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白酒中邻苯二甲酸二乙酯的化学发光酶联免疫分析方法 被引量:1
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作者 黄少文 羿利华 +3 位作者 孙远明 雷红涛 柳春红 沈玉栋 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期178-183,共6页
以邻苯二甲酸二乙酯(diethyl phthalate,DEP)为研究目标,以4-氨基邻苯二甲酸二乙酯为半抗原,通过重氮法偶联载体蛋白并免疫动物,制备针对DEP的特异性兔多克隆抗体。通过棋盘滴定法和单因素实验确定最佳的实验参数,即包被抗原浓度为50ng/... 以邻苯二甲酸二乙酯(diethyl phthalate,DEP)为研究目标,以4-氨基邻苯二甲酸二乙酯为半抗原,通过重氮法偶联载体蛋白并免疫动物,制备针对DEP的特异性兔多克隆抗体。通过棋盘滴定法和单因素实验确定最佳的实验参数,即包被抗原浓度为50ng/mL,4℃环境下包被12h;抗体用T液稀释;药物缓冲液选用pH5.4、0.005mol/L的PBS缓冲液;酶标二抗用P液稀释,稀释度为1/3000;反应时间是:一抗:二抗=30min:40min。基于此建立了间接竞争化学发光酶联免疫法检测DEP。该方法对DEP的最低检测限(LOD)为3.09ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为5.93—42.03ng/mL,半抑制浓度(IC50)值为16.57ng/mL,与14种结构类似物及功能类似物交叉反应均远低于0.5%,通过对白酒样品添加回收率的测定,证明了该方法的准确性,适用于白酒中DEP的快速检测。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二乙酯 化学发光酶联免疫 间接竞争
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