苦参碱对K562细胞端粒酶hTERT-mRNA表达及其酶活性影响作用的研究 被引量：37

1

作者 李旭芬 张苏展 +1 位作者 郑树 张行 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期391-393,共3页

目的：观察苦参碱对 K562细胞 hTERT- mRNA表达及端粒酶活性的影响作用 ,并明确两者的相关性。方法：以 0.1～ 2 mg/ml苦参碱处理 K562细胞 48h后， RT- PCR检测其 hTERT- mRNA表达，同时行 TRAP- PCR- ELISA端粒酶活性检测。结果 :K56... 目的：观察苦参碱对 K562细胞 hTERT- mRNA表达及端粒酶活性的影响作用 ,并明确两者的相关性。方法：以 0.1～ 2 mg/ml苦参碱处理 K562细胞 48h后， RT- PCR检测其 hTERT- mRNA表达，同时行 TRAP- PCR- ELISA端粒酶活性检测。结果 :K562细胞为一强端粒酶活性细胞株，在浓度分别为 0.1、 0 5、 1 0、 2 0 mg/ml苦参碱作用后， K562细胞 hTERT- mRNA表达明显受抑，同时伴有端粒酶活性下降，抑制率分别为 0 3％、 13 0％、 91 7％和 98 6％。结论：苦参碱可降低 K562细胞 hTERT- mRNA表达 ,同时伴端粒酶活性下降；端粒酶活性强度与 hTERT- mRNA表达有关。 展开更多

关键词 苦参碱 端粒酶 肿瘤细胞系 聚合酶链反应 htert-mrna

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检测胃癌患者外周血微转移端粒酶hTERT-mRNA的意义 被引量：7

2

作者 邢全台 袁孟彪 +5 位作者 孙启龙 梁业民 王菁华 于涛 高艳景 李延青 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期321-323,共3页

目的　探讨检测胃癌血液微转移的新方法 ,评价端粒酶hTERT—mRNA作为检测微转移标志物的价值。方法　提取4 2例胃癌病人外周血有核细胞RNA ,采用RT -PCR方法检测其端粒酶hTERT -mRNA的表达 ,半定量分析 ,并与 2 5名健康者作对照。结果　... 目的　探讨检测胃癌血液微转移的新方法 ,评价端粒酶hTERT—mRNA作为检测微转移标志物的价值。方法　提取4 2例胃癌病人外周血有核细胞RNA ,采用RT -PCR方法检测其端粒酶hTERT -mRNA的表达 ,半定量分析 ,并与 2 5名健康者作对照。结果　 4 2例胃癌病人外周血端粒酶hTERT—mRNA的表达显著高于 2 5例健康者 ;Ⅰ期癌与Ⅱ～Ⅳ期癌之间存在显著性差异 ;不同细胞学类型胃癌之间无显著性差异 ;不同病理学类型的胃癌之间不存在显著性差异。结论　RT -PCR检测外周血端粒酶hTERT -mRNA可用来观察胃癌微转移 ,半定量分析更具价值。 展开更多

关键词 胃癌 微转移 端粒酶 htert-mrna RT-PCR法

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硝普钠诱导K562细胞凋亡过程中STAT3/P38MAPK活化及端粒酶hTERT-mRNA表达的研究

3

作者 周永列 吕亚萍 +4 位作者 吕火祥 邱莲女 王文松 林惠君 刘建栋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期686-691,共6页

为了研究外源性一氧化氮供体硝普钠(SNP)诱导K562细胞凋亡过程中STAT3及P38MAPK活化及端粒酶hTERT-mRNA表达的变化,探讨硝普钠诱导K562细胞凋亡机制,用Annexin-V/PI双标记、DNA片段原位末端标记法、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析... 为了研究外源性一氧化氮供体硝普钠(SNP)诱导K562细胞凋亡过程中STAT3及P38MAPK活化及端粒酶hTERT-mRNA表达的变化,探讨硝普钠诱导K562细胞凋亡机制,用Annexin-V/PI双标记、DNA片段原位末端标记法、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析等方法检测细胞凋亡。用流式细胞术测定经硝普钠干预后K562细胞磷酸化P38MAPK和磷酸化STAT3的表达,同时利用实时荧光PCR定量检测端粒酶hTERT-mRNA表达的变化。结果表明K562细胞经硝普钠作用后出现典型的细胞形态改变,DNA片段化,显现亚G1峰Ⅱ并显著增加。Annexin-V/PI和DNA片段原位末端标记表达增加。这些均证实NO能诱导K562细胞凋亡,大部分细胞阻滞于G0/G1期。SNP诱导K562细胞凋亡过程中,磷酸化P38MAPK和磷酸化STAT3的表达随SNP浓度的增加而表现为先增强后下降;K562细胞与2.0mmol/LSNP孵育不同的时间内,磷酸化P38MAPK的表达在12小时时达到高峰并持续至48小时,72小时后表达下降;磷酸化STAT3的表达在24小时时达高峰,48小时后表达即显著下降;端粒酶hTERT-mRNA的表达随SNP作用的浓度增加和时间延长而显著下调。结论SNP能诱导K562细胞凋亡,其机制可能与P38MAPK的活化、抑制端粒酶逆转录酶和STAT3的活化有关。 展开更多

关键词 硝普钠 一氧化氮 K562细胞 细胞凋亡 STAT3 P38MAPK 端粒酶 hTERT—mRNA

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曲古抑菌素A对人胃腺癌SGC-7901细胞株增殖及其端粒酶hTERT—mRNA表达影响的研究 被引量：5

4

作者 刘立玺 石巍 +1 位作者 廖爱军 姚育红 《美国中华临床医学杂志》 2005年第2期132-134,共3页

目的探讨不同浓度的曲古抑菌素A(trichostatin A，TSA)对人胃腺癌SGC-7901细胞增生及其端粒酶hTERT-mRNA表达的作用。方法不同浓度的TSA与人胃腺癌SGC-7901细胞株共培养，MTT检测细胞增生，RT—PCR法检测细胞端拉酶hTERTH-mRNA的表达，... 目的探讨不同浓度的曲古抑菌素A(trichostatin A，TSA)对人胃腺癌SGC-7901细胞增生及其端粒酶hTERT-mRNA表达的作用。方法不同浓度的TSA与人胃腺癌SGC-7901细胞株共培养，MTT检测细胞增生，RT—PCR法检测细胞端拉酶hTERTH-mRNA的表达，同时用相差显微镜动态观察细胞形态及生长方式上的改变。结果TSA呈时间剂量依赖性抑制胃癌细胞株SGC-7901的生长，同时它也能显著减少hTERT-mRNA的表达，呈剂量依赖关系。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA能抑制胃癌细胞株SGC-7901的hTERT-mRNA表达，进而抑制其生长，这可能是组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA抗肿瘤的另一机制。 展开更多

关键词 MRNA表达 端粒酶HTERT 人胃腺癌 曲古抑菌素A 影响的研究 细胞株增殖 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 SGC-7901细胞株 htert-mrna 剂量依赖性抑制 胃癌细胞株 PCR法检测 剂量依赖关系 不同浓度 细胞增生 MTT检测 相差显微镜 TSA

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人参皂苷单体Rh_2促使人脑胶质瘤U251细胞凋亡的实验研究 被引量：8

5

作者 邱建武 罗俊生 +2 位作者 顾立学 关宁 张继全 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2011年第4期773-776,共4页

目的:观察人参皂苷单体Rh2(GS-Rh2)诱导人脑胶质瘤U251细胞的凋亡作用,进而探讨其对端粒酶活性的影响和人端粒酶逆转录酶(hTERT)表达的机制。方法:人脑胶质瘤U251细胞经GS-Rh2处理后,采用MTT法检测细胞抑制率,免疫荧光技术观察凋亡小体... 目的:观察人参皂苷单体Rh2(GS-Rh2)诱导人脑胶质瘤U251细胞的凋亡作用,进而探讨其对端粒酶活性的影响和人端粒酶逆转录酶(hTERT)表达的机制。方法:人脑胶质瘤U251细胞经GS-Rh2处理后,采用MTT法检测细胞抑制率,免疫荧光技术观察凋亡小体,流式细胞仪经Annexin V-FITC/PI双染法观察细胞凋亡,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性改变,通过RT-PCR技术检测hTERT基因的表达。结果:GS-Rh2对U251细胞具有抑制作用,呈明显的剂量依赖关系,免疫荧光技术观察到凋亡小体的出现,流式细胞仪检测GS-Rh2引起U251细胞凋亡并与药物浓度存在依赖关系,TRAP-ELISA法发现GS-Rh2可以降低端粒酶活性且呈剂量和时间依赖关系,RT-PCR证实GS-Rh2可降低hTERT基因的表达。结论:人参皂苷单体Rh2能够诱导人脑胶质瘤U25l细胞发生凋亡,并抑制和降低细胞端粒酶活性,经过RT-PCR证实GS-Rh2作用于胶质瘤的分子生物学机制可能与抑制胶质瘤细胞hTERT基因有关,进而诱导细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 人参皂苷单体Rh2 胶质瘤 细胞凋亡 HTERT mRNA

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胸腔积液中hTERT mRNACEA CA19-9检测及其意义 被引量：9

6

作者 赵年贵 叶小群 +2 位作者 杨维兰 邹叶青 颜春松 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期92-95,共4页

目的:探讨人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)、CEA、CA19-9在鉴别诊断良恶性胸腔积液的意义。方法:采用全自动化学发光法检测胸腔积液中CEA、CA19-9含量及RT-PCR检测胸腔积液中hTERT mRNA表达。结果:恶... 目的:探讨人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)、CEA、CA19-9在鉴别诊断良恶性胸腔积液的意义。方法:采用全自动化学发光法检测胸腔积液中CEA、CA19-9含量及RT-PCR检测胸腔积液中hTERT mRNA表达。结果:恶性组中hTERTmRNA、CEA、CA19-9阳性率显著高于良性组(P<0.05)。三者在恶性胸腔积液的敏感性(%)、特异性(%)和诊断符合率(%)分别为:hTERT mRNA:81.8/90.5/86.1,CEA:52.3/92.9/72.1,CA19-9:34.1/90.5/61.6。hTERT mRNA+CEA在恶性胸腔积液中诊断阳性率97.7%。结论:三者均有助于良恶性胸腔积液的鉴别诊断,而hTERT mRNA对于鉴别良恶性胸腔积液有更大的临床价值,CA19-9不宜作为首选指标;hTERT mRNA和CEA联合检测可以进一步提高恶性胸腔积液的阳性检出率,有助于提高其诊断价值。 展开更多

关键词 胸腔积液hTERT MRNA CEA CA19-9

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四嗪二甲酰胺体外诱导NB4细胞增殖、凋亡与分化作用的研究 被引量：6

7

作者 周永列 吕亚萍 +4 位作者 胡惟孝 邱莲女 王文松 吴建国 刘建栋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期880-886,共7页

为了观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)对白血病细胞株NB4的增殖、分化和凋亡作用,并对其作用机制进行初步探讨。将不同浓度的ZGDHu-1与NB4细胞在体外培养,并以全反式维甲酸作阳性药物对照,观察ZGDHu-1对NB4细胞增殖抑制、凋亡和分化的作用。... 为了观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)对白血病细胞株NB4的增殖、分化和凋亡作用,并对其作用机制进行初步探讨。将不同浓度的ZGDHu-1与NB4细胞在体外培养,并以全反式维甲酸作阳性药物对照,观察ZGDHu-1对NB4细胞增殖抑制、凋亡和分化的作用。用流式细胞术检测ZGDHu-1诱导NB4细胞分化和调亡过程中bcl-2和bax的表达变化,以及P38MAPK和STAT3磷酸化水平,同时利用实时荧光PCR定量检测端粒酶hTERT-mRNA表达的变化。结果表明:ZGDHu-1对NB4细胞增殖和活力抑制呈时间和剂量的量效关系,48和72小时的IC50分别为450和200ng/ml。NB4细胞经ZGDHu-1作用后,大部分细胞阻滞于G2-M期,G0/1期细胞减少;细胞出现典型的形态改变,DNA片段化,亚G1峰检出并显著增加,Annexin-V/PI标记升高;Hoechst33258荧光染色后见凋亡细胞的特征性改变,这些均证实ZGDHu-1能诱导NB4细胞凋亡。NB4细胞经2-100ng/mlZGDHu-1作用3天后,细胞部分分化,NBT阳性率增加,细胞表面CD11b、CD13表达增高。ZGDHu-1作用NB4细胞后,bcl-2表达无变化,但bax表达显著增加,bax/bcl-2的比值升高,磷酸化P38MAPK表达增强,而磷酸化STAT3表达无变化,端粒酶hTERT-mRNA的表达随ZGDHu-1作用的浓度增加而显著下调。结论:ZGDHu-1能抑制NB4细胞增殖,诱导细胞分化,促进细胞凋亡,其机制可能与bax表达上调、P38MAPK活化增强和端粒酶逆转录酶受抑有关。 展开更多

关键词 四嗪二甲酰胺 NB4细胞株 有丝分裂原激活蛋白激酶 BAX/BCL-2 端粒酶逆转录酶 白血病

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3种卵巢癌细胞中hTERT转录水平及其与端粒酶活性的相关性研究 被引量：6

8

作者 宋悦 孔北华 +2 位作者 刘培淑 马道新 江森 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期486-491,共6页

背景与目的:端粒酶在约90%的肿瘤细胞中有活性而在绝大多数正常细胞中受抑,催化亚单位端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)是端粒酶的重要组成部分,其表达的调控主要发生在转录水平。端粒酶、hTERT、hTERT启动... 背景与目的:端粒酶在约90%的肿瘤细胞中有活性而在绝大多数正常细胞中受抑,催化亚单位端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)是端粒酶的重要组成部分,其表达的调控主要发生在转录水平。端粒酶、hTERT、hTERT启动子三者之间密切相关。本研究探讨卵巢癌细胞系中hTERT启动子的活性及其与hTERTmRNA表达和端粒酶活性之间的关系。方法:应用脂质体转染法将hTERT核心启动子基因转入3种卵巢癌细胞OVCAR3、SKOV3、3AO及正常卵巢上皮细胞中,并用荧光素酶检测实验检测其中hTERT启动子的活性;应用RT-PCR半定量法检测这4种细胞中hTERTmRNA的表达水平;应用PCR-ELISA定量检测这4种细胞中端粒酶的活性。同时以端粒酶阳性的永生化人胚肾成纤维细胞HEK293作为阳性对照,以端粒酶阴性的人胚肺成纤维细胞HELF作为阴性对照。结果:OVCAR3、SKOV3、3AO细胞及正常卵巢上皮细胞中的hTERT启动子活性(视每种细胞中pGL3-control的启动子活性为100%)分别为31.4%、20.3%、17.7%和0.3%;hTERTmRNA的相对表达水平(视SKOV3的表达水平为1.00)分别为1.30、1.00、0.63和0;端粒酶活性分别为0.580、0.414、0.386和0.103(>0.200时定为阳性)。3种卵巢癌细胞中hTERT启动子活性、hTERTmRNA表达水平和端粒酶活性均特异性增高。 展开更多

关键词 卵巢癌细胞 hTERT转录 端粒酶活性 相关性 研究

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非小细胞肺癌患者外周血hTERT mRNA水平检测的临床意义 被引量：14

9

作者 周婉婉 梁冰 +1 位作者 王效静 胡丙清 《东南大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2017年第2期217-221,共5页

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)发展与外周血端粒酶逆转录酶(hTERT)表达的相关性。方法:采用Real-time PCR技术检测114例NSCLC患者和35例肺部良性病变患者外周血hTERT mRNA表达水平,比较二者之间的差异并分析。结果:检测结果显示,肺鳞癌... 目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)发展与外周血端粒酶逆转录酶(hTERT)表达的相关性。方法:采用Real-time PCR技术检测114例NSCLC患者和35例肺部良性病变患者外周血hTERT mRNA表达水平,比较二者之间的差异并分析。结果:检测结果显示,肺鳞癌Ⅰ~Ⅳ期hTERT mRNA表达量分别为(0.134±0.018)×10^(-3)、(0.185±0.044)×10^(-3)、(0.576±0.267)×10^(-3)、(3.409±2.544)×10^(-3),Ⅰ、Ⅱ期之间差异无统计学意义(P>0.05),其余各组之间差异有统计学意义(P<0.05);肺腺癌Ⅰ~Ⅳ期hTERT活性分别为(0.156±0.006)×10^(-3)、(0.220±0.052)×10^(-3)、(0.630±0.282)×10^(-3)、(3.230±2.245)×10^(-3),Ⅰ、Ⅱ期之间差异无统计学意义(P>0.05),其余各组之间差异有统计学意义(P<0.05);同期鳞癌与腺癌之间差异无统计学意义(P>0.05);肺部良性病变组外周血hTERT mRNA表达水平为(0.042±0.017)×10^(-3),与肺癌组之间存在显著性差异(P<0.05)。结论:NSCLC患者外周血hTERT mRNA表达显著升高,并与NSCLC临床分期正相关,提示其可作为肺癌诊断和临床分期的有益参考,但与NSCLC的病理类型无关。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 HTERTMRNA 实时荧光定量PCR

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连黛片对结肠癌模型裸鼠移植瘤端粒酶活性及hTERT mRNA表达的影响 被引量：4

10

作者 胡丽娟 文彬 +2 位作者 周福生 黄绍刚 黄穗平 《上海中医药杂志》 北大核心 2008年第8期71-73,共3页

目的观察连黛片对实验性HT29大肠癌裸鼠移植瘤端粒酶活性及其相关基因hTERTmRNA表达的影响。方法采用皮下注射HT29大肠癌细胞株制作结肠癌裸鼠模型,每组均在初次接种后7天进行灌胃治疗,连续灌胃1个月。中药治疗组用连黛片灌胃治疗(每只... 目的观察连黛片对实验性HT29大肠癌裸鼠移植瘤端粒酶活性及其相关基因hTERTmRNA表达的影响。方法采用皮下注射HT29大肠癌细胞株制作结肠癌裸鼠模型,每组均在初次接种后7天进行灌胃治疗,连续灌胃1个月。中药治疗组用连黛片灌胃治疗(每只灌胃2g/kg),西药治疗组用端粒酶抑制剂3’-叠氮3’-脱氧胸腺核苷(叠氮胸苷,AZT,150mg/kg)灌胃治疗,空白对照组予以生理盐水灌胃。动态观察各组裸鼠肿瘤体积变化,用游标卡尺测量每组裸鼠移植瘤的大小。采用TRAP-ELISA方法检测端粒酶活性变化,荧光定量PCR检测端粒酶hTERTmRNA的表达,结果进行统计学分析。结果①初次接种后7天各组裸鼠皮下肿瘤大小比较无显著性差异;②1个月后治疗组裸鼠皮下肿瘤体积比较无明显差异,治疗组与空白对照组比较有差异;③空白对照组端粒酶相对活性较两组治疗组明显增强;空白对照组端粒酶hTERTmRNA的表达增多。中药组与AZT组端粒酶活性及端粒酶hTERTmRNA的表达改变无显著性差异。结论连黛片能抑制人大肠癌HT29裸小鼠移植瘤的增值,其作用机制可能是减少肿瘤细胞hTERTmRNA的表达,从而降低肿瘤组织端粒酶活性。 展开更多

关键词 连黛片 裸鼠 端粒酶活性 HTERT mRNA

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hTERT mRNA、p53蛋白在胃黏膜病变中的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系 被引量：2

11

作者 舒徐 吕农华 +2 位作者 祝荫 陈江 谢勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第23期3918-3920,共3页

目的:探讨人端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA、p53蛋白在胃黏膜病变中的表达和幽门螺杆菌(Hp)感染的关系。方法:对未经抗Hp治疗且被确诊为慢性浅表性胃炎(CSG)和胃癌前病变者,检测胃黏膜Hp感染状况,并分别用RT-PCR和SP免疫组化方法检测hTER... 目的:探讨人端粒酶催化亚单位(hTERT)mRNA、p53蛋白在胃黏膜病变中的表达和幽门螺杆菌(Hp)感染的关系。方法:对未经抗Hp治疗且被确诊为慢性浅表性胃炎(CSG)和胃癌前病变者,检测胃黏膜Hp感染状况,并分别用RT-PCR和SP免疫组化方法检测hTERT mRNA和p53蛋白的表达。结果:在胃癌前病变组中,hTERT mRNA和p53蛋白的阳性表达率均显著高于CSG组(P<0.05)。在胃癌前病变组中,Hp阳性亚组hTERTmRNA和p53蛋白的表达率分别显著高于Hp阴性亚组的表达率(P<0.05)。在CSG组中,Hp感染和hTERTmRNA、p53蛋白的表达无明显关系。在24例Hp阳性的胃癌前病变组中,p53蛋白和hTERT mRNA的表达有相关性,Pearson相关系数为0.608(P<0.05)。结论:在Hp致胃癌前病变的发生过程中,p53基因的变异和hTERT基因的激活起重要作用,且存在相关关系,这可能是Hp引起胃黏膜病变发生发展的作用机制之一。 展开更多

关键词 胃肿瘤 癌前状态 胃炎 螺杆菌 幽门 HTERT MRNA P53蛋白

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CK20mRNA和hTERTmRNA表达与胃癌患者外周血微转移的研究 被引量：2

12

作者 刘新兰 陈萍 魏建敏 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第22期1286-1289,共4页

目的:检测胃癌患者外周血中CK20 mRNA和hTERT mRNA的表达,探讨其能否作为判断外周血微转移及预后的分子生物学指标。方法:采用RT-PCR技术检测40例胃癌患者、19例胃良性病变患者和20例健康体检者外周血中CK20 mRNA和hTERT mRNA定性和半... 目的:检测胃癌患者外周血中CK20 mRNA和hTERT mRNA的表达,探讨其能否作为判断外周血微转移及预后的分子生物学指标。方法:采用RT-PCR技术检测40例胃癌患者、19例胃良性病变患者和20例健康体检者外周血中CK20 mRNA和hTERT mRNA定性和半定量表达。结果:1)CK20 mRNA和hTERT mRNA在胃癌患者中阳性率分别为52.50%(21/40)和65.00%(26/40),相对系数分别为0.81±0.17和0.78±0.17;在胃良性病变患者阳性率均为5.26%(1/19),相对系数分别为0.12和0.11;在健康体检者中均为0。胃癌患者与胃良性病变患者、健康体检者相比,两项指标均有统计学差异(P<0.01)。2)CK20 mRNA、hTERT mRNA阳性率和相对系数与临床分期、淋巴结转移、远处转移均有关(P<0.05),阳性者生存率低于阴性者(P<0.05)。3)CK20 mRNA、hTERT mRNA与CEA、CA199表达呈正相关(P<0.05),其阳性率高于CA199(P<0.05)。结论:胃癌患者外周血中存在CK20 mRNA和hTERT mRNA表达,与临床分期及患者生存密切相关,提示两项指标能预测外周血微转移和判断预后,其诊断外周血微转移优于CA199。 展开更多

关键词 胃癌 外周血 微转移 RT—PCR CK20 MRNA HTERT MRNA

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外周血淋巴细胞中端粒酶活性激活及机制的研究 被引量：2

13

作者 雷红玮 田亚男 王旭 《东北大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第3期444-447,共4页

实验采用PHA和rhIL-2激活人外周血淋巴细胞,再以流式细胞术(FCM)分析细胞周期和细胞分裂增殖;以TRAP检测外周血淋巴细胞活化前后端粒酶活性的变化;以Western blot检测hTERT和相关蛋白的表达;以荧光定量PCR分析hTERT的mRNA变化水平.结果... 实验采用PHA和rhIL-2激活人外周血淋巴细胞,再以流式细胞术(FCM)分析细胞周期和细胞分裂增殖;以TRAP检测外周血淋巴细胞活化前后端粒酶活性的变化;以Western blot检测hTERT和相关蛋白的表达;以荧光定量PCR分析hTERT的mRNA变化水平.结果表明:外周血淋巴细胞在被PHA和rhIL-2刺激活化后,端粒酶活性升高,升高的端粒酶活性能够被JAK抑制剂所抑制,提示端粒酶活性的升高依赖JAK信号通路.升高的端粒酶活性是由于hTERT蛋白表达的增高,而hTERT表达增高的原因是由于hTERT的mRNA表达水平升高,实验还表明这些活动都同样依赖于JAK信号通路.本研究深化了对端粒酶活性以及hTERT调控机制的认识. 展开更多

关键词 端粒酶活性 淋巴细胞 HTERT MRNA JAK信号通路

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茶多酚对膀胱肿瘤细胞端粒酶活性的影响 被引量：6

14

作者 王田 邱学德 +3 位作者 黄杰 刘乔保 肖民辉 杨晓华 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2005年第6期314-316,共3页

目的探讨茶多酚(EGCG)对膀胱肿瘤细胞株T24和BIU87的端粒酶活性影响及其可能机制。方法用MTT法测定治疗组(EGCG)、阳性对照组(阿霉素)、阴性对照组的细胞抑制率,用流式细胞仪测定细胞凋亡率。将1/4IC50的EGCG和阿霉素作用于肿瘤细胞株24... 目的探讨茶多酚(EGCG)对膀胱肿瘤细胞株T24和BIU87的端粒酶活性影响及其可能机制。方法用MTT法测定治疗组(EGCG)、阳性对照组(阿霉素)、阴性对照组的细胞抑制率,用流式细胞仪测定细胞凋亡率。将1/4IC50的EGCG和阿霉素作用于肿瘤细胞株24h、48h和72h后,用PCR-ELISA法测定肿瘤细胞的端粒酶活性。用1/4IC50的药物作用于肿瘤细胞株24h、48h和72h后,用半定量RT-PCR法测定人端粒酶逆转录酶(hTERT)和c-mycmRNA表达量。结果EGCG和阿霉素均表现为剂量和时间依赖的细胞抑制作用。IC50浓度的EGCG和阿霉素均能够导致肿瘤细胞的凋亡。用1/4IC50浓度的EGCG和阿霉素分别作用于细胞株72h后,T24细胞的端粒酶活性分别降低67.8%和34.1%,BIU87分别降低63.7%和23.2%。1/4IC50浓度的EGCG作用于肿瘤细胞株后,其hTERT和c-mycmRNA表达量降低。结论EGCG能够抑制膀胱肿瘤细胞株的端粒酶活性,作为端粒酶活性抑制剂,其用于肿瘤治疗的可能性还需进一步研究。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 茶多酚 端粒酶 hTERT/c-myc mRNA

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hTERT mRNA、UbcH10和Ki-67在乳腺大汗腺病变中的鉴别诊断价值 被引量：1

15

作者 徐明 许杰莉 +1 位作者 周英姿 许伟青 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1239-1243,共5页

目的探讨UbcH10、Ki-67和hTERT mRNA在乳腺大汗腺病变中的鉴别诊断价值。方法免疫组织化学EnVision法检测标记物UbcH10和Ki-67,显色原位杂交检测hTERT mRNA在20例大汗腺化生(APM)、26例大汗腺腺病(AA)、32例非典型性大汗腺增生(AAH)、2... 目的探讨UbcH10、Ki-67和hTERT mRNA在乳腺大汗腺病变中的鉴别诊断价值。方法免疫组织化学EnVision法检测标记物UbcH10和Ki-67,显色原位杂交检测hTERT mRNA在20例大汗腺化生(APM)、26例大汗腺腺病(AA)、32例非典型性大汗腺增生(AAH)、22例大汗腺导管内癌(ADCIS)和35浸润性大汗腺癌(IAC)的表达。结果 UbcH10、Ki-67和hTERT mRNA在APM、AA、AAH、ADCIS和IAC表达的阳性率分别为(10.0%、5.0%和45.0%)、(50.0%、50.0%和84.6%)、(62.5%、62.5%和81.3%)、(81.8%、81.8%和81.8%)和(94.3%、94.3%和85.7%),呈正相关。Ki-67在APM、AA、AAH、ADCIS和IAC中表达的平均增殖指数分别为1.01%、5.35%、7.53%、16.05%和31.12%。hTERT mRNA、Ki-67和UbcH10表达的阳性率在APM与AA、AAH、ADCIS和IAC相比较差异具有统计学意义(P<0.05),在AA、AAH、ADCIS和IAC相邻两组比较中差异均无统计学意义(P>0.05);Ki-67平均增殖指数在AA、AAH与ADCIS相比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论苏木精-伊红染色观察组织病理学特征,辅以免疫组织化学方法检测Ki-67,能够在一定程度上提高乳腺大汗腺谱系中良、恶性病变鉴别诊断的准确性。 展开更多

关键词 乳腺 大汗腺病变 UBCH10 KI-67 hTERTm RNA 免疫组织化学 显色原位杂交

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CK20 mRNA和hTERT mRNA表达与大肠癌患者外周血微转移的临床研究 被引量：2

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作者 陈萍 王宁菊 刘新兰 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第15期1417-1421,共5页

目的:检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20(CK20)mRNA和人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标.方法:采用RT-PCR技术检测大肠癌32例、肠道良性病变11例和健康体检者20例... 目的:检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20(CK20)mRNA和人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标.方法:采用RT-PCR技术检测大肠癌32例、肠道良性病变11例和健康体检者20例的外周血中CK20mRNA和hTERT mRNA的定性和半定量表达.以人胃腺癌细胞株SGC-7901作阳性对照.实验数据采用SPSS13.0forWindows软件包统计分析.结果:①CK20mRNA和hTERT mRNA在大肠癌患者外周血中的阳性表达率分别为50.0%和56.2%,相对系数分别为0.89±0.17和0.88±0.17;在肠道良性病变患者外周血中阳性表达率分别为9.1%和0%,相对系数分别为0.11和0;在健康体检者外周血中阳性表达率及相对系数均为0.大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,CK20mRNA和hTERTmRNA的表达均有统计学差异(P<0.05).②CK20mRNA和hTERT mRNA阳性表达率和相对系数与临床分期、远处转移均有关(P<0.05);其阳性表达率与浸润深度、淋巴结转移无关,但相对系数与之均有关(P<0.05).阳性表达者生存率低于阴性者(P<0.05).结论:大肠癌患者外周血中存在CK20mRNA和hTERT mRNA的表达,与临床分期及患者生存密切相关,提示CK20mRNA和hTERTmRNA的表达能预测大肠癌患者外周血微转移,可判断预后. 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 外周血 微转移 逆转录聚合酶链反应 CK20 MRNA HTERT MRNA

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hTERT mRNA和MDR mRNA在人肝癌中的表达及其意义 被引量：1

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作者 韦长元 曹骥 +2 位作者 黎丹戎 梁安民 莫军杨 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2004年第8期583-586,共4页

目的　探讨hTRTmRNA及MDRmRNA在人肝细胞肝癌 (HCC )组织中的表达及其意义。方法　检测 5 8例HCC患者癌组织及癌旁组织中hTERTmRNA和MDRmRNA的表达情况。结果　在 5 8例肝癌患者癌组织及其癌旁组织中 ,hTERTmRNA阳性率分别为 44 .83 % (... 目的　探讨hTRTmRNA及MDRmRNA在人肝细胞肝癌 (HCC )组织中的表达及其意义。方法　检测 5 8例HCC患者癌组织及癌旁组织中hTERTmRNA和MDRmRNA的表达情况。结果　在 5 8例肝癌患者癌组织及其癌旁组织中 ,hTERTmRNA阳性率分别为 44 .83 % ( 2 6/5 8)和 5 .17% ( 3 /5 8) ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;MDRmRNA阳性率分别为 60 .3 4% ( 3 5 /5 8)和 3 2 .76% ( 19/5 8) ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。hTRTmRNA ,MDRmRNA在人肝癌组织中的检出率与临床分期、肝外转移、术后复发、肿瘤大小等明显相关 (均P <0 .0 5 ) ,而与肿瘤数目、血清AFP水平等无明显相关 (P >0 .0 5 )。MDRmRNA检出率与术前化疗明显相关 (P <0 .0 1) ,但与门静脉癌栓无关 (P >0 .0 5 ) ;而hTERTmRNA与术前化疗无相关 (P >0 .0 5 ) ,但与门静脉癌栓有关 (P <0 .0 5 )。结论　hTERTmRNA和MDRmRNA可能与肝细胞的恶性转化及术后复发有关 ,故可望作为预测肝癌复发。 展开更多

关键词 肝肿瘤/病理学 基因表达 HTERTMRNA MDRmRNA

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胃癌患者外周血hTERT mRNA的表达及意义 被引量：3

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作者 魏建敏 刘新兰 +4 位作者 刘奇伦 葛箭 陈萍 崔洁 丛芳圆 《宁夏医学杂志》 CAS 2009年第6期502-503,F0002,共3页

目的分析hTERTmRNA是否可以作为预测胃癌患者外周血微转移的分子生物学指标。方法RT-PCR法检测40例胃癌患者、20例慢性萎缩性胃炎患者和20例健康体检者外周血中hTERT mRNA的表达。结果hTERTmRNA在胃癌患者外周血中阳性表达率明显升高;hT... 目的分析hTERTmRNA是否可以作为预测胃癌患者外周血微转移的分子生物学指标。方法RT-PCR法检测40例胃癌患者、20例慢性萎缩性胃炎患者和20例健康体检者外周血中hTERT mRNA的表达。结果hTERTmRNA在胃癌患者外周血中阳性表达率明显升高;hTERTmRNA与CEA、CA199的表达呈正相关(P<0.05);hTERTmRNA阳性表达率高于CA199(P<0.05)。结论RT-PCR技术检测外周血hTERTmRNA表达可作为胃癌患者外周血微转移的预测指标。 展开更多

关键词 HTERT MRNA CEA CA199 胃癌 微转移

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甘氨脱氧胆酸钠对人肝癌细胞端粒酶活性及其hTERTmRNA表达的影响 被引量：1

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作者 陈江 黄文芳 +2 位作者 逯兴敏 郭渝 李光富 《四川医学》 CAS 2009年第3期297-298,共2页

目的探讨甘氨脱氧胆酸钠(glycodeoxycholic acid,GDCA)对肝癌SMMC7721细胞端粒酶活性以及hTERTmRNA表达影响。方法采用PCR-ELISA法检测端粒酶活性;应用RT-PCR检测hTERTmRNA的表达。结果GDCA作用肝癌SMMC7721细胞后,端粒酶活性与hTERTmRN... 目的探讨甘氨脱氧胆酸钠(glycodeoxycholic acid,GDCA)对肝癌SMMC7721细胞端粒酶活性以及hTERTmRNA表达影响。方法采用PCR-ELISA法检测端粒酶活性;应用RT-PCR检测hTERTmRNA的表达。结果GDCA作用肝癌SMMC7721细胞后,端粒酶活性与hTERTmRNA表达均降低,GDCA200、400μmol/L处理组与对照组端粒酶活性(A450nmOD值)分别为(0.140±0.04)、(0.077±0.01)、(0.248±0.05),差异有统计学意义(P<0.05),抑制率为43.5%和69.0%。hTERTmRNA表达明显降低,相对表达率分别为1.33、0.59、1.89。结论甘氨脱氧胆酸钠抑制肝癌SMMC7721细胞端粒酶活性,且下调hTERTmRNA的表达。 展开更多

关键词 甘氨脱氧胆酸钠 肝癌 端粒酶活性 HTERTMRNA

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胃癌患者外周血hTERT mRNA转录水平及临床意义 被引量：1

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作者 胡福军 凌志强 +1 位作者 陈晓钟 余传定 《浙江临床医学》 2008年第8期1029-1031,共3页

目的研究胃癌患者外周血中hTERT mRNA的表达,探讨其作为胃癌肿瘤细胞标志物的可行性。方法应用实时荧光定量RT-PCR技术检测96例原发性胃癌、50例胃溃疡和60例健康献血员血清中hTERT mRNA表达水平,并对阳性PCR产物进行克隆、测序。结果... 目的研究胃癌患者外周血中hTERT mRNA的表达,探讨其作为胃癌肿瘤细胞标志物的可行性。方法应用实时荧光定量RT-PCR技术检测96例原发性胃癌、50例胃溃疡和60例健康献血员血清中hTERT mRNA表达水平,并对阳性PCR产物进行克隆、测序。结果胃癌组hTERT mRNA表达水平(12.78±0.97)copies/ml,显著高于良性胃溃疡组(0.93±0.23)copies/ml和健康对照组(0.29±0.17)copies/ml。多变量分析表明,hTERT表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤生长方式、肿瘤分化程度、淋巴管侵犯、静脉侵犯均无显著相关性(p>0.05),而与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、pTNM分期及CEA有显著相关性(p<0.05)。结论qRT-PCR具有快速、敏感和特异的特点。定量分析外周血hTERT mRNA转录水平可作为胃癌的肿瘤细胞标志物之一,用于早期诊断。 展开更多

关键词 胃癌 肿瘤标志物 HTERT MRNA 实时荧光定量RT-PCR

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