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KLF9调控巨噬细胞体内IFN-β表达的机制
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作者 严秀蕊 关兆清 +1 位作者 宋建莉 张耀林 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第10期882-887,共6页
目的明确锌指蛋白Krüppel样转录因子9(KLF9)在Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)诱导巨噬细胞Ⅰ型干扰素表达中的作用及机制。方法通过琼脂糖凝胶电泳、实时荧光定量PCR及Western blot法检测KLF9在Klf9^(-/-)(gKO)小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BM... 目的明确锌指蛋白Krüppel样转录因子9(KLF9)在Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)诱导巨噬细胞Ⅰ型干扰素表达中的作用及机制。方法通过琼脂糖凝胶电泳、实时荧光定量PCR及Western blot法检测KLF9在Klf9^(-/-)(gKO)小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)中的敲除效果;RNA-seq筛选gKO小鼠及对照小鼠Klf9^(+/+)(WT)BMDM中HSV-1刺激后Klf9下游关键差异基因;实时荧光定量PCR验证HSV-1刺激后干扰素β1(Ifnb1)及下游干扰素刺激基因(ISG)如干扰素诱导蛋白与四肽重复1(Ifit1)、干扰素刺激的核酸外切酶基因20(Isg20)、胆固醇25-羟化酶(Ch25h)及2′-5′-寡聚腺苷酸合成酶1(Oasl1)的表达情况;ELISA检测HSV-1刺激后gKO及WT小鼠BMDM上清中β干扰素(IFN-β)的含量;Western blot法检测HSV-1刺激后gKO及WT小鼠BMDM中磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)、干扰素调节因子3(IRF3),p-IRF7、IRF7,磷酸化的核因子κB p65(p-NF-κB p65)、核因子κB p65(NF-κB p65)的表达;CUT-Tag及ChIP-qPCR技术检测KLF9在Ifnb1上的结合。结果KLF9在gKO小鼠的BMDM中表达明显减少;RNA-seq结果显示BMDM中Klf9缺失导致Ⅰ型干扰素信号通路受损;实时荧光定量PCR结果表明Klf9敲除后BMDM中除了Isg20以外,Ifit1、Ch25h及Oasl1表达均明显降低;ELISA结果显示Klf9敲除导致BMDM分泌的IFN-β明显减少。在机制研究方面,Western blot法检测结果显示Klf9的缺失不影响p-IRF3、p-IRF7及p-NF-κB p65的表达;CUT-Tag及ChIP-qPCR结果显示KLF9能直接结合至Ifnb1的启动子区。结论KLF9对巨噬细胞抵抗HSV-1感染至关重要。 展开更多
关键词 骨髓来源的巨噬细胞(BMDM) 锌指蛋白Krüppel样转录因子9(klf9) Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1) IFN-Β
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Genetic variants and mRNA expression levels of KLF4 and KLF5 with hypertension:A combination of case-control study and cohort study
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作者 Xu Han Wen Li +10 位作者 Changying Chen Jiahui Liu Junxiang Sun Feifan Wang Chao Wang Jialing Mu Xincheng Gu Fangyuan Liu Hankun Xie Song Yang Chong Shen 《Journal of Biomedical Research》 2025年第1期103-113,共11页
Hypertension(HT)is a major risk factor for cardiovascular diseases.Krüppel-like factors(KLFs)are important transcription factors in eukaryotes.Studies have reported that KLF4 and KLF5 are correlated with several ... Hypertension(HT)is a major risk factor for cardiovascular diseases.Krüppel-like factors(KLFs)are important transcription factors in eukaryotes.Studies have reported that KLF4 and KLF5 are correlated with several cardiovascular diseases,but population-based studies on associations between HT and KLF4 or KLF5 have rarely been reported.Therefore,the current study investigated the associations of genetic variants and m RNA expression levels of KLF4 and KLF5 with HT,as well as the effects of antihypertensive drugs on the expression levels of these genes.The associations of one single-nucleotide polymorphism(SNP)in KLF4 and three SNPs in KLF5with HT were analyzed using a combination of case-control and cohort studies.The study populations were selected from a community-based cohort in four regions of Jiangsu province.The risks of HT were estimated through logistic and Cox regression analyses.In addition,m RNA expression levels of KLF4 and KLF5 were detected in 246 controls and 385 HT cases selected from the aforementioned cohort.Among the HT cases,263were not taking antihypertensive drugs[AHD(-)]and 122 were taking antihypertensive drugs[AHD(+)].In the case-control study,SNP rs9573096(C>T)in KLF5 was significantly associated with an increased risk of HT in the additive model(adjusted odds ratio[OR],1.106;95%confidence interval[CI],1.009 to 1.212).In the cohort study of the normotensive population,rs9573096 in KLF5 was also significantly associated with an increased risk of HT in the additive model(adjusted hazards ratio[HR],1.199;95%CI,1.070 to 1.344).KLF4 and KLF5m RNA expression levels were significantly higher in the AHD(-)group than in the control group(P<0.05),but lower in the AHD(+)group than in the AHD(-)group(P<0.05).The current study demonstrated the associations of KLF4 and KLF5 genetic variants with hypertension,as well as the association of the indicative variations in m RNA expression levels of KLF4 and KLF5 with the risk of hypertension and antihypertensive treatment. 展开更多
关键词 HYPERTENSION klf4 klf5 single-nucleotide polymorphism mRNA expression antihypertensive drugs
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miR-141-3p靶向调控KLF9对前列腺癌细胞血管生成拟态形成的影响及其机制探究 被引量:1
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作者 刘彼得 王书恒 +4 位作者 李循 靳宏勇 张小安 董强 李九智 《中国细胞生物学学报》 2025年第1期18-27,共10页
该文探讨了miR-141-3p对前列腺癌(prostate cancer,PCa)细胞血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)形成的作用及其机制。培养人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)和PCa细胞系(PC-3、LNCaP、DU145),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中miR... 该文探讨了miR-141-3p对前列腺癌(prostate cancer,PCa)细胞血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)形成的作用及其机制。培养人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)和PCa细胞系(PC-3、LNCaP、DU145),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中miR-141-3p的表达情况,Western blot检测细胞中KLF9蛋白质的表达情况,根据检测结果及该研究的目的,选择LNCaP和DU145细胞系进行后续实验。将两种细胞均分为miR-141-3p抑制组、miR-141-3p对照组、KLF9过表达组和KLF9对照组,采用miR-141-3p抑制剂下调PCa细胞miR-141-3p的表达,或采用过表达质粒上调PCa细胞KLF9的表达后,通过三维培养实验、CCK-8实验、划痕实验、Transwell实验检测细胞的VM形成、增殖、迁移及侵袭能力;通过Western blot检测干细胞标志蛋白的表达情况,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测CD133^(+)细胞比例,以评估PCa细胞的干细胞特性。双荧光素酶报告实验和功能回复实验验证miR-141-3p和KLF9的靶向关系。结果显示,下调miR-141-3p或上调KLF9的表达均能显著抑制PCa细胞的VM形成及干细胞特性,并能显著抑制PCa细胞的增殖、迁移、侵袭;miR-141-3p能够通过靶向抑制KLF9的表达,从而促进PCa细胞的VM形成及增强干细胞特性。该研究得出,miR-141-3p通过靶向调控KLF9调节PCa细胞的VM形成,该调节作用可能是通过调控PCa细胞的干细胞特性实现的。 展开更多
关键词 miR-141-3p klf9 前列腺癌 血管生成拟态 肿瘤干细胞
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高转移性结直肠癌细胞通过分泌KLF4诱导M2型巨噬细胞极化对结直肠癌免疫逃逸的影响 被引量:1
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作者 尚靖 路畅 +4 位作者 侯阳波 袁沁 李炜 王海静 陈进宝 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1036-1042,共7页
目的探讨高转移性结直肠癌细胞HCT116诱导M2型巨噬细胞极化对结直肠癌免疫逃逸的影响及其机制。方法将结直肠癌细胞条件培养基(CM)与佛波酯(PMA)诱导的M0型巨噬细胞共培养后,通过流式细胞术、实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和酶联免疫... 目的探讨高转移性结直肠癌细胞HCT116诱导M2型巨噬细胞极化对结直肠癌免疫逃逸的影响及其机制。方法将结直肠癌细胞条件培养基(CM)与佛波酯(PMA)诱导的M0型巨噬细胞共培养后,通过流式细胞术、实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)观察M2型巨噬细胞极化状态;将CMM0、CMSW480-Mφ和CM_(HCT116-Mφ)与HCT116细胞共培养后,通过Western blot和qPCR检测程序性死亡受体配体1(PD-L1)的表达情况,同时将刺激后的HCT116细胞与人源T淋巴细胞共培养,检测HCT116细胞存活情况及上清液中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)水平;用Western blot、qPCR和ELISA检测SW480和HCT116细胞中Kruüppel样因子4(KLF4)表达差异;用KFL4抑制剂肯帕罗酮(Ken)预处理HCT116细胞后,将CM_(HCT116-Mφ)和CM_((HCT116+Ken)-Mφ)与M0型巨噬细胞共培养,通过流式细胞术、qPCR、ELISA实验观察M2型巨噬细胞极化状态。将CM_(HCT116-Mφ)和CM_((HCT116+Ken)-Mφ)与HCT116细胞共培养后,通过Western blot和qPCR检测PD-L1的表达情况。结果M0型巨噬细胞在CM刺激后,HCT116-Mφ细胞中CD11b+CD206+细胞比例更高,M2型巨噬细胞标志物白细胞介素(IL)-10及转化生长因子-β(TGF-β)表达更高;相比于CMSW480-Mφ组,CM_(HCT116-Mφ)组的PD-L1蛋白表达水平更高;与T淋巴细胞共培养后,CM_(HCT116-Mφ)组细胞存活最多,同时TNF-α和IFN-γ水平最低;加入Ken后,M2型巨噬细胞极化比例及标志物均降低。与CM_(HCT116-Mφ)组相比,CM_((HCT116+Ken)-Mφ)组HCT116细胞PD-L1表达下降。结论高转移性结直肠癌细胞通过分泌KLF4诱导M2型巨噬细胞极化促进结直肠癌细胞PD-L1表达,促进肿瘤免疫逃逸。该研究有望为提高临床免疫治疗效果提供潜在靶点。 展开更多
关键词 高转移性结直肠癌细胞 klf4 肿瘤相关巨噬细胞 免疫逃逸 PD-L1
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KLF4通过抑制脂肪酸合成抑制MASLD的发生
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作者 陈雨婷 樊丽君 +3 位作者 潘紫妍 王翠喆 张婷 张君 《石河子大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期397-404,共8页
目的研究KLF4在代谢功能障碍相关脂肪变性肝病(Metabolic dysfunction-associated steatotic liver disease,MASLD)发生过程中的作用,并初步探究其可能的分子机制。方法将12只C57BL/6雄性小鼠分为普通饮食组(Normal Chow Diet,ND,n=6)... 目的研究KLF4在代谢功能障碍相关脂肪变性肝病(Metabolic dysfunction-associated steatotic liver disease,MASLD)发生过程中的作用,并初步探究其可能的分子机制。方法将12只C57BL/6雄性小鼠分为普通饮食组(Normal Chow Diet,ND,n=6)和高脂饮食组(High Fat Diet,HFD,n=6),监测其生理指标变化,分析肝脏组织中KLF4的蛋白和mRNA表达水平。使用游离脂肪酸(Free fatty acids,FFA)处理人肝癌细胞HepG2和小鼠肝癌细胞Hepa1-6构建脂代谢紊乱细胞模型。体外细胞实验分为过表达KLF4并用游离脂肪酸处理组(OE-KLF4-FFA)及其对照组(NC-FFA),敲低KLF4并用游离脂肪酸处理组(Si-KLF4-FFA)及其对照组(NC-FFA),通过酶法检测细胞内甘油三酯(Triglyceride,TG)和胆固醇(Cholesterol,CHO)水平;实时荧光定量聚合酶链反应检测KLF4以及脂质合成相关因子脂肪酸合酶(Fatty acid synthase,FASN)、甾醇调节元件结合蛋白1(Sterol-regulatory element binding proteins,SREBP1)和过氧化物酶增殖物激活受体γ(Peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)的mRNA表达水平;蛋白质免疫印记法检测KLF4以及脂质合成相关因子FASN、SREBP1和PPARγ的蛋白表达水平;油红O染色观察细胞内脂滴积累情况。结果HFD组小鼠肝脏组织中KLF4的蛋白和mRNA表达水平显著低于ND组,FASN、SREBP1和PPARγ的mRNA表达水平显著高于ND组(P<0.05,P<0.01,P<0.001);HepG2细胞和Hepa1-6细胞FFA处理组KLF4的mRNA和蛋白表达水平低于对照组(P<0.05,P<0.01);HepG2细胞和Hepa1-6细胞中过表达KLF4改善脂质积累,降低脂质合成相关因子的mRNA和蛋白表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001);与之相反,HepG2细胞和Hepa1-6细胞中敲低KLF4加剧脂质积累,增加脂质合成相关因子的mRNA和蛋白表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论KLF4通过负调控脂肪酸的合成抑制MASLD的发生。 展开更多
关键词 klf4 代谢功能障碍相关脂肪变性肝病 转录因子 脂质合成
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结直肠癌组织KLF6、REG4表达与临床病理参数的相关性
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作者 袁森辅 吴和刚 +3 位作者 张续 袁密 朱坤婷 庄翔 《保健医学研究与实践》 2025年第1期48-53,共6页
目的探究KLF转录因子6(KLF6)、再生基因4(REG4)与结直肠癌患者临床病理参数的关系。方法选取2021年6月—2022年6月四川某医院收治的93例结直肠癌患者为研究对象,术中收集患者结直肠癌组织及癌旁组织,分析KLF6、REG4表达情况,采用Spearma... 目的探究KLF转录因子6(KLF6)、再生基因4(REG4)与结直肠癌患者临床病理参数的关系。方法选取2021年6月—2022年6月四川某医院收治的93例结直肠癌患者为研究对象,术中收集患者结直肠癌组织及癌旁组织,分析KLF6、REG4表达情况,采用Spearman相关分析结直肠癌组织中KLF6与REG4的表达相关性,根据结直肠癌患者生存情况将患者分为存活组与死亡组,采用Cox回归分析结直肠癌患者预后影响因素,Kaplan-Meier分析KLF6、REG4表达情况和结直肠癌患者预后的关系。结果结直肠癌组织中KLF6阴性表达率(77.42%)高于癌旁组织(46.24%)(P<0.05),结直肠癌组织中REG4阳性表达率(52.69%)高于癌旁组织(29.03%)(P<0.05)。结直肠癌组织中KLF6表达与REG4表达呈负相关(rs=-0.312,P=0.002)。结直肠癌患者癌组织中KLF6、REG4表达情况与TNM分期、淋巴结转移情况、分化程度有显著关系(P<0.05)。单因素分析结果显示:TNM分期,淋巴结转移情况,分化程度,KLF6、REG4表达水平是结直肠癌患者预后的影响因素(HR=1.869、3.937、0.515、0.726、2.836,P<0.05)。多因素分析结果显示:TNM分期为高分期、淋巴结转移、REG4升高是结直肠癌患者预后的危险因素(HR=2.582、1.452、2.653,P<0.05),高分化程度、KLF6升高是结直肠癌患者预后的保护因素(HR=0.455、0.486,P<0.05)。KLF6阳性表达结直肠癌患者2年总生存率(90.48%)高于KLF6阴性表达结直肠癌患者2年总生存率(62.50%)(Log Rankχ^(2)=5.670,P=0.017),REG4阴性表达结直肠癌患者2年总生存率(79.55%)高于REG4阳性表达结直肠癌患者2年总生存率(59.18%)(Log Rankχ^(2)=5.507,P=0.019)。结论结直肠癌患者癌组织中KLF6、REG4表达情况与TNM分期、淋巴结转移情况、分化程度有关,还与结直肠癌的发生发展有关。此外,KLF6阴性表达、REG4阳性表达不利于患者预后。 展开更多
关键词 结直肠癌 klf转录因子6 再生基因4 临床病理参数
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miR-153-3p通过靶向KLF5抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移、侵袭并促进凋亡
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作者 乔金婉 王生兰 +4 位作者 刘川川 范春梅 丁玲 邢艳霞 苏占海 《中国高原医学与生物学杂志》 2025年第1期33-47,共15页
目的探究miR-153-3p通过靶向结合KLF5对卵巢癌细胞的增殖、迁移、侵袭及促进凋亡的影响。方法通过GEPIA软件和Kaplan-Meier曲线分析KLF5在426例卵巢癌组织中的基因表达情况及对卵巢癌患者生存的影响;使用qPCR法检测卵巢癌组织和邻近正... 目的探究miR-153-3p通过靶向结合KLF5对卵巢癌细胞的增殖、迁移、侵袭及促进凋亡的影响。方法通过GEPIA软件和Kaplan-Meier曲线分析KLF5在426例卵巢癌组织中的基因表达情况及对卵巢癌患者生存的影响;使用qPCR法检测卵巢癌组织和邻近正常组织以及卵巢癌细胞系中KLF5的基因表达水平;采用Western Blot法检测卵巢癌组织和邻近正常组织以及卵巢癌细胞系中KLF5蛋白的表达水平;采用生物信息学工具和双荧光素酶基因实验确定KLF5的潜在靶基因(miR-153-3p),并通过TCGA数据库分析miR-153-3p表达与卵巢癌患者生存结果之间的相关性。检测miR-153-3p在卵巢癌组织和卵巢癌细胞系中的表达;转染过表达miR-153-3p质粒,检测其对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,同时通过qPCR和Western Blot法检测KLF5 mRNA和蛋白表达情况,并检测miR-153-3p与KLF5在卵巢癌组织中的表达情况。恢复KLF5表达后,通过CCK-8、transwell实验和细胞集落形成实验检测miR-153-3p对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果KLF5基因和蛋白在卵巢癌组织中的表达水平高于邻近正常组织,同时KLF5 mRNA和蛋白在卵巢癌细胞系尤其是OVCAR3、SW626细胞系中表达上调。生物信息学和双荧光素酶基因实验确定KLF5为卵巢癌细胞中miR-153-3p的直接靶基因。miR-153-3p在卵巢癌组织和卵巢癌细胞系中的表达水平明显低于邻近正常卵巢组织和非恶性细胞系中的表达水平,尤其在OVCAR3、SW626细胞系中降低更为明显。转染miR-153-3p后证实miR-153-3p过表达能抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进卵巢癌细胞凋亡。进一步分析miR-153-3p和KLF5在卵巢癌细胞中的关系,miR-153-3p过表达组(miR-153-3p mimic)的KLF5 mRNA和蛋白与NC-mimic组相比表达率明显降低,miR-153-3p在卵巢癌组织中的表达水平与KLF5水平呈负相关(P<0.0001)。miR-153-3p mimic与pcDNA3.1-KLF5共转染可减轻miR-153-3p过表达对KLF5表达水平的抑制作用;miR-153-3p与pcDNA3.1-KLF5共转染可消除miR-153-3p过表达对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用,并促进卵巢癌细胞凋亡。结论miR-153-3p靶向结合KLF5抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭并促进凋亡。 展开更多
关键词 klf5 卵巢癌 miR-153-3p 细胞 增殖 迁移 凋亡
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卵巢癌组织KLF5的表达及与患者临床病理特征、预后的相关性
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作者 杨至纯 朱晓华 《现代实用医学》 2025年第2期129-133,共5页
目的 探讨转录因子Krüppel样因子5(KLF5)在卵巢上皮性癌(EOC)患者中的表达及与患者临床病理特征、生存预后的关系。方法 回顾性分析2013年1月至2019年1月丽水市中心医院收治的98例EOC患者的临床资料。采用COX比例风险模型预测影响... 目的 探讨转录因子Krüppel样因子5(KLF5)在卵巢上皮性癌(EOC)患者中的表达及与患者临床病理特征、生存预后的关系。方法 回顾性分析2013年1月至2019年1月丽水市中心医院收治的98例EOC患者的临床资料。采用COX比例风险模型预测影响EOC患者生存预后的危险因素;采用Kaplan-Meier生存曲线分析KLF5水平与EOC患者生存预后的关系;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,以曲线下面积(AUC)评估KLF5对EOC患者生存预后的预测效果;采用染色质免疫沉淀测序分析卵巢癌组织中KLF5对细胞周期蛋白和凋亡蛋白的结合丰度,并检测周期蛋白依赖性激酶4 (CDK4)、CDK6、B淋巴细胞瘤-2基因(BCL2)及BCL2相关X蛋白(BAX)的mRNA表达水平。结果 转录组测序结果显示KLF5位于卵巢癌组织高表达基因前列。卵巢癌组织KLF5mRNA和蛋白表达水平均高于癌旁组织(均P <0.05);KLF5高表达组Ⅲ~Ⅳ期、低分化、淋巴结转移、腹膜转移及存在腹水患者占比显著高于KLF5低表达组(均P <0.05);多因素COX分析显示,淋巴结转移、腹膜转移及KLF5血清水平与EOC患者生存预后相关(均P<0.05);与KLF5低表达组相比,KLF5高表达组生存期较差[HR=1.37(1.06~1.77),P<0.05];血清KLF5预测EOC患者预后的准确度为0.854,AUC为0.893(95%CI:0.860~0.952)。卵巢癌组织中KLF5对BAX结合丰度显著降低,但与BCL2、CDK6和CDK4结合丰度显著增强(均P<0.05)。卵巢癌组织中BAX mRNA表达显著低于癌旁组织,而BCL2、CDK6和CDK4 mRNA表达显著高于癌旁组织(均P <0.05)。结论KLF5在EOC组织中高表达,并与肿瘤恶性程度呈正相关,其相关机制可能与KLF5对细胞周期蛋白和凋亡蛋白的转录调控相关。 展开更多
关键词 卵巢癌 klf5 临床病理特征 癌症转移 生存预后
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lncRNA CCDC183-AS1调节miR-628-5p/KLF12信号轴对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 王瑾 高倩 +1 位作者 刁丛 刘蓬 《中国优生与遗传杂志》 2025年第5期1040-1046,共7页
目的该研究旨在探讨长链非编码RNA(lncRNA)CCDC183-AS1调节miR-628-5p/KLF转录因子12(KLF12)信号通路对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法对宫颈癌细胞(CaSki、HeLa、SiHa、MS751)进行表型筛选,选择CaSki细胞分为si-NC组、si-CCDC18... 目的该研究旨在探讨长链非编码RNA(lncRNA)CCDC183-AS1调节miR-628-5p/KLF转录因子12(KLF12)信号通路对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法对宫颈癌细胞(CaSki、HeLa、SiHa、MS751)进行表型筛选,选择CaSki细胞分为si-NC组、si-CCDC183-AS1组、mimic NC组、miR-628-5p mimic组、si-CCDC183-AS1+inhibitor NC组、si-CCDC183-AS1+miR-628-5p inhibitor组。qRT-PCR检测lncRNA CCDC183-AS1、miR-628-5p、KLF12 mRNA表达水平;EdU检测CaSki细胞增殖;Transwell检测CaSki细胞迁移和侵袭情况;流式检测CaSki细胞凋亡率;Western blot检测KLF12蛋白表达;双荧光素酶检测lncRNA CCDC183-AS1与miR-628-5p、miR-628-5p与KLF12的相互关系。结果与人正常宫颈细胞相比,宫颈癌细胞(CaSki、HeLa、SiHa、MS751)miR-628-5p表达降低,CCDC183-AS1和KLF12 mRNA表达提高,CaSki细胞表型变化最明显(P<0.05);与si-NC组比较,si-CCDC183-AS1组CaSki中CCDC183-AS1和KLF12表达、细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,miR-628-5p表达和凋亡率升高(P<0.05);与si-CCDC183-AS1+inhibitor NC组比较,si-CCDC183-AS1+miR-628-5p inhibitor组CaSki中KLF12表达、细胞增殖、迁移和侵袭能力提高,miR-628-5p表达和凋亡率降低(P<0.05);双荧光素酶检测显示,lncRNA CCDC183-AS1与miR-628-5p、miR-628-5p与KLF12存在靶向关系(P<0.05)。结论lncRNA CCDC183-AS1可能通过抑制miR-628-5p,促进KLF12表达,促进宫颈癌细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 lncRNA CCDC183-AS1 miR-628-5p klf12 宫颈癌细胞 恶性生物学行为
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KLF1在急性髓系白血病中的表达及临床意义研究
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作者 袁佳佳 邵欢 《生物技术进展》 2025年第5期904-912,共9页
急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是一类以髓系细胞异常增殖及分化阻滞为特征的恶性造血性疾病。利用数据库中患者的转录组信息和临床信息分析Krueppel样因子1(Krueppel like factor 1,KLF1)在AML患者中的表达情况,使用R语... 急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是一类以髓系细胞异常增殖及分化阻滞为特征的恶性造血性疾病。利用数据库中患者的转录组信息和临床信息分析Krueppel样因子1(Krueppel like factor 1,KLF1)在AML患者中的表达情况,使用R语言中的“Survival”和“Survminer”包进行生存分析。将患者分为KLF1高表达和低表达2组,进行差异基因功能富集分析。采用STRING在线数据库构建差异基因的蛋白互作网络图,利用Cytoscape软件筛选出核心基因,通过“pRRophetic”包预测潜在药物IC_(50)值,并对靶向KLF1低表达药物进行筛选。结果发现,KLF1在AML患者中表达显著下调,且KLF1低表达与不良预后相关。在KLF1低表达组和高表达组之间共筛选出1017个差异基因,差异基因功能分析表明KLF1低表达组富集在免疫应答相关通路。筛选出CD4是KLF1低表达导致AML预后不良的关键基因。药物敏感性预测表明KLF1低表达细胞对细胞周期、激酶相关抑制剂具有敏感性。研究结果提示KLF1低表达可预测AML不良预后,可进一步为AML的诊断和治疗提供新的方案。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 klf1 差异基因表达 蛋白互作网络
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子宫内膜样癌中miR-613与KLF6的表达及相关性
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作者 许晓 《锦州医科大学学报》 2025年第2期72-77,共6页
目的 对子宫内膜样癌(endometrioid carcinoma, EC)中miR-613和Kruppel样因子6(kruppel-like factor 6,KLF6)的表达予以检测,深入研讨它们的关联性及其临床意义。方法 选取52例接受手术治疗的子宫内膜样癌患者设定为观察组,同时选取因... 目的 对子宫内膜样癌(endometrioid carcinoma, EC)中miR-613和Kruppel样因子6(kruppel-like factor 6,KLF6)的表达予以检测,深入研讨它们的关联性及其临床意义。方法 选取52例接受手术治疗的子宫内膜样癌患者设定为观察组,同时选取因子宫肌瘤行子宫全切后留存的子宫内膜组织的患者52例作为对照组。通过实时荧光定量PCR法对术后组织里miR-613的表达进行检测,利用免疫组化手段检测KLF6的表达。运用Pearson相关分析以及K-M生存分析展开分析。结果 观察组miR-613的表达量显著低于对照组,观察组中KLF6的阳性率明显超出对照组,结果显示,观察组中miR-613和KLF6的表达与研究对象的肿瘤肌层的深度、患者的病理分级结果和患者宫颈管累及的程度有密切的关系。观察组miR-613和KLF6呈现负相关性,它们的表达和术后生存时间存在关联。结论 在子宫内膜样癌中miR-613和KLF6都出现异常表达且具备负相关性,联合检测miR-613和KLF6的表达对于判定肿瘤预后有可能具有一定的价值。 展开更多
关键词 子宫内膜样癌 miR-613 klf-6 相关分析 预后
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KLF6、IGF-1R及Ki-67蛋白在皮肤黑色素瘤中的表达及临床意义
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作者 吴刚 罗承逊 +3 位作者 王楠 杨露 陈易华 曾冬梅 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第10期1853-1856,共4页
目的探究KLF6、IGF-1R及Ki-67蛋白在皮肤黑色素瘤中的表达及临床意义。方法选取2021年3月至2023年6月期间四川大家医学检验中心接收的108例黑色素瘤患者作为观察组,选取同期患98例色素痣患者作为对照组。检测两组KLF6、IGF-1R、Ki-67的... 目的探究KLF6、IGF-1R及Ki-67蛋白在皮肤黑色素瘤中的表达及临床意义。方法选取2021年3月至2023年6月期间四川大家医学检验中心接收的108例黑色素瘤患者作为观察组,选取同期患98例色素痣患者作为对照组。检测两组KLF6、IGF-1R、Ki-67的表达情况;分析KLF6、IGF-1R、Ki-67与黑色素瘤临床特征的关系;随访记录黑色素瘤患者预后情况,比较不同预后患者相关临床资料;分析影响皮肤黑色素瘤预后的危险因素。结果观察组中KLF6阳性表达率低于对照组,IGF-1R、Ki-67阳性表达率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);低分化、出现淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期及有深肌浸润患者KLF6蛋白阳性表达率均低于高分化、无淋巴结转移、TNM分期0~Ⅱ期及无深肌浸润患者,低分化、出现淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期及有深肌浸润患者IGF-1R及Ki-67蛋白阳性率均高于于高分化、无淋巴结转移、TNM分期0~Ⅱ期及无深肌浸润患者,差异有统计学意义(P<0.05);预后不良组出现淋巴结转移占比、有深肌层浸润KLF6蛋白阳性表达率显著低于预后良好组,出现淋巴结转移占比、有深肌层浸润IGF-1R及Ki-67阳性表达率显著高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);经多元Logistic回归分析可知,淋巴结转移、深肌层浸润、KLF6阴性、IGF-1R阳性、Ki-67阳性是影响黑色素瘤患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论KLF6在黑色素瘤中呈低表达,IGF-1R、Ki-67在黑色素瘤中呈高表达,三指标可以反映黑色素瘤患者病情程度及评估预后情况。 展开更多
关键词 klf6 IGF-1R KI-67 黑色素瘤
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宫颈癌组织中KLF12、STAT3的表达及其与临床病理特征和预后的相关性 被引量:1
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作者 何永亮 章培 +4 位作者 吴宁 蒋炳林 成永莲 欧阳海英 涂媛 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第7期1305-1310,共6页
目的:分析宫颈癌中Krüpple样转录因子12(KLF12),信号转导和转录激活因子3(STAT3)的表达,并探讨其与临床病理特征和预后的相关性。方法:收集2017年07月至2020年07月收治于本院的82例宫颈癌患者活检及手术宫颈癌标本。采用免疫组化... 目的:分析宫颈癌中Krüpple样转录因子12(KLF12),信号转导和转录激活因子3(STAT3)的表达,并探讨其与临床病理特征和预后的相关性。方法:收集2017年07月至2020年07月收治于本院的82例宫颈癌患者活检及手术宫颈癌标本。采用免疫组化法检测患者宫颈癌组织及宫颈癌KLF12、STAT3表达情况。通过χ^(2)检验分析KLF12、STAT3表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系。采用多因素Cox回归分析宫颈癌患者预后的相关因素。绘制Kaplan-Meier曲线分析KLF12、STAT3表达与宫颈癌患者3年生存率的关系。结果:宫颈癌组织KLF12阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05),STAT3阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05)。不同年龄、产次、月经状态、肿瘤直径、组织学分类、浸润深度患者宫颈癌组织中KLF12、STAT3表达差异无统计学意义(P>0.05)。FIGO分期Ⅱ期、低分化、有淋巴结转移的宫颈癌患者组织中KLF12、STAT3阳性表达率较高(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,FIGO分期Ⅱ期、KLF12、STAT3阳性表达均是宫颈癌患者3年内死亡的独立危险因素(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线结果显示,KLF12阳性表达患者3年生存率66.66%(28/42)低于KLF12阴性表达患者90.00%(36/40)(P<0.05),STAT3阳性表达患者3年生存率70.49%(43/61)低于STAT3阴性表达患者100%(21/21)(P<0.05)。结论:宫颈癌组织中KLF12、STAT3阳性表达升高,两者异常表达与FIGO分期、分化程度、淋巴结转移及预后有关,可作为用于评估预后的生物标志物。 展开更多
关键词 宫颈癌 klf12基因 信号转导和转录激活因子3 临床病理特征 预后
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老年胃癌患者癌组织KLF17、TP53蛋白表达及临床意义 被引量:1
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作者 胡成乙 李莹莹 孙鹰 《老年医学与保健》 CAS 2024年第5期1382-1387,共6页
目的观察老年胃癌患者组织Krüppel样因子17(KLF17)、TP53蛋白表达及分析其临床意义。方法选取2021年9月—2023年5月哈尔滨医科大学附属第四医院消化内科接诊的108例老年胃癌病例,采用免疫组织化学法测定患者的癌组织、癌旁组织KLF1... 目的观察老年胃癌患者组织Krüppel样因子17(KLF17)、TP53蛋白表达及分析其临床意义。方法选取2021年9月—2023年5月哈尔滨医科大学附属第四医院消化内科接诊的108例老年胃癌病例,采用免疫组织化学法测定患者的癌组织、癌旁组织KLF17、TP53蛋白表达,并分析其与胃癌患者临床病理参数、预后的相关性。结果癌组织KLF17、TP53蛋白表达阳性率分别为37.04%、12.96%,均低于癌旁组织66.67%、44.44%(均P<0.05);癌组织中KLF17蛋白表达水平与肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移、脉管侵犯呈负相关,TP53蛋白表达与肿瘤直径、TNM分期呈负相关(P<0.05);癌组织KLF17、TP53蛋白阳性表达者无进展生存时间(PFS)、总生存时间(OS)均长于阴性表达者(均P<0.05)。结论老年胃癌患者癌组织KLF17蛋白、TP53蛋白阳性表达比例可能低,且二者均与其临床病理可能呈独立负相关,并影响患者预后,有一定临床检测意义。 展开更多
关键词 老年 胃癌 癌组织 癌旁组织 klf17 TP53蛋白 临床意义
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彝药痹Ⅱ号介导KLF2调控PI3K/Akt/mTOR通路对类风湿性关节炎小鼠模型表达及生物学行为特性影响的机制研究
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作者 周树成 顾玲丽 +1 位作者 普文静 邱伟明 《河北医学》 CAS 2024年第11期1809-1814,共6页
目的:探讨彝药痹Ⅱ号介导KLF2调控PI3K/Akt/mTOR通路对类风湿性关节炎小鼠模型表达及生物学行为特性影响的机制。方法:80只昆明种小鼠分为对照组、模型组、彝药痹Ⅱ号组低、高剂量组;除对照组外,其余各组通过左后足趾皮内注射弗氏完全... 目的:探讨彝药痹Ⅱ号介导KLF2调控PI3K/Akt/mTOR通路对类风湿性关节炎小鼠模型表达及生物学行为特性影响的机制。方法:80只昆明种小鼠分为对照组、模型组、彝药痹Ⅱ号组低、高剂量组;除对照组外,其余各组通过左后足趾皮内注射弗氏完全佐剂建立小鼠RA模型;彝药痹Ⅱ号组低、高剂量组于造模成功第1天开始给予相应剂量药物灌胃,持续给予3个月,对照组和模型组给予等体积生理盐水。试验结束后测定小鼠PEL、关节炎症积分、足趾容积;RT-PCR法、蛋白印迹法、免疫组化法测定小鼠踝关节软骨KLF2、PI3K、Akt、mTOR水平。结果:模型组小鼠PEL低于对照组,关节炎症积分、足趾容积高于对照组(P<0.05);彝药痹Ⅱ号低、高剂量组小鼠PEL高于对照组,关节炎症积分、足趾容积低于对照组(P<0.05);且随着彝药痹Ⅱ号剂量的逐渐升高,各剂量组小鼠PEL逐渐升高,关节炎症积分、足趾容积逐渐降低(P<0.05)。模型组小鼠踝关节KLF2、PI3K、Akt、mTOR mRNA和蛋白表达水平高于对照组(P<0.05);与模型组比较,彝药痹Ⅱ号低、高剂量组小鼠踝关节KLF2、PI3K、Akt、mTOR mRNA和蛋白表达水平低于对照组(P<0.05);且随着彝药痹Ⅱ号剂量的逐渐升高,各剂量组小鼠踝关节KLF2、PI3K、Akt、mTOR mRNA和蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05)。结论:彝药痹Ⅱ号对小鼠类风湿性关节炎具有明显治疗作用,能明显抑制小鼠踝关节软骨滑膜炎症反应;其机制与彝药痹Ⅱ号抑制类风湿性关节炎小鼠踝关节软骨炎症KLF2-PI3K-Akt-mTOR通路的激活有关。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 彝药痹Ⅱ号 klf2 PI3K/Akt/mTOR通路
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KLF4通过mTOR/P70S6K途径激活细胞自噬减轻高糖诱导的足细胞损伤
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作者 冯琦 布合力其·麦麦提 +1 位作者 莫颖 张蕾 《中国中西医结合肾病杂志》 2024年第4期304-309,共6页
目的:分析Krüppel样转录因子4(KLF4)对高糖诱导的足细胞损伤的影响及相关分子机制。方法:体外培养MPC5细胞,将MPC5细胞分为对照组(Control组)、高糖组(HG组)、高糖+空载质粒对照组(HG+NC组)、高糖+KLF4过表达组(HG+KLF4组)。采用qR... 目的:分析Krüppel样转录因子4(KLF4)对高糖诱导的足细胞损伤的影响及相关分子机制。方法:体外培养MPC5细胞,将MPC5细胞分为对照组(Control组)、高糖组(HG组)、高糖+空载质粒对照组(HG+NC组)、高糖+KLF4过表达组(HG+KLF4组)。采用qRT-PCR法检测细胞中KLF4 mRNA表达水平,CCK-8法测定细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞中相关蛋白表达水平。结果:与Control组比较,HG组MPC5细胞中KLF4 mRNA和蛋白表达量降低,细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,细胞中突触足蛋白(synaptopodin)、足蛋白(podocin)、肾蛋白(nephrin)、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、Beclin1蛋白表达量降低,P62蛋白表达量、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)/mTOR和磷酸化核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(p-P70S6K)/P70S6K比值升高;差异均有统计学意义(P<0.05)。与HG组比较,HG+KLF4组MPC5细胞中KLF4 mRNA和蛋白表达量升高,细胞增殖活性升高,细胞凋亡率降低,细胞中synaptopodin、podocin、nephrin、LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白表达量升高,P62蛋白表达量、p-mTOR/mTOR和p-P70S6K/P70S6K比值降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:KLF4通过激活足细胞自噬减轻高糖诱导的足细胞损伤,其作用机制可能与调控mTOR/P70S6K信号通路有关。 展开更多
关键词 klf4 足细胞 自噬 增殖 凋亡 mTOR/P70S6K信号通路
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异土木香内酯通过miR-5195-3p/KLF5/N-cadherin对肝纤维化的作用机制
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作者 梁倞 林红霞 +4 位作者 麻文婕 张美燕 吴瑕 陈宁 霍琳 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2024年第11期1487-1493,共7页
目的探讨异土木香内酯(isoalantolactone,IAL)通过miR-5195-3p/KLF5/N-cadherin对肝纤维化的作用机制。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、IAL低、中、高剂量(IAL组)、IAL+miR-5195-3p mimic组和奥贝胆酸组,每组20只。采用ELISA法检... 目的探讨异土木香内酯(isoalantolactone,IAL)通过miR-5195-3p/KLF5/N-cadherin对肝纤维化的作用机制。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、IAL低、中、高剂量(IAL组)、IAL+miR-5195-3p mimic组和奥贝胆酸组,每组20只。采用ELISA法检测炎症因子水平,HE染色和天狼星红染色观察病理学改变情况和纤维化分级、评分情况,比色法测定氧化和抗氧化酶水平;qRT-PCR和Western blotting检测肝脏组织各因子mRNA和相关蛋白表达。结果与正常组相比,模型组ALT、AST、IL-6、IL-β、TNF-α、MDA、KLF5 mRNA、N-cadherin mRNA水平及肝纤维化分级、Ishak评分明显升高(P均<0.05)。与模型组相比,IAL低、中、高剂量组和奥贝胆酸组的以上各项指标依次显著降低(P均<0.05)。与正常组相比,模型组的SOD、GSH-Px、miR-5195-3p水平明显降低(P均<0.05),与模型组相比,IAL低、中、高剂量组和奥贝胆酸组的以上指标水平依次显著升高(P均<0.05)。与正常组相比,模型组大鼠肝脏小叶炎症明显升高,并发生严重损伤,与模型组相比,IAL低、中、高剂量组和奥贝胆酸组肝脏病理状态依次减轻。荧光素酶报告发现,KLF5是miR-5195-3p的重要靶点。与IAL组相比,IAL+miR-5195-3p mimic组肝脏损伤明显减轻,纤维化程度明显改善。结论IAL可以明显改善肝功能及炎症因子水平,增强肝脏的抗氧化能力,减轻肝脏脂质过氧化损伤程度,对肝脏纤维化具有一定的防治疗作用,这可能与IAL通过提高miR-5195-3p表达,降低KLF5和N-cadherin水平有关。 展开更多
关键词 肝纤维化 异土木香内酯 抗氧化 miR-5195-3p klf5 N-CADHERIN
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miR-29b通过KLF4调控血管平滑肌细胞增殖及表型蛋白表达
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作者 蔡君艳 朱迪迪 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期615-620,共6页
目的探讨微小RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)通过靶向作用于Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)信号通路对血管平滑肌细胞增殖及表型蛋白表达的影响。方法将血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)分为... 目的探讨微小RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)通过靶向作用于Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)信号通路对血管平滑肌细胞增殖及表型蛋白表达的影响。方法将血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)分为4组:无义序列对照组(control+NC)、miR-29b过表达对照组(control+miR-29b)、无义序列模型组(ox-LDL+NC)、miR-29b过表达模型组(ox-LDL+miR-29b)。对照组细胞正常培养;模型组细胞采用80 mg/L氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导24 h建立模型。细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测VSMCs的增殖情况;实时荧光定量PCR检测miR-29b、单核细胞化学趋化因子1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、MCP-3、α平滑肌肌动蛋白(smooth muscleα-actin,SMα-actin)、平滑肌肌球蛋白重链(smooth muscle myosin heavy chain,SM MHC)及KLF4的mRNA表达水平;酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测培养上清中MCP-1、MCP-3水平;Western blot检测蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-29b对KLF4的靶向作用。结果ox-LDL刺激VSMCs后,细胞中miR-29b表达量显著下降。与ox-LDL+NC组相比,ox-LDL+miR-29b组细胞增殖减少,炎症因子MCP-1和MCP-3的表达降低,收缩表型蛋白SMα-actin、SM MHC的表达显著升高,KLF4表达下降。双荧光素酶报告基因实验结果表明,miR-29b能与KLF4 mRNA的3′端非翻译区(3′UTR)结合。过表达KLF4可抑制miR-29b的作用。结论miR-29b可靶向作用于KLF4,调控ox-LDL诱导的VSMCs增殖、炎症因子的表达及表型蛋白表达的变化。 展开更多
关键词 微小RNA-29b klf4 血管平滑肌细胞 氧化低密度脂蛋白
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基于CRISPR/Cas9技术构建猪KLF4基因敲除细胞系及其对细胞活性的影响分析 被引量:2
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作者 董娇 陆繁 +3 位作者 方晓敏 陈瑜哲 包文斌 王海飞 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期893-902,共10页
【目的】试验旨在利用CRISPR/Cas9技术构建Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)基因敲除的猪小肠上皮细胞,并探究KLF4基因敲除对于细胞活性和细胞周期的影响。【方法】在猪KLF4基因转录本第1外显子区域设计3条sgRNAs(... 【目的】试验旨在利用CRISPR/Cas9技术构建Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)基因敲除的猪小肠上皮细胞,并探究KLF4基因敲除对于细胞活性和细胞周期的影响。【方法】在猪KLF4基因转录本第1外显子区域设计3条sgRNAs(sgRNA1、sgRNA2和sgRNA3),经退火形成的双链DNA与线性化pGK1.1载体连接,产物转化大肠杆菌Top10感受态细胞进行鉴定,并将重组载体转染至猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)。PCR扩增敲除位点附近序列,并通过测序判断sgRNA敲除效率;利用CruiserTMEnzyme酶切鉴定阳性细胞克隆,通过TA克隆测序鉴定敲除序列;利用Western blotting检测基因敲除细胞中KLF4蛋白表达情况。利用CCK-8和流式细胞术检测KLF4基因敲除后细胞活性和细胞周期的变化。【结果】重组载体测序结果显示,sgRNAs与pGK1.1成功连接。分析敲除效率发现,3个sgRNAs均可对靶序列进行敲除,其中sgRNA3有较高的敲除效率。PCR产物经CruiserTMEnzyme酶切筛选出2个阳性单克隆细胞。TA克隆测序分析发现,KLF4基因2个等位基因序列分别缺失116和137 bp。Western blotting结果表明,KLF4基因敲除细胞中未见KLF4蛋白表达。细胞活性及细胞周期分析显示,敲除KLF4基因极显著抑制了细胞活性(P<0.01),并导致G0/S细胞周期阻滞。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了KLF4基因敲除的IPEC-J2细胞,且KLF4基因敲除可抑制细胞活性,并引起G0/S细胞周期阻滞。KLF4基因敲除细胞可为进一步探究KLF4基因功能及分子机制提供材料。 展开更多
关键词 klf4基因 CRISPR/Cas9技术 细胞活性 细胞周期
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棕榈酸通过下调KLF4促进子宫内膜癌细胞的恶性生物学行为 被引量:1
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作者 袁芳媛 吴金秀 +7 位作者 褚孝龙 王翠喆 温馨 陈瑶 彭钞灵 谢建新 王竞州 张君 《华中科技大学学报(医学版)》 CSCD 北大核心 2024年第6期723-732,共10页
目的阐明肥胖后棕榈酸(palmitic acid,PA)含量增加是否可通过上调DNMT1/3b抑制KLF4表达,进而调控子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)细胞的生物学行为。方法收集非EC对照个体(n=120)和EC患者(n=30)一般资料,分析两组肥胖相关表型的差异... 目的阐明肥胖后棕榈酸(palmitic acid,PA)含量增加是否可通过上调DNMT1/3b抑制KLF4表达,进而调控子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)细胞的生物学行为。方法收集非EC对照个体(n=120)和EC患者(n=30)一般资料,分析两组肥胖相关表型的差异;收集非EC对照个体子宫内膜组织(n=20)和EC患者癌组织(n=20),免疫组织化学法检测子宫内膜组织中KLF4、DNMT1/3b表达情况;体外培养EC细胞,qRT-PCR和Western blot检测细胞中DNMTs/KLF4/MMP2等因子的mRNA和蛋白表达水平,CCK-8、Transwell和划痕实验检测EC细胞的增殖、迁移与侵袭能力;构建肥胖小鼠的EC荷瘤模型,观察EC细胞或过表达KLF4的EC细胞在小鼠体内的成瘤能力。结果EC患者的体重、体质量指数、血浆低密度脂蛋白及游离脂肪酸含量均显著高于非癌受试个体(均P<0.05);EC患者中超重/肥胖者占比高于非癌受试个体(73.33%vs.50.00%,P<0.05);EC患者肿瘤组织中KLF4表达水平显著降低,DNMT1/3b的表达水平显著升高,KLF4表达水平与血清中游离脂肪酸(FFAs)含量呈显著负相关。PA处理后,EC细胞中KLF4表达水平显著降低,DNMT1/3b以及MMP2表达水平显著升高,细胞迁移与侵袭能力显著增强,细胞增殖能力无显著变化;上调KLF4后,EC细胞中MMP2表达水平显著降低,细胞迁移与侵袭能力显著减弱;下调KLF4后,EC细胞中MMP2表达水平显著升高,细胞迁移与侵袭能力显著增强;PA处理的同时上调KLF4,可显著逆转PA处理对EC细胞MMP2表达水平及其迁移与侵袭能力的促进作用;分别下调DNMT1和DNMT3b后,EC细胞中KLF4的表达水平均显著增加;PA处理的同时分别下调DNMT1和DNMT3b后,均可显著逆转PA处理对EC细胞中KLF4表达水平的抑制作用;EC细胞在高脂饮食诱导的肥胖小鼠体内成瘤能力显著增强,而过表达KLF4后的EC细胞在高脂饮食诱导的肥胖小鼠体内成瘤能力显著减弱。结论肥胖后血浆PA含量增加,通过下调DNMT1/DNMT3b抑制KLF4表达,促进子宫内膜癌细胞的迁移、侵袭以及体内成瘤能力。 展开更多
关键词 棕榈酸 DNMT1/DNMT3b klf4 子宫内膜癌
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