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当归补血汤治疗心肌纤维化的核心有效活性成分和靶基因筛选及其机制分析
1
作者 郑璐瑶 韩艳丽 +1 位作者 高红梅 靳乐 《山东医药》 2025年第6期17-22,共6页
目的运用网络药理学与分子对接技术筛选当归补血汤治疗心肌纤维化(MF)的核心有效活性成分及靶基因,并分析其作用机制。方法通过中医药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及已发表的文献报道,筛选当归补血汤中黄芪、当归的有效活性成分,... 目的运用网络药理学与分子对接技术筛选当归补血汤治疗心肌纤维化(MF)的核心有效活性成分及靶基因,并分析其作用机制。方法通过中医药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及已发表的文献报道,筛选当归补血汤中黄芪、当归的有效活性成分,小分子药物靶基因预测在线平台预测有效活性成分相关靶基因。通过GeneCards、OMIM、DisGeNET数据库筛选MF相关疾病靶基因。将有效活性成分相关靶基因和MF相关疾病靶基因取交集,得到当归补血汤治疗MF的潜在靶基因;将潜在靶基因导入DAVID平台,进行基因本体(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;利用CytoScape 3.7.2软件构建有效活性成分-潜在靶基因-信号通路网络图,连接度排名前5位的潜在靶基因为核心靶基因,排名前8位的有效活性成分为核心有效活性成分,采用分子对接技术分析其结合能。结果共获得黄芪有效活性成分22种、当归有效活性成分2种,有效活性成分相关靶基因437个,MF相关疾病靶基因1733个,取交集后得到当归补血汤治疗MF的潜在靶基因166个。GO富集分析结果显示,潜在靶基因涉及635个生物过程条目、160个分子功能条目和97个细胞组分条目;KEGG通路富集分析结果显示,潜在靶基因主要参与磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、Ras相关蛋白1(Rap1)信号通路等。分子对接结果显示,8个核心有效活性成分为熊竹素、异鼠李素、槲皮素、山奈酚、美迪紫檀素、3,9-二-O-甲基尼索林、异微凸剑叶莎醇、豆甾醇,5个核心靶基因分别为AKT1、表皮生长因子受体(EGFR)、磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α(PIK3CA)、MAPK1、MAPK3,其结合能均<0 kcal/mol,异鼠李素、异微凸剑叶莎醇与AKT1的结合能>-5 kcal/mol,其余结合能均<-5 kcal/mol。结论当归补血汤中的熊竹素、异鼠李素、槲皮素等核心有效活性成分可能作用于AKT1、EGFR、PIK3CA、MAPK1等核心靶基因,通过调控PI3K/AKT信号通路等发挥治疗MF的作用。 展开更多
关键词 当归补血汤 网络药理学 分子对接技术 心肌纤维化 熊竹素 蛋白激酶B1 表皮生长因子受体
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华良姜素对PDGF-BB诱导血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响 被引量：10
2
作者 李岩 安芸 +3 位作者 张赫彬 张海燕 张凤英 宋国华 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2023年第10期865-871,共7页
[目的]探讨华良姜素对PDGF-BB诱导下血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响及可能的机制。[方法]利用25μg/L的PDGF-BB处理人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)诱导血管平滑肌细胞增殖和迁移。实验分为正常对照组、PDGF-BB组(模型组)、PDGF-BB+... [目的]探讨华良姜素对PDGF-BB诱导下血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响及可能的机制。[方法]利用25μg/L的PDGF-BB处理人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)诱导血管平滑肌细胞增殖和迁移。实验分为正常对照组、PDGF-BB组(模型组)、PDGF-BB+华良姜素(10、20、40μmol/L)组和DMSO组。采用CCK-8实验检测HA-VSMC增殖活力,Transwell实验检测HA-VSMC迁移能力,Western blot检测自噬效应蛋白p62、LC3、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)以及磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达水平的变化。[结果]PDGF-BB处理后,HA-VSMC增殖和迁移能力显著上调(P<0.01),华良姜素显著抑制PDGF-BB诱导的HA-VSMC的增殖和迁移,且随浓度的上升抑制能力越明显(P<0.05)。与模型组比较,40μmol/L华良姜素处理后,LC3Ⅰ以及mTOR蛋白表达水平显著降低(P<0.05);LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p62与p-mTOR蛋白表达水平显著升高(P<0.05),同时发现40μmol/L华良姜素与AMPK抑制剂Compound C,对PDGF-BB诱导的HA-VSMC AMPK/mTOR信号通路的影响一致。[结论]华良姜素可抑制PDGF-BB诱导的HA-VSMC的增殖和迁移,其作用机制可能是通过上调AMPK/mTOR信号通路,抑制自噬实现。 展开更多
关键词 华良姜素 血小板源生长因子BB 血管平滑肌细胞 自噬 细胞增殖 细胞迁移
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基于网络药理学和分子对接的玉屏风散预防新型冠状病毒肺炎(COVID-19)活性化合物的研究 被引量：24
3
作者 詹群璋 黄英杰 +1 位作者 林树红 褚庆民 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1731-1740,共10页
目的采用网络药理学和分子对接技术探寻玉屏风散预防新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的活性化合物,以期将其更好地应用于临床。方法在中药系统药理学分析平台(TCMSP)网站检索玉屏风散中黄芪、白术、防风3味中药的全部有效成分及作用靶点,通... 目的采用网络药理学和分子对接技术探寻玉屏风散预防新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的活性化合物,以期将其更好地应用于临床。方法在中药系统药理学分析平台(TCMSP)网站检索玉屏风散中黄芪、白术、防风3味中药的全部有效成分及作用靶点,通过String数据库生成玉屏风散的蛋白与蛋白相互作用(PPI)网络,用Cytoscape3.6.1软件进行数据分析提取PPI网络中的Hub网络,通过String数据库的analysis功能进行KEGG通路分析,用ChemOffice、PyMOL、Auto Dock软件进行分子对接。结果限定筛选条件为口服生物利用度(OB)≥30%、类药性(DL)≥0.18共得到45个活性成分,筛选得到玉屏风散的潜在靶点345个,关键靶点共15个,通过KEGG通路分析得到50条通路,筛选得到25条主要通路,包含PI3K-Akt信号通路、Ras信号通路、HIF-1信号通路、MAPK信号通路和T细胞受体信号通路等。结论玉屏风散中的活性化合物能通过抑制新型冠状病毒(SARS-CoV-2)蛋白与血管紧张素转化酶Ⅱ(ACE2)结合,作用于PIK3R1、IGF1R等靶点,调节多条信号通路,起到预防COVID-19的作用。 展开更多
关键词 玉屏风散 新型冠状病毒 新型冠状病毒肺炎 网络药理学 分子对接 槲皮素 山柰酚 异鼠李素 表儿茶素 熊竹素
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基于PI3K/Akt信号通路探讨华良姜素抗肝癌细胞HepG2凋亡的作用机制 被引量：19
4
作者 姚红 侯宇芯 +3 位作者 任晋宏 王禹璇 薛慧清 李青山 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期80-87,共8页
目的:观察华良姜素的体外抗肝癌细胞HepG2凋亡的作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测华良姜素(0、5、10、25、50、100、150、300μmol·L^(-1))对HepG2细胞不同时间(24、48、72 h)的增殖抑制作用;异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin... 目的:观察华良姜素的体外抗肝癌细胞HepG2凋亡的作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测华良姜素(0、5、10、25、50、100、150、300μmol·L^(-1))对HepG2细胞不同时间(24、48、72 h)的增殖抑制作用;异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)凋亡试剂盒检测华良姜素(0、3、15、75μmol·L^(-1))对HepG2细胞的凋亡作用;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测华良姜素对HepG2细胞中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响;转录组学分析华良姜素(15μmol·L^(-1))对HepG2细胞处理后基因差异表达与信号通路改变情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)验证差异基因[TEK、血小板源性生长因子α受体(PDGFRA)、脾酪氨酸激酶(SYK)、磷酸肌醇-3-激酶催化亚基G肽(PIK3CG)、Janus激酶3(JAK3)、膜相关鸟苷酸激酶转化蛋白2(MAGI2)]mRNA相对表达。结果:与空白组比较,华良姜素组HepG2细胞的增殖降低(P<0.05,P<0.01);凋亡率升高(P<0.01);Bax蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01),Bcl-2的蛋白表达水平降低(P<0.01);转录测序得到59000个受调控的表达基因,受调控显著差异表达基因125个,其中表达上调差异基因47个,表达下调差异基因74个,京都基因和基因组数据库(KEGG)分析显示,加华良姜素后磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路中与凋亡相关的差异基因变化较大。与空白组比较,华良姜素组(15μmol·L^(-1))TEK、PDGFRA、SYK、PIK3CG、JAK3、MAGI2的mRNA表达水平降低(P<0.01)。结论:采用体外细胞学实验研究华良姜素能抑制HepG2细胞增殖,初步验证其凋亡,可能是影响了PI3K/Akt信号通路中部分差异基因的表达。为后续华良姜素抗肿瘤提供实验基础,同时有助于促进黄酮类化合物的开发利用及潜在的应用价值。 展开更多
关键词 华良姜素 HEPG2 凋亡 转录组学 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路
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