间歇皮下注射人甲状旁腺激素不同片段(hPTH_(1-34)及hPTH_(1-84))对去卵巢大鼠股骨及腰椎骨量的影响 被引量：9

1

作者 邢小平 山本逸雄 +1 位作者 森田陆司 周学瀛 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2002年第2期128-131,共4页

目的　比较间歇皮下注射人甲状旁腺激素不同片段 (hPTH1 - 34 )及 (hPTH1 - 84 )对完整雌性(Non OVX)大鼠和去卵巢 (OVX)大鼠股骨及腰椎 1- 4骨矿物含量 (BMC)和骨密度 (BMD)的影响。方法　Wistar雌性大鼠 176只 ,分为hPTH1 - 34 和hPTH... 目的　比较间歇皮下注射人甲状旁腺激素不同片段 (hPTH1 - 34 )及 (hPTH1 - 84 )对完整雌性(Non OVX)大鼠和去卵巢 (OVX)大鼠股骨及腰椎 1- 4骨矿物含量 (BMC)和骨密度 (BMD)的影响。方法　Wistar雌性大鼠 176只 ,分为hPTH1 - 34 和hPTH1 - 84 两大组 (各 80只及 96只 ) ,每大组又各自分 4组 (每组各 2 0只或 2 4只 ) ,分别为 :两组安慰剂组 (未切卵巢及切卵巢 )用安慰剂 (PBS)进行皮下注射 ,每周 3次 ,共 2周 ;两组治疗组 (未切卵巢及切卵巢 )用hPTH1 - 34 或hPTH1 - 84 ,皮下注射 ,每周 3次 ,共 2周。结果　 1 卵巢切除术后 3个月大鼠股骨及腰椎1 - 4BMC和BMD明显下降 ;2 两种片段的甲状旁腺激素(hPTH1 - 34 及hPTH1 - 84 )间歇注射均能使Non OVX大鼠和OVX大鼠股骨及腰椎 1- 4BMC和BMD较相应对照组明显升高 ;且腰椎1 - 4较股骨的BMC和BMD升高更明显 ;3 OVX大鼠治疗后股骨及腰椎1 - 4BMC和BMD的升高率较Non OVX大鼠更明显 ;OVX大鼠在治疗后股骨及腰椎骨量能恢复到去卵巢前水平 ;4 hPTH1 - 34 较hPTH1 - 84 更明显的使完整大鼠和OVX大鼠股骨BMC和BMD升高。结论　间歇皮下注射人甲状旁腺激素对大鼠股骨及腰椎骨量均有增高作用 ,尤其对腰椎的骨量以及对去卵巢大鼠骨量升高作用更明显 ;hPTH1 - 34 展开更多

关键词 间歇皮下注射 hpth1-34 hpth1-84 腰椎 人甲状旁腺激素 骨密度 骨质疏松 骨矿物含量 股骨

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利用酿酒酵母稳定完整表达融合蛋白hPTH(1-34)ab-HSA 被引量：1

2

作者 刘青霞 诸葛斌 +3 位作者 方慧英 宗红 金坚 诸葛健 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期74-78,共5页

为稳定完整表达人甲状旁腺激素(hPTH)(1-34)二联体与人血清白蛋白(HSA)融合蛋白,以酿酒酵母为宿主,利用重叠PCR技术,将α-factor基因拼接到hPTH(1-34)ab-HSA基因片段上,获得α-hPTH(1-34)ab-HSA,并插入穿梭表达质粒pYX212,构建了基因工... 为稳定完整表达人甲状旁腺激素(hPTH)(1-34)二联体与人血清白蛋白(HSA)融合蛋白,以酿酒酵母为宿主,利用重叠PCR技术,将α-factor基因拼接到hPTH(1-34)ab-HSA基因片段上,获得α-hPTH(1-34)ab-HSA,并插入穿梭表达质粒pYX212,构建了基因工程菌S.cerevisiae W303-1A/pYX-α-hPTH(1-34)ab-HSA。经Western blot分析及N端氨基酸测序表明,该工程菌表达分泌了具有HSA和hPTH抗原性的完整hPTH(1-34)ab-HSA融合蛋白,解决了毕赤酵母不能稳定完整表达融合蛋白hPTH(1-34)ab-HSA的问题。 展开更多

关键词 hpth(1 34)ab HSA酿酒酵母稳定表达完整表达

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HPTH(1-34)及hPTHrP(1-34)的结构与功能的关系 被引量：3

3

作者 王春晓 刘景晶 《药物生物技术》 CAS CSCD 2003年第6期394-400,共7页

对各种结构研究及检测方法所得hPTH(1-34)及hPTHrP(1-34)的空间结构进行综合整理,探讨其结构与功能的关系及其应用意义。分别以N端,C端,连接区为着眼点,对hPTH(1-34)及hPTHrP(1-34)在溶液中的构象及其晶体结构进行综述,讨论了特定氨基... 对各种结构研究及检测方法所得hPTH(1-34)及hPTHrP(1-34)的空间结构进行综合整理,探讨其结构与功能的关系及其应用意义。分别以N端,C端,连接区为着眼点,对hPTH(1-34)及hPTHrP(1-34)在溶液中的构象及其晶体结构进行综述,讨论了特定氨基酸对该多肽的激动剂活性以及受体结合活性的影响,并对这些影响在该多肽结构改造上的意义进行了展望 hPTH(1-34)及hPTHrP(1-34)是由负责生理活性的N端和负责受体结合的C端以及结构随环境而改变的连接区组成的。对hPTH(1-34)及hPTHrP(1-34)结构知识的深入了解必将对理论研究及临床实践产生重要意义。 展开更多

关键词 人甲状旁腺素 人甲状旁腺素相关蛋白 空间结构 构效关系 柔性

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人甲状旁腺激素N端肽中一个含有B细胞新表位的hPTH^(13-27)片段的研究

4

作者 赵丹慧 张艳 +3 位作者 王娜 袁越 王芊 李成文 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期812-816,共5页

目的研究并证明人甲状旁腺激素(hPTH)N端肽内的hPTH13-27片段是一个新的B细胞抗原表位。方法计算机辅助分析预测hPTH1-37和hPTH1-84多肽片段内hPTH13-27抗原表位的特征;制备大鼠抗hPTH13-27-KLH多克隆抗体;酶联免疫测定(ELISA)研究hPTH1... 目的研究并证明人甲状旁腺激素(hPTH)N端肽内的hPTH13-27片段是一个新的B细胞抗原表位。方法计算机辅助分析预测hPTH1-37和hPTH1-84多肽片段内hPTH13-27抗原表位的特征;制备大鼠抗hPTH13-27-KLH多克隆抗体;酶联免疫测定(ELISA)研究hPTH13-27抗原表位和抗体的免疫特征。结果蛋白质结构分析预测在hPTH13-27区域含有B细胞抗原表位。hPTH13-27单表位多克隆抗体制备成功。ELISA分析证明hPTH13-27片段含有B细胞抗原表位,与抗体的结合效果依次为:抗hPTH13-27抗体>抗hPTH1-84抗体>抗hPTH1-37抗体。hPTH13-27片段与固相板结合对免疫原性影响不大。抗hPTH13-27抗体与含hPTH13-27讲片段的多肽结合良好;与不含hPTH13-27片段的多肽无交叉反应。结论hPTH13-27可能是制备hPTH N端肽抗体的核心表位片段。 展开更多

关键词 蛋白质结构软件分析 hpth^13-27 B细胞抗原表位 抗hpth^13-27抗体 ELISA

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新型水凝胶对糖尿病大鼠慢性感染性皮肤创面修复的疗效

5

作者 李穗鸥 李明翰 +2 位作者 祝兆波 曾辉 白云川 《中华医院感染学杂志》 北大核心 2025年第19期2896-2900,共5页

目的本研究评估搭载hPTH(3-34)(29-34)短肽的明胶甲基丙烯酸酯(GelMA)水凝胶在糖尿病大鼠慢性感染性皮肤创面愈合中的作用。方法将实验大鼠分为对照组、GelMA组和GelMA+hPTH(3-34)(29-34)组,各15只,制备糖尿病大鼠模型并构建慢性感染性... 目的本研究评估搭载hPTH(3-34)(29-34)短肽的明胶甲基丙烯酸酯(GelMA)水凝胶在糖尿病大鼠慢性感染性皮肤创面愈合中的作用。方法将实验大鼠分为对照组、GelMA组和GelMA+hPTH(3-34)(29-34)组,各15只,制备糖尿病大鼠模型并构建慢性感染性皮肤创面,比较各组在创面面积变化、伤口愈合相关指标[I型胶原α1链(COL1A1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血小板内皮细胞黏附分子-1(CD31)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)及环氧合酶-2(Cox2)]表达及成纤维细胞体外迁移能力方面的差异。结果与对照组比较,第7、14天GelMA组大鼠创面面积缩小(P<0.05),第3、7、14天GelMA+hPTH(3-34)(29-34)组大鼠创面面积缩小(P<0.05)。与GelMA组相比,第3、7、14天GelMA+hPTH(3-34)(29-34)组大鼠创面面积缩小(P<0.05)。与对照组比较,建模后第7天,大鼠COL1A1、α-SMA及CD31均上调,且GelMA+hPTH(3-34)(29-34)组>GelMA组(P<0.05),而MMP9及Cox2均下调,且GelMA+hPTH(3-34)(29-34)组<GelMA组(P<0.05)。与对照组相比,建模后第7天大鼠NLRP3、IL-6、TNF-α、IL-1β及Caspase-1相对活性均下降,且GelMA+hPTH(3-34)(29-34)组<GelMA组(P<0.05)。建模后第7天大鼠创面组织来源的成纤维细胞相对划痕距离GelMA+hPTH(3-34)(29-34)组>GelMA组>对照组(P<0.05)。结论搭载hPTH(3-34)(29-34)短肽的GelMA水凝胶能通过抑制NLRP3炎症小体通路活性有效加速伤口愈合过程,提升组织修复和结构重建的效果,提升伤口愈合效率的潜力。 展开更多

关键词 hpth(3-34)(29-34) GelMA水凝胶 慢性感染 伤口愈合 糖尿病 NOD样受体热蛋白结构域蛋白3炎症小体通路

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人甲状旁腺素(1-34)衍生物在大肠杆菌中表达、纯化及其生物学活性 被引量：4

6

作者 狄旭 刘长征 +4 位作者 陈松森 张艳丽 邓艳春 孙兰 杨京 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期227-233,共7页

为研究Gly hPTH(1 34)衍生物的生物学活性 ,用重叠PCR方法合成编码hPTH(1 34)的DNA片段 ,克隆到融合表达载体pGEX 2T的缩短型谷胱甘肽转移酶基因GST6 9△的 3′末端 ,构建正确读码框架的融合基因 .在两个基因间引入蛋白质羟胺切割位点序... 为研究Gly hPTH(1 34)衍生物的生物学活性 ,用重叠PCR方法合成编码hPTH(1 34)的DNA片段 ,克隆到融合表达载体pGEX 2T的缩短型谷胱甘肽转移酶基因GST6 9△的 3′末端 ,构建正确读码框架的融合基因 .在两个基因间引入蛋白质羟胺切割位点序列 ,转入E .coliJM10 9中 ,IPTG诱导表达 .该融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的 2 0 %以上 ,主要以包涵体形式存在 ,盐酸羟胺切割表达产物 .分析表明 ,80 %左右的融合蛋白被裂解为GST6 9△和Gly hPTH(1 34) .经分子筛柱层析和反相层析分离纯化获得重组Gly hPTH(1 34)衍生物 ,纯度达 98%以上 ,回收率约为 10mg/升发酵液 ,分子量为 4 177,等电点 (pI)为 8 4 0 ,N端 16个氨基酸 ,除第一个为甘氨酸外 ,其余与天然hPTH(1 34)序列一致 .Western印迹结果表明 ,Gly hPTH(1 34)衍生物具有hPTH(1 34)的免疫学活性 .体外活性测定结果表明 ,Gly hPTH(1 34)衍生物能刺激人成骨细胞HOSTE85增殖、增加细胞内胶原合成、ALP活性增高和cAMP生成量增加 ,并呈量效关系 ,提示它具有与化学合成的hPTH(1 34)相同的生物学活性 ,N端多一个Gly对其活性无明显影响 . 展开更多

关键词 Gly—hpth(1—34)衍生物 融合表达 羟胺切割 纯化 生物学活性

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人甲状旁腺激素结构与功能研究进展 被引量：6

7

作者 张艳 李成文 赵丹慧 《生物技术通讯》 CAS 2001年第3期W024-W026,共3页

甲状旁腺激素 (PTH)分子由 84个氨基酸残基组成。二级结构中富含α 螺旋 ,该螺旋结构在与受体相互作用中起重要作用。探索PTH分子结构与功能间的关系 ,有助于制药工业的发展 ,为临床治疗提供借鉴。

关键词 人甲状旁腺激素 结构 功能 研究进展 hpth

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甲状旁腺激素PTH 1-34对成骨细胞的机械应答的影响 被引量：1

8

作者 刘云启 张卫群 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第10期1874-1876,共3页

目的:探讨PTH对成骨细胞在机械载荷状态下的功能影响。方法:人成骨样细胞株MG63复苏培养,采用163mOsm低渗液作为刺激源,实验分为三组,A组为单纯用DMEM培养基培养;B组为低渗液对成骨细胞分别作用0.5h、2h、4h和6h;C组为低渗处理同期加入h... 目的:探讨PTH对成骨细胞在机械载荷状态下的功能影响。方法:人成骨样细胞株MG63复苏培养,采用163mOsm低渗液作为刺激源,实验分为三组,A组为单纯用DMEM培养基培养;B组为低渗液对成骨细胞分别作用0.5h、2h、4h和6h;C组为低渗处理同期加入hPTH1-34(20ng/L)。检测细胞内钙离子浓度[Ca2+]i、细胞凋亡指数以及增殖活力的变化。所得结果采用单因素方差分析法。结果:随着培养时间延长,[Ca2+]i升高,以B组升高最为明显,(与A组比较p<0.05),A组和C组比较p>0.05;细胞凋亡指数在B组4h和6h为最高(29.38±0.336;54.87±0.781),明显高于A组和C组,且与两组相比均p<0.05,C组4h凋亡率低于A组(p<0.05),其它时间组统计学比较p>0.05。细胞增殖活力随着培养时间增加逐渐增加,与A组和C组同期相比,B组较低,且p<0.05。结论:过强的低渗牵张作用对细胞有损害作用,[Ca2+]i降低,凋亡率增加且降低增殖活性;PTH通过维持[Ca2+]i浓度,对细胞的功能具有保护作用。 展开更多

关键词 hpth1-34 成骨样细胞 过载荷

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RP-HPLC法测定注射用重组人甲状旁腺素含量

9

作者 程速远 李晶 梁成罡 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1008-1011,共4页

目的：建立RP-HPLC法测定注射用重组人甲状旁腺素的含量。方法：色谱柱为Agilent Zorbax 300SB C18（150 mm×4.6 mm,3.5μm）,流动相为0.2 mol.L-1硫酸盐缓冲液（pH2.3）-乙腈（75∶25）,流速0.8 mL.min-1,检测波长为214 nm,柱温... 目的：建立RP-HPLC法测定注射用重组人甲状旁腺素的含量。方法：色谱柱为Agilent Zorbax 300SB C18（150 mm×4.6 mm,3.5μm）,流动相为0.2 mol.L-1硫酸盐缓冲液（pH2.3）-乙腈（75∶25）,流速0.8 mL.min-1,检测波长为214 nm,柱温为40℃。结果：线性范围：在10~30μg.mL-1浓度范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.9997,n=5）,最低检出限为20 ng,平均回收率为99.8%（n=9）。结论：本方法准确,重复性好,可为注射用重组人甲状旁腺素质量评价提供较为可靠的分析方法。 展开更多

关键词 激素 重组人甲状旁腺素(r-hpth) 反相高效液相色谱法

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人血清甲状旁腺激素的测定及临床应用

10

作者 杨惠滨 马玉林 白风兰 《黑龙江医药》 CAS 1989年第5期5-6,共2页

人血清甲状旁腺激素(hpTH)的测定对临床某些疾病的诊断具有重要意义。本文重点介绍了hpTH的测定方法及其临床应用。应用西德MEDGENIX的hpTH放免药盒,共做56例次,其结果19例慢性肾功衰竭者PTH100％升高;26例次继发性甲状旁腺功能减退者PT... 人血清甲状旁腺激素(hpTH)的测定对临床某些疾病的诊断具有重要意义。本文重点介绍了hpTH的测定方法及其临床应用。应用西德MEDGENIX的hpTH放免药盒,共做56例次,其结果19例慢性肾功衰竭者PTH100％升高;26例次继发性甲状旁腺功能减退者PTH明显降低;4例次特发性甲状旁腺功能减退者PTH降低;还为3例肾结石、4例疑甲状旁腺功能减退者做了鉴别诊断。 展开更多

关键词 hpth甲状旁腺机能亢进 甲状旁腺功能减退

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人血浆完整甲状旁腺激素双位免疫放射分析法及其临床应用

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作者 徐志惠 季冠芳 《天津医学院学报》 1990年第1期24-26,共3页

关键词 hpth1-84 IRMA 血浆 夹心法

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放射学引导的甲状旁腺切除术是对腺瘤性和增殖性腺体同样有效的

12

作者 金忱 《国外医学（外科学分册）》 2004年第3期182-182,共1页

关键词 放射学 甲状旁腺切除术 腺瘤性 增殖性腺体 甲状旁腺机能亢进症 hpth

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人甲状旁腺激素多肽抗体制备及纯化方法研究 被引量：2

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作者 赵丹慧 王娜 +2 位作者 张艳 袁越 李成文 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期168-169,共2页

关键词 人甲状旁腺激素 抗体制备 纯化方法 hpth1-84 多肽 活性片段 免疫活性 基因工程表达 免疫亲和层析 生命活动

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