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海洋蛭弧菌LBd02-1的分离及其生物学特性的研究 被引量：3
1
作者 徐静 张晓君 +2 位作者 秦蕾 范朋 阎斌伦 《水产科学》 CAS 北大核心 2010年第10期587-590,共4页
利用海水双层平板法分离获得蛭弧菌LBd02-1,从基因水平上进行鉴定,并对其生物学特性进行了初步研究。研究结果表明,蛭弧菌LBd02-1对嗜水气单胞菌、鳗弧菌、大肠杆菌和霍乱弧菌等革兰氏阴性菌有较好的裂解作用;对金黄色葡萄球菌、枯草芽... 利用海水双层平板法分离获得蛭弧菌LBd02-1,从基因水平上进行鉴定,并对其生物学特性进行了初步研究。研究结果表明,蛭弧菌LBd02-1对嗜水气单胞菌、鳗弧菌、大肠杆菌和霍乱弧菌等革兰氏阴性菌有较好的裂解作用;对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等革兰氏阳性菌的裂解能力较弱。以鳗弧菌为宿主菌,探索了不同条件（温度、盐度、Ca2＋、Mg2＋）下蛭弧菌LBd02-1对鳗弧菌的裂解效果。试验结果表明,蛭弧菌LBd02-1在温度为25~30℃.盐度为10~30时,对鳗弧菌的裂解效果较佳;在Ca2＋浓度为5~10 mmol/L、Mg2＋浓度为0.5~2 mmol/L时,蛭弧菌LBd02-1的裂解能力也较好。 展开更多
关键词 蛭弧菌LBd02-1 鳗弧菌 裂解 生长 宿主菌
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荧光定量PCR法测定重组人/门冬胰岛素原料中宿主DNA的残留量 被引量：1
2
作者 周朝东 苏喆 黄哲甦 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期477-481,共5页
目的:利用wako DNA提取试剂盒结合荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术,建立重组人/门冬胰岛素原料中宿主DNA残留量测定的方法并进行验证,用于对该产品进行质量控制。方法:通过wako DNA提取试剂盒提取重组人/门冬胰岛素原料中的宿主残留DNA... 目的:利用wako DNA提取试剂盒结合荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术,建立重组人/门冬胰岛素原料中宿主DNA残留量测定的方法并进行验证,用于对该产品进行质量控制。方法:通过wako DNA提取试剂盒提取重组人/门冬胰岛素原料中的宿主残留DNA,再利用SYBRGreen染料法对样品和标准DNA进行定量PCR测定,根据标准曲线对样品中的DNA残留量进行分析。对建立的方法进行引物特异性以及结果准确性和精密性验证,同时对本室留样的3批重组人胰岛素原料和3批重组门冬胰岛素原料中的残留DNA进行测定。结果:该方法检测酿酒酵母菌基因组DNA的最低准确定量质量浓度可达0.137 8 ng·mL^(-1),DNA质量浓度在0.137 8~137 800 ng·mL^(-1)范围内,其质量浓度的对数值与Ct值呈良好线性关系,标准曲线的相关系数(r)为0.994;DNA提取试剂盒提取不同量的加标样品回收率均在50%~200%范围内;该方法检测3批重组人胰岛素原料和3批重组门冬胰岛素原料中的DNA残留量均小于10 ng·剂量^(-1),符合进口药品注册标准中关于重组人/门冬胰岛素原料中宿主DNA残留量的要求。结论:wako DNA提取试剂盒能解决重组人/门冬胰岛素原料中样品前处理的技术难点,与定量PCR法结合能够简便、快速、准确地对重组人/门冬胰岛素原料中残留的DNA进行定量测定。 展开更多
关键词 基因工程产品 重组人门冬胰岛素 杂质控制 DNA提取试剂盒 荧光定量PCR 酿酒酵母 宿主菌DNA残留
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噬菌蛭弧菌生物学特性的初步研究 被引量：2
3
作者 吴承龙 杨忠 《中国公共卫生学报》 1996年第5期309-311,共3页
研究了噬菌蛭弧菌噬菌斑形成，对宿主菌的寄生和裂解，及其相差显微镜下动力观察和电镜超微结构等．结果表明：噬菌蛭弧菌形态有杆状、弧形、球杆状和球形４种．其鞭毛可分极生单鞭毛、极生双鞭毛和极生三鞭毛．鞭毛螺旋桨样转动是该菌... 研究了噬菌蛭弧菌噬菌斑形成，对宿主菌的寄生和裂解，及其相差显微镜下动力观察和电镜超微结构等．结果表明：噬菌蛭弧菌形态有杆状、弧形、球杆状和球形４种．其鞭毛可分极生单鞭毛、极生双鞭毛和极生三鞭毛．鞭毛螺旋桨样转动是该菌动力的来源，菌体表面有附加结构． 展开更多
关键词 弧菌 噬菌蛭弧菌 噬菌斑 宿主菌 螺旋桨样转动
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猫胃粘膜螺旋菌的调查与鉴定
4
作者 王继德 张亚历 +4 位作者 周殿元 张万岱 宋敏 徐智民 杨海涛 《现代消化病及内镜杂志》 1996年第1期18-20,共3页
本研究应用多种分子生物学和病理学技术,对18只猫胃粘膜的螺旋样细菌进行了调查和鉴定。15/18的猫胃粘膜组织尿素酶阳性,5只猫胃培养出弯曲样和HP样细菌,后者及8/11只猫胃粘膜DNA与螺杆菌属细菌特异寡核苷酸探针发生阳性杂交。且该株细... 本研究应用多种分子生物学和病理学技术,对18只猫胃粘膜的螺旋样细菌进行了调查和鉴定。15/18的猫胃粘膜组织尿素酶阳性,5只猫胃培养出弯曲样和HP样细菌,后者及8/11只猫胃粘膜DNA与螺杆菌属细菌特异寡核苷酸探针发生阳性杂交。且该株细菌与及7/11的猫胃粘膜组织DNA应用幽门螺杆菌特异PCR引物扩增阳性.涂片及组织切片W-S银染发现三种类型的螺旋样菌:幽门螺杆菌样细菌;人胃螺旋菌样细菌及弯曲菌样细菌。PCR对照研究发现切片发现的HP样菌即为HP,而GH-LOs也为螺杆菌属细菌。提示猫也是幽门螺杆菌的动物宿主,其与人类HP感染之间的关系尚待进一步阐明。 展开更多
关键词 猫 胃粘膜 螺旋菌 病理学 分子生物学
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取食四种寄主植物对番茄潜叶蛾中肠肠道细菌的影响 被引量：4
5
作者 杨亚贤 周昭旭 +3 位作者 钱秀娟 刘月英 张美娇 蒋明君 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期776-786,共11页
番茄潜叶蛾Tuta absoluta是一种世界性害虫,寄主范围广泛,对多种寄主作物造成严重危害。通过16S rRNA测序分析了取食番茄、马铃薯、茄子、和人参果的番茄潜叶蛾2龄幼虫中肠肠道细菌的多样性和功能。结果显示,在上述四种寄主植物为食的... 番茄潜叶蛾Tuta absoluta是一种世界性害虫,寄主范围广泛,对多种寄主作物造成严重危害。通过16S rRNA测序分析了取食番茄、马铃薯、茄子、和人参果的番茄潜叶蛾2龄幼虫中肠肠道细菌的多样性和功能。结果显示,在上述四种寄主植物为食的番茄潜叶蛾中肠肠道细菌中,共检测到4886、6016、2781、3471个操作分类单元(OTU),其中共有905个OUT。Alpha和Beta多样性分析结果表明,取食马铃薯和茄子的番茄潜叶蛾中肠肠道细菌多样性最高。物种分类分析表明,取食不同寄主的番茄潜叶蛾,中肠肠道细菌在门水平的优势菌群均为厚壁菌门和变形菌门;在属水平上,取食番茄和马铃薯的番茄潜叶蛾中肠肠道细菌优势属为沃尔巴克氏体,取食人参果和茄子的为肠球菌属;对其代谢通路分析,发现取食四种寄主植物其中肠肠道细菌代谢通路相似,无显著差异,且占比最高的代谢通路都为生物合成和降解代谢。 展开更多
关键词 番茄潜叶蛾 不同寄主植物 中肠肠道细菌 菌群多样性
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质粒DNA中宿主菌基因组DNA残留检测方法的比较
6
作者 徐向明 张泉 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期85-87,共3页
目的对检测质粒DNA中宿主菌基因组DNA含量的Southern blot和Real-time PCR法进行比较。方法PCR扩增宿主菌染色体DNA的16SrRNA片段,以地高辛标记回收的目的片段为探针,对提取的质粒pcDNAH进行Southern blot,同时根据16SrRNA基因序列设计... 目的对检测质粒DNA中宿主菌基因组DNA含量的Southern blot和Real-time PCR法进行比较。方法PCR扩增宿主菌染色体DNA的16SrRNA片段,以地高辛标记回收的目的片段为探针,对提取的质粒pcDNAH进行Southern blot,同时根据16SrRNA基因序列设计探针,建立Real-time PCR反应体系和标准曲线,分别检测质粒中宿主菌基因组DNA的含量。结果应用Southern blot和Real-time PCR检测质粒pcDNAH中宿主菌基因组DNA的含量,结果均符合WHO相关标准。结论两种检测方法各有优缺点,均可用于检测质粒DNA中宿主菌基因组DNA的残留,可根据不同情况,采用不同方法或配套使用。 展开更多
关键词 质粒DNA 宿主菌 SOUTHERN BLOT 实时PCR
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寄主转换对云斑白条天牛幼虫肠道细菌多样性的影响 被引量：1
7
作者 徐蕾 陈乃明 +3 位作者 杨振德 周浩 李琼 韦善方 《广东农业科学》 CAS 2022年第4期64-73,共10页
【目的】研究寄主转换对云斑白条天牛Batocera lineolata幼虫肠道细菌多样性的影响,为从肠道细菌的角度解析云斑白条天牛的寄主适应性以及开发利用微生物等方面提供理论依据。【方法】以核桃作为原寄主,桉树作为转换寄主饲养云斑白条天... 【目的】研究寄主转换对云斑白条天牛Batocera lineolata幼虫肠道细菌多样性的影响,为从肠道细菌的角度解析云斑白条天牛的寄主适应性以及开发利用微生物等方面提供理论依据。【方法】以核桃作为原寄主,桉树作为转换寄主饲养云斑白条天牛幼虫,采用传统微生物分离培养、16Sr RNA基因测序以及高通量测序的方法对转换寄主云斑白条天牛幼虫肠道细菌多样性进行研究。【结果】通过传统微生物培养共获得19株可培养细菌,从核桃饲养的云斑白条天牛幼虫肠道中分离出10株细菌,转换寄主后,从云斑白条天牛幼虫肠道中分离出9株细菌;两种寄主饲养处理均分离出6个属的可培养细菌,其中有5个属为共有菌属。高通量测序结果表明,寄主转换前后的云斑白条天牛幼虫肠道细菌多样性无显著差异。云斑白条天牛幼虫肠道样本中细菌分别属于20个门32个纲55个目90个科170个属,其中两种处理云斑白条天牛幼虫肠道优势菌均属于变形菌门(Proteobacteria)γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)肠杆菌目(Enterobacteriales)肠杆菌科(Enterobacteriaceae)肠杆菌科下未确定属(Uncultured bacterium f Enterobacteriaceae)【结论】两种处理云斑白条天牛幼虫肠道细菌种类组成相似,肠道细菌群落整体多样性比较丰富且菌群较为稳定,短期内改变寄主很难使其肠道细菌多样性发生改变。 展开更多
关键词 云斑白条天牛 寄主转换 可培养细菌 高通量测序 优势菌 肠道细菌多样性
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解糖微小寄生菌的研究进展 被引量：6
8
作者 聂杰 陈宇星 +3 位作者 姜淞 王晓燕 陈峰 何雪松 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2021年第11期1523-1531,共9页
候选门级辐射类群(candidate phyla radiation,CPR)所包含的细菌种类约占已知细菌种类总数的1/4,然而该类细菌中只有解糖微小寄生菌(Saccharibacteria,又名TM7)的少数菌株被成功分离培养.研究发现,解糖微小寄生菌具有许多独特的生物学性... 候选门级辐射类群(candidate phyla radiation,CPR)所包含的细菌种类约占已知细菌种类总数的1/4,然而该类细菌中只有解糖微小寄生菌(Saccharibacteria,又名TM7)的少数菌株被成功分离培养.研究发现,解糖微小寄生菌具有许多独特的生物学性状:该类细菌需要寄生在宿主细菌表面生长,这是一种全新的"细菌-细菌"寄生生存方式;细菌尺寸及基因组均较小,缺乏代谢相关基因,不能合成氨基酸和维生素;对宿主细菌表现出杀伤作用或保护其躲避免疫系统的攻击.此外,解糖微小寄生菌与牙周病等疾病存在紧密的联系.同时,宏基因组学研究表明,其他CPR细菌与解糖微小寄生菌具有相似的生物学特性.本文通过介绍解糖微小寄生菌的研究概况、形态特征、生理特性、基因特点以及与疾病的相关关系,以期对目前研究进展有更全面的了解,为未来解糖微小寄生菌及CPR细菌的研究提供参考,这对于发现新物种、发掘新基因、改进疾病的预防和治疗方式以及研究细菌的进化有着重要的生物学意义和社会意义. 展开更多
关键词 解糖微小寄生菌 TM7 候选门级辐射类群 寄生 宿主细菌
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乙肝治疗性可复制型DNA疫苗pSVK-HBVA高稳定宿主菌的筛选及其基础培养基的选择
9
作者 朱晓明 王宇 +9 位作者 吴昊 徐元基 张巍 王琳 张亮 李盼 侯沙沙 王启宇 于继云 阎瑾琦 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期363-367,共5页
目的为乙肝治疗性可复制型DNA疫苗质粒pSVK-HBVA筛选稳定性高,能多次传代的宿主菌,以满足中试工艺的要求,同时对该工程菌最适的基础发酵培养基进行选择。方法将质粒pSVK-HBVA分别转化几种不同的大肠杆菌感受态细胞并提取质粒,通过琼脂... 目的为乙肝治疗性可复制型DNA疫苗质粒pSVK-HBVA筛选稳定性高,能多次传代的宿主菌,以满足中试工艺的要求,同时对该工程菌最适的基础发酵培养基进行选择。方法将质粒pSVK-HBVA分别转化几种不同的大肠杆菌感受态细胞并提取质粒,通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的形态结构,连续传代法对工程菌的稳定性进行检测;选取质粒含量最高和稳定性最好的工程菌作为原始种子,按照2010版《中国药典》要求建立工程菌的三级种子批,并对种子批进行鉴定。同时,从LB,TB,M9(甘油),M9(葡萄糖)4种培养基中为工程菌筛选质粒产量最高的基础发酵培养基。结果经过筛选发现,在以大肠杆菌XL10-Gold为宿主菌时,质粒pSVK-HBVA表现出了同常规质粒DNA类似的稳定性,转接传代30次也未发生重组或片段丢失,能满足后续中试工艺的要求,LB作为基础培养基能得到最高的质粒容积产率为5.5 mg/L。结论大肠杆菌XL10-Gold是一个更利于可复制型DNA疫苗质粒pSVK-HBVA扩增的宿主菌,该工程菌发酵的最佳基础培养基是LB培养基。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 疫苗 DNA 高稳定性 宿主菌 XL10-Gold 基础培养基
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病原菌作用于细胞焦亡的策略:盾-矛之争
10
作者 唐礼瑞 黄诗晴 +1 位作者 陈涛涛 欧阳松应 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2024年第3期459-468,共10页
焦亡是一种细胞程序性死亡的形式,其特征表现为细胞的裂解并伴随细胞因子、损伤和病原体相关的分子模式的释放.细胞焦亡能够促进炎症免疫反应发生,消除细胞内的病原菌,在细胞抵御病原菌感染过程中发挥重要作用.但是,在长期的军备竞赛中... 焦亡是一种细胞程序性死亡的形式,其特征表现为细胞的裂解并伴随细胞因子、损伤和病原体相关的分子模式的释放.细胞焦亡能够促进炎症免疫反应发生,消除细胞内的病原菌,在细胞抵御病原菌感染过程中发挥重要作用.但是,在长期的军备竞赛中,病原体已进化出抑制宿主细胞焦亡的机制,以增强它们生存和致病的能力.本文从细胞焦亡的分子机制及其在宿主防御中的作用,以及病原菌抵御宿主细胞焦亡的策略等方面进行了综述,将有助于人们进一步了解和探索细菌病原体和细胞焦亡相互作用的机制,并为将来开发基于细胞焦亡抵抗病原体感染的新药提供思路. 展开更多
关键词 宿主免疫 细胞焦亡 病原菌 毒力蛋白
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