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hIL-1Ra基因的克隆及在原核细胞中的表达
被引量：
1
1
作者
唱韶红
吴军
巩新
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期484-487,共4页
目的 :克隆hIL 1Ra基因并在大肠杆菌中高效表达。方法 :从人外周血中分离白细胞并提取其总RNA。用RT PCR获得hIL 1RacDNA ,克隆入pBV2 2 0表达载体进行诱导表达。对表达产物进行复性和纯化。结果 :成功地构建了pBV2 2 0 IL 1Ra表达载...
目的 :克隆hIL 1Ra基因并在大肠杆菌中高效表达。方法 :从人外周血中分离白细胞并提取其总RNA。用RT PCR获得hIL 1RacDNA ,克隆入pBV2 2 0表达载体进行诱导表达。对表达产物进行复性和纯化。结果 :成功地构建了pBV2 2 0 IL 1Ra表达载体 ,并在大肠杆菌中获得高效表达 ,表达量占全菌的 4 0 %。对表达产物进行分离纯化及活性分析表明 ,获得纯度大于98%的样品。该样品具有明显抑制IL 1刺激EL 4细胞分泌IL 2的作用。结论 :在大肠杆菌中成功地表达有活性的hIL 1Ra基因 ,为进一步的开发利用奠定了实验基础。
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关键词
hil-1ra
克隆
大肠杆菌
原文传递
hIL-1Ra基因体内转染兔颞下颌关节骨关节病模型的免疫组化研究
2
作者
王栋
田卫东
+1 位作者
李声伟
刘磊
《广东牙病防治》
2008年第2期60-62,共3页
目的研究人白介素-1受体拮抗剂(hIL-1Ra)基因转染兔颞下颌关节骨关节病(TMJOA)动物模型后,颞下颌关节腔内hIL-1Ra蛋白的表达和定位。方法18只新西兰白兔随机分为3组,每只兔右侧颞下颌关节腔注射Ⅱ型胶原酶诱发骨关节病。4周后第一组和...
目的研究人白介素-1受体拮抗剂(hIL-1Ra)基因转染兔颞下颌关节骨关节病(TMJOA)动物模型后,颞下颌关节腔内hIL-1Ra蛋白的表达和定位。方法18只新西兰白兔随机分为3组,每只兔右侧颞下颌关节腔注射Ⅱ型胶原酶诱发骨关节病。4周后第一组和第二组动物连续3次每隔24h向右侧颞下颌关节腔内注射生理盐水,第一组生理盐水中含100μL阳离子脂质体介导的200μgpcDNA3.1-hIL-1Ra基因的质粒;第二组生理盐水中含100μL阳离子脂质体介导的200μgpcDNA3.1的质粒;第三组不作处理。最后一次注射后4周处死动物,切取右侧颞下颌关节的关节盘、滑膜、髁状突,用免疫组化方法行hIL-1Ra蛋白表达和定位的观察。结果免疫组化研究发现第一组颞下颌关节的关节软骨、软骨下骨和滑膜细胞的胞浆内有棕色颗粒,表明存在hIL-1Ra蛋白。第二组和第三组未查见该蛋白。结论外源性hIL-1Ra基因能够在兔髁状突软骨和滑膜细胞甚至软骨下骨内正确翻译,表达的蛋白产物可与抗hIL-1Ra的抗体发生特异性结合,具有免疫活性。
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关键词
颞下颌关节骨关节病
人白介素-
1
受体拮抗剂
免疫组织化学
暂未订购
人白细胞介素1受体拮抗剂cDNA克隆及其表达影响因素
被引量：
1
3
作者
张学述
《微生物学免疫学进展》
1999年第2期25-27,共3页
采用ＰＣＲ技术成功地从人胎盘ｃＤＮＡ文库中扩增出人白细胞介素１受体拮抗剂（ｈＩＬ１ｒａ）成熟蛋白编码区基因，并以此为模板突变其ｃＤＮＡ５；其克隆产物经物理图谱证实与文献报道完全一致，利用含不同ＳＤ的同一表达质粒分...
采用ＰＣＲ技术成功地从人胎盘ｃＤＮＡ文库中扩增出人白细胞介素１受体拮抗剂（ｈＩＬ１ｒａ）成熟蛋白编码区基因，并以此为模板突变其ｃＤＮＡ５；其克隆产物经物理图谱证实与文献报道完全一致，利用含不同ＳＤ的同一表达质粒分别表达含不同５的ｃＤＮＡ，结合文献分析其表达影响因素，同时对ｈＩＬ１ｒａＥ．ｃｏｌｉ表达产物的可能存在形式进行了推论。
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关键词
基因克隆
表达
白细胞介素
1
受体拮抗剂
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职称材料
题名
hIL-1Ra基因的克隆及在原核细胞中的表达
被引量：
1
1
作者
唱韶红
吴军
巩新
机构
军事医学科学院生物工程研究所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期484-487,共4页
文摘
目的 :克隆hIL 1Ra基因并在大肠杆菌中高效表达。方法 :从人外周血中分离白细胞并提取其总RNA。用RT PCR获得hIL 1RacDNA ,克隆入pBV2 2 0表达载体进行诱导表达。对表达产物进行复性和纯化。结果 :成功地构建了pBV2 2 0 IL 1Ra表达载体 ,并在大肠杆菌中获得高效表达 ,表达量占全菌的 4 0 %。对表达产物进行分离纯化及活性分析表明 ,获得纯度大于98%的样品。该样品具有明显抑制IL 1刺激EL 4细胞分泌IL 2的作用。结论 :在大肠杆菌中成功地表达有活性的hIL 1Ra基因 ,为进一步的开发利用奠定了实验基础。
关键词
hil-1ra
克隆
大肠杆菌
Keywords
IL-
1
ra
cloning
E.coli
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
hIL-1Ra基因体内转染兔颞下颌关节骨关节病模型的免疫组化研究
2
作者
王栋
田卫东
李声伟
刘磊
机构
东莞市人民医院
四川大学华西口腔医院
出处
《广东牙病防治》
2008年第2期60-62,共3页
基金
广东省卫生厅医学科研基金立项课题(A2007718)
文摘
目的研究人白介素-1受体拮抗剂(hIL-1Ra)基因转染兔颞下颌关节骨关节病(TMJOA)动物模型后,颞下颌关节腔内hIL-1Ra蛋白的表达和定位。方法18只新西兰白兔随机分为3组,每只兔右侧颞下颌关节腔注射Ⅱ型胶原酶诱发骨关节病。4周后第一组和第二组动物连续3次每隔24h向右侧颞下颌关节腔内注射生理盐水,第一组生理盐水中含100μL阳离子脂质体介导的200μgpcDNA3.1-hIL-1Ra基因的质粒;第二组生理盐水中含100μL阳离子脂质体介导的200μgpcDNA3.1的质粒;第三组不作处理。最后一次注射后4周处死动物,切取右侧颞下颌关节的关节盘、滑膜、髁状突,用免疫组化方法行hIL-1Ra蛋白表达和定位的观察。结果免疫组化研究发现第一组颞下颌关节的关节软骨、软骨下骨和滑膜细胞的胞浆内有棕色颗粒,表明存在hIL-1Ra蛋白。第二组和第三组未查见该蛋白。结论外源性hIL-1Ra基因能够在兔髁状突软骨和滑膜细胞甚至软骨下骨内正确翻译,表达的蛋白产物可与抗hIL-1Ra的抗体发生特异性结合,具有免疫活性。
关键词
颞下颌关节骨关节病
人白介素-
1
受体拮抗剂
免疫组织化学
Keywords
Temporomandibular joints osteoarthritis
hil-1ra
Immunohistochemistry
分类号
R782.6 [医药卫生—口腔医学]
暂未订购
题名
人白细胞介素1受体拮抗剂cDNA克隆及其表达影响因素
被引量：
1
3
作者
张学述
机构
卫生部成都生物制品制品研究所
出处
《微生物学免疫学进展》
1999年第2期25-27,共3页
文摘
采用ＰＣＲ技术成功地从人胎盘ｃＤＮＡ文库中扩增出人白细胞介素１受体拮抗剂（ｈＩＬ１ｒａ）成熟蛋白编码区基因，并以此为模板突变其ｃＤＮＡ５；其克隆产物经物理图谱证实与文献报道完全一致，利用含不同ＳＤ的同一表达质粒分别表达含不同５的ｃＤＮＡ，结合文献分析其表达影响因素，同时对ｈＩＬ１ｒａＥ．ｃｏｌｉ表达产物的可能存在形式进行了推论。
关键词
基因克隆
表达
白细胞介素
1
受体拮抗剂
Keywords
hIL
1
ra
Gene cloning Expression E.Coli
分类号
R979.5 [医药卫生—药品]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
hIL-1Ra基因的克隆及在原核细胞中的表达
唱韶红
吴军
巩新
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
原文传递
2
hIL-1Ra基因体内转染兔颞下颌关节骨关节病模型的免疫组化研究
王栋
田卫东
李声伟
刘磊
《广东牙病防治》
2008
0
暂未订购
3
人白细胞介素1受体拮抗剂cDNA克隆及其表达影响因素
张学述
《微生物学免疫学进展》
1999
1
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引证文献
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