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异奥卡宁抑制PRRSV诱导炎症的作用机制研究
1
作者 陈洪博 李佳铠 +4 位作者 唐歆 广倩 张龙泽 曹翀 邱龙新 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第1期71-79,共9页
为研究异奥卡宁抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)诱导Marc-145细胞炎症的作用机制,本研究经CCK-8法测定异奥卡宁对Marc-145细胞无毒性的浓度后,将Marc-145细胞分为空白对照组、PRRSV组和PRRSV+异奥卡宁组(12.5µmol/L、25µmo... 为研究异奥卡宁抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)诱导Marc-145细胞炎症的作用机制,本研究经CCK-8法测定异奥卡宁对Marc-145细胞无毒性的浓度后,将Marc-145细胞分为空白对照组、PRRSV组和PRRSV+异奥卡宁组(12.5µmol/L、25µmol/L和50µmol/L),各组处理后培养72 h,观察细胞病变(CPE),检测各组病毒滴度,采用荧光定量PCR(qPCR)和western blot检测各组细胞中PRRSV N基因mRNA的转录和蛋白表达水平,经qPCR检测各组细胞中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA转录水平;进一步经western blot检测NF-κB信号通路相关蛋白的表达变化,并基于液相色谱与串联质谱联用(LC-MS/MS)分析技术,筛选空白对照组、PRRSV组和PRRSV+异奥卡宁组(25µmol/L)潜在的差异代谢物及相关信号通路。结果显示,与PRRSV组相比,异奥卡宁减少PRRSV诱导的CPE数量,以25µmol/L和50µmol/L浓度效果最佳。与PRRSV组相比,异奥卡宁显著降低PRRSV滴度和PRRSV N基因mRNA转录水平(P<0.01),其中以25µmol/L和50µmol/L浓度效果最佳;异奥卡宁组PRRSV N蛋白含量也降低;异奥卡宁显著和极显著降低IL-6、IL-8和TNF-αmRNA转录水平(P<0.05、P<0.01),其中以25µmol/L和50µmol/L浓度效果最佳。与空白对照组相比,PRRSV组p-p65/p65蛋白表达量极显著升高(P<0.01),p-IκB-α/IκB-α蛋白表达量显著升高(P<0.05);与PRRSV组相比,异奥卡宁组p-p65/p65蛋白表达量显著降低(P<0.05),p-IκB-α/IκB-α蛋白未发生显著变化(P>0.05)。代谢组学结果显示,共筛选出血栓素b3、D-天冬氨酸、L-脯氨酸、鸟苷、L-天冬氨酸和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad+)等,涉及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、烟酸和烟酰胺代谢、柠檬酸循环(TCA循环)、组氨酸代谢和β-丙氨酸代谢等经PRRSV诱导差异显著且能够被异奥卡宁回调的17种差异代谢物。上述结果首次证实异奥卡宁通过调控氨基酸、烟酸和烟酰胺代谢途径抑制PRRSV的复制及NF-κB信号通路的激活,降低PRRSV诱导的炎症反应,本研究为研究异奥卡宁缓解PRRSV诱导炎症反应的机制提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 异奥卡宁 炎症 代谢组学
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HPLC同时测定雪菊中4种黄酮类成分 被引量：7
2
作者 高飞 陈芳 +4 位作者 马旗联 郝丽莉 刘江云 李雅丽 杨世林 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第20期49-52,共4页
目的:建立雪菊中4种主要黄酮类成分的同时含量测定方法。方法:采用Cosmosil-5C18-AR-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%乙酸溶液梯度洗脱,流速1.0 m L·min^(-1),检测波长280 nm(黄诺玛苷、异奥卡宁)和378 nm(马... 目的:建立雪菊中4种主要黄酮类成分的同时含量测定方法。方法:采用Cosmosil-5C18-AR-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%乙酸溶液梯度洗脱,流速1.0 m L·min^(-1),检测波长280 nm(黄诺玛苷、异奥卡宁)和378 nm(马里苷、奥卡宁),测定雪菊中黄诺玛苷、异奥卡宁、马里苷、奥卡宁的含量。结果:4种黄酮类成分色谱分离良好,黄诺玛苷、异奥卡宁、马里苷、奥卡宁线性范围分别为0.503 5~5.035μg,0.502 5~5.025μg,0.505 5~5.055μg,0.506 5~5.065μg,r值均>0.999,加样回收率在95.4%~98.4%。结论:该测定方法快速、准确,可为雪菊的质量控制方法提供参考。 展开更多
关键词 雪菊 黄酮 高效液相色谱 马里苷 黄诺玛苷 奥卡宁 异奥卡宁
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鬼针草化学成分的分离和鉴定 被引量：12
3
作者 蒋海强 王建平 +2 位作者 刘玉红 巩丽丽 刘红燕 《食品与药品》 CAS 2008年第5期15-17,共3页
目的研究鬼针草的化学成分。方法采用乙醇提取,硅胶柱、聚酰胺柱层析分离纯化,波谱分析鉴定其结构。结果从鬼针草中得到5个化合物:异槲皮苷(Ⅰ),异奥卡宁-7-O-β-D-葡糖苷(Ⅱ),海生菊苷(Ⅲ),槲皮素-7-O-β-D-葡糖苷(Ⅳ),D-甘露醇(Ⅴ)。... 目的研究鬼针草的化学成分。方法采用乙醇提取,硅胶柱、聚酰胺柱层析分离纯化,波谱分析鉴定其结构。结果从鬼针草中得到5个化合物:异槲皮苷(Ⅰ),异奥卡宁-7-O-β-D-葡糖苷(Ⅱ),海生菊苷(Ⅲ),槲皮素-7-O-β-D-葡糖苷(Ⅳ),D-甘露醇(Ⅴ)。结论5个化合物中的Ⅳ、Ⅴ是首次从本属植物中得到的。 展开更多
关键词 鬼针草 异槲皮苷 异奥卡宁-7-O-β-D-葡糖苷 海生菊苷 槲皮素-7-O-β-D-葡糖苷 D-甘露醇
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雪菊花茶的质量评价 被引量：1
4
作者 潘英妮 崔庆玲 +3 位作者 曲寿河 倪慧 李宁 刘晓秋 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期988-991,共4页
目的综合考察雪菊花茶的质量,建立质量评价方法。方法采用TLC和UPLC法建立雪菊中异奥卡宁葡萄糖苷的定性鉴别法和含量测定法,测定10批样品中异奥卡宁葡萄糖苷含量及水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物和醇溶性浸出物等常规理化... 目的综合考察雪菊花茶的质量,建立质量评价方法。方法采用TLC和UPLC法建立雪菊中异奥卡宁葡萄糖苷的定性鉴别法和含量测定法,测定10批样品中异奥卡宁葡萄糖苷含量及水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物和醇溶性浸出物等常规理化试验项目。结果 TLC图谱中,在各样品中均可检视出异奥卡宁葡萄糖苷的斑点;UPLC测定法中,异奥卡宁葡萄糖苷色谱峰分离度好,在5.1~40.8 mg·L^(-1)内线性关系良好,回收率为98.7%(RSD1.7%),在10批样品中异奥卡宁葡萄糖苷含量质量分数为0.361~0.681%;常规理化试验项目测定结果表明:各样品中仅酸不溶性灰分值差异较大,其他项目测定值集中分布在平均值±40%区间内。结论建立的TLC和UPLC分析方法及采用的理化试验项目适宜作为雪菊综合质量评价方法。 展开更多
关键词 雪菊 质量评价 薄层色谱 超高效液相 常规理化项目 异奥卡宁葡萄糖苷
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小花鬼针草中1个新的橙酮苷类化合物 被引量：2
5
作者 李传厚 朱彦军 +2 位作者 于绍华 蒋海强 周洪雷 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第22期5389-5394,共6页
目的对小花鬼针草Bidens parviflora全草的化学成分进行系统研究。方法对小花鬼针草80%乙醇提取物的醋酸乙酯部位采用硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20及HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从小花鬼针草80... 目的对小花鬼针草Bidens parviflora全草的化学成分进行系统研究。方法对小花鬼针草80%乙醇提取物的醋酸乙酯部位采用硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20及HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从小花鬼针草80%乙醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为(Z)-6-O-(4″-O-乙酰基-6″-O-p-香豆酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)-6,7,3′,4′-四羟基橙酮(1)、奥卡宁-4′-O-β-D-(6″-乙酰基)-葡萄糖苷(2)、7,3′,4′-三羟基-6-O-(4″,6″-二乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)-橙酮(3)、6,7,3′,4′-四羟基橙酮(4)、异奥卡宁(5)、丁香酸-4-O-α-L-鼠李吡喃糖苷(6)、奥卡宁-4′-O-β-D-(6″-反式-对-香豆酰基)-吡喃葡萄糖苷(7)、奥卡宁-4′-O-β-D-(4″-乙酰基-6″-反式-对-香豆酰基)-吡喃葡萄糖苷(8)、槲皮素-3,4′-二甲醚-7-O-芸香糖苷(9)、cordifolioidyne B(10)。结论化合物1为1个新化合物,命名为鬼针草苷I,化合物6和10为首次从该属植物中分离得到,其他化合物为首次从该植物中分离得到。 展开更多
关键词 小花鬼针草 Z-6-O-(4″-O-乙酰基-6″-O-p-香豆酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)-6 7 3′ 4′-四羟基橙酮 异奥卡宁 丁香酸-4-O-α-L-鼠李吡喃糖苷 槲皮素-3 4′-二甲醚-7-O-芸香糖苷 鬼针草苷I
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