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[Gly^(14)]-humanin多肽对β淀粉样蛋白引起的神经干细胞毒性的拮抗作用研究 被引量:7
1
作者 胥显民 王廷杰 +5 位作者 陈显久 张悦红 程牛亮 蔡大勇 解军 牛勃 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1623-1627,共5页
目的:研究[G ly14]-hum an in对β淀粉样蛋白1-42引起的神经干细胞毒性的作用。方法:用[G ly14]-hum an in和β淀粉样蛋白1-42处理神经干细胞,观察其对神经干细胞增殖、分化的影响。结果:较低浓度的[G ly14]-hum an in加入有β淀粉样蛋... 目的:研究[G ly14]-hum an in对β淀粉样蛋白1-42引起的神经干细胞毒性的作用。方法:用[G ly14]-hum an in和β淀粉样蛋白1-42处理神经干细胞,观察其对神经干细胞增殖、分化的影响。结果:较低浓度的[G ly14]-hum an in加入有β淀粉样蛋白1-42处理的神经干细胞培养基,经过琼脂糖凝胶电泳分析及流式细胞测定DNA含量,神经干细胞显示出对β淀粉样蛋白1-42的耐受,而对照组则显示神经干细胞出现凋亡现象。高浓度的[G ly14]-hum an in加入培养基,经台盼蓝拒染法计数细胞,神经干细胞死亡率明显低于对照组,对照组神经干细胞出现大量死亡。结论:[G ly14]-hum an in不但具有抑制β淀粉样蛋白1-42对神经干细胞的毒性作用,而且在低浓度的情况下,可以促进神经干细胞的增殖和分化为神经元。 展开更多
关键词 干细胞 淀粉样Β蛋白 humanin 多肽
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Humanin通过内源性途径抑制Aβ_(31-35)诱导的神经元凋亡(英文) 被引量:3
2
作者 李灵敏 张宇 +1 位作者 乔建天 张策 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期93-100,共8页
为了探讨Humanin(HN)对Aβ31-35诱导的培养皮层神经元凋亡的影响,本研究采用不同浓度(5、10、20μmol/L)的HN预孵育体外培养的皮层神经元不同时间(0、8、16h),加入Aβ31-35(25μmol/L)24h后,应用电子显微镜观察神经元的凋亡情况;流式细... 为了探讨Humanin(HN)对Aβ31-35诱导的培养皮层神经元凋亡的影响,本研究采用不同浓度(5、10、20μmol/L)的HN预孵育体外培养的皮层神经元不同时间(0、8、16h),加入Aβ31-35(25μmol/L)24h后,应用电子显微镜观察神经元的凋亡情况;流式细胞术、TUNEL法检测神经元的凋亡率;酶标仪检测caspase活性;Westernblot检测Bax蛋白的表达。结果显示:HN(20μmol/L)预孵育16h明显抑制了Aβ31-35诱导的神经元凋亡;HN降低了Aβ31-35诱导的caspase-3、9活性的升高;HN抑制了Aβ31-35诱导的Bax从胞浆到线粒体的转位。以上结果提示,HN通过阻断内源性凋亡途径抑制Aβ31-35诱导的神经元凋亡。 展开更多
关键词 Aβ31-35 humanin 凋亡 神经保护 内源性途径
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Humanin拮抗Aβ_(31-35)引起的培养皮层神经元胞内Ca^(2+)浓度升高 被引量:5
3
作者 李灵敏 乔健天 张策 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期127-131,共5页
β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)在脑组织中的过多沉积与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的发病密切相关。Aβ的毒性作用机制目前尚不明确,有研究认为扰乱细胞内钙稳态是其重要机制之一。Aβ31-35是一个小的Aβ活性片段,... β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)在脑组织中的过多沉积与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的发病密切相关。Aβ的毒性作用机制目前尚不明确,有研究认为扰乱细胞内钙稳态是其重要机制之一。Aβ31-35是一个小的Aβ活性片段,具有与完整肽链相同的神经毒作用。Humanin(HN)是一种存在于AD患者脑组织中具有神经保护作用的多肽,它能有效抑制Aβ诱发的神经元死亡。本研究应用Ca2+荧光成像技术,检测不同时间给予不同浓度的HN对Aβ31-35引起的培养皮层神经元[Ca2+]i升高的影响,探讨HN对Aβ31-35神经毒的抑制作用是否通过抑制Aβ31-35所致的细胞内钙稳态紊乱而实现。结果显示:HN(10μmol/L)预孵育10min部分抑制Aβ31-35(25μmol/L)所致的神经元[Ca2+]i的升高。当HN与Aβ31-35(25μmol/L)同时加入时,10μmol/L HN未能改变Aβ31-35(25μmol/L)引起的神经元[Ca2+]i升高的幅度,但可延迟[Ca2+]i的升高;而20μmol/L HN明显抑制了Aβ31-35(25μmol/L)引起的神经元[Ca2+]i的升高。以上实验结果提示,Aβ31-35引起神经细胞内钙稳态的紊乱是其神经毒作用机制之一;HN抑制Aβ31-35引起的神经元[Ca2+]i升高具有时间和剂量依赖性。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 β-淀粉样蛋白31-35 humanin 胞内钙离子
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Humanin通过抑制一氧化氮发挥神经保护作用 被引量:5
4
作者 宋海岩 邓晓慧 苗莹莹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期742-745,共4页
目的:探讨humanin(HN)拮抗N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导的兴奋性神经毒的作用及其可能的作用机制。方法:原代培养SD新生大鼠皮层神经元,免疫荧光检测神经元特异性烯醇化酶(NSE),细胞随机分为正常组、NMDA组、内皮型一氧化氮合酶抑制剂(L... 目的:探讨humanin(HN)拮抗N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导的兴奋性神经毒的作用及其可能的作用机制。方法:原代培养SD新生大鼠皮层神经元,免疫荧光检测神经元特异性烯醇化酶(NSE),细胞随机分为正常组、NMDA组、内皮型一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)组及HN组,分别采用MTT法、一氧化氮(NO)浓度测定、Hoechst染色及Western blotting检测各组细胞中细胞活性、NO浓度、细胞凋亡状况及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)的表达。结果:免疫荧光显示90%细胞为NSE阳性细胞,L-NAME组与HN组细胞活性均低于正常组而高于NMDA组,NO浓度、细胞凋亡数目及p-p38 MAPK的表达均高于正常组而低于NMDA组;L-NAME组与HN组相比,细胞活性降低,细胞凋亡数目及p-p38 MAPK的表达升高。结论:HN可部分通过抑制NO产生和p38 MAPK的激活而减少神经元的凋亡,从而发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 一氧化氮 humanin N-甲基-D-天冬氨酸 兴奋性神经毒性 细胞凋亡 神经元
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Humanin抑制NR1亚基表达和NR2B亚基磷酸化的神经保护作用 被引量:2
5
作者 翁启芳 龙儒桃 +2 位作者 许闽广 王丹妹 张策 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期907-911,I0001,共6页
目的:探讨Humanin(HN)通过抑制N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体NR1亚基的表达和NR2B亚基的磷酸化在兴奋性神经毒中发挥的保护作用,并阐明其可能的作用机制。方法:利用原代培养的Wistar大鼠皮层神经元建立NMDA诱导的兴奋性神经毒模型,将... 目的:探讨Humanin(HN)通过抑制N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体NR1亚基的表达和NR2B亚基的磷酸化在兴奋性神经毒中发挥的保护作用,并阐明其可能的作用机制。方法:利用原代培养的Wistar大鼠皮层神经元建立NMDA诱导的兴奋性神经毒模型,将神经元分为对照组、NMDA组、NMDA+MK-801(MK-801)组和NMDA+HN(HN)组。流式细胞术荧光定量检测各组神经元膜NMDA受体NR1亚基蛋白的表达,Western blotting法检测各组神经元膜NMDA受体NR2B亚基Tyr1472位点的磷酸化水平。结果:倒置相差显微镜观察,NMDA组中的神经元胞体肿胀,个别细胞变成圆形,胞体周围光晕模糊,神经元突起大部分消失,表现出明显的神经毒性作用。流式细胞术免疫荧光定量检测,与对照组比较,NMDA组NR1亚基蛋白的平均荧光强度值明显增加(P<0.05);与NMDA组比较,MK-801组和HN组的NR1亚基蛋白的平均荧光强度值明显降低(P<0.05)。Western blotting法检测,各组神经元的NR2B亚基总蛋白的表达水平无改变;与对照组比较,NMDA组NR2B亚基蛋白Tyr1472位点的磷酸化水平明显升高(P<0.05);与NMDA组比较,MK-801组和HN组均能降低NR2B亚基蛋白Tyr1472位点的磷酸化水平(P<0.05)。结论:NMDA受体NR1亚基蛋白表达水平的增加和NR2亚基磷酸化可能参与NMDA诱导的兴奋性神经毒作用;HN可能通过抑制NR1亚基的表达和NR2B亚基的磷酸化而发挥对神经元的保护作用。 展开更多
关键词 humanin N-甲基-D-天门冬氨酸受体 NR1亚基 NR2B亚基 兴奋性神经毒
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[Gly14]-humanin拮抗Aβ_(31-35)引起的大鼠空间学习记忆损伤 被引量:6
6
作者 原丽 韩维娜 +3 位作者 李少凤 刘晓杰 武美娜 祁金顺 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期625-632,共8页
淀粉样β蛋白(Amyloid β protein,Aβ)与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病机理密切相关,拮抗Aβ神经毒性或清除脑内沉积的Aβ已成为一个主要的AD治疗策略。本研究采用Morris水迷宫技术,探讨了海马内注射Aβ31-35对大鼠空间... 淀粉样β蛋白(Amyloid β protein,Aβ)与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病机理密切相关,拮抗Aβ神经毒性或清除脑内沉积的Aβ已成为一个主要的AD治疗策略。本研究采用Morris水迷宫技术,探讨了海马内注射Aβ31-35对大鼠空间学习记忆行为的影响,并在此基础上研究了[Gly14]-humanin(HNG)拮抗Aβ的神经保护作用及其可能机制。结果显示,双侧海马注射2.0nmol的Aβ31-35后,大鼠定位航行试验中寻找水下平台的平均逃避距离较对照组明显延长;撤除平台后空间探索试验中目标象限内的游泳距离占游泳总距离的百分比明显下降;HNG(0.2和2.0nmol)预处理拮抗了Aβ31-35所致的逃避距离延长和游泳距离百分比下降;给予酪氨酸激酶抑制剂Genistein(40nmol)则几乎完全阻断HNG的抗Aβ效应。以上结果表明,HNG可以剂量依赖性保护大鼠的空间学习记忆免受Aβ伤害,其机制可能与激活内源性酪氨酸激酶途径有关,提示HNG上调酪氨酸激酶信号转导对AD患者认知功能的改善具有重要意义。 展开更多
关键词 [Gly14]-humanin Aβ31-35 MORRIS水迷宫 空间学习记忆
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[Gyl14]-Humanin对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡的影响 被引量:3
7
作者 靳辉 胡海涛 +3 位作者 王唯析 冯改丰 李月英 杨维娜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期427-430,共4页
目的:探讨神经保护肽[Gly14]-Humanin过表达对Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡的影响。方法:采用脂质体法将重组真核表达载体pcDNA3.1(-)/HNG-FLAG转入PC12细胞,G418筛选获得抗性亚克隆细胞株,免疫细胞化学法分析[Gly14]-Humanin基因的表达... 目的:探讨神经保护肽[Gly14]-Humanin过表达对Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡的影响。方法:采用脂质体法将重组真核表达载体pcDNA3.1(-)/HNG-FLAG转入PC12细胞,G418筛选获得抗性亚克隆细胞株,免疫细胞化学法分析[Gly14]-Humanin基因的表达。用25μmol/LAβ25-35作用细胞24h,MTT法分析细胞存活率,流式细胞术(FCM)监测细胞凋亡,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态改变。结果:建立了稳定过表达[Gly14]-Humanin的PC12细胞系。经25μmol/LAβ25-35作用后,稳定表达[Gly14]-Humanin的PC12细胞存活率较空质粒转染组明显提高(P<0.05),凋亡率显著降低(P<0.05)。Hoechst33258染色结果表明,空质粒转染组细胞核出现浓缩及断裂等凋亡形态,而过表达[Gly14]-Humanin组细胞核形态正常。结论:过表达[Gly14]-Humanin能够抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 [Gly14]-humanin 凋亡
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冠心病患者血清抗凋亡多肽Humanin水平变化的临床意义 被引量:9
8
作者 胡艳清 马建群 +3 位作者 冯真真 徐惠圃 卢琳 陈伟 《广东医学》 CAS 2018年第11期1686-1689,共4页
目的探讨抗凋亡多肽Humanin(HN)与不同类型冠心病(CHD)的关系及临床意义。方法选取首次发作胸痛并经冠状动脉造影(CAG)确诊的CHD患者86例(CHD组),其中稳定型心绞痛(SAP)28例(SAP组)、不稳定型心绞痛(UAP)25例(UAP组)、急性心肌梗死(AMI... 目的探讨抗凋亡多肽Humanin(HN)与不同类型冠心病(CHD)的关系及临床意义。方法选取首次发作胸痛并经冠状动脉造影(CAG)确诊的CHD患者86例(CHD组),其中稳定型心绞痛(SAP)28例(SAP组)、不稳定型心绞痛(UAP)25例(UAP组)、急性心肌梗死(AMI)33例(AMI组),单支病变26例、双支病变36例、多支病变24例,另选同期经CAG排除冠脉狭窄的胸痛患者58例作为对照组(NC组)。采用酶联免疫吸附试验测定血清HN水平。结果 (1)与NC组比较,CHD组及其各亚组患者血清HN水平均明显降低,且UAP组和AMI组患者血清HN水平显著低于SAP组,AMI组患者血清HN水平亦显著低于UAP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)单支病变、双支病变、多支病变组间血清HN水平差异无统计学意义(P>0.05),且CHD组患者血清HN水平与Gensini积分无相关性(P>0.05)。(3)CHD组患者血清HN与HDL-C水平呈正相关(P<0.05),而与TC、LDL-C、Lp(a)、TG、CK-MB、c Tn I无显著相关性(P>0.05)。结论 HN血清学水平的降低,可能参与动脉粥样硬化(AS)的发生、发展及斑块的破裂破溃,是冠心病的潜在保护因素,有望成为延缓AS和早期防治CHD的药物治疗新靶点。 展开更多
关键词 抗凋亡多肽humanin 冠心病 动脉粥样硬化 GENSINI积分
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Humanin拮抗Aβ_(31-35)诱导的神经元凋亡 被引量:1
9
作者 李灵敏 刘青华 +2 位作者 张宇 乔健天 张策 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期626-630,共5页
为了研究Humanin(HN)对Aβ31-35诱导的大鼠皮层神经元凋亡的影响,本研究采用原代培养的大鼠皮层神经元,应用流式细胞术、TUNEL法、HO33342染色法检测不同时间(0、8、16h)加入不同浓度的HN对Aβ31-35致神经元凋亡的影响。结果显示:Aβ31-... 为了研究Humanin(HN)对Aβ31-35诱导的大鼠皮层神经元凋亡的影响,本研究采用原代培养的大鼠皮层神经元,应用流式细胞术、TUNEL法、HO33342染色法检测不同时间(0、8、16h)加入不同浓度的HN对Aβ31-35致神经元凋亡的影响。结果显示:Aβ31-35(25μmol/L)引起培养皮层神经元的凋亡率明显增高,神经元凋亡率由7.43%上升到32.69%;凋亡指数由6.87%上升到28.36%(P<0.05)。与Aβ31-35同时或提前8h给予不同浓度(5,10,20μmol/L)的HN对Aβ31-35(25μmol/L)诱导的神经元凋亡均未产生影响;但20μmol/L的HN提前16h孵育可明显抑制Aβ31-35所致的神经元凋亡,其凋亡率由32.69%下降到20.36%,凋亡指数由28.36%下降到17.57%。本研究结果提示,HN拮抗Aβ31-35致神经元凋亡作用具有剂量和时间依赖性。 展开更多
关键词 humanin Aβ31-35 凋亡流式细胞术TUNEL大鼠
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S14G-Humanin对Aβ_(31-35)所致大鼠行为学及神经元凋亡的影响 被引量:2
10
作者 郭林芝 李灵敏 张策 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期164-168,共5页
目的:研究S14G-Humanin对Aβ31-35所致大鼠行为学及神经元凋亡的影响。方法:SD大鼠60只随机分为5组,经侧脑室分别注入生理盐水(对照组)、Aβ31-35(Aβ31-35组),Aβ31-35+HNG(0.01 mmol/L),Aβ31-35+HNG(0.1 mmol/L)和Aβ31-35+HNG(1 mmo... 目的:研究S14G-Humanin对Aβ31-35所致大鼠行为学及神经元凋亡的影响。方法:SD大鼠60只随机分为5组,经侧脑室分别注入生理盐水(对照组)、Aβ31-35(Aβ31-35组),Aβ31-35+HNG(0.01 mmol/L),Aβ31-35+HNG(0.1 mmol/L)和Aβ31-35+HNG(1 mmol/L)。注射第7 d行Morris水迷宫实验观察各组大鼠的行为学改变;注射12 d后处死大鼠,应用TUNEL法检测各组海马神经元的凋亡情况,应用免疫组化法检测神经元caspase-3的表达。结果:与对照组相比,Aβ31-35组大鼠的学习、记忆能力明显下降(P<0.05),Aβ31-35+HNG(0.1,1 mmol/L)组大鼠的学习、记忆能力有所改善,与Aβ31-35组相比差异有统计学意义(P<0.05)。Aβ31-35组海马神经元的凋亡指数及caspase-3阳性细胞数均高于正常对照组,Aβ31-35能引起大鼠海马神经元的凋亡及学习、记忆能力的下降;Aβ31-35+HNG(1,0.1,0.01 mmol/L)组凋亡指数及caspase-3阳性细胞数均明显下降,与Aβ31-35组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:S14G-Humanin对Aβ31-35诱导的大鼠海马神经元凋亡及行为学改变具有保护作用。 展开更多
关键词 Aβ31-35 S14G-humanin 凋亡 行为学 大鼠
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Humanin对谷氨酸诱导大鼠脊髓神经元兴奋性损伤的影响 被引量:1
11
作者 叶蓓 陈建珍 +1 位作者 张立光 贺芳 《山东医药》 CAS 2014年第22期26-28,共3页
目的 探讨Humanin(HN)对体外培养的大鼠脊髓神经元兴奋性损伤的保护作用。方法 选取Wistar 14~17 d胎鼠的脊髓神经元进行原代培养,将其分为三组,分别为对照组、损伤组、HN干预组。对照组不加入任何药物作用;损伤组加入谷氨酸建立... 目的 探讨Humanin(HN)对体外培养的大鼠脊髓神经元兴奋性损伤的保护作用。方法 选取Wistar 14~17 d胎鼠的脊髓神经元进行原代培养,将其分为三组,分别为对照组、损伤组、HN干预组。对照组不加入任何药物作用;损伤组加入谷氨酸建立脊髓神经元兴奋性损伤模型;HN干预组则加入HN及谷氨酸。光镜下观察三组大鼠脊髓神经元的形态学差异,显微测量神经元胞体直径、突起数和最长突起长度。应用MTT法测定D570值评价神经元存活率,测定D340值评价LDH释放量。结果 损伤组细胞结构改变严重,胞体皱缩,突起较多已经断裂,不能形成网络,出现破裂死亡细胞。 HN干预组神经元出现轻微形态变化,大多数神经元突起完好。损伤组D570值低于对照组,HN干预组D570值高于损伤组(P均<0.05)。损伤组 D340值高于对照组,HN干预组D340值高于损伤组(P均<0.05)。损伤组神经元胞体直径、突起数目及最长突起长度均低于对照组(P均<0.05)。结论 HN对脊髓神经元兴奋损伤有较强的保护作用。 展开更多
关键词 脊髓 神经元 谷氨酸 humanin 神经保护
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血清FGF-21和抗凋亡多肽Humanin与冠心病病理进程的相关性 被引量:2
12
作者 林立中 吴建华 夏先考 《中国卫生标准管理》 2020年第11期114-117,共4页
目的研究血清成纤维细胞生长因子21(FGF-21)和抗凋亡多肽Humanin(anti-apoptotic polypeptide Humanin,HN)与冠心病(coronary heart disease,CHD)病理进程的关系。方法回顾性分析2017年2月-2019年2月间于本院94例CHD患者(观察组)和47例... 目的研究血清成纤维细胞生长因子21(FGF-21)和抗凋亡多肽Humanin(anti-apoptotic polypeptide Humanin,HN)与冠心病(coronary heart disease,CHD)病理进程的关系。方法回顾性分析2017年2月-2019年2月间于本院94例CHD患者(观察组)和47例无冠脉狭窄患者(对照组)临床资料,比较两组患者血清FGF-21与HN水平。记录稳定性心绞痛(stable angina pectoris,SAP)、不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)及急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)三组例数。分析血清GFG-21、HN与冠心病发生发展病理进程的关系。结果观察组患者血清FGF-21显著高于对照组,HN显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。94例CHD患者中SAP 40例,UAP 28例,AMI 26例。不同病理分型CHD患者HN水平差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示血清FGF-21与Gensini具有良好的相关性(r=0.353,P=0.000)。ROC分析结果显示血清FGF-21判断CHD的AUC为0.899(S.E.=0.029,95%CI=0.841~0.956,P=0.000),灵敏度为0.809,特异度为0.851,最佳截断值为308.5 pg/mL。ROC分析结果显示HN判断UAP或AMI的AUC为0.787(S.E.=0.051,95%CI=0.687~0.887,P=0.000),灵敏度0.815,特异度为0.75,最佳截断值为1.995 ng/mL。结论检测血清FGF-21有助于CHD早期筛查和冠脉狭窄程度的判断,而HN监测有助于预测心血管事件的发生,为临床提供参考。 展开更多
关键词 血清FGF-21 抗凋亡多肽humanin 冠心病 病理进程 关联性 鉴定引导
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S14G-humanin restored cellular homeostasis disturbed by amyloid-beta protein 被引量:1
13
作者 Xue Li Wencong Zhao +2 位作者 Hongqi Yang Junhong Zhang Jianjun Ma 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2013年第27期2573-2580,共8页
Humanin is a potential therapeutic agent for Alzheimer’s disease, and its derivative, S14G-humanin, is 1 000-fold stronger in its neuroprotective effect against Alzheimer’s disease-relevant insults. Alt-hough effect... Humanin is a potential therapeutic agent for Alzheimer’s disease, and its derivative, S14G-humanin, is 1 000-fold stronger in its neuroprotective effect against Alzheimer’s disease-relevant insults. Alt-hough effective, the detailed molecular mechanism through which S14G-humanin exerts its effects remains unclear. Data from this study showed that fibril ar amyloid-beta 40 disturbed cel ular ho-meostasis through the cel membrane, increasing intracel ular calcium, generating reactive oxygen species, and decreasing the mitochondrial membrane potential. S14G-humanin restored these re-sponses. The results suggested that S14G-humanin blocked the effects of amyloid-beta 40 on the neuronal cel membrane, and restored the disturbed cel ular homeostasis, thereby exerting a neuroprotective effect on hippocampal neurons. 展开更多
关键词 neural regeneration Alzheimer's disease amyloid-beta protein wild type humanin S14G-humanin re-active oxygen species mitochondrial membrane potential grants-supported paper NEURODEGENERATION NEUROREGENERATION
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新型神经保护肽[Gly14]-Humanin的表达,纯化和活性鉴定(英文)
14
作者 于保锋 解军 +4 位作者 陈显久 张悦红 王惠珍 程牛亮 牛勃 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期21-26,共6页
Humanin(HN)是近年来在人体内发现的内源性多肽,能够保护神经细胞免于各种阿尔茨海默氏病相关因素诱导的凋亡,HN肽链第14位氨基酸被Gly取代的突变体[Gly14]-Humanin(HNG),神经保护活性比HN高了近1000倍。但由于HNG天然获取的途径有限,... Humanin(HN)是近年来在人体内发现的内源性多肽,能够保护神经细胞免于各种阿尔茨海默氏病相关因素诱导的凋亡,HN肽链第14位氨基酸被Gly取代的突变体[Gly14]-Humanin(HNG),神经保护活性比HN高了近1000倍。但由于HNG天然获取的途径有限,限制了对其功能的进一步研究。构建了HNG的表达质粒pET32a/HNG,并将其转化大肠杆菌BL21trxB(DE3),诱导表达后HNG以可溶性融合蛋白的形式出现并用镍离子亲和层析纯化,纯化的融合蛋白用肠激酶切割后经反相层析得到纯化的HNG多肽(23mg每1L细菌培养液),重组HNG多肽的分子量经电喷雾电离质谱(ESI-MS)检测为2876.5道尔顿,其N末端8个氨基酸残基的序列经Edman降解法测定为A-M-M-A-P-R-G-F,均与理论值一致。神经细胞保护实验表明,重组HNG多肽的神经保护作用与天然的HNG相近。 展开更多
关键词 神经保护 [Gly14]—humanin(HNG) 表达
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Humanin对缺氧诱导的大鼠皮层神经元损伤的保护作用
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作者 赵珅婷 赵丽 +1 位作者 乔健天 张策 《中西医结合心脑血管病杂志》 2010年第2期197-199,共3页
目的观察Humanin(HN)对缺氧诱导皮层神经细胞损伤的保护作用。方法培养10d的原代皮层神经元在缺氧环境下(氧含量<2%)放置4h诱导神经细胞损伤。实验组在缺氧之前24h分别加入终浓度为10μmol/L和20μmol/L的HN。通过测定MTT和Calcein-A... 目的观察Humanin(HN)对缺氧诱导皮层神经细胞损伤的保护作用。方法培养10d的原代皮层神经元在缺氧环境下(氧含量<2%)放置4h诱导神经细胞损伤。实验组在缺氧之前24h分别加入终浓度为10μmol/L和20μmol/L的HN。通过测定MTT和Calcein-AM染色检测细胞活力。通过测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)的变化检测细胞损伤的程度。结果HN可以提高缺氧4h后细胞的存活率,同时可以降低由细胞损伤所引起的MDA、SOD、LDH的升高。20μmol/L的HN具有比10μmol/L更显著的保护作用。结论HN对缺氧诱导的神经元细胞损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 humanin 缺氧 MTT Calcein—AM 丙二醛 超氧化物歧化酶 乳酸脱氢酶
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[Gly14]-Humanin的基因克隆及序列测定
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作者 靳辉 王唯析 +3 位作者 杨广笑 王全颖 胡海涛 韩太真 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期120-122,共3页
目的利用基因工程方法对[Gly14]-Humanin进行基因克隆并测定其序列,为进一步对阿尔茨海默病进行基因治疗奠定基础。方法采用非对称互补引物/模板法,制备两端含有酶切位点的[Gly14]-Humanin的cDNA,将其克隆入pVAXI载体中并测序。结果经... 目的利用基因工程方法对[Gly14]-Humanin进行基因克隆并测定其序列,为进一步对阿尔茨海默病进行基因治疗奠定基础。方法采用非对称互补引物/模板法,制备两端含有酶切位点的[Gly14]-Humanin的cDNA,将其克隆入pVAXI载体中并测序。结果经酶切鉴定、测序分析,表明所插入的基因片断为[Gly14]-Humanin基因,与设计完全相同。结论成功地克隆了[Gly14]-Humanin基因。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 [Gly14]-humanin 基因克隆 序列测定
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Humanin对实验性阿尔茨海默病小鼠海马小胶质细胞OX-42表达的影响
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作者 张新宇 尹榕 +2 位作者 付学锋 赵波 万东君 《中华老年多器官疾病杂志》 2012年第4期269-272,共4页
目的探讨Humanin(HN)在体内是否存在对实验性阿尔茨海默病(AD)小鼠的神经保护作用以及可能的机制。方法采用β-淀粉样蛋白(Ap)脑内注射方法建立AD模型。健康雄性小鼠60只,随机分为假手术组(n=15)、AB模型组(n=15)和HN治疗组... 目的探讨Humanin(HN)在体内是否存在对实验性阿尔茨海默病(AD)小鼠的神经保护作用以及可能的机制。方法采用β-淀粉样蛋白(Ap)脑内注射方法建立AD模型。健康雄性小鼠60只,随机分为假手术组(n=15)、AB模型组(n=15)和HN治疗组(n=30)。应用免疫组织化学方法于造模后3,7,14d观察海马小胶质细胞OX-42表达的变化;Nissl染色方法检测3组动物海马区病理改变。结果OX-42免疫组织化学染色显示,与AB模型组比较,HN治疗组造模后3,7,14d海马OX-42阳性细胞的表达均减少(P〈0.05);A13模型组、HN治疗组在手术后各时间点Nissl染色均可见海马区病理改变,HN治疗组在相同时间点炎性的病理变化弱于Aβ模型组。结论在活体内,HN可以减少Aβ25-35毒性引起的OX-42的表达,具有神经保护作用。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 humanin多肽 小胶质细胞
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炎症反应在S14G-Humanin拮抗Aβ31-35所致大鼠行为学改变中的作用
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作者 郭林芝 乔爱秀 +1 位作者 李灵敏 张策 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期375-379,共5页
目的:以小胶质细胞形态和功能的改变为观察指标,探究炎症反应在S14G-Humanin(HNG)拮抗Aβ31-35所致大鼠行为学改变中的神经保护作用。方法:SD大鼠60只随机分为5组,经侧脑室分别注入生理盐水(对照组)、Aβ31-35(Aβ31-35组)、Aβ31-35+HN... 目的:以小胶质细胞形态和功能的改变为观察指标,探究炎症反应在S14G-Humanin(HNG)拮抗Aβ31-35所致大鼠行为学改变中的神经保护作用。方法:SD大鼠60只随机分为5组,经侧脑室分别注入生理盐水(对照组)、Aβ31-35(Aβ31-35组)、Aβ31-35+HNG(0.01 mmol/L)、Aβ31-35+HNG(0.1 mmol/L)、Aβ31-35+HNG(1 mmol/L)。注射第7 d行Morris水迷宫实验观察各组大鼠的行为学改变;注射12 d后处死大鼠,运用免疫组化法检测海马及皮层的激活小胶质细胞的数量,采用ELISA法检测大鼠海马及皮层组织IL-6的含量。结果:与对照组相比,Aβ31-35组大鼠的学习、记忆能力明显下降(P<0.05),Aβ31-35+HNG(0.1,1 mmol/L)组大鼠的学习、记忆能力有所改善,与Aβ31-35组相比差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,Aβ31-35组的激活小胶质细胞数及IL-6的含量在皮层及海马组织中均增加(P<0.05);与Aβ31-35组相比,Aβ31-35+HNG(0.01,0.1,1 mmol/L)组皮层及海马的激活小胶质细胞数及IL-6的含量均减少(P<0.05)。结论:S14G-Humanin对Aβ31-35诱导的大鼠行为学改变具有保护作用,而抑制Aβ31-35诱导的小胶质细胞激活产生的炎症反应可能是HNG拮抗Aβ神经毒的机理之一。 展开更多
关键词 Aβ31-35 S14G-humanin 行为学研究 炎症 小胶质细胞 大鼠
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Humanin通过JNK途径减轻Aβ_(31-35)诱导的皮层神经元的凋亡
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作者 李灵敏 乔建天 张策 《山西医科大学学报》 CAS 2009年第10期871-873,F0003,共4页
目的研究JNK信号通路在Aβ31-35诱导神经元凋亡中的作用以及Humanin(HN)的神经保护机制。方法原代培养大鼠皮层神经元随机分为对照组、Aβ31-35组(1h,4h,8h,16h,24h)、抑制剂SP600125组、HN预处理组。应用流式细胞术观察各组神经元凋亡... 目的研究JNK信号通路在Aβ31-35诱导神经元凋亡中的作用以及Humanin(HN)的神经保护机制。方法原代培养大鼠皮层神经元随机分为对照组、Aβ31-35组(1h,4h,8h,16h,24h)、抑制剂SP600125组、HN预处理组。应用流式细胞术观察各组神经元凋亡率,应用免疫细胞化学法观察各组磷酸化c-Jun(p-c-Jun)和FasL蛋白表达情况。结果对照组仅有少数神经元发生凋亡;Aβ31-35诱导培养皮层神经元异常凋亡;JNK抑制剂SP600125抑制了Aβ31-35诱导的神经元凋亡;HN(20μmol/L)16h预孵育部分抑制了Aβ31-35的致凋亡作用,各组神经元凋亡率分别为7.43%,32.6%(24h),8.8%,20.36%。对照组仅有少量p-c-Jun及FasL蛋白的表达;Aβ31-35时间依赖性诱导了p-c-Jun、FasL蛋白的表达;SP600125抑制了Aβ31-35诱导的p-c-Jun、FasL蛋白的表达;20μmol/LHN16h预孵育部分抑制了p-c-Jun及FasL蛋白的表达。结论JNK通路可能参与了Aβ31-35诱导的神经元凋亡过程;HN可在一定程度上阻抑JNK信号通路,减轻Aβ31-35诱导的神经元凋亡。 展开更多
关键词 humanin Aβ31-35 JNK 神经保护
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Humanin对谷氨酸诱导大鼠脊髓神经元凋亡和caspase-3表达的影响
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作者 叶蓓 卢玫 +4 位作者 贺芳 李曼 陈建珍 程翔 张立光 《中国地方病防治》 北大核心 2016年第12期1391-1391,1393,共2页
目的探讨Humanin(HN)对谷氨酸诱导体外培养大鼠脊髓神经元凋亡和caspase-3表达的影响。方法利用谷氨酸诱导原代培养胚胎大鼠脊髓神经元损伤,MTT法、NSE免疫组化染色评价HN对脊髓神经元的保护作用,Hoechst33258荧光染色研究HN对脊髓神经... 目的探讨Humanin(HN)对谷氨酸诱导体外培养大鼠脊髓神经元凋亡和caspase-3表达的影响。方法利用谷氨酸诱导原代培养胚胎大鼠脊髓神经元损伤,MTT法、NSE免疫组化染色评价HN对脊髓神经元的保护作用,Hoechst33258荧光染色研究HN对脊髓神经元凋亡的影响,免疫组化、western blotting检测脊髓神经元cleaved caspase-3蛋白的表达,RT-PCR检测caspase-3 mRNA的表达。结果 HN促进脊髓神经元存活,显著减少凋亡细胞数,降低caspase-3mRNA的表达,从而降低caspase-3蛋白的表达。结论 HN能抑制caspase-3蛋白的活化,从而抑制神经元的调亡,对谷氨酸造成的大鼠脊髓神经元的兴奋性损伤起到一定的保护作用。 展开更多
关键词 humanin 谷氨酸 脊髓损伤 神经元 凋亡
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