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The impacts of PVC microplastics on physiology and transcriptomic responses of pearl oyster Pinctada fucata martensii
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作者 Robert MKUYE Luomin HUANG +7 位作者 Chuangye YANG Xiuyan YANG Fortunatus MASANJA Salifu IBRAHIM Fenglan LU Shaojie ZHU Hailing WU Yuewen DENG 《Journal of Oceanology and Limnology》 2025年第2期589-613,共25页
Microplastics(MPs),particularly polyvinyl chloride microplastics(PVC MPs)have become a notable environmental pollutant that affect various marine organisms such as Pinctada fucata martensii.As filter feeders,these biv... Microplastics(MPs),particularly polyvinyl chloride microplastics(PVC MPs)have become a notable environmental pollutant that affect various marine organisms such as Pinctada fucata martensii.As filter feeders,these bivalves consume significant volumes of water containing MPs,leading to contact with and ingestion of MPs.Moreover,given the ecological and economic importance of P.f.martensii in artificial pearl production,investigating the effects of PVC MPs exposure is crucial.This study aimed to investigate the effects of PVC MPs exposure on nucleus retention,pearl formation,oxidative stress by examining superoxide dismutase(SOD)activity,catalase(CAT)activity,lipid peroxidation(LPO),and total antioxidant capacity(TAOC)of P.f.martensii,while also exploring transcriptomic changes at different concentrations and exposure time points,including a recovery period.The pearl oysters were exposed to PVC MPs at concentrations of 1-,2.5-,and 5-mg PVC MPs/L for 10 d followed by 6 d of recovery.After 1-,4-,10-d of exposure,and additional 6 d of recovery,samples were taken and analyzed.Findings revealed that only prolonged exposure(10 d)to PVC MPs affected SOD activity,while CAT activity,LPO,and TAOC remained unaffected throughout the experiment.Notably,SOD activity was restored during the 6-d recovery phase.Transcriptome analysis highlighted significant gene alterations linked to various pathways,affecting cellular processes,environmental information processing,genetic information processing,metabolism,and organismal systems,with an increase in pathway-related genes during recovery,implying a potential role of PVC MPs as gene inhibitors.This study provided insights into the effects of PVC MPs on P.f.martensii,shedding light on pearl retention,oxidative systems,and molecular pathways influenced by PVC MPs.Additionally,it contributed novel information on potential MPs exposure biomarkers,particularly relevant to marine organisms like P.f.martensii. 展开更多
关键词 microplastic(MP) Pinctada fucata martensii oxidative stress TRANSCRIPTOME
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Identification of Shell Color-Associated Genes Using Mantle Branch-Specific RNA Sequencing of Yellow-Colored Line of Pearl Oyster Pinctada fucata martensii
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作者 PENG Haiming LIAO Yongshan +3 位作者 YANG Chuangye MKUYE Robert DENG Yuewen YUE Chenyang 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2024年第4期1076-1086,共11页
The yellow-colored line of pearl oyster Pinctada fucata martensii displays a yellow prismatic layer and a white nacreous layer that can be used as an ideal model for research on shell color formation.Micro-Raman spect... The yellow-colored line of pearl oyster Pinctada fucata martensii displays a yellow prismatic layer and a white nacreous layer that can be used as an ideal model for research on shell color formation.Micro-Raman spectroscopy and transcriptome analyses were performed to explore the potential molecular mechanism underlying the phenotype differentiation.The micro-Raman spectroscopy results indicate that the prismatic layer exhibits distinct characteristic peaks of carotenoids,while these peaks are not prominent in the nacreous layer.In the transcriptome comparison of the central zone of mantle and mantle edge tissue,which function in nacreous and prismatic layer formation,respectively,935 significantly differentially expressed genes(DEGs)were identified,with 385 genes upregulated and 227 genes downregulated(|log_(2)(Fold change)|>1 and false discovery rate<0.05)in the mantle edge tissue.Among these genes,some were associated with melanoma/melanogenesis,such as tyrosinase,zinc metalloprotease,glutathione S-transferase,and ATP-binding cassette sub-family;some were associated with the carotenoid-related pathway,including scavenger receptors,cytochrome P450 and lipoprotein receptor.Genes associated with porphyrin metabolism,including porphobilinogen deaminase,and copper/zinc superoxide dismutase,and genes associated with shell matrix protein,including amorphous calcium carbonate binding protein,shematrin,PIF,and collagen,also exhibited significantly different expressions.It is speculated that the different colours between prismatic layer and nacreous layer in the yellow-colored line of P.f.martensii might be resulted from melanin,carotenoids and porphyrin metabolism,while genes related to shell structure and biomineralization might also affect coloration.Our results provide new insights to understand the mechanism of shell color formation in mollusca. 展开更多
关键词 Pinctada fucata martensii shell coloration TRANSCRIPTOME
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马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)Pm-HSP70基因的克隆及其对温度胁迫的响应 被引量:3
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作者 刘雅 王庆恒 +3 位作者 郑哲 焦钰 李利二 杜晓东 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期990-998,共9页
本实验利用RACE技术克隆获得了马氏珠母贝HSP70 (Pm-HSP70)基因,并对其基因和氨基酸序列结构特征进行了生物信息学分析,同时采用荧光定量PCR技术分析了该基因在不同组织的表达模式及不同温度下的时序表达模式。序列分析表明,Pm-HSP70 c... 本实验利用RACE技术克隆获得了马氏珠母贝HSP70 (Pm-HSP70)基因,并对其基因和氨基酸序列结构特征进行了生物信息学分析,同时采用荧光定量PCR技术分析了该基因在不同组织的表达模式及不同温度下的时序表达模式。序列分析表明,Pm-HSP70 cDNA序列全长为2 215 bp,其中开放式阅读框1 899 bp,5'UTR 107 bp,3'UTR 209 bp,编码632个氨基酸,理论蛋白分子量为69.44 kD,理论等电点为5.61。该蛋白具有HSP70家族典型的结构域HSP70,以及ATP结合位点、细胞质特征性保守序列和3个HSP70家族标签。多序列比对结果表明Pm-HSP70与菲律宾蛤仔HSP70同源性最高,为80%;系统进化分析发现,Pm-HSP70与菲律宾蛤仔等贝类HSP70聚为一支。组织表达定量分析结果显示,Pm-HSP70在马氏珠母贝多个组织中均有表达,在肝胰腺中表达量最高,其次是性腺;对不同温度下鳃组织中Pm-HSP70的时序表达分析发现,在处理后各时间点高温组(32℃)基因表达水平最高,且均显著高于对照组(22℃)和低温组(17℃)。以上结果表明Pm-HSP70可能参与马氏珠母贝的高温胁迫响应。该研究为进一步探索Pm-HSP70在马氏珠母贝温度适应性中的作用提供了基础资料。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 温度适应 Pm-HSP70 基因克隆 表达分析
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马氏珠母贝(Pinctada fucata)组织蛋白酶L基因的克隆与表达分析 被引量:2
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作者 王忠良 简纪常 +4 位作者 鲁义善 丁燏 王蓓 陈刚 吴灶和 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1604-1611,共8页
根据已构建的溶藻弧菌(Vibro alginolyticus)诱导的马氏珠母贝(Pinctada fucata)血淋巴cDNA差减文库得到的ESTs序列,应用cDNA末端快速扩增(RACE)技术成功克隆了其组织蛋白酶L基因(PFCatL),并对其进行了生物信息学分析;应用实时荧光定量P... 根据已构建的溶藻弧菌(Vibro alginolyticus)诱导的马氏珠母贝(Pinctada fucata)血淋巴cDNA差减文库得到的ESTs序列,应用cDNA末端快速扩增(RACE)技术成功克隆了其组织蛋白酶L基因(PFCatL),并对其进行了生物信息学分析;应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术,研究了PFCatL基因在溶藻弧菌刺激前后马氏珠母贝足、外套膜、鳃、闭壳肌等8个组织中的表达变化。结果表明,PFCatL基因cDNA全长2004bp,其中5′非编码区(5′-UTR)50bp,3′非编码区(3′-UTR)865bp,开放阅读框(ORF)1089bp,编码362个氨基酸,其分子量计算值(MW)为40.52kDa,理论等电点(IP)为5.20;生物信息学分析表明,PFCatL含有16个氨基酸残基组成的信号肽序列以及组织蛋白酶前体抑制功能域I29;Clustalw2多重比对发现PFCatL氨基酸序列在催化三联体Cys-His-Asn、底物结合位点以及二硫键形成相关的半胱氨酸残基位点高度保守;Real-time PCR研究发现,PFCatL在马氏珠母贝各组织中均有表达,但各组织间的表达量存在差异,其中以肾和闭壳肌中的表达量最高;溶藻弧菌感染4h后,外套膜、鳃以及血淋巴中PFCatL基因的表达较感染前显著上调。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 组织蛋白酶L CDNA末端快速扩增 实时荧光定量PCR
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Pf-Dmrt4,a potential factor in sexual development in the pearl oyster Pinctada fucata 被引量:4
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作者 WANG Qi SHI Yu HE Maoxian 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2018年第6期2337-2350,共14页
The mechanisms of sex determination and sex differentiation in the pearl oyster P inctada fucata are currently poorly understood. We therefore investigated the roles of orthologs of the D mrt gene family, key players ... The mechanisms of sex determination and sex differentiation in the pearl oyster P inctada fucata are currently poorly understood. We therefore investigated the roles of orthologs of the D mrt gene family, key players in male gonad differentiation in mammals, in P. fucata sex diff erentiation and sexual development. Pf-Dmrt4 exhibits features typical of the D mrt family, and displays significant homologies to the DMRT4 cluster. Pf-Dmrt4 mRNA expression in the gonads during a gametogenic cycle, measured by quantitative polymerase chain reaction, was maximal in mature individuals. P f-Dmrt4 expression, demonstrated by in situ hybridization, was localized in the spermatozoa, spermatids, oocytes and vitellogenic oocytes. Knockdown of Pf-Dmrt4 with double-stranded RNA resulted in decreased mRNA expression levels. And Pf-Dmrt4-dsRNA-injected groups showed spawning-stage male gonads, with ruptured follicles and released spermatozoa. Our results enhance the understanding of sex determination and differentiation in P. fucata and suggest that Pf-Dmrt4 could be involved in male gonadal development, and maintenance of male gonadal function. 展开更多
关键词 PINCTADA fucata Pf-Dmrt4 GENE EXPRESSION sexual development
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马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)Pm-CTSL基因的克隆及表达分析
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作者 刘雅 王庆恒 +2 位作者 郑哲 焦钰 杜晓东 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期25-31,共7页
组织蛋白酶L (cathepsin L, CTSL)是无脊椎动物体内非特异性免疫的重要组成部分。为了研究马氏珠母贝CTSL (Pm-CTSL)的功能,本实验利用RACE技术克隆获得了Pm-CTSL基因,并对其结构和组织表达模式进行了分析。结果表明,Pm-CTSL基因c DNA... 组织蛋白酶L (cathepsin L, CTSL)是无脊椎动物体内非特异性免疫的重要组成部分。为了研究马氏珠母贝CTSL (Pm-CTSL)的功能,本实验利用RACE技术克隆获得了Pm-CTSL基因,并对其结构和组织表达模式进行了分析。结果表明,Pm-CTSL基因c DNA序列全长为1 237 bp,其中开放式阅读框957 bp,5'UTR69 bp,3'UTR 211 bp,共编码氨基酸318个。结构域分析发现Pm-CTSL具有CTSL两个典型的结构域Inhibitor_I29和Pept_C1。Pm-CTSL也具有信号肽、保守序列ERFNVN和GNFD、两个潜在的N-糖基化位点和催化活性位点三联体残基(Cys, His和Asn)。多序列比对结果表明Pm-CTSL与太平洋牡蛎的同源性最高,为42%;系统进化分析发现,Pm-CTSL与虾夷扇贝等贝类聚为一支。实时荧光定量分析发现,Pm-CTSL在肝胰腺中显著高表达(p<0.05),表明Pm-CTSL可能参与马氏珠母贝的免疫应答。本研究为进一步探讨CTSL在马氏珠母贝非特异性免疫应答中的作用提供了基础资料。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 Pm-CTSL 基因克隆 表达分析
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不同饲料对马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)消化酶、免疫和生长相关基因表达的影响
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作者 廖永山 杨创业 +3 位作者 王庆恒 孙瑞椒 邓岳文 杜晓东 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期5251-5257,共7页
本研究分析了不同人工饲料(S1,S2和S3)对马氏珠母贝(Pinctadafucatamartensii)消化酶、免疫和生长相关基因表达的影响。共设置了6个实验组(EG1,EG2,EG3,EG4,EG5,EG6)和1个对照组(CG)。实验组EG1、EG2、EG3分别只投喂饲料S1、S2和S3,EG4... 本研究分析了不同人工饲料(S1,S2和S3)对马氏珠母贝(Pinctadafucatamartensii)消化酶、免疫和生长相关基因表达的影响。共设置了6个实验组(EG1,EG2,EG3,EG4,EG5,EG6)和1个对照组(CG)。实验组EG1、EG2、EG3分别只投喂饲料S1、S2和S3,EG4投喂饲料S1+亚心形扁藻(Platymonassubcordiformis),EG5投喂饲料S2+亚心形扁藻,EG6投喂饲料S3+亚心形扁藻。对照组CG仅投喂亚心形扁藻。养殖60d,结果显示:(1)EG5、EG6和CG的蛋白酶活力显著的高于其他组(p<0.05);EG6和CG淀粉酶活性显著高于其他组(p<0.05)。(2)EG5、EG6和CG的FGF18、TβRI和GHITMmRNA的表达水平显著高于其他组(p<0.05)。(3)EG1的免疫酶(ALP,SOD,CAT和POD)活性最低,MDA含量最高;EG1、EG2和EG3中SODmRNA的表达水平显著低于EG5,EG6和CG(p<0.05);EG1、EG2和EG3GPxmRNA的表达水平显著低于EG5、EG6和CG(p<0.05);EG1、EG2和EG3CATmRNA的相对表达水平显著低于EG6和CG(p<0.05)。因此,饲料S2和S3与微藻混合投喂可以促进马氏珠母贝的消化吸收以及抗应激的能力,从而获得较好的生长性能和保持最佳的免疫机能。 展开更多
关键词 人工饲料 消化酶 免疫 生长相关基因 马氏珠母贝
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马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)Pm-SCD基因的克隆及其对温度胁迫的响应
8
作者 刘雅 王庆恒 +3 位作者 郑哲 焦钰 李利二 杜晓东 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期5234-5241,共8页
硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearoyl-CoA desaturase,SCD)是合成单不饱和脂肪酸的限速酶。本实验利用RACE技术克隆获得了马氏珠母贝SCD(Pm-SCD)基因,并对其基因和氨基酸序列结构特征进行了生物信息学分析,同时采用荧光定量PCR技术分析了该基... 硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearoyl-CoA desaturase,SCD)是合成单不饱和脂肪酸的限速酶。本实验利用RACE技术克隆获得了马氏珠母贝SCD(Pm-SCD)基因,并对其基因和氨基酸序列结构特征进行了生物信息学分析,同时采用荧光定量PCR技术分析了该基因在不同组织的表达模式及在鳃中不同温度下的时序表达模式。序列分析表明,Pm-SCDcDNA序列全长为1588bp,其中开放式阅读框948bp,5'UTR200bp,3'UTR440bp,编码315个氨基酸,理论蛋白分子量为36.52kD,理论等电点为9.63。SMART软件分析显示Pm-SCD蛋白具有SCD典型的脂肪酸去饱和酶结构域FA_desaturase,以及3个组氨酸簇和3个跨膜区。多序列比对结果表明Pm-SCD与太平洋牡蛎SCD同源性最高,为68%;系统进化分析发现,Pm-SCD与太平洋牡蛎等软体动物聚为一支。组织表达定量分析结果显示,Pm-SCD在马氏珠母贝多个组织中均有表达,在性腺中表达量最高;对不同温度下鳃组织中Pm-SCD的时序表达分析发现,在处理后各时间点低温组(17℃)基因表达水平最高,且均显著高于对照组(22℃)、高温组(32℃)。以上结果表明Pm-SCD可能参与马氏珠母贝的低温胁迫响应。该研究为进一步探索Pm-SCD在马氏珠母贝在温度适应性中的作用提供了基础资料。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 温度适应 Pm-SCD 基因克隆 表达分析
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Troponin T from the Japanese Pearl Oyster <i>Pinctada fucata</i>: Molecular Cloning, Tissue Distribution, Gene Structure, and Interaction Analysis with Tropomyosin
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作者 Daisuke Funabara Yoshinori Urakawa +1 位作者 Daisuke Ishikawa Satoshi Kanoh 《American Journal of Molecular Biology》 2020年第1期61-73,共13页
Troponin (Tn) is composed of three subunits (TnI, TnC and TnT) that bind Ca2+ and regulate striated muscle contraction in vertebrates. TnT’s function has been extensively described in vertebrates, but its role has be... Troponin (Tn) is composed of three subunits (TnI, TnC and TnT) that bind Ca2+ and regulate striated muscle contraction in vertebrates. TnT’s function has been extensively described in vertebrates, but its role has been obscure in molluscan muscles. Our previous work indicated that the TnC and TnI subunits work in adductor phasic muscle, but not in catch muscle. Here, we have characterized TnT from the Japanese bivalve pearl oyster Pinctada fucata to start to explain the function of Tn in molluscan muscle contraction. We determined the primary structure of the full-length TnT protein from the P. fucata adductor muscle (Pifuc-TnT), and found that it is composed of 316 amino acid residues with a predicted molecular mass of 37.4 kDa. Multiple sequence alignment showed that Pifuc-TnT has an extension of >60 residues at the C-terminus that are not present in vertebrate TnTs, including known TnTs from other mollusks. Pifuc-TnT gene structure predictions using Splign alignment of the cDNA generated in this study and genome sequences indicated that Pifuc-TnT consists of 13 exons. Start and stop codons are located in exons 2 and 12, respectively. Quantitative real-time PCR revealed that the Pifuc-TnT gene was predominantly expressed in adductor phasic muscle, weakly in adductor catch muscle, slightly in gill, and not at all in mantle and foot. These findings suggest that TnT plays a regulatory role in adductor phasic muscle contraction, but not in catch contraction. Isothermal titration calorimetry revealed that unlike vertebrate TnTs, Pifuc-TnT does not interact with P. fucata tropomyosin-1 nor with tropomyosin-2. These findings in P. fucata imply that Tn functions differently in molluscan muscle than it does in vertebrates. 展开更多
关键词 ADDUCTOR Muscle Catch Contraction PINCTADA fucata TROPONIN T TROPOMYOSIN
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Molecular Cloning and Tissue Distribution of Troponin I from the Japanese Pearl Oyster, <i>Pinctada fucata</i>
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作者 Daisuke Funabara Yoshinori Urakawa Satoshi Kanoh 《American Journal of Molecular Biology》 2019年第2期29-40,共12页
Troponin is a complex of three proteins (troponin I, troponin C, and troponin T) that binds Ca2+ and is a thin filament-associated regulator of vertebrate striated muscle contraction. The function of troponin I (TnI) ... Troponin is a complex of three proteins (troponin I, troponin C, and troponin T) that binds Ca2+ and is a thin filament-associated regulator of vertebrate striated muscle contraction. The function of troponin I (TnI) in vertebrates has been extensively characterized, but its role in molluscan muscles has not yet been elucidated. Our previous work suggested that the troponin C subunit has a role in adductor phasic muscle but not in catch muscle. Here, we investigated the molecular characteristics of TnI from the bivalve Japanese pearl oyster, Pinctada fucata to aid the elucidation of the function of molluscan muscle troponin. We determined the primary structure of the full-length TnI protein from the P. fucata adductor muscle (Pifuc-TnI) and found that it is composed of 286 amino acid residues with a predicted molecular weight of 33,737. Motif structure predictions and multiple sequence alignments revealed that Pifuc-TnI has a 138 residue extension at its N-terminus compared with rabbit TnI. This is analogous to characterized TnIs from other mollusks. However, unlike scallop TnI, Pifuc-TnI is predicted to contain two cAMP-dependent protein kinase phosphorylation sites, at residues 39 - 45 (RRGTEDD) and 145 - 151 (KKKSKRK). Phylogenetic analysis indicated that Pifuc-TnI and molluscan TnIs were grouped into the same clade. Pifuc-TnI gene structure predictions using Splign alignment of our obtained cDNA and genome sequences indicated that Pifuc-TnI consists of fifteen exons, with the start and stop codons located in exon 2 and exon 11, respectively. Using quantitative real-time PCR, we determined that the Pifuc-TnI gene is predominantly expressed in adductor phasic muscle, weakly in adductor catch muscle, and is not expressed in the gill, mantle or foot. These findings suggest that TnI, as a component of the troponin complex, plays a regulatory role in adductor phasic muscle contraction, but not in catch contraction. 展开更多
关键词 ADDUCTOR Muscle CATCH Contraction PINCTADA fucata TROPONIN TROPONIN I
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The role of Smad6 in immunity of the pearl oyster Pinctada fucata martensii
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作者 Yu SHI Xiaolan PAN +3 位作者 Meng XU Huiru LIU Hanzhi XU Maoxian HE 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2022年第3期1135-1147,共13页
Inhibitory Smads(I-Smads),which belong to the Smad family and inhibit bone morphogenic protein 2(BMP2)signaling by a variety of mechanisms,can suppress innate immunity responses in vertebrates.However,there are no rep... Inhibitory Smads(I-Smads),which belong to the Smad family and inhibit bone morphogenic protein 2(BMP2)signaling by a variety of mechanisms,can suppress innate immunity responses in vertebrates.However,there are no reports for the role of Smad6 in immunity in mollusks.In this study,we showed that Smad6 of the pearl oyster Pinctada fucata martensii was located in the Smad6 cluster of the phylogenetic tree;mRNA expression of Smad6 and Smad3 was up-regulated after lipopolysaccharide and polyinosinic:polycytidylic challenge;and transcript levels of Smad6 and Smad3 showed opposite patterns during wound healing.Under salinity stress,water inflow and outflow in the gills appear to be regulated by BMP2-Smads signals,and BMP2-Smads signaling may be closely related to the immune response.Our results indicate that Smad6 is involved in immunity,that it plays a positive role in the response to immune challenge and an inhibitory role during wound healing,and that Smad6 and Smad3 may work against each other. 展开更多
关键词 SMAD6 BMP2-Smads signal pathway expression IMMUNITY Pinctada fucata martensii
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Transcriptomic Analysis and Comparison of the Gene Expression Profiles in Fast- and Slow-Growing Pearl Oysters Pinctada fucata martensii
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作者 XU Hanzhi LIU Huiru +1 位作者 ZHANG Hua HE Maoxian 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2022年第1期186-194,共9页
The pearl oyster Pinctada fucata martensii is an economically valuable shellfish that is cultured for seawater pearl pro-duction,which mainly depends on oyster growth.However,the growth mechanisms of the pearl oyster ... The pearl oyster Pinctada fucata martensii is an economically valuable shellfish that is cultured for seawater pearl pro-duction,which mainly depends on oyster growth.However,the growth mechanisms of the pearl oyster are still poorly understood.In this study,oysters were grouped with relative growth rate,including fast-growing(FG)group and slow-growing(SG)group.Oxford Nanopore Technologies(ONT)long-read sequencing was applied to investigate the molecular mechanisms involved in the growth of this species.Five alternative splicing(AS)types were analyzed in both FG and SG groups,which include alternative 3’splice site,alternative 5’splice site,exon skipping,intron retention,and mutually exclusive exon.Transcriptome analysis showed that four of five different AS events(excluding mutually exclusive exons)occurred more frequently in FG than in SG oysters,and the five main AS types exhibited different characteristics.The AS events that were detected may be involved in growth,and the difference in ex-pression of AS events between FG and SG oysters may be involved in the mechanism underlying the difference in growth.Fifty dif-ferentially expressed genes(DEGs)were identified between the FG and SG oysters.The results showed that 40 genes were signifi-cantly up-regulated in FG oysters,while 10 genes were significantly down-regulated in SG oyster.Several genes related to nutrient metabolism,shell formation,and immunity were more highly expressed in FG oysters than in SG oysters.In summary,FG oysters exhibited higher metabolic and biomineralization activities and had a more powerful immune system than SG oysters.These results provide insight into the growth of P.f.martensii that can be used to improve breeding programs. 展开更多
关键词 Pinctada fucata martensii differential growth Oxford Nanopore Technologies sequencing differentially expressed genes
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马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)近交家系与其杂交子代DNA甲基化差异分析 被引量:4
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作者 杨晶淼 蔡炜裕 +4 位作者 罗少杰 王庆恒 焦钰 黄荣莲 邓岳文 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1926-1932,共7页
2012年4月,利用马氏珠母贝全同胞家系进行家系内与家系间交配组合构建了近交家系(A与D)与杂交家系(B与C)。贝龄2龄时,比较家系生长性状差异,利用甲基化敏感多态性扩增技术(MSAP)检测了4个家系甲基化水平的差异,估计了甲基化比例... 2012年4月,利用马氏珠母贝全同胞家系进行家系内与家系间交配组合构建了近交家系(A与D)与杂交家系(B与C)。贝龄2龄时,比较家系生长性状差异,利用甲基化敏感多态性扩增技术(MSAP)检测了4个家系甲基化水平的差异,估计了甲基化比例与生长性状平均值相关性系数。结果表明,家系杂交子代的平均壳长、平均壳高、平均壳宽与平均体重均值大于近交家系,性状优势率为8.5%~24.7%;近交家系与杂交家系的总条带数和甲基化比例均存在显著性差异(p〈0.05)。近交家系A和D获得的总条带数分别729.0±19.6与717.3±28.2,甲基化水平分别为(10.0±0.9)%与(8.5±0.4)%;杂交家系B和C获得的总条带数分别为703.0±10.7与726.3±18.8,甲基化比例分别为(5.9±0.7)%与(5.7±0.9)%;家系的平均壳长、平均壳高、平均壳宽与平均体重性状与甲基化均存在明显负相关,相关系数分别为-0.849、-0.751、-0.674和-0.652。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 杂交 甲基化 MSAP
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马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)FBP基因的克隆及其对温度胁迫的响应 被引量:4
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作者 赖卓欣 刘雅 +2 位作者 王庆恒 郑哲 邓岳文 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2019年第2期106-114,共9页
果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)是催化糖异生过程中的限速酶,当动植物处于温度胁迫等不良环境条件时,FBP通过参与糖异生途径以维持机体的糖平衡,在动植物抗逆过程中起着重要作用。本研究通过RACE技术获得了马氏珠母贝(Pinctada fucata martensi... 果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)是催化糖异生过程中的限速酶,当动植物处于温度胁迫等不良环境条件时,FBP通过参与糖异生途径以维持机体的糖平衡,在动植物抗逆过程中起着重要作用。本研究通过RACE技术获得了马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii) FBP(Pm-FBP)基因c DNA全长,并使用实时荧光定量PCR技术检测了该基因在马氏珠母贝不同组织中的表达量,以及在17℃(低温组)、22℃(对照组)、32℃(高温组)条件下鳃中的时序表达模式。序列分析显示,Pm-FBP全长为1381 bp,具有54 bp的5¢UTR和62 bp的3¢UTR,开放阅读框(ORF)为1020 bp,编码339个氨基酸,预测分子量为37.13 kDa,等电点为6.02。Pm-FBP具有一个Pfam FBPase保守结构域,6个潜在的O-连接糖基化位点(Ser36、Ser56、Ser57、Ser76、Ser80和Thr115),1个潜在的N-糖基化位点,1个金属结合位点(Asp-Pro-Ile/Leu-Asp-Gly/Ser-Thr/Ser)和46个磷酸化位点。多序列比对结果显示,Pm-FBP与长牡蛎(Crassostrea gigas)FBP的相似性最高,为83%;系统进化树显示,Pm-FBP与长牡蛎等贝类聚为一支,然后再与其他软体动物聚为一大支,节肢动物和脊椎动物分别聚类,进化树总体聚为三大支。实时荧光定量结果显示,Pm-FBP在所检测的闭壳肌、鳃、性腺、肝胰腺、足和外套膜等组织中均有表达,在性腺表达量最高,肝胰腺和鳃中有较高表达;对Pm-FBP时序表达的分析发现,Pm-FBP在低温组和高温组实验时间范围内均出现先上升后下降的趋势,且在72 h时达到最大值,表明Pm-FBP参与了马氏珠母贝对温度胁迫的响应;在120h时,高温组和低温组的Pm-FBP表达量均显著下降,表明Pm-FBP可能主要在短期的温度胁迫中发挥作用。本研究结果为进一步探索马氏珠母贝对温度胁迫的适应性提供了参考资料。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 果糖-1 6-二磷酸酶基因 温度胁迫 表达分析 基因克隆
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马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)细胞粘附分子3(Pm-CAM3)基因的克隆与表达分析 被引量:1
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作者 曹艳飞 曾森林 +4 位作者 焦钰 郝瑞娟 郑哲 王庆恒 杜晓东 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期32-39,共8页
细胞粘附分子3 (cell adhesion molecule 3, CAM3)是免疫球蛋白家族(immunoglobulin family, IgSF)的一员,在细胞黏连、外源病原体的识别等方面具有重要作用。本实验利用末端快速克隆(RACE)技术,克隆获得马氏珠母贝(Pinctada facata mar... 细胞粘附分子3 (cell adhesion molecule 3, CAM3)是免疫球蛋白家族(immunoglobulin family, IgSF)的一员,在细胞黏连、外源病原体的识别等方面具有重要作用。本实验利用末端快速克隆(RACE)技术,克隆获得马氏珠母贝(Pinctada facata martensii)细胞粘附分子3的全长序列(Pm-CAM3),并使用荧光定量PCR(Real-time PCR, q RT-PCR)技术检测了Pm-CAM3在马氏珠母贝不同组织中的表达模式。结果显示,Pm-CAM3基因全长2 245 bp。其中5'UTR 335 bp,3'UTR 166 bp,开放阅读框(ORF)长度为1 744 bp,共编码581个氨基酸;预测其相对分子量为63.21 kD,等电点为5.07,脂溶指数(aliphatic index)为67.21;总平均亲水性(grand averageofhydropathy, GRAVY)为-0.549,属于亲水性蛋白;Pm-CAM3具有跨膜结构域,其胞外区域具有一个Ig SF家族典型的Ig结构域以及一个Ig-like结构域。多序列比对结果显示,Pm-CAM3在物种间的保守性较低,其中Pm-CAM3与太平洋牡蛎的CAM3 (Crassostrea gigas, Cg-CAM3)的氨基酸序列相似性最高,但仅为37%。qRT-PCR分析表明Pm-CAM3在马氏珠母贝的9个组织中均有表达,其中在鳃中的表达量最高(p<0.05)。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 Pm-CAM3基因 基因克隆 表达分析
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马氏珠母贝(Pinctada fucata)血细胞RNA-Seq转录组数据中补体样组分分析 被引量:4
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作者 吴勇 张野 +2 位作者 许尤厚 梁雪茹 王忠良 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1343-1353,共11页
补体系统在体液免疫中发挥着重要作用,是连接先天免疫和适应性免疫的枢纽。本研究基于前期转录组RNA-Seq数据检索马氏珠母贝(Pinctada fucata)补体样组分,并对其结构域及溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)刺激后的基因表达水平进行了分析... 补体系统在体液免疫中发挥着重要作用,是连接先天免疫和适应性免疫的枢纽。本研究基于前期转录组RNA-Seq数据检索马氏珠母贝(Pinctada fucata)补体样组分,并对其结构域及溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)刺激后的基因表达水平进行了分析。结果表明,共获得68条补体样成分unigene,分别编码14个含C1q结构域蛋白、14个凝集素蛋白、4个纤维蛋白原相关蛋白、12个丝氨酸蛋白酶、10个含硫酯键蛋白、1个末端补体分子C6、5个补体受体、1个补体因子及7个纤胶凝蛋白;结构域分析表明,马氏珠母贝补体样组分均含有相应的保守结构域,与其他贝类补体组分的研究结果基本一致;表达量分析表明,经溶藻弧菌刺激后,68条补体样组分unigene中共有21条unigene表达上调,其中12条为模式识别受体unigene。结合牡蛎等贝类补体组分的研究结果,推测贝类已形成一个含有多种补体组分的原始补体系统,且可能以凝集素途径或替代途径行使补体的生物学功能。以上研究结果为深入了解马氏珠母贝及其他海洋无脊椎动物免疫防御机制、探讨补体系统的进化起源提供了新的依据。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 RNA-SEQ 补体样组分 保守结构域
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基于马氏珠母贝(Pinctada fucata)血细胞全长转录组数据补体样组分的鉴定与分析 被引量:1
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作者 王菁 李桂英 +3 位作者 林楷琪 欧静 张淑瓶 王忠良 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期176-186,共11页
补体系统作为先天免疫的重要组成部分,是一种复杂的限制性蛋白水解系统,其在免疫系统中发挥着重要的防御作用。为分析马氏珠母贝补体系统的组成及作用机制,使用血细胞样品进行了全长转录组测序建库、基因比对、功能注释,共挖掘到212个... 补体系统作为先天免疫的重要组成部分,是一种复杂的限制性蛋白水解系统,其在免疫系统中发挥着重要的防御作用。为分析马氏珠母贝补体系统的组成及作用机制,使用血细胞样品进行了全长转录组测序建库、基因比对、功能注释,共挖掘到212个潜在补体样组分相关基因。补体样组分基因经同源性比对和结构域检测分析表明,检索到的基因分别编码89个含C1q结构域蛋白、57个C型凝集素蛋白、33个纤维胶凝蛋白、11个纤维蛋白原相关蛋白、8个甘露糖结合型凝集素关联丝氨酸蛋白酶、2个含硫酯蛋白(1个C3分子,1个TEP分子)、1个补体受体、2个补体因子、9个丝氨酸蛋白酶。随机选择12个补体相关基因,使用溶藻弧菌刺激前后的血细胞样品进行实时定量PCR检测其表达水平,结果显示C1q(C1q domain containing protein)、C-lectin、MBL(mannose-binding lectin)、ficolin、MASP(mannan-binding lectin serine protease)等基因均呈现出显著差异表达,表明马氏珠母贝补体系统是一个复杂的多组分效应系统,且可能通过凝集素途径或类似于凝集素途径激活补体系统的免疫作用。研究结果为进一步验证马氏珠母贝中存在的原始补体系统提供了分子生物学证据,同时对深入了解马氏珠母贝免疫防御机制,丰富和发展海洋无脊椎动物免疫学内容也具有重要理论意义。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 全长转录组 补体组分 生物信息学分析 实时定量PCR
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马氏珠母贝(Pinctada fucata)血细胞全长转录组测序与分析 被引量:1
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作者 王菁 李桂英 +3 位作者 陈志炜 郭焕娣 龚晓晴 王忠良 《安徽农业科学》 CAS 2022年第6期86-90,共5页
[目的]开发马氏珠母贝(Pinctada fucata)基因组资源,挖掘功能基因。[方法]以马氏珠母贝血细胞为试材,利用单分子实时技术(single-molecule real time,SMRT)进行全长转录组测序,并对所获得unigenes进行功能注释和基因结构分析。[结果]共... [目的]开发马氏珠母贝(Pinctada fucata)基因组资源,挖掘功能基因。[方法]以马氏珠母贝血细胞为试材,利用单分子实时技术(single-molecule real time,SMRT)进行全长转录组测序,并对所获得unigenes进行功能注释和基因结构分析。[结果]共获得277064条全长非嵌合序列和82381个基因。经过比对nr、SwissProt、KEGG和KOG数据库进行注释和功能分类后,共得到59621个注释基因。同时,在8493条基因中共发现11219个SSR位点,其中以二核苷酸重复基元类型最高(50.9%)。生物信息学分析鉴定得到20013个lncRNA、2004个转录因子、10522个可变剪切分析位点。[结论]使用SMRT技术能够深入挖掘马氏珠母贝全长转录组数据,为进一步探讨马氏珠母贝功能基因的挖掘、免疫响应及遗传机制的研究提供可靠的基因组资源。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 全长转录组 SSR标记 可变剪切
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马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)PmGIFLP基因的分子特征与表达分析
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作者 范闪闪 李绮晴 +3 位作者 郑哲 郝瑞娟 杜晓东 焦钰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期3313-3321,共9页
胃内因子(gastric intrinsic factor,GIF)是一种转运蛋白,在介导维生素B12(VB12)维持机体正常造血功能、神经系统功能和免疫调节功能等方面发挥重要作用。为探究胃内因子样蛋白(gastric intrinsic factorlike protein,GIFLP)在马... 胃内因子(gastric intrinsic factor,GIF)是一种转运蛋白,在介导维生素B12(VB12)维持机体正常造血功能、神经系统功能和免疫调节功能等方面发挥重要作用。为探究胃内因子样蛋白(gastric intrinsic factorlike protein,GIFLP)在马氏珠母贝免疫调节中的作用,本研究运用RACE技术获得马氏珠母贝胃内因子样蛋白基因(Pm GIFLP)的c DNA序列全长,并检测Pm GIFLP在各个组织的表达模式。结果表明:Pm GIFLP序列全长1 721 bp,其中5'UTR为78 bp,3'UTR为116 bp,开放阅读框(ORF)为1 527 bp,编码508个氨基酸。预测其分子量(MW)为56 644.84 Da,理论等电点(p I)为7.13。SMART软件分析显示Pm GIFLP氨基酸序列具有2个典型的钴胺素结合结构域。多序列比对发现Pm GIFLP与其它物种的同源性较低。q RT-PCR结果表明Pm-GIFLP基因在肝胰腺中显著高表达,其次是外套膜边缘区、性腺和足。综上所述,Pm GIFLP可能参与马氏珠母贝的免疫调节作用,可为进一步探究Pm GIFLP在马氏珠母贝中免疫防御中的作用积累基础资料。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 胃内因子样蛋白 分子特征 表达分析
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马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)PmTYRL-1基因的分子特征与表达分析
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作者 范闪闪 郑哲 +2 位作者 焦钰 黄荣莲 杜晓东 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期5226-5233,共8页
酪氨酸酶(Tyrosinase)是Ⅲ-型铜蛋白超家族的一员,在色素沉着、伤口愈合、先天免疫和角质层形成等过程发挥重要作用。为了探究酪氨酸酶样蛋白1基因在马氏珠母贝贝壳形成中的作用,本研究运用RACE技术获得马氏珠母贝酪氨酸酶样蛋白1基因(P... 酪氨酸酶(Tyrosinase)是Ⅲ-型铜蛋白超家族的一员,在色素沉着、伤口愈合、先天免疫和角质层形成等过程发挥重要作用。为了探究酪氨酸酶样蛋白1基因在马氏珠母贝贝壳形成中的作用,本研究运用RACE技术获得马氏珠母贝酪氨酸酶样蛋白1基因(PmTYRL-1)的cDNA序列全长,并检测PmTYRL-1在各个组织的表达模式。结果表明:PmTYRL-1序列全长2406bp,其中5'UTR为169bp,3'UTR为116bp,开放阅读框(ORF)为2121bp,编码706个氨基酸。预测其分子量(MW)为81112.60Da,理论等电点(PI)为8.67。SMART软件分析PmTYRL-1氨基酸序列具有典型的酪氨酸酶结构域。多序列比对发现PmTYRL-1与其它物种的同源性较低。qPCR结果表明,PmTYRL-1在边缘区显著高表达,其次是套膜区和肝胰腺。综上所述,PmTYRL-1可能参与马氏珠母贝的贝壳形成,可为进一步探究PmTYRL-1在马氏珠母贝生物矿化中的作用提供理论基础。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 酪氨酸酶样蛋白1 分子特征 表达分析
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