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接种大豆根瘤菌(Sinorhizobium fredii)遗传工程菌株LMG101对大豆的增产效应 被引量:19
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作者 戴小密 刘彦杰 +7 位作者 叶小梅 朱万宝 许玲 朱家壁 常志州 黄红英 马艳 俞冠翘 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期66-70,共5页
笔者曾报道带外源肺炎克氏杆菌 (Klebsiellapneumoniae)nifA的大豆根瘤菌 (Sinorhizobium fredii)工程菌株LMG10 1在实验室条件下具有较高的结瘤固氮效率 ,用其接种大豆幼苗可以提高大豆生物量。本项工作通过 3年的田间小区试验 ,对工程... 笔者曾报道带外源肺炎克氏杆菌 (Klebsiellapneumoniae)nifA的大豆根瘤菌 (Sinorhizobium fredii)工程菌株LMG10 1在实验室条件下具有较高的结瘤固氮效率 ,用其接种大豆幼苗可以提高大豆生物量。本项工作通过 3年的田间小区试验 ,对工程菌S .frediiLMG10 1的田间施用效果进行了研究。试验表明 ,接种工程菌S .frediiLMG10 1能有效地提高大豆的结瘤固氮效率和大豆产量。接种工程菌S .frediiLMG10 1的大豆植株固氮酶活力分别比对照和接种出发菌植株高 3.1倍和 2 .1倍 ,与之相应工程菌占瘤率也较高 ,大豆田间产量分别比对照和接种出发菌提高 10 %和 5 %以上 ,统计差异显著 (P <0 .0 5 )。 展开更多
关键词 大豆根瘤菌 遗传工程菌株 增产效应 大豆 NIFA基因 占瘤率 固氮酶活力 共生固氮
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快生型大豆根瘤菌(Rhizobium fredii)内源质粒在培养及共生过程中的稳定性 被引量:3
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作者 陈雯莉 李阜棣 周俊初 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1997年第1期55-62,共8页
以湖北洪湖公离的快生型大豆根瘤菌为材料,考察了它们的内源质粒在培养过程及共生过程中的稳定性.结果表明,所有供试菌株的质粒在培养条件下比较稳定,传代50次后没有明显变异.对其中2个菌株与4种不同的大豆宿主共生过程中质粒的稳... 以湖北洪湖公离的快生型大豆根瘤菌为材料,考察了它们的内源质粒在培养过程及共生过程中的稳定性.结果表明,所有供试菌株的质粒在培养条件下比较稳定,传代50次后没有明显变异.对其中2个菌株与4种不同的大豆宿主共生过程中质粒的稳定性研究,发现HA12-1-12的共生质粒和隐性质粒高度构定,HA7-2-2的质粒却发生了不同程度的变异.质粒检测的结果及RFLP分析表明,HA7-2-2共生质粒的稳定性高于隐性质粒,而且共生质粒上携带的nodDABC和nifHDK基因相当保守,不易受宿主的影响而产生变异.盆栽试验的结果也说明,虽然HA7-2-2的内源质粒在共生过程中发生了遗传重排,但它的共生性状没有明显的变异. 展开更多
关键词 快生型 大豆根瘤菌 内源质粒 稳定性 共生 培养
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Sinorhizobium fredii WGF03胞外多糖分泌相关基因exoD功能初探 被引量:3
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作者 马婷婷 张健 +4 位作者 粟月萍 宋张杨 唐咸来 申佩弘 武波 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期47-54,共8页
从费氏中华根瘤菌WGF03的基因组中克隆出与胞外多糖分泌密切相关的基因exoD,研究该基因对胞外多糖合成、菌株共生结瘤能力和固氮效率的影响。利用自杀性质粒pK18mobsacB,通过同源双交换法构建exoD基因的缺失突变体ΔexoD。实验发现:与... 从费氏中华根瘤菌WGF03的基因组中克隆出与胞外多糖分泌密切相关的基因exoD,研究该基因对胞外多糖合成、菌株共生结瘤能力和固氮效率的影响。利用自杀性质粒pK18mobsacB,通过同源双交换法构建exoD基因的缺失突变体ΔexoD。实验发现:与野生菌株相比,突变株在YMA培养基平板上胞外多糖产量明显减少、运动能力也有所减弱;在NaCl浓度小于350 mmol/L范围内,菌体均能维持稳定生长;接种于大豆幼苗后,产生的根瘤数量较多,但个体小、形状不一,且固氮酶活也显著下降。研究结果说明exoD基因参与S.fredii WGF03胞外多糖的合成并影响菌株共生结瘤能力和固氮效率。 展开更多
关键词 费氏中华根瘤菌WGF03 胞外多糖 exoD 突变 植株实验
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快生型大豆根瘤菌(Rhizobium fredii)15067与褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)10006的16S rDNA分析 被引量:1
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作者 李海英 刘金玲 +3 位作者 张喜波 康妮 于海鹏 李鹏 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2008年第6期769-773,共5页
分别对快生型大豆根瘤菌(Rhizobium fredii)15067和褐球固氮菌(Azotobacter chroococ-cum)10006两个菌株进行了16S rDNA的全序列测定,将此全序列与已知相关的16S rDNA进行了比较及聚类分析,得到系统发育树状图。在系统发育树中,根瘤菌15... 分别对快生型大豆根瘤菌(Rhizobium fredii)15067和褐球固氮菌(Azotobacter chroococ-cum)10006两个菌株进行了16S rDNA的全序列测定,将此全序列与已知相关的16S rDNA进行了比较及聚类分析,得到系统发育树状图。在系统发育树中,根瘤菌15067隶属于中华根瘤菌属,与Sinorhizobium xinjiangenseIAM 14142,SinoRhizobium frediiSjzZ 4构成一个分支,其中与S.frediiSjzZ4的相似性最高,达99.72%;固氮菌10006处于固氮菌属分支中,其中和Azotobacter chroococcumAM12A,Azotobacter chroococcum的相似性均高达99.93%。为确定两株菌株的分类地位、进一步发掘和利用菌株的优良性状提供了参考依据。 展开更多
关键词 快生型大豆根瘤菌 褐球固氮菌 16SrDNA的全序列 系统发育分析
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豌豆根瘤菌共生基因在S.fredii中的表达及共生质粒间的相互作用 被引量:1
5
作者 缪礼鸿 周俊初 《武汉大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期498-502,共5页
通过两亲本接合转移 ,将豌豆根瘤菌 ( Rhizobium leguminosarum bv. viciae) 12 2 9的约 2 5 5 0 kb的共生质粒 p Sym12 2 9分别转入费氏中华根瘤菌 ( Sinorhizobium fredii) HN0 1SR及其消除了共生质粒的菌株 HND10 0中 .在人工培养条... 通过两亲本接合转移 ,将豌豆根瘤菌 ( Rhizobium leguminosarum bv. viciae) 12 2 9的约 2 5 5 0 kb的共生质粒 p Sym12 2 9分别转入费氏中华根瘤菌 ( Sinorhizobium fredii) HN0 1SR及其消除了共生质粒的菌株 HND10 0中 .在人工培养条件下 ,用 1 4C标记的薄层层析 ( TL C)技术检测转移接合子的结瘤因子 ( L COs)的结果表明 ,转移接合子 HND10 0 ( p Sym12 2 9)产生的 L COs与豌豆根瘤菌 12 2 9相同 .植物盆栽结瘤试验结果表明 ,HND10 0( p Sym 12 2 9)能够在豌豆品种 Nigra上形成白色球状的无效根瘤 ,而豌豆根瘤菌 12 2 9则形成正常的长圆柱状的有效根瘤 .将 p Sym 12 2 9转入 HN 0 1SR后 ,部分接合子表现出与 HND10 0 ( p Sym 12 2 9)相同的结瘤性状 ,而另一部分接合子的结瘤性状与 HN0 1SR相同 ,显示了 HN0 1SR与 12 2 9两菌株异源共生质粒之间结瘤功能的抑制关系 . 展开更多
关键词 共生质粒 费氏中华根瘤菌 结瘤因子 豌豆根瘤菌 基因表达 接合子
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三叶草素基因(tfx)在快生型大豆根瘤菌(Sinorhizobium fredii)H12-2中的表达与稳定性测定
6
作者 陈大松 周俊初 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期7-12,共6页
将含有三叶草条基因的重组质粒pT2TFXK和pT2TX3K以接合转移的方式导入快生型大豆根瘤菌H12-2。转移接合子H12-2(pXK)能产三叶草素并具有抑菌活性;H12-2(P3K)表现出对三叶草素的抗性。抑菌谱试验结果表明:82%的供试快生型大豆... 将含有三叶草条基因的重组质粒pT2TFXK和pT2TX3K以接合转移的方式导入快生型大豆根瘤菌H12-2。转移接合子H12-2(pXK)能产三叶草素并具有抑菌活性;H12-2(P3K)表现出对三叶草素的抗性。抑菌谱试验结果表明:82%的供试快生型大豆根瘤菌菌株对三叶草素敏感;所有供试慢生型大豆根瘤菌则表现抗性。稳定性检测结果表明:在共生与人工培养条件下,导入的pXK和p3K质粒均可在宿主菌中稳定存在和表达。 展开更多
关键词 快生型 大豆根瘤菌 细菌素 三叶草素
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费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)质粒复制基因repC序列多样性的研究 被引量:3
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作者 周岿 夏薇 +1 位作者 丁晨红 周俊初 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期537-543,共7页
采用质粒快速检测法从供试33株费氏中华根瘤菌中分别检测出2~4个内源大质粒.用根据豌豆根瘤菌的repC基因设计1对引物RC1和RC3,从供试菌株及3株华癸中生根瘤菌和1株大豆慢生根瘤菌中扩增得到repC基因片段,证明在费氏中华根瘤菌中广泛存... 采用质粒快速检测法从供试33株费氏中华根瘤菌中分别检测出2~4个内源大质粒.用根据豌豆根瘤菌的repC基因设计1对引物RC1和RC3,从供试菌株及3株华癸中生根瘤菌和1株大豆慢生根瘤菌中扩增得到repC基因片段,证明在费氏中华根瘤菌中广泛存在repC基因.通过对扩增产物的测序,并与已报道的repC基因序列进行聚类分析,发现供试菌株可分为2个群,群a和群b,群内十分保守,但群间差异明显;其中群b的序列与已知类型的差异明显. 展开更多
关键词 费氏中华根瘤菌 内源质粒 repC 聚类分析
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费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)的多样性研究 被引量:6
8
作者 陈明周 谢福莉 周俊初 《应用生态学报》 CAS CSCD 2001年第4期597-600,共4页
用大豆品种Willimas和黑龙 33从多年种植大豆未接种根瘤菌的土壤中捕集大豆根瘤菌 ,从分离株中选出 5 0株费氏中华根瘤菌 ,对供试菌株的培养特性、生长速度、耐酸、耐碱性、生长最终pH值、天然抗药性、CN源利用、刚果红吸收强度、产黑... 用大豆品种Willimas和黑龙 33从多年种植大豆未接种根瘤菌的土壤中捕集大豆根瘤菌 ,从分离株中选出 5 0株费氏中华根瘤菌 ,对供试菌株的培养特性、生长速度、耐酸、耐碱性、生长最终pH值、天然抗药性、CN源利用、刚果红吸收强度、产黑色素能力和质粒图谱类型进行了系统的比较研究 ,并通过聚类分析得到树状图谱 ,证实了不同土壤中费氏中华根瘤菌的多样性 . 展开更多
关键词 费氏中华根瘤菌 多样性 聚类分析
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湖北潜江灰潮土中费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)多样性的研究 被引量:4
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作者 胡千德 周俊初 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期7-10,共4页
用5种代表性大豆为捕集植物从湖北潜江灰潮土中经盆栽试验分离筛选出50株费氏中华根瘤菌,对它们的生长速度、耐盐性、pH生长范围、天然抗药性、碳氮源利用和共生效应等同时进行了比较研究,证实了同一土壤环境中费氏中华根瘤菌群体的... 用5种代表性大豆为捕集植物从湖北潜江灰潮土中经盆栽试验分离筛选出50株费氏中华根瘤菌,对它们的生长速度、耐盐性、pH生长范围、天然抗药性、碳氮源利用和共生效应等同时进行了比较研究,证实了同一土壤环境中费氏中华根瘤菌群体的多样性。 展开更多
关键词 背氏中华根瘤菌 生物多样性 共生效应 灰潮土
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S.fredii WGF03 SiR基因的功能鉴定 被引量:1
10
作者 郭美树 粟月萍 +3 位作者 马婷婷 申佩弘 蒋承建 武波 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期432-439,共8页
亚硫酸盐还原酶催化亚硫酸盐还原为硫化物,参与了生物硫循环。为了明确亚硫酸盐还原酶在S船捌WGF03中是否与亚硫酸盐同化途径有关,通过分子克隆技术,采用同源双交换的方法,利用质粒pKl8mobsaeB构建SiR基因缺失突变体SiRI。用不同硫... 亚硫酸盐还原酶催化亚硫酸盐还原为硫化物,参与了生物硫循环。为了明确亚硫酸盐还原酶在S船捌WGF03中是否与亚硫酸盐同化途径有关,通过分子克隆技术,采用同源双交换的方法,利用质粒pKl8mobsaeB构建SiR基因缺失突变体SiRI。用不同硫源的液体MM培养基培养检测,发现互补菌株CSiRI与野生型菌株能够利用亚硫酸盐作为唯一硫源,而突变体SiRI却不能,结果证实了亚硫酸还原酶确实与亚硫酸盐同化途径有关。植株试验表明突变株SiRI比野生菌株WGF03推迟结瘤2~3d,固氮酶活比野生菌株低12%左右,但在瘤数,瘤重,植株干重的平均值却差异不大。 展开更多
关键词 费氏中华根瘤菌 硫循环 亚硫酸盐还原酶 突变 植株试验
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Proteome Analysis of Inhibitory Effect of Gadolinium on Sinorhizobium fredii 被引量:4
11
作者 韩威威 沈世华 台培东 《Journal of Rare Earths》 SCIE EI CAS CSCD 2007年第1期106-110,共5页
The inhibitory effect of gadolinium on Sinorhizobium fredii USDA 205 was studied on a global scale using twodimensional gel electrophoresis and MALDI-TOF MS. The results indicated that 22 proteins were significantly a... The inhibitory effect of gadolinium on Sinorhizobium fredii USDA 205 was studied on a global scale using twodimensional gel electrophoresis and MALDI-TOF MS. The results indicated that 22 proteins were significantly affected by 1 mmol · L^-1 Gd^3 + treatment when compared with an untreated control. Among these proteins, nine were up-regulated and thirteen were down-regulated. The differently expressed proteins were classified into 8 functional categories based on their functions, including transporters, proteins for cellular defence, and proteins involved in metabolism. 展开更多
关键词 Sinorhizobium fredii PROTEOME GADOLINIUM rare earth elements
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费氏中华根瘤菌042BS(Rhizobium fredii 042BS)蛋白质组学初步研究
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作者 颜廷虎 白庆武 +1 位作者 李波 沈世华 《齐齐哈尔大学学报(自然科学版)》 2004年第1期99-101,共3页
为了从蛋白质水平阐明根瘤菌的固氮机理,扩大其宿主植物范围,应用蛋白质组学技术(2-DE),分析比较了能够在大豆和苜蓿上跨宿主结瘤的费氏中华根瘤菌042BS与已经完成基因组测序的根瘤菌模式菌株苜蓿中华根瘤菌(Rhizobium meliloti 1021)... 为了从蛋白质水平阐明根瘤菌的固氮机理,扩大其宿主植物范围,应用蛋白质组学技术(2-DE),分析比较了能够在大豆和苜蓿上跨宿主结瘤的费氏中华根瘤菌042BS与已经完成基因组测序的根瘤菌模式菌株苜蓿中华根瘤菌(Rhizobium meliloti 1021)的蛋白质表达图谱差异。经过图像分析检测到二者分别有436和428蛋白点。其中约有50个蛋白点初步认为二者所共有的。 展开更多
关键词 费氏中华根瘤菌 蛋白质组学 二维凝胶电泳 苜蓿中华根瘤菌 生物固氮
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Variation of Sym Plasmid and Symbiotic Effectiveness in Isolates of Rhizobium fredii
13
作者 CHEN WENLI LI FUDI ZHOU JUNCHU 《生物多样性》 CAS CSCD 1995年第B06期36-42,F0003,共8页
关键词 根瘤菌 共生质粒 共生效果 变异 种群隔离 植物 固氮酶
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微塑料与镉联合暴露对中华费氏根瘤菌的生态毒性效应
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作者 袁丹 吴天昱 +5 位作者 秦羽恬 杨昱欣 赵伟 宋晓雨 陈董 张亮 《浙江农业科学》 2025年第12期3093-3098,共6页
为探究微塑料与镉联合暴露对土壤微生物的生态毒性效应,本试验以中华费氏根瘤菌为供试菌株,开展了单分散聚苯乙烯微塑料(MPs)(0、20、100、200 mg·L^(-1))和镉(Cd^(2+))(4 mg·L^(-1))单一及联合暴露对根瘤菌的生态毒性效应研... 为探究微塑料与镉联合暴露对土壤微生物的生态毒性效应,本试验以中华费氏根瘤菌为供试菌株,开展了单分散聚苯乙烯微塑料(MPs)(0、20、100、200 mg·L^(-1))和镉(Cd^(2+))(4 mg·L^(-1))单一及联合暴露对根瘤菌的生态毒性效应研究。结果表明,在单一MPs/Cd^(2+)暴露下,根瘤菌的生长受到了明显的抑制,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性显著(p<0.05)升高。另外,根瘤菌体内超氧阴离子的含量、电解质渗漏率、脯氨酸和丙二醛含量均随着MPs/Cd^(2+)浓度的升高而呈现出先升高后下降的趋势。在两者联合暴露下,根瘤菌菌体内的可溶性蛋白含量显著高于单一MPs/Cd^(2+)处理组,并且菌体内的SOD和CAT活性提高。以上结果说明在两者联合暴露下,根瘤菌通过调节渗透物质含量和减少生物膜的破坏程度,从而缓解单一污染物对根瘤菌产生的生态毒性。 展开更多
关键词 微塑料 中华费氏根瘤菌 生态毒性效应
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应用发光酶基因对快生型大豆根瘤菌HN01结瘤作用进行检测 被引量:31
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作者 莫才清 覃雅丽 +1 位作者 周俊初 李阜棣 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期213-218,共6页
含发光酶基因luxAB的Tn5转座子自杀质粒pHNC3,在辅助质粒pRK2013的帮助下,转入快生型大豆根瘤菌HN01中小,pHNC3经自杀重组,其Tn5-luxAB转座插入HN01基因组中,从而赋予HN01以发光活性。挑取具有发光活性的HN01杂交单菌落,进行质... 含发光酶基因luxAB的Tn5转座子自杀质粒pHNC3,在辅助质粒pRK2013的帮助下,转入快生型大豆根瘤菌HN01中小,pHNC3经自杀重组,其Tn5-luxAB转座插入HN01基因组中,从而赋予HN01以发光活性。挑取具有发光活性的HN01杂交单菌落,进行质粒快检和以luxAB为探针的分子杂交,选取Tn5-luxAB分别插入到HN01染色体上和不同质粒上的标记菌株,进行灭菌盆栽实验,并对一株Tn5-luxAB标记于染色体上的菌株HN01LC02进行了模拟大豆栽培条件下的有菌盆栽实验,包括对发光根瘤菌占瘤率的测定和发光根瘤在根系上分布情况的测定。 展开更多
关键词 发光酶基因 大豆根瘤菌 检测 结瘤
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pH对土壤中土著快、慢生大豆根瘤菌结瘤的影响 被引量:35
16
作者 杨江科 周琴 周俊初 《应用生态学报》 CAS CSCD 2001年第4期639-640,共2页
The effect of pH on the nodulation of Sinorhizobium fredii and Bradyrhizobium japonicum was examined by analy- zing the indigent soybean rhizobia,predominant indigent rhizobia,and specific rhizobia,respectively.The re... The effect of pH on the nodulation of Sinorhizobium fredii and Bradyrhizobium japonicum was examined by analy- zing the indigent soybean rhizobia,predominant indigent rhizobia,and specific rhizobia,respectively.The results showed that very acid and very alkaline environment could retard the nodulation and inhibit the growth of the rhizobia.Sinorhizohium fredii could endure environment more strongly than Bradyrhizobium japonicum,and had a high competitive nodulation capacity.Bradyhizobium japonicum could endure acid environment more strongly than Sinorhizobium fredii.In very acid and very alkaline environment,the nodulation capacity of S.fredii and B.japonicum was mainly determined by their physiological characteristics. 展开更多
关键词 PH 土壤 大豆慢生根瘤菌 快生根瘤菌 结瘤
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一株能在苜蓿上结瘤的费氏中华根瘤菌 被引量:9
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作者 张海瑜 张海予 +1 位作者 李小红 杨苏声 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期127-132,T001,共7页
费氏中华根瘤菌 (Sinorhizobiumfredii) 0 4 2BS分离自新疆的苜蓿根瘤 ,通过交叉结瘤试验 ,发现它既可在苜蓿上又可在大豆上结瘤固氮。 1 6SrDNAPCR RFLP分析表明 ,0 4 2BS与费氏中华根瘤菌模式菌株USDA2 0 5的 4种限制性酶切图谱完全... 费氏中华根瘤菌 (Sinorhizobiumfredii) 0 4 2BS分离自新疆的苜蓿根瘤 ,通过交叉结瘤试验 ,发现它既可在苜蓿上又可在大豆上结瘤固氮。 1 6SrDNAPCR RFLP分析表明 ,0 4 2BS与费氏中华根瘤菌模式菌株USDA2 0 5的 4种限制性酶切图谱完全一致。其G +Cmol%为 60 0 ,与费氏中华根瘤菌USDA2 0 5和USDA1 91的DNA同源性分别为 84 9%和89 6% ,表明 0 4 2BS属于费氏中华根瘤菌。应用绿色荧光蛋白基因标记 0 4 2BS ,得到重组菌株 0 4 2BSG。将其接种保定苜蓿和北引 1号大豆 ,并重新分离出根瘤菌 ,利用激光共聚焦荧光显微镜检测到标记基因的表达 ,从而确证了 0 4 2BS能在苜蓿和大豆上结瘤。而且 ,0 4 展开更多
关键词 费氏中华根瘤菌 DNA同源性 绿色荧光蛋白 苜蓿
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周口地区大豆根瘤菌的分离与分子鉴定 被引量:7
18
作者 张怡 张超 +7 位作者 杨艳杰 于洁 季慧佳 陈红 刘文婷 李晓博 李蒙 李成伟 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期98-102,共5页
为了进一步研究发掘新的根瘤菌资源库,采用平板划线分离的方法从大豆根瘤中分离纯化根瘤菌,并且将获得的菌株进行盆栽回接试验,结果表明,分离获得的大豆根瘤菌菌株均可在大豆和苜蓿上结瘤,具有结瘤能力。根据已公布大豆根瘤菌共同结瘤基... 为了进一步研究发掘新的根瘤菌资源库,采用平板划线分离的方法从大豆根瘤中分离纯化根瘤菌,并且将获得的菌株进行盆栽回接试验,结果表明,分离获得的大豆根瘤菌菌株均可在大豆和苜蓿上结瘤,具有结瘤能力。根据已公布大豆根瘤菌共同结瘤基因nod A、nif H、16S r DNA保守区域设计引物,并且对nod A、nif H、16S r DNA序列进行扩增分析和系统发育分析,由此鉴定分离的根瘤菌为费式中华根瘤菌,从而在分子水平上实现了对大豆根瘤菌的快速鉴定。 展开更多
关键词 大豆 根瘤菌 回接鉴定 费式中华根瘤菌
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以luxAB为报告基因的大豆根瘤菌的竞争结瘤研究 被引量:5
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作者 杨江科 刘墨青 +1 位作者 周琴 周俊初 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期110-112,共3页
将来自pHN101的luxAB基因和来自pTR102的parCBA /DE基因,经过一系列中间载体整合到PLAFR3上构建成广宿主、稳定性质粒PHN158。通过三亲本杂交将pHN158导入费氏中华根瘤菌得到4株能在癸醛的激发下发出荧光的转移接合子WZRL、HWRL、HZRL和... 将来自pHN101的luxAB基因和来自pTR102的parCBA /DE基因,经过一系列中间载体整合到PLAFR3上构建成广宿主、稳定性质粒PHN158。通过三亲本杂交将pHN158导入费氏中华根瘤菌得到4株能在癸醛的激发下发出荧光的转移接合子WZRL、HWRL、HZRL和WWRL。将它们与3株大豆慢生根瘤菌WHB1、WHB2和WWB组配成12对组合,并以黑龙33和Williams为宿主以luxAB为报告基因进行竞争结瘤试验。结果表明,费氏中华根瘤菌与大豆慢生根瘤菌之间的平均竞争结瘤能力相当;同类型根瘤菌不同菌株之间的竞争结瘤能力存在着显著的差异;同时根瘤菌的竞争结瘤能力也明显受到宿主的影响。表明费氏中华根瘤菌与大豆慢生根瘤菌之间的竞争结瘤是一个菌株之间、菌植之间复杂的相互作用的过程。 展开更多
关键词 luxAB 费氏中华根瘤菌 大豆慢生根瘤菌 竞争结瘤 报告基因
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含发光酶基因的转座子质粒载体的改造及向根瘤菌HN01的转座 被引量:10
20
作者 莫才清 周俊初 李阜棣 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1997年第3期252-257,共6页
将从自杀性重组质粒pDB30上分离的3.6kb含卡那霉素抗性基因和发光酶基因(luxAB)的BglⅡ酶切片段,克隆到小Mr的高拷贝质粒pIJ2925上,构成新的质粒,pHNLX1011;然后将pHNLX1011经BglⅡ部分酶切,酶连在含蔗糖酶基因(sacB)的自杀... 将从自杀性重组质粒pDB30上分离的3.6kb含卡那霉素抗性基因和发光酶基因(luxAB)的BglⅡ酶切片段,克隆到小Mr的高拷贝质粒pIJ2925上,构成新的质粒,pHNLX1011;然后将pHNLX1011经BglⅡ部分酶切,酶连在含蔗糖酶基因(sacB)的自杀性重组质粒载体pMH1701上,载体分别采用BglⅡ酶切和BamHⅠ酶切.连接转化后共得到4种重组质粒类型的菌株,它们具有不同发光活性;将它们分别与快生型大豆根瘤菌HN01进行三亲本杂交,发现它们的转座频率均较pDB30高.对经转座标记后的根瘤菌进行发光活性检测,只有pHNC3质粒所转座的根瘤菌浇具有较强发光活性.所得发光根瘤菌衍生菌株能在野大豆和栽培大豆黑农39根际形成正常根瘤,能用X光片记录下根瘤的发光活性. 展开更多
关键词 发光酶基因 大豆根瘤菌 质粒载体 转座子
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