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题名白酒中邻苯二甲酸二乙酯的化学发光酶联免疫分析方法
被引量:1
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作者
黄少文
羿利华
孙远明
雷红涛
柳春红
沈玉栋
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机构
华南农业大学食品学院
广东省食品质量安全重点实验室
农业部农产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室
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出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第8期178-183,共6页
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基金
农业部农产品质量安全风险评估专项(GJFP201501202)
广东省科技计划项目(2013B020204001)
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文摘
以邻苯二甲酸二乙酯(diethyl phthalate,DEP)为研究目标,以4-氨基邻苯二甲酸二乙酯为半抗原,通过重氮法偶联载体蛋白并免疫动物,制备针对DEP的特异性兔多克隆抗体。通过棋盘滴定法和单因素实验确定最佳的实验参数,即包被抗原浓度为50ng/mL,4℃环境下包被12h;抗体用T液稀释;药物缓冲液选用pH5.4、0.005mol/L的PBS缓冲液;酶标二抗用P液稀释,稀释度为1/3000;反应时间是:一抗:二抗=30min:40min。基于此建立了间接竞争化学发光酶联免疫法检测DEP。该方法对DEP的最低检测限(LOD)为3.09ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为5.93—42.03ng/mL,半抑制浓度(IC50)值为16.57ng/mL,与14种结构类似物及功能类似物交叉反应均远低于0.5%,通过对白酒样品添加回收率的测定,证明了该方法的准确性,适用于白酒中DEP的快速检测。
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关键词
邻苯二甲酸二乙酯
化学发光酶联免疫
间接竞争
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Keywords
DEP
chmiluminescence
iccleia
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分类号
TS262.3
[轻工技术与工程—发酵工程]
O657.3
[理学—分析化学]
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