p水平联合传统因素预测模型对DM+CHD患者冠状动脉粥样硬化严重程度的预测价值优于传统因素,差异有统计学意义(P=0.049)。结论DM合并CHD患者外泌体来源miRNA hsa-let-7b-5p的水平升高,与冠状动脉粥样硬化严重程度具有一定相关性,联合传统的危险因素评估,对冠状动脉病变的严重程度具有更好的预测价值。 展开更多
关键词 外泌体 let-7b-5p 糖尿病 冠状动脉粥样硬化性心脏病
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黄芪总黄酮对特发性肺纤维化miRNA-21、let-7 d及TGF-β/smad信号干预作用 被引量：38
4
作者 徐昌君 王鹏飞 +7 位作者 黄雅薇 朱星 陈云志 欧江琴 丁倩 杨长福 赵宗江 张莉莉 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第6期1308-1311,I0006,I0007,共6页
目的：研究黄芪总黄酮对BLM诱导的肺纤维化模型miRNA-21、let-7 d表达水平和TGF-β1/smad信号干预作用。方法：C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪总黄酮组。模型组及药物处理组小鼠气管内一次性滴注博莱霉素（10 mg/kg）,假手... 目的：研究黄芪总黄酮对BLM诱导的肺纤维化模型miRNA-21、let-7 d表达水平和TGF-β1/smad信号干预作用。方法：C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪总黄酮组。模型组及药物处理组小鼠气管内一次性滴注博莱霉素（10 mg/kg）,假手术组予等量生理盐水,造模后治疗组予黄芪总黄酮（43 mg/kg）灌胃,假手术组和模型组与等量生理盐水灌胃。第28天取材,进行HE、Masson染色分析肺组织形态及胶原蛋白表达水平,羟脯氨酸含量测定胶原蛋白含量,realtime-PCR分析miRNA-21、let-7 d表达变化,Western-Bloting检测TGF-β/smad信号及EMT相关蛋白表达。结果：BLM诱导肺纤维化miRNA-21明显上调,而let-7 d下调,在此过程中信号蛋白smad7表达增强mad3磷酸化水平减弱,EMT标记蛋白α-SMA表达增高而E-cadherin减少,黄芪总黄酮对上述改变具有逆转作用,但对let-7 d表达无影响。结论：黄芪总黄酮可通过抑制miRNA-21,增加smad7表达,使TGF-β1/smad激活能力下降,抑制肺纤维化EMT作用。 展开更多
关键词 特发性肺纤维化 mirna-21 let-7 d TGF-Β1/SMAD 黄芪总黄酮
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MiRNA let-7a对人喉鳞癌细胞增殖的抑制作用 被引量：4
5
作者 马丽娟 周恩 +2 位作者 邹联洪 尹娟 肖旭平 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2020年第3期159-163,共5页
目的探讨miRNA let-7a调控高迁移率族蛋白2(HMGA2)对人喉鳞癌细胞株TU212增殖的影响。方法合成let-7a模拟体(let-7a mimics)并采用阳离子脂质体法瞬时转染入喉癌TU212细胞,裸鼠皮下注射TU212细胞,构建裸鼠移植瘤模型。RT-qPCR和Western ... 目的探讨miRNA let-7a调控高迁移率族蛋白2(HMGA2)对人喉鳞癌细胞株TU212增殖的影响。方法合成let-7a模拟体(let-7a mimics)并采用阳离子脂质体法瞬时转染入喉癌TU212细胞,裸鼠皮下注射TU212细胞,构建裸鼠移植瘤模型。RT-qPCR和Western blot法分别检测转染后TU212细胞及移植瘤内let-7a和HMGA2的表达。结果在过表达let-7a的喉癌TU212细胞中,HMGA2的转录和翻译水平下调,细胞增殖能力降低。体外成瘤实验证实,与let-7a NC组和空白对照组相比,转染let-7a mimics的喉癌细胞TU212成瘤组织的质量和体积均显著下降;let-7a过表达的TU212成瘤组织中HMGA2的mRNA和蛋白水平均明显下调。结论let-7a能显著抑制HMGA2的mRNA和蛋白表达,进而显著抑制喉癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 喉肿瘤 TU212细胞 裸鼠移植瘤 mirna let-7a HMGA2
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miRNA let-7b修饰的骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后脊髓NF-200、GFAP表达的影响 被引量：9
6
作者 徐玉生 崔浩 +4 位作者 张松 王培松 朱海洋 钟斌 苗金红 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2015年第3期400-403,共4页
目的:通过观察miRNA let-7b修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脊髓损伤大鼠的运动功能恢复的作用,探讨miRNA let-7b在损伤脊髓修复中的作用和机制。方法:60只成年SD大鼠分为对照组、BMSCs组、miRNA组,每组20只。采用改良Allen's... 目的:通过观察miRNA let-7b修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脊髓损伤大鼠的运动功能恢复的作用,探讨miRNA let-7b在损伤脊髓修复中的作用和机制。方法:60只成年SD大鼠分为对照组、BMSCs组、miRNA组,每组20只。采用改良Allen's法制备脊髓损伤模型。造模后1周,BMSCs组行BMSCs移植,miRNA组移植miRNA let-7b慢病毒载体感染的BMSCs,对照组注射生理盐水。移植后第3天至8周,按BBB标准量表对大鼠后肢运动功能进行评分,用免疫组化方法检测脊髓中神经丝蛋白-200(NF-200)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果:实验时间内,各组大鼠BBB评分和脊髓NF-200表达持续升高;不同时间点BBB评分和脊髓NF-200表达以miRNA组最高,BMSCs组次之,对照组最低(P<0.05)。移植后各组脊髓GFAP表达均呈持续性增高,各时间点GFAP阳性表达面积以对照组最大,BMSCs次之,miRNA组最小(P<0.05)。结论:miRNA let-7b可能通过促进BMSCs分化为神经元样细胞、抑制脊髓损伤后反应性胶质细胞的增生及胶质瘢痕形成等机制促进损伤后的神经功能恢复。 展开更多
关键词 mirna let-7b 骨髓间充质干细胞 脊髓损伤 细胞移植 大鼠
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miRNA Let-7与乳腺癌预后的相关性分析 被引量：6
7
作者 耿淼 潘静坤 +2 位作者 罗芸 田磊 王建华 《局解手术学杂志》 2019年第1期1-5,共5页
目的探讨Let-7家族各成员与乳腺癌患者预后相关性,寻找更有效的乳腺癌防治分子靶标。方法利用KaplanMeier plotter在线数据库分析Let-7家族各成员(Let-7a、7b、7c、7d、7e、7f、7g、7i、miR-98、miR-202)表达与乳腺癌患者总生存期(OS)... 目的探讨Let-7家族各成员与乳腺癌患者预后相关性,寻找更有效的乳腺癌防治分子靶标。方法利用KaplanMeier plotter在线数据库分析Let-7家族各成员(Let-7a、7b、7c、7d、7e、7f、7g、7i、miR-98、miR-202)表达与乳腺癌患者总生存期(OS)及临床病理参数的相关性,并得出相应的危险比(HR)、95%置信区间(CI)和P值。结果 Let-7a、Let-7b、Let-7c、Let-7e、Let-7f、Let-7g、miR-98高表达或miR-202低表达的患者有较好的OS(P<0.05);病理特征分析显示,Let-7a、Let-7b、Let-7f、Let-7g、miR-98、miR-202的表达与疾病临床分期存在相关性(P<0.05)。Let-7a、Let-7b、Let-7c、Let-7e、Let-7f、Let-7g、miR-98和miR-202与淋巴结表达存在相关性(P<0.05);三阴乳腺癌患者OS则与Let-7b、Let-7c、Let-7g、miR-202表达显著相关(P<0.05)。结论 Let-7与乳腺癌患者OS显著相关,各成员在乳腺癌中的预后判断中具有不同的价值,其中Let-7b、Let-7g、miR-202在不同临床参数及三阴乳腺癌中都显示出与预后密切相关,更有望成为乳腺癌防治靶标。 展开更多
关键词 乳腺癌 let-7 预后 靶向治疗 mirna 分子靶标
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miRNA let-7a调控HMGA2表达抑制喉癌细胞增殖并促进其凋亡的作用机制 被引量：4
8
作者 马丽娟 尹娟 +1 位作者 周恩 肖旭平 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第13期1993-1997,共5页
目的:探讨在喉癌细胞株Hep-2中上调miRNA let-7a的表达对高迁移率族蛋白(high mobility group A,HMGA2)的作用机制以及对喉癌细胞增殖的影响。方法:合成miRNA let-7a模拟体(let-7a mimics)并采用阳离子脂质体法转染入Hep-2内;分别用流... 目的:探讨在喉癌细胞株Hep-2中上调miRNA let-7a的表达对高迁移率族蛋白(high mobility group A,HMGA2)的作用机制以及对喉癌细胞增殖的影响。方法:合成miRNA let-7a模拟体(let-7a mimics)并采用阳离子脂质体法转染入Hep-2内;分别用流式细胞术和MTT法检测let-7a高表达对细胞凋亡和增殖的影响;实时荧光PCR(Real-time q PCR)和Western blot检测上调let-7a后对HMGA2表达的影响。结果:本实验将let-7a mimics成功转染入Hep-2内,流式细胞术及MTT法检测显示Hep-2内let-7a的表达上调会抑制喉癌细胞的增殖,促进喉癌细胞的凋亡。RT-q PCR检测显示:let-7a mRNA在空白组和阴性对照组(NC组)的表达水平明显低于实验组(P<0.05);HMGA2 mRNA在空白组、NC组的表达水平明显高于实验组(P<0.01)。Western blot检测细胞中HMGA2蛋白的表达显示:实验组HMGA2蛋白的表达量明显低于空白组和NC组(P<0.01)。上述实验中空白组与NC组之间比较均无统计学差异(P>0.05)。结论:let-7a能够显著下调HMGA2基因和蛋白的表达,抑制喉癌细胞的增殖,促进其凋亡,为喉癌基因靶向治疗提供坚实的理论基础。 展开更多
关键词 喉癌 HEP-2细胞 mirna let-7a HMGA2
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Let-7 miRNA家族与胃癌的研究进展 被引量：2
9
作者 刘斌 王婧 +1 位作者 陈亚琼 蔡辉 《西北国防医学杂志》 CAS 2020年第6期391-396,共6页
胃癌发病率较高,对人们的健康造成了严重威胁。其早期临床症状并不典型且诊断率低,患者出现明显临床症状时多数已发展为进展期或晚期,此时手术效果及预后不理想。早期胃癌的治疗主要以手术根治为主,而进展期胃癌还需要联合化疗等方式进... 胃癌发病率较高,对人们的健康造成了严重威胁。其早期临床症状并不典型且诊断率低,患者出现明显临床症状时多数已发展为进展期或晚期,此时手术效果及预后不理想。早期胃癌的治疗主要以手术根治为主,而进展期胃癌还需要联合化疗等方式进行后续治疗,但由于化疗药物多耐药,导致预后不佳。miRNA广泛参与了细胞的一系列重要生理活动,包括细胞的增殖、凋亡、发育、分化和代谢等,与胃癌及各类肿瘤的发生发展和预后密不可分。Let-7 miRNA家族是第2个被发现的miRNA。研究发现其在胃癌及各类肿瘤中低表达,但其调控机制尚不清楚。因此,明确Let-7 miRNA家族与胃癌的关系对胃癌的诊断治疗及预后有着十分重要的作用。 展开更多
关键词 胃癌 微小RNA let-7 mirna家族
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MiRNA Let-7和Lin28在散发性听神经瘤中的表达及意义 被引量：3
10
作者 黄孝文 许胜 +3 位作者 褚汉启 王少立 崔永华 张平 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期520-524,共5页
目的研究微小RNA Let-7与Lin28在散发性听神经瘤中的表达及二者之间的关系,探讨其对肿瘤进展可能的影响。方法收集18例经过术后病理证实的散发性听神经瘤组织作为实验组,7例正常胃迷走神经为对照组。采用RT-PCR、免疫组织化学染色方法,... 目的研究微小RNA Let-7与Lin28在散发性听神经瘤中的表达及二者之间的关系,探讨其对肿瘤进展可能的影响。方法收集18例经过术后病理证实的散发性听神经瘤组织作为实验组,7例正常胃迷走神经为对照组。采用RT-PCR、免疫组织化学染色方法,检测Let-7d和Lin28A/B mRNA的表达,以及Lin28蛋白的表达。结果 RT-PCR检测显示,Let-7dmRNA表达量在听神经瘤组织显著高于对照神经组织(P<0.001),Lin28A/B mRNA表达量在听神经瘤组织显著低于对照组织(PLin 28A=0.004,PLin28B=0.001)。在听神经瘤组织中,Let-7d与Lin28A/B mRNA的表达存在负相关关系(r=-0.671,P=0.002;r=-0.662,P=0.003)。免疫组织化学检测显示在听神经瘤与正常神经组织中均未发现Lin28蛋白阳性染色。结论在听神经瘤的生长及恶性转化抑制机制中,以微小RNA为主导的Let-7d/Lin28双向负反馈调节可能起重要作用。 展开更多
关键词 听神经瘤 let-7d Lin28A Lin28B
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鸭miRNA let-7-5p的分子生物学特征及功能预测 被引量：5
11
作者 徐铁山 顾丽红 +1 位作者 叶保国 侯水生 《中国家禽》 北大核心 2016年第14期7-12,共6页
let-7通过影响靶基因的表达水平而参与细胞的生长、分化、凋亡等。为了研究let-7-5p在鸭上的序列特征、表达模式及其对鸭骨骼肌发育的可能作用,本文应用本课题组前期mi RNA测序数据,通过生物信息分析技术和分子生物学技术,研究了鸭let-7... let-7通过影响靶基因的表达水平而参与细胞的生长、分化、凋亡等。为了研究let-7-5p在鸭上的序列特征、表达模式及其对鸭骨骼肌发育的可能作用,本文应用本课题组前期mi RNA测序数据,通过生物信息分析技术和分子生物学技术,研究了鸭let-7-5p序列特征、表达模式、其靶基因及靶基因的功能注释。结果如下:1鸭let-7-5p成熟序列是TGAGGTAGTAGGTTGTATAGTT;2鸭let-7-5p在北京鸭孵化第11天(E11)至E27胸肌内的表达量逐渐增加。组织间表达模式显示,在鸭E27心脏内的表达量最高(3.33),在肝脏、皮脂、肌胃、小肠和腹脂的相对表达量较低;3鸭let-7-5p靶基因的GO条目中许多条目与骨骼肌发育密切相关。研究结果能为进一步研究let-7-5p对鸭骨胳肌发育的作用奠定基础。 展开更多
关键词 鸭 let-7-5p 序列特征 靶基因
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人miRNA let-7a2质粒的构建及其表达 被引量：1
12
作者 关恒云 张菊 +5 位作者 张鹏举 陈蔚文 刘闻闻 于春晓 胡晓燕 姜安丽 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第2期1-5,9,共6页
目的构建人miRNA let-7a2真核表达质粒,检测其在肺癌细胞A549中的表达。方法以人肺腺癌A549细胞总RNA为模板,将RT-PCR扩增let-7a2的前体(pre-let7a2)序列,克隆至pSilencer4.1-CMVneo表达载体中,构建pSilencer4.1-let7a2重组质粒,转染A54... 目的构建人miRNA let-7a2真核表达质粒,检测其在肺癌细胞A549中的表达。方法以人肺腺癌A549细胞总RNA为模板,将RT-PCR扩增let-7a2的前体(pre-let7a2)序列,克隆至pSilencer4.1-CMVneo表达载体中,构建pSilencer4.1-let7a2重组质粒,转染A549细胞,采用RT-PCR法检测pre-let7a2的表达;构建let-7a2靶序列-报道基因融合质粒pMIR-Report-let7a2T,与pSilencer4.1-let7a2质粒共转染A549细胞,测定相对荧光素酶活性,以检测成熟let7a2在A549细胞中的表达及作用;采用MTT比色法检测pSilencer4.1-let7a2转染对A549细胞增殖的影响。结果构建的人let-7a2真核表达质粒pSilencer4.1-let7a2和let7a2靶序列-报道基因融合质粒pMIR-Report-let7a2T经酶切及测序鉴定正确;pSilencer4.1-let7a2质粒转染A549细胞后,RT-PCR检测pre-let7a2表达较对照组明显增强;MTT比色法显示let-7a2对A549细胞增殖有抑制作用。pSilencer4.1-let7a2质粒和pMIR-Report-let7a2T质粒共转染A549细胞后,通过报告基因检测相对荧光素酶活性较对照组降低,显示let-7a2表达质粒转染A549细胞后,可有效表达let-7a2并转变为成熟的具有生物学活性的let-7a2。结论成功构建了人let-7a2真核表达质粒,并在肺腺癌细胞A549中有效表达。 展开更多
关键词 肺肿瘤 基因表达调控 mirna let-7a2
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稳定表达猪miRNA let-7c细胞株的建立及其对CSFV的调控作用 被引量：1
13
作者 张旭 张彦明 +2 位作者 张倩 程媛媛 谭晓妮 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第12期1-6,12,共7页
【目的】构建含有let-7c前体基因的重组质粒pGene-pre-let-7c,建立稳定表达猪miRNAlet-7c细胞株,研究let-7c对猪瘟病毒(CSFV)复制的调控作用。【方法】利用RNA22软件筛选出CSFV基因组3′-UTR潜在的let-7c结合位点,PCR扩增出let-7c前体片... 【目的】构建含有let-7c前体基因的重组质粒pGene-pre-let-7c,建立稳定表达猪miRNAlet-7c细胞株,研究let-7c对猪瘟病毒(CSFV)复制的调控作用。【方法】利用RNA22软件筛选出CSFV基因组3′-UTR潜在的let-7c结合位点,PCR扩增出let-7c前体片段,连接到表达载体pGenesil-1.1-dBm2上,构建重组质粒pGene-pre-let-7c,采用脂质体法将重组质粒转染猪脐静脉血管内皮细胞(SUVEC),经G418抗性压力筛选获得阳性细胞株。对获得的阳性细胞株进行接毒试验,检测CSFV的复制情况。用MTT比色法检测阳性细胞的增殖情况。【结果】成功扩增出let-7c前体基因,并构建了pGene-pre-let-7c重组质粒。重组质粒转染SUVEC细胞后筛选获得了稳定表达let-7c的细胞株。let-7c可下调CSFV在细胞中的复制。【结论】let-7c可下调CSFV的RNA复制水平。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪脐静脉血管内皮细胞 mirna let-7c
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子宫内膜癌组织中dMMR蛋白和miRNA Let-7表达水平及临床价值的研究 被引量：1
14
作者 张亚军 刘裴丽 +4 位作者 江月 闫莉 陈云云 蒋欣 孟凡菲 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第3期48-52,108,共6页
目的探讨子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)中微小RNA Let-7(miRNA Let-7)表达水平与DNA错配修复(DNA mismatch repair,dMMR)蛋白表达缺失的关系及意义。方法选取2016年5月~2022年12月在江苏省连云港市妇幼保健院行根治性手术切除... 目的探讨子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)中微小RNA Let-7(miRNA Let-7)表达水平与DNA错配修复(DNA mismatch repair,dMMR)蛋白表达缺失的关系及意义。方法选取2016年5月~2022年12月在江苏省连云港市妇幼保健院行根治性手术切除的子宫内膜癌患者74例,分别用免疫组织化学法检测dMMR蛋白(包括MLH1,PMS2,MSH2,MSH6)的表达、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNA Let-7的相对表达量,按照dMMR蛋白表达情况,将EC患者分为表达完整组(n=43)和表达缺失组(n=31),采用Logistic多因素回归分析与dMMR蛋白缺失相关的危险因素、绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估相关因素的预测价值。结果74例EC病例中,miRNA Let-7的表达水平在肌层浸润<1/2组显著高于肌层浸润≥1/2组,差异具有统计学意义(t=1.79,P=0.04);dMMR蛋白表达的缺失率为41.89%,且年龄<55岁组和miRNA Let-7低表达组(<0.715)患者中的dMMR蛋白缺失率高于≥55岁组和miRNA Let-7高表达组(≥0.715),差异具有统计学意义(χ2=3.92,4.50,均P<0.05);Logistic多因素回归分析结果显示miRNA Let-7表达水平是发生dMMR表达缺失的独立危险因素(P=0.012);Spearman相关分析表明,miRNA Let-7的表达水平与dMMR蛋白缺失呈明显负相关(r=-0.247,P=0.034);ROC曲线分析结果显示,miRNA Let-7表达水平对于预测EC患者中发生dMMR蛋白的缺失具有一定的价值,其AUC为0.737,最佳临界值为0.77,敏感度和特异度分别为0.651,0.806。结论子宫内膜癌患者中miRNA Let-7的表达水平与dMMR蛋白缺失具有相关性,也是发生dMMR蛋白缺失的危险因素,有望为预测dMMR的表达缺失提供帮助。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 林奇综合征 DNA 错配修复蛋白 微小RNA let-7
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Circ_0022382/let-7a-5p/PI3K/AKT/mTOR轴促进乳腺癌细胞增殖和迁移 被引量：1
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作者 刘伟 张俊 +6 位作者 张佳雯 叶雨 诸健琴 虞绮雯 李涛 孙晓春 陈华标 《江苏大学学报(医学版)》 2025年第2期145-153,共9页
目的:研究circ_0022382对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及可能的作用机制。方法:①筛选乳腺癌中高表达的circRNA,首先分别对乳腺癌circRNA相关GEO数据集(GSE165884)和miRNA相关GEO数据集(GSE45498)进行差异分析,然后通过ENCORI数据库预测... 目的:研究circ_0022382对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及可能的作用机制。方法:①筛选乳腺癌中高表达的circRNA,首先分别对乳腺癌circRNA相关GEO数据集(GSE165884)和miRNA相关GEO数据集(GSE45498)进行差异分析,然后通过ENCORI数据库预测差异表达的circRNA所结合的miRNA,最后通过韦恩图对circRNA结合的miRNA和GEO数据库预测的miRNA取交集,得到交集的miRNA及其对应的circRNA。②分别予以收敛引物和发散引物对乳腺癌细胞MDA-MB-231来源的互补DNA(cDNA)和基因组DNA(gDNA)进行PCR,并通过琼脂糖凝胶电泳实验对PCR产物进行分离以验证circ_0022382的环形结构。③实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7及正常乳腺上皮细胞MCF-10A,乳腺癌组织和癌旁组织中circ_0022382表达水平。④在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中分别转染si-NC、si-circ_0022382,采用qRT-PCR检测转染效率,分别采用克隆形成实验和划痕愈合实验检测乳腺癌细胞增殖和迁移;qRT-PCR检测let-7a-5p的表达水平;在si-circ_0022382组中分别转染let-7a-5p inhibitor NC、let-7a-5p inhibitor,克隆形成实验和划痕愈合实验检测乳腺癌细胞增殖和迁移。⑤通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析let-7a-5p的下游信号通路;在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中分别转染let-7a-5p NC、let-7a-5p mimic,蛋白质印迹法和细胞荧光免疫法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达,蛋白质印迹法检测let-7a-5p inhibitor和si-circ_0022382共转染后乳腺癌细胞p-AKT表达。结果:①GSE165884差异分析得到37个高表达的circRNA,GSE45498差异分析得到6个低表达的miRNA,37个高表达的circRNA中,circ_0022382对应的miRNA和6个低表达的miRNA有交集基因let-7。②乳腺癌细胞MDA-MB-231来源的cDNA既可以通过发散引物又可以通过收敛引物来扩增,而gDNA只能通过收敛引物来扩增。③与MCF-10A细胞相比,circ_0022382在乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中均显著高表达(P均<0.001);乳腺癌组织中circ_0022382表达亦明显高于癌旁组织(P<0.05)。④下调circ_0022382表达后,MDA-MB-231和MCF-7细胞的增殖和迁移能力均显著下降(P均<0.001),let-7a-5p的表达水平均显著升高(P<0.01和P<0.05);在si-circ_0022382组中,共转染let-7a-5p inhibitor能够显著挽救MDA-MB-231和MCF-7细胞增殖和迁移能力的下降(P<0.01和P<0.001)。⑤KEGG信号通路富集分析结果显示,PI3K-AKT和mTOR信号通路显著富集;与let-7a-5p NC组相比,let-7a-5p mimic组的p-AKT、p-PI3K和mTOR的蛋白水平显著下降;在si-circ_0022382组中,共转染let-7a-5p inhibitor能够显著挽救MDA-MB-231和MCF-7细胞中p-AKT表达水平的降低。结论:circ_0022382在乳腺癌中高表达,通过靶向let-7a-5p/PI3K/AKT/mTOR轴促进乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,其有可能作为乳腺癌治疗和诊断的潜在靶点。 展开更多
关键词 circ_0022382 let-7a-5p PI3K/AKT/mTOR信号通路 增殖 迁移
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let-7b-5p靶向IGF1R调控脑胶质瘤细胞生长的机制
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作者 刘喜红 杜晓丹 +4 位作者 范孟杨 徐柳清 杨丽萍 侯俊林 赵培源 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第3期359-364,共6页
目的探讨let-7b-5p在脑胶质瘤中的表达及其对U251细胞生长的影响和潜在的作用机制。方法采用qRT-PCR法检测let-7b-5p在脑胶质瘤细胞和组织中的表达量,通过CGGA数据库分析let-7b-5p表达与脑胶质瘤WHO分级和总生存率的关系;通过瞬时转染... 目的探讨let-7b-5p在脑胶质瘤中的表达及其对U251细胞生长的影响和潜在的作用机制。方法采用qRT-PCR法检测let-7b-5p在脑胶质瘤细胞和组织中的表达量,通过CGGA数据库分析let-7b-5p表达与脑胶质瘤WHO分级和总生存率的关系;通过瞬时转染法下调脑胶质瘤细胞U251中let-7b-5p和胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)的表达,采用qRT-PCR、CCK8、克隆形成实验、Western blot、双荧光素酶报告基因等技术检测let-7b-5p在U251细胞生长中的作用及潜在的机制。结果let-7b-5p在脑胶质瘤细胞(A172:3.64±0.64、V251:4.56±0.52、U87-MG:3.31±0.50)和组织中(2.18±0.22)的表达显著高于星形胶质细胞(HMC3:1.00±0.21,P<0.05或P<0.01)和正常脑组织(1.01±0.19,P<0.05),其表达水平与脑胶质瘤患者WHO分级呈负相关(P<0.0001),与原发性和复发性脑胶质瘤患者的生存率呈正相关(P<0.0001,P=0.028);敲减U251细胞中let-7b-5p的表达可促进脑胶质瘤细胞的生长(CCK8:let-7b-5p敲减组126.00±12.09 vs miR-NC组90.93±5.13,P<0.05),激活PI3K/AKT信号通路;在U251细胞中抑制IGF1R表达可以逆转let-7b-5p低表达促进脑胶质瘤细胞生长[CCK8:let-7b-5p敲减组+IGF1R敲减组(92.08±6.14)vs let-7b-5p敲减组+sh-NC组(116.67.08±8.50)]、激活PI3K/AKT信号通路的效应。结论let-7b-5p在脑胶质瘤细胞中起抑癌基因作用,let-7b-5p可能通过靶向IGF1R激活PI3K/AKT信号通路参与脑胶质瘤细胞的进程。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 let-7b-5p IGF1R PI3K/AKT
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miRNA Let-7对神经母细胞瘤细胞的抑制作用及其机制 被引量：2
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作者 宋楠 徐宁 金莉 《中南医学科学杂志》 CAS 2020年第2期175-178,共4页
为研究miRNA Let-7神经母细胞瘤(NB)的抑制作用,本研究采用小RNA干扰技术(siRNA)降低miRNA Let-7的表达,PCR法检测miRNA Let-7表达,Western blotting检测相关凋亡蛋白的表达,采用吸光度值反映细胞的增殖情况,Transwell方法检测细胞转移... 为研究miRNA Let-7神经母细胞瘤(NB)的抑制作用,本研究采用小RNA干扰技术(siRNA)降低miRNA Let-7的表达,PCR法检测miRNA Let-7表达,Western blotting检测相关凋亡蛋白的表达,采用吸光度值反映细胞的增殖情况,Transwell方法检测细胞转移。结果显示,与未转染组和si-NC(携带空质粒的干扰RNA)转染组细胞相比,siRNA-Let-7转染组细胞的数量增多,Cleaved casp-3、Bax mRNA及其蛋白显著增高,而Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著降低。结果表明,miRNA Let-7能够通过抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力和促进细胞的凋亡,进而对神经母细胞瘤有重要抑制作用。 展开更多
关键词 let-7 神经母细胞瘤 增殖 转移
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miRNA let-7对疾病调控机制的研究进展 被引量：5
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作者 王婷婷 王桂香 +1 位作者 张俊绘 刘爱菊 《中国医药导报》 CAS 2018年第34期53-56,共4页
微小RNA(mi RNA)是一种高度保守的单链小分子RNA,具有调控组织细胞的生长发育、分化以及凋亡的作用。let-7 miRNA家族是目前研究最为广泛的mi RNA家族。let-7能够在人体外周血以及体液中稳定存在,其表达以及平衡状态的维持受到调控因子... 微小RNA(mi RNA)是一种高度保守的单链小分子RNA,具有调控组织细胞的生长发育、分化以及凋亡的作用。let-7 miRNA家族是目前研究最为广泛的mi RNA家族。let-7能够在人体外周血以及体液中稳定存在,其表达以及平衡状态的维持受到调控因子的相关作用来实现。这些调控通路的异常将导致let-7家族的表达异常,就从而导致肿瘤,高血压,癫痫,心血管等疾病的发生。因此,监测let-7表达水平可预防、治疗与其相关的疾病。本文主要综述了mi RNA let-7对这些疾病的调控机制的研究进展。 展开更多
关键词 mirna let-7 机制 基因表达 研究进展
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食管癌组织中miRNA let-7e的表达 被引量：1
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作者 许一鸣 肖平 +1 位作者 仲崇俊 沈亮 《江苏医药》 CAS 北大核心 2014年第21期2582-2584,共3页
目的研究食管癌组织中微小RNA(miRNA)let-7e的表达水平。方法以U6小核RNA为内参,应用RQ-PCR法检测40例食管癌组织及癌旁组织中miRNA let-7e的表达水平,分析其表达水平与临床病理参数的关系。结果 miRNA let-7e在食管癌组织的表达水平高... 目的研究食管癌组织中微小RNA(miRNA)let-7e的表达水平。方法以U6小核RNA为内参,应用RQ-PCR法检测40例食管癌组织及癌旁组织中miRNA let-7e的表达水平,分析其表达水平与临床病理参数的关系。结果 miRNA let-7e在食管癌组织的表达水平高于癌旁组织(10.54±5.50)倍(P<0.01);其与患者性别和肿瘤组织学类型、淋巴转移、分化程度及分期无明显相关。结论 miRNA let-7e在食道癌组织中表达升高,可能作为食道癌分子生物学的诊断标记。 展开更多
关键词 食道癌 微小RNA let-7e
原文传递
宫颈鳞癌患者血浆miRNA let-7a-3p表达及其临床意义 被引量：2
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作者 武燕 王福花 《中国药物与临床》 CAS 2019年第5期745-747,共3页
子宫颈鳞癌在妇科恶性肿瘤最常见,病死率也高,每年全球新发病例超45万之多,是严重威胁女性健康的恶性疾病之一,近年研究发现宫颈癌发病逐渐趋于年轻化[1],其也是我国重点防治癌症之一。宫颈癌的发生是一个多因素、多阶段的发展过程,因... 子宫颈鳞癌在妇科恶性肿瘤最常见,病死率也高,每年全球新发病例超45万之多,是严重威胁女性健康的恶性疾病之一,近年研究发现宫颈癌发病逐渐趋于年轻化[1],其也是我国重点防治癌症之一。宫颈癌的发生是一个多因素、多阶段的发展过程,因此尽早诊断,及时采取相应治疗措施,是降低宫颈癌死亡率以及改善患者生活质量的关键。人乳头状瘤病毒(HPV)感染,尤其是高危型HPV的感染是导致宫颈癌发生的主要危险因素。 展开更多
关键词 宫颈癌患者 宫颈鳞癌 mirna let-7a-3p HPV
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