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环状RNA HN1靶向miR-766-5p/KLF3轴调控胃癌细胞生物学行为的分子机制
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作者 王莉 师红利 +1 位作者 李峰 刘泓 《解剖学研究》 2025年第1期18-24,31,共8页
目的探讨环状RNA HN1(CircHN1)靶向微小RNA-766-5p(miR-766-5p)/Krüpple样转录因子3(KLF3)轴调控胃癌细胞生物学行为的分子机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、western blot分别检测人胃癌细胞系MKN-45以及人正常胃黏膜上皮细胞G... 目的探讨环状RNA HN1(CircHN1)靶向微小RNA-766-5p(miR-766-5p)/Krüpple样转录因子3(KLF3)轴调控胃癌细胞生物学行为的分子机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、western blot分别检测人胃癌细胞系MKN-45以及人正常胃黏膜上皮细胞GES-1中CircHN1、miR-766-5p、KLF3表达;将si-NC、si-CircHN1、si-CircHN1+inhibitor NC、si-CircHN1+miR-766-5p inhibitor分别转染至MKN-45细胞并命名为si-NC组、si-CircHN1组、si-CircHN1+inhibitor NC组、si-CircHN1+miR-766-5p inhibitor组,未做任何处理的MKN-45细胞记为NC组。双荧光素酶报告基因实验检测CircHN1、miR-766-5p、KLF3的关系;qRT-PCR检测MKN-45细胞中CircHN1、miR-766-5p表达;Western blot检测MKN-45细胞KLF3、上皮钙黏附素(E-cadherin)、神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达;MTT法检测MKN-45细胞活性;流式细胞术检测MKN-45细胞凋亡率;Transwell检测MKN-45细胞侵袭、迁移情况。结果与GES-1细胞(1.00±0.00)相比,MKN-45细胞中CircHN1水平(1.48±0.16)、KLF3水平(1.17±0.13)显著上调(P<0.05),miR-766-5p表达量(0.32±0.05)显著下调(P<0.05);与NC组、si-NC组相比,si-CircHN1组MKN-45细胞CircHN1表达量、KLF3、N-cadherin、Vimentin蛋白水平、A570值(0.35±0.03)、迁移、侵袭细胞数量显著降低(P<0.05),MKN-45细胞凋亡率(25.57%±3.26%)、miR-766-5p表达量、E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05);而miR-766-5p下调减弱了沉默CircHN1抑制MKN-45细胞增殖、迁移和侵袭的有利影响;CircHN1靶向调节miR-766-5p/KLF3轴。结论沉默CircHN1可能通过上调miR-766-5p来抑制KLF3表达,进而抑制MKN-45细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 胃癌 环状RNA HN1 微小RNA-766-5p Krüpple样转录因子3 增殖 迁移 侵袭
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鸡KLF3基因的表达规律及其对脂肪细胞分化的影响研究 被引量:6
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作者 王海霞 张志威 +4 位作者 贺綦 王宁 王宇祥 曹志平 李辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期26-31,共6页
为研究鸡KLF3(Gallus gallus Krüppel-like factor 3,gKLF3)基因的表达规律及其对脂肪细胞分化的影响,利用qRT-PCR检测了其在肉鸡脂肪组织和脂肪细胞中的表达特点,并利用基因过表达技术研究gKLF3基因对脂肪细胞分化的影响。结果显... 为研究鸡KLF3(Gallus gallus Krüppel-like factor 3,gKLF3)基因的表达规律及其对脂肪细胞分化的影响,利用qRT-PCR检测了其在肉鸡脂肪组织和脂肪细胞中的表达特点,并利用基因过表达技术研究gKLF3基因对脂肪细胞分化的影响。结果显示,gKLF3在2~10周龄肉鸡腹部脂肪组织中持续表达,10周龄高脂肉鸡腹部脂肪组织gKLF3表达量显著高于低脂肉鸡(P<0.05);gKLF3在鸡成熟脂肪细胞的表达量低于前脂肪细胞(P<0.01);体外培养的鸡前脂肪细胞经油酸诱导分化后,gKLF3基因表达量均有低于对照组的趋势;过表达gKLF3基因有抑制脂肪细胞分化,以及抑制C/EBPα、FAS基因表达(P<0.01)的趋势。研究结果表明,gKLF3基因在鸡腹部脂肪组织生长发育过程中发挥重要作用,其可能是通过抑制C/EBPα、FAS基因表达进而抑制脂肪细胞分化实现的。 展开更多
关键词 klf3基因 脂肪细胞分化 基因表达
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Krüppel-Like Factor 3(KLF3)基因对牛脂肪沉积的作用 被引量:3
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作者 郭红芳 宁越 +1 位作者 成功 昝林森 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1272-1281,共10页
【目的】通过研究牛KLF3基因对牛脂肪分化和脂肪酸代谢关键基因表达量的作用,进而探讨KLF3基因对脂质沉积的影响。【方法】合成干扰siRNA,筛选得到KLF3基因干扰效率最高SiRNA,分离培养秦川牛肉用新品系新生牛前脂肪细胞生长至70%-90%汇... 【目的】通过研究牛KLF3基因对牛脂肪分化和脂肪酸代谢关键基因表达量的作用,进而探讨KLF3基因对脂质沉积的影响。【方法】合成干扰siRNA,筛选得到KLF3基因干扰效率最高SiRNA,分离培养秦川牛肉用新品系新生牛前脂肪细胞生长至70%-90%汇合度时转染筛选得到的KLF3基因SiRNA和阴性对照SiRNA(NC),并进行诱导分化培养至第0天和第4天时,利用荧光定量PCR方法研究分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ, PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT/enhancer-binding proteinsα, C/EBPα),脂肪酸代谢关键基因脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylaseα, ACCα)和脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4, FABP4)基因在牛脂肪细胞分化不同时期干扰KLF3基因处理组和对照组之间表达量的变化,同时在干扰KLF3基因处理并进行诱导脂肪细胞分化的第4天采用油红O染色法观察干扰KLF3基因处理组和对照组之间脂滴差异及采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法测定甘油三酯含量进一步确定KLF3基因对牛脂肪细胞分化和脂肪酸代谢的作用。【结果】KLF3-Si2具有最高的干扰效率达到73%。转染KLF3-Si2后PPARγ的表达量在牛脂肪细胞诱导分化的第0天和第4天与对照组相比分别下调了58%和37%,达到了差异极显著(P<0.01),C/EBPα的表达量也分别下调了64%和41%,达到了差异极显著(P<0.01)。脂质代谢的关键基因FABP4的表达量与对照组相比在牛脂肪细胞诱导分化的第0天和第4天分别下调了89%和60%,而ACCα的表达量干扰KLF3处理组与对照组相比在脂肪细胞诱导分化第0天和第4天分别下调了50%和37%,而FAS的表达量则分别下调了73%和19%,都分别达到了差异极显著(P<0.01)。在牛脂肪细胞诱导分化第4天油红O染色和甘油三酯含量测定也发现干扰KLF3基因处理组与对照组相比脂滴减少,甘油三酯含量显著下降(P<0.05)。【结论】干扰牛KLF3基因可以抑制牛脂肪细胞分化和脂肪酸代谢关键基因表达量下调,进而影响脂肪的沉积。 展开更多
关键词 秦川牛 前脂肪细胞 klf3 脂肪沉积
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牦牛KLF3基因克隆及组织表达分析 被引量:1
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作者 林森 林亚秋 +3 位作者 朱江江 柏雪 江明锋 王永 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期132-138,共7页
旨在克隆牦牛KLF3基因序列,并获得其生物学特征,同时阐明其组织表达规律。选取4-6周岁的健康麦洼牦牛6头,采集脾、肺、肾、皮下脂肪和背最长肌组织样品,提取组织总RNA,利用RT-PCR方法克隆KLF3基因序列,同时利用荧光定量PCR(q PCR)技术... 旨在克隆牦牛KLF3基因序列,并获得其生物学特征,同时阐明其组织表达规律。选取4-6周岁的健康麦洼牦牛6头,采集脾、肺、肾、皮下脂肪和背最长肌组织样品,提取组织总RNA,利用RT-PCR方法克隆KLF3基因序列,同时利用荧光定量PCR(q PCR)技术检测该基因在不同组织中的表达情况。结果表明,获得牦牛KLF3基因序列1 137 bp(Gen Bank登录号:KX964630),其中CDS为1 041 bp,5'UTR 32 bp和3'UTR 64 bp,编码346个氨基酸,牦牛KLF3氨基酸序列与普通牛(XP_010820342.1)的氨基酸序列同源性达100%。KLF3 m RNA在牦牛肺脏和肝脏的表达水平较高,极显著高于其他组织(P<0.01)。 展开更多
关键词 牦牛 klf3基因 克隆 组织表达
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KLF3基因3′-UTR区双荧光素酶报告载体及其突变载体的构建与活性鉴定 被引量:1
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作者 翟博 李旭 +4 位作者 王春昕 赵云辉 孙铭 张立春 张明新 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第3期644-650,共7页
试验旨在构建锌指蛋白3(KLF3)基因3′-UTR区双荧光素酶基因报告载体及其突变载体,初步分析可能调控KLF3基因表达的miRNAs。首先通过PCR方法扩增KLF3基因的3′-UTR序列,将其克隆到经XhoⅠ、NotⅠ双酶切的双荧光素酶报告载体中;运用Target... 试验旨在构建锌指蛋白3(KLF3)基因3′-UTR区双荧光素酶基因报告载体及其突变载体,初步分析可能调控KLF3基因表达的miRNAs。首先通过PCR方法扩增KLF3基因的3′-UTR序列,将其克隆到经XhoⅠ、NotⅠ双酶切的双荧光素酶报告载体中;运用Targetscan软件预测可能与KLF3基因3′-UTR相互作用的miRNA;使用脂质体2000转染试剂将miRNAs mimics与构建好的KLF3基因3′-UTR段双荧光素酶报告载体或突变载体共转染于常规培养的293T细胞中,检测荧光素酶活性。结果表明,KLF3基因3′-UTR可能是miR-21的作用靶位点;双荧光报告显示,miR-21 mimics组(0.6900±0.0144)比突变组(1.000±0.0688)和空白对照组(1.000±0.0159)KLF3基因3′-UTR双荧光素酶基因报告载体和突变载体的活性降低了31%(P<0.01)。本试验成功构建了含有KLF3基因3′-UTR段双荧光素酶基因报告载体与突变载体,初步证实miR-21对KLF3基因有调控作用。 展开更多
关键词 klf3基因 双荧光素酶基因报告载体 MIR-21 3′-非编码区
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KLF3基因的分子调控机制及其在家畜育种中的应用与展望
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作者 徐嘉威 梁君桐 +6 位作者 黄殷琦 熊业城 张子敬 王二耀 雷初朝 陈宏 黄永震 《中国牛业科学》 2018年第6期44-47,共4页
Kupple like factor 3(KLF3)是kupple like factors(KLFs)家族中的重要成员之一。作为转录因子参与癌症、脂肪细胞分化、血液中细胞生成、免疫B细胞的发育、肌肉基因调节等众多生物学进程。近几年来,被作为一种重要的遗传分子标志而被... Kupple like factor 3(KLF3)是kupple like factors(KLFs)家族中的重要成员之一。作为转录因子参与癌症、脂肪细胞分化、血液中细胞生成、免疫B细胞的发育、肌肉基因调节等众多生物学进程。近几年来,被作为一种重要的遗传分子标志而被科学家们所重视,本文就KLF3基因蛋白的分子结构、生物学功能,以及在家畜育种中的应用和展望进行综述。 展开更多
关键词 klf3基因 分子结构 生物学功能 动物育种
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KLF3在胃癌组织中的表达及临床意义
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作者 孙任成 于渊 《潍坊医学院学报》 2022年第4期281-284,F0003,共5页
目的 探讨KLF3在胃癌组织中的表达情况及其与临床病理、预后的相关性。方法 基于KM数据库评估KLF3 mRNA与胃癌预后的关系,收集130例胃癌患者临床病理及预后信息,免疫组化检测胃癌组织中KLF3的表达情况。结果 KM数据库分析显示,与低表达... 目的 探讨KLF3在胃癌组织中的表达情况及其与临床病理、预后的相关性。方法 基于KM数据库评估KLF3 mRNA与胃癌预后的关系,收集130例胃癌患者临床病理及预后信息,免疫组化检测胃癌组织中KLF3的表达情况。结果 KM数据库分析显示,与低表达相比,KLF3 mRNA高表达患者具有较长的总生存时间、首次疾病进展时间和首次复发后生存时间。130例胃癌中KLF3蛋白高表达与良好的病理因素相关,如肿瘤体积更小,pT分期、pN分期更早以及Ki-67更低。同样,KLF3蛋白高表达患者的无病生存期(DFS)和总生存期(OS)明显长于KLF3低表达的患者(P<0.01)。多因素Cox回归分析发现KLF3表达量是DFS(HR=0.581,95%CI=0.343-0.852,P=0.019)和OS(HR=0.617,95%CI=0.445-0.937,P=0.011)的独立影响因素。结论 KLF3蛋白高表达与良好的临床病理因素相关,是胃癌患者良好预后的独立影响因素,KLF3可能在胃癌中起抑癌作用。 展开更多
关键词 klf3 病理因素 预后 胃肿瘤
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KLF3通过STAT3调控乳腺癌细胞的运动、迁移及侵袭 被引量:6
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作者 吕峰 李翠 +5 位作者 于洋 梁栋 孔舒欣 李兆明 秦景博 尤伟 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第38期3014-3018,共5页
目的观察人类Krüppel样因子3(KLF3)对乳腺癌细胞中信号转导和转录激活因子3(STAT3)表达的影响,并探索KLF3影响乳腺癌细胞运动、迁移及侵袭的潜在机制.方法首先在乳腺癌细胞(MCF-7和MDA-MB-231)中,分别通过蛋白质印迹、实时荧光定... 目的观察人类Krüppel样因子3(KLF3)对乳腺癌细胞中信号转导和转录激活因子3(STAT3)表达的影响,并探索KLF3影响乳腺癌细胞运动、迁移及侵袭的潜在机制.方法首先在乳腺癌细胞(MCF-7和MDA-MB-231)中,分别通过蛋白质印迹、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)、荧光素酶报告系统及染色质免疫共沉淀等实验方法验证KLF3对STAT3表达的调控作用;其次构建STAT3启动子的突变型质粒,进一步证实KLF3对STAT3启动子活性的影响;进而利用细胞划痕实验及Transwell法检测细胞运动、迁移、侵袭的能力;最后通过动物实验验证敲减KLF3对动物体内肿瘤转移的影响.结果在MDA-MB-231细胞中敲低KLF3后STAT3的mRNA水平升高(3.58±0.65)倍,而在MCF-7细胞中敲低KLF3后STAT3的mRNA水平升高(2.28±0.19)倍(P<0.001).KLF3能够结合于STAT3的启动子区域,在MDA-MB-231细胞中敲低KLF3后STAT3的转录活性升高(2.47±0.87)倍,而在MCF-7细胞中敲低KLF3后STAT3的转录活性升高(2.63±0.65)倍(P<0.01);敲减KLF3能够抑制乳腺癌细胞的运动、迁移、侵袭能力,在此基础上沉默STAT3能够部分逆转KLF3的功能;敲减KLF3能够促进小鼠体内肿瘤转移.结论敲减KLF3能够促进STAT3的转录活性,从而促进后者的蛋白表达;KLF3能够通过STAT3影响乳腺癌细胞的运动、迁移及侵袭,KLF3可能作为治疗转移性乳腺癌的潜在靶点. 展开更多
关键词 klf3 乳腺癌 STAT3 转移
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强心汤干预慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的作用机制 被引量:1
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作者 毛美玲 卢健棋 +5 位作者 陈佳永 张蕴力 陆微 陈丽丹 张艺博 林浩 《中西医结合心脑血管病杂志》 2025年第11期1652-1657,共6页
目的:探讨强心汤通过抑制促凋亡蛋白Bcl-2同源拮抗因子1(bak1)、克鲁伯样因子(klf)3改善慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌细胞凋亡的作用机制。方法:将48只无特定病原体(SPF)级SD大鼠随机分为对照组、模型组、强心汤低剂量组、强心汤中剂量组... 目的:探讨强心汤通过抑制促凋亡蛋白Bcl-2同源拮抗因子1(bak1)、克鲁伯样因子(klf)3改善慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌细胞凋亡的作用机制。方法:将48只无特定病原体(SPF)级SD大鼠随机分为对照组、模型组、强心汤低剂量组、强心汤中剂量组、强心汤高剂量组、沙库巴曲缬沙坦组,每组8只。除对照组外余各组大鼠均采用结扎冠状动脉左前降支方法建立CHF模型。造模成功后第2天开始,强心汤低剂量组、强心汤中剂量组、强心汤高剂量组分别给予6.125、12.250、24.500 g/(kg·d)强心汤灌胃;沙库巴曲缬沙坦组给予用生理盐水溶解的沙库巴曲缬沙坦10.38 g/(kg·d)灌胃;对照组和模型组给予生理盐水灌胃,均为2 mL,连续灌胃28 d。干预结束后,采用心脏彩超检测各组大鼠心功能指标[包括左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF)];苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠左心室组织病理学变化;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色观察心肌细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠左心室组织bak1、klf3蛋白表达情况。结果:HE染色和TUNNEL检测结果表明,与对照组相比,模型组大鼠正常心肌组织结构改变,心肌横纹模糊,心肌细胞排列紊乱、变性坏死且细胞凋亡增加,棕褐色坏死颗粒物质明显增多;各给药组大鼠心肌结构完整,细胞排列整齐,坏死颗粒物减少,心肌细胞凋亡情况得到明显改善。与对照组比较,模型组大鼠LVEDD、LVESD升高,LVEF降低,促凋亡蛋白bak1、klf3表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠LVEDD、LVESD均降低,LVEF均升高,促凋亡蛋白bak1、klf3表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与强心汤低剂量组比较,强心汤中剂量组、强心汤高剂量组和沙库巴曲缬沙坦组各指标改善效果更佳(P<0.05);与强心汤中剂量组比较,沙库巴曲缬沙坦组和强心汤高剂量组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:强心汤通过降低心肌组织中促凋亡蛋白bak1、klf3表达,改善心肌细胞异常凋亡情况,进而减轻心肌组织病理损伤,达到治疗CHF的效果。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 强心汤 Bcl-2同源拮抗因子1 bak1 克鲁伯样因子3 klf3 细胞凋亡 实验研究
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miR-301b对山羊肌内脂肪细胞分化的调控作用 被引量:3
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作者 张浩 何长晟 +4 位作者 李艳艳 王永 朱江江 俄木曲者 林亚秋 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期254-261,共8页
旨在明确miR-301b对山羊肌内脂肪细胞分化的调控作用,探讨其发挥调控作用的可能机制。利用化学合成的miR-301b mimics和miR-301b siRNA,通过脂质体转染法在山羊肌内脂肪细胞过表达和干扰miR-301b,并通过油红O染色、qPCR和生物信息学分... 旨在明确miR-301b对山羊肌内脂肪细胞分化的调控作用,探讨其发挥调控作用的可能机制。利用化学合成的miR-301b mimics和miR-301b siRNA,通过脂质体转染法在山羊肌内脂肪细胞过表达和干扰miR-301b,并通过油红O染色、qPCR和生物信息学分析等方法,从细胞形态学和mRNA水平明确miR-301b对山羊肌内脂肪细胞分化的调控作用,并初步探究其可能的作用机制。结果表明,过表达miR-301b效率约29290倍,细胞形态学结果显示,过表达miR-301b后山羊肌内脂肪细胞脂滴积聚减少,甘油三酯合成降低。qPCR结果显示,过表达miR-301b后成脂标志基因CEBPα、PPARγ、SREBP1、LPL表达水平极显著下调(P<0.01)。miR-301b干扰效率约60%,干扰miR-301b表达后,细胞形态学结果显示,山羊肌内脂肪细胞脂滴积聚增加,甘油三酯合成升高。qPCR结果显示,干扰miR-301b后成脂标志基因AP2、CEBPα、CEBPβ、PPARγ、SREBP1、LPL表达水平极显著上调(P<0.01)。通过对miR-301b生物信息学分析,推测KLF3为miR-301b的靶标基因,qPCR验证发现过表达miR-301b后显著抑制KLF3的mRNA表达水平(P<0.05),干扰miR-301b后显著促进KLF3的表达水平(P<0.05)。过表达miR-301b抑制山羊肌内前体脂肪细胞分化,同时KLF3表达水平下调;干扰miR-301b促进山羊肌内前体脂肪细胞分化,KLF3表达水平上调,推测miR-301b可能通过KLF3抑制山羊肌内脂肪细胞分化。 展开更多
关键词 山羊 miR-301b klf3 肌内脂肪细胞 分化
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Krüppel样转录因子3在肺腺癌中表达的意义 被引量:1
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作者 朱艳霞 朱敬 +1 位作者 杨贤义 肖敏 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期1087-1090,共4页
目的:探讨Kruippel样转录因子3(Kruippel-like factor 3,KLF3)在肺腺癌中的表达及其与临床特征的关系,为探索KLF3在肺腺癌中的作用提供依据。方法:荧光定量PCR及Western blot分析KLF3的mRNA及蛋白在肺腺癌细胞株中的表达。收集72例肺腺... 目的:探讨Kruippel样转录因子3(Kruippel-like factor 3,KLF3)在肺腺癌中的表达及其与临床特征的关系,为探索KLF3在肺腺癌中的作用提供依据。方法:荧光定量PCR及Western blot分析KLF3的mRNA及蛋白在肺腺癌细胞株中的表达。收集72例肺腺癌患者的肿瘤组织标本,免疫组织化学法分析KLF3在肺腺癌组织中表达并分析KLF3表达与患者临床特征的关系。结果:KLF3在肺腺癌细胞株中表达下调。大部分肺腺癌组织中KLF3低表达(50/72),其表达主要定位于胞浆及胞核内。KLF3表达与肺腺癌临床病理分期(P<0.000 1)及T分期(P=0.004)、N分期(P<0.000 1)、M分期(P<0.000 1)明显相关。结论:KLF3可能是一个重要的肺腺癌抑癌基因,并有望成为新的抗肿瘤治疗靶点。 展开更多
关键词 klf3 肺腺癌 抑癌基因
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下调miR-4262抑制肺癌细胞A549转移潜能的机制 被引量:7
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作者 朱丽 龚波 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第10期1375-1379,共5页
目的探讨下调miR-4262对肺癌细胞A549转移潜能的影响及机制。方法qRT-PCR检测肺癌细胞中miR-4262表达变化。在肺癌细胞A549中转染miR-4262 inhibitor,MTT测定细胞增殖能力,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移能力,Western blot测定E-cadhe... 目的探讨下调miR-4262对肺癌细胞A549转移潜能的影响及机制。方法qRT-PCR检测肺癌细胞中miR-4262表达变化。在肺癌细胞A549中转染miR-4262 inhibitor,MTT测定细胞增殖能力,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移能力,Western blot测定E-cadherin、vimentin蛋白表达。生物信息学软件预测miR-4262和KLF3的3,UTR端有结合位点,荧光素酶系统鉴定靶向关系。qRT-PCR检测肺癌组织中KLF3 mRNA表达变化,分析其表达水平与miR-4262的相关性。在肺癌细胞A549中转染miR-4262 inhibitor、KLF3 siRNA,检测细胞增殖、侵袭、迁移变化。结果肺癌A549细胞中miR-4262表达水平升高。转染miR-4262 inhibitor后的肺癌细胞A549增殖、侵袭和迁移能力降低,细胞中E-cadherin蛋白表达水平升高,vimentin蛋白表达水平下降。明确miR-4262与KLF3的靶向关系。下调miR-4262上调肺癌细胞A549中KLF3表达。KLF3 siRNA可以逆转miR-4262 inhibitor对肺癌细胞A549增殖、侵袭和迁移的抑制功能。结论下调miR-4262抑制肺癌细胞A549转移潜能,作用机制与靶向上调KLF3的表达有关。 展开更多
关键词 肺癌 klf3 miR-4262 迁移
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miR-10b通过激活KLF4/Notch-1/STAT3信号途径加速腹主动脉瘤的进展
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作者 郭畅 刘欣 +1 位作者 李妍洁 张明明 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第5期329-336,共8页
目的:miR-10b促进动脉瘤的进展但其机制未明确,本实验通过检测miR-10b对KLF4/Notch-1/STAT3途径的影响阐明其机理。方法:双荧光素酶实验验证miR-10b的靶基因。取20只apoE-/-小鼠构建腹主动脉瘤模型,其中10只尾静脉注射miR-10b过表达的... 目的:miR-10b促进动脉瘤的进展但其机制未明确,本实验通过检测miR-10b对KLF4/Notch-1/STAT3途径的影响阐明其机理。方法:双荧光素酶实验验证miR-10b的靶基因。取20只apoE-/-小鼠构建腹主动脉瘤模型,其中10只尾静脉注射miR-10b过表达的慢病毒,分别记为模型组和miR-10b组。另取10只apoE-/-小鼠作为假手术组,28 d后解剖小鼠腹主动脉行病理学染色、Western-blot实验。将血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用后的THP-1巨噬细胞根据是否转染miR-10b mimic及其Nc对照、是否添加抑制剂分组:(1)Nc组;(2)miR-10b mimic组;(3)Nc+KLF4抑制组;(4)miR-10b mimic+KLF4抑制组;(5)Nc+Notch-1抑制组;(6)miR-10b mimic+Notch-1抑制组;(7)Nc+STAT3抑制组;(8)miR-10b mimic+STAT3抑制组,检测细胞内蛋白水平。结果:检测双荧光素酶活性得知miR-10b可靶向作用于基因KLF4。小鼠血管病理实验发现,与正常小鼠相比,动脉瘤模型小鼠的血管明显增粗、组织结构异常,miR-10b可加重血管病变;CD68+巨噬细胞、蛋白Notch-1、p-STAT3、MMP-2、MMP-9在假手术组、模型组与miR-10b逐渐增多,而α-SMA、蛋白KLF4逐渐减少。(1)、(2)两组细胞间,后者KLF4表达较少、而Notch-1、p-STAT3、MMP-2、MMP-9表达显著偏多;KLF4抑制剂抑制KLF4表达,而Notch-1显著增多;Notch-1被抑制而减少表达,p-STAT3也随之减少;p-STAT3被抑制表达,MMP-2与MMP-9表达量也明显降低。结论:miR-10b通过作用于KLF4/Notch-1/STAT3信号途径,引起动脉瘤组织中MMP-2、MMP-9表达增加,从而加速动脉瘤的进程。 展开更多
关键词 动脉瘤 MIR-10B KLF4/Notch-1/STAT3 信号通路
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Lack of an Additive Effect between the Deletions of Klf5 and Nkx3-1 in Mouse Prostatic Tumorigenesis
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作者 Changsheng Xing Xiaoying Fu +1 位作者 Xiaodong Sun Jin-Tang Dong 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2013年第6期315-318,共4页
Prostate cancer is one of the most common malignancies.The development and progression of prostate cancer are driven by a series of genetic and epigenetic events including gene amplification that activates oncogenes a... Prostate cancer is one of the most common malignancies.The development and progression of prostate cancer are driven by a series of genetic and epigenetic events including gene amplification that activates oncogenes and chromosomal deletion that inactivates tumor suppressor genes.Whereas gene amplification occurs in human prostate cancer,gene deletion is more common, 展开更多
关键词 Lack of an Additive Effect between the Deletions of Klf5 and Nkx3-1 in Mouse Prostatic Tumorigenesis
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LncRNA CRNDE调节miR⁃338⁃3p/KLF6轴对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响
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作者 岳利英 林雪容 张盟盟 《解剖学研究》 CAS 2024年第3期228-235,共8页
目的探讨LncRNA结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)调节miR⁃338⁃3p/KLF6轴对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响。方法将人肺泡上皮细胞A549分为CK组、LPS组、LPS+si⁃NC组、LPS+si⁃CRNDE组、LPS+si⁃CRNDE+inhibitor NC组、LPS+si⁃CRNDE+miR⁃33... 目的探讨LncRNA结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)调节miR⁃338⁃3p/KLF6轴对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响。方法将人肺泡上皮细胞A549分为CK组、LPS组、LPS+si⁃NC组、LPS+si⁃CRNDE组、LPS+si⁃CRNDE+inhibitor NC组、LPS+si⁃CRNDE+miR⁃338⁃3p inhibitor组、LPS+si⁃CRNDE+oe⁃NC组、LPS+si⁃CRNDE+oe⁃KLF6组;qRT⁃PCR检测各组细胞CRNDE、miR⁃338⁃3p和KLF6表达水平;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA试剂盒检测TNF⁃α、IL⁃10和IL⁃1β水平;商品化试剂盒分析MDA、GSH⁃Px、SOD水平;Western blot检测细胞中KLF6、Cleaved⁃caspase⁃3、Bax、Bcl⁃2蛋白表达量。双荧光素酶报告基因实验验证miR⁃338⁃3p与RNDE和KLF6的关系。结果与CK组相比,LPS组和LPS+si⁃NC组A549细胞CRNDE和KLF6 mRNA表达、TNF⁃α、IL⁃1β水平、MDA含量、细胞凋亡率、caspase⁃3、Bax、KLF6蛋白表达显著升高,miR⁃338⁃3p表达、细胞活力、IL⁃10水平、SOD和GSH⁃Px活性、Bcl⁃2蛋白表达显著降低(P<0.05);与LPS+si⁃NC组相比,LPS+si⁃CRNDE组A549细胞CRNDE和KLF6 mRNA表达、TNF⁃α、IL⁃1β水平、MDA含量、细胞凋亡率、caspase⁃3、Bax、KLF6蛋白表达显著降低,miR⁃150⁃5p表达、细胞活力、IL⁃10水平、SOD和GSH⁃Px活性、Bcl⁃2蛋白表达显著升高(P<0.05);干扰miR⁃338⁃3p表达或过表达KLF6均可降低下调CRNDE表达改善LPS诱导A549细胞损伤的作用(P<0.05)。结论下调CRNDE可调控miR⁃338⁃3p/KLF6轴减轻LPS诱导的A549细胞损伤。 展开更多
关键词 急性肺损伤 长链非编码RNA 结直肠肿瘤差异表达基因 miR⁃338⁃3p/KLF6轴 脂多糖 肺泡上皮细胞
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