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KDR基因遗传变异在接受手术切除和辅助化疗的胃癌患者中的临床意义
1
作者 王豪勋 郑玮涵 +5 位作者 万文娟 刘小小 周雪艳 赵蓉爽 李慧霞 赵文超 《胃肠病学和肝病学杂志》 2025年第11期1661-1666,共6页
目的研究探讨激酶插入区受体(kinase insert domain containing receptor,KDR)基因遗传变异在手术切除和辅助化疗的胃癌患者中的临床意义。方法回顾性地纳入156例接受手术切除和以替吉奥为基础辅助化疗的胃癌患者。通过医院电子病历系... 目的研究探讨激酶插入区受体(kinase insert domain containing receptor,KDR)基因遗传变异在手术切除和辅助化疗的胃癌患者中的临床意义。方法回顾性地纳入156例接受手术切除和以替吉奥为基础辅助化疗的胃癌患者。通过医院电子病历系统收集整理患者的基本信息及治疗的预后情况。另一方面,留取患者的外周血标本提取DNA进行KDR基因分型。KDR基因多态性位点的基因型和预后的单变量分析用Kaplan-Meier方法分析,并通过Cox模型对其他变量进行校正。结果预后数据表明纳入研究的156例接受手术切除和辅助化疗的胃癌患者的中位无疾病生存期(disease-free survival,DFS)为4.7年(95%CI:3.90~5.50),中位总生存期(overall survival,OS)为6.1年(95%CI:4.89~7.32)。KDR遗传变异分析结果提示,在KDR的标记多态性位点中,只发现了4397T>C位点的临床意义。4397T>C位点位于该基因的上游区域,在研究人群的基因分布频率为:TT型97例(62.2%),TC型53例(34.0%),CC型6例(3.8%),最小等位基因频率为0.21,三种基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P=0.708)。对不同基因型患者进行预后分析发现:TT和TC/CC基因型患者的中位DFS分别为5.6年和4.0年,差异具有显著的统计学意义(P=0.009)。OS结果提示TT和TC/CC基因型患者的中位OS分别为7.5年和5.0年,差异具有显著统计学意义(P=0.005)。此外,为了进一步校正其他混杂变量,本研究对DFS构建了多变量的Cox模型,经过校正后4397T>C位点对DFS的影响仍然具有统计学意义(HR=0.73,P=0.019)。结论KDR基因4397T>C位点可作为评估接受手术切除和辅助化疗的胃癌患者复发风险和预后的生物标志物。 展开更多
关键词 kdr 胃癌 替吉奥 多态性 生物标志物
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多哥冈比亚按蚊靶标抗性kdr、ace-1基因突变研究
2
作者 梁国锐 周娴 +6 位作者 李国铭 李明强 郑绍琴 员月明 宋健平 黄新安 邓长生 《中国热带医学》 CAS 北大核心 2024年第6期652-658,共7页
目的 调查多哥冈比亚按蚊(Anopheles gambiae s.l.)中kdr和ace-1的等位基因突变,为该地区蚊媒传染病防制提供科学依据。方法 蚊虫样本采集自多哥2个疟疾高发地区东莫诺(Est-mono)和阿涅(Anié)的6个村庄。所有蚊虫均用于蚊种鉴定以... 目的 调查多哥冈比亚按蚊(Anopheles gambiae s.l.)中kdr和ace-1的等位基因突变,为该地区蚊媒传染病防制提供科学依据。方法 蚊虫样本采集自多哥2个疟疾高发地区东莫诺(Est-mono)和阿涅(Anié)的6个村庄。所有蚊虫均用于蚊种鉴定以及kdr和ace-1基因分型。结果 An. coluzzii和An. gambiae是在6个采集地点发现的2个冈比亚按蚊复合组中的近缘物种,其中An. gambiae占主导地位,占比约为96.53%。在所有检测到的蚊虫样品中,冈比亚按蚊复合组在kdr 1014位点具有高频率的突变,其中An. gambiae在奥古库利代(Ogou koulidé)、巴纳(Bana)、阿福莱(Afolé)地区突变频率达到100.0%,凯普西(Kepssi)、伊格博梅吉(Igbomedji)的突变频率为97.5%,科洛科佩(Kolocopé)地区突变频率为91.1%,1014F的等位基因频率为85.5%~100.0%,3个地区的An. coluzzii 1014位点的突变频率均为100.0%,1014F的等位基因频率为90.0%~100.0%,突变纯合度较高。An. gambiae在kdr 1575的突变频率为6.6%~24.3%,1575Y的等位基因频率为3.2%~12.2%,所有检测到的突变类型均为杂合突变,An. coluzzii的1575位点未检测到突变。冈比亚按蚊复合组在ace-1基因的119位点也检测到了突变,其中An. gambiae的突变频率为8.8%~15.0%,119S等位基因频率为4.4%~7.5%,An. coluzzii的突变频率为0~20.0%,119S等位基因频率为0~10.0%,所有检测到的119S突变均为杂合突变。结论 由于本研究中检测到的多哥冈比亚按蚊kdr突变频率很高,疟疾蚊媒可能对拟除虫菊酯类杀虫剂已产生高度抗性,同时可能对有机磷或氨基甲酸酯类杀虫剂也产生一定的抗性。提示当地相关病媒管理部门在今后的疟疾病媒控制及耐药性管理规划中应着重考虑杀虫剂耐药问题,并定期进行监测。 展开更多
关键词 疟疾 冈比亚按蚊 耐药性 kdr ace-1
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不同杀虫剂选育对家蝇抗药性水平及kdr基因频率的影响 被引量：10
3
作者 冷培恩 张晓龙 +5 位作者 李春晓 刘洪霞 范明秋 周毅彬 董言德 赵彤言 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期59-64,共6页
采用杀虫剂（溴氰菊酯和甲基嘧啶磷）筛选及不接触药物自然衰退的方法，研究了家蝇Musca domestica氯氟氰菊酯高抗品系（Cyh—R）对杀虫剂的抗性变化，探讨蝇类抗药性治理的方法。用点滴法测定氯氟氰菊酯对不同家蝇品系的毒力，比较抗... 采用杀虫剂（溴氰菊酯和甲基嘧啶磷）筛选及不接触药物自然衰退的方法，研究了家蝇Musca domestica氯氟氰菊酯高抗品系（Cyh—R）对杀虫剂的抗性变化，探讨蝇类抗药性治理的方法。用点滴法测定氯氟氰菊酯对不同家蝇品系的毒力，比较抗药性的变化，结合特异性等位基因PCR扩增（PASA）技术检测了不同家蝇品系的kdr基因频率，探讨kdr基因频率与抗性水平之间的关系。结果表明：甲基嘧啶磷筛选后，氯氟氰菊酯对第2～8代Cyh—R品系的LD50呈递减趋势，从F0的2．8434μg／蝇降为F8的0．4404μg／蝇，但第8—18代Cyh—R品系的LD5u呈逐代递增趋势；溴氰菊酯筛选后，氯氟氰菊酯对Cyh—R品系第2～16代的LD50呈上升趋势，从F0的2．8434μg／蝇升至F16的24．3249μg／蝇；表明了施用有机磷杀虫剂可降低其对氯氟氰菊酯的抗药性，而施用拟除虫菊酯药剂则有助于其对氯氟氰菊酯抗药性的增长；不使用任何杀虫剂也能降低其对氯氟氰菊酯的抗药性，但下降速率低于甲基嘧啶磷。PASA技术检测表明Cyh—R品系的kdr抗性基因频率为88．8％，不经过任何药剂筛选其kdr抗性基因频率下降程度最大，达到69．7％；甲基嘧啶磷筛选后其结果降为78．8％，而经溴氰菊酯筛选后kdr抗性基因频率则明显升高，达到98．9％。通过对kdr抗性基因频率和抗性水平进行相关和回归分析表明kdr抗性基因频率与家蝇对氯氟氰菊酯的LD50呈对数关系，即LD50值高的品系其kdr抗性基因频率相应的也较高。建议在家蝇防治中考虑轮换用药。 展开更多
关键词 家蝇 氯氟氰菊酯 杀虫剂筛选 抗药性治理 kdr基因频率
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益气化瘀解毒方对人肝癌裸鼠HepG2移植瘤MVD、HIF1a、VEGF/KDR表达的影响 被引量：21
4
作者 曾普华 郜文辉 +4 位作者 潘敏求 蒋益兰 李勇敏 李跃辉 唐珍 《中华中医药学刊》 CAS 2014年第7期1563-1565,共3页
目的:观察益气化瘀解毒方对人肝癌裸鼠HepG2移植瘤MVD、HIF1a、VEGF/KDR表达的影响。方法:建立人肝癌移植瘤模型,分为7组,分别以益气化瘀解毒方、黄芪、莪术、重楼、壁虎、顺铂药物干预21 d后,取瘤组织行免疫组化检测。结果:①对MVD的影... 目的:观察益气化瘀解毒方对人肝癌裸鼠HepG2移植瘤MVD、HIF1a、VEGF/KDR表达的影响。方法:建立人肝癌移植瘤模型,分为7组,分别以益气化瘀解毒方、黄芪、莪术、重楼、壁虎、顺铂药物干预21 d后,取瘤组织行免疫组化检测。结果:①对MVD的影响:全方组与除顺铂外的其它组比较有统计学意义(P<0.05);除黄芪、莪术外的其它组与空白组比较有统计学意义(P<0.05)。②对HIF1a的影响:全方组与除黄芪外的其它组比较有统计学意义(P<0.05);各组与空白组比较有统计学意义(P<0.05)。③对VEGF表达的影响:全方组与除顺铂外的其它组比较均有统计学意义(P<0.05);莪术组与空白组比较无统计学意义(P>0.05)。④对KDR表达的影响:全方组与其它各组比较均有统计学意义(P<0.05);黄芪组与空白组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:益气化瘀解毒方能明显抑制人肝癌裸鼠移植瘤MVD、HIF1a、VEGF和KDR的表达而发挥抗血管生成作用;各单味药对其作用各有侧重,但作为整方的有机组成从不同环节发挥了协同作用。 展开更多
关键词 益气化瘀解毒方 人肝癌裸鼠HepG2移植瘤 MVD HIF1a VEGF/kdr
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人参皂苷Rg_3对人肺鳞癌细胞VEGF及KDR表达的影响 被引量：10
5
作者 王鑫 郑玉玲 +2 位作者 李克 林娜 樊青霞 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1708-1710,共3页
目的:探讨人参皂苷Rg3在抑制肿瘤新生血管生成过程中的作用,及其对人肺鳞癌SK-MES-1分泌的血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体KDR的影响。方法:体外培养人肺鳞癌SK-MES-1细胞,经不同浓度的Rg3处理后,采用免疫细胞化学法与RT-PCR法检测... 目的:探讨人参皂苷Rg3在抑制肿瘤新生血管生成过程中的作用,及其对人肺鳞癌SK-MES-1分泌的血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体KDR的影响。方法:体外培养人肺鳞癌SK-MES-1细胞,经不同浓度的Rg3处理后,采用免疫细胞化学法与RT-PCR法检测Rg3对SK-MES-1细胞株VEGF mRNA、KDR mRNA及其蛋白表达的影响。结果:免疫细胞化学结果显示人参皂苷Rg3各浓度组SK-MES-1细胞VEGF及KDR蛋白阳性率与对照组比较差异显著。RT-PCR结果显示随着Rg3浓度的增加,VEGF、KDR扩增条带逐渐减弱,各浓度组与对照组比较差异显著。结论:人参皂苷Rg3能够抑制人肺鳞癌SK-MES-1细胞VEGF mRNA与KDR mRNA及其蛋白水平的表达,这可能是Rg3抑制肿瘤新生血管形成的机制之一。 展开更多
关键词 人参皂苷RG3 肺鳞癌 VEGF kdr
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基于VEGF/KDR通路探讨温肾养血方提高子宫内膜容受性的研究 被引量：14
6
作者 辛明蔚 何军琴 +4 位作者 武颖 梁欣韫 张莹 杨维 尹晓丹 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期2386-2389,共4页
目的:探讨温肾养血方提高子宫内膜容受性的作用机制。方法:建立肾虚血瘀型胚胎着床障碍大鼠模型,运用SP免疫组化法、蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR检测正常组,模型组,高、中、低剂量组血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(K... 目的:探讨温肾养血方提高子宫内膜容受性的作用机制。方法:建立肾虚血瘀型胚胎着床障碍大鼠模型,运用SP免疫组化法、蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR检测正常组,模型组,高、中、低剂量组血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(KDR)的表达情况。结果:与模型组比较,温肾养血方高剂量组的VEGF、KDR蛋白表达均显著升高(P<0.05)。结论:温肾养血方能促进子宫内膜VEGF和KDR的表达,并且其效果与剂量成正相关,提示温肾养血方提高妊娠率的作用机制可能与通过调节子宫内膜血流改善子宫内膜容受性有关。 展开更多
关键词 VEGF/kdr通路 温肾养血方 子宫内膜容受性
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安徽省沿淮地区中华按蚊溴氰菊酯抗性及代谢解毒酶活性kdr突变频率调查 被引量：6
7
作者 常雪莲 薛玉芹 +2 位作者 张安冬 朱国鼎 方强 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2013年第3期263-267,共5页
目的了解安徽省沿淮地区疟疾媒介中华按蚊对溴氰菊酯杀虫剂的抗性状况及谷胱甘肽S转移酶(GSTs)、细胞色素氧化酶(P450s)等代谢解毒酶活性和钠离子通道击倒抗性基因(Knockdown resistance,kdr)的突变情况。方法2011年8-9月采集安徽省蚌... 目的了解安徽省沿淮地区疟疾媒介中华按蚊对溴氰菊酯杀虫剂的抗性状况及谷胱甘肽S转移酶(GSTs)、细胞色素氧化酶(P450s)等代谢解毒酶活性和钠离子通道击倒抗性基因(Knockdown resistance,kdr)的突变情况。方法2011年8-9月采集安徽省蚌埠市李楼乡、沫河口镇和沱湖乡中华按蚊成蚊样本,采用WHO成蚊接触筒药膜滤纸接触法,调查3个地区中华按蚊对溴氰菊酯抗性状况。随机挑选样本采用生化法检测代谢解毒酶活性并用PCR扩增产物直接测序法检测分析钠离子通道kdr基因IIS6片段L1014位点基因型。结果李楼乡、沫河口镇和沱湖乡3个检测点的中华按蚊对溴氰菊酯60 min内击倒率分别为4.1%、7.0%和8.2%,恢复24 h后校正死亡率分别为8.2%、12.0%、12.8%,均为抗性种群。3个检测点的中华按蚊GSTs和P450s活性均显著高于实验室敏感种群(P<0.001)。3个检测点的中华按蚊kdr基因均发生突变,存在L1014C和L1014F两种突变类型,无野生纯合型(TTG/TTG),实验室敏感种群kdr基因均为无突变的野生纯合型。结论安徽省沿淮地区的中华按蚊已对溴氰菊酯产生较强的抗性,代谢解毒酶活性比实验室敏感种群显著升高,钠离子通道kdr基因L1014位点出现高频率的突变。 展开更多
关键词 中华按蚊 溴氰菊酯 抗性 代谢解毒酶 kdr 基因突变 沿淮地区
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KDR反义寡核苷酸对人胃癌细胞的作用 被引量：11
8
作者 任娟 董蕾 +5 位作者 徐仓宝 潘伯荣 李明众 王晖 王晓丽 王梅 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2002年第4期333-336,共4页
目的　用 KDR反义寡核苷酸作用于人胃腺癌细胞 ,观察对细胞增殖及超微结构的影响 ,检测作用后 KDR基因的表达 ,并测定细胞分泌 VEGF的能力 .方法　 MTT法测定细胞的增殖能力 ,电镜下观察细胞的超微结构 .原位杂交及免疫组化法检测 KDR m... 目的　用 KDR反义寡核苷酸作用于人胃腺癌细胞 ,观察对细胞增殖及超微结构的影响 ,检测作用后 KDR基因的表达 ,并测定细胞分泌 VEGF的能力 .方法　 MTT法测定细胞的增殖能力 ,电镜下观察细胞的超微结构 .原位杂交及免疫组化法检测 KDR m RNA及蛋白的表达 .ELISA法测细胞培养液中人 VEGF的含量 .结果　 KDR ASODN可明显的抑制人胃腺癌细胞增殖 .增殖抑制率最高可达 55.4% .当剂量为 2 0μmol· L-1 时还可诱发细胞凋亡 .KDR ASODN能明显抑制细胞内 KDR m RNA和蛋白的表达 .胃癌细胞还能分泌一定量的人 VEGF:(92± 1 .7) ng· L-1 .结论　胃癌细胞能分泌一定量的人 VEGF.KDR ASODN能抑制细胞内 KDR基因的表达 ,并显著抑制胃癌细胞的增殖 .在一定剂量下还可诱发其凋亡 .说明 VEGF及受体 KDR在人胃腺癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 kdr 反义寡核苷酸 人胃癌细胞 血管内皮生长因子
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大肠癌中C-Met VEGF及其受体KDR的表达与预后的相关性 被引量：5
9
作者 赵达 侯小明 +4 位作者 冯颖 刘小军 马守成 令晓玲 元淑巧 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期941-944,共4页
目的:探讨C-Met、CEGF及其受体KDR在大肠癌组织中的表达与预后的关系,为判断大肠癌患者预后提供参考。方法:应用免疫组织化学法检测60例大肠癌标本中C-Met、VEGF及其受体KDR的表达情况。随访统计5年生存率。结果:C-Met、VEGF及其受体KD... 目的:探讨C-Met、CEGF及其受体KDR在大肠癌组织中的表达与预后的关系,为判断大肠癌患者预后提供参考。方法:应用免疫组织化学法检测60例大肠癌标本中C-Met、VEGF及其受体KDR的表达情况。随访统计5年生存率。结果:C-Met、VEGF及其受体KDR在大肠癌组织中的表达阳性率分别为43.3%、61.7%及68.3%;三者在大肠癌组织中的表达与患者的年龄及性别无明显相关(P>0.05),与肿瘤侵袭深度、是否淋巴结转移及Dukes分期密切相关(P均<0.05)。C-Met、VEGF及KDR阳性者5年生存率分别为423%、43.2%及51.2%,阴性者5年生存率分别为73.5%、87.0%及78.9%,两组差异有统计学意义(P<0.05)Cox回归生存分析显示:对于大肠癌患者,VEGF、KDR及C-Met均是独立危险因素;联合检测VEGF、KDR及C-Met,是预测大肠癌预后很好的指标。结论:C-Met、VEGF及其受体KDR在大肠癌患者组织中的表达与大肠癌的发生、发展有关,三者均阳性表达提示患者预后差,可作为评价预后的指标。 展开更多
关键词 C—Met VEGF kdr 免疫组织化学 预后 肠肿瘤
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黄芪、丹参配伍提取物调控心肌梗死大鼠血管内皮生长因子及其受体KDR的作用 被引量：19
10
作者 张瓅方 王倩 +2 位作者 刘暖 杨雷 毛秉豫 《科学技术与工程》 北大核心 2018年第6期229-233,共5页
观察黄芪、丹参配伍提取物对心肌梗死大鼠血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体KDR(kinase insert domain receptor)的调控作用,分析其对心肌梗死大鼠的保护机制。对SD雄性大鼠采用冠状动脉左前降支结扎... 观察黄芪、丹参配伍提取物对心肌梗死大鼠血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体KDR(kinase insert domain receptor)的调控作用,分析其对心肌梗死大鼠的保护机制。对SD雄性大鼠采用冠状动脉左前降支结扎法复制心肌梗死大鼠模型,随机分为模型组、黄芪、丹参配伍提取物高、中、低剂量组(40、20、10 mg·kg-1·d-1);另设假手术组,各组均为8只。黄芪、丹参配伍提取物各组采用上述对应剂量灌胃给药,模型组和假手术组采用等量生理盐水灌胃,连续饲养28 d后采用ELISA法、RT-PCR法和Western blot法检测分析VEGF及其受体KDR的表达变化。黄芪、丹参配伍提取物各剂量组与模型组相比VEGF及其受体KDR随着剂量加大表达明显升高(P<0.01,P<0.05)。说明:黄芪、丹参配伍提取物可以有效上调VEGF及其受体KDR的表达,从而促进心肌梗死大鼠心肌组织中血管新生作用。 展开更多
关键词 黄芪、丹参配伍提取物 心肌梗死 VEGF kdr 血管新生
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淡色库蚊kdr等位基因突变及抗药性检测方法的研究 被引量：5
11
作者 刘宏美 代玉华 +6 位作者 王海防 程鹏 黄晓丹 刘丽娟 赵玉强 王怀位 公茂庆 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期820-824,共5页
目的了解山东省不同地区的淡色库蚊成蚊对溴氰菊酯的抗药性水平及其kdr等位基因的突变与抗药性水平间的关联情况,并探索建立蚊虫抗药性的现场检测方法。方法采用PCR和AS-PCR技术,使用特异性引物克隆不同地区野生淡色库蚊成蚊kdr基因序列... 目的了解山东省不同地区的淡色库蚊成蚊对溴氰菊酯的抗药性水平及其kdr等位基因的突变与抗药性水平间的关联情况,并探索建立蚊虫抗药性的现场检测方法。方法采用PCR和AS-PCR技术,使用特异性引物克隆不同地区野生淡色库蚊成蚊kdr基因序列,并进行基因测序。利用线性回归分析判断其突变情况与抗药性的关联情况。结果成功克隆出kdr等位基因,通过基因序列分析发现在淡色库蚊钠通道第II结构域S6节段1014位点上存在2种突变,即L1014F:TTA突变为TTT,相应的亮氨酸(L)被苯丙氨酸(F)取代,L1014S:TTA突变为TCA,相应的亮氨酸(L)被丝氨酸(S)取代。Kdr基因L1014F突变和L1014S突变与淡色库蚊对溴氰菊酯的抗性表型呈正相关。蚊虫抗药性检测的结果显示PCR技术优于AS-PCR技术。结论淡色库蚊kdr基因突变与溴氰菊酯抗药性表型呈正相关,PCR和AS-PCR技术都可以应用于蚊虫抗药性的现场检测。 展开更多
关键词 淡色库蚊 抗药性 溴氰菊酯 kdr等位基因 AS-PCR技术
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桃红四物汤Ⅱ号抑制小鼠B16黑色素瘤生长及VEGF,KDR/FLK-1表达 被引量：7
12
作者 王淑美 徐晓玉 +1 位作者 陈刚 杨丽容 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第23期1866-1869,共4页
目的:观察桃红四物汤Ⅱ号对小鼠B16黑色素瘤生长、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(KDR/FLK-1)表达及肿瘤微血管密度(MVD)值的影响。方法:采用C57BL/6J小鼠皮下接种B16黑色素瘤细胞建立模型,分别给予2.5,5,10 g.kg-1桃... 目的:观察桃红四物汤Ⅱ号对小鼠B16黑色素瘤生长、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(KDR/FLK-1)表达及肿瘤微血管密度(MVD)值的影响。方法:采用C57BL/6J小鼠皮下接种B16黑色素瘤细胞建立模型,分别给予2.5,5,10 g.kg-1桃红四物汤Ⅱ号水煎剂、环磷酰胺0.05 g.kg-1及联合用药桃红四物汤Ⅱ号10 g.kg-1+环磷酰胺0.025 mg.kg-1,检测各组肿瘤体积、重量、VEGF和KDR/FLK-1表达及肿瘤MVD值。结果:桃红四物汤Ⅱ号5,10 g.kg-1及联合用药组肿瘤体积、重量、VEGF和KDR/FLK-1表达及肿瘤MVD值均较生理盐水组明显降低(P<0.01)。结论:桃红四物汤Ⅱ号能抑制小鼠B16黑色素瘤的生长,其抗肿瘤机制可能与抗血管生成作用有关。 展开更多
关键词 桃红四物汤Ⅱ号 B16黑色素瘤 VEGF kdr/FLK-1 血管生成
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胃康宁含药血清对胃癌细胞生长与血管内皮生长因子及其受体KDR、Flt-1表达的影响 被引量：11
13
作者 李庆明 阚方巨 闵存云 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第S1期88-92,共5页
目的观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞生长和VEGF及其受体表达的作用。方法分别以高、中、低等不同剂量的胃康宁制剂对Wistar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量组合药血清培养胃癌细胞,以倒置显微镜及流式细胞仪观测... 目的观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞生长和VEGF及其受体表达的作用。方法分别以高、中、低等不同剂量的胃康宁制剂对Wistar雄性大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量组合药血清培养胃癌细胞,以倒置显微镜及流式细胞仪观测各组胃癌细胞的生长状况,免疫组织化学SABC法检测各组胃癌细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体Flt-1的表达,RT- PCR法检测各组胃癌细胞中VEGF及其受体KDR,Flt-1 mRNA的表达。结果与对照组比较,用药组胃癌细胞的生长及细胞周期明显改变(P＜0．01),用药组G_0-G_1期细胞增多,S期细胞减少,凋亡率增加,并呈一定的量效关系。VEGF的灰度值由对照组的147．82±0．15升高到低剂量组的174．80±0．81,中剂量组的178．65±0．56,高剂量组的182．44±0．54(P＜0．01)。Flt-1的灰度值由对照组144．31±0．71升高到低剂量组148．20±0．69,中剂量组162．01±0．52,高剂量组168．51±0．81(P＜0．01)。胃康宁含药血清培养的胃癌细胞中VEGF及其受体KDR、Flt-1 mRNA的表达明显减弱(P＜0．01)。结论中药胃康宁对胃癌细胞的生长,VEGF及其受体的表达有抑制作用。 展开更多
关键词 胃癌细胞 血管内皮生长因子 FLT-1 kdr 胃康宁
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腺病毒介导的KDR启动子-胸苷激酶系统对血管内皮细胞的选择性杀伤作用 被引量：4
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作者 朱忠政 殷正丰 +2 位作者 吴宗娣 张柏和 吴孟超 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第4期243-247,共5页
目的 :研究腺病毒介导的KDR启动子 胸苷激酶系统对血管内皮细胞的选择性杀伤作用。方法 :应用PCR克隆出人KDR基因启动子序列 - 2 2 5bp～ +12 7bp ,以AdEasysystem为载体 ,构建携带受KDR启动子或CMV启动子调控tk基因表达的 2种重组腺... 目的 :研究腺病毒介导的KDR启动子 胸苷激酶系统对血管内皮细胞的选择性杀伤作用。方法 :应用PCR克隆出人KDR基因启动子序列 - 2 2 5bp～ +12 7bp ,以AdEasysystem为载体 ,构建携带受KDR启动子或CMV启动子调控tk基因表达的 2种重组腺病毒质粒 pAdKDR tk和 pAdCMV tk ,在 2 93细胞中包装、扩增后 ,体外感染表达KDR的脐静脉血管内皮细胞系HUVEC和不表达KDR的肝癌细胞系HepG2 ,并给予不同浓度的丙氧鸟苷 (GCV)处理 ,5d后收集存活细胞并计数。结果 :产生的病毒滴度均为 5× 10 9pfu/ml。在MOI为 10 0、GCV为 5 0 μg/ml条件下 ,AdKDR tk转染HUVEC后细胞生存率下降 (31 49%± 6 .42 % ) ,AdKDR tk转染HepG2后细胞生存率为 76 .5 7%± 3.49% ,而转染AdCMV tk的 2细胞系生存率均显著下降 ,细胞生存率分别为 2 2 .2 4%± 3.77% (HUVEC)和 2 6 .5 3%± 6 .84% (HepG2 )。 结论 :KDR基因启动子可调控HSV tk在血管内皮细胞中特异性表达 ,为进一步开展靶向肿瘤血管内皮的自杀基因治疗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 肿瘤 血管内皮细胞 kdr启动子 自杀基因治疗 腺病毒 胸苷激酶系统
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桃红四物汤Ⅱ号抗血管生成作用及其对KDR/FLK-1表达的影响 被引量：13
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作者 徐晓玉 王淑美 +1 位作者 陈伟海 陈刚 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 2005年第5期329-332,共4页
目的探讨桃红四物汤(THSWD)Ⅱ号抗血管生成作用及其机理。方法以鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)法检测THSWDⅡ号对新生血管的效应,以MTT法检测其对血管内皮细胞ECV304增殖有无抑制作用,并以免疫组化法观察该方对小鼠B16黑色素瘤血管内皮细胞KDR/FL... 目的探讨桃红四物汤(THSWD)Ⅱ号抗血管生成作用及其机理。方法以鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)法检测THSWDⅡ号对新生血管的效应,以MTT法检测其对血管内皮细胞ECV304增殖有无抑制作用,并以免疫组化法观察该方对小鼠B16黑色素瘤血管内皮细胞KDR/FLK-1的表达和微血管密度(MVD)计数的影响。结果THSWDⅡ号1 g/mL、2 g/mL组CAM血管指数降低(P<0.01);THSWDⅡ号1 mg/mL、2 mg/mL组ECV304细胞吸光度值降低(P<0.01);THSWDⅡ号5 g/kg、10 g/kg组及THSWDⅡ号10 g/kg+环磷酰胺25 mg/kg组肿瘤重量、KDR/FLK-1的表达、MVD计数均降低(P<0.01)。结论THSWDⅡ号具有抗CAM血管生成、抑制ECV304细胞增殖、抑制小鼠B16黑色素瘤生长的作用。其抗肿瘤作用机制可能与抑制内皮细胞KDR/FLK-1的表达,继而抗血管生成有关。 展开更多
关键词 桃红四物汤Ⅱ号 抗血管生成 kdr/FLK-1
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共培养系统中视网膜微血管周细胞经KDR/Flk-1途径对内皮细胞增生的影响(英文) 被引量：5
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作者 王应利 惠延年 +3 位作者 郭斌 张晓光 侯旭 马吉献 《国际眼科杂志》 CAS 2006年第2期255-263,共9页
目的:采用细胞共培养模型研究缺氧诱导视网膜新生血管生成过程中周细胞对微血管内皮细胞增生的作用及其相关血管内皮细胞生长因子受体2(KDR/Flk-1)调节机制。方法:免疫磁珠法原代分离培养大鼠视网膜微血管内皮细胞和周细胞,分别采用抗V... 目的:采用细胞共培养模型研究缺氧诱导视网膜新生血管生成过程中周细胞对微血管内皮细胞增生的作用及其相关血管内皮细胞生长因子受体2(KDR/Flk-1)调节机制。方法:免疫磁珠法原代分离培养大鼠视网膜微血管内皮细胞和周细胞,分别采用抗VIII因子、CD31抗体以及抗血小板源性生长因子受体β、结蛋白抗体免疫细胞化学法鉴定内皮细胞和周细胞。通过Millicell小室建立周细胞和内皮细胞共培养模型,使用MTT法和流式细胞仪检测内皮细胞增殖数量及周期,观察缺氧和常氧下周细胞对血管内皮细胞增生的影响,并采用RT-PCR法检测内皮细胞KDR/Flk-1的mRNA水平变化,探讨相关调节机制。结果:经免疫细胞化学法鉴定,免疫磁珠法可获得高纯度的视网膜微血管内皮细胞和周细胞。MTT法显示,缺氧3～9d内皮细胞增生明显,6d增生达高峰(24.9%,P<0.01);共培养时内皮细胞的增生可被周细胞抑制。流式细胞仪检测发现,缺氧6dS期内皮细胞数量明显增加(43.9%,P<0.01);常氧(3.6%,P<0.05)或缺氧(15.1%,P<0.01)共培养时,周细胞均可抑制内皮细胞增生。缺氧下内皮细胞KDR/Flk-1的mRNA水平是常氧下的1.3倍;常氧(45.1%,P<0.05)和缺氧(27.7%,P<0.05)共培养下,周细胞均可下调内皮细胞KDR/Flk-1的mRNA表达。结论:缺氧和常氧共培养时周细胞均可抑制微血管内皮细胞增生,此抑制作用部分是通过下调内皮细胞KDR/Flk-1mRNA表达实现。 展开更多
关键词 周细胞 视网膜微血管内皮细胞 共培养 增生 kdr/FLK-1 血管生成 缺氧
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重组可溶性KDR及其抗体对内皮细胞的增殖抑制作用 被引量：4
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作者 刘丽 肖畅 +1 位作者 王烨 曹颖 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第1期23-26,共4页
目的 :分析可溶性KDR(sKDR)及其抗体对内皮细胞增殖的抑制作用。方法 :通过ELISA分析大肠杆菌表达的sKDR纯化产物与VEGF16 5结合的能力 ;sKDR免疫家兔制备KDR2 6 2抗血清 ,Wensternblot分析该抗血清与KDR2 6 2蛋白结合的特异性 ;用3 H ... 目的 :分析可溶性KDR(sKDR)及其抗体对内皮细胞增殖的抑制作用。方法 :通过ELISA分析大肠杆菌表达的sKDR纯化产物与VEGF16 5结合的能力 ;sKDR免疫家兔制备KDR2 6 2抗血清 ,Wensternblot分析该抗血清与KDR2 6 2蛋白结合的特异性 ;用3 H TdR掺入法 ,MTT法和细胞计数 3种方法分析重组sKDR及其抗体对内皮细胞的增殖抑制作用。结果 :sKDR蛋白可与VEGF16 5特异性结合 ,肝素可增强其结合能力。KDR2 6 2抗血清具有特异性识别KDR蛋白的能力 ,其滴度为 1∶2 0 0 0。用3 H TdR掺入法和MTT 2种方法分析sKDR蛋白及其抗体对内皮细胞的增殖抑制作用结果一致 ,sKDR蛋白浓度在 10 μg/ml,2μg/ml,0 .4μg/ml时对内皮细胞增殖抑制率平均为 5 6 %,44 %和 32 %;抗KDR2 6 2抗体在稀释度为 5 0 ,2 0 0和 80 0倍时对内皮细胞增殖的抑制率平均为 70 %,5 6 %和 43%。细胞计数法测定结果 ,sKDR及抗KDR2 6 2抗体组与VEGF16 5单独刺激组 ,GST和PBS对照组相比 ,内皮细胞增殖被明显抑制 ,随浓度增加抑制活性明显增强 ,但抗体的抑制活性比sKDR蛋白高。结论 :大肠杆菌表达的sKDR及其抗体对内皮细胞均具有明显的增殖抑制作用。 展开更多
关键词 重组可溶性kdr 抗体 内皮细胞 抑制作用 血管内皮细胞生长因子 抗血管形成 细胞增殖
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贵阳市家蝇对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性现状与kdr（L1014F）等位基因频率分析 被引量：4
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作者 杨茜 张亮 +4 位作者 杨迅 程金芝 吴渊明 刘鉴 吴家红 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 北大核心 2016年第4期218-223,共6页
探讨贵阳市区家蝇对拟除虫菊酯类杀虫剂抗药性水平与kdr等位基因上的L1014F点突变频率相关性，为贵阳市科学合理使用卫生杀虫剂控制家蝇提供科学依据。本研究采用WHO推荐的微量点滴法进行抗性测定。结果显示贵阳市4城区家蝇对氯菊酯和... 探讨贵阳市区家蝇对拟除虫菊酯类杀虫剂抗药性水平与kdr等位基因上的L1014F点突变频率相关性，为贵阳市科学合理使用卫生杀虫剂控制家蝇提供科学依据。本研究采用WHO推荐的微量点滴法进行抗性测定。结果显示贵阳市4城区家蝇对氯菊酯和高效氯氰菊酯的LD50分别为0．00620～0．013339μg／雌蝇、0．02298～0．03614μg／雌蝇，抗性系数分别为3．35～7．56、7．38—11．62。采用特异性等位基因PCR法测定基因频率，结果显示4城区家蝇种群的L1014F点突变频率在29％～37％。相关性分析显示L1014F点突变等位基因频率与高效氯氰菊酯LD50值之间存在直线相关。研究结果表明贵阳市家蝇对氯菊酯、高效氯氰菊酯已经产生了抗药性，击倒抗性是其抗性机理之一。 展开更多
关键词 家蝇 抗性 kdr L1014F PASA 拟除虫菊酯
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胃腺癌的血管内皮细胞生长因子和KDR受体的表达及其临床意义 被引量：10
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作者 张瑞芳 蔡永葆 +5 位作者 黄伟良 朱玉芳 曾艳 萧东 袁胜涛 丁健 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第1期61-64,共4页
目的：研究胃腺癌的血管内皮细胞生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ， ＶＥＧＦ）及其受体 ＫＤＲ（ＶＥＧＦＲ）的表达，并探讨其临床意义。方法：应用免疫组织化学染色法检测... 目的：研究胃腺癌的血管内皮细胞生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ， ＶＥＧＦ）及其受体 ＫＤＲ（ＶＥＧＦＲ）的表达，并探讨其临床意义。方法：应用免疫组织化学染色法检测ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ的表达，并分析其与６１例胃腺癌临床病理特征之间的关系。结果：胃腺癌组织ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ的阳性表达率分别为５５．９％和３９．３％；其中粘液腺癌和管状腺癌表达率较高（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ表达率分别为７１．４Ｔ／４２．８％和６１．９％／５２．４％；ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ的阳性表达与ＴＮＭ分期有显著差异（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），阳性率为Ⅵ＞Ⅲ＞Ⅱ＞Ⅰ期，Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ期的表达率分别为 ８０．０％／５０．０％，６８．２％／４５．５％，４０．０％／３０．０％和３６．８％／３１． ６％；胃腺癌并转移患者，ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ的阳性表达分别为７６．２％和４７．６％，远高于无转移的４５．０％和３５．０％（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；术后生存期小于１年的ＶＥＧＦ的表达率为６６．７％，明显高于术后生存期１年以上的５２．２％。 展开更多
关键词 胃腺癌 血管内皮细胞生长因子 kdr受体 免疫组织化学
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