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变形链球菌耐氟菌株gtfB基因失活菌株的构建 被引量：1
1
作者 李文月 高爽 +6 位作者 张志鹰 张红 超博 武玉凤 李贺 王春萌 张志民 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2018年第5期490-494,共5页
目的:构建变形链球菌(S.mutans)耐氟菌株UA159-FR中gtfB基因失活株,为研究耐氟菌株gtfB基因的功能奠定基础。方法:培养UA159-FR并以其为模板扩增gtfB基因上游、下游同源臂片段,以质粒pEGFP-N1为模板扩增kan基因;通过重叠延伸聚合酶链反... 目的:构建变形链球菌(S.mutans)耐氟菌株UA159-FR中gtfB基因失活株,为研究耐氟菌株gtfB基因的功能奠定基础。方法:培养UA159-FR并以其为模板扩增gtfB基因上游、下游同源臂片段,以质粒pEGFP-N1为模板扩增kan基因;通过重叠延伸聚合酶链反应法(overlap extension polymerase chain reaction,OE-PCR)获取上述3个片段的同源重组片段;与pEASY-Blunt Cloning Vector连接形成重组质粒后,进行PCR鉴定和测序鉴定;将重组片段电转化入UA159-FR感受态细胞中得到gtfB基因失活菌株,并进行PCR鉴定。结果:经PCR鉴定和测序鉴定,含有gtfB基因重组片段的重组质粒构建成功;经PCR鉴定,UA159-FR的gtfB基因失活株构建成功。结论:成功构建了含有gtfB基因重组片段的重组质粒和S.mutans耐氟菌株UA159-FR的gtfB基因失活株,可用于gtfB基因功能的研究。 展开更多
关键词 变形链球菌耐氟菌株 gtfb基因 重叠延伸聚合酶链反应 同源重组 基因失活
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高致龋变形链球菌探针检测与龋病现状的关系
2
作者 吴文 耿海霞 《广东牙病防治》 2009年第9期419-421,共3页
目的探讨唾液中gtfB基因片段检出率与龋病的关系,为寡核苷酸探针作为一种筛检方法用于临床奠定基础。方法以龋失补牙数(decayed missing of filled teeth,DMFT)记录439名不同龋敏感者口腔龋患现状,将其唾液样本中的菌体DNA抽提后行PCR扩... 目的探讨唾液中gtfB基因片段检出率与龋病的关系,为寡核苷酸探针作为一种筛检方法用于临床奠定基础。方法以龋失补牙数(decayed missing of filled teeth,DMFT)记录439名不同龋敏感者口腔龋患现状,将其唾液样本中的菌体DNA抽提后行PCR扩增,其产物与gtfB探针行斑点杂交,记录阳性结果。使用SPSS 11.0统计软件计算DMFT和PCR扩增后探针杂交阳性结果之间的spearman等级相关系数。结果DMFT和PCR扩增后探针杂交阳性结果之间有密切相关性,r=0.914,P<0.01。结论变形链球菌毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针敏感性高而且特异性好,且PCR扩增后探针杂交阳性结果与受试个体龋病现状密切相关,可以进一步考察该探针检测结果与受试人群未来患龋风险的相关性。 展开更多
关键词 变形链球菌 寡核苷酸探针 独立因子gtfb 龋齿
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变形链球菌葡萄糖基转移酶基因部分DNA克隆 被引量：2
3
作者 储冰峰 赵皿 +2 位作者 宋江洪 费振翔 王玉兰 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 1995年第2期71-73,共3页
根据变链菌ｇｔｆＢ基因序列设计一对引物，采用ＰＣＲ方法扩增其中的５３１ｂｐ的ＤＮＡ片段，纯化后通过质粒载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（－）转化大肠杆菌ＸＬ１Ｂｌｕｅ构建ｇｔｆＢ基因部分ＤＮＡ克隆，为变链菌基因检测做准备。
关键词 变形链球菌 葡萄糖基转移酶基因 部分DNA克隆
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维吾尔族不同龋敏感儿童变异链球菌临床分离株gftB、gftC基因遗传多态性研究
4
作者 连冰洁 刘媛 +1 位作者 张洋洋 赵今 《现代口腔医学杂志》 CAS 2018年第5期261-264,共4页
目的比较维吾尔族高龋和无龋儿童变异链球菌临床分离株葡萄糖基转移酶编码基因gtfB、gtfC基因遗传多态性与其合成水不溶性葡聚糖的关系。方法选取课题组前期实验所得的维吾尔族儿童合成水不溶性葡聚糖(WIG)能力较强的变异链球菌临床株1... 目的比较维吾尔族高龋和无龋儿童变异链球菌临床分离株葡萄糖基转移酶编码基因gtfB、gtfC基因遗传多态性与其合成水不溶性葡聚糖的关系。方法选取课题组前期实验所得的维吾尔族儿童合成水不溶性葡聚糖(WIG)能力较强的变异链球菌临床株18株和合成能力较弱临床株12株,提取全菌DNA,经PCR扩增gtfB、gtfC后,利用限制性内切酶BsrⅠ、SsPⅠ进行限制性片段长度多态性分析。结果 gtfB、gtfC经BsrⅠ和SsPⅠ酶切后分别表现出三种和两种基因型,gtfB在WIG合成量较高和较低的菌株中分布不同(P<0.05)。结论维吾尔族不同龋敏感儿童变异链球菌临床分离株gtfB基因的遗传多态性可能是其合成水不溶性葡聚糖能力出现差异的因素之一。 展开更多
关键词 维吾尔族儿童 变异链球菌 gffB、gff基因 基因型 水不溶性葡聚糖
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L-精氨酸对变异链球菌及戈登链球菌的体外影响研究
5
作者 张雯 黄芯怡 +3 位作者 耿笑溪 李梦雅 罗骏佼 许庆安 《中国实用口腔科杂志》 2025年第1期60-66,共7页
目的研究L-精氨酸对变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)、戈登链球菌(Streptococcus gordonii,S.gordonii)的体外影响。方法研究于2022年6月至2023年11月在江汉大学医学部公共实验平台进行。根据单独或混合培养将细菌分为S.mut... 目的研究L-精氨酸对变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)、戈登链球菌(Streptococcus gordonii,S.gordonii)的体外影响。方法研究于2022年6月至2023年11月在江汉大学医学部公共实验平台进行。根据单独或混合培养将细菌分为S.mutans组、S.gordonii组和S.mutans&S.gordonii组。检测经不同质量分数(2.00%、1.00%、0.10%)L-精氨酸处理后,S.mutans组、S.gordonii组细菌培养24、48、96 h后在波长620 nm处光密度(OD620)值,S.mutans&S.gordonii组细菌和S.mutans相关基因(gtfB、SMU.150、nlmD)的相对表达量,并与相同培养时间的空白对照(不进行L-精氨酸处理)比较;扫描电子显微镜下观察不同质量分数(2.00%、1.00%、0.10%)L-精氨酸对S.mutans组、S.gordonii组及S.mutans&S.gordonii组菌斑生物膜形成过程及已形成的菌斑生物膜的影响。结果S.mutans组和S.gordonii组中,经2.00%、1.00%L-精氨酸处理的菌液培养24 h后OD620值均较相同培养时间空白对照菌液明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);而经0.10%L-精氨酸处理的菌液培养24、48、96 h后OD620值与相同培养时间空白对照菌液比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。S.mutans&S.gordonii组中,经2.00%和1.00%L-精氨酸处理的菌液培养24 h后,S.mutans和S.gordonii的相对表达量明显降低,经0.10%L-精氨酸处理24 h后S.mutans相对表达量明显降低、S.gordonii相对表达量明显增加,各质量分数L-精氨酸处理24 h后gtfB、nlmD和SMU.150的相对表达量明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。扫描电子显微镜示,经2.00%、1.00%L-精氨酸处理的菌液培养24 h后S.mutans组、S.gordonii组及S.mutans&S.gordonii组菌斑生物膜变得疏松;而经0.10%L-精氨酸处理的S.gordonii组及S.mutans&S.gordonii组菌斑生物膜无明显变化,但可抑制S.mutans组菌斑生物膜的生长。结论2.00%、1.00%L-精氨酸对S.mutans和S.gordonii均具有抑制作用;0.10%L-精氨酸可抑制S.mutans菌斑生物膜生长,且可增加S.gordonii在混合菌斑生物膜中的占比。L-精氨酸可帮助构建健康口腔菌斑微生态,为预防龋病提供新方向。 展开更多
关键词 L-精氨酸 变异链球菌 戈登链球菌 gtfb基因 SMU.150基因 nlmD基因
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高致龋变形链球菌寡脱氧核苷酸探针的设计及有效性检测
6
作者 吴文 耿海霞 郭青玉 《临床口腔医学杂志》 2010年第5期263-266,共4页
目的:设计变形链球菌ATCC25175毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针,并进行敏感性和特异性检测。方法:采用斑点杂交法,将体外合成的变形链球菌毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针与经PCR扩增的S.M及7种口腔常见细菌DNA进行杂交检测,然后,使用该探... 目的:设计变形链球菌ATCC25175毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针,并进行敏感性和特异性检测。方法:采用斑点杂交法,将体外合成的变形链球菌毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针与经PCR扩增的S.M及7种口腔常见细菌DNA进行杂交检测,然后,使用该探针测试来源于髙龋和无龋个体的唾液样本。结果:探针检测同源性序列敏感性达到1ng水平;与7株口腔常见菌种的杂交结果不存在菌株间的交叉反应,具有较高的特异性。结论:变形链球菌毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针敏感性高而且特异性好,化学性质稳定。同时,观察临床唾液样本测试结果发现,其阳性率与个体龋患现状基本一致。可以进一步考察该探针检测结果与临床病例龋患风险的一致性,为今后用于大规模流行病学调查中龋高危人群的筛查奠定基础。 展开更多
关键词 变形链球菌 毒力因子gtfb 探针
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