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肿瘤转移抑制基因LASS2去磷酸化对液泡型ATP酶活性及前列腺癌侵袭性的影响
1
作者 刘艳华 陆敏 +6 位作者 赵旭阳 张宽根 武睿 梅放 戴志豪 由江峰 裴斐 《北京大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第6期1113-1123,共11页
目的:探讨人源酵母LAG1长寿同源物2(homo sapiens longevity assurance homolog 2 of yeast LAG1,LASS2)去磷酸化对前列腺癌细胞生物学功能的影响及其分子机制。方法:对90例前列腺癌患者的石蜡组织芯片标本进行LASS2免疫组织化学染色,... 目的:探讨人源酵母LAG1长寿同源物2(homo sapiens longevity assurance homolog 2 of yeast LAG1,LASS2)去磷酸化对前列腺癌细胞生物学功能的影响及其分子机制。方法:对90例前列腺癌患者的石蜡组织芯片标本进行LASS2免疫组织化学染色,并构建FLAG标签的LASS2全长pcDNA3真核表达载体,转染至HEK 293T细胞后行免疫共沉淀和蛋白质谱检测,分析LASS2的磷酸化位点。根据LASS2磷酸化位点结果构建LASS2 C末端5个去磷酸化突变体的pcDNA3真核表达载体,并稳定转染到高转移潜能前列腺癌PC-3M-1E8细胞系中,通过生长曲线、MTT掺入实验、平板克隆形成实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验和流式细胞术检测LASS2及其去磷酸化突变体对前列腺癌细胞生物学功能的影响。检测LASS2及其突变体对液泡型ATP酶V0复合体中c亚基(ATP6V0C)表达量及两者相互结合的影响,以及其对液泡型ATP酶活性、细胞外H+浓度和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)活性的影响,并探索蛋白磷酸酶抑制剂calyculin A对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:免疫组织化学染色显示前列腺癌组织中LASS2的表达与Gleason分级呈负相关;质谱分析发现LASS2的C末端存在3个磷酸化位点(Ser-341、Ser-348和Ser-349);与野生型LASS2相比,LASS2 S348位点的去磷酸化突变体(LASS2-S348A)能显著增强前列腺癌细胞的增殖能力、锚着不依赖生长能力、细胞迁移能力(细胞迁移率从49.11%±5.62%增加到74.28%±8.77%,P<0.001)和侵袭能力(穿膜细胞数从129.67±13.65增加到206.67±13.50,P<0.001),并显著降低S期比例(从44.17%降低到37.90%,P<0.05)和细胞凋亡率(从48.540%±0.269%降低到29.700%±0.778%,P<0.05)。LASS2-S348A去磷酸化突变体虽然不影响ATP6V0C的蛋白表达量,但会明显抑制LASS2与ATP6V0C的结合能力,并进而显著增强液泡型ATP酶活性和细胞外H+浓度,最终促进MMP-2的活性;而蛋白磷酸酶抑制剂calyculin A能够显著抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。结论:LASS2蛋白C末端S348位点的磷酸化对于LASS2的肿瘤抑制功能至关重要,其分子机制可能是LASS2 S348位点的磷酸化通过增强其与ATP6V0C的结合而抑制液泡型ATP酶活性,进而降低细胞外H+浓度和抑制MMP-2的活性,并最终抑制前列腺癌细胞的侵袭;蛋白磷酸酶抑制剂calyculin A有望成为侵袭性前列腺癌潜在的治疗药物。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 肿瘤浸润 基因表达调控 肿瘤 空泡质子转运ATP酶 lass2基因
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LASS2基因抑制HCCLM3肝癌细胞的转移 被引量：20
2
作者 谭宁 覃文新 +3 位作者 万晓桢 余艳军 王植柔 顾健人 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期335-340,共6页
目的:探讨LASS2基因对HCCLM3肝癌细胞转移的影响。方法:Northern blot分析高转移潜能肝癌细胞系HCCLM3和低转移潜能肝癌细胞系MHCC97-L中LASS2基因的mRNA水平。构建包含LASS2基因编码框的真核表达载体pCMV-HA2-LASS2,通过脂质体转染HCC... 目的:探讨LASS2基因对HCCLM3肝癌细胞转移的影响。方法:Northern blot分析高转移潜能肝癌细胞系HCCLM3和低转移潜能肝癌细胞系MHCC97-L中LASS2基因的mRNA水平。构建包含LASS2基因编码框的真核表达载体pCMV-HA2-LASS2,通过脂质体转染HCCLM3细胞,经G418筛选,建立稳定表达LASS2基因的HCCLM3细胞株。通过分析LASS2在HCCLM3中过表达后,HCCLM3细胞在迁移、侵袭等转移能力上的改变,Western blot、明胶酶谱及原位酶谱分析MMP-2合成、分泌、激活的变化。结果:Northern blot显示,HCCLM3细胞中LASS2基因的表达水平低于MHCC97-L细胞。当LASS2基因过表达后,HCCLM3细胞的迁移及侵袭能力受到显著抑制(P<0.001),虽然细胞内MMP-2的合成未改变,但细胞MMP-2的分泌及MMP-2的激活均受抑制。结论:LASS2基因可下调MMP-2的分泌及激活,可使肝癌细胞HCCLM3的转移能力受到明显抑制,提示LASS2基因对肝癌细胞HCCLM3的转移具有抑制作用。 展开更多
关键词 基因 lass2 癌 肝细胞 转移
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靶向LASS2基因的小干扰RNA对人肝癌细胞侵袭能力的影响 被引量：17
3
作者 唐宁 游海燕 +2 位作者 金洁 于彬 覃文新 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期399-403,共5页
目的:研究靶向人源性长寿保障基因2(homosapiens longevity assurance homologue2,LASS2)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人肝癌细胞MHCC97-L体外侵袭能力的影响。方法:通过脂质体转染将靶向LASS2的siRNA转染MHCC97-L细胞,... 目的:研究靶向人源性长寿保障基因2(homosapiens longevity assurance homologue2,LASS2)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人肝癌细胞MHCC97-L体外侵袭能力的影响。方法:通过脂质体转染将靶向LASS2的siRNA转染MHCC97-L细胞,运用实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)检测转染后LASS2mRNA的表达,筛选有效的siRNA片段;运用BCECF氢离子敏感荧光探针检测MHCC97-L细胞跨膜运输氢离子的功能;采用Western印迹法分析MHCC97-L细胞及上清液中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)的表达情况;应用明胶酶谱法检测MHCC97-L细胞上清液中MMP-2的活性;Transwell法检测细胞体外侵袭能力。结果:筛选得到靶向LASS2的有效siRNA-1片段。MHCC97-L细胞转染LASS2siRNA-1后,其跨膜运输氢离子的能力增强,与空白对照组比差异有统计学意义(P<0.05);MMP-2蛋白的表达及分泌无明显变化,但分泌的MMP-2活性形式增加,与空白对照组和无关序列组比明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);且细胞的体外侵袭能力明显高于无关序列组和空白对照组(P<0.05)。结论:靶向LASS2的siRNA能有效下调其表达,并能提高MHCC97-L细胞在转染LASS2siRNA后的体外侵袭能力。 展开更多
关键词 肝肿瘤 RNA 小分子干扰 肿瘤浸润 基因 lass2
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肿瘤抑制基因LASS2在裸鼠膀胱癌模型中的表达及其与肿瘤增殖和凋亡的关系 被引量：7
4
作者 栾婷 王海峰 +4 位作者 丁明霞 刘靖宇 王伟 李宁 王剑松 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第11期1172-1178,共7页
目的膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,关于膀胱癌的发病机制仍未得到全面而深入的研究。LASS2是我国新近发现的肿瘤抑制基因,文中通过检测LASS2在裸鼠膀胱癌模型中的表达,探讨LASS2与肿瘤增殖和凋亡的关系及可能的分子机制。方法... 目的膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,关于膀胱癌的发病机制仍未得到全面而深入的研究。LASS2是我国新近发现的肿瘤抑制基因,文中通过检测LASS2在裸鼠膀胱癌模型中的表达,探讨LASS2与肿瘤增殖和凋亡的关系及可能的分子机制。方法采用抽签方法将30只裸鼠随机分为皮下种植组、原代灌注组及空白对照组(DMEM膀胱癌细胞培养基),每组10只。皮下膀胱癌种植模型将已制备的细胞悬液按每只0.5 mL(即5×10~6/0.1 mL个细胞)注射入裸鼠左腋皮下。原位膀胱癌种植模型在裸鼠排空膀胱后将100μL EJ(即1×10~7个细胞)单细胞悬液灌注入膀胱,观察裸鼠致瘤情况。检测不同部位成瘤组织中LASS2、Ki-67的表达及增殖、凋亡等指标变化。结果皮下种植组皮下肿瘤形成,成瘤率为100%。原位灌注组、皮下种植组及空白对照组裸鼠肉眼及病理切片均未检测到肝、肺、肾等器官及淋巴结转移。与空白对照组LASS2表达(81.0%)比较,原位灌注组、皮下种植组LASS2表达(60.0%、14.0%)显著减少(P<0.05);与空白对照组Ki-67表达(16.0%)比较,原位灌注组、皮下种植组Ki-67表达(50.0%、78.0%)增加(P<0.05);与原位灌注组比较,皮下种植组LASS2表达(14.0%)明显减少(P<0.05),Ki-67表达(78.0%)增加(P<0.05)。与空白对照组比较,皮下种植组、原位灌注组Bcl-2表达明显升高(P<0.05);与皮下种植组比较,原位灌注组Bcl-2表达升高(P<0.05);而Bcl-xl在原位种植瘤组织中的表达高于其他两组(P<0.05);Bax和Bim均呈现低表达,Bax在各组中的表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组比较,皮下种植组Bim表达明显降低(P<0.05),而原位种植瘤组差异无统计学意义(P>0.05)。caspase3在各组组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05);而ki-67在皮下种植瘤组织中的表达较其他两种肿瘤组织中的表达显著升高(P<0.05);LASS2在空白对照组中的表达较其他两组表达显著升高(P<0.05)。结论 LASS2具有抑制肿瘤增殖的作用,其表达可能与膀胱癌EJ细胞体内成瘤能力、增殖和凋亡有关。 展开更多
关键词 lass2 膀胱癌 体内 致瘤能力 机制
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LASS1基因克隆及其在大鼠脑皮层的表达与神经元衰老的相关性初步研究(英文) 被引量：6
5
作者 王宝恒 傅玉才 +4 位作者 史桂芝 许铭炎 耿义群 徐小虎 许锦阶 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第8期760-768,共9页
长寿保障基因 LAG1 是从酵母中克隆的与酵母寿命相关的基因,随酵母生命衰老而表达发生变化. 对大鼠中同源基因LASS1 进行克隆、测序和序列分析,发现其 mRNA 序列不同于 GenBank 中的预测序列,开放阅读框包含 1 053 碱基对,编码蛋白由 3... 长寿保障基因 LAG1 是从酵母中克隆的与酵母寿命相关的基因,随酵母生命衰老而表达发生变化. 对大鼠中同源基因LASS1 进行克隆、测序和序列分析,发现其 mRNA 序列不同于 GenBank 中的预测序列,开放阅读框包含 1 053 碱基对,编码蛋白由 350 个氨基酸组成,内含 Lag1 蛋白家族保守的 Lag1p motif 和 TLC 结构域. 从新生、1 月龄、6 月龄、12 月龄和 24月龄大鼠脑顶叶皮质提取总 RNA,用半定量 RT-PCR 及 RNA 印迹方法对 LASS1 在大鼠脑皮质中的表达随年龄变化情况进行分析. 结果表明,出生后 LASS1 表达量随年龄增加而增高,至 6 月龄达高峰,然后随年龄增加而逐渐下降,至 24 月老龄鼠达最低. 衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)对鼠脑皮层染色发现,神经元阳性染色随年龄增长明显增加. 大鼠 LASS1 基因表达在正常衰老过程中发生变化,为进一步研究该基因的作用奠定了基础. 展开更多
关键词 lass1基因克隆 大鼠 基因表达 神经元衰老
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重组腺病毒载体介导人LASS2基因在肝癌细胞转移中的抑制作用 被引量：6
6
作者 游海燕 金洁 +4 位作者 唐宁 邵根宝 彭琬昕 龚爱华 覃文新 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期244-250,共7页
目的:探讨人源性长寿保障基因(homo-sapiens longevity assurance homologue 2 of yeast LAG1,LASS2)对人肝癌HCCLM3细胞体外转移的影响及可能的作用机制。方法:构建含人LASS2基因的重组腺病毒并转染入HCCLM3细胞;采用蛋白质印迹法检测H... 目的:探讨人源性长寿保障基因(homo-sapiens longevity assurance homologue 2 of yeast LAG1,LASS2)对人肝癌HCCLM3细胞体外转移的影响及可能的作用机制。方法:构建含人LASS2基因的重组腺病毒并转染入HCCLM3细胞;采用蛋白质印迹法检测HCCLM3细胞中LASS2蛋白的表达水平;划痕实验及体外侵袭实验检测LASS2基因过表达对HCCLM3细胞在迁移和侵袭等转移能力上的改变;免疫共沉淀法验证LASS2蛋白与V-ATPase(vacuolarH+-ATPase)质子泵中的c亚基(ATP6L)在细胞内相互结合的情况;通过对细胞内外H+浓度的测定,探讨LASS2过表达对V-ATPase功能抑制的情况。结果:成功构建了含人LASS2基因的重组腺病毒,LASS2基因在HCCLM3细胞中能有效表达;LASS2过表达可使HCCLM3细胞的侵袭和迁移能力均明显下降(P<0.01),其中侵袭能力下降达(48.3±7.6)%,穿过划痕的细胞个数从对照组的(59.00±6.87)个下降至(10.83±3.75)个;LASS2蛋白与ATP6L蛋白在HCCLM3细胞内特异性结合;LASS2过表达后,细胞内外H+浓度发生明显变化,表明V-ATPase质子泵功能受到抑制。结论:LASS2基因在HCCLM3细胞中过表达可抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与LASS2蛋白结合ATP6L,抑制其分泌H+功能相关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 实验性 肿瘤转移 腺病毒 人 lass2基因
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LASS2/TMSG-1基因过表达对人肺癌95D细胞体外侵袭迁移能力的影响及其机制 被引量：5
7
作者 徐晓艳 伊日贵 +2 位作者 李秀霞 于慧玲 李时荣 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期901-907,共7页
目的分析LASS2/TMSG-1基因过表达对人肺癌95D细胞体外侵袭迁移能力的影响,初步探讨LASS2/TMSG-1基因的作用机制。方法运用脂质体转染法将前期已构建好并冷冻保存的Pc DNA3-TMSG-1质粒通过脂质体转染法瞬时转染入95D细胞(高转移潜能,LASS... 目的分析LASS2/TMSG-1基因过表达对人肺癌95D细胞体外侵袭迁移能力的影响,初步探讨LASS2/TMSG-1基因的作用机制。方法运用脂质体转染法将前期已构建好并冷冻保存的Pc DNA3-TMSG-1质粒通过脂质体转染法瞬时转染入95D细胞(高转移潜能,LASS2/TMSG-1低表达),使外源性LASS2/TMSG-1基因在细胞内过表达即LASS2/TMSG-1过表达组,同时设立转染空白质粒的空白对照组和未转染质粒的阴性对照组。应用体外侵袭及迁移实验检测人肺癌95D细胞侵袭及迁移能力的变化;应用qRT-PCR和Western blot法检测LASS2/TMSG-1 mRNA及蛋白的表达;应用Western blot法检测ATP6L、MMP-2及MMP-9在细胞中的表达水平;应用明胶酶谱法检测肿瘤细胞中MMP-2及MMP-9的活性;使用比色法检测细胞中V-ATPase的活性;使用BCECF H+敏感探针检测细胞外H+浓度的变化。结果 LASS2/TMSG-1过表达组细胞的LASS2/TMSG-1表达水平明显升高,而ATP6L表达水平下降,其V-ATPase活性及细胞外H+浓度降低,与空白对照组和阴性对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05);MMP-2、MMP-9的表达及活性均降低,与其他两组相比差异有统计学意义(P<0.05);并且LASS2/TMSG-1过表达组细胞的体外侵袭及迁移能力明显低于其他两组(P<0.05)。结论 LASS2/TMSG-1可能通过结合ATP6L亚基抑制V-ATPase活性,改变细胞外H+浓度,影响MMP-2、MMP-9的表达及活性,进而改变肿瘤细胞的体外侵袭迁移能力等生物学行为。 展开更多
关键词 肺肿瘤 lass2/TMSG-1 V-ATPASE 基质金属蛋白酶 侵袭迁移
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LASS2-3'-非翻译区rs8444单核苷酸多态性与膀胱癌易感性的相关性研究 被引量：4
8
作者 陈玉锦 王海峰 +5 位作者 颜汝平 柯昌兴 丁明霞 栾婷 邹仁超 王剑松 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期107-111,共5页
目的:探讨人源性长寿保障基因2(Homo sapiens longevity assurance homologue 2,LASS2)-3'-非翻译区(UTR)单核苷酸多态性与中国云南地区膀胱癌人群之间的相关性。方法:选择2011年1月至2015年1月在昆明医科大学第二附属医院就诊且经... 目的:探讨人源性长寿保障基因2(Homo sapiens longevity assurance homologue 2,LASS2)-3'-非翻译区(UTR)单核苷酸多态性与中国云南地区膀胱癌人群之间的相关性。方法:选择2011年1月至2015年1月在昆明医科大学第二附属医院就诊且经病理学确诊的105例膀胱癌作为膀胱癌组、100例非膀胱癌作为对照组进行病例对照研究,对两组患者的膀胱组织进行基因扩增和测序,分析研究LASS2-3'-非翻译区单核苷酸多态性与膀胱癌之间的相关性。结果:在LASS2-3'-非翻译区仅发现1个单核苷酸多态性位点rs8444,经χ2检验和Logistic回归分析显示,膀胱癌组和对照组rs8444T/C等位基因频率及基因型分布差异具有统计学意义(χ2=10.267,P=0.006;χ2=10.634,P=0.001)。与携带T等位基因或TT基因型相比,携带C等位基因或CC基因型的个体发生膀胱癌的风险显著降低(OR=0.489,95%CI为0.309~0.772,P=0.002;OR=0.258,95%CI为0.081~0.827,P=0.023),但与膀胱癌的TNM分期、病理分级和有否转移无明显相关性(P>0.05)。结论:LASS2-3'-非翻译区rs8444C等位基因和CC基因型可降低膀胱癌的发病风险,但与膀胱癌的TNM分期、病理分级和转移情况无关。 展开更多
关键词 lass2 膀胱癌 多态性 单核苷酸
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膜蛋白LASS2的表达研究 被引量：1
9
作者 蔡兴锋 陶震 +2 位作者 曹郁 杨胜利 龚毅 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期69-73,共5页
利用多种原核表达系统、真核体外翻译系统和细菌 杆状病毒 (BactoBac)的昆虫表达系统对一个具有重要生理功能的人的膜蛋白LASS2 (Homosapienslongevityassurancehomologue 2ofyeastLAG1)进行表达研究。在原核表达系统中仅能够表达其羧... 利用多种原核表达系统、真核体外翻译系统和细菌 杆状病毒 (BactoBac)的昆虫表达系统对一个具有重要生理功能的人的膜蛋白LASS2 (Homosapienslongevityassurancehomologue 2ofyeastLAG1)进行表达研究。在原核表达系统中仅能够表达其羧基端胞外区片段却不能表达完整的LASS2蛋白 ,并制备了该片段的抗体。完整的LASS2蛋白能够在两种真核表达系统中进行表达 ,SDS PAGE分析结果表明 ,表达产物分子量为约 2 8kD的LASS蛋白 ,Western印迹分析也证实了这一结果 ,并利用Ni NTA树脂亲和层析将该蛋白纯化 ,纯度达到 90 %以上。 展开更多
关键词 膜蛋白 lass2 表达研究 昆虫表达系统 真核体外翻译系统 亲和层析
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LASS2基因对恶性肿瘤转移抑制作用的研究进展 被引量：3
10
作者 何俊 王海峰 王剑松 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第36期100-102,共3页
人源性长寿保障基因2(LASS2基因)又称为肿瘤转移抑制基因1,是一种新型的人类肿瘤转移抑制基因。LASS2基因对前列腺癌、膀胱癌、肝癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌、肺癌、脑膜瘤等多种肿瘤的侵袭和转移均有抑制作用。本文就LASS2基因对肿瘤转... 人源性长寿保障基因2(LASS2基因)又称为肿瘤转移抑制基因1,是一种新型的人类肿瘤转移抑制基因。LASS2基因对前列腺癌、膀胱癌、肝癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌、肺癌、脑膜瘤等多种肿瘤的侵袭和转移均有抑制作用。本文就LASS2基因对肿瘤转移抑制作用的相关研究进展作一综述。 展开更多
关键词 恶性肿瘤 lass2基因 预后
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LASS2/TMSG-1基因沉默对人前列腺癌细胞生物学功能的影响及其机制 被引量：10
11
作者 徐晓艳 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期153-158,共6页
目的探讨LASS2/TMSG-1基因沉默对PC-3M-2B4细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法将实验分为3组:空白对照组(仅转染PBS的PC-3M-2B4细胞)、无关阴性对照siRNA组及LASS2/TMSG-1 siRNA转染组。首先针对LASS2/TMSG-1基因,设计并合成... 目的探讨LASS2/TMSG-1基因沉默对PC-3M-2B4细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法将实验分为3组:空白对照组(仅转染PBS的PC-3M-2B4细胞)、无关阴性对照siRNA组及LASS2/TMSG-1 siRNA转染组。首先针对LASS2/TMSG-1基因,设计并合成siRNA;在脂质体介导下瞬时转染人前列腺癌PC-3M-2B4细胞24 h后分别采用Western blot和RT-PCR技术检测细胞内LASS2/TMSG-1蛋白及ATP6L mRNA表达水平;使用BCECF AM H+敏感荧光探针检测转染24、36、48、96 h后3组细胞的细胞内H+浓度;用MTT法检测细胞增殖;划痕修复实验和Transwell体外侵袭实验分别检测PC-3M-2B4细胞的迁移和侵袭能力。结果转染LASS2/TMSG-1 siRNA 24 h后,LASS2/TMSG-1 siRNA组LASS2/TMSG-1蛋白表达与对照组相比下降65%,ATP6L mRNA表达水平与对照组比较提高75%。通过BCECF AM荧光探针检测LASS2/TMSG-1 siRNA转染组细胞内H+浓度明显下降,且与空白对照组及无关阴性对照siRNA组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。MTT法检测显示,PC-3M-2B4细胞在转染24、48 h后,3组细胞生长速度无明显差异(P>0.05);转染72 h后LASS2/TMSG-1 siRNA转染组细胞生长速度明显升高,与空白对照组、无关阴性对照siRNA组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。划痕修复试验和Transwell体外侵袭实验显示,转染LASS2/TMSG-1 siRNA 24 h后,与空白对照组及无关阴性对照siRNA组相比,能显著促进细胞迁移和侵袭能力(P<0.05)。结论体外合成的siRNA能有效沉默LASS2/TMSG-1基因表达,同时上调V-ATPase质子泵中关键性亚基—ATP6L mRNA的表达水平,且基因沉默后其细胞内H+浓度下降,提示LASS2/TMSG-1基因可能与ATP6L相互作用、共同参与对细胞内pH值的影响,导致肿瘤细胞内外微环境的改变并影响肿瘤细胞的生物学行为,如增殖、迁移及侵袭能力。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 PC-3M-2B4 lass2 TMSG-1 SIRNA
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高尿酸血症合并肾结石中医体质特点和基于LASSO回归的危险因素分析 被引量：4
12
作者 曹凤娇 白雪娇 侯秀娟 《中医药导报》 2023年第6期106-110,共5页
目的:探讨高尿酸血症(HUA)合并肾结石患者的中医体质分布特点,并基于LASSO回归对HUA合并肾结石进行危险因素分析。方法:分析1266例HUA患者的体检资料,根据肾结石诊断分为HUA合并肾结石组(276例)和HUA未合并肾结石组(990例)。收集体检者... 目的:探讨高尿酸血症(HUA)合并肾结石患者的中医体质分布特点,并基于LASSO回归对HUA合并肾结石进行危险因素分析。方法:分析1266例HUA患者的体检资料,根据肾结石诊断分为HUA合并肾结石组(276例)和HUA未合并肾结石组(990例)。收集体检者年龄、性别、体质量指数、血糖、血脂等资料,采用SPSS 26.0进行统计学分析。结果:HUA合并肾结石患者的体质分布由高至低依次为痰湿质>湿热质>气虚质>阴虚质>阳虚质>平和质>气郁质、血瘀质>特禀质;不同性别的HUA合并肾结石患者体质分布有差异,男性群体中痰湿质、湿热质高于女性群体(P<0.05);50以上患病人群中,血瘀质最常见;LASSO回归显示年龄、舒张压、总胆固醇、甘油三酯是HUA合并肾结石的危险因素(P<0.05),ROC曲线下面积AUC为0.677[95%CI(0.641,0.713)],灵敏度为0.605,特异度为0.684,阈值为0.210,Hosmer-Lemeshorw拟合优度检验P=0.370。结论:湿热质、痰湿质是HUA合并肾结石人群的高发体质类型,年龄、舒张压、总胆固醇、甘油三酯是HUA人群发生肾结石的相关危险因素。 展开更多
关键词 高尿酸血症 肾结石 湿热质 痰湿质 中医体质 lass0回归 危险因素
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LASS2/TMSG-1、TAK1和TAB1在结肠癌中的表达及临床意义 被引量：1
13
作者 陈维 朱玮 吕成余 《肿瘤学杂志》 CAS 2020年第6期511-516,共6页
[目的]探讨肿瘤转移抑制基因-1(LASS2/TMSG-1)、转化生长因子激活激酶1(TAK1)和转化生长因子β活化激酶结合蛋白1 (TAB1)在结肠癌组织中的表达及其临床意义。[方法]选取2017年1月至2018年2月在我院治疗的原发性结肠癌患者68例,分别取其... [目的]探讨肿瘤转移抑制基因-1(LASS2/TMSG-1)、转化生长因子激活激酶1(TAK1)和转化生长因子β活化激酶结合蛋白1 (TAB1)在结肠癌组织中的表达及其临床意义。[方法]选取2017年1月至2018年2月在我院治疗的原发性结肠癌患者68例,分别取其结肠癌组织及癌旁正常组织,采用实时聚合酶联法(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)测定组织中的LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1表达水平,分析结肠癌组织中LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1的表达水平以及与患者临床病理特征的相关性,采用COX回归分析分析LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1表达水平与患者预后的相关性。[结果]结肠癌患者结肠癌组织TAK1(0.76±0.15ng/ml)、TAB1(1.46±0.20ng/ml)的表达水平与癌旁正常组织(0.57±0.15ng/ml,1.21±0.19ng/ml)相比显著升高;LASS2/TMSG-1的表达水平(1.52±0.36ng/ml)与癌旁正常组织(2.36±0.43ng/ml)相比显著下降(P<0.05)。LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期显著相关(P<0.05)。术后12个月随访时共有8例(11.76%)患者出现肿瘤复发/转移。出现肿瘤复发/转移的患者其TAK1、TAB1水平(0.96±0.15ng/ml,1.68±0.19ng/ml)与未复发/转移(0.52±0.13ng/ml,1.26±0.20ng/ml)患者相比显著升高;LASS2/TMSG-1显著下降(1.74±0.38ng/ml vs 3.02±0.49ng/ml)(P<0.05)。COX回归分析结果显示,肿瘤分化程度、肿瘤TNM分期、LASS2/TMSG-1、TAK1及TAB1表达水平是影响结肠癌患者临床预后的独立因素。LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1表达水平之间无显著相关性(P>0.05);患者预后与LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1表达水平具有显著相关性(P<0.05)。[结论] LASS2/TMSG-1、TAK1、TAB1的表达水平可能与结肠癌的发生及发展具有相关性,且与患者临床预后相关。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 lass2/TMSG-1 TAK1 TAB1
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LASS1基因在鼠脑皮层中的表达研究
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作者 王宝恒 徐小虎 +3 位作者 史桂芝 傅玉才 许铭炎 许锦阶 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第23期3529-3533,共5页
目的探讨LASS1基因在大脑衰老中的作用。方法分别从胎鼠、新生鼠、1月龄、3月龄、6月龄、11月龄、18月龄和24月龄鼠大脑皮层组织提取总RNA,RT-PCR扩增获得LASS1的cDNA片段并植入pGEM-T载体,以重组质粒载体为定量标准模板,采用Taqman荧... 目的探讨LASS1基因在大脑衰老中的作用。方法分别从胎鼠、新生鼠、1月龄、3月龄、6月龄、11月龄、18月龄和24月龄鼠大脑皮层组织提取总RNA,RT-PCR扩增获得LASS1的cDNA片段并植入pGEM-T载体,以重组质粒载体为定量标准模板,采用Taqman荧光探针,一步法实时定量RT-PCR检测LASS1mRNA表达,并以肌动蛋白基因(β-actin)和18SrRNA基因作为看家基因。结果在胎鼠至青壮年鼠(1～3个月龄)发育过程中大鼠脑皮层LASS1表达水平呈上调趋势,之后随年龄增长逐渐下降;β-actin表达量在胎鼠及新生鼠明显高于成年鼠和老年鼠;18SrRNA基因表达相对稳定。结论成功建立了大鼠LASS1基因表达的荧光实时定量RT-PCR检测方法;大鼠脑皮层中LASS1基因转录水平随年龄变化呈现相应的规律性,这将为进一步研究该基因在衰老过程中的作用提供实验室依据;同时,作为看家基因用于衰老研究,18SrRNA较β-actin基因更为可靠。 展开更多
关键词 鼠脑皮 lass1基因 看家基因 衰老研究
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酵母双杂交诱饵蛋白LASS1融合表达质粒的构建及鉴定
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作者 刘居理 傅玉才 +1 位作者 许铭炎 许锦阶 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第24期2406-2409,共4页
目的构建酵母双杂交系统诱饵蛋白大鼠LASS1融合表达质粒,为进一步筛选大鼠脑神经元内与LASS1p相互作用的蛋白奠定基础。方法应用PCR方法获得大鼠LASS1基因2个片段,分别克隆入酵母双杂交系统诱饵蛋白质粒载体pGBKT7,转染酵母菌AH109并检... 目的构建酵母双杂交系统诱饵蛋白大鼠LASS1融合表达质粒,为进一步筛选大鼠脑神经元内与LASS1p相互作用的蛋白奠定基础。方法应用PCR方法获得大鼠LASS1基因2个片段,分别克隆入酵母双杂交系统诱饵蛋白质粒载体pGBKT7,转染酵母菌AH109并检测重组质粒的自激活现象及毒性。利用Western印迹检测重组质粒在AH109的表达情况。结果LASS1基因的PCR产物片段大小分别为Flag(111bp)、Slag(109bp);Western印迹结果表明2个重组质粒表达的蛋白均可以与抗c-Myc抗体在22kU处特异性反应;重组质粒转化酵母后无自激活作用。结论重组质粒pGBKT7-Flag、pGBKT7-Slag均能够在AH109内正确表达,可作为酵母双杂交系统诱饵蛋白使用。 展开更多
关键词 lass1 酵母双杂交 诱饵蛋白
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LASS2、Ki67表达与鼻咽癌复发的相关性及其意义
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作者 王见璋 何志明 +1 位作者 黄金凤 李炜霞 《中国当代医药》 2017年第30期120-122,共3页
目的探讨LASS2及Ki67表达与鼻咽癌复发的相关性及其意义。方法收集我院2011年~2014年的126例鼻咽癌活检标本,其中首发病例77例,复发病例49例。采用免疫组织化学方法检测LASS2及Ki67在126例鼻咽癌活检组织中的表达,分析LASS2及Ki67在两... 目的探讨LASS2及Ki67表达与鼻咽癌复发的相关性及其意义。方法收集我院2011年~2014年的126例鼻咽癌活检标本,其中首发病例77例,复发病例49例。采用免疫组织化学方法检测LASS2及Ki67在126例鼻咽癌活检组织中的表达,分析LASS2及Ki67在两组间的表达差异及其之间的相关性。结果 LASS2在复发病例中的阳性率为61.2%,低于首发病例的88.3%,差异有统计学意义(P<0.001)。Ki67与鼻咽癌复发无显著相关性(P>0.05),但LASS2表达与Ki67表达相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LASS2在鼻咽癌复发的病例中呈低表达,检测LASS2蛋白可能有助于提示肿瘤是否容易复发,LASS2在预测鼻咽癌复发中可能具有重要的临床意义。LASS2与Ki67存在负相关,提示LASS2有可能抑制鼻咽癌肿瘤细胞的增殖。 展开更多
关键词 鼻咽癌 lass2 KI67 复发
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LASS2生物学功能的研究进展
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作者 李晓涛 王海峰 王剑松 《昆明医科大学学报》 CAS 2019年第12期130-134,共5页
恶性肿瘤是世界上致死率最高的疾病之一,仅次于心脑血管疾病。LASS2是一个新型肿瘤抑制基因,广泛分布于全身多数组织和器官,能够参与神经酰胺合成、细胞凋亡、细胞增殖、自噬等生物学过程,影响肿瘤细胞的的侵袭和转移,就LASS2生物学功... 恶性肿瘤是世界上致死率最高的疾病之一,仅次于心脑血管疾病。LASS2是一个新型肿瘤抑制基因,广泛分布于全身多数组织和器官,能够参与神经酰胺合成、细胞凋亡、细胞增殖、自噬等生物学过程,影响肿瘤细胞的的侵袭和转移,就LASS2生物学功能的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 lass2 凋亡 增殖 自噬 耐药
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LASS2基因对恶性肿瘤作用机制研究进展 被引量：7
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作者 王侨 栾婷 +1 位作者 王剑松 王海峰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第12期2020-2024,共5页
人源性长寿保障基因Ⅱ型(LASS2)又名肿瘤转移抑制基因-1(TMSG1),是新发现的一种肿瘤转移抑制基因,多项研究表明其在肝癌、肺癌、膀胱癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结直肠癌、脑膜瘤、鼻咽癌等多种恶性肿瘤中表达下降,有研究显示LASS2对... 人源性长寿保障基因Ⅱ型(LASS2)又名肿瘤转移抑制基因-1(TMSG1),是新发现的一种肿瘤转移抑制基因,多项研究表明其在肝癌、肺癌、膀胱癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结直肠癌、脑膜瘤、鼻咽癌等多种恶性肿瘤中表达下降,有研究显示LASS2对恶性肿瘤具有促进凋亡及抑制转移等抑癌基因的作用。本文就目前研究LASS2对不同恶性肿瘤的作用及其作用机制的进展作一综述。 展开更多
关键词 lass2 TMSG1 恶性肿瘤 肿瘤预后
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肿瘤转移抑制基因LASS2/TMSG1 S248A突变体通过增加ATP6V0C表达促进前列腺癌的侵袭 被引量：2
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作者 张宽根 周雨禾 +4 位作者 邵雅昆 梅放 由江峰 刘北英 裴斐 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期210-220,共11页
目的:探讨LASS2/TMSG1及其突变体在前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的分子作用机制。方法:构建表达LASS2/TMSG1全长及其4个突变体的pc DNA3真核表达载体,并稳定转染到高转移潜能前列腺癌PC-3M-1E8细胞系中;采用q PCR和Western blot法鉴... 目的:探讨LASS2/TMSG1及其突变体在前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的分子作用机制。方法:构建表达LASS2/TMSG1全长及其4个突变体的pc DNA3真核表达载体,并稳定转染到高转移潜能前列腺癌PC-3M-1E8细胞系中;采用q PCR和Western blot法鉴定稳定转染效果,并分析不同点突变体对LASS2/TMSG1和ATP6V0C表达量的影响;采用生长曲线测定、四甲基偶氮唑蓝(MTT)掺入实验、软琼脂集落形成实验、细胞划痕修复实验、Matrigel穿膜侵袭实验和流式细胞术研究LASS2/TMSG1及其4个点突变体的细胞生物学功能,并通过免疫双重荧光染色分析LASS2/TMSG1不同突变体和ATP6V0C的相互作用情况。结果:q PCR和Western blot检测显示LASS2/TMSG1 S248A组较LASS2/TMSG1野生型组ATP6V0C表达增加了3倍(P<0.05),且免疫双重荧光染色结果显示LASS2/TMSG1 S248A组ATP6V0C表达明显增加;与LASS2/TMSG1野生型组相比,LASS2/TMSG1 S248A组的细胞增殖能力、锚着不依赖生长能力、细胞迁移能力(细胞迁移率从35.3%±3.2%增加到70.3%±3%)和侵袭能力(穿膜细胞数从50.0±3.2增加到203.0±6.5)明显提高(P<0.05),G0/G1期比例增加(从51.0%增加到85.4%,P<0.05),但细胞凋亡率亦明显升高(从7%增加到15.1%,P<0.05)。结论:LASS2/TMSG1第248位丝氨酸突变为丙氨酸后(S248A)能促进前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,其分子机制可能是LASS2/TMSG S248A使ATP6V0C表达量增加,进而促进前列腺癌的侵袭,提示LASS2/TMSG1蛋白第248位丝氨酸是抑制前列腺癌侵袭的重要功能位点。 展开更多
关键词 前列腺癌 点突变 液泡型ATP酶 ATP6V0C lass2/TMSG1
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Nrf2/LASS2在子宫内膜癌细胞中的表达意义及二甲双胍的干预作用
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作者 周红 陈琪珍 《医药论坛杂志》 2021年第19期15-19,共5页
目的探讨Nrf 2/LASS 2在子宫内膜癌细胞中的表达意义及二甲双胍的干预作用。方法采用WesternBlot法和IHC法检测不同子宫内膜细胞株Nrf 2和LASS 2蛋白的表达。RT-PCR法检测mRNA和蛋白的表达水平。通过CCK-8法监测细胞生长。AnnexinV-PI... 目的探讨Nrf 2/LASS 2在子宫内膜癌细胞中的表达意义及二甲双胍的干预作用。方法采用WesternBlot法和IHC法检测不同子宫内膜细胞株Nrf 2和LASS 2蛋白的表达。RT-PCR法检测mRNA和蛋白的表达水平。通过CCK-8法监测细胞生长。AnnexinV-PI染色及流式细胞术检测细胞凋亡。用siRNA敲除技术观察Nrf 2对细胞增殖的影响。分析二甲双胍治疗后子宫内膜癌Nrf2和LASS2蛋白水平的变化及细胞增殖的影响。结果Nrf 2和LASS 2在子宫内膜癌细胞中的表达明显高于良性子宫内膜细胞(P<0.05),LASS2染色强度的增加与子宫内膜癌的病理进展相关,其表达峰值出现在子宫内膜癌中,而Nrf2峰值强度出现在EAH中,Nrf2和LASS2之间的表达具有正相关性。Nrf2/LASS2 mRNA和蛋白质的表达随着雌激素的加入而增加,其增殖活性也随之增强,敲除LASS2可减轻雌激素诱导的增殖效应。停止使用孕激素LASS2表现为持续下降,细胞增殖活性也会持续减弱。二甲双胍以剂量依赖性方式抑制Nrf2/LASS2蛋白表达,并可显著增强LASS2敲除细胞中的孕激素反应,抑制LASS2过度表达的增殖效应。二甲双胍还能增强孕激素对子宫内膜癌的抑制作用。结论Nrf 2/LASS 2在子宫内膜癌细胞中表达明显升高,二甲双胍能够抑制Nrf2/LASS2蛋白表达,增强孕激素对子宫内膜癌的抑制作用。 展开更多
关键词 Nrf 2 lass 2 Ⅰ型子宫内膜癌 增殖 孕激素抵抗
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