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Runx3敲减抑制BMP9诱导小鼠胚胎成纤维细胞iMEFs向成骨分化
1
作者 王玉凤 冯巧玲 +2 位作者 吉彩霞 刘晓骅 罗进勇 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第2期173-178,共6页
目的研究Runx3敲减对BMP9诱导的小鼠胚胎成纤维细胞iMEFs成骨分化的作用。方法 BMP9腺病毒感染iMEFs,用Western blot检测内源性Runx3蛋白的表达。Runx3干扰腺病毒ad-siRunx3和BMP9条件培养基共同处理iMEFs,用碱性磷酸(ALP)染色和活性定... 目的研究Runx3敲减对BMP9诱导的小鼠胚胎成纤维细胞iMEFs成骨分化的作用。方法 BMP9腺病毒感染iMEFs,用Western blot检测内源性Runx3蛋白的表达。Runx3干扰腺病毒ad-siRunx3和BMP9条件培养基共同处理iMEFs,用碱性磷酸(ALP)染色和活性定量测定检测成骨早期指标ALP;用茜素红S染色检测成骨晚期指标钙盐沉积;用RT-PCR检测成骨相关基因Id1、Id2、Id3和Runx2,用Western blot检测成骨相关蛋白Dlx5;用SBE荧光素酶报告质粒检测smad1/5/8的转录活性。结果 BMP9可以使Runx3表达降低(P<0.05);干扰Runx3可以抑制早期成骨指标ALP活性(P<0.05)和晚期成骨指标钙盐沉积;ad-siRunx3抑制BMP9诱导的成骨相关转录因子Id1、Id2、Id3和Runx2基因的表达(P<0.05)及DLX5蛋白的表达(P<0.05)。结论敲减Runx3可以抑制BMP9诱导小鼠胚胎成纤维细胞向成骨分化。 展开更多
关键词 imefs RUNX3 BMP9 成骨分化
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LPS激活TLR4抑制BMP9诱导iMEFs成骨分化 被引量：3
2
作者 郭杨柳 陈思成 +4 位作者 李亚 范梦恬 孙艳婷 李汪 施琼 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第1期25-31,共7页
目的研究脂多糖(LPS)激活的Toll样受体4(TLR4)信号对骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导永生化小鼠胚胎成纤维细胞(i MEFs)成骨分化的影响。方法细胞免疫荧光检测TLR4/NF-κB信号通路的激活;LPS,BAY11-7082和BMP9处理iMEFs,ALP染色和活性检测i M... 目的研究脂多糖(LPS)激活的Toll样受体4(TLR4)信号对骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导永生化小鼠胚胎成纤维细胞(i MEFs)成骨分化的影响。方法细胞免疫荧光检测TLR4/NF-κB信号通路的激活;LPS,BAY11-7082和BMP9处理iMEFs,ALP染色和活性检测i MEFs早期成骨分化能力;茜素红S染色检测晚期成骨分化能力;半定量PCR和Western blot检测晚期成骨基因OCN和OPN表达;Western blot检测Smad1/5/8磷酸化水平;半定量PCR和Western blot检测成骨关键转录因子Runx2和Dlx5的表达。结果 LPS成功激活TLR4/NF-κB信号通路;LPS抑制BMP9诱导的ALP染色和活性(P<0.01)、钙盐沉积、OCN的mRNA和蛋白质表达(P<0.05)、OPN的mRNA(P<0.01)和蛋白质(P<0.05)表达、Smad1/5/8信号通路激活(P<0.01)、Runx2的mRNA和蛋白质表达(P<0.05)、Dlx5的mRNA(P<0.01)和蛋白质(P<0.05)表达,BAY11-7082可以部分逆转LPS的抑制作用(P<0.05)。结论 LPS激活TLR4可以通过NF-κB信号通路抑制BMP9诱导的iMEFs成骨分化。 展开更多
关键词 TLR4 骨形态发生蛋白9 imefs 成骨分化
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