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POLO-LIKE KINASEl GENE EXPRESSION AND ITS CLINICO-PATHOLOGICAL SIGNIFICANCE IN GASTRIC CARCINOMA
1
作者 陈雪华 兰斌 +4 位作者 刘炳亚 瞿颖 张晓青 蔡劬 朱正纲 《Journal of Shanghai Second Medical University(Foreign Language Edition)》 2006年第1期36-42,共7页
Objective To clarify the polo-like kinasel (PLK1) expression in human gastric cancer tissue and its clinicopathological significance in gastric carcinoma. Methods PLK1 expression in 60 cancer tissues and their corre... Objective To clarify the polo-like kinasel (PLK1) expression in human gastric cancer tissue and its clinicopathological significance in gastric carcinoma. Methods PLK1 expression in 60 cancer tissues and their corresponding noncancerous tissues from gastric cancer patients was measured by both real-time quantitative RT-PCR and western blot assay, lmmunohistochemistry was used to detect PLK1 protein expression in eighty-nine paraffin-embedded samples. Results The PLK1 mRNA and protein expression level in the 60 fresh cancer tissues was significantly higher than that in noncancerous tissues ( P 〈 0. 0001, P = 0. 031 respectively). In paraffin-embedded samples, apart from its increased expression level, PLK1 was found to be in both cytoplasm and nucleus, double-site location only occurred in poor-differentiated cancer, PLKI expression intensity was associated with tumor dif- ferentiation ( P = 0. 03), invasion ( P = 0. 032 ), TNM stage ( P = 0. 019) , ki67 expression ( P = 0. 011 ). The patients with negative PLK1 expression had better survival rate than that with positive PLK1 expression ( P =0. 0292 ). Conclusion PLK1 may have clinicopathological value in tumor diagnosis, and may become another new biomarker and therapeutic target for gastric cancer. 展开更多
关键词 polo-like kinasel gastric neoplasm quantitative RT-PCR
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电针预处理调节Ca^(2+)/CaMKⅡ减轻布比卡因所致大鼠心肌线粒体损伤
2
作者 张斌森 张笑佳 +1 位作者 秦晓宇 王春爱 《中国中西医结合杂志》 北大核心 2025年第2期213-219,共7页
目的 探讨电针预处理调节Ca^(2+)/磷酸化钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(p-Ca MKⅡ)(T287)蛋白表达水平,减轻布比卡因诱导心肌线粒体损伤的可能机制。方法 将40只大鼠按随机数字表法分为对照组(C组)、布比卡因组(B组)、电针组(E组)、抑制剂... 目的 探讨电针预处理调节Ca^(2+)/磷酸化钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(p-Ca MKⅡ)(T287)蛋白表达水平,减轻布比卡因诱导心肌线粒体损伤的可能机制。方法 将40只大鼠按随机数字表法分为对照组(C组)、布比卡因组(B组)、电针组(E组)、抑制剂组(K组),每组10只。C组以0.9%生理盐水静脉泵注30 min后处死;B组经股静脉泵注布比卡因至心脏骤停;E组在电针刺激内关穴30 min后泵注布比卡因至心脏骤停;K组在静脉注射KN-93并电针刺激内关30 min后泵注布比卡因至心脏骤停。ELISA法检测心肌线粒体单胺氧化酶(MAO)、环氧合酶(COX)含量及线粒体膜通透性转换孔(MPTP)开放程度,透射电镜观察心肌线粒体超微结构并使用Flameng线粒体半定量法评估其损伤情况,Fluo-3/AM检测线粒体内Ca^(2+)浓度,Western Blot检测Ca MKⅡ位点p-CaMKⅡ蛋白表达水平。结果 与C组比较,B组心肌细胞线粒体MAO含量升高,COX含量、MPTP开放程度及Ca^(2+)浓度降低(P<0.01);心肌纤维排列紊乱,线粒体数量减少,线粒体嵴缺失甚至断裂,Flameng评分增加(P<0.01),p-CaMKⅡ蛋白表达下调(P<0.01)。与B组比较,E组布比卡因消耗量、COX含量、MPTP开放程度及Ca^(2+)浓度增加(P<0.05),MAO含量降低(P<0.01);心肌纤维排列紧密,线粒体含量丰富,呈卵圆形,线粒体嵴少量紊乱,无断裂缺失,Flameng评分降低(P<0.01);p-CaMKⅡ蛋白表达上调(P<0.01)。与E组比较,K组布比卡因消耗量、COX含量、MPTP开放程度及Ca^(2+)浓度降低(P<0.01,P<0.05),MAO含量增加(P<0.01),心肌纤维排列尚可,线粒体较丰富,偶有线粒体嵴断裂、缺失,Flameng评分增加(P<0.01),p-CaMKⅡ蛋白表达下调(P<0.01)。结论 电针预处理调节Ca^(2+)/p-CaMKⅡ能减轻布比卡因所致心肌线粒体结构与功能损伤病理改变,其作用机制可能与其维持线粒体正常结构与功能有关。 展开更多
关键词 电针 盐酸布比卡因 钙离子 钙调蛋白激酶Ⅱ 心肌 线粒体损伤
原文传递
艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠血清TFF及胃黏膜ERK1/2、PCNA的影响 被引量:27
3
作者 李铁浪 粟艳梅 +4 位作者 祁芳 倪伟 张泓 张雨辰 郭华 《湖南中医药大学学报》 CAS 2015年第2期49-51,55,F0003,共5页
目的观察艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠血清三叶因子(TFF1、TFF2)、胃黏膜细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和增殖细胞抗原(PCNA)的影响,探讨艾灸促进胃黏膜增殖修复的可能机制。方法将50只健康SD大鼠随机抽取10只为空白组,其余40只采用苦寒... 目的观察艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠血清三叶因子(TFF1、TFF2)、胃黏膜细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和增殖细胞抗原(PCNA)的影响,探讨艾灸促进胃黏膜增殖修复的可能机制。方法将50只健康SD大鼠随机抽取10只为空白组,其余40只采用苦寒泻下法+无水乙醇灌胃建立脾虚胃溃疡大鼠模型,模型成立后随机分为模型组、四君子汤组、艾灸组和艾灸非穴位组,每组10只。各组予以相应处理,8 d后采用酶联免疫吸附法检测血清中TFF1、TFF2的含量,免疫印迹法检测胃黏膜组织p-ERK1/2蛋白的表达,免疫组化法测胃黏膜细胞PCNA的表达。结果艾灸足三里、中脘等穴能明显提高胃黏膜损伤大鼠血清TFF1、TFF2的含量,增强胃黏膜损伤大鼠胃黏膜组织p-ERK1/2蛋白和PCNA的表达(P<0.05或P<0.01)。结论艾灸能促进脾虚胃溃疡大鼠损伤胃黏膜的增殖修复,其可能的机制是通过提高TFF1、TFF2的含量,激活TFF/ERK信号转导通路,增强PCNA的表达有关。 展开更多
关键词 艾灸 胃黏膜增殖修复 三叶因子 细胞外信号调节激酶1/2 增殖细胞抗原
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热应激对体外仔猪肝细胞AMPK活性及脂质代谢产物的影响 被引量:7
4
作者 郑萍 陈代文 +1 位作者 张克英 余冰 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期23-26,30,共5页
目的:研究提高细胞培养温度对仔猪肝细胞一磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)活性及脂质代谢产物的影响。方法:采用单因子试验设计,以37℃细胞培养温度为对照组,42℃的细胞培养温度为热应激组,每个组均设60、120、180 min三个培养时间点,每个... 目的:研究提高细胞培养温度对仔猪肝细胞一磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)活性及脂质代谢产物的影响。方法:采用单因子试验设计,以37℃细胞培养温度为对照组,42℃的细胞培养温度为热应激组,每个组均设60、120、180 min三个培养时间点,每个时间点9个重复。以原代分离的55d左右的仔猪肝细胞为材料,以油酸为脂质的研究对象,油酸的代谢方向通过检测示踪物[14C]-油酸的代谢产物进行标识。结果:热应激处理不影响谷丙转氨酸(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)及尿素氮(UN)含量的变化并可激活仔猪肝细胞AMPK活性;同时促进脂质分解代谢。热应激组的[14C]-二氧化碳及[14C]-酸溶性代谢产物的生成量均高于对照组。热应激处理抑制脂质合成代谢,降低肝细胞磷脂、甘油单酯、甘油三酯、胆固醇、胆固醇酯的合成量。结论:热应激能体外激活仔猪肝细胞AMPK,促进脂质分解代谢产物,抑制脂质合成代谢产物的生成。 展开更多
关键词 AMPK 仔猪肝细胞培养 脂质代谢 热应激
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白杨素诱导肝癌Hep3B细胞凋亡机制研究 被引量:7
5
作者 徐成坤 阳波 曹建国 《医药导报》 CAS 北大核心 2014年第3期295-298,共4页
目的研究白杨素诱导人肝癌Hep 3B细胞凋亡是否涉及激活ROS/ASK1/JNK/Bim信号通路。方法流式细胞术检测细胞凋亡,siRNA转染敲除细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)及Bim基因,SP600125抑制Jun氨基末端激酶(JNK),N-乙酰-L型半胱氨酸(NAC)清除活性... 目的研究白杨素诱导人肝癌Hep 3B细胞凋亡是否涉及激活ROS/ASK1/JNK/Bim信号通路。方法流式细胞术检测细胞凋亡,siRNA转染敲除细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)及Bim基因,SP600125抑制Jun氨基末端激酶(JNK),N-乙酰-L型半胱氨酸(NAC)清除活性氧(ROS),Western blot检测蛋白表达。结果白杨素显著诱导Hep 3B细胞凋亡,同时上调细胞p-ASK1、p-JNK1/2及Bim水平。NAC或SP600125预处理以及ASK1或Bim特异性siRNA转染均能有效拮抗白杨素诱导的细胞凋亡。NAC预处理能抑制白杨素活化ASK1,NAC预孵育或ASK1特异性siRNA转染能抑制白杨素活化JNK,NAC预孵育、ASK1特异性siRNA转染或SP600125预处理均能拮抗白杨素上调Bim蛋白表达效应。结论白杨素可能通过刺激ROS的生成激活ASK1,导致JNK活化,进而上调Bim表达,并最终促进Hep 3B细胞凋亡。 展开更多
关键词 白杨素 肝癌 细胞凋亡 细胞凋亡信号调节激酶1
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MAPK信号通路在复方丹参注射液调节人羊膜上皮细胞AQP3表达中的作用研究 被引量:4
6
作者 马小燕 沈奇 +2 位作者 华莹 谢爱兰 朱雪琼 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期778-782,共5页
目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)―细胞外信号调节激酶1和2(extracellular signal regulated kinase1/2,ERK1/2)信号转导通路在复方丹参注射液对人足月妊娠羊膜上皮细胞水通道蛋白3(aquaporin3,AQ... 目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)―细胞外信号调节激酶1和2(extracellular signal regulated kinase1/2,ERK1/2)信号转导通路在复方丹参注射液对人足月妊娠羊膜上皮细胞水通道蛋白3(aquaporin3,AQP3)表达调节中的作用。方法原代培养足月妊娠羊水量正常与羊水过少人羊膜上皮细胞,将人羊膜上皮细胞均分为4组:分别为空白对照组、U0126组、复方丹参注射液组和U0126加复方丹参注射液组。采用免疫印迹技术检测人羊膜上皮细胞中磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)和AQP3的表达。结果 (1)在羊水量正常和羊水过少人羊膜上皮细胞中,均发现p-ERK1/2表达水平在U0126组较空白对照组明显下降(P<0.05),而复方丹参注射液组可以明显上调p-ERK1/2表达水平(P<0.05),U0126加复方丹参注射液组人羊膜上皮细胞中p-ERK1/2表达水平高于U0126组,但低于复方丹参注射液组(P<0.05)。(2)在羊水量正常的人羊膜上皮细胞中,U0126组AQP3的表达与空白对照组比较无明显变化(P>0.05);复方丹参注射液组和U0126加复方丹参注射液组AQP3的表达水平均高于空白对照组(P<0.05),但两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)在羊水过少羊膜上皮细胞中,U0126组AQP3的表达较空白对照组下降(P<0.05);复方丹参注射液组可以明显上调AQP3的表达水平(P<0.05),而U0126加复方丹参注射液组AQP3的表达水平低于复方丹参注射液组(P<0.05),但高于U0126组(P<0.05)。结论羊水过少时,复方丹参注射液通过激活MAPK-ERK1/2信号转导通路来调节人羊膜上皮细胞中AQP3的表达水平。 展开更多
关键词 水通道蛋白3 细胞外信号调节激酶1 2 复方丹参注射液 人羊膜上皮细胞 羊水过少
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原发性肝癌Plk1基因表达及其与预后的相关性 被引量:5
7
作者 何自力 钟德玝 +4 位作者 郑核 苗雄鹰 胡继雄 文宇 陈勇 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第2期146-150,共5页
目的:分析Plk1基因在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达,及其与预后的关系.方法:用半定量RT-PCR及Western blot方法检测我院2003-01/2008-05原发性肝癌患者213例的Plk1基因蛋白表达,同时应用Kaplan-Meier法及多变量Cox比... 目的:分析Plk1基因在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达,及其与预后的关系.方法:用半定量RT-PCR及Western blot方法检测我院2003-01/2008-05原发性肝癌患者213例的Plk1基因蛋白表达,同时应用Kaplan-Meier法及多变量Cox比例险模型,分析Plk1基因的表达及临床病理因素与预后的关系.结果:Plk1基因在肝癌组织中阳性表达率为83.6%.Plk1阳性组的1、3、5年的生存率明显低于阴性组(P=0.004).原发性肝癌的预后与Plk1阳性表达,Edmondson分级,肉眼癌栓,显微癌栓及肿瘤数目相关;与HBsAg、肝硬化、AFP、假包膜、肿瘤大小无关;多因素Cox回归分析显示Edmondson分级、Plk1基因蛋白表达、肉眼癌栓及肿瘤数目4项指标反映肝癌预后情况,危险度分别为1.717、1.938、1.537及2.355.结论:Plk1基因的检测有助于有高危肝癌患者的选择,为Plk1基因靶向治疗肝癌提供了有力依据. 展开更多
关键词 肝癌 PLK1 半定量逆转录聚合酶链式反应
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碱性成纤维细胞生长因子经ERK信号通路抑制卵巢癌CAOV3细胞凋亡 被引量:5
8
作者 叶丽平 孙黎光 +2 位作者 任甫 刘萍 张莹 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期146-149,156,共5页
目的:研究卵巢癌CAOV3细胞中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)经MEK/ERK1/2信号转导通路对CREB、Bcl-2表达以及对细胞凋亡的影响作用。方法:无血清饥饿诱导细胞凋亡。分为对照组、bFGF组、bFGF+PD98059组。Annexin-EGFP/PI荧光双染法检测... 目的:研究卵巢癌CAOV3细胞中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)经MEK/ERK1/2信号转导通路对CREB、Bcl-2表达以及对细胞凋亡的影响作用。方法:无血清饥饿诱导细胞凋亡。分为对照组、bFGF组、bFGF+PD98059组。Annexin-EGFP/PI荧光双染法检测细胞凋亡。Western印迹法检测ERK1/2、CREB以及Bcl-2蛋白表达。RT-PCR法检测Bcl-2的mRNA表达。结果:bFGF可抑制无血清饥饿诱导的细胞凋亡;时效依赖性地诱导ERK1/2活性增高、刺激CREB磷酸化、促进Bcl-2的mRNA及蛋白表达增加。bFGF作用CAOV3细胞15 min时ERK1/2活性达高峰;45 min时CREB磷酸化达峰值;Bcl-2的mREN表达高峰为6h,8h时蛋白表达最高。MEK1抑制剂PD98059可抑制bFGF的上述作用。结论:bFGF可能通过激活MEK/ERK1/2/CREB/Bcl-2信号转导途径抑制卵巢癌CAOV3细胞凋亡。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 细胞外信号调节激酶 CAMP反应元件结合蛋白 Bcl-2 信号转导
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Aurora-A激酶在肺癌中的表达 被引量:2
9
作者 邹丽娟 李国权 +4 位作者 宋阳 郝立宏 宫琳琳 杨佩满 邵淑娟 《大连医科大学学报》 CAS 2007年第6期525-527,538,共4页
[目的]探讨Aurora-A基因在不同组织类型肺癌中的表达及其与临床的相关性。[方法]采用RT-PCR、Western-blot与免疫组化方法检测肺癌组织标本行Aurora-A的mRNA与蛋白表达。[结果]肺癌30例标本中RT-PCR检测Aurora-A mRNA的表达,19例(63%)... [目的]探讨Aurora-A基因在不同组织类型肺癌中的表达及其与临床的相关性。[方法]采用RT-PCR、Western-blot与免疫组化方法检测肺癌组织标本行Aurora-A的mRNA与蛋白表达。[结果]肺癌30例标本中RT-PCR检测Aurora-A mRNA的表达,19例(63%)肺癌表达水平高于相应癌旁组织,其中Western blot方法检测20例中,13例(65%)蛋白表达水平高于相应癌旁组织。免疫组化检测48例肺癌中32例高表达(66.67%)。肺癌Aurora-AmRNA的表达水平与肺癌患者的性别,吸烟史以及病理特征无明显相关性。肺鳞癌的Aurora-A的蛋白水平高表达程度与肿瘤转移有相关性。[结论]肺癌组织Aurora-A表达明显高于其癌旁组织,提示Aurora-A基因的过表达与肺癌的发生有相关性。 展开更多
关键词 Aurora—A激酶 肺癌 癌基因 过表达
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ERK1/2及JNK通路在AcSDKP抑制PDGF诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原蛋白表达中的作用 被引量:5
10
作者 张丽娟 张晓明 +3 位作者 马文东 李倩 杨方 王瑞敏 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期752-755,共4页
目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及C-Jun氨基末端激酶(JNK)通路在N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)抑制血小板源性生长因子(PDGF)诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原蛋白表达中的作用。方法将新生Wistar大鼠心... 目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及C-Jun氨基末端激酶(JNK)通路在N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)抑制血小板源性生长因子(PDGF)诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原蛋白表达中的作用。方法将新生Wistar大鼠心脏成纤维细胞分为对照组(A组)、10ng/ml PDGF刺激组(B组)、10-9 mol/L AcSDKP+10ng/ml PDGF干预组(C组)、25μmol/L PD98059+10ng/ml PDGF干预组(D组)和10nmol/L SP600125+10ng/ml PDGF干预组(E组)。MTT法检测心脏成纤维细胞代谢活性的变化,Western blot法检测大鼠心脏成纤维细胞中ERK1/2、JNK及磷酸化-ERK1/2、磷酸化-JNK蛋白表达和Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果与A组相比,B组心脏成纤维细胞代谢活性、Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白表达、磷酸化-ERK1/2及磷酸化-JNK蛋白表达均增强(P<0.05);而C、D、E组能明显逆转B组上述各观察指标的增加过程(P<0.05)。结论 AcSDKP能够通过阻断PDGF介导的ERK1/2及JNK通路的激活,进而抑制大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原蛋白表达。 展开更多
关键词 细胞外信号调节激酶1/2 C-Jun氨基末端激酶 N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸 血小板源性生长因子
原文传递
nidogen-2、HE4和TK1在卵巢癌中的表达意义研究 被引量:7
11
作者 王楠 刘杰 +1 位作者 周轶 牛艳昕 《中国妇幼健康研究》 2018年第10期1260-1263,共4页
目的分析nidogen-2、HE4和TK1联合检测在卵巢癌中的诊断价值。方法将2015年10月至2017年10月因卵巢癌于金华市人民医院治疗的74例患者(卵巢癌组),以及同期收治的48例良性卵巢疾病患者(良性组)、45例健康女性(对照组)作为研究对象。分析... 目的分析nidogen-2、HE4和TK1联合检测在卵巢癌中的诊断价值。方法将2015年10月至2017年10月因卵巢癌于金华市人民医院治疗的74例患者(卵巢癌组),以及同期收治的48例良性卵巢疾病患者(良性组)、45例健康女性(对照组)作为研究对象。分析三组研究对象机体内nidogen-2、HE4和TK1等指标表达情况,分析上述三种肿瘤标志物在卵巢癌中的诊断价值。结果卵巢癌组nidogen-2、HE4和TK1等指标表达量显著高于良性组、对照组(t值分别为21.36、26.97、15.22、23.69、29.55、16.01,均P<0.05),但良性组与对照组上述指标比较无显著性差异(t值分别为1.41、1.85、1.22、1.08,均P>0.05)。卵巢癌组nidogen-2、HE4和TK1阳性表达率均高于良性组与对照组(χ2值分别为8.991、7.695,均P<0.05)。对于卵巢癌患者,不同检测方法敏感性、特异性、准确率均有显著性差异(χ2值分别为29.321、98.129、31.941,均P<0.05),三联检测均最高。结论 nidogen-2、HE4和TK1联合检测可有效提高卵巢癌诊断的敏感性、特异性及诊断准确率,可考虑临床推广应用。 展开更多
关键词 nidogen-2 人附睾蛋白4 胸苷激酶1 联合检测 卵巢癌
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细胞外信号调节激酶1/2传导通路在不同发育阶段皮肤组织内的变化 被引量:1
12
作者 陈伟 付小兵 +2 位作者 孙同柱 杨银辉 盛志勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期871-873,T002,共4页
为研究磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、Ras和C-fos在不同发育阶段皮肤中的表达特征及其可能的生物学意义,用免疫组化技术检测这3种蛋白在8例胎儿皮肤和8例成人皮肤中的表达变化规律。结果发现,在胎儿发育初期,p-ERK1/2、Ras... 为研究磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、Ras和C-fos在不同发育阶段皮肤中的表达特征及其可能的生物学意义,用免疫组化技术检测这3种蛋白在8例胎儿皮肤和8例成人皮肤中的表达变化规律。结果发现,在胎儿发育初期,p-ERK1/2、Ras和C-fos蛋白表达较低,随着胎儿生长发育,这3种蛋白的阳性细胞率逐渐增大,在妊娠后期胎儿和成人皮肤组织中,3种蛋白的阳性细胞率明显高于妊娠早期胎儿皮肤(P<0.01)。p-ERK1/2、Ras和C-fos蛋白在不同发育阶段皮肤组织内都有表达,显示它们可能对皮肤的发生、结构和功能的维持以及损伤后修复十分重要。 展开更多
关键词 细胞外信号调节激酶1/2 信号传递 胎儿皮肤 免疫组化 增生性瘢痕
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PRDX1抑制蛋白酶体抑制剂诱导人甲状腺癌细胞凋亡机制探讨 被引量:1
13
作者 孟欣 邓娓娓 +2 位作者 张海燕 都镇先 王华芹 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2014年第12期899-902,908,共5页
目的:初步探讨过氧化还原蛋白1(peroxirodoxin 1,PRDX1)抑制蛋白酶体抑制剂诱导人甲状腺癌细胞凋亡的机制。方法:选取人甲状腺癌细胞,设立随机序列核酸siRNA、siASK1、siPRDX1和siASK1+siPRDX1组,分别用培养液、lactacystin和MG132培养... 目的:初步探讨过氧化还原蛋白1(peroxirodoxin 1,PRDX1)抑制蛋白酶体抑制剂诱导人甲状腺癌细胞凋亡的机制。方法:选取人甲状腺癌细胞,设立随机序列核酸siRNA、siASK1、siPRDX1和siASK1+siPRDX1组,分别用培养液、lactacystin和MG132培养细胞;用蛋白印迹法检测PRDX1、ASK1、p38、JNK1/2、p-ASK1、p-P38和p-JNK1/2在各组甲状腺癌细胞中的表达;用微小RNA干扰技术转染细胞;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:MG132处理组中,p-ASK1是对照组的1.5倍(F=214.14,P<0.001),其下游效应子p-p38和p-JNK1/2分别为对照组的1.34(F=216.75,P<0.001)和1.94倍(F=1 601.68,P<0.001);siASK1下调MG132介导的p-ASK1为随机序列组的0.58倍(F=1 136.82,P<0.001),p-p38为随机序列组的0.73倍(F=507.00,P<0.001),p-JNK1/2为随机序列组的0.51倍(F=6 087.48,P<0.001)。甲状腺癌细胞凋亡率降低为34.25%,显著低于于随机序列组的51.98%,F=18.39,P=0.013。MG132处理组中,siPRDX1组甲状腺癌细胞凋亡率为68.99%显著高于随机序列组的49.58%和siPRDX1+siASK1联合组的41.28%,而siASK1组的甲状腺癌细胞凋亡率为31.85%,显著低于上述两组,组间差异有统计学意义,F=30.13,P<0.001。结论:PRDX1通过负向调节ASK1活性及ASK1-p38和ASK1-JNK通路,抑制ASK1介导的细胞凋亡进而消减MG132对甲状腺癌细胞毒性效应。 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂 细胞凋亡信号调节激酶1 过氧化还原蛋白1 甲状腺肿瘤
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细胞外信号调节激酶在血管瘤组织中的表达及活性 被引量:2
14
作者 冯进云 李萍 +1 位作者 江贤萍 彭振辉 《中国美容医学》 CAS 2012年第7期1163-1165,共3页
目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及其活性形式磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)在血管瘤组织中的蛋白表达及其意义。方法:应用免疫组织化学SP法,检测23例增生期血管瘤组织及19例退化期血管瘤组织ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达。结果:增生... 目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及其活性形式磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)在血管瘤组织中的蛋白表达及其意义。方法:应用免疫组织化学SP法,检测23例增生期血管瘤组织及19例退化期血管瘤组织ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达。结果:增生期血管瘤组织与退化期血管瘤组织ERK1/2的蛋白表达无统计学差异(Z=-0.305,P>0.05);增生期血管瘤组织p-ERK1/2的蛋白表达显著高于退化期血管瘤组织的表达(Z=-4.271,P<0.01)结论:增生期血管瘤组织p-ERK1/2呈高表达,血管瘤的增生与ERK通路的激活有关。 展开更多
关键词 血管瘤 细胞外信号调节激酶 磷酸化细胞外信号调节激酶
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去卵巢大鼠海马CA1/CA2区ERK1/2的基础活性和诱导活性降低 被引量:1
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作者 张若楠 宋士军 +2 位作者 李芳芳 马俊骥 李怡秋 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期411-415,共5页
目的:观察去卵巢大鼠空间学习记忆能力的变化与海马中胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)通路的关系。方法:雌性SD大鼠随机分为假手术组和去卵巢组,饲养4个月后采用Morris水迷宫测试空间学习记忆能力,于测试前将各组组内又分为训练组和非训练... 目的:观察去卵巢大鼠空间学习记忆能力的变化与海马中胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)通路的关系。方法:雌性SD大鼠随机分为假手术组和去卵巢组,饲养4个月后采用Morris水迷宫测试空间学习记忆能力,于测试前将各组组内又分为训练组和非训练组,训练组用于测定经学习记忆训练诱发的ERK1/2的诱导活性,非训练组用于测定未经学习记忆训练时的ERK1/2的基础活性,Western blot方法检测海马CA1/CA2区p-ERK1/2蛋白及Raf激酶抑制蛋白(RKIP)的变化。结果:①与假手术组比较,去卵巢组大鼠的空间学习记忆能力明显下降(P<0.05)。②各组中的训练大鼠p-ERK1/2蛋白水平明显高于非训练大鼠(P<0.05)。③去卵巢组训练及非训练大鼠的p-ERK1/2蛋白水平均相应低于假手术组训练及非训练大鼠(P<0.05)。④去卵巢组RKIP蛋白表达水平明显高于假手术组(P<0.05)。结论:雌激素缺乏大鼠的空间学习记忆能力下降与海马CA1/CA2区ERK1/2通路的基础和诱导活性降低以及该通路的抑制蛋白RKIP的表达增加有关。 展开更多
关键词 雌激素缺乏 海马 学习记忆 胞外信号调节激酶1/2 RAF激酶抑制蛋白
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强直性肌营养不良临床特点分析 被引量:3
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作者 来小音 陈博 +5 位作者 余姗姗 唐娜 徐莉 陈琛 汪道文 卜碧涛 《国际神经病学神经外科学杂志》 2014年第2期97-101,共5页
目的分析强直性肌营养不良(DM)的临床特点,以提高对DM疾病的认识及诊断水平。方法对21例DM患者的临床资料进行回顾性总结与分析。结果 21例患者均为慢性起病,以双手无力,活动不灵活起病多见,其中5例有家族史,部分病例伴有心脏、眼部、... 目的分析强直性肌营养不良(DM)的临床特点,以提高对DM疾病的认识及诊断水平。方法对21例DM患者的临床资料进行回顾性总结与分析。结果 21例患者均为慢性起病,以双手无力,活动不灵活起病多见,其中5例有家族史,部分病例伴有心脏、眼部、内分泌及中枢神经系统等其他多系统损害。19例行肌电图检查提示肌源性损害,其中16例发现有肌强直电位。10例行肌活检,主要表现为部分肌纤维萎缩,变性、坏死肌纤维,核内移及肌浆块形成,部分萎缩纤维内可见无结构胞浆体。1例强直性肌营养不良蛋白激酶(DMPK)基因CTG重复序列分析发现拷贝数超过正常范围。结论 DM是一种主要累及肌肉系统,以肌强直、肌无力和肌萎缩为主要临床表现并伴有多系统损害的疾病。综合评估多系统损害并结合肌肉的电生理学及病理学检查,有助于提高对DM的认识;在有条件的医疗机构可以开展DM基因诊断,对DM确诊很有意义。 展开更多
关键词 强直性肌营养不良 肌强直 肌电图 肌活检 强直性肌营养不良蛋白激酶
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ERK和CREB磷酸化在硫氢化钠对大鼠脑缺血再灌注神经保护的机制探讨 被引量:2
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作者 殷俊 李艳冰 +1 位作者 沈琴 杨晓苏 《国际神经病学神经外科学杂志》 北大核心 2015年第3期223-229,共7页
目的探讨磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)和磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)在外源性硫化氢(NaHS)干预下对大鼠脑缺血再灌注的神经保护作用及机制。方法将180只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组和NaHS干预组(100μmol/L),每... 目的探讨磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)和磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)在外源性硫化氢(NaHS)干预下对大鼠脑缺血再灌注的神经保护作用及机制。方法将180只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组和NaHS干预组(100μmol/L),每组60只。线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,2h后再灌注,灌注前20min给予生理盐水或NaHS腹腔注射,术后6h、1d、2d、5d、7d后行TTC染色观察脑梗死体积,尼氏染色检测神经元表达,WesternBlot检测海马p-ERK1/2、p-CREB表达,免疫组化检测Bcl-2表达。结果干预组脑梗死体积和神经元凋亡相对于模型组显著减少(P<0.05)。与模型组相比,干预组各时间点p-ERK1/2、p-CREB蛋白表达均升高(P<0.05),两者之间呈正相关;干预组Bcl-2相对于模型组升高(P<0.05)。结论大鼠脑缺血再灌注损伤后NaHS可能通过诱导ERK1/2和CREB蛋白磷酸化,激活下游Bcl-2蛋白表达,起到抗凋亡作用,减少脑梗死体积,发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 缺血再灌注损伤 硫化氢 细胞外调节蛋白激酶 CAMP反应元件结合蛋白 B细胞淋巴瘤/白血病-2 大鼠
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人Polo样激酶1活性缺失突变体和结构域在293细胞中的瞬时表达 被引量:1
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作者 李伟 刘萱 +2 位作者 江其生 李平 曹诚 《生物技术通讯》 CAS 2013年第4期478-480,共3页
目的:构建人Polo样激酶1(Plk1)活性缺失突变体及结构域突变体的真核表达载体,并在293细胞中表达。方法:用二次PCR方法扩增Plk1基因并点突变,将82位赖氨酸突变为精氨酸,定向克隆到pcDNA3-Flag载体中;用普通PCR方法扩增Plk1激酶区域及Pol... 目的:构建人Polo样激酶1(Plk1)活性缺失突变体及结构域突变体的真核表达载体,并在293细胞中表达。方法:用二次PCR方法扩增Plk1基因并点突变,将82位赖氨酸突变为精氨酸,定向克隆到pcDNA3-Flag载体中;用普通PCR方法扩增Plk1激酶区域及Polo盒区域(PBD)基因,定向克隆到pcDNA3-Flag载体中;将上述质粒转染293细胞进行瞬时表达,Western印迹检测Plk1蛋白的表达。结果:构建了Flag-Plk1(K82R)、Flag-Plk1KD、Flag-Plk1PBD真核表达质粒,在293细胞中均可有效表达,蛋白相对分子质量分别为68×103、45×103、31×103。结论:在293细胞中表达了Flag-Plk1(K82R)、Flag-Plk1KD、Flag-Plk1PBD蛋白,有助于进一步探究Plk1对底物的功能。 展开更多
关键词 POLO样激酶1 激酶 结构域 真核表达
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JNK1基因沉默对肺成纤维细胞增殖的影响 被引量:1
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作者 林蓓蓓 张慧 +4 位作者 林立 崇蕾 张维溪 李昌崇 张海邻 《医学研究杂志》 2013年第3期34-37,共4页
目的研究C-Jun氨基末端激酶1(JNK1)基因表达沉默对肺成纤维细胞MRC-5增殖的影响。方法设计针对JNK1基因的小RNA分子(siRNA),以脂质体转染法将双链siRNA转入MRC-5细胞后,采用流式细胞术检测最佳转染浓度,RT-PCR检测JNK1 mRNA表达变化,Wes... 目的研究C-Jun氨基末端激酶1(JNK1)基因表达沉默对肺成纤维细胞MRC-5增殖的影响。方法设计针对JNK1基因的小RNA分子(siRNA),以脂质体转染法将双链siRNA转入MRC-5细胞后,采用流式细胞术检测最佳转染浓度,RT-PCR检测JNK1 mRNA表达变化,Western blot检测总JNK、磷酸化JNK(P-JNK)蛋白表达,用CCK-8法检测siRNA对MRC-5细胞增殖的影响。结果 siRNA转染MRC-5细胞的最佳浓度为50nmol/L;设计的两个靶位点siRNA,均可有效降低JNK1 mRNA表达,其中siRNA1抑制效果较siRNA2明显;siRNA1降低总JNK及P-JNK蛋白表达,有效抑制MRC-5细胞的增殖。结论 体外合成的siRNA可降低MRC-5细胞中JNK1基因的表达,降低JNK磷酸化水平,明显抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 JNK1 RNA干扰 细胞增殖
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结肠癌STK15基因表达的病理学分析 被引量:1
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作者 王莉琼 张宝仁 +5 位作者 陈雪华 兰斌 程伟志 余奇文 张继英 张冬青 《中国微循环》 北大核心 2008年第5期302-304,F0002,共4页
目的探讨丝氨酸/苏氨酸激酶15(serine/threonine kinase15,STK15)在结肠癌组织中的表达,以及与临床病理指标间的关系。方法采用免疫组化检测STK15在67例手术切除结肠癌的肿瘤组织及邻近非肿瘤组织中的表达。结果STK15在结肠癌组织中的... 目的探讨丝氨酸/苏氨酸激酶15(serine/threonine kinase15,STK15)在结肠癌组织中的表达,以及与临床病理指标间的关系。方法采用免疫组化检测STK15在67例手术切除结肠癌的肿瘤组织及邻近非肿瘤组织中的表达。结果STK15在结肠癌组织中的阳性率为40.29%(27/67),显著高于邻近的非癌组织8.95%(6/67,P<0.01),STK15基因过表达与结肠癌分化以及浸润深度密切相关(P<0.05),与其它临床病理指标无关。结论STK15基因可能在结肠癌的发生发展中起相应作用,其过表达程度可作为一新的结肠癌某些生物学行为判定指标。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 丝氨酸/苏氨酸激酶15 免疫组化
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