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hMTERF3与C-met在胃癌中的表达及临床意义 被引量：3
1
作者 李戈 李中福 +2 位作者 王灿 韩继明 马莎英 《肿瘤药学》 CAS 2018年第5期701-704,723,共5页
目的探讨人线粒体转录终止因子(hMTERF3)与C-met在胃癌组织中的表达变化及其临床意义。方法采用SP免疫组化方法检测hMTERF3与C-met在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达;RT-PCR法检测hMTERF3与C-met mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western bl... 目的探讨人线粒体转录终止因子(hMTERF3)与C-met在胃癌组织中的表达变化及其临床意义。方法采用SP免疫组化方法检测hMTERF3与C-met在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达;RT-PCR法检测hMTERF3与C-met mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测蛋白表达。结果胃癌组织和正常胃黏膜组织中均可检测到hMTERF3和C-met的表达,hMTERF3阳性率分别为89.66%和27.59%,C-met阳性率分别为81.61%和17.24%,差异均有统计学意义(P<0.01)。hMTERF3和C-met在胃癌组织中的蛋白及mRNA表达量明显高于正常胃黏膜组织,差异均有统计学意义(P<0.01)。胃癌组织中hMTERF3和C-met蛋白表达呈正相关(r=0.419,P<0.05)。hMTERF3和C-met蛋白阴性表达的患者5年内生存率显著高于阳性表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌组织中hMTERF3和C-met的表达均明显上调,并表现出协同效应。生存分析显示两种蛋白的阳性表达与胃癌患者的预后不良相关。 展开更多
关键词 胃癌 hmterf3 C-MET 预后
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肺腺癌组织DCLK1、GPD2、hMTERF3表达与临床病理特征及预后的关系 被引量：2
2
作者 张煜 吕兰 +2 位作者 王伟 孙耀华 张力为 《现代生物医学进展》 CAS 2024年第8期1490-1494,共5页
目的:探讨肺腺癌组织双皮质素样激酶1(DCLK1)、甘油-3-磷酸脱氢酶2(GPD2)、人线粒体转录终止因子3(hMTERF3)表达与临床病理特征及预后的关系。方法:选择2017年6月至2020年6月新疆医科大学第一附属医院胸外科收治的125例肺腺癌患者,取手... 目的:探讨肺腺癌组织双皮质素样激酶1(DCLK1)、甘油-3-磷酸脱氢酶2(GPD2)、人线粒体转录终止因子3(hMTERF3)表达与临床病理特征及预后的关系。方法:选择2017年6月至2020年6月新疆医科大学第一附属医院胸外科收治的125例肺腺癌患者,取手术切除的癌组织以及癌旁组织(距离癌组织5 cm以上)。采用免疫组化法检测癌组织以及癌旁组织的DCLK1、GPD2、hMTERF3表达。分析DCLK1、GPD2、hMTERF3表达与肺腺癌患者临床病理特征的关系。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线分析不同DCLK1、GPD2、hMTERF3表达肺腺癌患者3年总生存率(OS)、无进展生存率(PFS)。结果:癌组织DCLK1、GPD2、h MTERF3阳性表达率均高于癌旁组织(P<0.05)。低分化,TNM分期ⅢA期,淋巴结转移肺腺癌组织DCLK1、GPD2、hMTERF3阳性表达率高于中高分化、TNM分期Ⅰ、Ⅱ期、无淋巴结转移肺腺癌组织(P<0.05)。DCLK1、GPD2、hMTERF3阳性表达肺腺癌患者3年OS率、3年PFS率低于DCLK1、GPD2、hMTERF3阴性表达肺腺癌患者(P<0.05)。结论:肺腺癌组织中DCLK1、GPD2、h MTERF3阳性表达率升高,且与肺腺癌恶性病理特征和短期不良预后有关。 展开更多
关键词 肺腺癌 DCLK1 GPD2 hmterf3 临床病理特征 预后
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肝癌细胞hMTERF3基因启动子表达载体的构建及其受DNA甲基化的影响 被引量：4
3
作者 熊伟 孙美涛 +4 位作者 梅雯 自加吉 杨勇琴 左绍远 张晓娟 《生命科学研究》 CAS CSCD 2017年第4期289-294,共6页
为了筛选人线粒体转录终止因子3(human mitochondrial transcription termination factor 3,h MTERF3)基因各段启动子的活性,探讨肝癌细胞Hep G2和BEL-7402中h MTERF3基因启动子活性受DNA甲基化的影响,首先利用PCR技术扩增h MTERF3基因... 为了筛选人线粒体转录终止因子3(human mitochondrial transcription termination factor 3,h MTERF3)基因各段启动子的活性,探讨肝癌细胞Hep G2和BEL-7402中h MTERF3基因启动子活性受DNA甲基化的影响,首先利用PCR技术扩增h MTERF3基因启动子区,克隆至荧光素酶基因报告载体中,构建p GL6-h MTERF3重组质粒;随后运用荧光素酶检测法检测肝癌细胞中各段h MTERF3启动子对荧光素酶报告基因的启动活性,并采用DNA甲基化酶SssⅠ处理肝癌细胞,观察各报告基因的启动子活性变化。结果显示,成功构建了7个携带h MTERF3基因启动子的重组荧光素酶报告基因载体,重组子经NheⅠ和BglⅡ双酶切及PCR鉴定正确。双荧光素酶报告基因检测法显示,与p GL6相比,含有P523的3个启动子区段P523、P866、P932有强启动子活性,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。此外,与对照组比较,SssⅠ甲基化酶处理的P523、P866和P932启动子活性显著降低(P<0.05)。以上研究提示,h MTERF3启动子活性受DNA甲基化的影响,其中P523可能是h MTERF3启动子核心,为进一步研究肝癌细胞中h MTERF3基因表达的表观遗传学机制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 肝癌细胞 线粒体转录终止因子3基因(hmterf3) 启动子 载体构建 甲基化
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hMTERF3基因启动子区的生物信息学分析 被引量：4
4
作者 孙美涛 王昀 +4 位作者 李月 张晓娟 杨勇琴 杨泽芳 熊伟 《大理大学学报》 CAS 2017年第2期40-45,共6页
目的:探讨人线粒体转录终止因子3基因启动子区的序列特征、转录因子及其结合位点。方法:利用Promoter 2.0、NNPP、Proscan、First EF软件分别预测hMTERF3基因5端上游的启动子数目及分布;利用CpG Island Searcher和CpG Plot软件预测CpG... 目的:探讨人线粒体转录终止因子3基因启动子区的序列特征、转录因子及其结合位点。方法:利用Promoter 2.0、NNPP、Proscan、First EF软件分别预测hMTERF3基因5端上游的启动子数目及分布;利用CpG Island Searcher和CpG Plot软件预测CpG岛位置;利用P-match 1.0程序搜索TRANSFAC数据库预测与hMTERF3基因启动子结合的转录因子及其结合位点。结果:hMTERF3基因定位于8q21.2,基因全长22 216 bp,含有11个外显子和10个内含子。hMTERF3基因上游至5'侧翼共3 000 bp的核苷酸序列至少存在2个启动子区,其中1 733~2 302 bp之间可能为包含TATA盒的核心启动子区。启动子区序列中存在1个长为1 145 bp的CpG岛。hMTERF3基因启动子区存在1 055个转录因子结合位点,进化足迹法分析其保守的核心启动子区转录因子结合位点共19个。结论:hMTERF3基因启动子区的生物信息学分析能够提高基因启动子的研究效率,为后续实验构建hMTERF3基因启动子表达载体及鉴定启动子功能提供理论依据。 展开更多
关键词 hmterf3 生物信息学 启动子区 转录因子 CPG岛
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hMTERF3基因慢病毒载体的构建及在宫颈癌HeLa细胞中的表达 被引量：2
5
作者 熊伟 孙美涛 +3 位作者 王昀 杨勇琴 张海洋 张晓娟 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期444-449,425,共7页
[目的]研究显示人线粒体转录终止因子3(human mitochondrial transcription termination factor 3,h MTERF3)基因表达异常在肿瘤发生发展中具有重要意义。该研究旨在构建h MTERF3基因慢病毒表达载体,建立稳定过表达h MTERF3基因的人宫颈... [目的]研究显示人线粒体转录终止因子3(human mitochondrial transcription termination factor 3,h MTERF3)基因表达异常在肿瘤发生发展中具有重要意义。该研究旨在构建h MTERF3基因慢病毒表达载体,建立稳定过表达h MTERF3基因的人宫颈癌He La细胞株。[方法]采用RT-PCR技术从HEK293细胞中克隆出h MTERF3基因c DNA开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,使目的基因连接入载体质粒中,构建成重组慢病毒载体质粒。对重组慢病毒载体质粒进行PCR鉴定、酶切鉴定和DNA测序鉴定后,制备包装病毒病感染人宫颈癌He La细胞株,通过药物筛选及维持稳定过表达h MTERF3基因的He La细胞株。倒置荧光显微镜下观察转染后各组细胞中绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的表达情况,RT-q PCR检测转染后各组细胞中h MTERF3基因的表达水平。[结果]成功构建了含有h MTERF3基因c DNA ORF序列的载体质粒p Lenti6.3-h MTERF3-IRES2-EGFP,DNA测序结果完全正确,经慢病毒包装后所得病毒上清液的滴度为1.1×109TU/m L。稳转He La细胞株在荧光显微镜下可见GFP表达,RTq PCR实验证实稳定转染重组慢病毒后He La细胞中h MTERF3 mRNA水平比未转染细胞极显著增高(P<0.01)。[结论]成功构建了适用于h MTERF3基因研究的慢病毒表达系统,构建了稳定过表达h MTERF3基因的宫颈癌He La细胞株,从而为研究宫颈癌的基因诊治提供了一定的实验依据。 展开更多
关键词 人线粒体转录终止因子3 慢病毒 宫颈癌 过表达
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